UNIVERSIDADE DE CUIAB FAUEB Faculdade de Arquitetura Urbanismo Engenharia e Belas Artes

RELATRIO DE AULA PRTICA

MORFOLOGIA BACTERIANA: COLORAO PELO MTODO DE GRAM

Cuiab - MT Novembro/2011

UNIVERSIDADE DE CUIAB FAUEB Faculdade de Arquitetura Urbanismo Engenharia e Belas Artes

MORFOLOGIA BACTERIANA: COLORAO PELO MTODO DE GRAM

Trabalho sobre o mtodo de colorao de Gram, como parte dos requisitos para matria de micro biologia, do curso de Engenharia Ambiental na Universidade de Cuiab MT.

Cuiab - MT Novembro/2011

SUMRIO 1. INTRODUO ............................................................................................... 1 2. MATERIAIS E MTODOS ............................................................................. 2 2.1 Procedimentos ........................................................................................ 2 3. RESULTADOS ............................................................................................... 3

1. INTRODUO O diagnstico biolgico o conjunto de procedimentos e tcnicas complementares empregadas para estabelecer a etiologia do agente responsvel de uma doena infecciosa por exemplo. Muitos testes

microbiolgicos objetivam o isolamento de microorganismos viveis, os quais devem ser levados rapidamente ao laboratrio em transportes adequados e inoculados em maios de cultura para o crescimento. As preparaes do material de laboratrio envolvem todas as atividades necessrias para que os frascos, utenslios, instrumentos e vidraria encontremse totalmente limpos, estreis e isentos de resduos qumicos e orgnicos, no momento das anlises. Dentre as formas de anlises e diagnsticos, relevante o mtodo de colorao de Gram, aplicado a bactrias e utilizado na obteno de resultados classificam-do-as em Gram-positivas e Gram-negativas onde pode ser verificada a morfologia de bactrias.

2. MATERIAIS E MTODOS O experimento aplicado a saber o mtodo de colorao de Gram foi realizado no laboratrio de micro biologia, e foram utilizados os seguintes materiais: suspenso bacteriana; lminas; lamnulas; ala de inoculao; bico de Busen; pinas; microscpio; leo de imerso; Pipeta de Pasteur;

E tambm foram utilizados os seguintes reagentes: soluo de cristal violeta, soluo de lugol (iodeto de potssio KI), soluo de fucsina bsica, soluo lcool acetona.

2.1 Procedimentos Primeiro foi feito a preparao do esfregao bacteriano que consiste em colocar uma pequena poro do meio de cultura onde esto inseridas as bactrias, na lamina (isso utilizando a ala de inoculao) espalhando at formar uma pelcula fina e deixar esfriar. Feito isso o esfregao foi coberto com a soluo de cristal violeta e esperou-se um (1) minuto, logo aps retirou o excesso lavando com gua destilada e em seguida foi coberto com a soluo de lugol e esperou um (1) minuto, aps isso foi lavado com a soluo de lcoolacetona e deixar agir por 30 segundos, em seguida cobriu-se o esfregao com a soluo de fcsina durante 30 segundos e depois lavada em gua corrente. Esperou-se a lamina secar ao ar livre para ento ser levada ao microscpio.

No microscpio usando a lente objetiva quatro buscou-se localizar o foco de todo o esfregao que constitua os microorganismos presentes na lmina. Depois passou a verificar sob a objetiva de 10 e depois a lente de cem com insero do leo imerso. Tudo isso para observar a classificao atravs do tipo de colorao, as bactrias que aparecessem coradas de vermelho sero classificadas como Gram-negativas e as que ficassem coradas de roxo so Gram-positivas.

3. RESULTADOS Observo-se que os reagentes servem de corantes fixadores (violeta de cristal), a soluo de iodo (lugol) forma com o corante um complexo insolvel dentro da clula, o lcool e acetona servem como solventes lipdicos, e fucsina serve para corar o citoplasma de vermelho. Ficou evidenciada presena de bactrias que possuam colorao roxa violeta azulado deste a primeira observao com a lente objetiva 4, com a lente de 10 conseguiu-se notar a disposio das bactrias, e com a lente de 100 mais a imerso no leo pode-se verificar a estrutura da bactria. As bactrias encontradas foram de colorao roxa. Estavam em colnias e aos pares. As formas de bactrias encontradas foram bacilos e cocos.

Figura 01. Bactrias Gram-positivas (violeta azulado)