Oxidação de Aminoácidos e

Produção de Ureia
Princípios chave

Os diversos caminhos para o catabolismo de aminoácidos possuem duas partes

amplas, uma envolvendo os grupamento amino e outra envolvendo o esqueleto
carbônico

Quatro aminoácidos - alanina, glutamato, glutamina e aspartato - possuem

papel chave no transporte e distribuição dos grupamento amino

Vias metabólicas não são distintas

Amônia livre é tóxica

Cada aminoácido possui destino catabólico diferente

Visão geral do catabolismo de aminoácidos em mamíferos

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 1

 Circunstâncias metabólicas da oxidação de aminoácidos

aminoácidos sofrem degradação oxidativa quando:

- aminoácidos liberados durante turnover proteíco não são necessários para a
síntese de novas proteínas
- aminoácidos ingeridos excedem a necessidade de síntese proteíca
- proteínas celulares são utilizadas como combustível por conta de carboidratos
não disponíveis ou utilizados indevidamente (doenças metabólicas por exemplo)

Destinos metabólicos do grupo amino

Catabolismo do grupo amino

a menos que sejam reutilizados, grupos amino são canalizados em um único

produto final excretório

Animais amoniotélicos, ureotélicos e uricotélicos

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 2

 amoniotélicos = excretam o nitrogênio do amino como amônia
- maior parte das espécies aquáticas

urotélicos = excretam o nitrogênio amino como ureia

- maior parte dos animais terrestres

uricotélicos = excretam o nitrogênio amino como ácido úrico

- pássaros e répteis

Aminoácidos envolvidos no metabolismo de nitrogênio

glutamato, glutamina, alanina e aspartato são mais facilmente convertidos em

intermediários do ciclo do ácido cítrico:
- glutamato a alfa-cetoglutarato
- glutamina a alfa-cetoglutarato
- alanina a piruvato
- aspartato a oxaloacetato

Proteína da dieta é degradada enzimaticamente a aminoácidos

degradação ocorre no trato gastrointestinal

gastrina = hormônio secretado quando proteína da dieta entra no estômago

- estimula a secreção de HCl e pepsinogênio

pepsinogênio = zimogênio (forma inativa de uma proteína) que é convertido a

pepsina ativa por clivagem autocatalítica em pH baixo

Pepsina e secretina

pepsina = cliva a longa cadeia polipeptídica em uma mistura de peptídeos

menores

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 3

 secretina = hormônio secretado no sangue em resposta ao baixo pH no
intestino delgado
- estimula o pâncreas a secretar bicarbonato (básico) no intestino delgado

Zimogênios são secretado por células exócrinas do pâncreas

colecistocinina = hormônio secretado no sangue em resposta da chegada de

peptídeos no duodeno
- estimula a secreção de diversas proteases pancreaticas
→ tripsinogênio é o zimogênio da tripsina
→ quimotripsinogênio é o zimogênio da quimotripsina
→ procaroxipeptidases A e B são zimogênios das carboxipeptidases A e B

Tripsina e inibidor pancreático de tripsina

enteropeptidase = enzima proteolítica que converte tripsinogênio a tripsina

tripsina = ativa tripsinogênio, quimotripsinogênio e procarboxipeptidases e

proelastase adicionais

inibidor pancreático de tripsina = inibidor proteico que protege o pâncreas

contra auto-digestão, evitando liberação prematura

A mucosa intestinal absorve aminoácidos

aminoácidos livres transportados a células epiteliais cobrindo o intestino

delgado, entram nos capilares sanguíneo nas vilosidades e viajam para o fígado

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 4

 Pancreatite aguda

pancreatite agua = causada pela obstrução da via onde secreções

pancreáticas adentram o intestino
- zimogênios são prematuramente convertidos a suas formas ativas dentro das
células pancreáticas e atacam o tecido pancreático

Piridoxal fosfato participa na transferência do grupo alfa-amino ao alfa-

cetoglutarato

aminotransferases (transaminases) = catalisa a remoção dos grupos alfa-

amino
- células contém diferentes tipos que se diferem em sua especificidade para o L-
aminoácido
- muitas são específicas para o alfa-cetoglutarato como o aceptor do grupo
amino

Reações de transaminação

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 5

 reação de transaminação = tranferência do grupo alfa-amino ao átomo de
carbono alfa do alfa-cetoglutarato, produzindo um alfa-cetoácido análogo do
aminoácido
- reações são livremente reversível (deltaG próximo de 0)
- efetivamente coleta o grupo amino de diversos aminoácidos para formar L-
glutamato

Piridoxal-fosfato (PLP)

Piridoxal-fosfato (PLP) = a forma coenzimática da piridoxina ou vitamina B6

- usado como grupo prostético por todas as aminotransferases
- carrega gurpos amino no sítio ativo

A estrutura do piridoxal-fosfato e piridoxamina-fosfato

PLP (forma aldeído) = acepta um grupo amino

piridoxamina-fosfato (forma aminada) = doa seu grupo amino a um alfa-

cetoácido

Piridoxal-fosfato é ligado covalentemente a enzima

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 6

 ligado covalentemente por uma ligação aldimina (base de Schiff) ao grupo e-
amino de um resíduo de Lisina

Algumas reações facilitadas pelo PLP

Glutamato libera seu grupo amino como amônia no fígado

NH4+ na mitocôndria vem de diferentes alfa-aminoácidos na forma de

- grupo amino do L-glutamato
- nitrogênio amida da glutamina

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 7

 L-glutamato desidrogenase

catalisa a desaminação oxidativa do glutamato produzindo NH4+ e alfa-

cetoglutarato
- presente na matriz mitocondrial
- pode usar tanto NAD+ ou NADP+

alfa-cetoglutarato pode entrar no ciclo do ácido cítrico ou ser usado para síntese
de glicose

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 8

 Glutamato-desidrogenase opera numa interseção importante no metabolismo
de carbono e nitrogênio

alfa-cetoglutarato pode ser oxidado como combustível ou como precursor de

glicose na gliconeogênese

glutamato-desidrogenase é:
- positivamente modulada por ADP (sinal de baixo nível de glicose)
- negativamente modulada por GTP (sinaliza alto nível de alfa-cetoglutarato)

Glutamina transporta amônia na corrente sanguínea

glutamina-sintetase = catalisa a combinação de amônia livre com glutamato

para formar glutamina
- requer ATP
- crítica no transporte de amônia tóxica para o fígado

glutaminase = catalisa a conversão de glutamina a glutamato e NH4+

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 9

 Alanina transporta amônia do músculo esquelético para o fígado

músculo esquelético produz piruvato, lactato e amônia

alanina-aminotransferase = faz a interconversão de piruvato e alanina via

transaminação com glutamato

O ciclo da glicose-alanina

via onde alanina carrega amônia e esqueleto carbônico para o fígado

- amônia é excretada
- piruvato é usado para produzir glicose, que é então devolvida ao músculo

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 10

 Amônia é tóxica aos animais

amônia livre é tóxica, especialmente para o cérebro

NH4+ compete com K+ por transporte em astrócitos através da ATPase Na+K+

- resulta em aumento da concentração de K+ extracelular

cotransportador de Na+-K+-2Cl- 1 (NKCC1) = simportador que transporta

Na+, K+ e Cl-
- Cl- em excesso pelo excesso de K+ altera resposta neuronal ao
neurotransmissor GABA

Excreção de nitrogênio e o ciclo da ureia

O ciclo da ureia

via onde a amônia depositada na mitocôndria dos hepatócitos é convertida em

ureia
- ureia entra na corrente sanguínea e é excretada na urina
- enzimas são aglomeradas em metabolons

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 11

 Ureia é produzida a partir de amônia em cinco passos enzimáticos

carbamoil-fosfato-sintetase-1 = catalisa a formação de carbamoil-fosfato a

partir de NH4+ e CO2 (como bicarbonato_
- requer 2 ATP
- ocorre na matriz mitocôndrial

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 12

 A reação da carbamoil-fosfato-sintetase-1

o primeiro nitrogênio entra pela amônia na reação catalisada pela carbamoil-

fosfato-sintetase-1

a reação possui duas etapas de ativação que requerem ATP

A formação de citrulina

ornitina-transcarbamoilase = catalisa a formação de citrulina e fosfato

inorgânico a partir de ornitina e carbamoil-fosfato

Formação de argininosuccinato

citrulina passa da mitocondria para o citosol

argininosuccinato-sintetase = catalisa a condensação do grupo amino do

aspartato e o grupo ureido da citrulina para formar argininosuccinato

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 13

 - requer ATP
- usa um intermediário citrulil-AMP

A reação da argininosuccinato sintetase

o segundo nitrogênio entra pela amônia na reação catalisada pela

argininosuccinato-sintetase

a reação possui dois passos de ativação

A formação de arginina

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 14

 argininosuccinase = catalisa a clivagem reversível de argininosuccinato para
formar arginina e fumarato
- fumarato é convertido a malato e entra como intermediário no ciclo do ácido
cítrico

A formação da ureia

arginase = catalisa a clivagem da arginina para formar ureia e ornitina

- ornitina é transportada para a mitocôndria para iniciar outro ciclo

O ciclo do ácido cítrico e ciclo da ureia podem ser ligados

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 15

 Comunicação entre entre os ciclos do ácido cítrico e ureia

comunicação depende no transporte de intermediários chave entre a

mitocôndria e citosol
- transportador de malato-alfa-cetoglutarato
- transportador glutamato-aspartato
- transportador glutamato-OH-

A lançadeira aspartato-argininosuccinato

lançadeira aspartato-argininosuccinato = via ligando os ciclos da ureia e

ácido cítrico
- liga o destino do grupo amino e esqueleto carbônico dos grupos amino

Aspartato como doador de nitrogênio

essa via para incorporação de nitrogênio é uma de duas vias comuns para
introdução de grupo amino em biomoléculas

o ciclo da ureia e ácido cítrico estão ligados próximamente a um processo

adicional que tras redutores equivalentes de NADH para a mitocôndria

A atividade do ciclo da ureia é regulada em dois níveis

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 16

 o ciclo da ureia é regulado:
- no nível de síntese enzimática para:
→ as quatro enzimas do ciclo
→ carbamoil-fosfato-sintetase-1
- por regulação alostérica da carbamoil-fosfato-sintetase-1 por N-acetilglutamato
→ arginina indiretamente estimula atividade

Interconexões das vias reduz o custo energético da síntese de ureia

isolado, o ciclo da ureia requer quatro grupos fosfato de alta energia

o custo energético é reduzido pelas interconexões do ciclo

Defeitos genéticos no ciclo da ureia podem ser fatais

dietas livre de proteína não é uma opção para indivíduos com defeito nas
enzimas do ciclo da ureia

aminoácidos essenciais = aminoácidos que não podem ser sintetizados por

humanos e devem ser obtidos pela dieta

Tratamentos para deficiência nas enzimas do ciclo da ureia

o ácido aromático benzoato é metabolizado e se combina com glicina

o ácido aromático fenilbutirato é metabolizado e combina com glutamina

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 17

 Vias para degradação de aminoácidos
Catabolismo de aminoácidos

cerca de 10-15% da produção de energia em humanos

as 20 vias catabólicas convergem para formar seis produtos principais (todos

podem entrar no ciclo do ácido cítrico)

Visão geral do catabolismo de aminoácidos

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 18

 Alguns aminoácidos podem contribuir para a gliconeogênese, outros para
formação de corpos cetônicos

aminoácidos cetogênicos = pode formar corpos cetônicos no fígado

- fenilalanina, tirosina, isoleucina, leucina, triptofano, treonina e lisina

aminoácidos gliconeogênicos = podem ser convertidos em glicose e glicogênio

- todos os aminoácidos exceto lisina e leucina

Diversos cofatores enzimáticos tem papel importante no catabolismo de

aminoácidos

transferências de um carbono normalmente envolvem um de três cofatores:

- biotina (transfere CO2)
- tetrahidrofolato (transfere estados de oxidação intermediário)
- S-adenosilmetionina (transfere grupo metil)

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 19

 Tetrahidrofolato (H4-folato)

tetra-hidrofolato (H4-folato) = consiste de pterina substituida (6-metilpterina),

p-aminobenzoato e glutamato
- sintetizado em bactérias

folato (ácido fólico) = forma oxidada do tetra-hidrofolato

- convertido a tetra-hidrofolato em dois passos por dihidrofolato-redutase

S-adenosilmetionina (adoMet)

cofator preferido pra transferência biológica de grupo metil

- seu grupo metil é 1000x mais reativo que o grupo metil do N5-
methiltetrahidrofolato

metionina-adenosil-transferase = catalisa a síntese de adoMet a partir de ATP

e metionina

S-adenosil-homocisteina = formada quando o grupo metil da adoMet é

transferida a um aceptor

Síntese de metionina e S-adenosilmetionina

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 20

 Anemia perniciosa

observada em doença da deficiência de B12

- seguida até a reação da metionina-sintase

Seis aminoácidos são degradados a piruvato

alanina, triptofano, cisteína, serina, glicina e treonina são convertidos

completamente ou em parte a piruvato

piruvato é convertido a:
- acetil-CoA para oxidação via ciclo do ácido cítrico
- oxaloacetato para entrar na gliconeogênese

Degradação de aminoácido a piruvato

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 21

 Serina desidratase

serina desidratase = catalisa a conversão de serina a piruvato

- remova ambos os grupos beta-hidroxila e alfa-amino da serina
- reação dependente de piridoxal-fosfato

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 22

 Degradação de glicina por serina-hidroximetil-transferase

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 23

 serina-hidroximetil-transferase = catalisa a adição enzimática de um grupo
hidróximetil pra glicina produzindo serina
- requer tetrahidro-folato e piridoxal-fosfato

Degradação de glicina por enzima de clivagem da glicina

enzima de clivagem da glicina = catalisa a clivagem oxidativa reversível de

glicina a CO2, NH4+ e grupo metileno
- requer tetrahidro-folato
- defeitos enzimáticos causa a formação de metilglioxal, que modifica proteínas
e DNA

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 24

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 25
 Degradação de glicina por d-aminoácido-oxidase

d-aminoácido-oxidase = catalisa a conversão de glicina a glioxilato, que é

oxidado a oxalato

cristais de oxalato de cálcio contribuem pra cerca de 75% de todas as pedras

nos rins

Defeitos genéticos do metabolismo de aminoácidos

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 26

 Sete aminoácidos são degradados a acetil-CoA

leucina, lisina, fenilalanina, tirosina e triptofano produzem acetil-CoA via

acetoacetil-CoA

isoleucina, leucina, treonina, e triptofano formam acetil-CoA diretamente

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 27

 Quebra do triptofano

via mais complexa do metabolismo de todos os aminoácidos

alguns intermediários do catabolismo são precursores para síntese de outras

moléculas

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 28

 Vias catabólicas para fenilalanina e tirosina

fenilalanina e tirosina são degradados em acetoacetil-CoA (por consequência

em acetil-CoA) e fumarato

defeitos genéticos nas enzimas da via levam a doenças hereditárias

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 29

 Catabolismo de fenilalanina é defeituoso em algumas pessoas

muitos aminoácidos ou são neurotransmissores ou precursores ou antagonistas

de neurotransmissores

defeitos genéticos no metabolismo de aminoácidos pode causar

desenvolvimento neural defeituoso e déficits intelectuais

Fenilcetonúria (PKU)

doença causada por um defeito genético na fenilalanina-hidroxilase

- causa mais comum de níveis elevados de fenilalanina no sangue
- tratada com intervenção dietária

Alcaptonúria

doença causada por um defeito genético em homogentisato-dioxigenase

grande quantidades de homogentisato são excretada, e sua oxidação torna a

urina preta

Cinco aminoácidos são convertidos a alfa-cetoglutarato

arginina, glutamato, glutamina, histidina e prolina são degradados a alfa-

cetoglutarato

prolina, arginina, histidina e glutamina são todos convertidos a glutamato

glutamato é desaminado a alfa-cetoglutarato

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 30

 Quatro aminoácidos são convertidos a succinil-CoA

isoleucina, metionina, treonina e valina, são degradados a succinil-CoA

succinil-CoA é um intermediário importante do ciclo do ácido cítrico

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 31

 Aminoácidos de cadeia ramificada não são degradados no fígado

ao contrário de outros aminoácidos, os BCAAs (isoleucina, leucina e valina) são

degradas somente em tecidos extrahepáticos (músculo, adiposo, rim, cérebro)
- a aminotransferase é ausente no fígado

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 32

 O complexo da desidrogenase dos alfa-cetoácidos de cadeia ramificada

catalisa a descarboxilação oxidativa dos três alfa-cetoáxidos, liberando CO2 e

produzindo derivados acil-CoA
- regulado por modificação covalente ao conteúdo de BCAAs na dieta
- inativo quando fosforilado

Asparagina e aspartato são degradados a oxaloacetato

asparagina e aspartato são degradados a oxaloacetato

asparaginase = catalisa a hidrólise de asparagina a aspartato

aspartato-aminotransferase = catalisa a transaminação de aspartato com alfa-

cetoglutarato para produzir glutamato e oxaloacetato

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 33

Oxidação de Aminoácidos e Produção de Ureia 34