QFL 1313 – Química Analítica III

ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORÇÃO MOLECULAR

Iana Spadini Arantes

Laboratório 261 – B2 superior
iana_arantes@usp.br

Junho de 2020
 Espectrofotometria
Qualquer técnica que usa a luz para mensurar concentrações químicas
Na espectrofotometria de absorção, medimos a quantidade de luz absorvida por
uma substância em função do comprimento de onda.

Espectrofotometria de absorção UV-Vis

λ máx

λ (nm)
180 780

HARRIS, D. C.; Quantitative Chemical Analysis. Eighth Edition | SKOOG et al; Fundamentos de Química Analítica. 8ª edição. 2
Espectrofotometria

A parte da molécula responsável pela

ABSORÇÃO da luz é denominada CROMÓFORO

3
 Aspectos conceituais
Excitação eletrônica da molécula
M + h M*
Est
ad
os
exc
ita
do
s

Estado fundamental E1 < E2

λ 2 < λ1

SKOOG et al; Fundamentos de Química Analítica. 8ª edição. 4

 Medidas de absorção
𝑃 𝑃0
𝑇𝑟𝑎𝑛𝑠𝑚𝑖𝑡â𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑇 = 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 (𝐴) = − log 𝑇 = log
𝑃0 𝑃

Transmitânci Absorbância
a

y = ax + b
α = εb y=A ;
x=C
Concentração LEI DE LAMBERT-BEER Concentração

𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 𝐴 λ = ελ bc
Característica de uma Proporcional à
 Absorbância (adimensional) concentração de espécies
substância e indica a
 ε é a absortividade molar (L mol-1 cm-1) absorventes de luz na
quantidade de luz absorvida
 b é o caminho óptico (cm) amostra.
num determinado λ.
 c é a concentração (mol L-1)
5
 Instrumentação
 feixe simples fotodiodo

fonte de
monocromador amostra detector
radiação
deutério amplificador
tungstênio
linha base (solvente puro) referência

sinal
 feixe duplo
motor
fonte de P
monocromador amostra detector

radiação
amplificador
Corrige instabilidade da fonte e do detector
MAIOR ESTABILIDADE E SENSIBILIDADE
P0
referência
sinal
HARRIS, D. C.; Quantitative Chemical Analysis. Eighth Edition | SKOOG et al; Fundamentos de Química Analítica. 8ª edição. 6
 VÍDEO

ESPECTROFOTOMETRIA: da absorção de luz ao perfil de espectros

Fernando Lopes - IQUSP

www.youtube.com/watch?v=0PFHTYwQQg8

Assistir de 3:55 min até 12:12 min

7
 Experimento

Determinação de Mn em aço por

espectrofotometria de absorção molecular

OBJETIVO: Determinar a concentração de Mn em aço, por conversão de íons

permanganato, via espectrofotometria de absorção molecular.

8
 Preparo da amostra
Misturar Dissolução e 2 mL H2SO4 e aquecer
cuidadosamente HCl Pesar subamostras concentração das até desprendimento 10 mL H2O (destilada)
e HNO3 (3:1) em um (50 mg) n=2 amostras até ⅟2 do de fumaças brancas 5 mL de H3PO4 (conc.)
béquer volume inicial (solução incolor)
cobrir com
5 min vidro de relógio T. A. T. A.
(repouso)

10 mL

Água régia Δ Δ
Amostra de aço
2 Mn2+ + 5 IO4- + 3 H2O → 2 MnO4- + 5 IO3- + 6 H+
600 mg NaIO4
Não esquecer Transferir para balões Ferver por 1 min e
o branco das volumétricos e avolumar deixar as
(H2O destilada) soluções
T. aquecidas (5 a 10
subamostras! 100 mL
A. Δ
min)
MUITA ATENÇÃO, USAR EPIs E REALIZAR OS PROCEDIMENTOS EM CAPELA!
9
 Curva de Calibração

Solução estoque MnO4 - Ci x Vi = Cf x Vf

250 mg L-1 (C i)

1 mL 2 mL 4 mL 6 mL Caminho óptico
b = 1 cm
λ máx = 525 nm

25 mL 25 mL 25 mL 25 mL 25 mL

Branco 10 mg L-1 20 mg L-1 40 mg L-1 * 60 mg L-1

(H2O)

* Solução referência para registrar o espectro de absorção.

10
 VÍDEO

ESPECTROFOTOMETRIA: Introdução
Prof. Ivano Gutz - IQUSP

https://www.youtube.com/watch?v=0DWSGnOT8Ek&feature=youtu.be

Assistir até 2:17 min

11
 Resultados experimentais
Espectros de absorção típicos do permanganato de potássio Concentração (mg/L) Absorbância
Branco -
10 0,1482
525 nm 20 0,3011
40 0,5907
60 0,8928

12
 Resultados experimentais
 Amostras
Absorbância
(triplicata) Amostra 1 Amostra 2 Branco
Leitura em triplicata
1 0,2377 0,2581 0,0042 para avaliar erros
2 0,2378 0,2580 0,0042 instrumentais!
3 0,2374 0,2575 0,0043
A1 A2 Média 0,2376 ± 0,0002 0,2579 ± 0,0003 0,0042 ± 0,0001
m1 = 0,0498 g m2 = 0,0503 g

Calcular a concentração de Mn no aço expressando o resultado em % m/m e em X ± Y mg kg-1.

Onde: X é a concentração e Y o desvio padrão.

13
 Resultados experimentais
 Amostras
Absorbância
(triplicata) Amostra 1 Amostra 2 Branco
Leitura em triplicata
1 0,2377 0,2581 0,0042 para avaliar erros
2 0,2378 0,2580 0,0042 instrumentais!
3 0,2374 0,2575 0,0043
A1 A2 Média 0,2376 ± 0,0002 0,2579 ± 0,0003 0,0042 ± 0,0001
m1 = 0,0498 g m2 = 0,0503 g
Abs1 = 0,2334 Abs2 = 0,2536 Descontando o branco

Atenção às unidades de concentração! Dados:

A massa de Mn na amostra não é a MM Mn = 54,94 g/mol
concentração de MnO 4- que encontramos a MM MnO4- = 118,94 g/mol
partir da equação da calibração.
Considerar % Mn (m/m) = 1,51%
também as diluições! 15120 ± 785 mg Kg-1
2 Mn2+ + 5 IO4- + 3 H2O → 2 MnO4- + 5 IO3- + 6 H+
Média entre as duas amostras

14
 Análise dos resultados
Considerando os dados obtidos, esboçar a dependência da absorbância e da transmitância
com a concentração e verificar a obediência à Lei de Beer. Estimar o coeficiente de
absortividade molar do MnO4 -.

Concentração
Concentraçã
(mg/L) Absorbância
Absorbância Transmitância
o 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 (𝐴) = − log 𝑇
(mg/L)
10
10 0,1482
0,1482 0,7109
20
20 0,3011
0,3011 0,5000 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏â𝑛𝑐𝑖𝑎 𝐴 λ = ελ bc
40
40 0,5907
0,5907 0,2566
60
60 0,8928
0,8928 0,1280  Absorbância (adimensional)
 ε é a absortividade molar (L mol-1 cm-1)
 b é o caminho óptico (cm)
 c é a concentração (mol L-1)

ε = 1764,8 L mol-1 cm-1

(λ = 525 nm)

15
 Exercício para entregar!
Uma análise espectrofotométrica foi realizada numa certa Os dados obtidos foram:
amostra para determinação do teor de cobre. Os seguintes
procedimentos foram adotados: [CuSO4]/mol L-1 Absorbância
0,00 0,000
a) Pesou-se 9,000 g de amostra e a mesma foi tratada com ácido 0,10 0,355
sulfúrico em recipiente adequado (convertendo todo o cobre em 0,20 0,723
CuSO4). 0,30 1,025
0,40 1,435
b) Todo o conteúdo do procedimento a) foi transferido para um balão 0,50 1,756
volumétrico de 200 mL e completado com água. Amostra 0,850

c) Uma alíquota da solução obtida em b) foi usada para leitura

direta no espectrofotômetro.
Admitindo-se que a única espécie absorvente em
670 nm pós-tratamento advém apenas do sulfato
d) Uma curva analítica foi construída com um padrão de CuSO 4
de cobre formado e o “branco” tem valor igual à
para determinação do teor de cobre na amostra. As
zero, calcule o teor de cobre (%m/m) na amostra.
absorbâncias dos pontos da curva e da amostra foram
Dados: MMCu = 63,5 g/mol.
obtidas no comprimento de onda igual a 670 nm.

Enviar para: iana_arantes@usp.br

16