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Leso
da
plasmtica:
membrana
Estresse mecnico
Introduo
Clulas nucleadas- sobrevivncia por
selagem
Falha na selagem- perda do contedo
intracelular
Dano irreversvel- influxo de Ca2+
extracelular
Introduo
Abrupta elevao
do Ca2+
intracelular
Ativao de
proteinases e
fosfolipases
Dano generalizado
bicamada lipdica
e citoesqueleto
Blebs
Blebs so brotamentos das
clulas
cuja
membrana
plasmtica
se
separou
localmente do crtex de
actina.
Contrao
cortical
da
actomiosina
Presso hidrosttica
Herniaes
plasmtica
da
membrana
Blebbing
Citocinese
Locomoo
Cresciment
o celular
Leso
celular e
apoptose
Blebbing
Armadilha
para
o
segmento
da
membrana lesada e confina seu citosol
Selagem: isolamento do corpo celular
por tampo de anexina A1 (um ligante
de clcio e de protenas de membrana)
Blebbing
Materiais e Mtodos
Reagentes
Anticorpo monoclonal anti-anexina A1 - BD Biosciences
Fluo-5F AM - Invitrogen AG
Endonucleases de restrio, Taq polimerase e ligase de DNA T4 - New
England Biolabs
peCFP-N1 e peYFP-N1 - Clontech
Plasmdeos de SureSilencing shRNA - Biosciences.
Outros reagentes - Sigma.
Materiais e Mtodos
Cultura celular e transfeces
Clulas HEK
Clulas astrocitomas humanas- U373
Clulas primrias de msculo liso
Clulas T- Jurkat e Clulas B- Raji foram mantidas e
transfectadas
A sequncia de codificao de anexina A1 foi clonada nos
vetores de protena de cores fluorescentes seguida de
amplificao por PCR a partir de cDNA da bexiga de msculo
liso humano. Anexina A1- protena fluorescente amarela e
CFP foram expressos transitoriamente em clulas alvo.
Resultados
Resultados
Resultados
Resultados
Human astrocytoma
Localized accumlation
of Ca and translocation
ofAnnexin
Bleb 1 is repaired
Mechanical damage
SCRATCH
Bleb 2 is repaired
Discusso
Sem
Blebbing
Morte
celular
Discusso
Anexina
A1
Contrao
dirigida de
miosina
Injria
Babiychuk et al, 20
Discusso
Discusso
Discusso
Discusso
Discusso
Discusso
Clulas T e
NK
(Perforina)
Department of
Health
Integridade
da MP
restaurada,
protegendo
contra
necrose
Blebbing
est
intimament
e ligado a
proteo
Keefe et al.
(acumula
o de
corante
extracelula
r)
Concluso
No est
relacionado
com o reparo.
Eliminao da
leso
Tentativa de
reparo anterior
Se o dano for
muito extenso,
a regio deve
ser sacrificada
Aumento [Ca2+ ]
i responsvel
pela morte
celular
Referncias bibliogrficas