ARTIGO DE REVISO

Radicais livres de oxignio e exerccio: mecanismos de formao e adaptao ao treinamento fsico*

Cludia Dornelles Schneider e Alvaro Reischak de Oliveira

RESUMO O interesse acerca dos mecanismos de gerao e adaptao de radicais livres de oxignio (RLO) ao exerccio aumentou significativamente a partir da demonstrao de sua relao com o consumo de oxignio. Os RLO so formados pela reduo incompleta do oxignio, gerando espcies que apresentam alta reatividade para outras biomolculas, principalmente lipdios e protenas das membranas celulares e, at mesmo, o DNA. As injrias provocadas por estresse oxidativo apresentam efeitos cumulativos e esto relacionadas a uma srie de doenas, como o cncer, a aterosclerose e o diabetes. O exerccio fsico agudo, em funo do incremento do consumo de oxignio, promove o aumento da formao de RLO. No entanto, o treinamento fsico capaz de gerar adaptaes capazes de mitigar os efeitos deletrios provocados pelos RLO. Estas adaptaes esto relacionadas a uma srie de sistemas, dos quais os mais importantes so os sistemas enzimticos, compostos pela superxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase, e o no enzimtico, composto por ceruloplasmina, hormnios sexuais, coenzima Q, cido rico, protenas de choque trmico e outros. Tais adaptaes, apesar das controvrsias sobre os mecanismos envolvidos, promovem maior resistncia tecidual a desafios oxidativos, como aqueles proporcionados pelo exerccio de alta intensidade e longa durao. As tcnicas de avaliao de estresse oxidativo, na maioria das vezes, no so capazes de detectar injria em exerccios de curta durao. Dessa forma, esforos esto sendo feitos para o estudo de esforos fsicos realizados por longos perodos de tempo ou efetuados at a exausto. Novos marcadores de leso por ao dos RLO esto sendo descobertos e novas tcnicas para sua determinao esto sendo criadas. O objetivo deste trabalho discutir os mecanismos da formao dos RLO e das adaptaes ao estresse oxidativo crnico provocado pelo treinamento fsico.

Palavras-chave: Exerccio. Radicais livre de oxignio. Estresse oxidativo. Antioxidantes. Treinamento.

Palabras-clave: Ejercicio. Radicales libres de oxgeno. Estrs oxidativo. Antioxidantes. Entrenamiento.

injurias provocadas por el estrs oxidativo presentan efectos acumulativos y estn relacionados a una serie de enfermedades, como el cncer, la arteriosclerosis o la diabetes. El ejercicio fsico agudo, en funcin del incremento del consumo de oxgeno promueve un aumento en la formacin de los RLO. No en tanto, el entrenamiento fsico es capaz de generar adaptaciones capaces de mitigar los efectos deletreos provocados por los RLO. Estas adaptaciones estn relacionadas a una serie de sistemas de los cuales los mas importantes son los sistemas enzimticos, compuestos por la perxido dismutasa, catalasa y glutation peroxidasa y los sistemas no enzimticos compuestos por ceruloplasmina, hormonas sexuales, la coenzima Q, cido rico, protenas de choque trmico, y otros. Tales adaptaciones, a pesar de las controversias sobre los mecanismos comprendidos, promueven una mayor resistencia tisular a los desafos oxidativos, como son aquellos proporcionados por el ejercicio fsico de alta intensidad y de larga duracin. Las tcnicas de evaluacin del estrs oxidativo, la mayora de las veces, no son capaces de detectar injurias en ejercicios de corta duracin. De esta forma, los esfuerzos estn siendo realizados por largos periodos de tiempo o realizados hasta la extenuacin. Nuevos marcadores de lesin por accin de los RLO estn siendo descubiertos y nuevas tcnicas para su determinacin estn siendo creadas. El objetivo de este trabajo es discutir los mecanismos de formacin de los RLO y de adaptacin al estrs oxidativo crnico provocado por el entrenamiento fsico.
INTRODUO

RESUMEN Radicales libres de oxigeno y ejercicio: mecanismos de formacin y adaptacin al entrenamiento El inters a cerca de los mecanismos de generacin y adaptacin de radicales libres de oxgeno (RLO) al ejercicio aument significativamente a partir de la demostracin de su relacin con el consumo de oxgeno. Los RLO son formados por la reduccin incompleta de del oxgeno, generando especies que presentan una alta reactividad para otras biomolculas, principalmente lpidos y protenas de las membranas celulares y, as mismo, el DNA. Las

* Programa de Ps-Graduao em Cincias do Movimento Humano, Grupo de Estudos em Bioqumica e Fisiologia do Exerccio, Laboratrio de Pesquisa do Exerccio Escola de Educao Fsica, UFRGS, Porto Alegre, Brasil. Recebido em 21/3/04. 2a verso recebida em 22/5/04. Aceito em 25/5/04. Endereo para correspondncia: Rua Felizardo, 750 90690-200 Porto Alegre, RS. E-mail: claudiadschneider@ig.com.br/aroliveira@esef.ufrgs.br

O aumento do consumo de oxignio, assim como a ativao de vias metablicas especficas durante ou aps o exerccio, resulta na formao de radicais livres de oxignio, substncias conhecidas simplesmente como radicais livres(1-3). Estas molculas esto aumentadas nos exerccios de alta intensidade(4,5) e extenuantes(6) e foram relacionadas a um grande nmero de doenas como enfisema pulmonar, doenas inflamatrias, aterosclerose, cncer e envelhecimento, a partir da dcada de 80(7,8). Por outro lado, sabese que a atividade fsica uma conhecida forma de estresse e a exposio crnica a ela, chamada treinamento fsico, capaz de disparar adaptaes em resposta a uma maior produo destes radicais livres. Neste sentido os estudos mais recentes estabelecem o papel da atividade fsica na preveno e controle de diversas doenas, como cncer de clon, e possivelmente cncer de mama e de prstata(9), diabetes e hipertenso(10), dislipidemias e aterosclerose(11), entre outras. Este artigo proporciona uma reviso acerca dos mecanismos de gerao dos radicais livres atravs do exerccio, bem como os processos adaptativos e respectivas conseqncias induzidas pelo treinamento fsico.
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RADICAIS LIVRES Os radicais livres de oxignio (RLO) so produzidos naturalmente em nosso organismo atravs de processos metablicos oxidativos e, muitas vezes, so de extrema utilidade, como nas situaes em que h necessidade de ativao do sistema imunolgico (como exemplo, os macrfagos utilizam o perxido de hidrognio para destruir bactrias e outros elementos estranhos); na desintoxicao de drogas; e na produo do fator relaxante derivado do endotlio, o xido ntrico, extremamente importante nos processos que desencadeiam o relaxamento dos vasos sanguneos(12). Conforme Halliwell(1), o oxignio (O2) que respiramos metabolizado em nosso organismo da seguinte maneira: aproximadamente 85 a 90% so utilizados pela mitocndria, atravs da cadeia de transporte de eltrons, e os 10 a 15% restantes so utilizados por diversas enzimas oxidases e oxigenases e tambm por reaes qumicas de oxidao diretas. Na parte terminal da cadeia de transporte de eltrons, a enzima citocromo oxidase (reao 1) remove um eltron de cada uma das quatro molculas reduzidas de citocromo c, oxidando-as, e adiciona os quatro eltrons ao O2 para formar gua (em torno de 95 a 98% dos 85 a 90% citados acima). Os 2 a 5% restantes so reduzidos univalentemente em metablitos denominados espcies reativas de oxignio. Reao 1 reduo tetravalente do oxignio O2 + 4e- + 4H+ 2 H2O + energia

dos do oxignio, considerados em conjunto, so denominados espcies reativas de oxignio (ERO), em funo da sua aumentada reatividade para as biomolculas(14), e em geral alteram o tamanho e a forma dos compostos com os quais eles interagem. Alm disso, o radical superxido pode reagir diretamente com o xido ntrico (NO), um radical livre centrado no nitrognio, gerando peroxinitrito. Este pode levar formao de um oxidante com caractersticas do radical hidroxil (reao 6). Reao 6: O2- + NO ONOO- ONOO- + H+ OH

Cada ERO tem suas prprias caractersticas, mostrando diferentes reatividades e tempos de meia-vida(13,15).

ESTRESSE OXIDATIVO O termo estresse oxidativo utilizado em circunstncias nas quais o desafio por radicais livres resulta em dano tecidual ou na produo de compostos txicos ou danosos aos tecidos. Pode-se dizer que um organismo encontra-se sob estresse oxidativo (EO) quando ocorre um desequilbrio entre os sistemas prooxidantes e antioxidantes, de maneira que os primeiros sejam predominantes(16). Um dos principais mecanismos de leso a lipoperoxidao (LPO), ou seja, a oxidao da camada lipdica da membrana celular. Alm disso, o EO pode gerar danos a protenas e ao DNA, provocando diversas alteraes na funo celular e, portanto, tecidual.

FORMAO DAS ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO Em razo da sua configurao eletrnica, o oxignio tem forte tendncia a receber um eltron de cada vez. A converso univalente do oxignio gua processa-se da seguinte maneira: (a) A adio de um eltron a uma molcula de oxignio no estado fundamental gera a formao do radical superxido (O2-) (reao 2). Reao 2: O2 + e- O2-

DEFESA ANTIOXIDANTE Como as ERO so continuamente formadas em pequenas quantidades pelos processos normais do metabolismo, todas as clulas possuem mecanismos para mitigar seus efeitos agressores. Cabe salientar que a composio das defesas antioxidantes difere de tecido a tecido, de tipo de clula a tipo de clula e possivelmente de clula a clula do mesmo tipo, em um dado tecido(1). O sistema de defesa antioxidante est dividido em enzimtico e no enzimtico. O primeiro inclui as enzimas superxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx). A catalase desempenha importante papel na eliminao do H2O2, promovendo a sua catlise at gua. Reao 7: H2O2 + H2O2

(b) O superxido ao receber mais um eltron e dois ons hidrognio forma perxido de hidrognio (H2O2), atravs do processo chamado dismutao(13). Essa reao catalisada pela enzima superxido dismutase (SOD) que encontrada em quantidades elevadas nas clulas de mamferos e que acelera a reao a 104 vezes a freqncia para dismutao espontnea num pH fisiolgico (reao 3). Reao 3:

CAT

O2 + 2H2O

H2O2 2 O2- + 2H+

SOD

A GPx tambm funciona como mecanismo de proteo contra o estresse oxidativo, convertendo a glutationa reduzida (GSH) glutationa oxidada (GSSG), removendo H2O2 e formando gua (reao 8)(17). Reao 8: 2GSH + H2O2

(c) Quando o H2O2 recebe mais um eltron e um on hidrognio, formado o radical hidroxil (OH), que o mais reativo dos intermedirios, pois pode reagir e alterar qualquer estrutura celular que esteja prxima e assim influenciar enzimas, membranas ou cidos nuclicos(6). O radical hidroxil pode ser formado quando o H2O2 reage com ons ferro ou cobre (reao 4). A reao conhecida como Reao de Fenton. Reao 4: Fe2+/Cu+ + H2O2 OH + OH- + Fe3+/Cu2+

GPx

GSSG + 2H2O

Os ons de metais de transio podem tambm catalisar a reao entre H2O2 e superxido, conduzindo produo de radical hidroxil (reao 5), a chamada Reao de Haber-Weiss. Reao 5: H2O2 + O2Fe/Cu OH + OH- + O2

Os radicais superxido e hidroxil tm eltrons desemparelhados em sua rbita mais externa e so, portanto, chamados radicais livres. O perxido de hidrognio no um radical livre; no entanto, representa um metablito de oxignio parcialmente reduzido. Outras espcies reativas de interesse so os oxignio singletes, que so formas de oxignio spin-alteradas. Esses metablitos derivaRev Bras Med Esporte _ Vol. 10, N 4 Jul/Ago, 2004

Dessa forma, tanto a CAT quanto a GPx evitam o acmulo de radical superxido e de perxido de hidrognio para que no haja produo de radical hidroxil, contra o qual no existe sistema enzimtico de defesa(13). O perfeito equilbrio entre as enzimas antioxidantes (CuZnSOD, MnSOD, CAT, GPx) importante para a manuteno da integridade celular. J o sistema no enzimtico inclui compostos sintetizados pelo organismo humano como bilirrubina, ceruloplasmina, hormnios sexuais, melatonina, coenzima Q, cido rico, e outros, ingeridos atravs da dieta regular ou via suplementao como cido ascrbico (vitamina C), -tocoferol (vitamina E), -caroteno (precursor de vitamina A) e grupos fenis de plantas (flavonides). Em estudos desenvolvidos em nosso laboratrio(18,19), utilizando coraes isolados de ratos, em um modelo de perfuso coronariana (Langendorff), demonstramos que tanto a vitamina A quanto o Trolox (anlogo hidrossolvel da vitamina E) agiram reduzindo os nveis de lipoperoxidao e os efeitos inotrpico, cronotrpico e lusitrpico negativos induzidos por H2O2. Isto se deve capacida-

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de quencher de oxignio singlete de ambas as vitaminas. Um quencher uma molcula que capta a energia de excitao do oxignio singlete para si, levando-o ao estado fundamental e tornando-se excitada(1). MECANISMOS DE FORMAO DAS ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO Durante a atividade muscular, a demanda energtica pode superar em 35 vezes a demanda de repouso(20). Dessa forma, durante a sua realizao ocorre um grande aumento no consumo de oxignio, na sua maior parte em decorrncia do aumento de trabalho muscular. Pelo fato de as ERO serem produzidas atravs do metabolismo intermedirio, o exerccio provoca aumento da sua produo. Como exemplo, imaginemos um homem adulto de 70kg, que em repouso utiliza 3,5mL O2.kg-1.min-1 ou 352,8L.d-1 ou 14,7mol.d1 . Se 1% gera O2-, isto significa 0,147mol.d-1 ou 53,66mol.ano-1 ou 1,7 kg.ano-1 (de O2-). J durante o esforo fsico, com o aumento do consumo de O2, isto pode aumentar de 10 a 15 vezes(1). Segundo Via et al.(21), o grau de estresse oxidativo e de dano muscular no depende da intensidade absoluta do exerccio, mas do grau de exausto da pessoa que realiza o exerccio. Alm disso, conhecer os mecanismos de formao de RL com o exerccio importante para prevenir o estresse oxidativo e o dano associados com a atividade fsica exaustiva. Os mecanismos de formao so os seguintes: (1) Interrupes temporrias das bombas de ATP dependentes de clcio (Ca++) levam ao aumento das concentraes intracelulares de clcio, o que durante o exerccio pode ativar a via da xantina oxidase. Concentraes aumentadas de clcio intramuscular durante perodos de exerccio de alta intensidade podem ativar as proteases dependentes de clcio, as quais convertem a xantina desidrogenase em xantina oxidase. A xantina oxidase usa o oxignio molecular ao invs do NAD+ como aceitante de eltrons e assim gera o radical superxido; (2) Perodos de exerccio intenso podem aumentar o estresse oxidativo devido hipxia e reoxigenao temporrias, que ocorrem no msculo exercitado em funo das contraes e relaxamentos estabelecidos ciclicamente. Durante a contrao, a compresso vascular estabelece um quadro de isquemia e, portanto, de hipxia. No relaxamento, ocorre a reperfuso e, conseqentemente, a reoxigenao. Sob condies de hipxia, os equivalentes reduzidos podem se acumular dentro da cadeia de transporte de eltrons mitocondrial, resultando em um fenmeno conhecido como estresse redutivo (reductive stress). Na reoxigenao, uma exploso (burst) de redues monoeletrnicas pode converter o oxignio molecular em radicais superxido; (3) A ativao de leuccitos pode estimular a produo de radicais livres para melhorar os mecanismos de defesa do hospedeiro em resposta ao dano muscular induzido pelo exerccio. Em particular, os neutrfilos podem reduzir o oxignio molecular a radical superxido via NADPH oxidase, a qual est inativa nas clulas em repouso. Processos similares tm sido observados em moncitos e eosinfilos; (4) O aumento das concentraes de Ca++ pode ativar a enzima fosfolipase A2, a qual libera o cido araquidnico a partir dos fosfolipdeos. A ciclooxigenase reage com o cido araquidnico para gerar o radical hidroxil; (5) Condies hipxicas tambm tm sido mostradas no aumento da atividade da xido ntrico sintase (NOS), levando formao de radicais do xido ntrico. Estes radicais podem exercer um efeito pr-oxidante fraco por eles prprios ou se combinar com o superxido para formar um oxidante mais potente, o peroxinitrito(22), como j demonstrado (reao 6). Sendo assim, durante o metabolismo aerbio, a possibilidade de ocorrer leso oxidativa nos tecidos vai depender de um preciso equilbrio entre a gerao de radicais de oxignio e a eficcia dos mecanismos antioxidantes.

EXERCCIO FSICO E ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO Diversos estudos da dcada de 80 apresentaram resultados nos quais repetidas cargas de exerccio levavam a dano ou envelhecimento acelerado do msculo em indivduos ou cobaias que se exercitavam regularmente. Entretanto Heath et al.(23), depois de acompanhar atletas durante muitos anos, verificaram que seu potencial metablico e sua capacidade funcional muscular no eram prejudicados. Alm disso, Gutteridge et al.(24) apontaram como possibilidade de mecanismo protetor o fato de terem encontrado incremento nos nveis de ferro e cobre no suor de atletas aps o exerccio, especulando que a excreo de tais metais no suor diminuiria a extenso do dano oxidativo mediado por tais metais. A partir destes estudos levantou-se a possibilidade de que o exerccio regular pudesse promover um aumento adaptativo dos mecanismos de defesa do msculo esqueltico capaz de proteger contra as leses produzidas pelas ERO. Em 1982, Davies et al.(25) propuseram que a formao de radicais livres induzida por exerccio pudesse ser o estmulo inicial para a biognese mitocondrial em uma situao de treinamento crnico. Nesta linha de trabalho, Ji(26) demonstrou que em msculo esqueltico uma carga isolada de trabalho exaustivo produzia um aumento de LPO e que a atividade das enzimas antioxidantes glutationa redutase, GPx, SOD e CAT estava significativamente aumentada. Da mesma forma, Alessio(27) mostrou aumento de LPO em fibras musculares lentas e rpidas, de ratos submetidos a cargas de exerccio, indicando aumento de estresse oxidativo induzido pela atividade fsica. Esse estresse era melhor tolerado por ratos treinados, sugerindo uma adaptao dos sistemas antioxidantes. Ao estudar humanos, Nies et al.(28) demonstraram a ocorrncia de dano ao DNA nos leuccitos circulantes aps exerccio exaustivo em esteira. Pela primeira vez isto foi mostrado em indivduos treinados, mas, como a extenso do dano foi pequena, os autores sugerem que a adaptao ao treinamento de resistncia aerbia pode reduzir os efeitos do EO, como o dano ao DNA. No mesmo ano, os resultados do trabalho de Mills et al.(29), com cavalos de corrida, mostraram que o exerccio pode induzir mudanas nos parmetros bioqumicos que so indicativos de estresse oxidativo, e que estes so exacerbados na presena de altas temperaturas e umidade. Em interessante trabalho, envolvendo um modelo de sobrecarga de treinamento, Palazzetti et al.(30) estudaram triatletas submetidos a um incremento de carga de trabalho da ordem de 21% na natao, 51% no ciclismo e 44% na corrida, por quatro semanas. O simples fato de o atleta ser submetido sobrecarga de treinamento j provocava elevao significativa de adrenalina urinria e atividade da CK plasmtica em repouso. No entanto, as maiores diferenas apareciam ao avaliar os efeitos de um duatlo (corrida e ciclismo) simulado. Os atletas em condies de sobrecarga de treinamento apresentavam maiores ndices de lipoperoxidao, avaliada pelo nvel de substncias reativas ao cido tiobarbitrico (TBA-RS), CK-MB e mioglobina plasmticos, marcadores de leso muscular, alm de queda da relao GSH:GSSG, indicando claramente que esta sobrecarga compromete os mecanismos de defesa antioxidantes relacionados resposta induzida por exerccio. Foi proposto por Margaritis et al.(31) que a magnitude da melhora do sistema de defesa antioxidante depende das cargas de treinamento. Os mesmos autores demonstraram ainda que quanto mais alto o VO2mx, em triatletas, mais alta a atividade da enzima antioxidante GPX nos eritrcitos, protegendo o organismo do dano membrana celular. Leeuwenburgh et al.(32) acrescentam que o estresse oxidativo induzido pelo exerccio pode disparar adaptaes em resposta ao treinamento e que tais adaptaes seriam tecidoespecficas, sugerindo um mecanismo regulatrio complexo. Alm disso, Leaf et al.(33) sugerem que em indivduos saudveis o exerccio fsico induz a peroxidao lipdica transitoriamente e que existe remoo dos produtos da LPO durante a fase de recuperao. O trabalho de Venditti e Di Meo(34) com ratos adultos submetidos a
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um programa de treinamento regular com durao de um ano comprovou a hiptese de que tal treinamento prolonga a capacidade de resistncia aerbia e aumenta as defesas antioxidantes, limitando assim o dano tecidual causado por RL. Da mesma forma, em nosso laboratrio, demonstramos que o treinamento aerbio, realizado atravs de corrida em esteira, em ratos, aumenta a capacidade miocrdica de manejar um desafio por perfuso com H2O2, provocando menor contratura e menor formao de TBA-RS(35) (figuras 1 e 2). Na mesma linha de investigao, 11 semanas de treinamento aerbio em ratos idosos, alm de provocar bradicardia e aumento do ndice glicose/insulina (um marcador da resistncia insulina), estavam associadas a uma resposta reduzida ao estresse oxidativo induzido por perxido de hidrognio. Neste estudo, demonstramos uma correlao positiva entre a FC basal e os nveis de TBA-RS (figura 3), ou seja, quanto maior a FC basal, maiores eram os nveis de leso radicalar(36). Estes efeitos podem ser parcialmente explicados pela maior atividade da SOD encontrada em outro estudo de nosso grupo(37), em que ratos de apenas 21 dias foram submetidos a treinamento a 50% do VO2mx, por quatro semanas. No foi encontrado qualquer aumento de TBA-RS ou QL nos coraes destes animais, o que sugere que adaptaes compensatrias no sistema antioxidante tecidual tenham ocorrido. Neste sentido, Ramires e Ji(38) demonstraram que o treinamento fsico associado suplementao de glutationa protege o corao de ratos contra a leso oxidativa e depresso da funo cardaca provocados por isquemia e reperfuso in vivo. O mecanismo para esta adaptao foi a elevao do contedo miocrdico de glutationa e da capacidade antioxidante, atravs do incremento das atividades de SOD, GPx, GSH redutase, e -glutamil transpeptidase miocrdicas.
80 70 Contratura cardaca (%) 60 50 40 30 20 10 0 5 10 Tempo (min) 15 20

1,2 R = 0,7 p < 0,05 TBARS (nmol x mg protena )

-1

0,8

0,6

0,4

0,2

0 275

300

325 FCbasal (bpm)

350

375

400

Fig. 3 Correlao entre a FC de repouso e os nveis de lipoperoxidao, avaliados por TBA-RS, em ratos idosos sedentrios e treinados fisicamente

Sedentrio Treinado

* *

Fig. 1 Contratura cardaca (%) em diferentes tempos de perfuso coronariana com H2O2 (256mmolar.L-1), em ratos sedentrios e treinados

14 12 TBARS (ng x mg protena )

-1

10 8 6 4 2 0 Sedentrio Treinado

Fig. 2 TBARS em homogeneizado cardaco aps 20 minutos de perfuso coronariana com H2O2 (256mmolar.L-1), em ratos sedentrios e treinados
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Ainda utilizando o modelo animal, Smolka et al.(39) analisaram o efeito de dois protocolos diferentes de treinamento sobre a expresso de HSP72 (Heat shock protein 72 KDa), uma protena de estresse com a funo de manter e reparar a conformao protica. Esta protena est implicada na proteo das clulas contra diferentes tipos de insultos. Alguns destes insultos, como o estresse oxidativo, estresse trmico e baixo pH resultante do acmulo de lactato so gerados durante o exerccio. Alm das adaptaes j bastante bem descritas, de incremento da atividade de citrato sintase, catalase e GSH redutase musculares aps o treinamento, um achado original deste estudo foi a demonstrao de que a induo de HSP72 provocada por uma carga isolada de exerccio ocorre somente no grupo mantido sedentrio, sugerindo que esta age como um mecanismo protetor complementar ao estresse oxidativo induzido por exerccio. Alm disso, o grupo de animais submetidos a um protocolo de alta intensidade e curta durao apresentou maior suscetibilidade ao desafio proporcionado pelo exerccio agudo que o grupo treinado atravs de protocolo contnuo. No estudo de Child et al.(40), indivduos treinados foram submetidos a uma prova de meia maratona simulada; observou-se, atravs da medida da capacidade antioxidante total e do cido rico, uma maior habilidade scavenger (capacidade de neutralizar os radicais livres formando compostos menos reativos) sobre os RL do soro. Mas mesmo assim o exerccio induziu aumento das concentraes de malondialdedo, sugerindo que tais respostas foram insuficientes para prevenir a LPO induzida pelo exerccio. Powers et al.(41) afirmam que o treinamento habitual de alta intensidade que necessrio para o nvel de competio de elite capaz de aumentar as defesas antioxidantes. Nesta linha de pesquisa, Halliwell(1) refere que atletas tm altas concentraes de ceruloplasmina no plasma. A ceruloplasmina uma -globulina que est envolvida no transporte e na regulao do cobre, podendo reduzir diretamente o oxignio sem intermedirios conhecidos, e portanto participante no sistema de defesa antioxidante extracelular. Em 2000, o estudo de Selamoglu et al.(42) apresentou diferenas adaptativas entre os exerccios aerbios e anaerbios. A atividade da enzima GPx em eritrcitos estava aumentada nos corredores de longa distncia comparados com levantadores de peso. Na mesma linha de trabalho, Inal et al.(43), analisando o metabolismo anaerbio em exerccio agudo de natao, observaram que a produo de RL foi maior do que a capacidade antioxidante. Por outro lado, Subudhi et al.(22), avaliando esquiadores alpinos de elite aps treinamento intenso, no observaram mudana nos marcadores de estresse oxidativo, supondo ento que estes atletas tiveram uma adaptao positiva em seus mecanismos antioxidantes com o treinamento.

311

Recentemente, em nosso laboratrio, Schneider(44), Schneider et al.(45) e Oliveira et al.(46) encontraram uma maior atividade eritrocitria da enzima GPx em triatletas treinados comparados a indivduos no treinados (figura 4) e uma capacidade antioxidante total plasmtica (TRAP) aumentada aps o exerccio em esteira rolante em ambos os grupos (figura 5). A maior atividade da GPx est de acordo com diversos estudos que mostram adaptao do sistema de defesa enzimtico(32,41,47-49). O aumento no TRAP tambm foi observado no estudo de Child et al.(38) e deve ter ocorrido graas a uma maior liberao de substncias antioxidantes, entre elas o cido rico, como ocorreu no trabalho de Mastaloudis et al.(49).

40 Atividade da GPx (nmol x L x min x mg prot )

-1

35 30 25 20 15 10 5 0 Treinado Destreinado

-1

-1

as compensatrias no sistema antioxidante podem ter ocorrido. Os resultados apontam uma up-regulation em relao s enzimas GPx e SOD em msculo esqueltico e eritrcitos, mas em relao enzima catalase os resultados so conflitantes. interessante notar que diversos trabalhos que avaliam o sistema de defesa antioxidante humano analisam o sistema da glutationa, a GPx e SOD, a capacidade antioxidante total, mas no incluem a atividade da enzima catalase em seus estudos. Alm disso, a ativao de HSPs em exerccio agudo e crnico participa do processo de proteo antioxidante. Este mecanismo tem merecido ateno maior nos ltimos anos. Finalmente, como alternativas de estudo podemos apontar no sentido da utilizao de protocolos que contemplem exerccios de longa durao e/ou extenuantes aliados a uma dieta rica em nutrientes antioxidantes ou suplementao de vitaminas e co-fatores de enzimas sobre o estresse oxidativo induzido pelo exerccio, bem como o estudo da expresso gnica das enzimas antioxidantes, oxidao de protenas e DNA, a partir de tcnicas mais sensveis.

Todos os autores declararam no haver qualquer potencial conflito de interesses referente a este artigo.
REFERNCIAS
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Fig. 4 Atividade da GPx em eritrcitos de indivduos treinados (triatletas) e destreinados

500 450 400 TRAP (mmol x L Trolox) 350 300 250 200 150 100 50 0 Antes

-1

Depois

Fig. 5 Capacidade antioxidante total plasmtica (TRAP) de indivduos treinados (triatletas) e destreinados, aps 40 minutos de exerccio

CONSIDERAES FINAIS Conforme o exposto acima, observamos que os fatores mais importantes na formao do estresse oxidativo so a intensidade e conseqentemente o nvel de exausto do indivduo submetido ao exerccio e, portanto, a exposio a um maior fluxo de oxignio. Talvez alguns trabalhos no sejam capazes de demonstrar um desequilbrio nos sistemas pr e antioxidantes em razo do curto tempo de exposio ao exerccio. Alm disso, podemos observar protocolos de exerccio diversos, em geral baseados em um percentual do consumo mximo de oxignio, ou seja, no relativizando a carga de trabalho aos sujeitos do estudo, bem como diferentes tcnicas de deteco do estresse oxidativo. O processo adaptativo do treinamento fsico capaz de proteger os indivduos treinados na maioria das situaes de exposio ao exerccio. Uma falha em detectar qualquer mudana na lipoperoxidao ou outro alvo de dano pode sugerir que algumas mudan-

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