Eng. Agr.

Gilmar Roberto Zaffari

Estao Experimental de Itaja
Estudos bsicos de biologia celular, biologia
molecular, gentica, bioqumica, etc...

Cultura de
Tecidos
O que acontece quando retiramos
parte de uma Planta?

Alterao da harmonia estabelecida

Interrompe-se parte do sistema sinais / receptores

Rompe-se todo o sistema de controle da diviso celular e
expresso gnica.

Novos Sinais do
Sistema

Manifestao da TOTIPOTENCIALIDADE
Totipotncia Celular

Cada clula somtica possui o potencial

gentico para reconstituir um
organismo inteiro.

Reproduo sexuada
Gilmar R. Zaffari
Estgios:

Planta matriz (doadora de explantes);

Estabelecimento da cultura assptica;

Multiplicao dos explantes ou microplantas;

Enraizamento das microplantas;

Aclimatizao das microplantas.
Vias de diferenciao do material
em cultura

Organognese

Embriognese somtica.
 Organognese
Direta Indireta
Brotos Calo

Razes

Brotos

Flores
 Embriognese
Somtica
Direta Indireta
Calo
Planta
Matriz
(doadora de
explantes))
explantes
Estabelecimento da cultura
assptica

Depende da condio do explante

Sanidade da planta doadora

Condies nutricionais da planta doadora

Tipo de tecido ou rgo a ser utilizado como
explante

Idade fisiolgica

poca do ano da coleta

Forma de propagao da planta doadora
Multiplicao dos explantes.
explantes.
Enraizamento das microplantas

A rizognese considerada uma

fase crtica na regenerao de
plantas in vitro, pois determina a
sobrevivncia das mesmas durante a
aclimatizao
Aclimatizao das microplantas
Esquema geral de Micropropagao
Variao somaclonal
Fatores de estabilidade gentica de clulas somticas:

Modo da cultura (organognese; embriognese

somtica);

Tempo de cultura (nmero de subcultivos);

Composio do meio de cultura (tipo e concentrao do
regulador de crescimento);

Gentipo (escolha e seleo; tipo de explante);

Forma de reproduo da espcie (sexuada; assexuada).
Limpeza clonal

Teoria

As espcies propagadas vegetativamente
geralmente esto infectadas com um ou mais
vrus.

Os vrus se manifestam na planta infectada
pela reduo do vigor e produtividade das
culturas.

No existe controle qumico para eliminar
vrus de plantas.
Tcnicas auxiliares na eliminao
de vrus

Estiolamento:

Quebra da dominncia apical

Termoterapia:

Eletroterapia

Quimioterapia

Ainda no h produto qumico capaz de
eliminar vrus em plantas.

Porter & Kuenhle (1997) tratou plantas de

orqudeas (Cimbidium
(Cimbidium)) infectadas com
CyMV com ditiouracil (0,1 mmol
mmol/L)
/L) e
ribavarin (0,2 mmol
mmol/L)
/L) adicionados ao
meio de cultura. As plantas permaneceram
2,5 anos livre de vrus aps a quimioterapia.
Indexao de vrus (Mtodos de
deteco)

Observao visual

Plantas indicadoras

Teste sorolgico (ELISA)

Teste molecular

Microscpio eletrnico

Teste sorolgico + microscopia eletrnica
Obrigado!!!