Teste de Concentração Inibitória Mínima (MIC)

Profa Dra. Dilza A. Nalin de Oliveira Leite

Profa Dra. Dejanira de F. de Angelis

Objetivo: Determinar a Concentração Inibitória Mínima – MIC, ou seja, a CIM

Concentração Inibitória Mínima que representa a menor dose necessária de um agente
microbiano (ou condições físicas) para inibir o crescimento de um microrganismo.
O preparo de tubos com meio líquido para as usinas em ensaios na área de
fermentação, com meio CSN líquido, sem antibióticos ou actidiona + verde de bromo
cresol (solução estoque de 220mg/100mL, usar 1mL/100mL de meio CSN), pH 5,5
representa uma opção atrativa econômicamente.

Preparar um protocolo seguindo o exemplo:

Nº tubos A* B 1 2 3
Vol. Meio CSN (caldo clarificado) mL 9 9 9 9 9
mL inóculo 0,1 - 0,1 0,1 0,1
mL solução biocida em diferentes [ ] 0,0 1,0 1,0 1,0 1,0
PPM do anti-microbiano (neste caso) - - 5 10 20
Resultado: Crescimento (turvação -
mudança de cor, se com verde do
bromo-cresol para o amarelo
* para manter o volume final de 10,1mL acrescenta-se 1mL de água destilada no tubo
controle positivo.

A verificação dos resultados é baseada nas leituras de turvação do meio. Pode-se

empregar o meio de cultura com verde de bromocresol que é um bom indicador visual
do crescimento.
Para avaliar adequadamente a cultura pode-se usar a escala de turvação de Mac
Farland ou as linhas de Wickerhan (cartão com três linhas: uma fraca, uma média e uma
forte). Coloca-se o tubo na frente e faz-se a comparação.
A intensidade da turvação indicará o crescimento do micro-organismo. (CIM
será ideal onde não ocorrer crescimento).