Controle Microbiano

Microrganismos no meio ambiente e no organismo

INTRODUO

A aplicao de procedimentos que visam o controle ambiental de

microrganismos tem como objetivos:
Prevenir a transmisso de doenas e infeces;
Prevenir a contaminao ou crescimento de microrganismos nocivos.

Alguns termos utilizados no controle de microrganismos devem ser bem

entendidos:
Esterilizao: destruio de todas as formas de vida presentes em um
material;
Desinfeco: destruio, remoo ou reduo dos microrganismos em
material inanimado;
Assepsia: desinfeco de tecidos vivos, como pele e mucosas.

O controle de microrganismos pode ser feito atravs de agentes fsicos e/ou

qumicos, que podem ser bacteriostticos (causam parada metablica reversvel)
ou bactericidas (causam a morte dos microrganismos).

Agentes fsicos

AGENTE MTODO EXEMPLOS

Temperatura Calor seco Forno, incinerao
Calor mido Autoclave, fervura,
pasteurizao
Temperatura baixa Congelamento, N2 lquido
Radiaes UV Esterilizao de ar e
ambientes
Radiao ionizante Plsticos, linhas de sutura
Filtrao Fluxo laminar Ar de locais restritos
Membrana filtrante Filtros Seitz e Millipore

Agentes qumicos

Modo de ao
Coagulao de protenas
Dano s membranas
Oxidantes
Inativao de enzimas
Agentes
Fenis, cresis, lcool, iodo, metais
pesados
Fenis, lcool, detergentes, quaternrio
de amnio
Iodo, cloro, oznio, H2O2
Formol, xido de etileno
OBJETIVOS

Observar o grau de contaminao do ar e sua importncia como veculo de

transmisso de microrganismos;
Observar a presena de diferentes microrganismos no jaleco, cabelo e
mos;
Avaliar a eficincia de diferentes substncias utilizadas na assepsia das
mos;
Observar os diferentes tipos morfolgicos de colnias de microrganismos e
analisar a morfologia celular atravs da colorao de Gram.

Experimento 1: Microrganismos no ar

Procedimento: Abrir Placas de Petri contendo meio de cultura Agar Simples

durante 5, 10, 15 e 20 minutos e deix-las expostas ao ar. Fechar as placas,
identificar o material e incubar a 37 C por 24 horas.

Resultados: As bactrias esto em suspenso no ar, em partculas de

poeira que ao sedimentarem sobre a superfcie do meio de cultura agem como
veculo destes microrganismos. Estes, ao serem incubados em condies
favorveis, multiplicam-se formando colnias caractersticas.
O grau de contaminao proporcional ao tempo que as placas ficarem
abertas.
Deve-se ter em mente que todo o material esterilizado exposto ao ar
facilmente se contamina.

Experimento 2: Pesquisa de microrganismos no organismo e em superfcies

Procedimento A: Na zona de segurana do bico de Bunsen, pressionar a

superfcie de Placas de Petri contendo o meio de cultura Agar simples com o
jaleco, utilizando um carimbo de madeira. Fechar a placa e incubar 37C por 24
horas.

Procedimento B: Esfregar um swab estril na superfcie do couro

cabeludo ou da pele do rosto. Semear em movimentos de zigue-zague a superfcie
do meio de cultura Agar Simples. Incubar a placa a 37 C por 24 horas.

Procedimento C: Marcar a Placa de Petri contendo o meio de cultura Agar

Simples (fundo da base) dividindo-a em 4 partes e numerar cada parte.

4 1

3 2
 Tocar a superfcie do meio de cultura com o dedo indicador, seguindo o
seguinte procedimento:
Local 1: mo sem lavar
Local 2: mo lavada com gua e sabo
Local 3: mo lavada com gua + sabo + lcool a 70 %
Local 4: mo lavada com gua + sabo + lcool iodado

OBS: Aps cada procedimento deixar secar a mo sem tocar em nenhum

material. Trabalhar na zona de segurana do bico de Bunsen. Identificar a placa e
incubar a 37C por 24 horas.

Resultados: Observar o crescimento de colnias na superfcie do meio de

cultura. As mos freqentemente se apresentam contaminadas por uma
quantidade varivel de microrganismos. A microbiota da pele varia com as regies
anatmicas do corpo, entretanto, alguns gneros de bactrias so comumente
encontrados na superfcie da pele: Staphylococcus, Streptococcus,
Corynebacterium, etc.
A lavagem das mos com produtos anti-spticos elimina temporariamente a
maioria das bactrias, mas os microrganismos retidos nos folculos pilosos e nas
glndulas sudorparas logo restabelecem a microbiota da pele.
O sabo fraco como anti-sptico e tem mais ao na remoo mecnica
de microrganismos pela diminuio da tenso superficial e lavagem. O lcool etlico
eficaz contra as clulas bacterianas, entretanto no age sobre esporos. Quando
associado ao iodo constitui-se em um dos melhores anti-spticos.

Experimento 3: Avaliao da eficcia de solues anti-spticas e

desinfetantes sobre microrganismos

Procedimento: Semear toda a superfcie de uma placa contendo meio de

cultura Agar Simples com uma suspenso bacteriana (Escherichia coli, Serratia
marcescens, Staphylococcus aureus). Na zona de segurana do bico de Bunsen,
colocar sobre o meio, discos esterilizados de papel de filtro embebidos com
solues anti-spticas e desinfetantes (hipoclorito puro, hipoclorito 1:50, lisofrmio,
lcool etlico). Incubar a 37C por 24 horas.

Resultados: Os anti-spticos e desinfetantes que possurem ao sobre o

microrganismo semeado devero apresentar halos de inibio de crescimento ao
redor dos discos de papel de filtro, que sero tanto maiores quanto for a atividade
antimicrobiana da soluo.

OBS: Todas as placas devero ser semeadas com swab esterilizado, de

modo a ser obtido um crescimento contnuo (e no colnias isoladas) empregando-
se cultura ativa (crescida previamente durante 24 horas em meio lquido).