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Fundamentos de Bioquimica - Ricardo Vieira
Fundamentos de Bioquimica - Ricardo Vieira
Fundamentos de
Bioqumica
Textos
Textos didticos
didticos
Belm-Par
2003
Apresentao
A bioqumica , sem dvida, uma das cincias mais fascinantes porque desmonta o ser vivo
em seus componentes bsicos e tenta explicar o funcionamento ordenado das reaes qumicas que
tornam possvel a vida, freqentemente adjetivada como milagre ou fenmeno. Entretanto, o
processo qumico muito bem organizado que estabelece toda a existncia da vida em nosso planeta,
tem sido desvendado, continuamente, por cientistas do mundo inteiro. Muito j se sabe, porm o
desconhecido a essncia do conhecimento humano e a luta para desvend-lo advm da natureza
desbravadora da humanidade, que no se furta com explicaes empricas e procura a razo dos
fatos ao invs de eterniz-los mitos.
Os captulos que se seguem representam a organizao de informaes bsicas para o
aprendizado de Bioqumica Humana, resultado do contedo das aulas que ministro h pouco mais
de uma dcada. Como tal, possuem um carter estritamente didtico, no dispensando, de forma
alguma, a consulta s referncias bibliogrficas sugeridas ao final de cada captulo e outras,
existentes na literatura especializada.
Entretanto, no se tratam de apostilas repletas de dicas e macetes que tornam o ensino
estereotipado. Pelo contrrio, um trabalho realizado com carinho e ateno para facilitar o
aprendizado em bioqumica nos cursos de Farmcia, Medicina, Biologia, Biomedicina, Nutrio,
Enfermagem, Odontologia e reas afins.
O formato eletrnico em arquivos PDF uma alternativa econmica e prtica de acesso aos
meus textos originais, contornando dificuldades editoriais prprias de nossa regio. Acima de tudo,
este E-book (livro eletrnico) corresponde a um prottipo para uma futura publicao em formato
tradicional e, como todo material didtico, estes textos esto em constante atualizao, sendo a sua
opinio (informando falhas, sugerindo mudanas etc.) de extrema valia para a realizao de um
trabalho cada vez mais completo, possibilitando um retorno positivo para o processo ensinoaprendizagem.
Belm-Par
2003
Georgete,
minha companheira e cmplice.
A meus pais,
Benedito e Scila Vieira, meus mestres.
A meus alunos,
meus inspiradores.
Captulo 1
O que estuda a Bioqumica?
ais. Sobre este aspecto, veja o que dizem Alberts, B. et al. (1997).
"Evidncias geolgicas sugerem que houve mais de
um bilho de anos de intervalo entre o aparecimento das cianobatrias (primeiros organismos a liberar oxignio como parte do seu metabolismo) e o
perodo em que grandes concentraes de oxignio
comearam a se acumular na atmosfera. Esse intervalo to grande deveu-se, sobretudo, grande
quantidade de ferro solvel existente nos oceanos,
que reagia com o oxignio do ar para formar enormes depsitos de xido de ferro."
Monera e Protista) possuem mecanismos prprios de organizao celular, de acordo com sua
relao com o meio ambiente (as plantas so
auttrofas, por exemplo) ou entre si (os Moneras e Protistas so unicelulares), ainda havendo
distino quanto organizao das organelas
celulares (os moneras so procariotas, e portanto, ao contrrio dos demais, no possuem nenhuma estrutura intracelular de membrana).
Apesar das diferenas, contudo, todos os seres
vivos apresentam uma dinmica bioqumica
celular muitssimo parecida, evidenciando o
sucesso evolutivo dos processos experimentados nos bilhes de anos de aperfeioamento. As
vias metablicas celulares constituem um emaranhado de reaes qumicas que se superpem,
mas, maravilhosamente, no se atropelam e sim
se completam formando um complexo e preciso
ciclo qumico de consumo de reagentes (em
bioqumica denominado de substratos) e formao de produtos, como em uma reao qumica qualquer. A forma de regulao destas
reaes levam a uma intricada mecnica metablica tendo ao centro a degradao (catabolismo) e sntese (anabolismo) de biomolculas,
Os vrus traduzem um captulo parte
no estudo da bioqumica por apresentarem mecanismos nicos de reproduo e desenvolvimento. Possuem apenas dois tipos de biomolculas, protenas e cido nuclico (DNA ou
RNA), necessitando do ambiente celular para
seu desenvolvimento, podendo permanecer
cristalizados por milhares de anos em estado de
inrcia quando fora do meio biolgico. Alguns
vrus mais complexos, possuem carboidratos e
lipdios em sua composio oriundos da membrana do hospedeiro durante o processo ltico.
gua
o composto qumico mais abundante
(de 60 a 85% do peso total da maioria dos tecidos) sendo o solvente adequado para os compostos minerais e bioqumicos (Figura 1-1).
Apesar de no ser uma biomolcula verdadeira
(existe em grande quantidade livre na natureza,
independente, at, da existncia organismos
vivos - existe gua na lua e livre no vcuo do
espao), graas sua polaridade, a gua consegue dissolver a maioria das biomolculas (exceo s gorduras) criando uma capa de solvaRicardo Vieira
Protenas
So as biomolculas mais abundantes,
possuindo inmeras funes, dentre elas a
indispensvel funo catalisadora exercida
pelas enzimas, sem a qual no seria possvel a
maioria das reaes celulares (apesar de algumas molculas de RNA possurem ao
cataltica idntica a enzimas).
So formadas por aminocidos ligados
por ligaes qumicas extremamente fortes
entre seus grupamentos funcionais amino
(NH2) e cido carboxlico (COOH), as ligaes peptdicas (Figura 1-2).
-aminocidos
NH2
H - C - CO O H
H -N - C - H
CO O H
Extremidade
amino-terminal
Ligaes
peptdicas
NH2
H - C - CO N - C - H
R
CO O H
Extremidade
carboxila-terminal
Figura 1-2: A ligao peptdica entre dois aminocidos extremamente rgida e no gira, porm pode doar
ou receber prtons quando em meio bsico ou cido.
Alguns aminocidos podem ser sintetizados no organismo mas a uma taxa que o
torna essencial na alimentao, como o caso
da arginina que utilizada quase que integralmente na sntese da uria e da histidina
que produzida em quantidade insuficiente
para a sntese protica, porm tornam-se quase que desnecessrios na dieta de adultos,
quando o crescimento (e, portanto, a fase de
maior sntese de protenas estruturais) chega
ao fim. Em contrapartida, os aminocidos
ditos no-essenciais cistena e tirosina so
sintetizados a partir dos aminocidos essenciais metionina e fenilalanina, o que os torna,
de cera maneira, dependentes da presena
desses aminocidos essenciais.
No fgado, os aminocidos absorvidos
no processo digestivo so convertidos nas
protenas plamticas: 1) albumina (funo de
transporte); 2) 1-globulina (glicoprotenas e
lipoprotenas de alta densidade); 3) 2globulinas (haptoglobinas, transportadoras de
hemoglobina que saem das hemcias); 4) globulinas (transferrina, lipoprotenas de baixa densidade) e 5) fatores da coagulao sangnea (fibrinognio e protrombina). No
plasma sangneo encontra-se, ainda, uma
infinidade de protenas produzidas em outros
locais do organismo, como o caso das globulinas (os anticorpos) que so sintetizadas
por linfcitos e outras protenas teciduais.
Alguns aminocidos so convertidos,
no fgado, em bases nitrogenadas (para a sntese de cidos nuclicos) e outros produtos
nitrogenados. Em vrios tecidos, possuem
funes das mais diversas, como base de sntese de hormnios e neurotransmissores.
A parte nitrogenada dos aminocidos
metabolizada no fgado de mamferos, anfbios adultos, e tartarugas convertida em
uria e excretada pelos rins. Aves, rpteis,
insetos e invertebrados terrestres excretam o
nitrognio protico como cido rico, enquanto que peixes, invertebrados aquticos, anfbios na forma larvria excretam na forma de
amnia (crocodilos sintetizam, tambm, amnia e tartarugas uria a partir do nitrognio
protico).
A cadeia carbonada dos aminocidos
convertida em intermedirios do metabolismo
energtico celular, porm esta funo corres-
ponde a uma pequena frao do poderio biolgico das protenas que so, sem dvida nenhuma, as biomolculas de maior nmero de funes em um organismo vivo. A funo energtica prioridade de duas outras molculas: os
carboidratos e os lipdios.
Carboidratos
So os principais substratos energticos
da clula, atravs da degradao da glicose por
via anaerbia e aerbia (Figura 1-4). Popularmente so chamados de acares em virtude do
seu mais conhecido representante, a sacarose,
formada por um molcula de glicose e outra de
frutose com sabor doce caracterstico. O amido
(um polmero linear ou ramificado de glicose),
entretanto, a forma de carboidrato mais comum na alimentao, representando cerca de
90% dos carboidratos da dieta. Em mamferos,
a lactose (formada por glicose e galactose)
importante fonte energtica presente no leite,
apesar da maioria dos mamferos utilizarem o
leite como nica fonte de alimento somente em
seus primeiros perodos de vida (em ratos alguns dias, em humanos cerca de um ano).
Figura 1-4: A molcula de glicose (uma hexose - carboidrato de seis carbonos) em sua forma cclica.
Lipdios
A gorduras, como so conhecidas popularmente, so a principal fonte de armazenamento energtico, podendo manter alguns tipos
de clulas vivas por vrios anos (p.ex.: sementes oleaginosas).
Os lipdios fornecem significativa quantidade de energia (quase o dobro dos carboidratos), porm no esta a sua funo primria na
alimentao, uma vez que a absoro intestinal
dos lipdios se d pela linfa e no pela corrente
sangnea como os demais nutrientes. Desta
forma, os lipdios energticos (cidos graxos na
forma de triglicerdeos - Figura 1-5) so captados pelos tecido adiposo l ficando armazenado
at que haja necessidade energtica (como no
caso de dietas hipoglicdicas ou no paciente
diabtico o qual no consegue produzir energia
atravs da glicose, uma vez que ela no penetra
na clula). Por esta razo, os cidos graxos no
so to bem aproveitados para o metabolismo
energtico como a glicose que, apesar de menos
calrica, bem mais rapidamente degradada
pelas clulas.
Ricardo Vieira
Alm de conferir um sabor caracterstico aos alimentos e de proporcionar uma sensao de saciedade, a dieta lipdica veicula as
vitaminas lipossolveis e supre o organismo
dos cidos graxos essenciais poli-insaturados
que o ser humano incapaz de sintetizar, como o cido linolico (-6); linolico (-6 e
9); aracdnico (20:4).
Os cidos graxos saturados (presente
nas molculas de triglicerdeos) fornecem
energia quando as fontes de carboidratos se
esgotam, sendo bem mais calricos que os
insaturados. O excesso da utilizao dos lipdios para o metabolismo energtico fornece
uma quantidade de um composto energtico
alternativo, os corpos cetnicos, que suprem
msculos e neurnios na falta de glicose (neurnios s consomem glicose e corpos cetnicos como combustvel energtico), porm
trazem complicaes clnicas quando produzidas em excesso (como a degenerao da
bainha mielnica de proteo dos neurnios e
a queda do pH plasmtico).
O colesterol (Figura 1-6) encontrado
exclusivamente em gorduras animais, sendo a
gema do ovo a principal fonte, mas no possui
funo energtica e acumula-se nos vasos
sangneos quando a ingesto diria supera a
quantidade de 1g. Atualmente, o Ministrio
de Sade tem proibido a divulgao do rtulo
no contm colesterol que comumente
eram colocados em frascos de leos vegetais,
cidos Nuclicos
Os cidos desoxirribunuclico (DNA)
(Figura 1-7) e ribonuclico (RNA) so as molculas informacionais, atravs das quais so sintetizadas todas as protenas do organismo. O
processo de replicao (sntese do DNA) realizado de forma extremamente cuidadosa para
que no resulte em erros na seqncia de DNA
do genoma das clulas filhas e, consequentemente, erros na produo de protenas, uma vez
que durante o ciclo de vida de uma clula, h a
sntese de RNAm (mensageiro) a partir de um
molde da molcula de DNA. Este processo
(transcrio) est intimamente atrelado sntese de protenas (traduo), onde o RNAm
processado de maneira tal a se encaixar nos
RNA dos ribossomos (RNAr) e favorecer a
adio de aminocidos que chegam transportados pelos RNA transportadores (RNAt).
Ricardo Vieira
Figura 1-7: A descoberta da estrutura de dupla hlice em espiral da molcula de DNA em 1953 por Watson e Crick, trouxe informaes importantssimas para
desvendar o papel dos cidos nuclicos para o metabolismo de todos os seres vivos.
Vitaminas
Fazem parte de um grupo de biomolculas no sintetizadas pelo ser humano e que precisam estar presentes em pequenssimas concentraes na clula para que ocorram vrias
reaes celulares indispensveis para a vida, (a
maioria funcionando como co-fatores enzimticos), o que garante o elo indispensvel entre os
animais e vegetais na cadeia alimentar, uma vez
que so produzidas por vegetais, bactrias, fungos e animais, tornando-se indispensveis na
alimentao.
Quimicamente, as vitaminas so difceis
de serem classificadas, uma vez que pertencem
s mais variadas classes qumicas (p.ex.: a vitamina A um terpeno, a B1 uma amina, a C
um cido carboxlico). De uma maneira geral,
classificamos as vitaminas, quanto s caractersticas de solubilidade, como hidrossolveis
(B1, B2, B6, B12, C, biotina, cido flico, cido pantotnico) e lipossolveis (A, D, E, e K).
Ricardo Vieira
So requeridas na dieta em quantidades mnimas, sendo chamadas de oligoelementos (do grego oligos= pouco) juntamente
com alguns minerais. A maioria delas possui
baixa resistncia ao calor o que faz com seja
necessrio ingerir os alimentos que as contm
crus, pois a coco destruiria as vitaminas (as
vitaminas lipossolveis so as menos termolbeis).
Entretanto, apesar do conceito geral de
que vitaminas so indispensveis na dieta,
nem sempre isso verdade. Algumas no so
necessrias na dieta de todos os animais, em
virtude de serem sintetizadas no organismo
(p.ex.: somente os primatas, alguns roedores e
pssaros no sintetizam a vitamina C). Outras
so sintetizadas por microrganismos da flora
intestinal normal, sendo absorvidas independente da ingesto de fontes alimentcias (Vitamina B12 e K). A vitamina K pode ser obtida pela converso de um derivado do colesterol aps a ao da radiao ultravioleta solar e
considerada por alguns autores mais um
hormnio do que uma vitamina.
Outra caracterstica marcante das vitaminas o fato de que a sua ausncia especfica na alimentao causa uma doena carencial prpria (p.ex.: o escorbuto na carncia de
vitamina C; o bri-bri na carncia de B1).
Contudo, esta propriedade no evidenciada
muito facilmente, pois em um estado de desnutrio, h a culminncia de vrias carncias
vitamnicas levando a um quadro sintomatolgico complexo e no apenas o aparecimento
de uma doena carencial especfica.
A maioria das vitaminas so cofatores
de reaes enzimticas (o que justifica em si
sua necessidade em pequena quantidade, j
que as reaes enzimticas so reciclveis) e a
sua inexistncia na clula torna invivel o
processo de vida. Interessantemente, a administrao de vitaminas em dosagens acima das
necessidades dirias so utilizadas na teraputica para corrigir sintomas que nem sempre
tem correlao direta com sua ao biolgica
(p. ex.: a vitamina B6 utilizada no tratamento de enjos). Esta conduta teraputica s
pode ser realizada sob prescrio mdica, uma
vez que altas dosagens de vitaminas podem
ser txicas e s so possveis com a administrao de vitaminas na forma de medicamen-
Minerais
So compostos de origem inorgnica
necessrios para uma srie de funes bioqumicas importantes como, por exemplo, cofatores de reaes enzimticas (Mg++, K+), fatores da coagulao (Ca++), regulao do equilbrio hidro-eletroltico e cido bsico (Na+, K+,
Cl-), elementos estruturais (Ca++, P-3, F-), transporte (Fe++) e muitas outras funes.
As necessidades de minerais para as
funes fisiolgicas podem ser divididas, arbitrariamente, em dois grupos: os macrominerais necessrios em quantidades acima de 100
mg/dia (clcio, fsforo, sdio, potssio, cloretos, magnsio) e microminerais necessrios
em quantidades abaixo de 100 mg/dia (cobalto,
iodo, ferro, flor, crmio).
De maneira diferente aos demais nutrientes, os minerais possuem um processo de
absoro intestinal incompleto, ou seja enquanto todos os carboidratos, lipdios e protenas
ingeridos devem ser absorvidos (seno haver
proliferao bacteriana e, consequentemente,
distrbios digestivos) os minerais possuem um
limiar prprio para cada um deles (p.ex.: o Na+
de cerca de 180 mEq/l) acima do qual no h
a passagem do mineral para a veia portaheptica (que comunica o intestino e o fgado) e
o excesso excretado pelas fezes.
Desta maneira, h um controle digestivo
importante da concetrao plasmtica dos minerais. Contudo, quaisquer distrbios digestivos
(p.ex.: parasitrios, inflamatrios, medicamentos) podem alterar a absoro dos minerais levando a sua depleo e tambm de gua, uma
vez que haver distrbio no balana hidroRicardo Vieira
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Ricardo Vieira
Curiosidades
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Ricardo Vieira
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Biomania:
http://www.biomania.com.br/mapasite/map.htm
Biochemistry On-Line:
http://www.biochemist.com/home.htm
Bioqumica y Biologa Molecular en la Red:
http://www.yi.com/home/PerdigueroEusebio/bioquimica.html
Science: http://intl.sciencemag.org/
Nature: http://www.nature.com/
Ricardo Vieira
Captulo 2
Bioqumica dos Alimentos
A evoluo das espcies sempre se
apoiou em novas maneiras de se obter energia
das mais variadas fontes para assim melhor
aproveitar as matrias primas que a natureza
oferece aos seres vivos. Seres mais sofisticados na forma de obter energia, tm-se mostrado superiores nesta escala evolutiva e seus
descendentes impem-se na pirmide evolutiva.
Um grupo numeroso de seres vivos
especializou-se em captar a energia luminosa e
convert-la em energia qumica para sintetizar
algumas molculas energticas: so os auttrofos. As matrias-primas bases para essa
sntese de alimentos eram compostos abundantes na atmosfera primitiva, como o gs carbnico (CO2), amnia (NH3), gua (H2O). Com a
ajuda de energia proveniente das radiaes
luminosas do sol, por fotossntese, comeouse a acumular um composto at ento escasso
na atmosfera: o oxignio (O2) que era expelido
pelos organismos fotossintticos como dejeto
metablico.
Figura 2-1 - A idade da terra estimada em cerca de 4,5 bilhes de anos, sendo proposto que por volta do primeiro bilho tenha surgido as primeiras clulas fotossintticas auttrofas. No entanto, o O2 atmosfrico necessrio para o surgimento dos auttrofos s torna-se disponvel cerca de 2 bilhes de anos depois, devido absoro do oxignio produzido
pelo ferro da superfcie da terra, fato comprovado pela existncia de enormes depsitos de xido de ferro nos sedimentos mais antigos do planeta. Os seres muticelulares demoraram cerca de 3 bilhes para surgirem, o que mostra a dificuldade da organizao celular parcialmente possibilitada pelo metabolismo aerbio. (Adaptado de Biologia Molecular da
Clula - Albert B. et al., p.16, 1997.)
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Forma-se, ento, um elo importante
entre os seres vivos, construindo a complexa
teia alimentar que faz com que a Terra funcione como um gigantesco ser vivo e prossiga,
lentamente, seus passos evolutivos.
O relacionamento entre consumidores e
produtores est ligado disponibilizao de
carbono o oxignio para os processos metablicos, enquanto que os decompositores fornecem, principalmente, o nitrognio reciclado
dos tecidos mortos e dejetos, apesar de o ciclo
dos nitrognio, carbono e oxignio ser comum
para todos os seres vivos, de certa forma (Figura 2-2).
Figura 2-2: O ciclo do carbono entre produtores (vegetal), consumidores (animal) e decompositores (fungos e bactrias).
Consumidores e produtores trocam entre si, principalmente, carbono e oxignio enquanto que os decompositores reciclam o
nitrognio.
Ricardo Vieira
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(Vioult & Juliet); Substncias, em geral naturais e complexas, que associadas s de outros
alimentos em propores convenientes, so
capazes de assegurar o ciclo regular da vida
de um indivduo e persistncia da espcie a
qual ele pertence (Randon & Simonnet); As
matrias, qualquer que seja a natureza, que
servem habitualmente ou podem servir nutrio (Littr); Substncias necessrias
manuteno dos fenmenos do organismo sadio e reparao de partes que se faz constantemente (Claude Bernard); Substncia
que, incorporada ou no ao organismo, nele
exerce funo de nutrio (Escudero).
Entretanto, o termo alimento possui
significado bastante complexo que ultrapassa
os limites da bioqumica devendo ser estudado
com um carter multidisciplinar, uma vez que
envolve a qumica, biologia, agronomia, veterinria, nutrio, alm das cincias da sade.
Desta forma, a abordagem a ser realizada neste
captulo, diz respeito ao estudo da composio
qumica dos alimentos e da forma como apresentado para o metabolismo humano. Dentro deste ponto de vista, a digesto dos alimentos ser abordada neste captulo por se
tratar de uma fase fisiolgica adaptada s propriedades dos alimentos. Nos captulos correspondentes aos estudos de cada biomolcula,
sero abordadas peculiaridades de cada processo digestivo de interesse para o metabolismo da biomolcula em questo.
A capacidade energtica dos alimentos dse devido ao alto calor de combusto das ligaes C-C (cerca de 54 kcal). No captulo
3 sobre Bioenergtica, sero abordados temas relativos ao poder calrico das biomolculas.
b) Plsticos ou estruturais: atuam no crescimento, desenvolvimento e reparao de tecidos lesados, mantendo a forma ou protegendo o corpo. Novamente, protenas, lipdios e carboidratos so os principais representantes, estando presentes na membrana
celular e regio intersticial. Em vegetais, o
carboidrato celulose (um polmero de glicose) representa o principal composto da parede celular que garante a forma da clula
vegetal, mesmo em perodos de excesso ou
escassez de gua. O depsito cumulativo de
celulose em algumas rvores apresenta resistncia comparada aos metais resistentes
como o ferro. A quitina um polmero
muitssimo parecido com a celulose (a exceo de um grupamento -OH substitudo
por um NH2 no C2) e que confere extrema
resistncia ao exoesqueleto dos artrpodes.
A gua e os sais minerais representam os
componentes da alimentao que no so
exclusivos de organismos vivos, mais possuem funes estruturais importantssimas.
c) Reguladores: aceleram os processos orgnicos, sendo indispensveis ao ser humano.
So as vitaminas, gua, sais minerais e fibras vegetais. Favorecem a dinmica celular
como catalisadores (vitaminas) ou propor-
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cionando a concentrao exata dos substratos (gua), bem como agentes estabilizadores de vrias enzimas ou mesmo regulando
a quantidade de gua intracelular ou a excitabilidade da membrana (minerais). Apesar
de no serem digeridas ou absorvidas, as fibras vegetais desempenham funo importante no processo digestivo, como ser visto
ainda neste captulo.
Necessidade de alimentos
O organismo requer nutrientes suficientes para proporcionar energia livre correspondente s necessidades dirias. A manuteno
do peso corporal constante o melhor indicador de que existe energia suficiente na dieta e
cada grupo alimentar fornece energia prpria
sua composio qumica, com as necessidades
individuais de energia dependendo de vrios
fatores prprios do alimento e outros fatores
inerentes de quem se alimenta.
A ingesto dos nutrientes deve ser feita
de forma balanceada de modo a permitir a absoro sem carncias ou excessos, pois caso
isso no seja observado, sobrevm a desnutrio e a obesidade, respectivamente, que so
distrbios patolgicos oriundos da alimentao
inadequada seja qualitativa ou quantitativamente.
A desnutrio constitui-se um grave
distrbio alimentcio inerente a ingesto de
quantidades insuficientes para manter o metabolismo basal. As substncias de reserva so
rapidamente esgotadas e os subprodutos metablicos acarretam vrios distrbios que podem
deixar seqelas graves, apesar de, na maioria
dos casos, o restabelecimento da dieta normal,
promove a volta s condies de normalidade
metablica do indivduo.
So comuns doenas nutricionais em
crianas (principalmente por um fator social,
tpico de pases do terceiro mundo) e em adultos em processo de emagrecimento espontneo
realizado por meio de dietas que levam em
considerao simplesmente a privao da alimentao calrica.
Na ocorrncia de desnutrio calrica
associada a carncia de protenas, estabelecem-se as sndromes de m-nutrio conhecidas como kwashiakor e marasmo.
Ricardo Vieira
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massa corporal mais rapidamente do que o
tempo que levou para perd-la, e em quantidade, freqentemente, superior quela observada
antes da dieta.
Em adultos, o aumento da massa gordurosa se d pelo aumento do volume dos adipcitos, o que torna o esvaziamento brusco, no
caso das dietas exageradas, um fator de flacidez para o tecido adiposo que fica propcio a
ser reposto em seu volume quando termina a
dieta.
Desta forma, para o controle da obesidade (exceto para as formas geneticamente
determinadas) o controle da massa corporal s
possvel por um programa de reeducao
alimentar aliado a incorporao de hbitos de
atividades fsicas para queimar o excesso de
alimentos calricos ingeridos diariamente.
Na figura 3-1 est apresentada a frmula de clculo do ndice de massa corporal
(IMC) e as faixas de limite inferior e superior
do peso ideal para um indivduo, levando em
considerao sua altura e peso.
IMC =
peso (kg)
[altura (m)]2
Alguns tipos de cncer esto intimamente relacionados com o tipo de dieta, como
o cncer de esfago, estmago, intestino grosso, mama, pulmo e prstata. Aparecem, geralmente, entre os 70 e 80 anos sendo que 15%
tm sobrevida de 5 anos.
Outros fatores ambientais e genticos
influenciam na gnese desses tipos de cncer,
porm observado que em pases onde a incidncia de um tipo de cncer baixa observa-se
que os imigrantes para pases onde a incidncia do cncer alta, passam a ter um aumento
na incidncia da doena, o que sugere a relaRicardo Vieira
o do surgimento da doena com fatores culturais do pas, como o caso dos tipos de alimentao.
A crie dentria um exemplo tpico
de doena causada pelo acmulo de alimentos
na cavidade bucal, nos espaos interdentrios,
que possibilita s bactrias e fungos da flora
oral e quelas presente na alimentao, proliferem e produzir produtos abrasivos (p.ex.: cido
lctico, etanol, aminas) que destroem progressivamente a dentina dando origem crie. As
protenas so utilizadas pelas bactrias para
produzir uma matriz viscosa que se fixa aos
dentes (placa bacteriana) que permite a proliferao de microorganismos para a produo dos
produtos abrasivos.
Muitas outras doenas esto relacionadas a distrbios alimentares, dentre elas destacam-se:
lceras: relacionada com fatores alimentares, genticos e psicolgicos.
Obstruo pilrica: por contrao de uma
lcera, processo tumoral ou anomalia congnita e caracterizada por vmitos, distenso abdominal e acidose metablica por
perda de cido clordrico;
Sndrome de Zollinger-Ellison: lcera
pptica causada por um tumor pancretico;
Anorexia: distrbio nervoso que induz a
fobia de ganhar peso.
Bulimia: relacionada com compulso para
comer forando o paciente a estimular o
vmito para poder comer mais.
Anemia perniciosa: acloridria e atrofia
gstrica promovem a incapacidade de secretar o fator intrnseco de absoro da vitamina B12, fato comum em indivduos
anorexgenos.
Sndromes de m-absoro: devido a leses na mucosa gastrointestinal que pode
ser causada por microorganismos presentes
nos alimentos;
Esteatorria: falha na digesto ou absoro dos lipdios;
Diarria: produo excessiva de matria
fecal por excesso de gua nas fezes.
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Balanceamento de alimentos
Para manter o equilbrio do peso corpreo, uma dieta balanceada deve conter alimentos de origem animal e vegetal composta dos
vrios tipos de biomolculas, disposto de forma balanceada para suprir as necessidades
energticas do indivduo.
Os carboidratos e lipdios so primariamente calricos, devendo ser distribudo com
parcimnia na alimentao. As protenas possuem alto valor biolgico quando possuem
grande variedade de aminocidos. As vitaminas e minerais so requisitadas em pequenas
quantidades dirias. A gua tem um volume
dirio de acordo com a perda por evaporao,
urina e fezes. Os alimentos disponveis para o
ser humano so agrupados, de forma didtica,
em cinco grupos:
Grupo I - Leite e derivados: ricos em
protenas de alto valor biolgico, grande
quantidade de clcio, vitaminas A, D, E e
do complexo B.
Grupo II - Carnes, ovos, peixes e mariscos - ricos em protenas de alto valor biolgico, ferro, vitamina A e do complexo B.
Grupo III- Gorduras e leos.
Grupo IV - Cereais e derivados, legumes
secos e produtos aucarados : ricos em
carboidratos de carbono, protenas de origem vegetal (baixo valor biolgico), ferro,
vitamina B1 e fibras.
Grupo V - Hortalias e frutos: ricos em
vitaminas, minerais e fibras, com quantidades variveis de carboidratos.
Para distribuir os vrios grupos de alimentos dentre as refeies dirias, pode-se
estabelecer pores correspondentes a uma
xcara de ch (cerca de 200 ml).
Grupo I: 2 a 3 pores
Grupo II: 1 a 2 pores
Grupo III: 2 a 3 pores
Grupo IV: 5 a 7 pores
Grupo V: 5 a 7 pores
A orientao nutricional, entretanto,
depende de avaliao clnica de doenas que
podem ter complicaes com a alimentao de
certos grupos de alimentos (p.ex.: hipercolesterolemia, diabetes mellitus).
Ricardo Vieira
Necessidades calricas
A energia gasta por um indivduo depende, principalmente dos seguintes fatores:
a) Taxa basal metablica: a quantidade de
energia necessria para a manuteno das
funes fisiolgicas bsicas sob condies
padronizadas. Para se estabelecer os valores
basais, o indivduo deve estar em repouso,
acordado, num ambiente de temperatura adequada e as medidas devem ser feitas pelo
menos 12 horas aps a ltima refeio. Esta
taxa proporcional ao peso corpreo e rea corporal (quanto maior a rea corporal,
maior a perda de calor); nos homens e nos
jovens maior que nas mulheres e idosos
em virtude de suas atividades metablicas
serem diferentes (h uma diminuio mdia
de 2% na taxa basal metablica por cada 10
anos de vida, com o tecido muscular substitudo por gordura e gua). Outras atividades
metablicas indicam gasto de energia aumentado, como o caso de atividade mental e
doenas (principalmente com febre).
b) Efeito termognico: os alimentos possuem
uma taxa de, aproximadamente, 5 a 10% de
energia total fornecida que gasta para ser
digerida, o que vai variar de alimento para
alimento, dependendo de sua digestibilidade. Desta forma, uma determinada quantidade de um alimento pode ter um rendimento energtico final menor do que a
mesma quantidade de um outro alimento
que possua uma digestibilidade melhor. Outro fator que influencia neste poder termognico o metabolismo da biomolcula, o
que faz com que uma alimentao supercalrica seja convertida em massa gordurosa
que se deposita nos adipcitos e no , verdadeiramente, convertida em energia, a menos que o indivduo realize exerccios fsicos alm de sua quantidade normal.
c) Atividade fsica: a maior varivel, quanto
maior a atividade fsica, maior ser a energia gasta pelo indivduo.
19
aumenta-se o gasto energtico para que o
organismo mantenha-se em temperatura estvel (35 - 37oC) o mesmo acontecendo
quando a temperatura ambiente est acima
da temperatura corporal, sendo que o ser
humano resiste bem mais a variaes de
temperatura para menos do que para mais,
uma vez que o calor passa a ser quase insuportvel a partir de 35oC em virtude de as
trocas calricas com o meio ambiente se
tornarem mais difceis. Entretanto, h registro de seres humanos que resistem a invernos com temperaturas de at 50oC, o que
compreensvel pela existncia de molculas
energticas disponveis para mant-lo aquecido, alm de aparatos de proteo, claro.
As atividades metablicas dirias variam de acordo com a atividade fsica exercida
pelo indivduo e seu IMC, tendo, portanto,
cada indivduo uma necessidade calrica diferente. Na Tabela 2-2 podem ser observados
valores gerais propostos pela Sociedade Europia de Cardiologia de acordo com o tipo de
atividade fsica diria.
Tabela 2-2: Necessidades calricas dirias, de acordo
com o tipo de atividade fsica.
ATIVIDADE
NECESSIDADES
FSICA
CALRICAS DIRIAS
Sedentria/Repouso 30 kcal /Kg de peso desejvel (*)
Ligeira/moderada
35 kcal /Kg de peso desejvel
Intensa
45-55 kcal /Kg de peso desejvel
( )
* Peso desejvel de acordo com o ndice de massa
corprea (IMC).
Fonte: Sociedade Europia de Cardiologia.
20
fsicas de deslocamento. Para maiores consideraes acerca do poder energtico dos alimentos, veja o captulo 9 sobre Bionergtica.
Necessidades de fibras
Um dado importante na alimentao a
presena de fibras vegetais mesmo que, classicamente, no sejam consideradas alimento, j
que no so absorvidas no trato gastrintestinal
no possuindo, portanto, funo na bioqumica
intracelular. Entende-se por fibras todos os
constituintes das paredes celulares dos vegetais que no podem ser digeridos pelas enzimas animais (p.ex.: celulose, hemicelulose,
lignina, gomas, pectinas e pentosanos). Nos
herbvoros, tais como os ruminantes, as fibras
(significativamente a celulose) so as principais fontes de energia, aps serem digeridas
por microrganismos (bactrias e protozorios)
existentes no trato digestivo desses animais.
No homem, dietas com alto contedo
de fibras exercem efeitos benficos por auxiliar na reteno de gua durante a passagem do
alimento atravs do intestino e ainda produzindo maiores quantidades de fezes macias,
facilitando o trnsito intestinal e o processo
digestivo como um todo. Uma alta quantidade
de fibras na dieta est associada com incidncias reduzidas de diverticuloses, cncer de
clon, doenas cardiovasculares e diabetes
mellitus.
As fibras mais insolveis, tais como a
celulose e a lignina, encontradas no gro de
trigo, so benficas com respeito funo do
clon, enquanto as fibras mais solveis encontradas nos legumes e frutas (p.ex.: gomas e
pectinas) diminuem o colesterol plasmtico,
possivelmente pela ligao com o colesterol e
sais biliares da dieta. As fibras solveis tambm esvaziam o estmago lentamente e deste
modo atenuam o aumento da glicose e, consequentemente, a secreo de insulina, sendo
este esse efeito benfico aos diabticos e s
pessoas que esto de regime alimentar porque
diminui o efeito da queda brusca no nvel de
glicose sangnea, que estimula o apetite. as
principais fontes de fibras so os cereais (principalmente o trigo, a aveia e o arroz integral),
amndoa, coco, castanha-do-par, feijo, espiRicardo Vieira
Alimentos industrializados
Uma caracterstica da alimentao humana que h imensa manipulao antes do
consumo, com o uso de agrotxicos, conservantes qumicos, extrao de gorduras, adio
de nutrientes etc.
O processo de industrializao visa, basicamente, conservar as propriedades nutricionais e organolpticas dos alimentos por um
perodo bastante prolongado, o que, freqentemente, promove a perda de vrios nutrientes.
As vitaminas, por exemplo, so quase que totalmente destrudas pelo calor, outras so fotolbeis e muitas no resistem ao congelamento,
o que faz com que seja necessrio adicion-las
aps durante a industrializao dos alimentos.
Os aditivos alimentares so, portanto,
substncias naturais ou sintticas, adicionadas
aos alimentos com o fim de os conservar, processar, intensificar o sabor ou melhorar o aspecto, largamente utilizado pela indstria alimentar e uma constante na dieta humana. Os
principais so os conservantes, antioxidantes,
corantes, intensificadores de sabor, edulcorantes, reguladores de acidez, emulsionantes, estabilizadores e espessantes. Na Tabela 2-5
encontram-se relacionados as classes de aditivos e seus respectivos conceitos e na Tabela 26 os principais aditivos alimentares.
Durante o processo tecnolgico, so utilizados compostos qumicos que devem ser
totalmente eliminados do produto final, ou
permanecer como traos. So denominados de
coadjuvantes de tecnologia de fabricao e
correspondem a clarificantes, coagulantes,
antimicrobianos, floculantes, inibidores enzimticos, catalisadores, detergentes, resinas etc.
21
Tabela 2-5: Relao dos aditivos alimentares e seus
respectivos conceitos.
Funo
Aditivo
Conceito
Agentes de
mantm firmes ou crofirmeza
cantes frutas e hortalias
ou fortalecem gis.
Agentes de
aumentam do volume
corpo
sem modificar o valor
energtico.
Antiespuman- evitam a formao de
tes
espuma.
Antiumectan- diminuem as propriedates
des de absoro de gua.
Tecnologia
Emulsifican- permitem a mistura de
de
tes
fases insolveis entre si.
fabricao
Espessantes
aumentam a viscosidade.
Espumantes
favorecem a formao ou
manuteno de fase gasosa.
Estabilizantes mantm estveis emulses.
Gelificantes
conferem a textura de
gel.
Seqestrantes formam complexos qumicos com ons metlicos, inativando-os.
Fermentos
aumentam o volume com
qumicos
a liberam gs.
Glaceantes
do aparncia brilhante.
Melhoradores melhoram o processo
de farinha
tcnico de produo de
farinhas.
Antioxidantes retardam a oxidao dos
alimentos.
Conservado- retardam a ao de miConservante res
croorganismos
Umectantes
protegem contra a desidratao.
Reguladores controlam a variao de
de acidez
pH.
Acidulantes
aumentam a acidez e/ou
Modificao
conferem sabor cido.
das caracte- Edulcorantes conferem sabor adocicarsticas sendo.
soriais
Estabilizantes mantm a colorao.
de cor
Corantes
conferem, intensificam
ou restauram a colorao
natural.
Aromatizan- conferem ou reforam
tes
aromas e/ou sabor.
Realadores ressaltam o sabor e/ou
de aroma
aroma.
Fonte: Resolues do MERCOSUL.
Em todos os pases, existe uma legislao extremamente exigente que limita a quantidade de aditivos no alimento industrializado
Ricardo Vieira
22
Ricardo Vieira
Digesto e absoro
A forma de introduzir o alimento no
organismo por via oral, sendo admitido, em
determinadas situaes patolgicas, a alimentao parenteral, por via endovenosa. Este
padro reservado aos animais de organizao
celular complexa onde a existncia de um tubo
digestivo com entrada (boca) e sada (nus)
bastante freqente tanto em invertebrados
quanto nos vertebrados. Bactrias, fungos e
protozorios obtm os alimentos do meio por
difuso direta atravs de processo seletivo exercido pela membrana celular que possui papel decisivo tambm na excreo dos produtos
inservveis clula (p.ex.: CO2, NH3 etc.).
No obstante, os seres unicelulares
tambm possuem certa semelhana a este modelo, uma vez que vrios protozorios possuem uma entrada diferenciada. Os processos de
fagocitose e pinocitose e os vaclos digestivos
so formas primitivas desses organismos unicelulares realizarem a degradao de alimentos
em molculas mais simples adequadas ao metabolismo intracelular. O fato de os organismos unicelulares liberarem seus catablitos
diretamente para o meio extracelular leva a
uma saturao do meio ambiente em que crescem modificando as propriedades qumicas do
meio podendo torn-lo insuportvel para a
manuteno da vida. o que acontece em um
meio de cultura de bactrias in vivo onde a
produo de cidos (principalmente o lctico)
leva morte das bactrias, caso no haja a
renovao do meio de cultura.
Os organismos multicelulares no podem livrar-se de seus catablitos da mesma
maneira, uma vez que a morte das clulas vizinhas compromete a vida o organismo como
um todo. Desta forma, surge a organizao de
um complexo sistema de digesto, transporte
de nutrientes e excreo realizados em tubos
celulares (veias, artrias, vasos linfticos, vias
respiratrias, tubo digestivo) e rgos anexos
especializados (estmago, fgado, rins, corao, pulmes) trabalhando integrados de maneira a preservar o equilbrio da composio
do meio extracelular dos tecidos (lquido intersticial) e, por conseguinte, do meio intracelular, evitando a morte celular. Em certas condies patolgicas onde se perde este eficaz
23
meio de comunicao celular, h problemas
graves para a manuteno da vida, podendo
levar leses irreversveis ou at a morte
(p.ex.: a produo de corpos cetnicos em excesso pelas clulas de pacientes diabticos; a
excreo de hidrognios em demasia durante a
fadiga muscular).
O alimento contm os mais variados
tipos de compostos macromoleculares que
precisam ser processados at um tamanho adequado para a sua absoro e aproveitamento
pelo organismo. A maioria dos alimentos sofre
um processo enzimtico no trato digestivo,
sendo que a sede de maior ao digestiva e
absoro ocorre no intestino delgado. Aliado a
essa ao enzimtica, a ao mecnica exercida pelos msculos lisos do estmago e intestino, promove a homogeneizao do bolo alimentar, facilitando a ao enzimtica. Em captulos posteriores, sero abordados os aspectos mais especficos deste processo, cabendo,
agora, apenas uma abordagem introdutria do
assunto.
Na boca ocorre o incio do processo digestivo com a amilase salivar (ptialina ou
(14) glicosidase) degradando o amido e o
glicognio, quando presente (uma vez que
desaparece rapidamente dos alimentos aps o
abate dos animais). Este processo incompleto
devido o pouco tempo que o alimento passa na
boca e a amilase ser incapaz de quebrar as
ligaes (16) existentes entre as molculas
de glicose. No estmago, a ao do HCl inativa a amilase salivar, havendo o trmino da
digesto no intestino delgado, sob a ao das
enzimas do suco pancretico, pela ao da
amilase pancretica. Os demais carboidratos
sero degradados por enzimas especficas (as
dissacaridases e oligossacaridases) presentes
no suco entrico liberado pelas clulas de
Brunner e Liberkhn, no intestino delgado. Na
verdade, devemos considerar a digesto na
boca apenas como uma possibilidade e no
como um fato pois seriam necessrios cerca de
seis minutos para digerir um grama de amido
na boca, o que tornaria a alimentao um processo extremamente lento.
As protenas comeam a ser digeridas
no estmago atravs de um processo qumicocorrosivo no estmago pela ao do HCl gstrico e tambm enzimtico pela pepsina gstriRicardo Vieira
24
Um resumo das aes digestivas pode
ser observado na Tabela 2-5.
Para ter uma viso geral do processo de
absoro dos nutrientes, observe os itens abaixo:
Carboidratos:
so absorvidos somente na forma de monossacardeos;
glicose, galactose e frutose so absorvidos
mediante mecanismos especficos de
transporte ativo (contra gradiente de concentrao, com gasto de ATP);
h absoro preferencial de glicose pelas
clulas intestinais;
so drenados pelo sistema porta heptico;
aps a absoro, o fgado libera parte da
glicose para a corrente sangnea e promove a converso da glicose em excesso em
glicognio;
a glicose sangnea corresponde ao principal carboidrato circulante. Alguns outros
monossacardeos so identificado em
quantidades muito pequenas, sendo resultantes de reaes tautomricas espontneas
da molcula da glicose.
Protenas:
so absorvidos na forma de dipeptdeos e
de aminocidos;
os dipeptdeos so absorvidos mais rapidamente que os aminocidos, devido existncia de mecanismos especiais de
transporte;
na superfcie da mucosa intestinal se localiza um grande nmero de mecanismos especficos de absoro para vinte diferentes
aminocidos;
so drenados pelo sistema porta heptico;
fgado procede a sntese das inmeras protenas plasmticas a partir dos aminocidos
absorvidos na alimentao. Os aminocidos no-essenciais so sintetizados pelo fgado, o que faz com que o excesso da alimentao seja convertido a uria (pela retirada do grupamento amino) e haja o aproveitamento da cadeia carbonada em processos metablicos como a neoglicognese
ou o metabolismo energtico.
Ricardo Vieira
cidos graxos:
aps a digesto, as micelas so absorvidas
pela mucosa intestinal indo a parte correspondente aos cidos biliares para a circulao porta heptica;
os cidos graxos e os monoglicerdeos so
absorvidos pela clula intestinal por difuso;
os cidos graxos de cadeia longa (acima de
16 carbonos) so reesterificados (num processo denominado sntese "de novo") para
formar novos tri-acil-gliceris, que se fixam a apoliprotenas dando origem aos
quilomcrons;
essas lipoprotenas (quilomcrons) so drenados para o sistema linftico e transportadas para o duto torcico;
uma vez que no vo ao fgado, h a deposio dos tri-acil-gliceris reesterificados
nos adipcitos s sendo degradados no
processo metablico energtico quando
houver a carncia de carboidratos ou o
aumento da necessidade energtica;
25
Ricardo Vieira
EXERCCIOS
1. Qual a relao ecolgica entre produtores,
consumidores e decompositores? O que isso diz respeito ao estudo dos alimentos?
2. Comente sobre a classificao dos alimentos do ponto de vista biolgico.
3. Discuta a necessidade diria de alimentos
em relao aparecimento de doenas nutricionais.
4. Qual a importncia do ndice de Massa
Corprea (IMC) no estudo de patologias
nutricionais?
5. Comente sobre doenas alm da desnutrio e obesidade que podem estar relacionadas com os alimentos.
6. Conceitue taxa basal metablica e efeito
termognico dos alimentos.
7. Faa um levantamento de sua alimentao
diria mdia e relacione com sua atividade
fsica e IMC.
8. Qual a importncia das fibras na alimentao?
9. Qual a importncia do estudo da composio dos alimentos industrializados para a
manuteno da sade humana?
10. Faa um resumo das principais aes de
digesto e absoro dos alimentos.
26
Gastro-Intestinal Research FoundationGIRF):
http://homepage.interaccess.com/~ring/girf/girf.html
Vitaminas e Minerais:
http://www.cyber-north.com/vitamins/
Captulo 3
cidos Nuclicos
Figura 3-1 - Experimento de Griffth (1928). cColnias lisas (S) de D. pneumoniae induzem a morte d de
um camundongo por pneumonia, enquanto que colnias rugosas (R) no o fazem e. Quando submetido ao
calor, colnias R tornam-se inertes f, porm quando
misturas a colnias S mortas pelo calor, transformamse em letais g.
28
sultados de trabalhos de Edwin Chargaff
(composio percentual idntica de Adenina e
Timina, Citosina e Guanina no DNA e diferente no RNA), Linus Carl Pauling (estrutura
molecular e comprimento de ligao de bases
nitrogenadas) e de Rosalind Franklin e Maurice Wilkins (difrao de raios-X mostrando a
natureza de dupla fita do DNA). O modelo
favorece concluses sobre o mecanismo como
o DNA se duplica e, ainda mais, como coordena a sntese protica a partir da sntese de
RNA a partir de um molde de DNA e a combinao de trs nucleotdeos (cdon) para a
decodificao deste cdigo gentico nos ribossomos.
29
Nucleotdeos
Todas as clulas dos seres vivos possuem DNA e RNA, com exceo dos vrus
que no so organismos celulares e possuem
DNA ou RNA em sua composio, nunca os
dois ao mesmo tempo (os PRIONS ainda
precisam ter melhor caracterizada sua relao
com os seres vivos, mas no possuem cidos
nuclicos em sua composio, sendo somente
protenas)
O DNA difere do RNA em vrios aspectos que vo desde a composio molecular, forma estrutural, at a funo e mecanismo de sntese, possuindo, entretanto, vrias
semelhanas que os torna molculas irms e
de extrema importncia para o estudo da bioqumica celular, por serem responsveis por
todas as caractersticas da clula e as molculas alvo da evoluo.
Quimicamente, os cidos nuclicos
so polmeros de nucleotdeos unidos por
ligaes do tipo fosfo-di-ster, formando uma
molcula polimrica.
Nucleotdeos so as unidades bsicas
dos cidos nuclicos e so formados, sempre,
por uma molcula de pentose a qual se liga a
uma molcula de base nitrogenada e uma
molcula de fosfato em pontos especficos e
de maneira covalente, adquirindo forma estrutural helicoidal prpria e caracterstica do tipo
de molcula. Embora faam parte da composio dos cidos nuclicos, os nucleotdeos
so encontrados na forma livre dentro da clula, sendo responsveis por funes no relacionadas diretamente com a reproduo celular, como o caso do ATP (Figura 3-4). A
unio das bases nitrogenadas pentose, somente, forma um nucleosdeo, ou seja, um
nucleotdeo desprovido e fosfato.
A pentose (monossacardeo de 5 carbonos) pode ser a ribose (no RNA) ou a desoxirribose (no DNA) ambas em sua forma
cclica pentagonal de furanose. Em um nucleotdeo, convenciona-se identificar os carbonos
da pentose acrescentando o apstrofo para
diferencia-lo dos carbonos da base nitrogenada, desta forma o C1', C2', C3' e C5' esto
aptos realizar ligaes qumicas atravs das
hidroxilas (-OH) livres nestes carbonos, com
exceo da desoxirribose que no possui hidroxila no C2' (Figura 3-5).
Ricardo Vieira
Entretanto, comum observar modificaes na estrutura molecular das bases nitrogenadas aps o processo de sntese do DNA
ou do RNA j haverem sido concludo, o que
pode levar, ocasionalmente, presena de
uma pseudotimina no RNA quando h a metilao no C5 da uracila e de pseudo-uracila no
DNA por demetilao da timina (compare as
diferenas da estrutura dessas bases nitrogenadas na Figura 3-6). Essas modificaes podem ter funo na estrutura da molcula (como o caso da pseudotimina que caracteriza
uma das regies do RNAt) ou ter reflexos
negativos para a vida da clula (como no caso
da metilao de timina em regies codificadoras de protenas na molcula de DNA).
A ligao entre os nucleotdeos ocorre,
portanto, atravs de ligaes covalentes extremamente fortes tendo um grupamento fosfato como ligante, as ligaes fosfo-di-ster
(Figura 3-7). Essas ligaes garantem um
"esqueleto" covalente rgido para a molcula
de cido nuclico e que s clivado sob ao
de enzimas hidrolticas digestivas denominadas de nucleases (DNase e RNase).
A ligao entre as molculas de nucleotdeos que permite a polimerizao e a estru-
30
tura final do DNA e RNA ocorre entre a hidroxila do C3' de um nucleotdeo com o
fosfato hidroxila do C5' do outro nucleotdeo,
de forma que sempre o C5' do primeiro
nucleotdeo ter um fosfato livre, enquanto
que o ltimo nucleotdeo adicionado ter
sempre -OH livre no C3'. Esta uniformidade
na configurao da cadeia polimrica de
nucleotdeos, tanto de DNA quanto de RNA,
confere uma direo molcula onde
convencionado que o primeiro nucleotdeo de
uma determinada seqncia o que tem a
extremidade 5' livre, enquanto que o ltimo
ter a extremidade 3' livre.
Como todas as molculas de cidos
nuclicos so formadas por nucleotdeos polimerizados e como somente a base nitrogenada podem variar, o fosfato e a pentose no
so descritos em representaes simplificadas
das seqncias de RNA e DNA (Figura 3-8).
A molcula de DNA, por ser em dupla fita,
possui as duas cadeias orientadas em sentido
antiparalelo, ou seja, uma cadeia est no sentido 5' 3', enquanto que a outra est no sentido 3' 5'. A molcula de RNA, em fita
simples, possui somente orientao 5'3'.
Detalhes da estrutura de DNA e RNA sero
abordados a seguir.
31
atravs de duas pontes de hidrognio, enquanto que citosina lia-se somente com guanina
atravs de trs pontes de hidrognio. Qualquer
outro tipo de ligao entre bases nitrogenadas
impossvel e traria instabilidade estrutural
molcula (Figuras 3-9 e 3-10).
Seqncia de DNA
5-AAGTCCGTGCTGCGTGCGTGATGAATG-3
3-TTCAGGCACGACGCACGCACTACTTAC-5
Seqncia de RNA
5-UUAGGGCAUUGUACAUCCCUUAAACCU-3
Figura 3-8 - Representao simplificada de uma seqncia de DNA e de RNA (oligonucleotdeo). Observe que a orientao das duas cadeias de nucleotdeos do DNA oposta entre si.
Ricardo Vieira
32
(Figuras 3-11). As seqncias de DNA onde
h muitas ligaes entre guanina e citosina
(GC) so mais resistentes, devido ao maior
nmero de pontes de hidrognio formadas.
A direo do eixo da dupla hlice
para a direita e em cada volta h cerca de
10pb (pb). Em conseqncia a esta conformao, h uma cavidade maior e uma outra menor na forma de um sulco na superfcie da
molcula, locais importantes de ligao com
protenas estabilizadoras ou de outras envolvidas na regulao da replicao do DNA.
O modelo molecular descrito por Watson & Crick corresponde ao mais abundante
tipo de DNA encontrado nas clulas, j=hoje
denominado de B-DNA. A forma A-DNA
mais condensada, observada em meio extremamente hipertnico e possui mais de 10pb
por volta completa da dupla hlice.
A forma Z-DNA est relacionada,
com a regulao da expresso gnica e que
apresenta a configurao em zig-zag com giro
da hlice para esquerda, ao contrrio das demais formas de DNA que apresenta o giro
para a direita.
Ricardo Vieira
33
dupla hlice em cadeia circular. Os parvovrus (p.ex.: da parvovirose canina) possuem
seu genoma na forma de uma cadeia simples
monofilamentar de DNA, enquanto que alguns vrus podem apresentar cadeia hbridas
DNA/RNA (p.ex.: o vrus da hepatite B). Os
retrovrus (p.ex.: o vrus do HIV) possuem em
seu genoma somente o RNA.
Quanto maior o nmero de genes,
maior o tamanho da cadeia de DNA, o que
faz com que o DNA dos eucariotas possuam
uma estrutura molecular complexa que permita a compresso dos genes dentro do ncleo
celular de forma organizada. A organizao
do DNA em procariotas e em mitocndrias e
cloroplastos possuem uma organizao mais
simples.
O genoma eucarioto
Figura 3-11- Estrutura do DNA, segundo Watson &
Crick (1953). Uma volta completa possui cerca de
3,4nm e 10 pb; distncia entre as fitas de cerca de
2,0nm. A cavidade maior e menor so stios de ligao
a protenas estabilizadoras e da replicao.
A molcula de DNA contm as seqncias responsveis pela sntese das protenas e dos RNA ribossmico e transportador
que, junto com o RNA mensageiro (tambm
sintetizado a partir do DNA) so essenciais
para a sntese protica. Quanto mais complexo o organismo, mais adaptaes bioqumicas
ele possui o que corresponde a necessidade de
mais genes para expressar as caractersticas
genticas. A molcula de DNA torna-se cada
vez maior e tende a se enovelar para ser contida dentro do ncleo celular.
Na forma linear as duas fitas so livres
para rotao sobre seu prprio eixo o que favorece a um emaranhado de DNA que visvel ao microscpio ptico como a cromatina
nuclear. Quando mais condensada a colorao
da cromatina, mais compactado o DNA,
quanto mais frouxa a colorao, menos denso
o emaranhado molecular.
Protenas da classe das histonas desempenham papel fundamental na organizao dos cromossomos, promovendo o enovelamento da molcula de DNA em torno de
quatro tipos de histonas (H2A, H2B, H3 e
H4) repetidas duas vezes, formando um octmero onde a molcula de DNA se enrola cerca de duas vezes e meia (146pb) por sobre o
octmero de histonas, formando uma estrutura
na dimenso de 6 x 11nm denominada nucleosomo. Cada nucleossomo afastado de outro
atravs de um dmero de histonas H1 os quais
Ricardo Vieira
34
antes da migrao para as clulas filhas), gerando o aspecto caracterstico em forma de X.
Esses cromossomos metafsicos so
fotografados e, a partir do padro de bandas
que apresentam, so agrupados, par a par,
formando uma espcie de mapa cromossmico, denominado de caritipo (Figura 3-14).
Desta forma, os estudo do nmero de
cromossomos e as regies onde esto localizados os genes, permite a deteco de inmeras doenas de origem gentica, como a trisomia do cromossomo 23 (sndrome de
Down) ou a presena de translocaes de regies de um cromossomo para outro (p.ex.: a
transferncia de parte do cromossomo 9 para
o 22 na leucemia linfide aguda o cromossomo Filadlfia).
Ricardo Vieira
35
Anatomia do gene
Figura 3-13 Representao de cromossomo metafsico corado pelo Giemsa revelando um padro de bandas (bandas G) que individualizam cada cromossomo e
permite uma anlise do papel dos cromossomos na
biologia celular.
36
Cerca de 35pb antes do incio do gene h uma
seqncia do tipo TTGACA e na posio de
10pb antes do gene h a seqncia TATAAT
que so o ponto de acoplamento da RNA polimerase para o incio da sntese do RNAm
que dar origem, futuramente, protena, como ser descrito posteriormente. Essas seqncias so as mesmas para todos os tipos de
genes.
Na regio flanqueadora 3 (ou downstream rio abaixo), logo aps o trmino do
gene, existe uma regio rica em GC, seguida
de outra rica em AT, que vo possuir papel
fundamental para que a RNA polimerase encerre a sntese do RNAm correspondente quele gene, conforme ser mostrado posteriormente, ainda neste captulo.
Fazendo parte, ainda, do complexo de
regulao da expresso do gene, encontramos
regies muito afastadas do incio do gene que
exercem ao reguladora de sua expresso,
denominadas de enhancers (estimuladores).
A molcula de RNA
Existem trs tipos bsicos de RNA:
mensageiro (RNAm), transportador (RNAt) e
ribossmico (RNAr).
A forma estrutural do RNA de uma
fita simples em espiral que se arranja, na
maioria das vezes, formando pregas entre si,
em virtude de pontes de hidrognio ocorridas
entre as bases nitrogenadas dos nucleotdeos
da prpria cadeia. Estas pregas do a conformao e um grampo de cabelo (hairpins) s
regies onde elas ocorrem e so estruturas
caractersticas das molculas de RNAt e
RNAr (Figura 3-16).
Figura 3-15 Esquema de um gene eucariota. As zonas amarelas correspondem s regies flanqueadoras que contm as
regies promotoras -35 e 10 (na extremidade 5) e a regio de terminao com os stios GC e AT (na extremidade 3).
As regies codificadoras (xons) e as no codificadoras esto representadas em verde e vermelho, respectivamente.
Ricardo Vieira
37
O RNAt (transportador) realiza o
transporte dos aminocidos para a sntese
protica mediada pelo RNAm. Existem 20
tipos de RNAt (um para cada aminocido),
possuindo quatro domnios comuns: 1) o ponto de ligao com o aminocido que transporta, sempre a seqncia ACC na extremidade
3; 2) a ala D, com a presena do nucleotdeo diidrouridina (formado por hidroxilao
da uracila); 3) a ala T com a presena de
timina formada por metilao da uracila (chmada de ribotimidina); e 4) a ala do anticdon, que possui a seqncia que se ligar ao
RNAm no ribossomo durante a sntese protica (Figura 3-17). Na molcula de RNAt
observada a presena de outras bases modificadas como a pseudouridina () e, algumas
vezes, um mesmo tipo de RNAt pode apresentar ou C ou G em reas em que no h
formao de pregas, representado na estrutura
simplesmente como uma pirimidina (Y).
O RNAr (ribossmico) faz parte da
composio molecular dos ribossomos, local
da sntese protica, aonde se acopla o RNAm
e, posteriormente, os aminocidos. Possui
uma estrutura extremamente pregueada onde
se revelam domnios responsveis pela estrutura tridimensional final dos ribossomos (Figura 3-18).
38
metilguanosina, N-isopenteniladenina,
drouridina e ribotimidina.
dii-
39
tem a resistncia a antibiticos. So passados
de uma bactria a outra atravs do processo
de conjugao bacteriana, onde uma bacteriana emite uma espcie de tubo para a outra
bactria, transferindo seu plasmdio.
Os plasmdios so utilizados largamente em experimentos laboratoriais, como
vetores de pesquisas que manipulam o DNA
do plasmdio para aceitarem seqncias de
DNA de outros organismos. Desta forma, as
bactrias que aceitam esse plasmdio modificado podem duplicar o fragmento de DNA
inserido artificialmente o duplica-lo muitas
vezes fazendo com que um organismo que
antes no possua determinada seqncia de
DNA (a bactria) passe a expressar um novo
gentipo. Esses experimentos so denominados de clonagem bacteriana e foram desenvolvidos na dcada de 80, junto com a manipulao do genoma viral, sendo os primeiros
e bem sucedidos experimentos de engenharia
gentica que deram incio a uma era de grandes avanos na cincia, mas tambm de grandes preocupaes ticas que vo desde patente de seqncias de DNA at a clonagem
de seres humanos.
EXERCCIOS
1. O que so PRIONS?
2. Descreva a anatomia do gene eucarioto.
3. Quais as principais caractersticas estruturais das molculas de DNA e RNA?
4. No que consiste o DNA extra-genmico e
qual a sua importncia para os estudos de
biologia molecular?
REFERNCIAS DA INTERNET
Departamento de Bioqumica Mdica da UFRJ
http://www.bioqmed.ufrj.br/sonda/
Index of Genes on Human Chromossomes
http://wehih.wehi.edu.au/gdbreports/
Laboratrio Genomic de Anlise de DNA
http://www.genomic.com.br/
DNA na investigao criminal
http://www.laboratoriopasteur.com.br/
Ricardo Vieira
Captulo 4
Aminocidos e Protenas
s protenas so as molculas
orgnicas mais abundantes
nas clulas e correspondem a
cerca de 50% ou mais de seu
peso seco. So encontradas em todas as partes
de todas as clulas, tendo funes fundamentais na lgica celular. Em virtude desta importncia qualitativa e quantitativa, as protenas
tm sido largamente estudadas e seus segredos desvendados, no que diz respeito sua
sntese ou aproveitamento metablico.
As protenas so macromolculas de
alto peso molecular, polmeros de compostos
orgnicos simples, os -aminocidos. Nas
molculas proticas os aminocidos se ligam
covalentemente, formando longas cadeias no
ramificadas, atravs de ligaes peptdicas
envolvendo o radical amino (-NH2) de um
aminocido e o radical cido (-COOH) de um
outro, havendo a liberao de uma molcula
de gua durante a reao (Figura 4-1).
41
42
Figura 4-2 - Os aminocidos presentes nas protenas agrupados de acordo com a polaridade do grupamento R. A)
apolares com R = cadeia hidrocarbonada; B) apolares com R = anel aromtico; C) apolar com R contendo S; D)
apolar com R = H; E) polar no carregado com R contendo OH; F) polar no carregado com R = amida; G) polar
no carregado com SH; H) polar carregado positivamente (bases); I) polares carregados negativamente (cidos).
Ricardo Vieira
43
Tabela 4-2 - Principais caractersticas dos aminocidos relacionadas com suas funes.
Grupamento R
Aminocidos Smbolo Ceto- Glico- EssenNoPolar
gnico gnico
cial
essenCarregado Apolar
Nocial
carregado (-)
(+)
X
X
X
Alanina
Ala (A)
X
X
X
Arginina (1)
Arg (R)
X
X
X
Aspartato
Asp (B)
X
X
X
Asparagina
Asn (N)
X
X
X
Cistena
Cys (C)
X
X
X
Fenilalanina
Phe (F)
X
X
X
Glicina (2)
Gly (G)
X
X
X
Glutamato
Glu (Z)
X
X
X
Glutamina
Gln (Q)
X
X
X
Histidina
His (H)
(3)
X
X
X
X
Isoleucina
Ile (I)
X
X
X
Leucina
Leu (L)
X
X
X
Lisina
Lys (K)
X
X
X
Metionina
Met (M)
X
X
X
Prolina
Pro (P)
X
X
X
Serina
Ser (S)
X
X
X
Tirosina (4)
Tyr (Y)
X
X
X
X
Treonina (3)
Thr (T)
X
X
X
X
Triptofano (3)
Trp (W)
X
X
X
Valina
Val (V)
(1)
A arginina produzida no hepatcito, porm consumida em grande escala na sntese da uria, o que faz com
que seja classificada como essencial (pelo menos em crianas).
(2
) O R um hidrognio, o que faz com que o aminocido, como um todo, possua certa polaridade devido ao
grupamento funcional, uma vez que o grupamento R muito pequeno.
(3)
Aminocido glicocetognicos.
(4) A tirosina sintetizada no ser humano a partir da fenilalanina, um aminocido essencial
44
Figura 4-3 - Defeito na sntese ou controle das enzimas das vias metablicas de aminocidos podem levar a doenas
conhecidas como erros inatos do metabolismo. As setas pontilhadas indicam a existncia de mais de um passo metablico. As enzimas deficientes so: 1) fenilalanina-hidroxilase (ou co-fatores como a 5,6,7,8-tetraidropterina); 2) via de sntese do hormnio tiroidiano tiroxina ; 3) tirosinase; 4) homogentisato-dioxigenase; 5) via de sntese da melanina nos melancitos.
Ricardo Vieira
pK1 + pK2
2
45
Figura 4-5 - As trs formas carregadas dos aminocidos. A forma dipolar corresponde quela que contm um
plo positivo em NH3+ e outro negativo em COO- (a
carga final neutra) e corresponde nica forma existente no pHi. A forma catinica est presente em qualquer valor de pH abaixo do pHi, enquanto que a aninica tpica do aumento do valor do pH acima do valor do
pHi.
46
Se relacionarmos em um grfico o pH
em funo dos equivalentes de uma base adicionada a uma soluo cida de um aminocido, observaremos os pontos fundamentais no
comportamento cido-bsico dos aminocidos
(Figura 4-6).
47
pHi =
pKn + pK(n + 1)
2
48
Esta flexibilidade da molcula protica dada pelo C, confere uma grande versatilidade protena, o que faz de sua estrutura
tridimensional o ponto chave para sua funo.
Desta forma, a perda da configurao espacial
modifica completamente sua funo, podendo
at significar a destruio da protena.
Entretanto, esta flexibilidade limitada pela existncia de interaes qumicas entre as cadeias peptdicas e entre os grupamentos R dos resduos de aminocidos, seja intermolecular ou com outros compostos qumicos alheios composio original da protena.
Cada tipo de protena possui uma configurao tridimensional peculiar que determinada pela seqncia de aminocidos e
pelo grau de inclinao entre as ligaes qumicas (proporcionada pelos arranjos intermoleculares), que proporcionar pelo menos trs
nveis distintos de conformao estrutural:
1)
Estrutura primria: diz respeito
seqncia de aminocidos, dada pela seqncia de nucleotdeos da molcula de DNA responsvel por sua sntese. Esta seqncia deve
ser fundamentalmente mantida, sob o peso de
a protena perder sua funo, como o caso
da presena de valina ao invs de glutamato
no sexto aminocido da cadeia polipeptdica
da hemoglobina, que causa a doena gentica
denominada de anemia falciforme. A ausncia ou acrscimo de aminocidos estrutura
primria das protenas, tambm pode ser responsvel por modificao em sua eficcia
funcional.
2)
Estrutura secundria: relaciona a
forma que a cadeia polipeptdica assume no
espao, que pode ser de -hlice ou -folha
pregueada. A conformao em -hlice
conferida atravs do ngulo de toro que os
resduos de aminocidos apresentam na ligao peptdica, estabilizada por pontes de hidrognio entre o oxignio do grupamento
carboxila de um C e o H do grupamento
amino do outro aminocido (Figura 4-7).
Ricardo Vieira
49
Figura 4-9 Estrutura molecular da enzima da gliclise triose fosfato isomerase que apresenta regies
em -hlice (espirais em azul) e em -folha pregueada (setas vermelhas) (Adaptado de Devlin, T.M.,
1999).
H, ainda a formao de pontes de hidrognio, interaes eletrostticas e interaes fracas de van der Waals entre os grupamentos R
Ricardo Vieira
50
Figura 4-11 - Estrutura terciria final da mioglobina, uma protena formada por apenas uma
cadeia peptdica. (Adaptado de Devlin, T.M.,
1999).
molcula (p.ex.: colgeno e queratina). Algumas protenas tm os dois tipos de conformao, como o caso da miosina muscular e
do fibrinognio.
51
Protenas conjugadas
Muitas protenas apresentam em sua
composio, molculas no proticas ligadas
de forma covalente ou no aos aminocidos
das protenas, denominados, genericamente,
de grupo prosttico.
A hemoglobina (Figura 4-12) uma
protena conjugada cujo grupamento prosttico so quatro grupamentos hemes (Figura
4-14) que se ligam de forma no covalente s
cadeias peptdicas.
Ricardo Vieira
52
EXERCCIOS
1. Comente a classificao dos aminocidos
quanto a composio da cadeia R.
2. Conceitue aminocidos essenciais, noessenciais, glicognicos, cetognicos e
glicocetognicos.
3. O que so aminiocidos raros e nocodificados?
4. Qual a importncia dos aminocidos no
estudo dos erros inatos do metabolismo?
5. Comente sobre a propriedade cido-bsica
dos aminocidos.
6. Conceitue os vrios nveis de organizao
estrutural das protenas.
REFERNCIAS DA INTERNET
Fundamentos de Bioqumica:
www.fundamentosdebioquimica.hpg.com.br
Webioqumica
www.pucpr.br/disciplinas/bioquimica/Webio1.html
3D Images of proteins
www.imb-jena.de/IMAGE.html
Ricardo Vieira
Captulo 5
Enzimas
54
Algumas enzimas so formadas exclusivamente por aminocidos (p.ex.: a ribonuclease pancretica), porm, a maioria precisa
de um co-fator que funciona como uma espcie de calo molecular permitindo o encaixe
perfeito da enzima com o substrato e proporcionando a quebra da estrutura original da
molcula do substrato, iniciando a formao
do produto final da reao enzimtica (Figura
5-2).
Esses co-fatores podem ser ons metlicos (Fe++, Mn++, Zn++) ou compostos orgnicos denominados coenzimas (p.ex.: vitaminas hidrossolveis como a B6, B12, biotina0
etc.). Algumas enzimas utilizam um ou outro
tipo de co-fator ou ainda ambos, com a parte
protica denominada apoenzima e o complexo enzima/co-fator denominado holoenzima.
Em alguns casos, a ligao da enzima
com o co-fator no se faz de maneira permanente, porm quando esta ligao estvel, o
co-fator faz parte da enzima e denominada
de grupo prosttico.
me do substrato (p.ex.: amilase, urease, arginase) ou por nomes empricos (p.ex.: pepsina,
tripsina).
Normalmente, ao invs das denominaes empricas, as enzimas so denominadas
pela reao que executam sobre determiando
substrato, podendo, entretanto, ser denominada pelo nome comum quando o nome se mostrar extenso ou complexo de ser denominado.
Assim sendo, a enzima hexoquinase,
que catalisa a transferncia de um grupamento
fosfato do ATP para a glicose, denominada
de ATP-glicose transferase, porm mais
conhecida pelo primeiro nome.
Atualmente, existe uma classificao
de uso internacional para as enzimas, onde
so agrupadas em seis classes de acordo com
a reao que catalisa e cada classe subdividida em vrias subclasses. As classes e subclasses recebem nmeros que as identificam
e, desta maneira, permitem a classificao das
enzimas em grupos de ao enzimtica. Por
exemplo, a amilase, enzima que degrada o
amido, identificada pelo nmero 3.2.1 (classe 3 = grupo das hidrolases; primeira subclasse de nmero 2 = grupos das hidrolases que
quebram de carboidratos; segunda subclasse
de nmero 1 = as glicosidases).
Esta forma de classificao enzimtica
no tem grande popularidade em virtude da
dificuldade de fixao de todas as subclasses
existentes, porm a forma internacionalmente aceita e obrigatoriamente uma enzima emzima estudada em trabalhos cientficos deve
ser devidamente identificada por esta nomenclatura.
Entretanto, acima de forma complicada de identificao das enzimas, esta classificao internacional possui o metido de agrupar as enzimas em seus principais grupos e
facilitar o estudo dos diversos tipos de ao
enzimtica. Na tabela 5-1 esto citadas as
principais classes e subclasses das enzimas.
A seguir, esto descritas as classes de
enzimas e suas principais subclasses, especificando-se a reao a qual catalisa.
CLASSE 1 - Oxirredutases: catalisam reaes onde h troca de eltrons (oxi-reduo).
Desidrogenases: facilita a transferncia de
hidrognio. De uma maneira geral, desi-
55
drogenases OH =O e C-NH2 NH
possuem o NAD(P) como coenzima, enquanto que as C-C C=C so ligadas ao
FAD.
Desaturases: formao de ligao dupla
em cido graxo.
Hidroxilases: facilita a oxidao de dois
doadores com a incorporao de oxignio
em um dos doadores. O outro substrato
oxidado, sendo formado gua. O produto
final identificado pela incorporao de
uma OH em sua molcula.
Oxidases: h a reduo do oxignio molecular
Oxigenases: h a adio de oxignio em
uma molcula
Redutase: uma hidrogenase que reduz o
substrato.
Ricardo Vieira
56
57
58
59
por retirar um composto (o substrato) que pode ter outras vias metablicas importante e
produzir uma quantidade exagerada de um
composto (os produtos) que podem ser indesejveis clula. Logo, no basta que uma
enzima deixe de ser sintetizada para que ela
pare de fazer efeito, uma vez que continuamente regenerada. Portanto, um mecanismo
de regulao da ao enzimtica torna-se indispensvel para o sucesso da ao cataltica.
Em outras palavras, a enzima tem se saber
quando parar e quando comear a trabalhar.
Isto ocorre graas a vrios mecanismos de controle onde o principal uma diminuio (ou aumento) de sua atividade de acordo com o aumento (ou diminuio) de
compostos relacionados com o produto da
reao, o que estabelece um mecanismo de
feedback (retroalimentao, ou seja, informao a algo de trs por algo da frente) que pode
ser negativo ou positivo, de acordo com a
natureza da reao.
Por exemplo, o aumento da concentrao de ATP celular favorece a inibio da atividade da maioria das enzimas do metabolismo energtico atravs de um mecanismo de
feedback negativo o que impede que as molculas energticas produzam indefinidamente
ATP o que levaria destruio da clula pelo
excesso de calor liberado no processo. No entanto, no h a necessidade do longo processo
de sntese de mais enzimas para reiniciar o
processo em virtude de a queda de ATP ativar
as enzimas do metabolismo energtico induzindo a produo de mais ATP (esse processo
denominado de regulao alostrica e ser
melhor detalhado ainda neste captulo).
Mecanismos de ao enzimtica
Vrios mecanismos para a reao enzimtica so propostos a partir da natureza
qumica dos substratos e cada reao enzimtica possui uma peculiaridade que a torna nica. Entretanto, podemos agrupar os mecanismos de reao enzimtica em trs mecanismos principais que abrangem a maioria das
reaes enzimticas. So eles:
Ricardo Vieira
a)
Catlise cido-bsica:
Utiliza os ons H+ (catlise cida) ou
OH (catlise bsica) da gua, ou a propriedade cido-bsica de alguns aminocidos, para
promover a formao de um intermedirio
entre os substratos e os produtos que se quebra rapidamente impedindo o retorno forma
de substrato (Figura 5-5).
60
Figura 5-5 Modelo de catlise cido-bsica de converso de uma cetona em um enol. A) a reao no catalisada ocorre espontaneamente somente com alta energia de ativao; B) modelo de catlise cida com o grupamento cido
representado por A-H ligado ao stio ativo da enzima (curvas sinuosas em cinza); C) modelo de catlise bsica onde :B
o grupamento bsico ligado enzima. Tanto em B quanto em C, h o envolvimento do H+ da gua que esteqiometricamente regenerada ao final (OH- + H+) assim como a enzima em sua configurao original cida ou bsica. Observe
que H a formao de um composto traasnitrio onde o substrato est ligado por ponte de hidrognio enzima. (Adaptado de Voet & Voet, 2000).
Ricardo Vieira
61
b)
Figura 5-6 Catlise covalente. A) reao de descarboxilao espontnea no catalisada de oxalacetato em acetona;
B) pormenorizao dos passos da reao catalisada enzimaticamente, onde os diversos hbridos de ressonncia
formados permitem a ligao covalente do substrato com a
enzima (3) e a total regenerao da enzima, quebrando a
ligao covalente e liberando o produto (8). Note que h
sada e entrada de ons H+ e OH- (1, 3, 5 e 7) resultantes da
ao enzimtica.
Ricardo Vieira
Esta interao favorece uma maior estabilidade eletrosttica, o que permite que a
reao ocorra com menor necessidade energtica para atingir o estado de transio.
O papel desses ons metlicos semelhante ao on hidrognio nas reaes enzimticas, ligando-se a grupos carregados negativamente (p.ex.: a OH da H2O) e transferindo-os para o substrato (mecanismo que lembra a catlise cida). Porm, os ons metlicos
so mais eficazes por que podem estar presentes em concentrao maior que os H+ sem
modificar o pH, alm do que podem possuir
carga positiva maior que +1, favorecendo
uma reao mais eficaz.
Um mecanismo clssico por catlise
por on metlico a hidratao de CO2 em
bicarbonato (HCO3-) mediada pela anidrase
carbnica (Figura 5-7). A reao no catalisada forma cido carbnico somente em altas
concentraes de CO2 o que acarreta a necessidade de altas condies de presso, incompatvel com o ambiente celular. Entretanto, a
anidrase carbnica possui um on Zn+2 em seu
stio ativo que permite a transferncia de OH
para o substrato (CO2) favorecendo a formao do bicarbonato e liberando o H+ para o
meio.
62
63
Cintica enzimtica
Como j percebemos, a velocidade da
reao no proporcional a existncia de um
equilbrio de reao favorvel, ou seja, a formao de produtos em nveis de energia livre
(G) mais baixos que os substratos. A diminuio da energia de ativao (GAt) o principal efeito da ao enzimtica. A velocidade
da reao est atrelada, portanto, no a um
valor negativo alto de G, mas uma menor
variao de GAt, como observado na reao enzimtica.
Qualquer reao qumica tem sua velocidade aumentada pelo aumento da concentrao dos reagentes. Nas reaes catalisadas
por enzimas, um aumento da concentrao do
substrato tambm aumenta a velocidade de
reao, mas somente at um determinado ponto que corresponde a um valor da concentrao do substrato em que a capacidade cataltica da enzima est no mximo e a reao atinge, portanto, sua velocidade mxima, no aumentando mesmo que se aumente a concentrao do substrato (Figura 5-8).
Na prtica, isto acontece quando existe mais enzima disponvel que substrato, ou
seja, quando a concentrao da enzima est
saturada em relao ao substrato.
Quando os substratos esto em concentrao bastante inferior a da enzima, h a
predominncia da forma livre da enzima uma
vez que poucas molculas de enzimas so necessrias para as poucas molculas de substrato.
H a um aumento da velocidade da reao com o aumento da concentrao do substrato devido ainda haver enzima disponvel
para a catlise. Isto, entretanto, ocorre at um
determinado ponto onde h a equivalncia
entre a concentrao da enzima e do substrato, o ponto de saturao da enzima. Na verdade, a saturao da enzima no ocorre quando
h partes equivalentes entre o substrato e a
enzima, uma vez que h uma relao distinta
entre as concentraes necessrias de enzima
para degradar o substrato em uma unidade de
tempo, usualmente, um minuto.
Assim, algumas enzimas esto funcionando a pleno vapor quando existem, por exemplo, 3 moles de enzima para cada trs moles de substratos ou, ainda, 5 moles de substratos para cada mol de enzima. Na Figura 5-9
est representada a variao da velocidade da
reao enzimtica em funo da concentrao
do substrato, para uma enzima hipottica que
trabalhe em concentraes fictcias de 1 mol
de enzima degradando 1 mol de substrato em
um minuto.
Como pode ser observado, quando h
a saturao da enzima, a adio de mais substrato no promove o aumento da reao, no
entanto, a enzima poder degradar todo o
substrato adicionado, desde que tenha tempo
disponvel para isso. Esta observao acresRicardo Vieira
64
Figura 5-9 Representao esquemtica da velocidade de reao enzimtica. As figuras de A a E representam a adio crescente de substrato (crculo) em relao a uma concentrao constante de enzima (meia
lua) formando um complexo enzima substrato e liberao do produto (cruz). A partir de C, a enzima encontra-se saturada e a velocidade mxima de 3 moles/mim no se altera.
Na Figura 5-8, note que existe um valor de concentrao de substrato [S] em que
atingida a velocidade mxima (Vmx). Obviamente a concentrao da enzima [E] permanece constante durante a anlise, pois se aumentar [E], a tal ponto de ela no se encontrar
saturada, a velocidade da reao tambm aumentar atingindo a velocidade mxima em
outro patamar de [S].
Ainda no grfico da figura 5-8, observa-se que existe um determinado valor da
concentrao do substrato que necessrio
para se atingir a metade da velocidade mxima (1/2Vmx). Este valor de [S] denominado
de Km, a constante de Michaelis-Menten,
casal de pesquisadores que determinou a expresso quantitativa da relao de [S] e a velocidade da reao enzimtica, atravs da equao geral:
Vo =
Vmx [S]
KM + [S]
Onde:
Vo = velocidade inicial de uma reao enzimtica
Vmx = velocidade mxima da reao
Figura 5-10 O grfico do duplo-recproco de Linewaver-Burk onde so determinados pontos importantes no estudo da cintica enzimtica. Os valores de
1/VMx so visualizados na interseo no eixo da 1/Vo,
enquanto que o valor de -1/KM corresponde interseo com o eixo de 1/[S]. Como correspondem a valores inversos, quanto maior o KM, mais para a esquerda
o ponto de interseo e quanto menor a velocidade
mxima, mais abaixo o ponto de interseo, e viveversa.
65
Regulao enzimtica
Como na clula existe um verdadeiro
emaranhado de reaes qumicas onde os
produtos de uma reao so os substratos de
outras, muito comum que uma das enzimas
de uma via metablica determine a velocidade
de todo o processo diminuindo a velocidade
da reao, limitando a velocidade para o conjunto de reaes seguidas. Este fator provoca
o cmulo do substrato e o seu deslocamento
para outras vias metablicas acessrias.
A atividade enzimtica tambm pode
sofrer alteraes com a variao do pH intracelular. Todas as enzimas possuem um pH
timo de atuao onde qualquer variao para
mais ou menos, modifica a eficcia da reao
enzimtica. Isto se deve pelo fato de haver
aminocidos cujo radicais R funcionam como
cidos ou bases, doando ou cedendo prtons
para o meio. Em vista disso, h a alterao da
carga no stio cataltico ou na conformao
tridimensional da protena de maneira que
impea a ligao de forma eficaz com o substrato. Variaes na temperatura tambm diminuem a eficcia da reao enzimtica por
modificar o equilbrio qumico.
Variaes extremas de pH (geralmente
abaixo de 4,0 e acima de 8,0) e temperatura
(acima de 56oC) in vitro terminam por desnaturar de maneira irreversvel as enzimas
Existem vrios tipos de enzimas de
regulao, dos quais enfatizaremos trs:
a)
Enzimas alostricas:
Neste importante tipo de regulao, h
a formao de uma ligao no-covalente e
reversvel da enzima com o seu produto ou
(mais freqentemente) com um dos produtos
das reaes seguintes, levando a desestabilizao da sua forma tridimensional o que impede a regenerao para consumir nova molcula do substrato.
Na molcula da enzima h um ponto
especial para o encaixe com esse metablito
regulador, denominado stio de regulao ou
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Inibidores no-competitivos:
Reagem com a enzima livre, mas no
no stio cataltico. o tipo clssico de regulao alostrica.
Como a ligao do inibidor no se faz
no stio cataltico, no h diminuio da inibio com o aumento da concentrao de substrato como na inibio competitiva. Logo, a
nica maneira de reverter a inibio a retirada do inibidor da molcula da enzima, o que
feito, geralmente, por ao de outra enzima.
Como a queda na velocidade da reao ocorre independentemente da concentrao do substrato, o KM sofre mnima ou nenhuma variao, o que indica que o aumento
da inclinao do grfico de Linewaver-Burk
(queda na velocidade) induzido pela queda
da Vmx, Na Figura 5-12 esto descritas as
implicaes de uma inibio no competitiva
na anlise grfica da cintica enzimtica.
Alguns tipos de inibidores no competitivos podem combinar-se reversivelmente
com o complexo enzima-substrato ao invs do
substrato, evitando a formao de produtos.
Este tipo de inibio freqentemente denominada de incompetitiva e obedece aos
mesmos princpios cinticos da inibio nocompetitiva.
c)
Inibidores irreversveis:
Promovem uma alterao permanente,
qumica, de algum grupo funcional essencial
na molcula da enzima. Muitos medicamentos
modernos so inibidores irreversveis de uma
Ricardo Vieira
68
Figura 5-12 O efeito de inibidores nocompetitivos na anlise grfica da cintica enzimtica. A) devido ao impedimento no stio cataltico, a
enzima inibida no pode atingir a velocidade mxima e um aumento de substrato no reverte a inibio. B) a queda da Vmx a causa do aumento da
inclinao do grfico enquanto que o valor de KM
apresenta pouco ou nenhum aumento.
EXERCCIOS
1. Descreva a estrutura molecular bsica das
protenas.
2. Conceitue isoenzimas, co-enzimas e holoenzimas.
3. No que se baseia a classificao das enzimas?
4. Quais as principais classes enzimticas?
5. Por que as enzimas so catalizadores to
eficazes?
6. Descreva os mecanismos de ao enzimtica.
7. Comente sobre alguns fatores que aceleram a ao enzimtica.
8. Quais as caractersticas bsicas da cintica
enzimtica?
9. Quais os mecanismos de regulao enzimtica?
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69
3D Images of proteins
www.imb-jena.de/IMAGE.html
Ricardo Vieira
Captulo 6
Carboidratos
Figura 6-2 - Os
carboidratos so
as biomolculas
energticas
que
garantem a reciclagem do carbono na biosfera. Na
figura est representada a participao de mitocndrias e cloroplastos na reciclagem
do carbono.
71
Os monossacardeos
So os carboidratos mais simples.
Possuem de 3 a 8 carbonos, sendo denominado, respectivamente, trioses, tetroses, pentoses, hexoses, heptoses e octoses.
Tm uma nica unidade cetnica ou
aldedica, possuindo pelo menos um tomo de
carbono assimtrico (C*) existindo, portanto,
formas estereoisomricas, com exceo da dihidrxi-cetona, que no possui C* (ver Figura
6-1).
Os C* possibilitam a existncia de ismeros pticos e caracterizam a regio da
molcula denominada centro quiral, do latim
quiros = mo, em referncia a conformao
isomrica semelhante a duas mos que no se
superpe mas so idnticas (Figura 6-3).
Os monossacardeos possuem, portanto, inmeros ismeros estruturais e pticos,
com os quais compartilham a prioridade nos
processos bioenergticos. Como todo composto orgnico que possui carbono assimtrico, o nmero de ismeros pticos determinado por 2n (n= nmero de C* da molcula).
A glicose (como todas as hexoses) possui 16
ismeros pticos devido possuir 4 carbonos
assimtricos, logo 24 = 16.
Este grande nmero de ismeros leva
a ocorrncia de uma mistura racmica quando
os carboidratos encontram-se dissolvidos em
Ricardo Vieira
72
Figura 6-3 - A glicose, como todos os monossacardeos, possui ismeros pticos devido a presena carbonos assimtricos.
73
Figura 6-8 - A frutose em glicose convertida por tautomeria entre o C1 e o C2. A reao reversvel e justifica o poder redutor das cetoses.
Ricardo Vieira
Dissacardeos
So formados por dois monossacardeos unidos por ligao covalente (ligao
glicosdica). A ligao glicosdica ocorre entre as hidroxilas do C1 de um monossacardo
com qualquer um outro carbono do outro monossacardeo.
74
Esta ligao pode ocorrer entre carbonos que estejam no mesmo plano espacial (cis
ou ) ou entre carbonos em diferentes planos
(trans ou ).
Existem vrios dissacardeos presentes
na alimentao, como, por exemplo:
Trealose
= glicose + glicose (11);
Celobiose = -glicose + -glicose (14);
Maltose
= glicose + glicose (14)
presente no malte.
Iso-maltose = ismero (16) da maltose
(subproduto da digesto do
amido e glicognio);
Lactose
= glicose + galactose (14) o principal carboidrato do
leite;
Sacarose
= glicose + frutose ( 12), a
forma mais comum de acar,
obtida da cana-de-acar, beterraba etc.
Os dissacardeos so importantes fontes de carboidratos na alimentao, como o
caso da lactose que o principal carboidrato
da dieta dos mamferos na fase de amamentao. Posteriormente, a maioria dos animais
perde a capacidade de degradar a lactose devido queda na produo intestinal da enzima
que a degrada, a lactase (em humanos, isto
ocorre, freqentemente, na velhice).
Figura 6-9 - Os monossacardeos apresentam vrios ismeros pticos devido a presena
de centros quirais devido a seus
carbonos assimtricos (marcados em vermelho).
Ricardo Vieira
A sacarose o dissacardeo mais consumido o principal composto de sabor adocicado adicionado alimentao humana.
A maltose o principal substrato para
a produo de cervejas fermentadas, como a
cerveja e destilados como o usque.
Na Figura 6-10 esto representadas as
estruturas das molculas dos principais dissacardeos.
Polissacardeos
Os polissacardeos ou glicanas so
polmeros de monossacardeos (hexoses) unidos por ligao glicosdicas na forma ou .
Alguns funcionam como reserva de carboidratos, outros atuam na morfologia celular.
75
nico), formados por unidades de acar alternadas, uma das quais contm o grupamento
cido. Estas estruturas, nas quais a poro
polissacardica predomina, so chamadas proteoglicanas.
A carapaa dos insetos contm quitina, um polmero de N-acetilglicosamina) que
d resistncia extrema ao exo-esqueleto (Figura 6-13).
76
Ricardo Vieira
As glicoprotenas possuem um ou
mais carboidrato em sua composio molecular sendo que a maioria das protenas da superfcie celular so glicoprotenas.
O ponto de ligao destas glicoprotenas pode ser o nitrognio ou o oxignio (N ou
O-ligadas).
Nas glicoprotenas N-ligadas, h uma
conformao estrutural nica, onde o monossacardeo liga-se com a protena em sua forma
para C1 e o aminocido de ligao sempre
a asparagina, seguida de um aminocido
qualquer (exceto prolina e aspartato) e, em
seguida, serina ou treonina. Esta ligao de
carboidratos e protenas to especfica ocorre
durante a sntese da protena, sendo que
quando termina a sntese protica, o carboidrato j est ligado.
As glicoprotenas O-ligadas so, quase
em sua totalidade, formadas por um dissacar-
77
EXERCCIOS
1. Qual a importncia metablica das formas
isomricas alfa e beta-glicopiranose?
2. Descreva a estrutura molecular do amido
e da celulose.
3. Qual a importncia dos dissacardeos para
o metabolismo de mamferos?
4. Comente sobre a funo dos principais
polissacardeos.
5. Qual a origem do poder redutor dos carboidratos e por que alguns no possuem
tal caracterstica qumica?
6. Descreva o processo de formao das
formas cclicas da glicose.
Ricardo Vieira
78
Gastroinfo:
www.gastroinfo.com.br/01_pancr.htm
Diabetes:
www.diabetic.com/education/pubs/dcctslid/sld048.htm
Ricardo Vieira
Captulo 7
Lipdios
Figura 7-1 Os lipdios exercem as mais variadas e importantes funes no metabolismo dos seres vivos.
80
Figura 7-2 Representao didtica de uma molcula de lipdio evidenciando a parte polar e a apolar
de sua molcula.
Classificao
Devido a grande variabilidade estrutural dos lipdios, muitos tipos de classificaes
so propostas dependendo do ponto de vista,
se qumico ou biolgico.
Adotaremos uma classificao didtica que atende a ambos ponto de vistas, que
agrupa os lipdios de acordo com a presena
ou no de cidos graxos em sua molcula.
Os lipdios que possuem cidos graxos (cidos carboxlicos com grande cadeia
carbonada) so saponificveis, uma vez que
reagem com bases fortes formando sabes.
So lineares em sua maioria, podendo ser
saturados ou insaturados. Possuem funo
energtica e estrutural. So os acilgliceris,
fosfolipdios, esfingolipdios e ceras.
Os lipdios que no possuem cidos
graxos em sua molcula, no so saponificveis e no so energticos. A maioria possui
funo estrutural ou especializada (hormnios, vitaminas, anti-oxidantes), desempenhando papel chave em vrias vias metablicas. So os terpenos, esterides e Eixosanides.
A seguir, passaremos a apresentar as
principais caractersticas de cada tipo de lipdios, a comear por aqueles que os caracterizam, os cidos graxos.
cidos Graxos
Os cidos graxos so cidos carboxlicos de cadeia longa que pode ser saturada ou
insaturada e quase sempre de nmero par de
carbonos e de cadeia no linear.
A grande freqncia de cido graxos
de nmero par de carbonos d-se ao fato da
sntese ocorrer por adio de acetil-CoA, que
possui dois carbonos (ver Captulo sobre metabolismo lipdico). A maioria dos cidos
graxos so lineares, porm existem alguns,
(principalmente de origem vegetal) que so
ramificados, geralmente com grupamentos
metil como ramificao (p.ex.: o fitol, componente da clorofila), mas so agrupados dentro de um grupo a parte denominados terpenos, que sero estudados ainda neste captulo.
Outros cidos graxos ramificados mais simples so sintetizados em animais, como o
81
82
R-COO-R + H2O
R-COOH + NaOH
R-COONa + H2O
R-CH=CH-COOH + H2 R-CH2-CH2-COOH
Acil-gliceris
So assim denominados por se tratarem de molculas compostas por grupamentos
acil (R-COO-) ligado ao glicerol.
So formados pela esterificao de
um, dois ou trs cidos graxos (saturados ou
insaturados, iguais ou no) com uma molcula
de glicerol, formando mono, di ou tri-acilglicerol, comumente denominados de mono,
di ou triglicerdeos, denominao vulgar e
quimicamente incorreta, mas de grande uso na
prtica clnica e laboratorial sendo a denominao utilizada neste captulo (Figura 7-5).
83
Fosfolipdios
Figura 7-5 - Os triglicerdeos so os principais acilgliceris. A) uma molcula de glicerol une-se a trs
molculas de cidos graxos atravs ligaes ster. B) O
triglicerdeo formado possui o primeiro e terceiro cido
graxo no mesmo plano, opostos ao segundo cido graxo.
o
caso
do
dipalmitoilfosfatidilcolina (a fosfatidilcolina cujos cidos graxos so o cido palmtico) que o
principal componente da substncia surfactante pulmonar que impede o colabamento (unio das superfcies internas) dos alvolos pulmonares. Esta substncia ajuda a diminuir,
tambm, o efeito fsico da presso dos gases
respiratrios sobre o alvolo. A produo desta substncia surfactante, entretanto encontrase em plena produo somente aps o nascimento, o que leva a crianas que nascem prematuramente, portanto com pouco surfactante
pulmonar, a desenvolverem um quadro srio
de insuficincia respiratria devido a dificuldade de encher os alvolos colabados. Esta
condio patolgica (conhecida como sndrome da angstia respiratria) tambm
pode se estabelecer em adultos sempre que
diminui a produo desse fosfolipdio.
Quando h a retirada de um dos cidos
graxos da molcula de um fosfolipdio, a molcula resultante (fosfolisolipdio) possui potente ao detergente e, realmente, destri a
membrana, provocando, obviamente, a morte
celular. Enzimas que possuem essa funo
(fosfolipase A2) esto presentes em venenos
de cobra e de abelhas, justificando a potente
ao ltica tecidual. Outras enzimas que retiram a cabea polar (fosfolipase C) geram diacil-gliceris que agem como segundo mensageiros de alguns hormnios. A ao dessas
enzimas ser melhor estudada no Captulo
sobre metabolismo lipdico.
84
Esfingolipdios
So formados por um cido graxo ligado a uma molcula de esfingosina (um aminolcool) e uma cabea polar X (Figura 77).
Figura 7-7 A molcula de esfingolipdio constituda pela esfingosina ligada a somente um cido graxo
e uma cabea polar X. O mais simples possui X = H
(ceramida) e a base dos demais esfingolipdios.
Ricardo Vieira
85
Ceras
So misturas lcoois graxos (com cadeia longa de 16 a 20C) e cidos graxos (com
cadeia de 16 a 30C). Possuem funo estrutura bem definida na formao de favos em
colmias de insetos sociais.
As baleias do tipo cachalote possuem
grande quantidade de ceras e outros lipdios
em uma enorme cavidade nasal especializada
que funciona como rgo flutuador, de acordo
com o fluxo sanguneo. Essa mistura de lipdios foi utilizada durante quase todo o sculo
XVII como produto de beleza capilar pela
sociedade europia e americana, conhecido
como espermacete de baleia, alm, claro,
da utilizao como combustvel juntamente
com a gordura do tecido adiposo da baleia.
Este fato levou quase extino esses animais
e ao conseqente declnio da economia (na
sociedade norte-americana, a indstria baleeira foi a principal base da economia durante
vrios anos) fato superado graas inveno
de mquinas movidas combustvel fssil.
Lipdios esterides
Tambm chamados de esteris, este
grupo de lipdio no saponificvel possui possuem como estrutura molecular bsica o ncleo-pentano-per-hidro-fenantreno (Figura
7-8). Possuem funo diversificada que vai
desde estrutural at a especializados hormnios e vitamina (Vitamina D).
O colesterol o principal representante deste grupo e sintetizado exclusivamente
em animais, possuindo funo importante na
formao da membrana celular e na sntese de
cidos biliares e hormnios esterides (p.ex.:
os hormnios sexuais). Um similar vegetal do
colesterol, o fitosterol, no absorvido durante a digesto no possuindo, portanto funo metablica ou patolgica em seres humanos.
O conhecimento do metabolismo das
lipoprotenas que transportam o colesterol
plasmtico corresponde em importante passo
no estudo da bioqumica aplicada a clinica de
pacientes com hipercolesterolemia, como ser
abordado com maiores detalhes no Captulo
sobre metabolismo lipdico.
Terpenos
So lipdios no saponificveis que
possuem como estrutura base a unidade isoprenide (Figura 7-9).
So, geralmente, de origem vegetal e
muitos possuem propriedades organolpticas
(sabor e odor agradvel) sendo utilizadas como especiarias na culinria mundial. Nos vegetais, esses terpenos possuem funo protetora contra microorganismos, uma vez que
no possuem sistema imunolgico.
As vitaminas E e K so terpenos de
funo bioqumica especializada (ver Capitulo 8 sobre Vitaminas).
Figura 7-9 Os terpenos constituem-se lipdios cujos principais representantes so de origem vegetal e possuem caractersticas organolpticas. O mirceno (folha de louro), limoneno
(limo) e zingibereno (gengibre), o ltex da borracha natural
(sis-poli-terpeno), cinamaldedo (canela), eugenol (cravo) e
elemicina (noz-moscada) so exemplos de terpenos ou derivados.
Ricardo Vieira
Eicosanides
So lipdios no saponificveis derivados do cido araquidnico de 20C (eicos
= vinte em grego) (Figura 7-10).
So importantes hormnios locais,
produzidos no local de uma reao inflamatria e responsveis pela potencializao do
sinal qumico da inflamao, no sendo disseminado pela corrente sangunea como os
hormnios clssicos. Outras funes primordiais so desempenhadas pelos diferentes tipos de eicosanides.
As prostaglandinas so produzidas
em quase todos os tecidos e esto envolvidas
nos processos de sono e viglia, resposta inflamatria e contrao dos msculos lisos do
tero.
As tromboxanas so produzidas pelas
plaquetas e atuam na diminuio do fluxo
sangneo e na formao de trombos (tampes celulares que impedem a hemorragia de
pequenos vasos).
86
Ricardo Vieira
87
EXERCCIOS
1. Que relevncia tem para o metabolismo
celular o fato de os lipdios serem insolveis em gua?
2. Quais as principais funes dos lipdios?
3. Comente sobre a classificao dos lipdios
e as principais caractersticas estruturais
de cada classe.
4. No que consiste a organizao micelar dos
lipdios e qual a importncia desta propriedade para o metabolismo celular?
Biobrs:
http://www.biobras.com.br
Ricardo Vieira
Captulo 8
Vitaminas
mentao bsica era de arroz sem casca e cozido excessivamente que destrua, por aquecimento, os resqucios de vitamina B1 do arroz sem casca, alm do peixe cru que comiam
em excesso e que possui enzimas que destroem a vitamina B1.
Atualmente, entretanto, as doenas carenciais vitamnicas so, na maioria das vezes, observaes raras visto que s se observam os sintomas caractersticos quando h a
hipovitaminose exclusiva da vitamina em
questo, como descrito acima. O mais comum
a verificao de sndrome de desnutrio
com sintomatologia complexa, resultante da
combinao de hipovitaminoses e carncia de
nutrientes como os carboidratos, lipdios e
protenas.
As vitaminas so encontradas na maioria dos vegetais (principalmente cereais, folhas verdes e legumes) e produtos animais
(principalmente leite, ovos e fgado), com exceo da vitamina B12 que produzida somente por microorganismos mas que armazenada em tecidos animais (especialmente no
fgado), encontrada, portanto, nesses alimentos alm de produtos da fermentao por microorganismos (como o iogurte, por exemplo).
So classificadas em hidro e lipossolveis, de acordo com sua caracterstica qumica de solubilidade. Exercem vrias funes
nos organismo, com uma alimentao contendo cereais, vegetais verdes, legumes, carne e
suco de fruta suficiente para suprir as necessidades dirias.
Muitas das vitaminas so termolbeis, (sensveis ao calor) e fotolbeis (sensveis a luz), o que torna necessrio que o alimento que as contm seja ingerido cru (o cozimento destri essas vitaminas) e deva ser
armazenado ao abrigo da luz. Os alimentos
industrializados que devem ser esterilizados
pelo calor precisam ser adicionados de quantidades significativas dessas vitaminas para
garantir sua qualidade nutricional.
87
2-cetoglutarato
piruvato
TPP +
complexo multienzimtico
TPP +
complexo multienzimtico
TPP +
transcetolase
succinil-CoA
acetil-CoA
gliceraldedo 3-P +
sedoheptulose 7-P
Vitaminas Hidrossolveis
Vitamina B1 (tiamina):
Durante a absoro intestinal, fosforilada a tiamina pirofosfato (TPP), sua forma
ativa, que vai ser grupamento prosttico das
enzimas 2-cetoglutarato desidrogenase e
transcetolase.
1.
2.
Vitamina B2 (riboflavina):
A forma ativa o FAD (flavina adenina nucleotdeo) e o FMN (flavina adenina
mononucleotdeo), que recebem e prtons e
eltrons, convertendo-se de formas oxidadas
(FAD+ e FMN+) para reduzida (FADH2 e
Ricardo Vieira
3.
Vitamina B3:
Presente nos alimentos na forma de
niacinamida (uma amida) e cido nicotnico
(ou niacina, um cido carboxlico), esta vitamina, que pode ser sintetizada a partir do aminocido triptofano, participa da molcula
de NAD (nicotinamida adenina dinucleotdeo), importantssimo transportador de prtons e eltrons no metabolismo energtico
mitocondrial (Figura 9-3).
foto e termoestvel e tem na pelagra a forma clssica de carncia alimentar
cuja expresso sintomatolgica de fcil reconhecimento pela presena de dermatite, denmcia e diarria. Pode ocorrer quando o alimento est contaminado com fungos produtores de micotoxinas que destroem a vitamina
B3.
Outras doenas onde o metabolismo
do triptofano comprometido se expressam
88
com a pelagra. o caso do erro inato do metabolismo conhecido como doena de Hartnup onde o triptofano (e outros aminocidos)
possem a absoro diminuda. Em algumas
tipos de cncer desenvolve-se a sndrome
carcinide onde h o aumento do catabolismo do triptofano, o que leva a pelagra.
Seu uso teraputico est associado ao
combate dos sintomas causados pela sua deficincia, sendo que o uso teraputico em outras manifestaes clnicas desaconselhado,
no devendo estar presente em doses acima de
200mg/dia nos "coquetis" de vitamina do
complexo B, pois a hipervitaminose est relacionada leso heptica e hiperpigmentao
da pele, alm de vasodilatao (que induz a
queda da presso arterial e faces rubras) e distrbios no metabolismo da glicose e cido rico, levando a hiperglicemia e hiperuricemia.
4.
cido pantotnico:
J foi denominada de vitamina B5, esta vitamina faz parte da molcula de coenzima
A (CoA) e responsvel por reaes de acetilao (advindo da o termo A da coenzima A)
(Figura 9-4).
Outra enzima que possui o cido pantotnico a protena transportadora de grupamentos acil na sntese de cidos graxos.
Entretanto, a CoA a forma mais abundante e
importante de ao dessa vitamina, sendo responsvel pelo transporte de gripos carbonados
(como o acetil e o acil) para o metabolismo
energtico.
Nenhuma doena carencial descrita,
porm foi relatada uma sndrome do p ardente descrita em pelotes da segunda grande
guerra cuja rao apresentava uma deficincia
em cido pantotnico. Uma forma sinttica da
vitamina, o mega-pantotenato, possui ao
antagonista diminuindo a ao do cido panRicardo Vieira
89
6.
5.
Vitamina B6:
encontrada nos alimentos em trs
formas: piridoxina (um lcool), piridoxal
(um aldedo) e piridoxamina (uma amina)
(Figura 9-4).
coenzima em reaes do metabolismo dos aminocidos, como por exemplo as
transaminaes.
uma vitamina foto e termolbil
(principalmente a forma de piridoxal) o que
faz com que haja perda considervel com o
cozimento dos alimentos. estvel em meio
cido, sendo inativada em pH alcalino.
rara a deficincia de vitamina B6,
no havendo uma doena carencial especfica.
Entretanto, so descritos sintomas de dermatite, glossite e neuropatias relacionadas a sua
deficincia em pacientes que fazendo uso de
certos quimioterpicos (ciclosserina, isoniazida e penicilamina).
Seu uso teraputico como antineurtico e na preveno de enjos. Existe a
probabilidade de reaes alrgicas quando se
faz uso de altas dosagens.
90
termo e fotolbil, sendo destruda
gradataivamente caso o alimento que a contenha fique exposto a ao do sol ou se cozido.
O escorbuto a manifestao patolgica clssica da carncia de vitamina C e caracteriza-se por sintomatologia relacioanda
dimunio da sntese de colgeno (de hemorragias a queda de cabelos e dentes).
usada, terapeuticamente, em altas
doses para prevenir a formao de radicais
livres, combatendo o envelhecimento celular.
O uso como antigripal no possui fundamento
cientfico, at o momento.
Normalmente, as doses acima de
400mg/dia j so compatveis com a excreo
urinria, porm doses de at 12 mg/dia so
prescritas em pacientes que deseja-se diminuir
a ao do estresse oxidativo dos radicais livres, como no caso de pacientes idosos.
No h evidncias acerca de sua toxicidade, porm o risco de clculos renais no
deve ser desprezado em virtude do oxalato ser
o produto final de seu metabolismo, quando
em excesso.
7.
8.
91
Vitaminas Lipossolveis
1.
9.
Biotina:
Tambm conhecida como vitamina
H, coenzima de enzimas carboxilases, descarboxilases e transcarboxilases transportando o CO2 para os substratos (Figura 9-9).
produzida em grande quantidade pela flora
bacteriana intestinal normal do ser humano, o
que torna sua carncia muito rara.
Piruvato
Biotina + CO2 +
piruvato carboxilase
Acetil-CoA
Biotina + CO2 +
acetil-CoA carboxilase
oxalacetato
malonil-CoA
Vitamina A:
Na retina, faz parte dos pigmentos
fotorreceptores rodopsina e iodopsina, que
modifica sua conformao espacial (de cis
para trans) que desencadeia o processo de
transmisso do impulso nervoso da viso.
encontrada na forma de retinol (um
lcool) e de retinal (um aldedo), tambm
chamadas de vitamina A1 (Figura 9-10). Existe, ianda, a forma de 3-desidro-retinol, denominada vitamina A2. uma vitamina termoestvel, porm fotolbil a luz UV e a exposio ao oxignio atmosfrico.
obtida, principalmente, na forma de
beta-carotenos, pigmentos amarelados de vegetais.
Vitamina D:
produzida no organismo a partir da
ativao pela UV do 7-desidrocolesterol formando o colecalciferol (vitamina D3) que
convertido em 1,25-di-hidrxi-colecalciferol
por enzimas hepticas e renais. Existe, ainda,
a forma de ergocalciferol (vitamina D2) que
formada aps a ativao ergosterol presente
em leveduras (Figura 9-11).
necessria em dosagens dirias de
400UI (1 UI = 0,025g) o que obtido facilmente por sntese endgena.
No uma vitamina verdadeira, e sim
funciona mais como um hormnio. Regula a
absoro do clcio intestinal e o equilbrio na
liberao de clcio e fsforo nos ossos.
termo e fotoestvel. Altas dosagens
induzem a uma hipercalcemia que pode ser
fatal ou favorecer processo de calcificao em
alguns rgos.
O raquitismo a principal consequncia de uma carncia nutricional de vitamina D (nos adultos, osteomalcia).
92
3.
Vitamina E (tocoferol):
Possui importante funo antioxidante protegendo os lipidios de membranas (Figura 9-12). termo e fotoestvel.
Em altas doses, utilizada terapeuticamente no tratamento da infertilidade agindo
como estimulante da espermatognese, apesar
de poder apresentar alguns efeitos colaterias
severos na coagulao sangnea ou na regulao hormonal.
Um efeito interessante do uso excessivo da vitamina E est relacionado com uma
parente competio na absoro das demais
vitaminas lipossolveis, o que pode induzir a
carncia delas.
4.
Vitamina K:
cofator necessrio para o processo
de coagulao sangnea como no processo
de carboxilao. produzida pelas bactrias
intestinais, sendo sua carncia muito rara eocasiona distrbios hemorrgicos, apesar de
altas doses no prevenir hemorragias e poder
induzir anemias hemolticas e kernicterus
(deposito de bilirrubina indireta no tecido
nervoso).
Na tabela 8-1, encontra-se um resumo
das principais informaes sobre as vitaminas.
Ricardo Vieira
93
Vitaminas
Forma ativa
B1
(Tiamina)
TiaminaPirofosfato
(TPP)
B2
(Riboflavina)
Componente
de FAD e
FMN
B3
(Nicotinamida)
Componente
do NAD e
NADP
Coenzima de
transferncia
de
hidrognio
B5
(cido
pantotnico)
Componente
da Co-A
Transferncia
de grupos acil
e acetil
B6
(Piridoxina)
Piridoxal
Fosfato
(PALP)
B12
(Cobalamina)
Coenzima
B12 (desoxiadenosilcobalamida)
BIOTINA
Biocitina ou
Biotinilisina
cido flico
Vitamina C
(cido
ascrbico)
A
(Retinol)
cido tetrahidroflico
(THF)
No precisa
ser ativado
para exercer
sua funo
11-cis-retinal
Coenzima na
descarboxilao oxidativa
de cetocidos
Coenzima de
transferncia
de hidrognio
Transaminao e descarboxilao de
aminocidos
Cofator de
reaes de
metilao
Transporte de
grupos CO2
em processos
carboxilantes
Transferncia
de grupos
formil (sntese de nucleotdeos)
Cofator em
reaes de
hidroxilao
Regula o
ciclo visual
atravs da
formao de
Rodopsina a
partir da
opsina
D
(Colecalciferol)
1,25 diidroxicolecalciferol
Regula a
concentrao
de clcio
plasmtico
E
(tocoferol)
No precisa
ser ativado
para exercer
sua funo
Antioxidante
protetor dos
lipdios insaturados
K
(2-metil1,4naftoquinoina)
No precisa
ser ativado
para exercer
sua funo
Necessidades
dirias
2 mg
3 mg
20 mg
10 mg
2 mg
5 g
0,25mg
Termolbil
Fotolbil
Doena carencial
Uso teraputico
Toxicidade
SIM
NO
Bri-bri;
Sndrome de
WernikKorsakoff
Melhoria
do estado
metablico
geral
No
relatada
NO
SIM
Rachaduras
na boca,
seborria.
No
relatada
NO
NO
Pelagra;
sndrome da
lngua negra
em ces
Melhoria
do estado
metablico
geral
Melhoria
do estado
metablico
geral
Levedura,
fgado, ovos,
carnes e leite
SIM
NO
Sndrome do
p ardente
Sementes e
gros de
cereais, carne, viscera,
ovos e leite
SIM
SIM
Dermatite,
glossite e
neuropatias
NO
SIM
Anemia perniciosa
NO
NO
NO
NO
Anorexia,
nusea, vmito, palidez,
depresso,
dermatite e
glossite
Anemia perniciosa
SIM
SIM
Escorbuto
NO
SIM
(luz
UV)
Cegueira
noturna,
xeroftalmia.
Antioxidante;
NO
NO
Raquitismo
osteomalcia.
Associada
ao tratamento da
doena
carencial
NO
NO
Desestabilizao da
membrana
celular
Antioxidante;
estimula a
espermatognese
NO
NO
Distrbios da
coagulao
Associada
ao tratamento da
doena
carencial
Fontes
Sementes e
gros de
cerais, vsceras, carne
magra e leite
Germe de
cerais, vsceras, carne
magra e leite
Carne, fgado
e gros de
cerais
Vsceras e
carnes
Sementes e
gros de
cereais, carne, vscera,
ovos e leite
0,4 mg
Levedura e
vegetais
verdes
60 mg
Frutas ctricas
5.000 UI
400 UI
30 UI
1 mg
Vegetais
folhosos,
flora bacteriana intestinal
Melhoria
do estado
metablico
geral
Antineurtico;
anti-enjos.
Leso
heptica;
hiperpigmentao
No
relatada
Reaes
alrgicas
Associada
ao tratamento da
doena
carencial
Associada
ao tratamento da
doena
carencial
No
relatada
Associada
ao tratamento da
doena
carencial
Antioxidante;
antigripal.
No
relatada
No
relatada
Aumenta
o risco de
clculos
renais
Reaes
neurolgicas e
sistmics
severas
Hipercalcemia,
calcificao de
rgos
moles,
clculos
renais
Distrbios
hormonais e na
coagulao
Anemia
hemoltica, kernixterus
Ricardo Vieira
94
EXERCCIOS
1. Comente sobre a importncia das vitaminas para o metabolismo celular.
2. Comente sobre as vitaminas que possuem
uma doena carencial bem caractersticas.
3. Quais as aes farmacolgicas das vitaminas? Comente sobre o seu efeito txico.
Para navegar na Internet
Fundamentos de Bioqumica:
www.fundamentosdebioquimica.hpg.com.br
Vitaminas e Minerais:
www.cyber-north.com/vitamins
Webioqumica
www.pucpr.br/disciplinas/bioquimica/Webio1.html
3D Images of proteins
www.imb-jena.de/IMAGE.html
Ricardo Vieira
Captulo 9
Fundamentos de Bioenergtica
No s o ATP exerce essa funo (Tabela 1), mas h uma prevalncia de reaes
intracelulares que o utilizam como a molcula
fornecedora de calor para as reaes endotrmicas, talvez por um preciosismo evolucionrio que preferiu utilizar uma moeda nica
para as transaes energticas celulares.
A molcula de ATP no , entretanto,
uma molcula de reserva energtica por excelncia, uma vez que perde muito rapidamente seu Pi, sendo, por isso, utilizada mais
em reaes que necessitem da liberao rpida de calor.
As melhores molculas de armazenamento real de energia so o amido, glicognio
e triglicerdeos que podem liberar a principal
molcula precursora da sntese do ATP, a
acetil-CoA (Figura 9-2). Esta molcula responsvel por iniciar o principal grupo de reaes bioqumicas que desencadearo a sntese
de ATP: o Ciclo de Krebs, com a cadeia
respiratria acoplada.
Muitas so as formas de se produzir
acetil-coA na clula, mas o metabolismo dos
carboidratos constitui a principal via, quando
a gliclise prossegue em aerobiose (em anae-
98
99
danosa ao organismo, o que faz que um animal que no se alimente por mais de duas
semanas morra por inanio.
Os animais hibernantes so exceo a
essa regra, pois os lipdios armazenados durante as estaes quentes, garantem a energia
e gua necessrias durante o inverno, sem
haver a ao danosa dos corpos cetnicos,
mas sim seu aproveitamento total no metabolismo energtico. O camelo que contm em
suas corcovas grandes depsitos de gordura
que garante gua e energia para as longas
travessias do deserto.
Os carboidratos (glicose) so a fonte
primria de energia dos neurnios. Em sua
ausncia, somente h a utilizao dos corpos
cetnicos, no havendo o metabolismo energtico de cidos graxos.
As protenas so utilizadas somente de
forma terciria para a produo de energia,
porm possuem inmeras funes biolgicas
que as fazem essenciais na alimentao, apesar de serem desmontadas em aminocidos
na digesto e sintetizadas, no fgado, em todas
as protenas plasmticas.
A utilizao de protenas no metabolismo energtico indica um certo desperdcio
de um substrato to diferenciado em uma funo bsica como a produo de energia. Isto
s se observa quando h extrema carncia
energtica na ausncia de glicose ou lipdios
disponveis para o metabolismo energtico ou
quando h intensa atividade fsica.
As molculas "altamente"
energticas
O ATP no a nica molcula capaz
de receber e liberar energia trmica para as
reaes bioqumicas. A condio primordial
para uma molcula ser considerada "altamente" energtica ter a capacidade de transferir
grupamentos qumicos durante reaes bioqumica, liberando a energia para o meio (reao exergnica) possibilitando que os substratos da reao absorva esta energia para ser
produzido os produtos (reao endergnica)
num acoplamento entre esses dois tipos de
reao.
Ricardo Vieira
100
As reaes enzimticas
As reaes que acontecem no meio intracelular possuem o auxlio indispensveis de
enzimas que no interferem na estrutura molecular dos produtos, mas possibilitam sua
rpida formao. Apesar de algumas molculas de RNA possurem propriedades enzimticas (ribozimas), as enzimas clssicas so,
quimicamente, protenas que possuem uma
estrutura tridimensional complementar a um
substrato especfico ajustando-se a ele em um
modelo chave-fechadura, permitindo a formao dos produtos com um gasto mnimo de
energia.
Este processo acontece pela formao
de um complexo enzima-substrato que permite que os substratos se encontrem de maneira
muito mais rpida e ordenada, diminuindo a
energia necessria para que ocorra a reao
(energia de ativao), liberando a enzima
intacta ao final da reao (para maiores detalhes ver Captulo 5 sobre enzimas).
GRUPO DE
TRANSFERNCIA
eltrons, hidrognio
101
Gliclise
A glicose o principal substrato para
as reaes energticas, sendo a gliclise o
principal processo de utilizao energtica da
glicose, presente em todos os seres vivos,
desde a mais antiga e simples bactria at o
mais recente e complexo organismo multicelular. A gliclise, entretanto, um processo
102
103
importante observar que, sendo oxidado o piruvato, o NADH (produzido na gliclise) que seria utilizado para sua reduo,
poupado o que possibilita que os eltrons por
ele transportado, possam penetrar na mitocndrias e convertidos em ATP, em ltima
anlise, na cadeia respiratria.
A primeira fase da gliclise uma fase
de gasto energtico onde os produtos formados so mais energticos que a glicose. A
segunda fase, resgata a energia investida e
libera parte da energia contida na molcula de
glicose.
As reaes irreversveis impedem a
reverso do processo e a liberao de glicose
para o meio extra-celular. A neoglicognese
precisar "driblar" essas reaes irreversveis
para gerar glicose. As enzimas desta via metablica permitiro justamente nessa reversibilidade (ver captulo 10 sobre metabolismo).
Figura 9-6 - Na primeira fase da gliclise h o gasto da energia da ligao fosfato de duas molculas de ATP.
uma fase de investimento energtico para a produo posterior maior da energia com a quebra da molcula. Duas
reaes de fosforilaes so irreversveis o que obriga a no formao de glicose a partir do aumento da concetrao do produto. Essas reaes irreversveis sero alvo de enzimas da neoglicognese.
Ricardo Vieira
104
Figura 9-7 -A segunda fase da gliclise responsvel pela produo energtica equivalente a quatro ligaes de alta energia do ATP mais a formao de dois NADH. Parte do BPG formado usado como sinalizador para a liberao de O2 nos
tecidos pela hemoglobina.
Ciclo de Krebs
O Ciclo de Krebs (assim denominado
em homenagem ao bioqumico alemo Hans
Krebs que estabeleceu, em 1937, as seqncias de reaes a partir de estudos preliminares), tambm chamado Ciclo do cido Tricarboxlico ou Ciclo do cido Ctrico, a
mais importante via metablica celular. Ocorre sob a regncia de enzimas mitocondriais,
em condies de aerobiose, aps a descarboRicardo Vieira
Figura 9-8 A mitocndria, sede do metabolismo energtico. As enzimas do Ciclo de Krebs esto presentes na matriz
mitocondrial, enquanto que os transportadores de eltrons
encontram-se nas cristas mitocondriais (invaginaes da
membrana interna). O fluxo de prtons ocorre da matriz para
o espao intermembrana e da de volta para a matriz, gerando um potencial protnico necessrio para a sntese de ATP.
105
106
lico que inicia-se com a captao de uma molcula de 2C (acetil-CoA) por um composto
de 4C (oxalacetato), gerando uma molcula
de 6C (citrato) que trabalhado enzimaticamente para liberar os 2C iniciais como CO2,
regenerando a molcula original de oxalacetato, reiniciando o ciclo.
Durante esta regenerao, so produzidos 4 substratos altamente energtico derivados das reaes de desidrogenao: 3 NADH e 1 FADH2, alm de um ATP no nvel
dos substratos.
Na verdade, os carbonos da acetilCoA incorporados molcula de citrato s
so liberados como CO2, na segunda volta do
Ciclo de Krebs e no imediatamente aps a
formao do citrato. Entretanto, este detalhe
no diminui o fato que cada duas molculas
de CO2 liberado, corresponde a molcula de
acetil-CoA que entrou no Ciclo.
Na Figura 9-9 est representado esta
importante via metablica celular.
Na sua essncia, o Ciclo de Krebs representa a forma como a mitocndria, utilizando poucas molculas do substrato oxlacetato pode converter uma quantidade enorme
de acetil-CoA j que no final do ciclo, o oxalacetato se regenera e possibilita o a captao
de nova molcula de acetil-CoA. Sendo assim, a acetil-CoA a molcula iniciadora do
Ciclo de Krebs, uma vez que o oxalacetato
funciona como uma espcie de substrato temporrio do ciclo.
Desta forma qualquer biomolcula que
ao ser degradada fornea acetil-CoA (p.ex.:
glicose, cidos graxos, certos aminocidos,
etanol, cido actico) potencial combustvel mitocondrial para a formao de ATP
pelo Ciclo de Krebs. Entretanto, molculas
que forneam o oxalacetato ao serem degradadas (p.ex.: alguns aminocidos), ou qualquer substrato do ciclo de Krebs que converta-se em oxalacetato aumenta apenas a velocidade de formao de ATP, mas no a sua
quantidade j que o oxalacetato no um
combustvel propriamente dito do ciclo de
Krebs, mas o substrato para que ele acontea.
107
Figura 9-9 - O Ciclo de Krebs. produzido somente um ATP no nvel dos substratos, sendo necessrio que os hidrognios e os eltrons retirados durante o ciclo sejam transportados para a cadeia respiratria para a produo de
ATP (3 ATPs por cada par de hidrognios transportado pelo NADH e 2 por cada FADH2). Ao centro, a foto do cientista alemo que d nome a esta importante via metablica.
Todas essas vias alternativas da acetilCoA, no entanto, no fazem parte da via glicoltica, mas uma espcie de desvio do ciclo
de Krebs (ver captulo 10 sobre metabolismo).
Cadeia Respiratria
Os 4 pares de hidrognios (e seus eltrons) liberados no ciclo de Krebs so imediatamente transportado para a cadeia respiratria que um processo gerador de ATPs
onde o O2 serve de aceptor final dos hidrognios (e eltrons) gerando uma molcula de
H2O por cada par de eltrons que so transportados pelo NADH e FADH2, gerados no
s do ciclo de Krebs, mas de qualquer outra
reao metablica celular.
A sntese de ATP resultante do transporte de eltrons, ocorre em virtude da energia livre liberada durante o fluxo de prtons
que ocorre entre os complexos transportadoRicardo Vieira
108
O complexo IV contm os citocromos a e a3 que possuem um grupamento heme (com um tomo de ferro) e esto ligados a
uma protena transmembrana que conecta a
matriz com o espao intermembrana e possui
dois tomos de cobre que possibilita o transporte de eltrons para o aceptor final, o oxignio (O2).
Quando os eltrons atravessam este
complexo IV, gera-se um terceiro fluxo de um
prton da matriz para o espao intermembrana, com os eltrons sendo transferidos para o
oxignio, que se reduz formando gua. Os
dois prtons necessrios para formar a gua
so retirados da matriz mitocondrial, ficando
a gua na mitocndia podendo atravessar para
o citoplasma.
Observe que um nico par de eltrons
transportado seqencialmente pelos complexos I, III e IV, geram o fluxo de trs prtons
para o espao intermembrana, com a formao de uma molcula de gua.
O complexo II ou Complexo Succinato-ubiquinona, uma nica enzima fixa
na crista mitocondrial mas que no comunica
a matriz com o espao intermembrana. Esta
enzima a succinato-desidrogenase que participa da 6a reao do Ciclo de Krebs.
Este complexo formado um FAD+
ligado a centros Ferro-enxofre. Ela transfere
os eltrons provenientes do FADH2 para a o
complexo III, mas de maneira diferente como
os eltrons do NADH so transportados para
o complexo III. Em virtude de no ser uma
protena transmembrana, no gera o fluxo de
prtons que o complexo I gera, fornecendo
um stio de fluxo de prtons a menos que os
eltrons transportados pelo NADH.
Na Figura 9-10, observa-se a representao esquemtica dos complexos I,II, III e IV
e a relao dos prtons lanados para fora da
mitocndria e os pares de eltrons transportados.O fluxo de prtons gerado pela passagem
dos eltrons pelos complexos I, III e IV (conhecidos, por isso, como bomba de prtons),
fornece energia suficiente para a sntese de
trs ATPs, o que corresponde a uma relao
de uma molcula de ATP para cada prton
bombeado ou 3 molculas de ATP para cada
par de eltrons que passe pelos trs complexos.
Ricardo Vieira
109
Figura 9-10 A cadeia respiratria. Os eltrons transportados pelo NADH mitocondrial so doados para o
complexo I que favorece a formao de trs fluxos de prtons no sentido matrizespao intermembrana capazes
de gerar, cada fluxo, um ATP com o bombeamento do prton no sentido inverso (espao intermembranamatriz).
Os eltrons transportados pelo FADH2 s geram dois fluxos de eltrons. A ubiquinona um transportador mvel
entre os complexos I e II para o complexo III, assim como o citocromo c entre o complexo III e o IV.
+ O2
H2O + NAD+
G = - 53,14 kcal
+ O2 H2O + FAD+
G = - 36,71 kcal
110
111
Ricardo Vieira
Tabela 9-4 - Saldo energtico total (gliclise + Ciclo de Krebs + cadeia respiratria) do metabolismo aerbico da glicose.
ATPs gerados na
Quantidade total de
ATP no nvel
NADH
FADH2
cadeia respiratria
ATPs
dos substratos
Gliclise (1a. fase)
-2
-2
Gliclise (2a. fase)
+4
2
6
10
Oxidao de Piruvato
2
6
6
Ciclo de Krebs
+2
6
2
22
24
+4
102
TOTAL
34
38
Ricardo Vieira
Captulo 10
Metabolismo
114
Ricardo Vieira
Somente sete aminocidos geram direto acetil-CoA com os demais gerando intermedirios da neoglicognese. Os cidos graxos geram acetil-CoA atravs da betaoxidao, um processo intramitocondrial,
mas que se inicia no citoplasma com a ativao dos cidos graxos.
Esta segunda fase do metabolismo
possui uma diversidade muito grande de vias
metablicas prprias de cada biomolculas,
porm o produto final comum, a acetil-CoA,
faz com que seja necessrio perfeita integrao para o incio da prxima fase mitocondrial.
A terceira e ltima fase do metabolismo ocorre somente em condies de aerobiose e no interior das mitocndrias. A acetilCoA a molcula que inicia esta fase com o
ciclo de Krebs a etapa crucial onde a formao de citrato desencadeia o processo que
levar a formao de alto potencial redutor
verificado na formao de molculas de NADH e FADH2, alm de ATP formados na matriz mitocondrial.
Associado a este ciclo, uma cadeia de
transporte dos eltrons retirados dos substratos pelos NADH e FADH2, presente na crista
da mitocndria, permite a sntese de ATP em
grande escala a partir da oxidao do O2 proveniente da respirao que se combina com os
H+ mitocondrial e os eltrons liberados, formando H2O. Este processo extremamente
eficaz e a concentrao de acetil-CoA mitocondrial fundamental para o sucesso deste
processo.
Um excesso de acetil-CoA leva ao
desvio da sntese de ATP e sntese de cidos
graxos, colesterol e corpos cetnicos. Este
desvio do metabolismo energtico muito
comum e um a forma eficaz de impedir o
excesso do metabolismo oxidativo mitocondrial com a superproduo de ATP. Apesar da
sntese desses compostos ser citoplasmtica,
o excesso de acetil-CoA mitocondrial que
inicia esta sntese, em um processo ordenado
e extremamente eficaz, tpico de quando h
excesso de substratos energticos provenientes da alimentao ou da degradao dos cidos graxos provenientes dos adipcitos. Como vemos, so dois processos de origem diferente, mas fornecem excesso de acetil-CoA.
115
Muitas doenas metablicas instalamse netas vias, principalmente quando h excesso ou falta dos percussores metablicos o
que torna fundamental a compreenso do funcionamento dessas vias metablicas para poder entender a gnese dessas doenas (p.ex.:
diabetes mellitus, aterosclerose coronria,
gota etc.).
A seguir, sero detalhadas as principais vias metablicas envolvidas no metabolismo energtico celular, que, apesar de serem
apresentadas isoladamente, devem ser estudadas de maneira integrada, pois ocorrem dentro
de uma entidade dinmica e programada para
sobreviver, a clula. No captulo 9 sobre bioenergtica, foram apresentados os principais
processos energticos celulares comum a todas as clulas enquanto que neste captulo
sero apresentados as vias metablicas prprias de cada biomolcula.
5) sntese de corpos cetnicos (que possuem funo energtica para os tecidos extra-hepticos, principalmente
os neurnios e msculos).
O fgado a nica clula que pode liberar
glicose da clula para o sangue, fato indispensvel para suprir as necessidades energticas
de todas as clulas do organismo. Essa liberao s possvel graas enzima glicose-6fosfatase, que reverte a primeira reao da
gliclise (a formao de glicose-6-fosfato, ver
captulo 9). As demais clulas, por no possurem esta enzima, consomem integralmente a
glicose baixando a glicemia, j que absorvem
glicose do sangue mas no so capazes de
libera-la para o meio extracelular. Alm dos
hepatcitos, algumas clulas justaglomerulares (renais) possuem pequena atividade de
glicose-6-fosfatase, mas no exercem papel
significativo na manuteno da glicemia.
Apesar da grande quantidade de glicose
liberada para o sangue pelo hepatcito, as
concentraes normais de glicose plasmtica
(glicemia) no sofrem grande variao alm
de 70 - 110 mg/dl, devido regulao hormonal pelos hormnios pancreticos insulina e
glucagon.
importantssima a manuteno dos
nveis de glicemia dentro dessa faixa estreita,
pois uma hiperglicemia contnua torna o sangue muito concentrado alterando os mecanismos osmticos de reabsoro de gua nos
tbulos renais, induzindo a uma diurese excessiva que pode levar desidratao e uma
srie de alteraes patolgicas especficas
tpicas de uma doena metablica muito comum, a diabetes mellitus onde a falha no
mecanismo de absoro celular leva a uma
hiperglicemia crnica (ver captulo 15 sobre
Diabetes Mellitus).
A insulina e o glucagon no so os nicos hormnios que possuem ao regulatria sobre a glicemia plasmtica. Vrios outros
hormnios (p.ex.: hormnios sexuais, glicocorticides, tireoidianos, GH etc.) tambm
tm ao metablica, porm possuem uma
funo energtica secundria, sendo produzidos a partir de estmulos outros que no a
hiperglicemia ou hipoglicemia, como o caso
da insulina e do glucagon. Outros hormnios
116
1.
Insulina
Figura 10-3 - A regulao da sntese e secreo de insulina est relacionada ao aumento da atividade oxidativa
mitocondrial devido hiperglicemia, uma vez que as vias
naturais de desvios do metabolismo energtico possuem
baixa atividade nas clulas beta do pncreas. O ATP gerado abre abre canais de K+ que despolariza a membrana
levando entrada de Ca++ que, juntamente com o Ca++
disponvel nas reservas intracelulares estimula a secreeo
da insulina produzida no retculo endoplasmtico
117
Figura 10-4 - O receptor de insulina possui duas subunidades que fica no domnio extracelular e liga-s com
a insulina. As duas subunidades situam-se na poro
citoplasmtica e possuem atividade cataltica citoplasmtica. Para a entrada de glicose na clula, h a necessidade da integrao de um transportador de glicose
(GLUT), especfico para cada tipo de tecido.
118
hepatcito
clulas beta
NO
GLUT3
neurnios
hemcias
NO
GLUT4
msculos
adipcitos
a maioria das clulas
SIM
GLUT5
entercito
NO
GLUT7
retculo endoplasmtico
dos hepatcitos
NO
2.
Glucagon
3.
Somatostatina
A somatostatina pancretica produzida pelas clulas delta das ilhotas, possuindo forte ao parcrina (em clulas adjacentes), inibindo a secreo de insulina e glucagon. Apresenta-se sob duas formas: uma cadeia peptdica nica de 14 aminocidos e outra com o dobro, possuindo vida mdia de
cerca de 2 minutos (Figura 10-7).
A somatostatina atua, ainda, inibindo
a secreo dos hormnios gastro-intestinais
gastrina e secretina, diminui a motilidade gastro-intestinal, da vescula biliar e do pncreas
excrino.
119
5.
4.
Amilina
Este polipeptdeo pancretico foi identificado em clulas beta das ilhotas, possuindo
37 aminocidos (Figura 10-8). Entre as funes observadas, destaca-se a estimulao do
secreo do suco gstrico e pancretico, diminuindo, entretanto, a motilidade intestinal e da
vescula biliar, diminuindo o metabolismo
absortivo ps-prandial e, conseqentemente,
atrasando a absoro de carboidratos o que,
Sntese do glicognio
120
6.
Glicogenlise
121
mobilizado a partir de uma seqncia de reaes que no so o inverso da sua sntese, por
uma via metablica complexa que se inicia a
partir de estmulos hormonais reflexos hipoglicemia (glucagon) ou estmulos externos
(adrenalina, glicocorticides). Esses estmulos
possuem como segundo mensageiro o AMP
cclico (AMPc), que formado a partir do
ATP sob ao da enzima adenilato-ciclase.
O AMPc converte a enzima fosforilase-quinase-b (inativa) em fosforilasequinase-a (ativa), que por sua vez retira uma
molcula de glicose do glicognio, na forma
de glicose-1-fosfato, liberando-a para o metabolismo em uma reao que utiliza a mesma
enzima que inicia a sntese de glicognio, a
fosfoglicomutase, formando glicose-6-fosfato.
A ativao desta enzima, que tem como co-fator a vitamina B6, gera glicose-1fosfato atravs da quebra das ligaes
(14). As ligaes (16) dos pontos de
Ricardo Vieira
122
[A]
[B]
Na figura 10-11 [A] representa a regulao da glicogenlise no jejum onde o glucagon conecta-se ao seu receptor e 2) ativa a
protena G que, por sua vez, 3) ativa a adenilato ciclase que possui funo de converter
ATP em AMPc que, na seqncia, 4) liga-se a
forma inativa da protena cinase A 5) ativando-a e, por fosforilao, 6) inativa a glicognio sintase e, finalmente, 7) pra a sntese de
glicognio. A forma inativa da fosforilase
cinase A pode 8) por fosforilao induzida
pela msma forma ativa da protena cinase A
Ricardo Vieira
ser ativada 9) e degradar o glicognio formando 10) a glicose-1-fosfato que 11) pela
ao da fosfoglicomutase gera glicose-6fosfato que retorna ao sangue como glicose
12) pela ao da glicose-6-fosfatase heptica.
A Figura 10-11 B representa o mesmo
mecanismo mediado pela epinefrina onde 1) a
ligao com os receptores alfa ativa a enzima
fosfolipase C que leva a formao dos segundo mensageiros 3) di-acil-glicerol (DAG) e
inosina-3-fosfato (IP3). O DAG possui mecanimso idntico de inibio da glicognio sintase mediado pelo glucagon. O IP3, aps 4)
abrir canais de clcio (da mesma forma que
impulsos nervosos), promove 5) a ativao da
calmodulina e a ativao da fosforilase cinase
da mesma forma que o glucagon.
7.
Neoglicognese
123
Ricardo Vieira
124
Figura 10-11 - A neoglicognese um processo mitocondrial e citoplasmtico que ocorre como a reverso da
gliclise onde as reaes irreversveis so substitudas por reaes especficas da neoglicognese, estimuladas pelo
glucagon, epinefrina e cortisol.
As reaes enzimticas da neoglicognese so estimuladas pelo glucagon, epinefrina e cortisol e imprescindvel que no
haja acetil-CoA disponvel na mitocndria
para que o oxalacetato formado no seja convertido em citrato e inicie o ciclo de Krebs. A
ausncia de acetil-CoA compatvel com o
momento metablico da clula onde h uma
queda na degradao de glicose. O glucagon
um potente estimulador dessa via uma vez
que liberado pelo pncreas aps a hipoglicemia.
A neoglicognese estimulada pelo cortisol e epinefrina corresponde a uma ao
metablica derivada no a um estmulo hipoglicmico mas por uma necessidade metablica derivada a um estresse energtico.
Os aminocidos so importantes fornecedores de substratos da neoglicognese,
porm aqueles que fornecem acetil-CoA diretamente (cetognicos) no fornecem substratos para esta via metablica e sim estimulam a
produo de energia para o ciclo de Krebs.
Ricardo Vieira
8.
125
9.
Metabolismo de outros
carboidratos
126
Figura 10-12- Na via das pentoses para cada seis molculas de glicose degradas, uma convertida, novamente, a glicose-6-fosfato o eu gera um ciclo sem fim. As cinco molculas restantes so convertidas em ribose-5-fostato que
requisitada para a sntese de nucleotdeos. Nas hemcias, no entanto, no h a formao de riboses e, portanto, a via das
pentoses passa a ter no NADPH formado o produto principal, j que ele utilizado no processo de manutenol da
hemoglobina no estado reduzido, o que possibilita a ligao reversvel com o oxignio. A deficincia gentica da G6PD
leva a formao de uma hemcia frgil pelo depsito de metahemoglobina (hemoglobina oxidada irreversivelmente)
que sofre hemlise mais rapidamente que uma hemcia normal.
Ricardo Vieira
127
Ricardo Vieira
128
Figura 10-12 - Sntese dos cidos biliares. A partir do colesterol h a sntese dos cidos biliares primrios no fgado que so
excretados na bile. Uma vez no duodeno, sofrem a ao de bactrias intestinais produzindo os cidos biliares primrios. Devido ao pH alcalino da bile e do contedo duodenal, os cidos biliares apresentam-se na forma de sais biliares.
1.
Os lipdios da alimentao so transportados pelos quilomcrons e os provenientes da sntese heptica so transportados pelas
demais lipoprotenas.
A diferena bsica entre cada lipoprotena diz respeito quantidade de lipdios e
protenas na molcula, aumentando a densidade quanto maior a quantidade de protenas
presente em sua composio.
Desta forma existem lipoprotenas de
baixa densidade (LDL = low density lipoprotein), muito baixa densidade (VLDL = very
low density lipoprotein) e de alta densidade
(HDL = high density lipoprotein). Os quilomcrons (do latim quilo = gordura e micro =
pequena) so as de menor densidade enquanto
que as de maior densidade so as albuminas
ligadas aos cidos graxos.
Nas Tabelas 10-3 e 10-4 podem ser
observadas as composies relativas de lipdios e protenas transportadas pelas lipoproteRicardo Vieira
129
Densidade
Protenas (%)
Lipdios (%)
TG
FL
Col
(ster)
3
15
34
48
31
29
0
Col
(livre)
1
8
9
10
10
6
0
FFA
1-2
98-99
88
8
0,95
0,95 - 1,006
7-10
90-93
56
20
1
1,006 - 1,019
11
89
29
26
1
10,10 - 1,063
21
79
13
28
1
1,063 - 1,125
33
67
16
43
1,125 - 1,210
47
43
13
46
6
99
1
0
0
100
1,210
TG = triglicerdeos
Col = colesterol FL = fosfolipdio
FFA = free fat acid (cidos graxos livres)
VLDL = very low density lipoprotein
IDL = intermediate density lipoprotein
LDL = low density lipoprotein
HDL = high density lipoprotein
( )
* Alb-FFA = albumina ligada a cidos graxos livres. Forma de transporte dos FFA aps a mobilizao dos adipcitos.
(Adaptado de MURRAY et al., 2000, p. 269)
Quilomcrons
VLDL
IDL
LDL
HDL2
HDL3
Alb-FFA (*)
Apoprotenas
A1, A2, A4, B48, C1,
C2, C3, E
B48, E
B100, C1, C2, C3, E,
B100, E
Ricardo Vieira
130
ficao e captao pelo hepatcito para o processo de degradao. A apoE tambm tem
esta funo e tambm adicionada molcula
do quilomcrons pelo contato com a HDL da
mesma forma que a apoC2. Outras apoprotenas esto presentes na composio dos quilomicrons com a funo de torna-lo solvel (ver
tabela 10-4).
No fgado, h a sntese constante de
colesterol e triglicerdeos a partir do excesso
de acetil-CoA produzida durante o metabolismo energtico. Esses lipdios endgenos
Figura 10-13 - Representao esquemtica de uma
so transportados pela lipoprotena VLDL
lipoprotena. As apoprotenas integrais (apo A e apo B)
esto inseridas firmemente na matriz lipdica, enquanto
que possui a apoB100 como principal apoproque as protenas perifricas (apo C, apo D e apoE) litena.
gam-se por foras fracas aos lipdios da periferia da
Aps ser liberada para a corrente sanmolcula. Observe a semelhana com a estrutura lipognea,
a HDL transfere a apoC2 e apoE para
protica da membrana celular.
a molcula de VLDL, da mesma maneira como faz com os quilomcrons. Desta forma, a
VLDL pode ser reconhecida pelos adipcitos
e ter o seu contedo de triglicerdeos retirado
para o armazenamento no tecido adiposo.
Aps a retirada dos triglicerdeos, a
VLDL torna-se mais densa e de menor tamanho, sendo denominada de VLDL remanescente (ou IDL).
Esta lipoprotena remanescente pode
ser captada pelo fgado e o seu contedo de
colesterol degradado. Porm isso raramene
acontece uma vez que a VLDL que lhe deu
origem foi sintetizada em uma situao de
excesso de lipdios hepticos e, portanto, no
de se esperar que o fgado proceda a sua
degradao, mesmo depois do depsito de
triglicerdeos nos adipcitos.
Observe que o colesterol que est na
VLDL remanescente corresponde ao excesso
Figura 10-14 - Representao esquemtica das lipoprotenas da sntese e da alimentao, logo de se espeplasmticas. (Adaptado de DEVLIN, 2000).
rar que no haja uma degradao heptica a
amenos que aumente a necessidade de sntese
de sais biliares. Isto pode ser conseguido caso
A apoC2 responsvel pela identifidiminua a absoro dos sais biliares no intescao dos quilomcrons pelos adipcitos, intino o que leva a uma maior necessidade de
duzindo a ao da enzima lipase-lipoproteca
colesterol para a sntese. As fibras alimentares
do adipcito para favorecer a captao dos
e medicamentos da classe dos fibratos prodos triglicerdeos. Os quilomcrons no posmovem esta diminuio da absoro intestinal
suem esta importante apoprotena quando so
de sais biliares e levam a queda do colesterol
sintetizados na mucosa intestinal. AapoC2
plasmtico em conseqncia. Em pacientes
adicionada pela lipoprotena HDL durante o
com altas concentraes de colesterol plasmtransporte plasmtico.
tico por causas genticas (ver captulo 16 soA apoB-48 uma protena integral
bre Dislipidemias) a retirada cirrgica da ldos quilomcrons responsvel pela sua identiRicardo Vieira
131
Figura 10-15 - A captao do colesterol da LDL mediada por receptores celulares (LDL-R) que reconhecem a
apoB100 da LDL. A regenerao do LDL-R um importante mecanismo regulador da concentrao de colesterol
plasmtico.
132
O colesterol da LDL depositada na parede dos vasos pode ser retirado pelas
molculas de HDL pela ao da enzima
lecitina colesterol acil transferase (LCAT)
que esterifica o colesterol com triglicerdeos e
o transporta para novas molculas de VLDL
ou LDL para que possam novamente ser
metabolizadas nas clulas.
Porm, quanto maior a concentrao
de LDL (e menor a de HDL) o colesterol tende a se oxidar ao passar atravs do endotlio.
Essa oxidao impede que os macrfagos
(clulas de defesa) reconheam este LDL oxidado como estruturas prprias do organismo.
Ento, os macrfagos endocitam a LDL.
Esta endocitose, entretanto, ao invs
de se constituir um importante processo para a
retirada do colesterol da parede dos vasos,
torna-se um desencadeador do enrijecimento
da artria coronria. Isto acontece porque aps a endocitose os macrfagos no conseguem digerir o LDL e se tornam clulas grandes (clulas espumosas) sem funo de fagocitose e se acumulam nas paredes dos vasos
liberando fatores qumicos que levaro proliferao do msculo liso, a leso do vaso e a
calcificao do local, criando a placa ateromatosa que diminui a circulao sangnea
na rea afetada, induzindo necrose do tecido
irrigado pelo msculo.
Na Figura 10-18 esto representados
os eventos responsveis pela formao da
placa ateromatosa. Para maiores detalhes, ver
o captulo 16 sobre Dislipidemias.
Como foi descrito, a molcula de
HDL possui importante funo na manuteno dos nveis plasmticos de colesterol dentro de valores compatveis com a ausncia de
risco para aterosclerose coronria, pois possibilita a retirada do colesterol livre do plasma
esterificando-o com o triglicerdeos atravs da
LCAT, transferindo este colesterol molcula
de VLDL e LDL favorecendo o consumo do
colesterol pelas clulas perifricas e pelo prprio fgado. Uma outra funo atribuda
HDL a retirada fsica da molcula de LDL
da parede dos vasos, por um processo no
bem conhecido, ajudando na preveno da
placa ateromatosa. A HDL, ainda, captada
pelos hepatcitos onde tem o seu colesterol
Ricardo Vieira
Por todos esses fatores, a HDL considerada uma lipoprotena de proteo contra
a aterosclerose coronariana, sendo denominado vulgarmente, como o bom colesterol. Em
contrapartida, a LDL ganhou a fama de
mau-colesterol por ser a partcula aterogncia. Entretanto, o LDL que possibilita a captao do colesterol pelas clulas perifricas e
fgado.
O mau-colesterol na verdade aquele
ingerido na dieta alm da capacidade de excreo heptica diria do indivduo (at
1g/dia).
Estudos recentes demonstram que uma
lipoprotena sintetizada no fgado denominada
de lipoprotena (a) muito parecida com a
LDL, possuindo uma apo(a) ligada atravs de
ligao covalente com a apo-B100, o que lhe
confere um poder extremamente aterognico
uma vez que possui uma funo de retardo na
degradao dos cogulos sangneos. Por isto,
esta nova lipoprotena j vem sendo denominada como o colesterol muito ruim.
O metabolismo dos lipdios endgenos
e exgenos muito semelhante, variando no
tipo de lipoprotena envolvida. Porm, as conseqncias de um aumento da LDL plasmtico pode ter conseqncias desastrosas para o
organismo, da a importncia do estudo deta-
133
2.
Sntese do colesterol
134
CoA (HMG-CoA) pela adio de uma terceira acetil-CoA. A formao de HMGCoA etapa comum para asntese de corpos cetnicos. A enzima HMG-CoAredutase a responsvel pela converso
de HMG-CoA em mevalonato (6C), sendo, portanto, uma enzima regulaora da sntese de colesterol.
2) Formao de unidades isoprenides:
forma-se o isopentenil-pirofosfato (5C)
por fosforilao do ATP e perda de CO2.
3) Formao de esqualeno: seis molculas
da unidade isoprenide (5C), formadas na
etapa anterior, condensam-se formando o
esqualeno (30C), sendo necessrio a presena de NADPH.
4) Converso do esqualeno em lanosterol:
o lanosterol um composto cclico que
contm o ncleo ciclo-pentano-per-hidrofenantreno. Esta fase necessita de NADPH
e FAD+.
5) Converso do lanosterol em colesterol:
ocorre no retculo endoplasmtico, sendo
necessrios 4 NADPH e 1 NAD+. O colesterol possui 27 carbonos pois nesta fase h
a perda de 2 CO2 e um radical livre HCOOH.
O colesterol no possui funo energtica, mas possui importante funo na formao da membrana celular, na sntese de hormnios esterides e na sntese dos cidos biliares. Nas figuras 10-21 e 10-22 esto apresentadas as etapas na sntese de colesterol.
A enzima HMG-CoA redutase responsvel paela regulao da sntese do colesterol, que acontece em de trs nveis diferentes:
1) Feedback negativo da HMG-CoA redutase pelo prprio colesterol sintetizado. Esta
inibio alostrica extremamente eficaz
e impede uma superproduo de colesterol
citoplasmtico.
2) Ativao da HMG-CoA-redutase pela
insulina e inativao pelo glucagon, o que
faz da concentrao de glicose plasmtica
um importante regulador da sntese de
colesterol.
3) Reduo na transcrio do gene da HGMCoA-redutase atravs do colesterol captado pela clula atravs da LDL. Alguns
medicamentos (p. ex.: levatastina e mevaRicardo Vieira
3.
135
136
137
138
1.
Transaminao e Desaminao
139
As principais transaminases do hepatcito so a transaminase-glutmicopirvica (TGP) ou alanina aminotransferase (ALT) e a transaminase-glutmicooxalactica (TGO) ou aspartato aminotransferase (AST). Essas enzimas transaminamna a alanina e o aspartato, respectivamente, possuindo tambem ao sobre os demais
aminocidos, apesar de haver uma transaminase para cada tipo de aminocido.
Apenas doze dos vinte aminocidos
tm seu grupamento amino retirado por transaminao (alanina, arginina, asparagina, aspartato, cistena, isoleucina, leucina, lisina,
fenilalanina, triptofano, tirosina e valina). O
processo metablico dos demais aminocidos
(inclusive o glutamato produzido na transaminao) denomina-se desaminao oxidativa. Por essa via podem ser degradados inclusive os doze aminocidos que so transaminados.
Nessa desaminao h a retirada do
grupamento amino por enzimas denominadas
aminocido-oxidases, que convertem o grupamento amino em amnia livre (NH3), liberando o cetocido correspondente (Figura 1026).
Em virtude da grande quantidade de
glutamato produzido por transaminao, a via
glutamato-desidrogenase a mais freqente.
O acoplamento de transaminao e desaminao por essa via denominado de transdesaminao. A vantagem da transaminao
justamente a formao de glutamato e a necessidade de uma nica via metablica posterior para a degradao dos doze aminocidos.
Figura 10-25 - A transaminao dos aminocidos ocorre com a formao de um nico aminocido, o glutamato, e
um cetocido para cada tipo de aminocido metabolizado. O aceptor de amino o cetocido -cetoglutarato.
Ricardo Vieira
140
Figura 10-26 - A desaminao oxidativa um processo intramitocndrial que gera amnia par a sntese de uria. estimulada pelo ATP e inibida pelo GTP. O -cetoglutarato regenerado para o citoplasma.
2.
Sntese da uria
141
142
Figura 10-27 - O Ciclo de Uria
uma via metablica que se inicia no
citoplasma e concluda no citoplasma. A uria produzida quase
que totalmente excretada nos rins e
serve de bom parmetro e avaliao
da funo renal.
A glutamina corresponde a um substrato importante para outros processos de sntese que requerem amnia como a sntese de
aminocidos e o metabolismo do nitrognio
em bactrias. Em seres humanos, ela possui
uma funo adicional ao funcionar como reguladora do pH em casos de acidoses.
Nesta situao patolgica, a concentrao de H+ est perigosamente aumentada e
os rins atuam de vrias maneiras para inverter
essa situao (ver captulo 17 sobre Equilbrio
cido-Bsico). Uma das formas de controle
do pH a ativao da enzima glutaminase
das clulas justaglomerulares renais que converte a glutamina e glutamato e amnia.
Ricardo Vieira
143
Figura 10-28 - A glutamina sintetizada nos msculos a partir do glutamato como forma de absorver
amnia e transport-la at o fgado.
3.
Catabolismo da cadeia
carbonada dos aminocidos
144
4.
Ricardo Vieira
145
Ricardo Vieira
146
2.
A partir dos aminocidos noessenciais glutamina e aspartato, h a sntese de cido ortico, que combina-se com o
PRPP fornecendo a uridina-monofosfato
(UMP) formando, posteriormente, UTP que
pode ser convertido em citidina-monofostato
Ricardo Vieira
147
Figura 10-32 - O Metabolismo das bases nitrogenadas est relacionado com a formao de produtos de excreo
(cido rico) ou de intermedirios metablicos (-alanina e cido -NH2-isobutrico).
Ricardo Vieira
O que vida?
Ricardo Vieira
Professor de Bioqumica - Universidade Federal do Par
E-mail: jrvieira@ufpa.br
O conceito de vida no privativo da cincia, da mesma forma que no pode a religio ou a filosofia
requerer a propriedade deste conceito. Em cincia, instrumento de estudo dos fenmenos naturais
abordados neste Curso, no importa saber o que a vida como um conceito pronto, mas sim estudar e
discutir o que a vida, baseado em evidncias comprovadas e reproduzveis pelos cientistas.
Muitos cientistas pensaram nisto antes de se chegar ao estgio atual do conhecimento cientfico, por
isso indispensvel saber o papel desempenhado por esses grandes nomes dentro desse contexto em que a
vida tambm est inserida, a cincia.
Experimento de Redi
Francesco Redi (1621 - 1697) combate a teoria da gerao espontnea provando que
as moscas precisam que outras moscas para que surjam novas moscas.
Lazaro Spalanzani (1729 - 1799) demonstra que necessrio contato com o ar para
que se apodrea material orgnico fervido previamente sugerindo a natureza
biolgica da putrefao dependente de fatores no visveis presentes no ar.
Isaac Newton
O que vida?
Antoine-Laurent Lavosier
Ren Decartes
Robert Virchow
Gregor Mendel
Ricardo Vieira
O que vida?
conservado em lcool e a denomina Bathybius haeckleli em homenagem a Haeckel.
Tem incio a onda Bathybius que trs tona a discusso da possibilidade da vida
poder surgir espontaneamente a partir de reaes qumicas.
Em 1873 tem incio a Expedio Challenger que viaja pelo mundo colhendo e
analisando amostras do lodo de fossas abissais ainda frescas e comprova que
Bathybius no passa de um artefato produzido pelo lcool utilizado como
conservante por Huxley.
Thomas Henry
Huxley
A expedio Challenger (1873 - 1875)
Aparato de Miller
Stanley Miller
Esta teoria de que a vida surgiu de uma sopa csmica nica, radicalmente diferente da teoria de
Hackel, pois necessrio que haja condies atmosfricas prprias (que no mais existem) e um
tempo de bilhes de anos at um estgio de organizao molecular que suporte a vida.
Somente com a utilizao do Carbono14 como mtodo de datao que se pde estabelecer a idade
tempo provvel da Terra (cerca de 4,5 bilhes de anos) e esta teoria ganhou fora dentro do meio
cientfico.
Ricardo Vieira
O que vida?
Thomas Morgan
Rosalind Franklin
Maurice Wilkens
Linus Pauling
As tcnicas de biologia molecular prometem ser a ferramenta ideal para desvendar o funcionamento dos
organismos vivos.
Bem distante de se estabelecer novos conceitos para a vida, a cincia deve dissecar as molculas e
encontrar as respostas para descrever como a vida funciona. A molcula alvo o DNA de onde se pode
tirar concluses baseadas na simples decodificao de sua seqncia e o estudo de como o gene se
expressa e regula.
O estudo do genoma favorecer a compreenso de vrios mecanismos biolgicos e os mtodos de
clonagem e de DNA recombinante traro a comprovao das novas teorias formuladas.
A cincia deve superar os problemas ticos para se estabelecer como testemunha de como a vida
gerada.
A busca incessante por vida extraterrestre em planetas vizinhos, como Marte, deve prosseguir por todo
este sculo. Os resultados so imprevisveis, podendo modificar drasticamente os conceitos atuais de
vida, ou, simplesmente, mant-los.
Entretanto, independente do progresso cientfico, a resposta para a pergunta o que vida? continuar
com suas mltiplas respostas. A diferena que a resposta da cincia dever estar bem mais
fundamentada.
E voc? J pensou sobre o assunto?
Ricardo Vieira
Abundncia em
organismos
80 250
1.000
60 300
500 800
10 20
2- 8
8 50
4 20
6 40
24 50
0,25 0,8
0,25 0,8
0,1 0,4
Abundncia no
universo
10.000.000
1.000
1.600
5.000
12
200
3
80
0,6
10
1,6
100
0,12
Figura 1
Ribozima
RNA ribossomal
Auto splicing de
RNA
RNA sintetizado
in vitro
Sidney Altman
Figura 2
Thomas Cech
Francis Crick
Leslie Orgel
A molcula de RNA com poder cataltico deve ter sido a primeira biomolcula a ter sido
sintetizada de maneira no randmica, o que garantiu a perpetuao das molculas mais
estveis durante milhes de anos de experimentao aleatria. Acima, os autores desta teoria
que supe um mundo de RNA pr-bitico. (Fotos: www.nobel.se)
Esses
microambientes
ricos
em
macromolculas favoreceram a ao cataltica
dessas ribozimas sobre aminocidos (gerados por
sntese
randmica),
gerando
polipetdeos
especficos que, em virtude de suas propriedades
qumicas naturais, passam a exercer uma ao
cataltica mais complexa e, em um frentico
processo de sntese orgnica, chegam a formar um
agrupamento de biomolculas que reagem entre
si reguladas por um equilbrio qumico especfico
que, quando no adaptado s condies qumicas
do ambiente, levam ao decaimento das
concentraes dos substratos e aquele ambiente
reacional deixava de existir.
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Biologia Evolutiva
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Entrevista com Dr. Stanley Miller:
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Microesferas de Sidney Fox:
http://www.siu.edu/~protocell/
O que vida? http://www.nbi.dk/~emmeche
The Nobel Prize Oficial Site: http://www.nobel.se
Ricardo Vieira
O que vida?
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VIDEIRA, A.A.P & EL-HANI, C.N. O que vida? Para entender a biologia do sculo XXI. Faperj - Editora
Relume Dumar. Rio de Janeiro, 2000.
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Biologia Evolutiva: http://www.nceas.ucbs.edu/lroy/lefa/lophodon.html
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The Challenger Expedition: http://www.oceansonline.com/challenger_ex.htm
Entrevista com Dr. Stanley Miller: http://www.accessexcellence.com/WN/NM/miller.html
Microesferas de Sidney Fox: http://www.siu.edu/~protocell/
Ricardo Vieira