Este documento destina-se aos usuários dos

Ensaios de Proficiência para Laboratórios de Veterinária.

Revisão Novembro 2020

2020
ÍNDICE
Instruções de Uso e Critérios Adicionais......................................................................................................................................................................... 2
Segurança e Manipulação dos Itens de Ensaio............................................................................................................................................................. 2
Microscopia Virtual.................................................................................................................................................................................................................. 3
Fatores de Conversão............................................................................................................................................................................................................. 11
Anemia Infecciosa Equina...................................................................................................................................................................................................... 5
Bioquímica .................................................................................................................................................................................................................................. 5
Bacteriologia.............................................................................................................................................................................................................................. 5
Bacterioscopia Gram............................................................................................................................................................................................................... 5
Brucelose..................................................................................................................................................................................................................................... 6
Citologia........................................................................................................................................................................................................................................ 6
Coagulação.................................................................................................................................................................................................................................. 6
Contagem de Células Somáticas (microscopia)............................................................................................................................................................ 6
Hematologia................................................................................................................................................................................................................................ 7
Hematoscopia/ Hemoparasitologia...................................................................................................................................................................................7
Hormônios.................................................................................................................................................................................................................................... 5
Imunohematologia Canino.....................................................................................................................................................................................................7
Leucose Bovino.......................................................................................................................................................................................................................... 7
Micologia....................................................................................................................................................................................................................................... 8
Mormo FC......................................................................................................................................................................................................................................8
Mormo ELISA............................................................................................................................................................................................................................... 8
Parasitologia............................................................................................................................................................................................................................... 8
Patologia.......................................................................................................................................................................................................................................9
Reticulócitos................................................................................................................................................................................................................................9
Urinálise.........................................................................................................................................................................................................................................9
Sangue Oculto............................................................................................................................................................................................................................ 10
Sarna...............................................................................................................................................................................................................................................10

Instruções de Uso e Critérios Adicionais

Ensaio de Proficiência Veterinária
Novembro 2020
1
Instruções de Uso e Critérios Adicionais
Este documento é parte integrante do Programa de Controle Externo da Qualidade, complementa o Manual do Participante e
tem o objetivo de fornecer orientações para manipulação dos itens de ensaio e participação nos programas.
Para que os programas de controle da qualidade para ensaios laboratoriais sejam realizados é necessário o envio dos itens de
ensaio. Os itens de ensaios podem ser considerados como amostra, produto, artefato, material de referência, equipamento,
padrão, conjunto de dados ou outra informação utilizada para a realização do referido ensaio.
As Instruções de Uso e Critérios Adicionais descrevem os itens de ensaio dos programas, as instruções de uso, as regras para
reportar os resultados e os Critérios específicos de avaliação. Quando não houver necessidade de instrução de uso ou na
ausência de regras e/ou critérios adicionais, alguns desses itens podem ser suprimidos.
Existem ensaios onde a escassez da matéria prima ou a baixa estabilidade para a confecção do item podem inviabilizar um
programa de controle de qualidade, sendo necessária a utilização de outras técnicas de comparação e controle.
A Controllab, para atender aos ensaios veterinários de microscopia, utiliza a tecnologia de Microscopia Virtual em favor da
qualidade para ampliar a variabilidade de casos, permitir a participação de mais laboratórios e padronizar o conteúdo para os
usuários.
É disponibilizado no “Sistema Online” ferramentas para análise de lâminas virtuais e vídeos e, quando necessários, são
acrescidos casos clínicos e imagens. Com essa ferramenta, o laboratorista trabalha com os mesmos recursos que no
microscópio físico só que de forma digital precisando em alguns momentos de instruções adicionais que estão disponíveis no
“Manual de Instrução da Microscopia Virtual” e resumido neste documento no item Microscopia Virtual.

Segurança e Manipulação dos Itens de Ensaio

Os materiais de controle de qualidade são comumente de origem animal.
Deve-se tomar as devidas precauções para a manipulação e o descarte do material, conforme as Regras de Biossegurança e
Boas Práticas Laboratoriais.
Siga os procedimentos de biossegurança adotados pelo laboratório para amostras de pacientes, incluindo:
• luvas descartáveis;
• vestuário de proteção;
• equipamento protetor adequado para olhos/face;
• ter um “lava olhos” próximo ao local de manuseio da amostra.
Cuidados
• evitar contato com a pele e olhos;
• nunca pipetar pela boca;
• não manusear lentes de contato no setor técnico;
• não comer, beber, fumar ou aplicar cosméticos no setor técnico.
• lavar a roupa contaminada antes de voltar a utilizá-la
ACIDENTE
• em caso de projeção do material sobre as mucosas de olhos, boca e nariz, lavar abundantemente com água.
• se o produto for aos olhos e estiver utilizando lentes de contato na hora do acidente, retirá-las se possível e continuar
enxaguando.
• em contato com a pele, por meio de respingo ou corte, lavar imediatamente com água e sabão adequado.
Em seguida, comunique imediatamente o responsável local pelo laboratório
labora tório e procure orientações médicas.

Instruções de Uso e Critérios Adicionais

Ensaio de Proficiência Veterinária
Novembro 2020
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Microscopia Virtual
A imagem é um bom aliado e viabiliza programas em áreas onde há escassez de matéria prima ou baixa estabilidade de
materiais. Possibilita ampliar a variabilidade de casos, permitir a participação de mais laboratórios e padronizar o conteúdo
disponibilizado para os usuários.
A ferramenta é simples, mas é imprescindível num primeiro momento ler as instruções a seguir para facilitar sua adaptação a
este formato do programa.
• O profissional que realiza a análise deve ser cadastrado no sistema online. Para isto, basta o Administrador do programa
entrar no Sistema Online, em Dados do Usuário/Cadastro de Usuário e incluí-lo.
• O profissional deve utilizar um computador com acesso à internet. O acesso pode ocorrer a qualquer hora e de qualquer
computador. O caso estará disponível desde a liberação da rodada na internet.
• Um computador padrão com um link de acesso à internet de 500kbps é suficiente para as análises. A região da lâmina
disponibilizada é produzida, com tamanho padronizado por material, sem exigir recursos de informática especiais.
• Deve-se ter atenção para a configuração e ajustes do monitor. As configurações usuais de vídeo são resolução, brilho,
contraste, calibração da cor e formato (p. ex. widescreen). Todos podem ser ajustados (atalhos no teclado ou via painel de
controle) de forma a reproduzir fielmente a imagem. O monitor do computador utilizado para análise deve ter uma boa
resolução.
• A análise é similar a do microscópio: correr a lâmina, ampliar e reduzir a imagem, escala para medição e grade para
contagem. Não é possível apenas manipular o foco (profundidade). Este já é ajustado na preparação da imagem, conforme o
caso retratado.
• A análise deve demandar o mesmo tempo da realizada na rotina. Com o link de acesso à internet adequado e prática de uso
da ferramenta o tempo dedicado a análise deve ser similar ao rotineiro.
• Ao realizar a análise é possível reportar o resultado simultaneamente, pois o caso é disponibilizado no próprio formulário de
resposta.
OBS. Para separar um campo da imagem do próximo, sem que fique sobreposto, usar como referência um elemento celular de
fácil identificação do lado direito da imagem, arrastando-a em direção ao lado oposto, até seu desaparecimento. Desta forma,
garante-se que um campo foi percorrido.

Instruções de Uso e Critérios Adicionais

Ensaio de Proficiência Veterinária
Novembro 2020
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 Imagens disponíveis. Quando um caso tem mais de uma área da lâmina
disponibilizada, estas são enumeradas para seleção. As imagens
disponibilizadas são descritas junto do caso clínico, quando aplicável.

Barra de zoom. Apresenta a ampliação atual da imagem maior (inicialmente no

menor zoom) e possui os comandos para ampliar (+) e reduzir (-) a imagem. O
aumento pode variar de 16x a 2000x, de acordo com o material a ser analisado.

Barra de ferramentas para ativar/ocultar a exibição de (1) miniatura da

imagem, (2) escala para medição e (3) grade para contagem. Existem
duas opções de grades para facilitar a contagem na imagem maior: 3x3
(9 quadrantes) ou 5x5 (25 quadrantes) e (4) brilho/ contraste.

Ícone para exibir/ocultar as barras de zoom e ferramentas. Ao desativá-lo, a

régua e miniatura permanecem disponíveis. Para ocultá-las, basta desabilitá-las
antes de ocultar as ferramentas.
Escala para medição. Régua com
escala para medição de achados. Ela
Ampliação atual da imagem maior. Apresenta o aumento aplicado pelo usuário. está disponível para medição
horizontal e pode ser arrastada para
próximo do achado. A régua deve ser
ativada na barra de ferramentas.

Seta para expansão da imagem para toda a tela do computador (oculta o

formulário online) e redução (reexibição do formulário). Não aplicável para
ensaios com contagem por campo.

Miniatura da imagem a ser analisada. Quando a imagem maior é ampliada,

a região que está sendo exibida é demarcada para simples orientação. A
exibição desta miniatura pode ser ativada na barra de ferramentas.

Imagem a ser analisada, correspondente a um campo do microscópio. A

navegação deve ser ativada por um clique sobre a imagem.
Para análise pode-se ampliar a imagem com duplo clique sobre a área que
deseja analisar, ampliar e reduzir através da barra de zoom ou botão de
rolagem do mouse, arrastar a imagem para andar para os lados ou usar as
setas do teclado para esta movimentação.

Brilho/ contraste. Ferramenta para

ajustes de brilho e contraste da
imagem. O brilho/ contraste deve ser
ativado na barra de ferramentas,
clicar em “aplicar” para adequar às
definições ajustadas e “reset” para
voltar a definição original.
Recomendado para os navegadores
Internet Explorer e Chrome.

Instruções de Uso e Critérios Adicionais

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Anemia Infecciosa Equina
Item de ensaio soro equino liofilizado.
Procedimento de uso (1) deixar à temperatura ambiente por 20 minutos; (2) retirar a tampa do frasco com muito cuidado, para que o
material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada; (3) reconstituir
adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar a tampa
com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida; (5) deixar em repouso por 20 minutos e, em
seguida, homogeneizar suavemente até dissolução completa; (6) realizar os ensaios.
Reporte de Resultado O laboratório deve identificar qual a metodologia aplicada em sua análise e reportar a leitura e/ou
interpretação obtida.

Bioquímica e Hormônios
Item de Ensaio: soro de origem animal liofilizado. Item de ensaio único por módulo (Bioquímica e Hormônios).
Procedimento de uso: (1) deixar à temperatura ambiente por 20 minutos; (2) retirar a tampa do frasco com muito cuidado, para que o
material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada; (3) reconstituir
adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar a tampa
com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida; (5) realizar os ensaios imediatamente após a
reconstituição.
Obs: A especíe a qual o material se refere é informada no formulario online e no documento Dados da Rodada para cada item.
É esperado que alguns itens apresentem resultados superiores à faixa de detecção. Neste caso, é necessário realizar diluições até
chegar ao resultado real, exceto se contra-indicado nas instruções (bula) do reagente.

Bacteriologia
O material poderá apresentar colorações branca a levemente amarronzada, pastilhas do liofilizado inteiras ou quebradiças devido à
sua composição, mas isto não configura deterioração e não inviabiliza seu uso.
Item de Ensaio:
Ensaio bactéria liofilizada preparada a partir de cepas puras.

Procedimento de uso: (1) Promover a desinfecção na tampa e borda do frasco com álcool a 70%; (2) retirar a tampa e rolha de
borracha e adicionar lentamente (pela parede interna do frasco) um diluente estéril utilizado na rotina (solução salina, água destilada
ou caldo nutritivo do tipo BHI, TSB, tioglicolato) conforme o volume indicado no rótulo, com seringa estéril ou pipetadores com
ponteiras estéreis; (3) deixar em repouso para reidratação por 10 minutos; (4) homogeneizar o material suavemente, evitando a
formação de bolhas; (5) com uma alça, semear a suspensão em placas com meio de cultura (selecionar o meio conforme o caso
clínico); (6) incubar em temperatura, atmosfera e período adequados; (7) proceder a rotina de identificação e teste de sensibilidade
(este último apenas para o item VBA01).

NOTA: O material é de uso único e não deve ser armazenado após hidratação.

Cada item de ensaio contém apenas 1 tipo bacteriano. A presença de pleomorfismo colonial pode ocorrer eventualmente devido à
estocagem. Sempre que o resultado for negativo ou o participante encontrar mais de uma bactéria, deve ser analisado o restante da
suspensão.

Reporte de Resultado: deve-se reportar a bactéria identificada, independente de seu potencial patogênico, assim como a
interpretação dos antimicrobianos para o item VBA01.

O formulário de resposta contém uma lista de bactérias. Na ausência da bactéria identificada no material, o laboratório deve procurar
uma denominação sinônima entre as opções existentes e, em último caso, reportar o achado no campo "comentários".

Documento de Referência: CLSI VET01S Padronização dos Testes de Sensibilidade a Antimicrobianos por Disco-difusão e diluição
para bactérias isoladas de animais.

Critérios Adicionais de Avaliação: como regra geral, se o gênero e a espécie são identificados corretamente, o participante recebe
dois adequados (2A); se somente o gênero é identificado corretamente, o participante recebe um adequado e um inadequado (1A/1I);
se o microrganismo identificado é diferente, o participante recebe dois inadequados (2I). Exceções podem ser definidas conforme
relevância clínica, grau de dificuldade e análise crítica dos resultados.

Assim, deve-se ficar atento à estas exceções. Espécies de microrganismos que não são relevantes para o diagnóstico e que são de
difícil identificação não serão exigidas. Quando for relevante clinicamente, de fácil identificação ou freqüentemente isolada na rotina,
a identificação da espécie será exigida na avaliação, assim como quando for baseada em provas básicas, tais como sensibilidade a
optoquina, bacitracina, catalase, oxidase, ou mesmo atividade hemolítica.

O laboratório deve ter atenção e evitar reportar apenas o gênero para as situações descritas acima e assim evitar prejuízo a sua
avaliação.

No teste de sensibilidade a antimicrobianos, para um item de ensaio não respondido, o participante recebe NR (não realizado) em
quantidade proporcional ao número de antimicrobianos indicados para serem utilizados.

Bacterioscopia Gram
Item de Ensaio Gram: esfregaço preparado a partir de crescimento bacteriano em fase logarítimica. Pode ser fornecido em lâmina
(fixada para transporte) ou como imagem (lâmina digitalizada).
Procedimento de uso lâmina: (1) Marcar a lâmina – identificação do item de ensaio – com lápis dermográfico (lápis grafite), para
evitar perder a identificação durante a fixação e coloração (estes processos danificam a etiqueta); (2) fixar as lâminas a quente; (3)
corar a lâmina pelo método de Gram; (4) realizar a leitura observando a morfologia bacteriana e a afinidade tintorial. Para lâminas
recebidas coradas, pular as etapas 1, 2 e 3.
Procedimento de uso imagem: ver instruções nas páginas 3 e 4, em “Microscopia Virtual”.
Instruções de Uso e Critérios Adicionais
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Interpretação/Reporte de Resultado: (1) as lâminas devem ser interpretadas como sendo provenientes de hemocultura positiva; (2)
indicar a afinidade da célula microbiana ao corante de Gram; (3) indicar a forma celular; (4) quando possível, sugerir o arranjo
predominante.
O formulário de resposta contém uma lista de opções de resposta. Na ausência da resposta correspondente ao encontrado no
material, deve-se procurar uma denominação sinônima entre as existentes e, em último caso, reportar o achado no campo
"comentários".

Brucelose
Item de Ensaio: Soro de origem bovina liofilizado.
Procedimento de uso: (1) deixar à temperatura ambiente por 20 minutos; (2) retirar a tampa do frasco com muito cuidado, para que o
material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada; (3) reconstituir
adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar a tampa
com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida; (5) deixar em repouso por 20 minutos e, em
seguida, homogeneizar suavemente até dissolução completa; (6) realizar os ensaios de forma rotineira, da mesma maneira que
amostras de pacientes e conforme procedimentos de análise adotados, seguindo as normas de Biossegurança.
Reporte de Resultado: O laboratório deve identificar quais as metodologias aplicadas em sua rotina e reportar a leitura e/ou
interpretação obtida.
Critérios Específicos de Avaliação: são considerados os resultados de caracterização e validação dos itens de ensaio, e também os
obtidos pelos participantes. Para os testes confirmatórios, somente os resultados de conclusão são avaliados.
(1) Para o teste confirmatório, o participante é avaliado apenas quando o item é reativo (segundo ‘Resultado Aceito’). Quando o item é
não-reativo, só é avaliado o participante que responde;
(2) Participantes que deixam de responder o confirmatório de itens reativos recebem NR (vale como inadequado). Esse NR
não conta como avaliação se o participante nunca responder o confirmatório.

Citologia
Item de Ensaio: Casos digitalizados de lâminas coradas com Giemsa ou Panótipo Rápido, preparadas a partir de material citológico
(líquido e não líquido) de origem animal (cães e gatos). Cada item corresponde a um caso clínico diferente.
Procedimento de uso: ver instruções nas páginas 3 e 4, em “Microscopia por Imagem”.
Reporte de resultados: Consultar os dados clínicos (disponíveis no próprio formulario online) que contém informações importantes
para cada caso e contribuem para o correto diagnóstico.
Celularidade: reportar uma opção. Esse ensaio tem caráter apenas orientativo.
Tipos Celulares: reportar até duas opções
Infiltrado inflamatório: reportar uma opção.
Agentes infecciosos: reportar até duas opções.
Alterações celulares: reportar até duas opções.
Critérios de malignidade: reportar até 10 opções.
Observações Qualitativas: reportar até cinco opções. Esse ensaio tem caráter apenas orientativo
Interpretação final: reportar até três opções.
O formulario de resposta contém uma lista de opções de respostas qualitativas. Na ausência de alguma opção, deve-se procurar uma
denominação sinônima entre as existentes ou, em último caso, reportar o achado no campo "comentários".

Coagulação
Item de Ensaio: plasma de origem animal liofilizado.
Procedimento de uso: (1) deixar à temperatura ambiente (15°C-30°C) por 20 minutos; (2) retirar a tampa do frasco com muito
cuidado, para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada; (3)
reconstituir adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar
a tampa com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida; (5) deixar em repouso por 20 minutos e,
em seguida, homogeneizar suavemente até dissolução completa; (6) realizar os ensaios.
Obs: A espécie a qual o material se refere é informada no formulario online e no documento Dados da Rodada para cada item.
É esperado que alguns itens apresentem resultados superiores à faixa de detecção. Neste caso, é necessário realizar diluições até
chegar ao resultado real, exceto se contra indicado nas instruções (bula) do reagente.

Contagem
Contagem de Células Somáticas (microscopia)
Item de Ensaio: Casos digitalizados de lâminas preparadas a partir de leite de origem animal e coradas com Lebowitz-Weber (corante
de Newman-Lampert modificado).
Procedimento de uso - imagem: ver instruções nas páginas 3 e 4, em “Microscopia Virtual”. Realizar a contagem, conforme padrão de
leitura de coloração por corante de Lebowitz-Weber, abrangendo toda a área da lâmina digitalizada. Considerar apenas as células
íntegras.
Reporte de Resultado: deve ser reportado no formulário online somente o valor absoluto de células somáticas presentes na imagem.
Não realizar nenhum cálculo de conversão nos valores encontrados.

Instruções de Uso e Critérios Adicionais

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Hematologia
Item de Ensaio: sangue líquido de origem animal.
Procedimento de uso: (1) Homogeneizar o material à temperatura ambiente (15°C a 30°C) por 15 minutos utilizando homogeneizador
orbital; (2) retirar a tampa e proceder conforme rotina.
Atenção: Este material não é próprio para a leitura de lâmina. Para isto existe o módulo específico (Hematoscopia/Hemoparasitologia).

Hematoscopia/ Hemoparasitologia
Item de Ensaio: Casos digitalizados de lâminas com esfregaço preparado a partir de sangue de origem animal colhido em EDTA e
corado pelo May-Grunwald Giemsa ou Panótico. Para “Hemoparasitologia (Canino) Identificação”, os casos digitalizados de esfregaço
também podem ser preparados com gota espessa, "print" ou aspirado de medula óssea, com utilização de corantes hematológicos.
Procedimento de uso Hematoscopia: realizar a contagem diferencial de leucócitos no microscópio, com, no mínimo, 100 células. Ao
realizar a contagem da série vermelha (qualitativo), deve-se atentar para os índices hematimétricos absolutos. O hemograma
apresentado deve ser considerado um dado preliminar a ser confirmado pela leitura da lâmina.
Procedimento de uso Hemoparasitologia: realizar a pesquisa de hemoparasitas.
Reporte de Resultado Hematoscopia: a contagem diferencial de leucócitos deve ser reportada em percentual (%), totalizando 100%.
No campo de linfócitos, deve ser reportada a soma de pró-linfócitos, linfócitos maduros, linfócitos atípicos, linfócitos
linfoplasmocitóides e plasmócitos. Estes 3 (três) últimos tipos celulares devem ser indicados em ‘outras condições’.
Todos os campos da ‘Contagem diferencial’ e ‘Eritroblastos/100 leucócitos’ devem ser preenchidos. No caso de não encontrar nenhuma
célula, preencher com ‘0’ (zero).
Para “Hematoscopia Identificação”, o laboratório deve selecionar a opção que melhor descreve a estrutura identificada nas imagens
estáticas (fotos).
Critérios Adicionais de Avaliação: são considerados os resultados de aprovação do material, o diagnóstico do paciente e os resultados
obtidos pelos participantes.
Para a avaliação de “Outras Condições”, são consideradas apenas as relevantes para o diagnóstico, sistematicamente presente. O
participante que identificar essa condição recebe adequado (A), e o que não identificar recebe inadequado (I) de forma educativa, sem
contar para o ano cumulativo. Por outro lado, se o Grupo Assessor não apontar nenhuma condição, tal condição não é avaliada.
Reporte de Resultado Hemoparasitologia:
Hemoparasitologia No caso de presença de hemoparasitas, proceder a identificação. Caso contrário, reporte
“ausência” no campo específico do formulário online.

Imunohematologia Canino
I tem de Ensaio:
Ensaio soro e suspensão de hemácias (conservadas em preservativo celular) fornecidos em conjunto.
Procedimento de uso hemácias: A suspensão de hemácias é fornecida pronta para o uso. (1) deixar à temperatura ambiente por 20
minutos; (2) homogeneizar em homogeneizador orbital por 2 minutos, ou rolar entre as palmas das mãos 12 vezes ou por 20 segundos,
invertendo o frasco e repetindo o rolamento até que todo o conteúdo esteja bem homogeneizado; (3) retirar a tampa do frasco com
muito cuidado, para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada;
(4) não centrifugar os materiais antes das análises; (5) realizar os ensaios conforme rotina.
Procedimento de uso soro: O soro é fornecido pronto para o uso. (1) deixar à temperatura ambiente por 20 minutos; (2) homogeneizar o
material suavemente, evitando a formação de bolhas, até ter certeza de que todo o conteúdo do tubo foi bem homogeneizado; (3)
retirar a tampa do frasco com muito cuidado, para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la
virada para cima na bancada; (4) não centrifugar os materiais antes das análises; (5) realizar os ensaios conforme rotina.
Prova Cruzada principal (Soro receptor – VSR/ Hemácia dos doadores - VHD): devem ser reportados nos campos correspondentes os
resultados de conclusão da Prova Cruzada do soro do receptor com as hemácias de cada um dos possíveis doadores.
Prova Cruzada secundária (Soro dos doadores - VSD/ Hemácia do receptor - VHR): devem ser reportados nos campos correspondentes
os resultados de conclusão da Prova Cruzada do soro de cada possível doador com as hemácias do receptor.
Tipagem Sanguínea: devem ser reportados nos campos correspondentes os resultados de conclusão da tipagem das hemácias do
receptor e dos possíveis doadores.
Critérios Específicos de Avaliação:
Avaliação são considerados os resultados de aprovação do material e a estatística de consenso. O
participante é avaliado em relação à conclusão de cada ensaio.

Leucose Bovina

Item de Ensaio: Soro bovino liofilizado.

Procedimento de uso: (1) deixar à temperatura ambiente por 20 minutos; (2) retirar a tampa do frasco com muito cuidado, para que o
material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada; (3) reconstituir adicionando
água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar a tampa com o mesmo
cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida; (5) deixar em repouso por 20 minutos e, em seguida,
homogeneizar suavemente até dissolução completa; (6) realizar os ensaios.

Reporte de Resultado: O laboratório deve identificar qual a metodologia aplicada em sua análise e reportar a leitura e/ou
interpretação obtida.

Instruções de Uso e Critérios Adicionais

Ensaio de Proficiência Veterinária
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Micologia
Item de Ensaio: Cepas de fungo conservadas em água.
Procedimento de uso fungo: (1) remover o lacre plástico; (2) promover a desinfecção na borda do microtubo com álcool a 70%; (3)
retirar a tampa; (4) homogeneizar suavemente; (5) recomenda-se centrifugar o material re-suspendido para aumentar a viabilização da
cultura positiva; (6) transferir, com o auxílio de uma alça de platina em ‘gota’, uma porção da suspensão para um tubo ou placa com
meio de cultura (selecionar o meio de acordo com o caso clínico); (7) incubar à temperatura entre 25 e 30ºC por período adequado e
proceder à rotina de identificação.
A seleção dos meios (geralmente ágar Sabouraud e ágar Mycosel) e o controle de qualidade são fundamentais para um resultado
confiável. Para evitar contaminação da cultura, é recomendado um controle de qualidade periódico do ambiente (placa aberta com meio
saboraud por 20 minutos).
Em caso de contaminação por bactérias, colocar 1(uma) gota de solução de penicilina (100.000 unidades penicilina G potássica + 10 mL
solução salina ou água destilada/deionizada (estéril) antes do repique.
Para garantir a viabilidade do fungo, é necessário armazenar o material à temperatura entre 25 e 30ºC. Não colocar em geladeira, freezer
ou em ambientes com temperatura superior a 37ºC, pois provoca a inativação do microrganismo.
Procedimento de uso imagem: ver instruções nas páginas 3 e 4, em “Microscopia Virtual”.
Critérios Específicos de Avaliação:
Avaliação : são considerados o nível de complexidade e a relevância clínica do microrganismo, os resultados de
aprovação do material e os resultados obtidos pelos participantes.
Na Identificação, devem ser especificados o gênero e a espécie do microrganismo. Desta forma, se o gênero e a espécie forem
identificados, o participante recebe dois adequados (2A); se somente o gênero for identificado, o participante recebe um adequado e um
inadequado (1A/1I); se o microrganismo identificado for diferente, o participante recebe dois inadequados (2I). Exceções podem ser
definidas conforme relevância clínica e grau de dificuldade.

Mormo
Item de Ensaio Mormo (FC e ELISA)
ELISA) : soro equino liofilizado.
Procedimento de uso Mormo FC: FC: (1) deixar à temperatura ambiente por 20 minutos; (2) retirar a tampa do frasco com muito cuidado,
para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada; (3) reconstituir
adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar a tampa com
o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida; (5) deixar em repouso por 20 minutos e, em seguida,
homogeneizar suavemente até dissolução completa; (6) Aspirar 20uL (microlitros) e diluir a amostra adicionando 80uL de solução de
trabalho; (7) Inativar a temperatura de 58°C por 35 minutos; (8) realizar os ensaios de forma rotineira, da mesma maneira que amostras
de pacientes e conforme procedimentos de análise adotados, seguindo as normas de Biossegurança.
Reporte de Resultado Mormo FC:
FC: devem ser reportados os resultados correspondentes ao título e interpretação.
Atenção! O material deste programa é específico para o método Fixação do Complemento. Os usuários não devem analisar em outros métodos.

Procedimento
Procedime nto de uso Mormo ELISA: (1) deixar à temperatura ambiente por 20 minutos; (2) retirar a tampa do frasco com muito
cuidado, para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada; (3)
reconstituir adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar a
tampa com o mesmo cuidado, para que nenhuma porção do produto liofilizado seja perdida; (5) deixar em repouso por 20 minutos e, em
seguida, homogeneizar suavemente até dissolução completa; (6) realizar os ensaios de forma rotineira, da mesma maneira que amostras
de pacientes e conforme procedimentos de análise adotados, seguindo as normas de Biossegurança.

Reporte de Resultado Mormo ELISA:

ELISA: devem ser reportados os resultados correspondentes ao percentual de positividade e
interpretação.

Atenção! O material deste programa é específico para o método ELISA. Os usuários não devem analisar em outros métodos.

Critérios Específicos de Avaliação:

Avaliação:

O Controle de Qualidade dos Materiais (CQM) é realizado por laboratórios subcontratados competentes para execução da(s)
atividades(s) subcontratada(s). Ressaltamos que a preparação e avaliação do desempenho do material não são subcontratadas, sendo
o provedor do ensaio de proficiência responsável por esse serviço.

Parasitologia
Item de Ensaio: solução de fezes de origem animal conservada em formol (solução salina formalizada etc.) ou como imagem (lâmina
digitalizada). Conforme o conservante usado, há variação natural da cor da solução.
Procedimento de uso - solução (1) homogeneizar suavemente, no próprio frasco; (2) remover a tampa plástica e a rolha; (3) preparar
lâminas sem concentrar o material, até esgotar todo o material; (4) realizar a análise das lâminas.
Vedar completamente as bordas da lâmina/ lamínula com parafina ou esmalte, para que o material não resseque. Desta forma, desde
que guardado apropriadamente, o material poderá ser reexaminado para conferências futuras.
Preparo e estocagem corretos e validade da solução de lugol são fundamentais para a identificação de alguns parasitas:
Solução Estoque de Lugol: dissolver 10g de iodeto de potássio, com 5g de iodo, em 100mL de água destilada, sob constante agitação,
em frasco contendo um ímã. Esta solução tem validade de 1 ano. É importante anotar a data do preparo e da validade.
Solução de Trabalho de Lugol: diluir uma porção da Solução Estoque em água destilada, numa relação 1:5 (1 parte de solução estoque
mais 4 partes de água). Esta solução tem validade de 14 dias, devendo ser desprezada antes, caso haja redução da intensidade da cor. É
importante anotar a data do preparo e da validade.
As duas soluções devem ser acondicionadas em frasco escuro, à temperatura ambiente (15ºC-30ºC) e afastadas da luz.
Reporte de Resultado: reportar, no máximo, três parasitas (ovos, cistos, trofozoítos, larvas, vermes etc) de presença predominante no
material. Deve-se reportar apenas uma opção de resposta - espécie ou gênero - para cada parasito identificado. No caso de não

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encontrar nenhum parasita reportar como ‘negativo’.
Critérios Adicionais de Avaliação: são considerados os resultados de aprovação do material e os obtidos pelos participantes. Para
itens físicos contemplam-se apenas os parasitas considerados sempre presentes no material, após esgotamento da amostra. Qualquer
outro parasito que tenha sido identificado pelos participantes não é avaliado. Para itens digitalizados, são considerados para a
avaliação todos os parasitos presentes nas lâminas disponibilizadas.

Patologia
Item de Ensaio: Casos digitalizados de lâminas coradas com hematoxilina e eosina preparadas a partir de material de biopsia de
origem animal (cães e gato). Cada item corresponde a um caso clínico diferente.
Procedimento de uso: ver instruções nas páginas 3 e 4, em “Microscopia Virtual”.
Reporte de resultados: Consultar os dados clínicos (disponíveis no próprio formulario online) que contém informações importantes
para cada caso e contribuem para o correto diagnóstico.
O formulário de resposta contém uma lista de opções de respostas qualitativas. Na ausência de alguma opção, deve-se procurar uma
denominação sinônima entre as existentes ou, em último caso, reportar o achado no campo "comentários".

Reticulócitos
Item de Ensaio: casos digitalizados de lâminas com esfregaço preparado com sangue de origem animal colhido em EDTA e corado com
Novo Azul de Metileno.
Procedimento de uso: ver instruções nas páginas 3 e 4, em “Microscopia Virtual”.Realizar a análise em um aumento de 1000x e contar
minimamente 1000 células.
Reporte de Resultado: o percentual de reticulócitos deve ser obtido pela fórmula [(contagem de reticulócitos / contagem de hemácias)
x 100]. A contagem das hemácias e a adoção desta fórmula evita a super ou subestimação do resultado por conta da variação da
quantidade de hemácias por campo. Não é fornecido o hematócrito de cada item e os resultados não devem ser ajustados com base no
índice de reticulócitos (IR) ou no índice de produção de reticulócitos (RPI).
Obs: Para espécie felina devem ser considerados na contagem somente os reticulócitos agregados, visto que estes são os melhores
indicadores de liberação medular ativa.
Critérios Específicos de Avaliação: o resultado do participante é avaliado conforme estatística de grupo, obtida com a normalização
dos resultados pela aplicação da raiz quadrada.
Orientações complementares: consulte o documento "Diferentes práticas que impactam no resultado do Ensaio de Proficiência de
Reticulócitos." disponível no link ‘Educação’ do Sistema Online.

Urinálise
Urinálise Bioquímica
Urinálise Elementos Anormais
Urinálise Sedimentoscopia (câmara e microscopia)
Item de Ensaio Bioquímica e Elementos Anormais:
Anormais: urina sintética líquida. Item de ensaio único para Bioquímica e Elementos
Anormais.
Item de Ensaio Urina Sedimentoscopia: urina de origem animal líquida.
Procedimento de uso Bioquímica e Elementos Anormais: (1) deixar à temperatura ambiente (15-30ºC) por 15 minutos; (2)
homogeneizar suavemente; (3) realizar primeiro a leitura dos Elementos Anormais; (4) colocar a tira reagente sobre papel absorvente na
posição horizontal; (5) gotejar a urina nas áreas da tira, evitando o excesso; (6) remover o excesso de urina encostando a aresta lateral
da tira no papel absorvente; (7) efetuar as leituras no tempo indicado para a tira; (8) leituras em equipamentos devem ocorrer conforme
instrução do fabricante.
Cuidados que podem evitar variações na leitura de elementos anormais:
anormais (1) não subdividir uma tira em várias. Isto reduz a área visual
para leitura e aumenta o erro humano ao comparar com a escala; (2) evitar deixar o material sobre a bancada (em temperatura
ambiente) por um tempo maior que o necessário para a climatização, pois isto pode negativar alguns parâmetros.

Procedimento de uso Sedimentoscopia:

Sedimentoscopia: (1) deixar à temperatura ambiente (15ºC a 30ºC) por 20 minutos; (2) passar o material no
vórtex, em baixa velocidade, por 5-10 segundos; (3) homogeneizar invertendo o material por 15 minutos; (4) proceder à análise em
lâmina e lamínula ou na câmara.
Atenção! O volume enviado corresponde ao material já pronto para análise obtido a partir da centrifugação de 10mL de urina, não
necessita centrifugar.
centrifugar Para análise do sedimento entre lâmina/lamínula recomenda-se pipetar 0,02mL do material e realizar a análise
com zoom de 400x.
Procedimento de uso imagem: ver instruções nas páginas 3 e 4, em “Microscopia Virtual”.
As imagens digitalizadas apenas ilustram o caso clínico enviado, não sendo necessária a realização de contagens e identificações de
estruturas na mesma.
Reporte de Resultado Urina EA: reportar resultados na unidade de cada ensaio no formulário de resposta. O formulário de resposta
contém uma lista de opções de resposta para cada tira. Na ausência de uma opção equivalente (algumas tiras tem dois tipos de leitura),
o laboratório deve reportar o achado no campo "comentários".
Reporte de Resultado Urina Bioquímica: Para reporte de resultados em 24h, o laboratório deve considerar o volume de 1 litro.
Reporte de Resultado Sedimentoscopia (item físico): físico): Para hemácias e leucócitos, reportar resultados apenas nos campos
relacionadas com a(s) metodologia(s) utilizada(s) na rotina do laboratório (por campo, câmara ou automação).
Reporte de Resultado Sedimentoscopia (fotos - identificação): o laboratório deve selecionar a opção que melhor descreve a
Instruções de Uso e Critérios Adicionais
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estrutura identificada (a fresco/contraste de fase, corada com Sternheimer Malbin e Sudan III).
As fotos envidas para um caso clínico são obtidas do mesmo paciente. As fotos a fresco, por contraste de fase e luz polarizada são
obtidas do mesmo campo do microscópio (estruturas idênticas), ao contrário das fotos coradas que são obtidas de um campo diferente
(diferentes lâminas).
O formulário de resposta contém uma lista de opções de resposta para cada tira. Na ausência de uma opção equivalente (algumas tiras
têm dois tipos de leitura), o laboratório deve reportar o achado no campo "comentários".

Sangue Oculto
Item de Ensaio: Fezes sintéticas liofilizada com adição de hemoglobina de origem animal.
Procedimento de uso: (1) deixar à temperatura ambiente (15ºC-30ºC) por 20 minutos; (2) retirar a tampa do frasco com muito cuidado,
para que o material a ela aderido não seja perdido. Ao retirar a tampa, deve-se colocá-la virada para cima na bancada; (3) reconstituir
adicionando água reagente (CLSI/NCCLS) conforme o volume indicado no rótulo, utilizando pipeta calibrada; (4) recolocar a tampa com
o mesmo cuidado, para que nenhuma porção da solução seja perdida; (5) passar o material no vórtex por 2 a 3 minutos; (6) realizar o
ensaio.

Sarna
Item de Ensaio imagens estáticas (fotos)
Reporte de Resultado O laboratório deve selecionar a opção que melhor descreve o ectoparasito identificado nas imagens.
O formulário contém uma lista de opções de respostas. Na ausência de alguma opção, deve-se procurar uma denominação sinônima
entre as existentes ou, em último caso, reportar o achado no campo "comentários".

O Controle de Qualidade dos Materiais (CQM) destes materiais é realizado por laboratórios subcontratados competentes para execução
da(s) atividades(s) subcontratada(s). Ressaltamos que a preparação e avaliação do desempenho do material não são subcontratadas,
sendo o provedor do ensaio de proficiência responsável por esse serviço.

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Fatores de Comversão Gerais Fatores de Conversão por ensaio
Unidade Unid
x Fator = Ensaio Unid Atual X Fator = Unid Desejada
Atual Desejada
Unid x 103 (1.000) = m Unid Ácido Lático mg/dL x 0,111 = mmol/L
(grama, x 106 (1.000.000) = µ Unid Acido Urico x 0,0168 = mg/dL
............................................ NUMERADOR ..................................................

µmol/L
mol, ou
x 109 (1.000.000.000) = n Unid Acido Urico mmol/L x 16,8 = mg/dL
UI)
x 1012 (1.000.000.000.000) = p Unid Albumina µmol/L x 0,0069 = g/dL
α-Glicoproteína
m Unid x 10-3 (0,001) = Unid µmol/L x 4,1 = mg/dL
ácida
x 103 (1.000) = µ Unid Bilirrubina µmol/L x 0,0585 = mg/dL
x 106 (1.000.000) = n Unid Cálcio Total mmol/L x 4,01 = mg/dL
x 109 (1.000.000.000) = p Unid Cap Tot FixFerro µmol/L x 5,587 = µg/dL
µ Unid x 10-6 (0,000001) = Unid Cloretos mg/dL x 0,282 = mmol/L
x 10-3 (0,001) = m Unid Cloretos mg/dL em NaCl x 0,171 = mEq/L
x 103 (1.000) = n Unid Cobre µmol/L x 6,354 = µg/dL
x 106 (1.000.000) = p Unid Colesterol mmol/L x 38,67 = mg/dL
n Unid x 10-9 (0,000000001) = Unid Creatinina µmol/L x 0,0113 = mg/dL
x 10-6 (0,000001) = m Unid Ferro µmol/L x 5,587 = µg/dL
x 10-3 (0,001) = µ Unid Fósforo mmol/L x 3,097 = mg/dL
x 103 (1.000) = p Unid Glicose mmol/L x 17,99 = mg/dL
p Unid x 10-12 (0,000000000001) = Unid Magnesio mEq/L x 1,215 = mg/dL
x 10-9 (0.000000001) = m Unid Magnesio mmol/L x 2,43 = mg/dL
x 10-6 (0,000001) = µ Unid Trigliceridos mmol/L x 88,50 = mg/dL
x 10-3 (0,001) = n Unid Urea mmol/L x 6,024 = mg/dL
Unid/ dL x 101 (10) = Unid/ L Cortisol nmol/L x 0,0363 = µg/dL
DENOMINADOR

x 10-2 (0,01) = Unid/ mL T3 Livre pmol/L x 0,651 = pg/mL

Unid/ L x 10-1 (0,1) = Unid/ dL T3 Total nmol/L x 65,10 = ng/dL
x 10-3 (0,001) = Unid/ mL T4 Livre pmol/L x 0,0777 = ng/dL
Unid/
x 103 (1000) = Unid/ L T4 Total nmol/L x 0,0777 = µg/dL
mL
2
x 10 (100) = Unid/ dL 100mL = dL = %

Exemplo: Resultado inicial de 2345 µUI/dL, deseja-se passar para

mUI/L

µUI mUI
x 0,001x10 = 0,01
dL L
O resultado final é: 2345 x 0,01 = 23,45 mUI/L

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