UNIVERSIDADE DO ESTADO DE MINAS GERAIS 7

CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
MICROBIOLOGIA
2. PRÁTICA 2 – MICROSCOPIA DE LUZ: MORFOLOGIA BACTERIANA

OBJETIVOS
• Reconhecer as partes e aprender a manusear o microscópio óptico.
• Aprender a focalizar preparados no microscópio, inclusive em imersão.
• Observar atentamente os cuidados a serem tomados com o microscópio de luz.
• Observar a morfologia das bactérias (cocos, bacilos e espiroquetas).

FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA
A Microbiologia pode ser definida como o estudo de organismos muito pequenos para
serem vistos claramente e individualizados pelo olho humano sem ajuda nenhuma. Para visualização
de microrganismos é necessário aumentos, os quais são conseguidos com o uso do microscópio
óptico composto ou de luz, o qual é composto pela parte mecânica e parte óptica.

Parte mecânica: Representada pelo corpo ou braço do microscópio, o qual se encontra

apoiado, pela extremidade inferior em uma base metálica de tamanho e peso suficientes para
assegurar o equilíbrio do aparelho. A extremidade superior do braço articula-se com um tubo metálico
conhecido como "canhão", o qual suporta as lentes. Um sistema de "cremalheira" permite o
deslocamento do canhão (ou da mesa, conforme o modelo do microscópio) pera baixo e pare cima,
através dos parafusos macro e micrométricos. O parafuso macrométrico permite deslocamentos
rápidos e de grande amplitude, ao passo que o micrométrico permite pequenos deslocamentos.
Na parte inferior do tubo microscópico são colocadas as objetivas, em número variável,
que serão rosqueadas num dispositivo móvel especial denominado revólver, o qual permite o
intercâmbio das objetivas. Entre o canhão e a base do microscópio existe uma plataforma metálica
chamada mesa ou platina do microscópio.
Sobre a platina é colocada a lâmina com a preparação a ser examinada, a qual será fixada
por meio de presilhas a fim de que permaneça imóvel. Para correr todo o campo do microscópio,
existe um dispositivo especial denominado charriot, que por intermédio de dois parafusos, permite o
deslocamento da preparação.

Parte óptica: constituída peles lentes e pelo sistema de iluminação.

à Lentes oculares: são adaptadas na extremidade superior do tubo do microscópio e é
através dela que o observador olha, A ocular geralmente produz de 10x, entretanto, existem oculares
de 5 e 15 aumentos.
à Lentes objetivas: são constituídas por um conjunto de lentes e acham-se dispostas na
extremidade inferior do tubo do microscópio. A maioria dos microscópios possui três objetivas a
"seco" (pequeno, médio e grande aumento) e uma objetiva de imersão.
à Objetiva de imersão: dá maior aumento e permite ver o objeto com mais nitidez. A
técnica é simples: colocar uma gota de óleo de cedro sobre a preparação e baixar a objetiva própria
sobre a lâmina, de forma que esse líquido denso se interponha entre a objetiva e o objeto a ser
examinado. Nesse caso os raios luminosos não sobrem desvio, pois o índice de refração do óleo é
igual ou muito próximo ao do vidro.
à Sistema de iluminação: representado pelo condensador que dirige os raios de luz para
o objeto e uma fonte de luz, a qual pode ser direta ou refletida por um espelho. O condensador possui
um diafragma com a finalidade de controlar a quantidade de luz desejada.

Procedimento para focalização

(i) Acender a fonte de luz acoplada;
(ii) Posicionar o condensador o mais próximo possível da mesa (platina);
(iii) Verificar se o diafragma está completamente aberto;
(iv) Colocar em foco a objetiva de menor aumento;
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(v) Fixar a preparação a ser examinada com auxílio da presilha;
(vi) Observar o campo microscópico;
(vii) Focalizar a imagem através do uso sucessivo das objetives;
(viii) Para observar a preparação com objetiva de 100X, utilizar a uma gota de óleo de
imersão sobre a lâmina;
(ix) Girar o revólver para colocar a objetiva de imersão em foco;
(x) Olhando pelo lado, fazer descer o canhão com o parafuso micrométrico, até que a
lente frontal da objetiva fique encostada no óleo de imersão.
(xi) Olhando pela ocular, mover o parafuso micrométrico delicadamente, até conseguir
uma boa focalização da preparação;
(xii) Para mudar o campo microscópico, mover o charriot em outro sentido.
(xiii) Terminando a observação:
- Encaixe a objetiva de menor aumento;
- Abaixe a mesa (ou platina) com o auxílio do Macrométrico;
- Desligue a luz;
- Retire a lâmina e limpe a lente objetiva com papel macio.
Observação: não movimente a mesa do microscópio com a objetiva de maior aumento
encaixada.

MATERIAIS POR BANCADA/ GRUPO

• Lâmina de Staphylococcus sp. corada pelo Gram (A);
• Lâmina de Bacillus subtilis corada pelo Gram (B);
• Lâmina de Escherichia coli corada pelo Gram ©
• Microscópios;
• Óleo de imersão;
• Papel absorvente macio (limpeza de lentes)

ATIVIDADE PRÁTICA
• Reconhecer as partes dos microscópio;
• Focalizar as preparações
• Observar a morfologia das bactérias estudadas.
• Esquematizar os micro-organismos observados

Aumento_____. Aumento_____. Aumento_____.

ANOTAÇÕES
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