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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAO, CINCIA E TECNOLOGIA DE PERNAMBUCO.

DEPARTAMENTO ACADMICO DE SISTEMAS, PROCESSOS E CONTROLES INDUSTRIAIS. COORDENAO DO CURSO TCNICO EM QUMICA INDUSTRIAL. LABORATRIO DE MICROBIOLOGIA GERAL E APLICDA.

TCNICA DE ANLISE DE MICRORGANISMOS NA GUA

Rogrio Paiva Diniz Jnior Lucas Moreira Duarte de Melo Karolliny Amanda

Microbiologia Geral e Aplicada

Prof. Cristina Prof. Silvana

Recife, 28 de Novembro de 2013.

1. Objetivo
Determinar o nmero mais provvel de coliformes totais e coliformes termotolerantes numa amostra de gua do lago do IFPE campus Recife.

2. Introduo
A tcnica utilizada nesta prtica foi a determinao do nmero mais provvel de coliformes totais e termotolerantes em gua. Essa prtica utilizada como forma de quantificar de maneira aproximada o nmero de microrganismos presentes numa determinada amostra de gua. As analises so realizadas em laboratrio atravs de inoculaes em determinados tubos com caldos (devidamente diludos numa proporo estabelecida previamente) que so colocados em ambientes propcios ao desenvolvimento do ser vivo. Com o desenvolvimento, os caldos so analisados e comparados com uma tabela de uma manual que fornece informaes a respeito do NMP (numero mais provvel) por 100 ml para srie de trs tubos. A partir disto, podemos tirar concluses a respeito da gua analisada e verificar a qualidade............. No sei o que falar mais, me d uma luz.

3. Materiais e equipamentos utilizados

- Ala de platina - Tubos contendo os caldos - Tubo de Durhan - Autoclave EletroLab - Balana Coleman JB-600 - Estufa Bacteriolgica Marconi MA-032 - Estantes - Pipeta graduada - Pipetador Automtico - Meio Lauril Sulfato

- Meio Verde Brilhante - Meio E.Coli

4. Mtodos
Primeiramente foi tomada uma amostra de gua do lago do IFPE campus Recife. Para que se pudesse realizar a anlise qualitativa e quantitativa de Coliformes Termotolerantes na amostra de gua o procedimento foi dividido em duas partes. 4.1. Ensaio Presuntivo

Inicialmente, com o auxlio da pipeta, foram tomadas trs alquotas de 10ml da amostra e foram adicionadas a trs tubos contendo o meio Lauril Sulfato e um tubo de Durhan. Em seguida foram tomadas mais trs alquotas da amostra de 1ml e foram adicionadas a trs tubos contendo o meio Lauril Sulfato e um tubo de Durhan. Tomou-se mais trs alquotas da amostra de 1ml que foram diludos de 1:10 e dessa diluio foram tomadas mais trs alquotas foram adicionadas a trs tubos contendo o meio Lauril Sulfato e um tubo de Durhan. Por fim esses Nove tubos foram colocados na estufa a 35,5C por 48 horas. Passada as 48 horas, os tubos foram examinados e os resultados positivos foram devidamente anotados. 4.2. Ensaio confirmativo Para cada tubo onde foi observado o resultado positivo, com o auxlio de uma ala de platina, tomou-se trs aladas de caldo e foram depositadas em mais outros dois tubos, um contendo o caldo Verde Brilhante e o outro o meio E.Coli. Os tubos de Verde Brilhante foram acondicionados numa estufa 35C por 48horas e os tubos de E. Coli foram acondicionados numa estufa 45,5C por 48horas. Passada as 48 horas os tubos foram examinados e os resultados positivos foram devidamente anotados.

5. Resultados:
A partir do experimento realizado, pode-se notar que na grande maioria dos tubos com os caldos houve turvao, que seria um sinal de desenvolvimento microbiano, mas no necessariamente o desenvolvimento do ser vivo em estudo. O sinal que deveria ocorrer era a formao de bolhas (devido liberao de gases) no tubo de Durhan. Os resultados obtidos nessa prtica foram:

- Dois tubos de caldo EC de 10 ml houve formao de bolhas - Dois tubos de caldo Verde Brilhante de 10 ml houve formao de bolhas - Nenhum tubo de 1,0 ml houve formao de bolhas. - Nenhum tubo de 0,1 ml houve formao de bolhas Atravs de uma tabela de Nmero Mais Provvel por 100 ml, para sries de trs tubos com inculos de 10 ml, 1,0 ml e 0,1 ml pode-se concluir que o nmero mais provvel por mililitros 9,2 NMP/ml. Ao se observar a formao de bolhas no tubo de caldo Verde Brilhante percebe-se que na amostra continha coliformes. J o resultado positivo no tubo que continha meio E.Coli sinaliza a presena de coliformes termotolerantes.

6. Discusso
De acordo com os resultados obtidos, podemos afirmar que a amostra de gua coletada no lago est fora dos critrios de potabilidade segundo a portaria N 2915 do ministrio da sade.

7. Concluso
Aps a prtica observamos como de fundamental importncia a utilizao das tcnicas de determinao da presena de coliformes termotolerantes e totais nas guas que nos cercam. Essa prtica est ligada a anlise do nvel de potabilidade da gua, ou seja, atravs dela podemos determinar se o nvel de microrganismos encontrados est acima do permitido pelos rgos competentes tornando essa guas totalmente imprpria ou se o nvel de coliformes est dentro dos limites de potabilidade no oferecendo risco populao circunvizinha.

8. Referncias
Pelczar
http://www.simposiocma.com.br/arquivos/documentos/anais/comunicacoeslivres/saude-e-meio-ambiente/analise-da-agua-tratada.pdf http://www.unigran.br/interbio/vol4_num1/arquivos/artigo1.pdf SITE DA ANVISA