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UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA

CENTRO DE CINCIAS NATURAIS E EXATAS


CURSO DE CINCIAS BIOLGICAS

Caderno Didtico de

Biologia Celular

(BLG 138)

lgion Loreto
Departamento de Biologia -2005

Sumrio:
Pgina
Introduo

Primeira Parte
Uma breve reviso de Biologia Celular

A lgica da composio molecular dos seres vivos

Estruturas supra-moleculares e a emergncia de novas propriedades

12

A organizao celular: o conceito de clula mnima

16

Da clula procaritica para a clula eucaritica

24

Segunda Parte
Recomendaes de ordem geral a serem observadas no uso do Laboratrio.

27

O uso do microscpio ptico (mo)

29

Observando clulas de epitlio de escamas de cebola

40

Propriedades fsico-qumicas dos componentes da membrana plasmtica.

41

Comparando clulas procariotas e eucariotas.

42

Um pouco de fsico-qumica: pH

44

Estudando a passagem de solutos e solventes pela membrana plasmtica.

47

Fracionamento celular :
centrifugao.

49

cromatografia

51

eletroforese

53

Observao de ciclose e cloroplastos em clulas de Elodea

54

Observando clios e sistema de endomembranas

57

Preparao de lminas permanentes

59

Observao de complexo de Golgi em lminas permanentes de epiddimo

60

Observao de clulas musculares estriadas

61

Observao de mitose em ponta de raiz de cebola

62

Atividades de prticas de biologia como componente


de formao pedaggica.
atividade 1 Biologia na cozinha.

65

atividade 2 - O uso de modelos didticos e simulaes

65

INTRODUO
Biologia Celular (BLG 138) uma disciplina do primeiro semestre, e ministrada com duas
horas/aula (h/a) tericas e duas h/a prticas semanais.
Os principais objetivos da disciplina so o dar ao aluno:
-

uma viso atual da organizao e funcionamento celular, assim como o domnio dos
conceitos bsicos dessa rea do conhecimento;

uma viso histrica sobre as principais descobertas que levaram aos paradigmas atuais
dessas cincias;

instrumentalizao para busca de informao e atualizao, de forma autnoma nessa


rea do conhecimento;

instrumentalizao para o desenvolvimento de atividades didticas de Biologia Celular,


para todos os nveis de ensino, incluindo as atividades prticas.

O presente Caderno Didtico foi escrito para auxiliar a atingir os objetivos descritos acima.
Para tal, ele consta de duas parte:
1a) Uma breve reviso terica atualizada, porm escrita em nvel de ensino mdio. Este
texto servir de base para as primeiras semanas de aula terica que consistir de uma reviso
geral de Biologia Celular.
2a) Protocolos das aulas prticas. Estas atividades sero executadas durante as aulas
prticas e cabe ao aluno fazer o registro solicitado nos protocolos. Pensamos ser este material
uma posterior fonte de consulta para a execuo de atividades didticas.
O aprofundamento terico, que se seguir reviso apresentada na primeira parte deste
Caderno Didtico ser feito a partir da seguinte bibliografia:
CARVALHO, H.F. e RECCO-PIMENTEL, S.M. A clula 2001. Barueri,SP, Ed. Manole, 2001.
JUNQUEIRA , L.C. e CARNEIRO, J. Biologia Celular e Molecular. 7a Ed. Rio de Janeiro,
Guanabara-Koogan, 2000.
DeROBERTIS, E.D.P. e DeROBERTIS, E.M.F. Bases da Biologia Celular e Molecular. 14 ed, Rio
de Janeiro, Guanabara-Koogan, 2003.
COOPER, G.M. A clula, uma abordagem molecular. 2 ed P. Alegre, Artes Mdicas, 2001.
ALBERTS, B. e colaboradores. Fundamentos da Biologia Celular. P. Alegre, Artes Mdicas,
1999.
ALBERTS, B. e colaboradores. Biologia Molecular da Clula. 4 ed. P. Alegre, Artes Mdicas,
2004.

Uma breve reviso de Biologia Celular


Unidade I
A lgica da composio molecular
dos seres vivos:

entendimento dos seres vivos so aqueles


relacionados aos tipos de molculas que os
compem. Os seres vivos so formados por
clulas e todas as clulas so constitudas
componentes

qumicos,

organizados em uma lgica muito simples:


tomos se agrupam para formar molculas,
estas, nos seres vivos so as vezes muito
grandes,

por

isto

chamadas

de

macromolculas, que se associam para


formar as organelas e demais partes da
clula. (Figura 1).

nos sistemas vivos e perfaz 70%, ou mais, do


admitimos a gua como um lquido inerte,

Os conceitos primordiais para o

mesmos

A gua a molcula mais abundante


peso da maioria das formas de vida. Sempre

DE QUE SO FEITAS AS CLULAS?

pelos

1. A gua e suas propriedades especiais

suave, conveniente para muitos propsitos


prticos. Embora seja quimicamente estvel,
ela uma substncia com propriedades
incomuns. Na verdade, a gua e seus
produtos de ionizao, os ons H+ e OH-,
influenciam profundamente nas propriedades
de muitos componentes importantes das
clulas, como as enzimas, as protenas, os
cidos nuclicos e os lipdios.
A molcula da gua eletricamente
neutra, mas o arranjo dos tomos de
hidrognio e oxignio em forma de V torna
essa molcula um dipolo eltrico. Pela
presena dos dois plos (+ e -) a gua dita
um solvente polar.
A gua melhor solvente do que a
maioria dos lquidos comuns. Quase todos os
sais minerais, podem ser dissolvidos na gua
sob forma de ons, como por exemplo, os
ons de Na+, Cl -, K+, Mg++ . Estes ons, em
especial, so de fundamental importncia no
controle da quantidade de gua nas clulas
(presso osmtica), e atuam tambm no
funcionamento de muitas enzimas e na

Figura 1. Organizao das estruturas


celulares a partir dos tomos.

excitabilidade das clulas.


As molculas orgnicas, que so as
molculas mais importantes na constituio e

funcionamento

dos

seres

vivos,

podem

que as molculas biolgicas podem ser

apresentar trs diferentes comportamentos

organizadas em apenas 4 classes. Alm

com relao a gua: a) so solveis (se

disso, deve-se levar em conta que as

solubilizam totalmente na gua, como a

molculas orgnicas so formadas por,

maioria dos glicdios); b) so insolveis (por

aproximadamente, 30 componentes bsicos.

exemplo, as gorduras neutras), ou c) so

Entender esta classificao fundamental

anfipticos, isto , possuem uma parte da

para a compreenso da qumica da vida.

molcula que se dissolve na gua e outra


que insolvel. Temos,como exemplo desse
ltimo tipo, os lipdios e protenas que
compem as membranas.

As quatro classes de molculas


orgnicas que esto presentes nas clulas
so as seguintes:
A)

A forma e propriedades funcionais


que as macromolculas vo apresentar so
profundamente influenciadas pelo modo com
que elas interagem com a gua. Sendo
desempenha,

no

funcionamento

celular, um papel muito importante.

uma

chamados

de

B) cidos nuclicos
C) Protenas
D) Lipdios (gorduras)
As trs primeiras classes formam
MOLCULAS POLIMRICAS, isto , so
molculas compostas por unidades que se
repetem, denominadas MONMEROS.

2. As molculas orgnicas
Em

(tambm

acares ou carboidratos)

assim, esse lquido inodoro, incolor e sem


gosto

Glicdios

primeira

observao,

podemos constatar que os seres vivos so


quimicamente
molculas

muito

orgnicas

complexos.
so

Suas

gigantescas

quando comparadas as molculas dos seres


brutos e, alm disso, so extremamente
variveis. Por exemplo, um organismo bem
simples como uma bactria, pode ter mais de
2.000 protenas diferentes. Um ser humano
deve ter em torno de 100.000 tipos de

Figura 2. Formao de polmeros

protenas.
Como

poderemos

estudar

quimicamente estes seres, se, considerando


somente

as

protenas,

temos

uma

diversidade to grande ?
Esta tarefa, que aparentemente
impossvel, torna-se facilitada pelo fato de

Podemos resumir a composio das


macromolculas orgnicas dos seres vivos
na Figura 3, em que encontramos os tomos
que

compem

cada

classe

de

macromolcula, os monmeros de cada


classe e o polmero formado.

Devemos lembrar que na Figura 3 as

No

grupo

dos

glicdios,

principal

molculas polimricas aparecem formadas

monmero a glicose. Nas protenas, os

por poucos monmeros, mas na realidade,

monmeros so 20 diferentes aminocidos

geralmente, elas so formadas por milhares

e, nos cidos nuclicos, so basicamente

deles.

8 nucleotdeos. Somando-se a estes alguns


tipos predominantes de lipdeos, teremos
ento,

aproximadamente

os

30-

40

componentes qumicos bsicos, e suas


variaes, que so predominantes nos
seres vivos.

2.1 PROTENAS
As protenas so as molculas
responsveis pelo funcionamento da
clula.
Praticamente todas as atividades da
clula e, portanto, de um organismo so
executadas por protenas.
O

transporte

de

substncias

realizado por protenas, como por exemplo, a


HEMOGLOBINA que transporta oxignio. O
movimento das organelas no interior da
clula, e mesmo o movimento proporcionado
pelos msculos, como um todo, resultado
da interao de protenas como a TUBULINA
e DINEIRA; a ACTINA e a MIOSINA. A
proteo
Figura 3. Classes de molculas presentes
nas clulas

Como podemos ver na Figura 3, seis


principais tipos de tomos vo formar todas
as molculas orgnicas dos seres vivos.
Estes seis elementos se organizam em
aproximadamente 30 40 tipos de molculas
(os monmeros) que podem ser classificados
por sua estrutura qumica em 4 grupos.

do

nosso

corpo

contra

os

microrganismos que causam doenas dada


pela ao de ANTICORPOS, que so
protenas. Todas as reaes qumicas que,
constantemente, esto ocorrendo em nosso
organismo, so realizadas por protenas
especiais chamadas de ENZIMAS. Enfim,
todo o funcionamento do nosso organismo se
d graas atividade das PROTENAS.
Cada

uma

dessas

funes

realizada por uma protena diferente. Existe,

no corpo humano, cerca de 100.000 tipos

estrutura primria . A substituio de um

diferentes de protenas, cada uma sendo

nico aminocido em uma cadeia protica,

especialista em uma funo.

provoca uma alterao na estrutura primria

As protenas so construdas a partir

dessa

protena.

conseqncia

da

de 20 tipos de aminocidos, que diferem

modificao pode ser grave, resultando em

entre si atravs de uma parte da molcula,

uma

chamada de radical.

corretamente dentro da clula.

nova

protena

que

no

funcione

Chamamos de estrutura secundria a


interao entre os aminocidos vizinhos um
uma cadeia polipeptdica. A interao entre
radicais + e ou hidrofbicos e hidroflicos
fazem com que parte da cadeia se organize
em hlice ou pregas (folhas) .
Na Figura 5, est representada a
estrutura primria da ribonuclease bovina, que
uma enzima que degrada o RNA. Na
estrutura primria, est explcito apenas qual
a ordem dos aminocidos que compem uma
protena, ou seja, qual o primeiro, o segundo,
o terceiro... at o ltimo aminocido.

Figura 4 - Os 20 aminocidos que compe


as protenas
As protenas so formadas pela
unio de 100 ou mais aminocidos. O que vai
diferenciar uma protena de outra a
seqncia dos aminocidos que a compem.
Como existem 20 diferentes tipos desses
aminocidos e as vrias protenas podem ter
comprimentos

diferentes,

temos

uma

diversidade muito grande nessa classe de

Figura 5. Estrutura primria da ribonuclease bovina

macromolculas (figura 4). Por exemplo, a

enzima ribonuclease bovina formada por

protena,

124 aminocidos, j a albumina do soro

representa

humano formada por 528 aminocidos.

tridimensional. O formato da mioglobina, ou

estrutura
por

sua

como

terciria
vez,

de

aquela
sua

uma
que
forma

A seqncia de aminocidos que

seja, sua estrutura terciria representada

compe uma protena, recebe o nome de

na da Figura 6. A estrutura terciria das

protenas

depende

da

seqncia

O modo como uma protena ir

de

desempenhar a sua atividade depender de

aminocidos (estrutura primria).

sua forma tridimensional, ou seja, depende


de sua estrutura terciria, que em ltima
anlise

depende

aminocidos

que

da

seqncia

compe

de

protena

(estrutura primria).
A troca, acrscimo ou retirada de um
aminocido PODE ocasionar alteraes na
estrutura dessa protena, alterando sua forma
e, portanto, sua funo. A troca de um
aminocido na protena ribonuclease, por
exemplo,

aminocido
Figura 6. Estrutura secundria
terciria da mioglobina.

Forma e Funo das Protenas


Para todo o lado que olhamos,
podemos observar que a forma dos objetos
que ditam a sua funo. Na Figura 7, temos a
representao de uma tesoura e de uma
colher. muito difcil cortar um pano com
uma colher, ou comer sopa com uma
tesoura. A forma desses objetos que
permite sua funo.

substituio
(treonina)

por

do

terceiro

uma

glicina

resultar em uma protena com outra forma


tridimensional e incapaz de executar sua
funo.
Somos formados por aproximadamente 100
trilhes de clulas. As clulas so estruturas
muito organizadas cujo funcionamento ,
essencialmente, realizado por uma classe de
molculas, as protenas. So as protenas
que iro dar forma as estruturas celulares,
transportar substncias, realizar as reaes
qumicas necessrias a sobrevivncia e
crescimento da clula, enfim so elas que
iro pr as clulas a funcionar. Existem
milhares de protenas diferentes em cada
clula. Cada protena est envolvida em uma
funo ou atividade especfica. Diferentes
clulas apresentam protenas diferentes, o
que explica as variaes nas formas e
funes observadas em cada tipo celular
Portanto,

para

entender

funcionamento celular temos que olhar com


Figura 7- Relao entre forma e funo

ateno para as protenas. As protenas so


cadeias

de

aminocidos.

Imagine

uma

protena como um colar de prolas, cada

um deles est relacionada sua forma.

aminocido sendo uma prola. Existem 20

a estrutura tridimensional que permitir

diferentes tipos de aminocidos, o que

a uma enzima (protena que ativa

poderia ser representado em nosso colar por


prolas de 20 cores diferentes. O nmero de
prolas e a seqncia nas cores das prolas
(aminocidos)

variam

de

protena

para

protena, como nos dois "colares" vistos na

reaes

qumicas)

encaixar-se

perfeitamente ao seu substrato e alterlo. Vamos a um exemplo: o fator VIII


uma protena de 2.531 aminocidos e
est envolvida na coagulao sangunea.

Figura 8.

A ausncia ou a reduo da atividade


dessa protena no sangue causa a
hemofilia clssica (hemofilia A), condio
em que a pessoa pode morrer devido
hemorragia intensa e de longa durao,
desencadeada por qualquer pequeno
ferimento.
H casos em que os hemoflicos
Figura 8:
Diferentes protenas
podem possuir diferentes nmeros de
aminocidos (como no exemplo aqui temos
um "colar" com 11 e outro com 9 contas). As
protenas diferem tambm com relao a
seqncia de cores das contas do colar
(seqncia de aminocidos).

tm o fator VIII no sangue, porm, essa


protena apresenta alguns dos seus
aminocidos trocados ou faltando, e isso
causa

uma

alterao

no

formato

tridimensional dessa protena, impedindo


que ela se ligue com as outras protenas

O nmero de aminocidos varia


de uma protena para outra, as menores

envolvidas na coagulao sangunea, ou


dificultando essa ligao.

tem em torno de 50 aminocidos e as


maiores perto de 20.000. As protenas se
dobram

formando

tridimensional

tpica,

uma
ou

estrutura
seja

cada

protena tem uma forma definida que


depende da seqncia de aminocidos
que possui. essa forma que vai ser
responsvel pela funo da protena.
Observe a sua volta diferentes

Sabe-se tambm que algumas


substituies de aminocidos na protena
podem

ter

provocando

efeitos
apenas

menos drsticos,
uma

pequena

alterao de forma do fator VIII, sem


comprometer o funcionamento de modo
muito intenso. Neste caso, a pessoa
pode ter um tempo de coagulao um
pouco maior do que a maioria dos

objetos e veja como a funo de cada


9

indivduos, sendo, no entanto, normal e

As Protenas na Nossa Dieta

no hemoflica.

As

protenas,

enquanto

macromolculas, no so essenciais na dieta


humana. Alguns monmeros que formam as
protenas que so considerados essenciais

Enzimas
As enzimas formam uma classe
especial de protenas que tem como funo
Cada enzima especializada em
uma

reao

especfica.

amido e o degrada at glicose. O amido, que


a substncia que vai ser alterada durante a
qumica,

recebe

nome

produzir.
As protenas presentes nos alimentos

Por

exemplo, a enzima amilase age sobre o

reao

Os aminocidos chamados de essenciais so


aqueles que nossas clulas no conseguem

catalisar (acelerar) as reaes qumicas.


acelerar

para nutrio humana.

de

so degradadas no aparelho digestivo. Essa


degradao corresponde separao da
cadeia polipeptdica em monmeros. Os
aminocidos liberados so, ento, levados
atravs do sangue para todas as clulas do

SUBSTRATO.
Na enzima, existe uma regio que se
liga especificamente ao substrato e a esta
regio chamamos de STIO ATIVO. Assim,
aps a interao do substrato com o stio

nosso corpo. Uma vez no interior de nossas


clulas, esses aminocidos sero utilizados
para compor as nossas protenas e fazer
funcionar o nosso organismo.
As

ativo, ocorre a reao qumica, sendo


liberado o PRODUTO da reao, que no
As enzimas no se alteram com a
qumica

que

promovem,

importantes

no

de um bife eram

msculo

da

vaca.

As

protenas do ovo seriam importantes para o

caso da amilase, a glicose.


reao

protenas

saindo

intactas do processo, podendo ir localizar


mais substrato para catalisar nova reao
(Ver Figura 9).

pintinho que iria se desenvolver naquele ovo.


Se essas protenas entrassem intactas em
nossa circulao, de nada adiantaria, pois
no estariam aptas a desempenhar as
funes que as nossas clulas devem
executar. Alm do mais, como sabemos, toda
protena estranha serve como antgeno, e
provavelmente, a absoro de uma protena
de vaca ou de galinha provocaria uma reao
alrgica. Nosso sistema imune reconheceria
essas

Figura 9 Esquema de uma reao enzimtica

protenas

como

estranhas

ao

organismo e criaria anticorpos contra elas.


As protenas so molculas muito
grandes.
composto

Por
por

exemplo,

colgeno

aproximadamente

3.000

10

aminocidos. Essa protena fibrosa o


principal componente da matriz extracelular e

Resumindo o que foi apresentado


sobre protenas, podemos dizer que:

do tecido conjuntivo. Se considerarmos que a


molcula da gua (que bem menor que a

O funcionamento de um organismo
depende de suas protenas.

de um aminocido) tem dificuldade de


atravessar

pele,

absorvida

uma

como

poderia

molcula

de

ser
3.000

O funcionamento de cada protena


depende de sua forma.

aminocidos? Mas muitos cremes vendem


a idia de que podemos repor o colgeno
que est faltando em nossa derme, usando
colgeno de galinha. Na verdade essa

A forma de uma protena depende da


seqncia dos aminocidos que a compem.

protena no consegue atravessar a pele e


chegar na derme, onde normalmente est
depositada.

Caso

isso

acontecesse,

provocaria uma reao alrgica (seria um

A questo agora explicar:


Como o organismo estabelece seqncia
de aminocidos que deve estar presente
em cada protena?

antgeno).
Os aminocidos so divididos em

A seqncia de aminocidos das

essenciais, isto , aqueles que precisam

protenas est escrita (codificada) nos

fazer parte de nossa dieta, pois no temos a

genes. Os genes so compostos de outro

capacidade de sintetiz-los e no essenciais

tipo

(aqueles que podemos sintetizar).

nuclicos.

quantidade

de

de

molcula

orgnica,

os

cidos

protenas

necessrias na dieta varia conforme a idade

2.2.CIDOS NUCLICOS

e o estado fisiolgico. Crianas, gestantes e

Os cidos nuclicos tambm so

lactantes necessitam mais protenas do que

macromolculas polimricas, formadas por

adultos. Um adulto jovem, com intensa

monmeros chamados de nucleotdeos.

atividade fsica, deve consumir em torno de

Cada nucleotdeo formado por uma base

56g diria de protenas. Os alimentos de

nitrogenada,

origem animal, como carne, leite e ovos so

desoxirribose) e fosfato (Figura 10):

um

acar

(ribose

ou

ricos em protenas. Os vegetais tambm tm


protenas porm em quantidades menores.
Por exemplo, uma fatia de po de trigo
integral possui 2 gramas de protena, mas
como

essa

uma

protena

de

baixa

qualidade, um adulto jovem precisaria comer


72 fatias dirias

para obter as 56 g

de

protenas.
Figura 10. Nucleotdeo

11

Estes monmeros se unem para

1) Capacidade de replicao. Com o auxlio

formar dois tipos de polmeros, o DNA (cido

de enzimas, a dupla hlice de DNA se abre,

desoxirribonuclico)

formando fita simples e pode ser duplicada,

RNA

(cido

ribuclico).

originando

Os cidos nuclicos so formados


pela unio de nucleotdeos (Figura 11).

cpias

exatamente

iguais

molcula original.
2) Capacidade de conter a informao da
seqncia de aminocidos que compe as
protenas. As seqncias de nucleotdeos do
DNA determinam a estrutura primria das
protenas.

Figura 11- Molcula de cido nuclico

Na molcula de DNA encontramos as


seguintes bases: adenina (A); citosina (C);
guanina (G) e timina (T) e so chamados de
desoxiribonucleotdeos, porque o aucar a
desoxiribose. A molcula de DNA formada
por uma cadeia dupla, tendo algumas
caractersticas

importantes.

Sempre

que

existir uma adenina em um lado da cadeia,

Figura 13- Replicao da molcula de DNA

teremos uma timina no outro e sempre que


ocorrer uma citosina em um lado da cadeia,

O RNA uma molcula formada por uma

teremos uma guanina no outro. Chamamos

nica cadeia, ou seja, fita simples. Os

isto de complementariedade das bases, ou

nucleotdeos do RNA so chamados de

seja, as timinas sempre fazem par com as

Ribonucleotdeos porque o acar a ribose.

adeninas e as citosinas sempre pareiam com

No RNA a base uracila (U) substitui a Timina

as guaninas.

do DNA. Os diferentes tipos de RNAs so


extremamente importantes para fazer com
que a informao gentica contida no DNA
seja

traduzida

em

uma

seqncia

de

aminocidos, originando as protenas (ser


Figura 12. Estrutura da molcula de DNA
mostrando a complementariedade das bases A=T;
C=G.

visto adiante).

2.3. GLICDIOS
Duas

propriedades

resultam da estrutura do DNA:

importantes

Os glicdios, tambm chamados de


carboidratos ou acares so poliis de
aldedos ou cetonas, divididos em:

12

a) Monossacardeos - como por exemplo a


glicose e a frutose. Os monossacardeos
podem unir-se formando dissacardeos. Por
exemplo, a sacarose (acar de cana) a
unio de uma frutose e uma glicose. A
maltose formada pela unio de duas
molculas de glicose e a lactose (acar do

As

principais

funes

desempenhadas pelos glicdios so:


-ENERGTICA: so fonte de energia
para a clula (ou reserva de energia)
- ESTRUTURAL: formam as paredes
das clulas vegetais
-RECONHECIMENTO:

esto

leite) formada pela unio de galactose e

envolvidos no processo de reconhecimento

glicose.

clula-clula

nos tecidos dos animais

pluricelulares, atravs do glicocalix.

2.4. LIPDIOS
Os

lipdios

ou

gorduras

desempenham importante papel na estrutura


e funo celular.

H vrias classes de

lipdios e cada uma possui funes biolgicas


especficas.
Os cidos graxos

so a unidade

fundamental da maioria dos lipdios e junto


com os triglicerdios constituem as principais
gorduras

neutras

que

funcionam

como

reservas energticas.

Figura

14

-Exemplo

de

alguns

monossacardeos
b) Polissacardeos - so formados pela
unio

de

vrios

POLMEROS

DE

monossacardeos

(so

GLICOSE)

trs

Os

Fig 15 - Exemplos de cidos graxos.

polissacardeos mais importantes so o


AMIDO (reserva de energia dos vegetais), o
GLICOGNIO

(reserva

de

energia

dos

os

fosfolipdios

os

esfingolipdios so lipdios derivados dos

animais) e a CELULOSE (constituinte da

triglicerdios.

parede das clulas vegetais). A diferena

cadeias de cido graxo substituda por uma

entre esses polissacardeos est na ligao

estrutura qumica POLAR. Desta forma,

Nesses

lipdios,

uma

das

qumica que une as glicoses.

13

estas molculas tero uma parte polar

muito especfica, a amilase desdobra o

(hidroflica) e uma parte apolar (hidrofbica)

amido em glicose.

Os fosfolipdios e esfingolipdios so

Se ao invs de acrescentar saliva na

componentes fundamentais das membranas

mistura, acrescentssemos os aminocidos

biolgicas (ser visto adiante).

que compem a amilase, iria ocorrer a

Outra classe de lipdio a dos

reao de degradao do amido? claro que

esterides que podem ter funo estrutural,

no. Uma pilha de tijolos no o mesmo que

como o colesterol que um componente da

uma casa. Uma mistura de aminocidos

membrana

funo

isolados, no possui as propriedades da

desempenhada pelos esteris a hormonal,

protena que poderia ser formada pela unio

como

desses aminocidos.

plasmtica.

por

exemplo

Outra
a

testosterona,

progesterona.

Para que uma protena desempenhe


uma funo definida, necessrio que ela
tenha uma forma especfica. A estrutura

ESTRUTURAS SUPRA-MOLECULARES E A EMERGNCIA DE NOVAS


PROPRIEDADES
Um

conceito

importante

para

entendimento dos seres vivos o de


propriedades emergentes. Vejamos um
exemplo

bem

simples:

um

professor

demonstra a ao enzimtica da amilase


salivar, atravs de um experimento muito
comum, que pode (e deve) ser realizado em
sala de aula. Nesse experimento, uma
soluo de Maizena fervida e distribuda
em dois frascos. Em apenas um dos frascos
adiciona-se um pouco de saliva e ,depois,
uma gota de lugol (ou soluo de iodo)
acrescentada em ambos os frascos.
Neste caso, a alterao de cor que
se observa no frasco explicada pelo fato da
enzima

presente

na

saliva

ter

PROPRIEDADE de degradar o amido da


Maizena. Essa uma propriedade cataltica

tridimensional de uma protena resultado


da unio de aminocidos em uma seqncia
tambm especfica. Portanto, a ligao
sucessiva de um aminocido ao outro que ir
determinar a forma final de uma protena e
sua capacidade funcional.
As

macromolculas

apresentam

propriedades novas que no esto presentes


nos seus componentes isolados. A amilase,
por exemplo, tem a capacidade de degradar
o amido, porm esta propriedade no est
presente em nenhum dos aminocidos que
compem a amilase. Quando, pela unio de
aminocidos em uma seqncia especfica, a
macromolcula amilase se forma, EMERGE
uma

nova

propriedade

(capacidade

de

degradar a amido) que no est presente nos


seus componentes.
As propriedades emergentes so um
atributo

da

forma

esterioqumica

da

macromolcula. Do mesmo modo que a


forma da tesoura confere a esse instrumento
uma

propriedade

nova

(capacidade

de

14

Os

cortar), a forma da protena amilase lhe


permite catalisar a reao amidoglicose.

ribossomos

so

estruturas

capazes de auto-montagem, isto , basta

celular

colocarmos todos os componentes juntos e,

depende das propriedade emergentes de

em condies fsico-qumicas apropriadas,

suas macromolculas. Mas as clulas no

automaticamente

so formadas apenas de macromolculas,

ribossomo montam-se. possvel, portanto,

elas

desmontar e remontar os ribossomos em

Muito

do

possuem

funcionamento

tambm

ESTRUTURAS

estruturas

supramoleculares

formadas

sub-unidades

do

tubos de ensaio. E sempre, aps a auto-

SUPRAMOLECULARES.
Estruturas

as

por

so
vrias

macromolculas. Um exemplo de estrutura

montagem,

uma

PROPRIEDADE

nova

EMERGE : os ribossomos so capazes de


fazer sntese de protenas.
Todas as organelas intracelulares

supramolecular o ribossomo (Figura 16).


Cada sub-unidade do ribossomo formada

so

por vrias macromolculas. A sub-unidade

mitocndria, por exemplo, formada por um

maior formada por 3 diferentes RNAs

grande nmero de protenas, lipdios, DNA,

ribossmicos: um com 120 nucleotdeos

RNA... que formam suas membranas, os

(nts), outro com 160 nts e o terceiro com

seus ribossomos, corpsculos elementares,

4700 nts. Alm dos RNAs a sub-unidade

etc...

maior apresenta 49 diferentes protenas

associarem,

(denominadas L1, L2, L3, ... at L49). Na

possui propriedades novas que no esto

sub-unidade menor temos apenas um rRNA

presentes nos componentes isolados. Por

de 1900 nts associado a 33 protenas

exemplo, a sntese quimiosmtica do ATP s

(denominadas S1, S2, ..at S33).

possvel graas estrutura da mitocndria


que

estruturas

Estas

supramoleculares.

macromolculas,
formam

dada

pela

ao

se

mitocndria

que

totalidade

de

seus

componentes associados, e no pode ser


realizada

apenas

por

um

ou

outro

componente da mitocndria. Este outro


exemplo de uma propriedade emergente, que
s se manifesta a partir do surgimento de
uma

estrutura

com

organizao

supramolecular.

Figura 16 .Ribossomo dos eucariontes

15

UNIDADE II

dependia exclusivamente do microscpio


ptico e de alguns corantes. Neste perodo, o
que mais chamava a ateno, quando se

A ORGANIZAO CELULAR

observava uma clula, era a presena do

O tema de estudo da Biologia, a

ncleo. Posteriormente, verificou-se que, no

VIDA uma propriedade emergente de uma

ncleo, estavam os cromossomos e inferiu-

supraestrutura: a clula. A Vida originou-se

se que estes eram depositrios dos genes.

na Terra a +/- 3.5 bilhes de anos atrs

Assim, a idia de que, no ncleo,

quando montaram-se as primeiras clulas.

estava o controle do funcionamento celular

O CONCEITO DE CLULA MNIMA

relativamente antiga, porm por muito tempo

A definio mais comum para clula


:

unidade

morfo-fisiolgica

dos

seres

no foi possvel saber exatamente como


esse controle era exercido.

vivos. Mas o que caracteriza uma clula?


Quais so os componentes MNIMOS para
que uma estrutura possa ser considerada
uma clula?
De

uma

forma

geral,

quando

perguntamos como constituda e como


funciona uma clula, a resposta mais comum
:
...formada por membrana, citoplasma e

Figura 17. Aspecto geral da organizao

ncleo. A membrana reveste a clula,

celular de um procarionte.

fazendo

as

trocas

citoplasma

contm

responsveis
clula

com

pelo
o

as

meio,

organelas

funcionamento

ncleo

controla

CARACTERSTICAS BSICAS DE UMA

da

CLULA (uma concepo atual)

este

Se a descrio de uma clula como

funcionamento.

um conjunto de membrana, citoplasma e

Devemos considerar, entretanto, dois

ncleo uma viso originria do fim do

aspectos importantes:

sculo

1) As bactrias e demais procariontes so

caractersticas da organizao celular em

organismos celulares e no possuem ncleo;

uma viso contempornea?

2) Quando dizemos que o ncleo controla o


funcionamento

celular,

no

fornecemos

nenhuma idia de como isto ocorre.


Esta

viso

da

sculo passado e, nessa poca, o estudo da


e

do

funcionamento

quais

seriam

as

Para responder essa questo temos


que pensar em caractersticas que sejam
comuns a todas as clulas, sejam elas

constituio

funcionamento celular originria do fim do


estrutura

passado,

procariticas e eucariticas.
So quatro as partes essenciais que
podemos encontrar em toda clula:

celular
16

Membrana - delimita a clula, separando

ambiente. Estas trocas so controladas pela

os demais elementos celulares do meio

membrana plasmtica. Por isto a principal

ambiente e regulando as trocas da

caracterstica

clula com o meio;

PERMEABILIDADE SELETIVA.

da

membrana

Maquinaria metablica conjunto de

Assim, a membrana permevel

enzimas e protenas capazes de utilizar

porque deixa passar substncias atravs

a matria e energia do meio ambiente

dela, porm, faz isso seletivamente, ou seja,

para realizar as funes celulares;

escolhendo o que deve entrar e sair da

Informao gentica -

clula.

como,

quando

informao de

onde

montar

as

Para se entender como a membrana

protenas da mquina metablica e

realiza

demais protenas estruturais da clula

seletiva,

Maquinaria de sntese protica


constituda por ribossomos, mRNAs e
tRNAs

capazes

informao

de

gentica

transformar
em

metablica.

funo

temos

de

que

permeabilidade

estudar

como

membrana constituda quimicamente e


como estes componentes atuam.

maquinaria

esta

Os

lipdios

da

membrana

so

diferentes dos lipdios que so usados como


reserva

de

energia

(cidos

graxos

Estes componentes celulares podem

triglicerdios).

facilmente

nos

energticos so insolveis em gua, os

Mycoplasma, um tipo de bactria, que so os

lipdios que compe a membrana (chamados

seres celulares estruturalmente mais simples

de fosfolipdios, esfingolipdios e outros) so

que conhecemos (Ver Figura 17).

ANFIPTICOS, ou seja, tm uma parte da

ser

reconhecidos

Enquanto

os

lipdios

molcula que eletricamente carregada e


Vamos, a seguir, tratar de cada uma

hidroflica (solvel em gua), e outra parte

dessas partes que compem o que podemos

que hidrofbica (insolvel em gua) -

chamar de uma clula mnima.

Figura 18.

MEMBRANA CELULAR
O que delimita a clula do resto do
universo uma fina membrana LIPO-

Figura 18- .Estrutura de um

PROTICA chamada membrana plasmtica

Fosfolipdio

ou membrana celular.
A clula no pode se isolar do meio

Tendo esta caracterstica anfiptica,

em que se encontra, precisando manter uma

os fosfolipdios, quando colocados em gua,

constante troca de matria e energia com o

vo ter uma organizao tpica, formando

17

finas membranas em BICAMADAS, conforme

protenas da membrana tambm tero uma

representado na Figura 19.

parte hidroflica e uma parte hidrofbica.

Figura 19 Formao de bicamadas lipdicas


quando os fosfolipdios so colocados em gua.

Desta forma, sempre que colocarmos


lipdios anfipticos em gua, formar-se-o

Figura 20. Estrutura das protenas

bolhas e a gua estar tanto do lado de

da membrana

dentro da bolha, quanto do lado de fora


(Figura 19).
A gua e todas as substncias
hidrossolveis,

como

os

acares,

aminocidos, nucleotdeos, por no serem


solveis em lipdios, no podem passar pela
camada hidrofbica da membrana.

Por terem tanto regies hidrofbicas como


regies hidroflicas, as protenas anfipticas
vo se intercalar entre os fosfolipdios. (figura
20 e 21)
O

Modelo

do

MOSAICO

FLUDO das membranas biolgicas explica


Como, ento, a membrana realiza a sua
funo de permeabilidade seletiva?

membranas. Segundo este modelo, temos

S existe permeabilidade seletiva


graas ao do outro componente das
membranas:

as

PROTENAS.

organismos esto relacionadas s protenas.


protenas

das

membranas

tambm so ANFIPTICAS, ou seja, elas


tm uma parte formada por aminocidos
polares (com carga eltrica) e outra parte
constituda
aminocidos

preponderantemente
apolares.

Desta

uma bicamada de lipdios com protenas


intercaladas nesta bicamada.

Como

sempre, as atividades de funcionamento dos


As

como se organizam e funcionam essas

forma,

As

partes hidroflicas dos

fosfolipdios e das protenas ficam voltadas


para as superfcies interna e externa da
membrana em contato com a gua. As partes
hidrofbicas
protenas

dos

ficam

na

fosfolipdios
regio

interior

das
da

membrana (figura 21)

com
as

18

TRANSPORTE DE SUBSTNCIAS PELA


MEMBRANA
As

substncias

passam

pela

membrana de trs formas diferentes:


1) Difuso simples: Algumas substncias
como o O2, CO2, lcool e ter, por serem
solveis tanto em gua como em gorduras,
podem

passar

fosfolipdios.
Figura

21-

Modelo

do

MOSAICO

FLUIDO da membrana biolgica

diretamente

Para

estas

pelos

substncias,

membrana no constitui uma barreira, e suas


molculas vo difundir de onde elas esto
mais concentradas para aonde esto menos

Este

modelo

chamado

de

concentradas (1 na Figura 22).

MOSAICO, porque os componentes da


membrana se organizam como um mosaico
(associao de pequenas peas que se
encaixam ou sobrepe para formar uma
estrutura).

denominao

de

Mosaico

FLUDO justificada pelo fato de seus


componentes (fosfolipdios e protenas) no
serem

fixos

na

membrana,

podendo

apresentar movimentos laterais.


Podemos resumir a atuao dos
componentes da membrana da seguinte

Figura 22 Passagem de substncias


atravs da membrana

forma:
a) OS FOSFOLIPDIOS atuam como uma

A maioria das substncias no pode

barreira, impedindo que as substncias que

atravessar livremente pela membrana e

esto dentro da clula saiam e evitando que

precisam

as substncias que esto fora da clula

passagem pode ocorrer de duas maneiras:

entrem.

2)

b)

AS

portes

PROTENAS
(tecnicamente

funcionam
chamados

como
de

passar

Transporte

pelas

protenas.

passivo

ou

Essa

difuso

facilitada. O transporte passivo ocorre,


quando

uma

substncia

est

mais

CARREADORES ou POROS), por onde

concentrada de um lado da membrana do

passam as molculas;

so as elas que

que do outro, e h interesse da clula que

reconhecem as substncias que devem

esta substncia passe pela membrana.

entrar ou sair da clula.

Protenas

especficas,

CARREADORES,

chamadas

permitem

que

de
essas

19

substncias atravessem (geralmente atravs


de

aberturas

ou

canais

nas

prprias

protenas).

NA INTERNET:
Entenda melhor a membrana celular comparando-

No caso do transporte passivo, no


h gasto de energia, porque a favor do

com

bolhas

de

sabo:

www.sbbq.org.br/revista/artigo.php?artigoid=41

gradiente de concentrao ( 2 na Figura 22).


3) Transporte Ativo: Quando do interesse
da clula transportar substncias contra um
gradiente de concentrao, (ou seja, de onde
tem pouco de uma substncia para aonde j
existe bastante dessas mesmas molculas) a
clula precisa gastar energia para fazer esse
transporte (3 na Figura 22).
Como

podemos

ver,

somente

molculas no muito grandes podem entrar e


sair da clula pelos carreadores. Molculas
grandes como as protenas, cidos nuclicos
ou polissacardeos, somente em condies
muito

especiais

podem

passar

BRINCAR COM BOLHAS DE SABO PODE


AJUDAR A ENTEDER A

pela

membrana.
Molculas

grandes

(macromolculas), assim como estruturas


ainda maiores como vrus ou clulas no
passam diretamente pela membrana celular,
e

entram

na

clula

atravs

de

mecanismos de TRANSPORTE DE MASSA,


chamado

endocitose

(fagocitose

pinocitose). Mas vale ressaltar que atravs


da fagocitose e pinocitose as substncias ou
estruturas

entram

passam

na

clula,

membrana

envolvidas em membrana.

mas

pois

no

entram

MEMBRANA SEGUNDO O MODELO


MOSAICO-FLUIDO

20

MAQUINARIA METABLICA

os em energia ou em outras molculas


estruturais da clula; as protenas motoras

O que permite que uma lactobactria (bactria do iogurte) se desenvolva

que produzem movimento dos componentes


celulares, etc...
No caso especfico do exemplo que

to bem no leite, transformando-o em iogurte


procrie

estamos trabalhando, a aceto-bactria ter

maravilhosamente no vinho, transformando-o

as protenas de membrana para retirar do

em vinagre? Se colocarmos a bactria do

vinho os nutrientes apropriados. No interior

vinho no leite, ela no vai se desenvolver, o

da clula, enzimas transformaro estes

mesmo acontecendo com a bactria do

nutrientes em mais macromolculas de

iogurte, quando colocada no vinho. Por que

aceto-bactria. Enfim, possibilitam o sonho

isto acontece?

primordial de toda aceto-bactria: tornar-se

uma

aceto-bactria

se

Cada clula, mesmo simples como

duas aceto-bactrias...

uma bactria, possui enzimas e outras


protenas que a capacita a desempenhar as

INFORMAO GENTICA

funes para as quais est adaptada. A


lacto-bactria possui enzimas para quebrar a

Porque uma aceto-bactria colocada

lactose e as protenas do leite. J a aceto-

no leite no produz as enzimas necessrias

bactria possui enzimas para transformar o

para usar o acar e as protenas do leite

lcool em cido actico e usar outros

como nutrientes? Ou, colocando a mesma

nutrientes encontrados no vinho. Estas duas

questo em um outro exemplo: sabemos que

bactrias possuem diferentes maquinarias

a celulose um polissacardeo formado de

metablicas que as tornam adaptadas para

molculas de glicose. No entanto, se por um

explorar recursos diversos.

motivo

As

diferenas

que

ocorrem

no

qualquer

(celulose)

para

tivssemos

comer,

papel

acabaramos

funcionamento entre clulas so explicadas

morrendo de inanio por falta de energia,

pela variao nas protenas existentes nelas.

embora estivssemos ingerindo um polmero

Chamamos

de

maquinaria

construdo com glicose. Outros organismos,

como cavalos, vacas ou baratas so capazes

protenas que vo ser responsveis pelo

de aproveitar a glicose presente na celulose

funcionamento da clula (ou seja, pelo

do papel. Nos dois exemplos, o que falta a

metabolismo

as

informao gentica de como fazer as

captam

enzimas necessrias para aproveitar uma

metablica

protenas

conjunto

celular).

da

de

Por

membrana

enzimas

exemplo,
que

nutrientes do meio externo e os transportam

determinada

para o interior da clula; as enzimas que vo

nutriente.

transformar estes nutrientes, atravs de

complexas rotas bioqumicas, transformando-

molcula
informao

como

fonte

gentica

de
est

armazenada nas clulas sob forma de cidos

21

nuclicos.

Para

(procariticas

todas

ou

macromolcula

as

clulas

eucariticas),

informacional

a
DNA.

seqncia de DNA que essencial para uma


funo especfica. Trs tipos de genes so
reconhecidos:

Somente alguns vrus apresentam suas


informaes armazenadas sob forma de
RNA.

1)

genes

protenas.
A

informao

gentica

total,

carregada por um organismo ou clula,

So

que

codificam

transcritos

para

para
RNA

mensageiro (mRNA) e subseqentemente


traduzidos, nos ribossomos, para protenas.

denominada de GENOMA. Por exemplo, na


nossa espcie, o genoma das clulas
somticas constitudo por 46 molculas de

2) genes que especificam RNAs

DNA. Cada uma dessas molculas se

funcionais,

organiza sob forma de um cromossomo, ou

(rRNA); RNAs transportadores (tRNA) e

seja, cada cromossomo contm uma nica

RNAs

molcula

regulatrias na clula como os snoRNA e

de

comeando

DNA
em

cromossomo

que

uma

contnua,

extremidade

prolongando-se

do

como os RNAs ribossmicos

que

desempenham

funes

miRNA.

sem

interrupo at a outra extremidade. Temos


tambm uma 47a molcula de DNA que o
cromossomo mitocondrial.

3) genes no transcritos. So
seqncias de DNA que, embora no sejam

O genoma de clulas mais simples,

transcritas, desempenham alguma funo.

como as bactrias, est organizado em um

Por exemplo, os genes de replicao,

nico cromossomo circular. Em torno de

envolvidos na duplicao do DNA; genes de

2000 genes esto presentes no genoma de

recombinao,

uma bactria, como a Escherichia coli.

envolvidas no processo de crossing-over;

O cromossomo bacteriano como de


E. coli

possui aproximadamente 4,2x 10

pares de bases. Ou seja, se contssemos o


nmero

de

diferentes

que

so

seqncias

telomricas,

proteo

das

seqncias

envolvidas

extremidades

na
dos

cromossomos...

nucleotdeos

ATCCGGTAACC... em uma das fitas do


DNA,

este

de,

Assim, o genoma contm um grande

aproximadamente, 4.200.000 nucleotdeos.

nmero de genes que, quando necessrios,

na

so ativados, ou seja, so copiados em RNA

seqncia

de

nmero
bases

seria
desta

imensa

molcula de DNA que est escrito a


informao

gentica,

nos

genes

(ver Figura 23).

dessa

bactria.
Estudos moleculares recentes tem
ampliado o conceito de gene: uma
22

Figura 23) Exemplo hipottico do


genoma de um procarionte O genoma
contm muitos genes. Alguns so genes
para tRNA, outros para rRNA e outros ainda
codificam para polipeptdios (mRNA).
A transcrio de um gene depende
da regio regulatria desse gene. Um dos
principais elementos da regio regulatria do
gene o stio ou regio promotora que
corresponde ao local de entrada da RNA

Figura 24) Processo de transcrio dos genes


ribossmicos (rRNA); dos RNAs transportadores
tRNA e dos RNAs mensageiros mRNAs.
mostrado tambm, a unio de todos estes
componentes no processo de TRADUO, que
a sntese de protenas.

polimerase. Essa enzima, responsvel pela


transcrio de DNA em RNA, reconhece a
regio promotora do gene, se associa a esse
conjunto de bases e passa a se deslocar pela
fita molde de DNA, fazendo a ligao entre
os ribonucleotdios complementares fita de
DNA. No fim do processo de transcrio
temos uma fita de RNA que,aps passar por
algumas modificaes (processamento do
RNA), torna-se funcional e poder executar
as diferentes funes necessrias sntese
de protenas.

Figura 25 Fluxo da informao gentica


dentro da clula.
O DNA se duplica pelo processo chamado
de transcrio. A informao nele contida
copia em molculas de RNA em um
processo chamado de transcrio. Os
RNAs participam do processo de sntese
de protenas (traduo)

23

MAQUINARIA DA SNTESE PROTICA

tenha

No citoplasma existem todos os


elementos

necessrios

polipeptdios,

que

sntese

chamamos

uma

trinca

de

bases

que

seja

complementar as trs bases do mRNA que

de

esto naquele momento no stio A. A regio

de

do tRNA que entra em contado com as bases


do

MAQUINARIA DE SNTESE PROTICA:

mRNA

dentro

do

ribossomo

denominada de anticdon. De um modo


simplificado, as molculas de tRNAs so

> ribossomos

representadas

>RNAs transportadores

como

tendo

em

uma

extremidade a regio do cdon e na outra a

> RNA mensageiro

regio de ligao com o aminocido. Os


tRNAs que possuem o mesmo anticdon

A seqncia de eventos que resulta

transportam

mesmo

aminocido.

Por

na sntese de uma protena pode ser

exemplo, se o anticdon for AAA, esse tRNA

resumida da seguinte forma :

estar

c Transcrio do DNA em RNA (nos


1, 2 e 3 na Figura 21).

transportando

para

dentro

do

ribossomo o aminocido fenilalanina. Alguns


aminocidos so transportados por mais de

d Processamento do RNA para que


se torne funcional (ocorre em eucariontes).

um tipo de tRNAs. Por exemplo, os tRNAs


que possuem anticdons GCA, GCG, GCU

Montagem do ribossomo - a

ou GCC transportam (ver tabela do cdigo

subunidade menor do ribossomo reconhece

gentico) para o ribossomo arginina. Desse

o incio da fita de mRNA e se liga ao mRNA .

modo, as trs bases do mRNA (cdon) que

Essa ligao permite que a subunidade maior

ocupam o stio A, ao selecionar qual o tRNA

se associe subunidade menor, formando-se

que permanecer dentro do ribossomo,

assim um ribossomo capaz de realizar a

determinam qual o aminocido que ser

sntese de protenas.

adicionado cadeia polipeptdica. O primeiro

Primeira ligao Peptdica - o

ribossomo se desloca sobre a fita de mRNA


e quando encontra nessa fita a seqncia de
base AUG, cria no seu interior, dois stios,
um destinado a receber os tRNAs que trazem
os aminocidos para serem ligados cadeia
polipeptdica (stio A) e outro que ser
ocupado pelo transportador que mantm a
cadeia

polipeptdica

nascente

(stio

P).

tRNA a ocupar o stio A, deve ter anticdon


complementar trinca AUG. Esses tRNAs
sempre transportam uma metionina, portanto
esse o primeiro aminocido de toda a
sntese de protenas. A metionina inicial pode
ser removida depois, o que significa que nem
todas as protenas funcionais tero esse
aminocido presente no incio da cadeia.

Crescimento

da

cadeia

Qualquer tRNA pode entrar no ribossomo e

polipeptdica - quando os stios A e P esto

ocupar o stio A, porm para que o tRNA

ocupados por tRNAs, que tenham anticodons

permanea nesse stio necessrio que ele

complementares ao mRNA, na parte superior

24

da subunidade maior do ribossomo, ocorre a

polipeptdica.

ligao entre os aminocidos que esses

citoplasma, vrios ribossomos realizando

tRNAs transportam. Quando essa ligao

traduo a partir da mesma fita de mRNA.

ocorre, o ribossomo se desloca sobre a fita

Desse modo, a clula pode originar vrias

de mRNA e esse deslocamento corresponde

molculas da mesma protena com um nico

exatamente a trs nucleotdios. Assim, a

RNA mensageiro.

comum

encontrar,

no

cada ligao entre dois aminocidos, um

h Final da sntese - os ribossomos

novo cdon ocupa o stio A e determina a

seguem se deslocando na fita de mRNA e

entrada de um novo tRNA que trar o

quando o stio A ocupado por uma trinca

prximo aminocido a ser ligado. Com o

UAA, ou UAG ou UGA o crescimento da

deslocamento do ribossomo, o tRNA que

cadeia polipeptdica interrompido. Nenhum

trouxe o ltimo aminocido adicionado passa

tRNA possui anticodons complementares a

a ocupar o stio P e o tRNA, que antes estava

essas trincas e por isso esses codon so

nesse stio, liberado pelo ribossomo,

chamados sem sentido e sinalizam o fim da

podendo voltar a participar da sntese de

traduo. Depois que o ribossomo atinge um

protenas quando estiver de novo ligado a um

desses codon, as subunidades se separam.

aminocido especfico. Por exemplo, na

Figura 26, no incio da traduo, o stio P

associar novamente com a parte inicial de

est ocupado pelo cdon AUG e pelo tRNA

um

da metionina, e o stio A est ocupado com o

processo de traduo.

subunidade
mRNA,

menor
iniciando

pode,

ento,

se

novamente

um

mecanismos

de

cdon UUU e o tRNA da fenilalanina. Aps a


ligao entre os dois primeiros aminocidos
(metionina

fenilalanina),

com

Atravs

dos

deslocamento do ribossomo, o tRNA da

transcrio e traduo, a informao gentica

metionina perde sua ligao com esse

se transforma em maquinaria metablica.

aminocido e sai do ribossomo. O tRNA da

Assim, em uma clula simples como uma

fenilalanina passa, ento, a ocupar o stio P

lacto-bactria,

e se mantm ligado fenilalanina, que por

genoma traduzida, isto , esta informao

sua vez est ligada metiona. medida que

capaz de conduzir a sntese de um bom

cadeia

nmero de protena que estaro aptas a

polipeptdica vai crescendo, sempre ligada ao

utilizar os nutrientes presentes no leite, para

tRNA que acabou de fornecer o ltimo

manter a estrutura celular e ainda criar mais

aminocido.

macromolculas e permitir o crescimento

ribossomo

se

desloca,

Deve-se ressaltar que, logo aps o

informao

contida

no

desta bactria e posterior reproduo.

primeiro deslocamento do ribossomo, o


cdon de iniciao AUG fica liberado e outro
ribossomo pode se associar ao mRNA e
iniciar a sntese de uma segunda cadeia
25

Unidade III
DA CLULA PROCARITICA PARA
A CLULA EUCARITICA.
Podemos dizer que uma bactria
um bom exemplo de uma clula mnima.
Vimos

anteriormente

membrana,

como

maquinaria

atuam

metablica,

informao gentica e a maquinaria da


sntese protica, para fazer uma bactria
funcionar.
Mas se as bactrias so ditas
Figura 26) Processo de traduo de
uma protena. A) montagem do ribossomo B)

clulas mnimas, porque existem clulas


muito mais complexas, as eucariticas.
O que elas possuem que no est

iniciao do processo de traduo C e D)


elongao da cadeia de aminocidos. Cada

presente nas clulas bacterianas?


c Um sistema de membranas que

tRNA que se liga ao ribossomo, deixa um


aminocido.

compartimentaliza as diversas funes da


clula,

A TABELA DO CDIGO GENTICO

chamado

de

SISTEMA

DE

ENDOMEMBRANAS;
d

Uma

rede

de

protenas

filamentosas que do forma e mobilidade


para

clula,

chamada

de

CITOESQUELETO.

A INFORMAO GENTICA NOS EUCARIONTES


A
eucariontes

informao

gentica

apresenta

dos

algumas

peculiaridades. Nas clulas eucariontes o


DNA

est

sempre

complexado

com

protenas. As protenas que se associam ao


DNA so de dois tipos: as histonas ou
Diga que protena resulta do seguinte mRNA:
UUAUGGUUAGUCGUAGAUAUUGA

protenas bsicas e as protenas cidas.


Quando a clula no est em diviso
(durante a interfase),

a molcula de DNA

26

apresenta seu grau mnimo de enrolamento,


constituindo

Cromatina.

Em (C) a fibra de nucleossomos se

Conforme

enrola sobre si mesma, originando a fibra em

podemos ver na Figura 27, a cromatina

solenide, em um formato de fio de

apresenta vrios graus de compactao: em

telefone; nesse formato de solenide que

(A) temos a molcula de DNA com seu

a cromatina se encontra no ncleo na

dimetro de 2 nammetros (nm = 10

m)

interfase.

no associado a nenhum tipo de protena. A


Algumas protenas cidas unem as

dupla hlice sem protenas associadas no


encontrada no ncleo das clulas, pois em
seu estado funcional o DNA eucaritico
sempre est ligado a protenas. Em (B) a
molcula de DNA apresenta-se enrolada nas
histonas,

formando

as

fibras

dos

nucleossomos com 11 nm. Quando a clula


inicia o processo de diviso, pode-se notar
uma mudana no aspecto do ncleo. A
medida que a clula avana na fase de
prfase, possvel visualizar, no ncleo, uma

fibras da cromatina formando s alas de


cromatina (letra D na figura). As alas vo
sendo unidas em grupos cada vez mais
condensados, no centro da cromtide. No fim
desse processo, o cromossomo atinge seu
grau

mximo

de

dobramento,

que

corresponde ao cromossomo metafsico, ou


seja, ele observvel na fase de metfase
da diviso celular. (letras E e F na figura
abaixo).

condensao progressiva da cromatina.


Para dar uma idia de como longo
os fios de cromatina, apresentamos, na
Figura 28, a cromtide de um cromossomo
mittico

que

teve

as

protenas

cidas

removidas. Esse tratamento permitiu que as


alas constitudas pela fibra de cromatina se
desprendessem do centro da cromtide.
A informao gentica est escrita
na

seqncia

de

bases

que

DNA

apresenta. O genoma nuclear de uma clula


humana

contm,

aproximadamente,

6.000.000.000 pares de bases, compondo as


46 molculas de DNA dos cromossomos. O
menor cromossomo humano, o de nmero
Figura 27- ver texto

21, possui 50.000.000 pares de bases. Voc


pode imaginar isso?

27

Ter

genomas

caracterstica

dos

organismos

grandes

uma

eucariotes.

apresentam

Esses
grandes

As

principais

vantagens

da

compartimentalizao celular so:

Permitir a separao e a associao dos

quantidades de DNA em suas clulas, mas

sistemas enzimticos;

boa parte desse DNA no considerado

Aumentar a superfcie interna da clula,

gene, pois no transcrito, e no apresenta


funo para a clula.

aumentando o campo de ao enzimtica e


facilitando

as

reaes

qumicas,

principalmente as que ocorrem em cadeia;

Permitir diferentes valores do pH


intracelular.
Componentes

do

sistema

de

endomembranas

Retculo endoplasmtico:
O

retculo

endoplasmtico

constitudo por endomembranas que limitam


tbulos

(pequenos

tubos)

cisternas

(cavidades em forma de sacos achatados).


O retculo endoplasmtico dividido em:

cReticulo endoplasmtico liso-

Figura 28 visualizao de uma cromtide em um


cromossomo

forma

clulas
todo

eucariticas

dividido

em

so

estruturas

membranosas. Cada compartimento tem a


sua funo especfica.
As membranas que delimitam estas
organelas so do tipo mosaico fludo. Assim,
os lipdios destas membranas isolam os
contedos destes compartimentos e as
protenas controlam o que deve entrar ou sair
de

cada

compartimento.

enzimas

especificas

reaes

qumicas

Alm

disso,

proporcionam
caractersticas

funcionamento de cada organela.

est

envolvido

em

sntese de lipdios e desintoxicao celular;

compartimentalizadas, isto , possuem o


citoplasma

tbulos,

transporte e armazenamento de substncias,

SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS
As

de

tem a

as
do

dRetculo

endoplasmtico

rugoso-

possui ribossomos aderidos a sua superfcie


citoplasmtica; como os ribossomos fazem a
sntese protica, o retculo endoplasmtico
rugoso est envolvido na sntese protica,
alm de transporte e armazenamento de
substncias (principalmente protenas).
Complexo de Golgi:
formado por vrias vesculas ou cisternas
achatadas em forma de discos. Nestas
vesculas ocorre a maturao (modificaes
qumicas) de substncias (principalmente
protenas
ribossomos
rugoso).

que
do

foram

sintetizadas

retculo

pelos

endoplasmtico

Aps esta maturao, essas

28

protenas tero dois destinos: c podem ser

temos as clulas glandulares. As clulas do

enviadas para fora da clula (secreo);d

pncreas produzem insulina, que uma

podem ser enviadas para outra organela


(lisossomo)

para

participar

da

digesto

protena importante para todas as clulas do


organismo. A esta exportao de substncia
chamamos SECREO CELULAR.

intracelular.

secreo

celular

tem

vrias

FASES. Vamos ver o exemplo da secreo


da insulina para entendermos estas fases. A
insulina uma protena, portanto, tem uma
seqncia especfica de aminocidos. Esta
seqncia est codificada no gene da
insulina que est no ncleo da clula. n A
primeira fase da secreo celular ocorre
ento, no ncleo da clula, onde o gene
transcrito em RNA mensageiro (mRNA). o
Este

mRNA ento processado e sai do

ncleo. No citoplasma, ele ir se ligar aos


ribossomos

no

retculo

endoplasmtico

rugoso (RER) e, l, ocorre a sntese da


protena (insulina) que entra no RER.p A
insulina transportada do RER at o
Figura 29- -Sistema endomembranas da clula eucaritica

Complexo de Golgi, onde sofrer algumas


modificaes

(amadurecimento)

ser

A Figura 29 apresenta o esquema de uma

empacotada em vesculas.q As vesculas

clula eucaritica:

produzidas

pelo

mp=memb. plasmtica; ri= ribossomos; mi=

chamadas

vesculas

mitocndrias; REG= retculo endoplasmtico

levedas para fora da clula. Neste caso, a

granular (rugoso); REA= ret. end. agranular

insulina cair na corrente sangunea e ser

(liso); c= centrolo; G= golgi; Li= lisossomos;

levada para todas as clulas do organismo.

Complexo

de

Golgi,

secretoras,

sero

Pe= peroxissomos; vs= vescula secretora;


ve=

vescula

endoctica;

mv=

microvilosidade.

Lisossomos:
So vesculas que contm hidrolases
cidas (enzimas digestivas que atuam em pH

Secreo celular:

cido) e esto envolvidas no processo de

Muitas clulas produzem substncias

digesto intracelular.

de exportao, isto , so substncias que


vo atuar fora da clula. Como exemplo,

29

Digesto intracelular:

vezes

lisossomo

primrio

Chamamos de digesto intracelular a quebra

envolve partes da prpria clula, que por

de macromolculas como protenas, cidos

algum motivo no esto mais funcionais,

nuclicos

seus

formando o AUTOFAGOSSOMO, que um

no

lisossomo que digere uma parte da clula

interior da clula. Para fazer estas quebras,

(AUTOFAGIA - auto= por si prprio / fagos=

so necessrias enzimas (PROTEASES,

comer ).

respectivos

polissacardeos
monmeros,

em

ocorrendo

DNAses, etc...). Estas enzimas no podem


ficar soltas no interior da clula, pois

Como podemos notar, tanto na digesto

quebrariam as protenas, DNA.... da prpria

celular como na secreo celular, nenhuma

clula. Por isso elas so isoladas no interior

parte do sistema de endomembranas atua

de um compartimento, os lisossomos aonde

sozinha, ao contrrio, so processos em que

ocorre a digesto intracelular.

vrias partes do sistema de endomembranas

digesto

intracelular

tambm

atuam em conjunto.

ocorre em FASES: nop as trs primeiras


fases da digesto so idnticas a secreo

Peroxissomas:

celular, uma vez que para fazer digesto,

Os

precisamos

pequenas

enzimas

que

quebrem

peroxissomas

ou

vesculas

microssomas
de

forma

so

esfrica,

macromolculas, e enzimas so protenas, e

semelhantes aos lisossomos, porm as

a mensagem de como fazer as protenas

enzimas que carregam so muito diferentes.

esto nos genes; q na quarta fase, ocorre a

Os

internalizao do que vai ser digerido atravs

(peroxidases,

da

vescula

fagocitose

ou

internalizar

endoctica,

carregam

catalases

OXIDASES
superoxido

ou

seja,

por

dismutase) que so enzimas que quebram as

clula

vai

formas

dentro

de

pinocitose,
alimento

peroxissomas

ativas

do

oxignio

(RADICAIS

uma

LIVRES). Como exemplo de radicais livres

vescula (vescula endoctica) e r ocorre a

podemos citar a gua oxigenada (H2O2). A

unio da vesicula endoctica com o lisossoma

gua

primrio (produzido no complexo de golgi,

perxido de hidrognio uma molcula muito

contendo as enzimas j prontas para atuar

reativa, podendo reagir com as protenas e

na digesto). Da unio da vescula endoctica

outras macromolculas quebrando-as. Por

com o lisossomo primrio formar-se- o

isso muitas pessoas usam gua oxigenada

lisossoma

para branquear os cabelos, pois a molcula

digesto. Aps a digesto, os monmeros

de H2O2 quebra a melanina que uma

sero lanados para o hialoplasma (lquido

protena que d a cor ao cabelo.

secundrio,

onde

ocorrer

que envolve todos os compartimento do

oxigenada,

No

interior
de

chamada

de

reaes

tambm

nossas
qumicas

de

clulas,

sistema de endomembrana), onde serviro

milhares

esto

para a clula montar novos polmeros.

continuamente sendo realizadas, a estas

30

reaes chamamos METABOLISMO. Muitas


reaes

metablicas

produzem,

normalmente, muitas formas reativas de


oxignio do tipo da gua oxigenada, ou
mesmo

alguns

mais

(O2-).

superoxido

reativos,

como

Para impedir que estes

radicais livres degradem as nossas prpria


protenas

DNAs,

as

nossas

clulas

produzem algumas enzimas (oxidases) que


degradam

estes

enzimas

radicais

so

livres.

Estas

armazenadas

nos

PEROXISSOMAS.
Crianas

que

nascem

com

um

defeito gentico em que estas enzimas no

Figura 30- Esquema trimensional do sistema


de endomembranas. Podemos ver o REG na
forma de cisternas (sacos achatados) e o
REL na forma de tbulos. O golgi tambm
apresenta a forma de cisternas, porm so
menores e no possui ribossomos aderidos.

so produzidas, morrem nos primeiros dois


anos de vida (Sndrome de Zellsweger).

CITOESQUELETO
Mitocndria:
Um

compartimento

citoplasmtico
mitocndria,

muito
uma

(organela)

importante
vez

que

a
este

A habilidade da clula eucaritica em


adotar variedades de formas, assim como
promover

movimentos

coordenados

dos

compartimento est envolvido no processo

componentes de seu interior, depende de

de transduo de energia (transferncia de

uma

energia

filamentosas

provinda

dos

alimentos,

principalmente de molculas de glicdios e

complexa

rede

de

protenas

chamadas

de

CITOESQUELETO (Figura 31).

lipdios para a molcula de ATP - Adenosina


Tri-Fosfato.

Citoesqueleto:

rede

de

protenas filamentosas que do


Ncleo:

forma e movimento clula

Este que o maior compartimento do


sistema

de

endomembranas

contm

informao gentica, conforme j descrito


anteriormente.

Diferente de um esqueleto feito de


ossos, a rede de protenas do citoesqueleto
muito

dinmica,

reorganizando-se

continuamente. De fato, o citoesqueleto


poderia

bem

citomusculatura,

ser

chamado

de

j que responsvel

pelas mudanas de forma das clulas, pelos

31

movimentos das clulas sobre um substrato


(movimento amebide), atua na contrao
muscular, assim
movimentos

como em todos os

intracelulares,

tais

como

transporte de organelas, segregao dos


cromossomos, etc...

Figura 32- Microtbulos

Os microtbulos se distribuem pelo interior


da clula, a partir

de uma regio central

chamado centro celular, aonde nas clulas


animais encontra-se o centrolo.
Estes microtbulos citoplasmticos
so importantes em estabelecer a forma da
clula, pois, ao se irradiarem a partir do
centro da clula, atuam como se fossem

Figura 31. Clula vista ao microscpio,


evidenciando a rede de protenas do
citoesqueleto

estacas ou colunas.
Os

DIVISES DO CITOESQUELETO:

microtbulos

citoplasmticos

tambm esto envolvidos em movimento dos

O citoesqueleto pode ser dividido em

componentes internos das clulas. Existem

classes

os

protenas enzimticas, como a dinena e a

os

cinesina que quebram ATP e usam a

classes

energia liberada para promover movimento.

diferem em relao ao tipo de protena que

Estas protenas ligam-se s organelas que

as compe, ao padro de distribuio no

precisam ser transportadas no

interior da clula e quanto s funes

clula, e usam os microtbulos como se

desempenhadas na clula.

fossem trilhos, transportando as organelas

trs

microtbulos,
filamentos

de
os

componentes:

microfilamentos

intermedirios.

Essas

interior da

at seu destino.
MICROTBULOS

Alm
citoplasmtica,

So tubos ocos, de 25 nm, formados

formar

de
os

constituir

uma

microtbulos

rede
podem

ORGANELAS MICROTUBULARES.

por uma protena globular, a TUBULINA.

Neste caso, muitos microtbulos e protenas

Milhares destas protenas iro se unir

motoras se unem para formar uma estrutura

(polimerizar) formando os microtbulos.

com uma finalidade especfica. Por exemplo,

32

durante a diviso celular, um feixe de

so

microtbulos se estende de um plo da

intracelulares (ex.: ciclose e movimentos

clula

amebides).

at

outro,

estes

microtbulos

responsveis
Essa

por
funo

movimentos

executada

serviro como trilhos por onde as protenas

principalmente por uma protena motora, a

motoras levaro os cromossomos para os

MIOSINA, que tambm usa o ATP como

plos da clula.

fonte de energia e produz movimentos ao se

Clios e flagelos (ex.: flagelo da

ligar e puxar as fibras de actina.

cauda do espermatozide), so formados


por muitos microtbulos e protenas motoras.
As protenas motoras fazem com que os

FILAMENTOS INTERMEDIRIOS

movimentos

Os filamentos intermedirios so

rtmicos, dando capacidade de deslocamento

filamentos com um dimetro em torno de 10

para a clula. Clios e flagelos tm uma

nm, formado por vrios tipos de protenas,

organizao

sendo

microtbulos

apresentem

peculiar:

nove

pares

de

microtbulos formaro um feixe em volta de


um par central.
MICROFILAMENTOS

mais

importante

delas

QUERATINA.
Os
filamentos

filamentos
associam-se

intermedirios
a

protenas

da

Os microfilamentos so formados,

membrana plasmtica e formam ligaes

principalmente por uma protena chamada

entre clulas vizinhas, mantendo-as unidas.

ACTINA. Esta, uma protena globular, mas

Nas clulas epiteliais, por exemplo, os

ao polimerizar-se formar longos filamentos

filamentos

de 5 a 9 nm. Estes filamentos formam uma

abundantes pois a unio entre as clulas

rede logo abaixo da membrana plasmtica,

deve ser mais forte.

intermedirios

so

mais

servindo de sustentao para essa estrutura


que muito fina e frgil.

Figura 33 Microfilamentos

DO UNICELULAR AO PLURICELULAR
Durante o processo evolutivo, alguns
organismos tomaram o caminho de formar
colnias de muitas clulas. Posteriormente,
cada clula foi se especializando em uma
determinada funo. Este caminho levou ao
surgimento de seres pluricelulares.
A

rigor,

pluricelulares

todas

as

contm

clulas
a

dos

MESMA

INFORMAO GENTICA. Como ento a


Alm de serem importantes para dar

maquinaria

metablica

de

uma

clula

forma clula, os microfilamentos tambm

33

muscular to diferente daquele de um


neurnio?
A

medida

desenvolvimento
pluricelulares,

que

ocorre

dos

organismos

diferentes

genes

sero

ativados. ( VER FIGURA 34) As clulas vo


sofrer

um

diferenciao,

processo

chamado

de

tomando as suas vrias

funes. Embora todos os genes estejam


presentes em todas as clulas, nas clulas
musculares apenas alguns genes so ativos
(so transcritos) e ento s as protenas
codificadas pelos genes transcritos esto
presente nessas clulas. J em uma clula
nervosa, embora possua os mesmos genes
da clula muscular, outros genes esto
ativos, resultando a traduo de outras
protenas.

FIGURA 34 Diferenciao celular que


corre no desenvolvimento de organismos
pluricelulares.

34

PRTICAS DE BIOLOGIA CELULAR*


Recomendaes de ordem geral a serem
observadas
no
uso
do
Laboratrio**
1

A manuteno do material colocado


a sua disposio depende de sua boa
vontade e do seu senso de responsabilidade
pessoal. O microscpio que voc usa custou
elevado preo, cuida dele como se fosse seu.
Dedique 3 minutos finais de cada aula
para limpar as objetivas com leno de
papel (se foi usado leo de imerso),
assim como a sua bancada.
Freqentemente voc dever fazer
desenhos ilustrativos das preparaes
observadas. Para tal, traga folhas de papel
ofcio, ou um caderno de desenho. Exatido
nos detalhes, limpeza e capricho sero
levados em conta mais do que habilidade
para a arte de desenhar. Nunca desenhe
algo incgnito que veja sob o microscpio.
Compare aquilo que visto sob o
microscpio com ilustraes de livros,
quadros ou outras fontes. No se limite
apenas a copiar figuras, examine o material
colocado a sua disposio.
Os roteiros de aulas prticas que
esto includos neste caderno devem ser
lidos
CUIDADOSAMENTE
antes
que
qualquer trabalho seja iniciado. Discuta suas
dvidas com o professor. Procure estar
sempre em dia com os trabalhos das aulas
prticas.
PONTOS A SEREM OBSERVADOS AO
DESENHAR:
Porque se exige um bom desenho:
1) para obrigar a observar.
2) para que a observao possa ser corrigida
por outra pessoa.

3) para que fique um registro da observao


efetuada que possa ser consultada
posteriormente.
**Copia parcial da introduo de MANARA,
N.T.F.(mimeografado, sem data).
FORMA CORRETA DE REALIZAR OS
DESENHOS EXIGIDOS
NAS AULAS PRTICAS.
1) Todos os desenhos e as anotaes
devero ser feitos com lpis HB, ou similar,
com a ponta fina. Tenha a mo uma borracha
macia.
2) No esquea a data e o aumento
usado.
3) Guarde as folhas arquivadas, junto ao
caderno didtico.
4) Escreva sempre com letras de
imprensa.
5) No encha o campo de desenhos. Os
espaos em branco facilitam a compreenso
e posterior estudo do tema.
6) Os desenhos devem ser proporcionais
ao observado. No faa desenhos muito
pequenos.
7) As setas indicadoras dos elementos
desenhados devero ser linhas suaves, feitas
com rgua e paralelas ao borde inferior da
folha.
8) A utilizao de formas geomtricas
(Figura 2.1) artifcio para facilitar a
representao do objeto. Sobre esta base se
1

Mais detalhes de algumas das prticas aqui


descritas podem ser encontradas no livro:
LORETO, E.L.S. & SEPEL, L. M.N. Atividades
experimentais e didticas de Biologia Molecular
e Celular. Ribeiro Preto, SBG. 2003. 2a ed.

www.sbg.org.br

35

trabalhar, at obter a maior semelhana


possvel com o observado.
9) Na Figura 2.2, encontrar um exemplo
de proporo, formas, espaos, distncias e
grossuras dos traos.
10) Antes de comear a desenhar o
contorno dos objetos:
a) observe bem o preparado. Estude-o
e interprete-o;

b) determine exatamente o espao que


vai ocupar o desenho, marcando com linha
suave;
c) observe a relao que guardam
entre si os elemento a desenhar, isto , sua
proporo, tamanho e forma, fixe-os com
linhas auxiliares dentro do contorno geral
(Figura 2.2).

Figura 2.1 Observao da linha e forma na hora de desenhar

Figura 2.2 Cuidados no fazer o desenho quanto proporo, forma, e espao.

36

1a Aula

O USO DO MICROSCPIO PTICO (MO)


O mundo microscpico fascinante. O microscpio foi um aparelho que muito contribuiu
para o desenvolvimento da Biologia Celular. Por esse motivo iniciamos as atividades prticas
dessa disciplina descrevendo um microscpio ptico e dando algumas dicas para o seu uso
adequado.
Uma clula animal tpica tem 10 a 20 m de dimetro, ou ao redor de 5 vezes menos do
que a menor partcula visvel ao olho nu. Portanto, a descoberta de que os animais e vegetais
eram compostos por agregados de clulas individuais, ou a existncia de pequenos seres
unicelulares, no foi possvel at que bons microscpios fossem fabricados, no incio do sculo
XIX.
As clulas animais no so apenas pequenas, mas so descoloridas e translcidas;
conseqentemente, a descoberta de sua organizao interna dependeu, tambm, do
desenvolvimento, na ltima metade do sculo XIX, de uma variedade de corantes que tornaram
vrias partes da clula visveis.
O microscpio tem por objetivo produzir imagens aumentadas de objetos to pequenos
que, ao exame da vista desarmada, no poderiam ser vistos. Tem ainda como escopo, revelar
detalhes texturais imperceptveis a olho nu.
Devemos lembrar que os objetos so vistos por duas razes fundamentais: 1) porque
absorvem a luz; 2) por causa da diferena entre o seu ndice de refrao e o do meio que os
envolve. Quanto maior a diferena, mais facilmente o objeto ser visto. Assim, as clulas e seus
componentes, para serem observados ao microscpio devem ser tratados por reagentes especiais,
do que resulta sua colorao, isto , os componentes celulares passam a absorver luz
diferentemente, tornando-se bem visveis.
Chamamos de limite de resoluo (LR) a capacidade mxima de ver dois objetos como
distintos. O LR depende do comprimento de luz usado e da abertura numrica do sistema de
lentes. Dentro da faixa de luz visvel o LR de 0,4 m para o violeta e 0,7 m para o vermelho. Em
termos prticos, bactrias e mitocndrias (+/- 0,5 m) so geralmente os menores objetos vistos ao
M.O.
Na Figura 2.3 temos um microscpio, em que so indicadas as suas principais partes. Um
microscpio compe-se de um sistema ptico (condensador, objetivas e oculares), corpo do
microscpio (mesa, tubo, platina...) e fonte de iluminao (que nos microscpios mais antigos no
fazem parte do microscpio).
O condensador tem por objetivo prover uma iluminao uniforme. Geralmente dotado de
um diafragma que permite controlar a quantidade de luz que incidir sobre a preparao a ser

37

observada. Em muitos aparelhos, a intensidade e qualidade da luz tambm pode ser controlada
atravs de um parafuso que permite subir ou baixar o condensador.
Duas lentes ou conjuntos de lentes permitem o aumento da imagem da preparao, so as
lentes oculares e as objetivas. As oculares, como o prprio nome diz, ficam prximas ao olho do
observador. J as objetivas ficam prximas ao objeto a ser observado. As objetivas so afixadas
em um sistema rotativo, o revlver, que permite que sejam trocadas com facilidade. Quanto maior
o tamanho da objetiva, maior o aumento que ele proporciona. As objetivas e oculares, trazem
escrito no seu corpo, vrias informaes e entre elas o seu valor de aumento. O aumento final
dado por um conjunto de lentes obtido multiplicando o aumento da objetiva pelo aumento da
ocular. Assim, se o aumento da objetiva de 10X e a ocular tambm de 10X o aumento final
de 100 vezes.

Como proceder para focalizar no microscpio:


1) Mova o revolver de modo a deixar a objetiva panormica (menor aumento) na posio
de observao, e abaixe totalmente a mesa.
2) Coloque a lmina na mesa (platina), fixando-as com as garras do charriot (obs: a
lamnula deve estar voltada para cima).
3) Ligue o sistema de iluminao e ajuste o charriot de modo a centrar o material a ser
observado na regio iluminada do orifcio da platina.
4) Olhe pela ocular ao mesmo tempo em que a mesa lentamente elevada, girando o
parafuso macromtrico, at que a preparao esteja focalizada. Use o micromtrico para fazer o
ajuste fino do foco.
5) Mova a lmina usando o charriot de forma a encontrar campos interessantes a serem
observados. Interprete o que estas vendo, registre e se necessrio desenhe.
6) Quando mais detalhes de uma regio da lmina so necessrios, utilize as objetivas de
maior aumento (10X; 40X). Para tal, basta girar o revlver e fazer um ajuste fino do foco com o
micromtrico.
PARA USAR A OBJETIVA DE 100X, se faz necessrio colocar uma gota de leo de
imerso entre a lamnula e a lente. Focalize mexendo somente o micromtrico.
Aps o uso da lente de imerso no esquea de retirar o leo da objetiva e tambm da
preparao.
Outros lembretes importantes:
Cada pessoa tem uma distncia entre os seus olhos. Para que possamos olhar em
microscpios binoculares (com duas oculares), estes possuem um sistema de regulagem da
distncia interorbital, ou seja, um mecanismo que permite movimentar os dois canhes para a
medida exata da distncia entre os olhos de cada usurio. Alm disso, ao menos uma das
oculares tem uma regulagem de foco independente. Assim, ao comear a observao em um
microscpio binocular, primeiro focalize olhando somente a ocular que no tem regulagem,
posteriormente, focalize com a outra ocular, girando o controle de foco da ocular.
A iluminao, de fundamental importncia na visualizao ao microscpio ptico. Aps a
focalizao, movimente o condensador e o diafragma deste, at encontrar a iluminao ideal.

38

Ao encerrar as observaes ao microscpio no esquea de deixa-lo com a platina


abaixada, com a objetiva panormica, e desligado.

Procedimento:
1) Corte um pedao de jornal que contenha algumas letras, coloque sobre uma lmina e
leve ao microscpio.
2) Focalize algumas letras. O que acontece? Desenhe.
3) Mude as objetivas. O que acontece? Desenhe.
4) Pegue um fio de cabelo, coloque entre lmina e lamnula. Leve ao microscpio, observe
e desenhe.
Questes a serem respondidas:
1) Como se calcula a aumento final que estamos vendo em um microscpio?
2) Porque a imagem vista em um microscpio invertida?
3) O que microscopia de fluorescncia? Para que serve?
4) O que microscopia de contraste-de-fase? Para que serve?
5) Descreva o processo de focalizao de Khler
6) O que um estereomicroscpio?
7) O que microscopia eletrnica? Descreva o funcionamento de um microscpio eletrnico e
compare o seu funcionamento com o do microscpio ptico.

Figura 2.3 Partes do microscpio

39

2a aula

observando clulas de epitlio


de escamas de cebola
Um dos materiais mais apropriados para um primeiro contato com as clulas uma
preparao a fresco de epitlio de escamas de cebola. uma prtica extremamente simples e as
clulas desse material so grandes de tal forma que com qualquer microscpio mesmo rudimentar
permite a visualizao dessas clulas. Com um microscpio de uma boa ptica possvel observar
o ncleo, nuclolo, plasmlise, parede celular, e plasmodesmos.

OBSERVANDO OSMOSE EM CLULAS VEGETAIS


1) Retire a epiderme de uma escama de cebola e coloque sobre uma lmina com uma gota
de azul de metileno (0,3%). Preste ateno para retirar o epitlio exterior da escama, pois este tem
uma nica camada de clulas enquanto o da camada inferior tem vrias camadas o que dificultar
a observao. Espere 1 minuto para corar e depois retire o excesso de corante com uma gota de
gua.
2) Cubra com uma lamnula. Cuide para no ficar bolhas de ar e que fique lquido entre a
lmina e a lamnula. Seque a lmina principalmente a face de baixo (sem a lamnula) pois se esta
ficar mida, vai grudar na mesa do microscpio dificultando o movimento do charriot.
2) Observe e desenhe as clulas de epiderme de cebola, indicando a parede celular, o
ncleo e o nuclolo.
3) Coloque em um dos lados da lamnula uma gota de uma soluo saturada de NaCl ou
sacarose (ou glicerina). Observe, descreva e desenhe o que aconteceu.
4) Identifique os plasmodesmos, e a parede celular.

Responda as seguintes questes:


1) Faa um desenho com todas as partes observadas.No esquea as legendas,
aumentos e a data.
2) Qual o formato das clulas observadas?
3) Para que serve o azul de metileno?
4) O que aconteceu quando colocamos as clulas em uma soluo hipertnica? Por que?
5) O que plasmlise?
6) O que so plasmodesmos?
7) O que a parede celular? No que ela difere da membrana plasmtica?

40

PARA FAZER EM CASA (As questes e desenhos dessa atividade deve ser entregue junto com as
questes e desenhos da segunda aula)

PROPRIEDADES FSICO-QUMICAS DOS COMPONENTES DA


MEMBRANA PLASMTICA.
Material necessrio: 3 recipientes (copo, vidro de remdio...); 1 colher; azeite; gua;
detergente colorido (azul, verde ou vermelho); solvente orgnico (acetona, gasolina, ter ou guaraz); acar e sal.
As macromolculas que compe os seres vivos podem ser classificadas em 2 tipos:
polares, sendo solveis em gua (hidrossolveis) e as apolares que so insolveis em gua, mas
solveis em solventes orgnicos como ter, clorofrmio, cetonas... (lipossolveis).

Procedimento:
1) Em um recipiente com um pouco de azeite de cozinha (que um lipdio- portanto
apolar), coloque uma pitada de acar (que um glicdio). Mexa bem. O que aconteceu? Por que?
- Repita com sal de cozinha, o que aconteceu? Por que?
2) Em um recipiente, coloque um pouco de acetona ou ter ou gua-raz ou gasolina (todos
estes so solventes apolares). Coloque uma colher de acar. Agite. O que aconteceu? Por que?
- Repita com uma gota de azeite. O que aconteceu? Por que?
3) Em 3 recipientes, coloque:
no 1o: 1/2 de gua, 1/2 de azeite
no 2o: 1/2 de azeite, metade de detergente colorido (azul ou vermelho)
no 3o: 1/3 de gua, 1/3 de azeite e 1/3 de detergente colorido.
Agite os lquidos com uma colher e observe por 5 minutos ou mais. Descreva o
que aconteceu?
As membranas biolgicas so formadas, principalmente, por lipdios e protenas
anfipticas, ou seja, molculas com uma parte apolar (lipossolveis) e uma parte polar
(hidrossolvel) como os detergentes. Portanto so, hidrossolveis e lipossolveis ao mesmo
tempo.

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Responda:
a) Faa um desenho de como so organizadas as molculas anfipticas de detergentes
em uma bolha de sabo.
b) Faa um desenho de como so organizadas as molculas de lipdios e protenas nas
membranas plasmticas (Consulte os modelos nos livros de Biologia Celular).
c) Que propriedades podemos esperar da Membrana Biolgica segundo o modelo do
Mosaico Fludo ?
d) Qual a funo dos lipdios (fosfolipdios) nas membranas biolgicas segundo o modelo
do M-F ?
e) Qual a funo das protenas nas membranas biolgicas segundo o modelo M-F?

3a Aula:

COMPARANDO CLULAS PROCARIOTAS E EUCARIOTAS.


Os seres vivos podem ser classificados em dois grandes grupos: os procariontes e os
eucariontes, conforme a organizao da clula que os compe. O objetivo desta prtica de
comparar clulas procariotas e eucariotas, suas semelhanas e diferenas. Ao microscpio ptico,
o que mais chama a ateno, a grande diferena de tamanho que existe entre as clulas
procariontes e eucariotes tpicas. claro que podemos encontrar clulas procariontes, como
algumas algas cianofcias, que possuem tamanho prximo ou mesmo maior que algumas clulas
eucariontes. Entretanto, a regra que os procariontes geralmente tm clulas bem menores que
os eucariontes.
Outra diferena bem marcante a presena do ncleo nos eucariontes e a sua ausncia
nos procariontes. Internamente, no s a presena do ncleo difere os procariontes dos
eucariontes, mas sim uma intensa compartimentalizao das diversas funes celulares em
organelas envoltas por membranas, o sistema de endomembranas que caracteriza as clulas
eucariontes. Porm, via de regra, o sistema de endomembranas de difcil visualizao ao
microscpio ptico, sendo mais bem observado ao microscpio eletrnico.
Nesta atividade, vamos colocar lado-a-lado clulas bacterianas (uma tpica clula
procarionte) e clulas da mucosa da bochecha (representando uma tpica clula eucarionte).

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Material necessrio:
Lmina, lamnula, palito de fsforo, placa com bactrias, ala de platina, lamparina, lcool
70%, corante azul de metileno 0,05%, papel filtro, copo Becker 250 ml (ou vidro de Nescaf),
microscpio.

Procedimento:
1) Com uma ala de platina, encoste levemente em uma colnia de bactrias na placa de
Petri.
2) Esfregue a ala na lmina at espalhar bem as bactrias.
3) Fixe as bactrias pelo calor, passando a lmina na chama de uma lamparina, com as
bactrias voltadas para cima, tomando o cuidado para a lmina no aquecer demais (controle nas
costas da mo).
4) Com um palito de fsforo, raspe a bochecha, posteriormente,esfregue o palito em cima
da regio da lmina em que previamente foram colocadas as bactrias.
5) Fixe as clulas em lcool 70% por 1 minuto.
6) Coloque uma gota de corante (azul de metileno 0,3%) e espere 1 minutos.
7) Tire o corante, deixando passar um pequeno fluxo de gua, sob a torneira.
9) Cubra com lamnula, seque os lados da lmina e observe ao microscpio.
Questes a serem respondidas:
1) Compare as clulas procariotas e eucariotas (observe e desenhe):
a) Quanto ao tamanho - Faa um desenho com as relaes de tamanho, no esquecendo
de anotar o aumento usado.
b) Quanto forma.
c) Quanto presena de ncleo.
d) Porque fixamos as bactrias na chama ?
e) Qual a funo da fixao em lcool ?
f) Qual a funo de cada um dos componentes do corante?
2) Quais seres vivos chamamos de procariontes? Quais os que representam os
eucariontes?
3) Que outras diferenas existem entre as clulas procariotas e as eucariotas, mas que no
puderam ser vistas ao microscpio ptico? O que precisamos fazer para poder detectar estas
diferenas?

43

Para fazer na cozinha (2)

UM POUCO DE FSICO-QUMICA:
(as questes dessa atividade devem ser respondidas e entregues junto com as da 3a aula)

O que pH ?
INFORMAES TERICAS:
Muitas molculas esto continuamente formando ons. A gua, por exemplo, forma os ons
H+ e OH-, que permanecem por algum tempo nesta forma inica e voltam a se associar para
formar nova molcula de gua. A molcula de gua ao se dissociar, forma quantidades iguais de
ons H+ e OH- .
Algumas molculas formam quantidades desiguais de ons H+ ou OH-. Por exemplo:
a) HCl (cido clordrico) forma os ons H+ e Cl - . Sempre que a dissociao de uma molcula em
seus ons forma prtons H+, ela um CIDO.
b) NaOH (hidrxido de sdio) forma os ons Na+ e OH-. Sempre que a dissociao de uma
molcula em seus ons forma hidroxilas OH-, ela uma BASE.
O pH (potencial de Hidrognio) uma medida da quantidade de prtons H+ presentes em
uma soluo. Quanto mais prtons H+, mais cida a soluo. Quanto mais hidroxilas (OH-)
mais bsica, ou alcalina a soluo. A gua, como tem igual quantidade de H+ e OH- dita
NEUTRA.
Chamamos de ESCALA DE pH as variaes na quantidades de prtons H+, que varia de 1
a 14. As solues com pH abaixo de 7 so ditas cidas e as acima de 7 so as bsicas (alcalinas).
A gua tem pH 7,0.
cido
pH

Neutro

Base

8 9 10 11 12 13 14

Quando, em uma soluo cida, vamos gradativamente acrescentando uma base,


forma-se Sal e gua e o pH da soluo vai subindo at ficar neutro e posteriormente continua
subindo tornando-se bsica.

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Agora, se comearmos a adicionar um cido em uma soluo bsica, o pH vai diminuindo,


torna-se neutro e passa a cido.

EXPERIMENTOS PARA DEMONSTRAR ALTERAO DE pH


Algumas substncias podem mudar de colorao dependendo do

pH da soluo.

Podemos usar esta propriedade para demonstrar alteraes de pH.

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I . Preparando a atividade:
Material Necessrio para Execuo do Experimento:
- Folhas de Repolho Roxo,
- cido actico (3%) ou vinagre
- Hidrxido de sdio (0,1 M), ou uma soluo feita com umas escamas de soda custica (2 ou 3)
em 10 ml de gua (+/- 3 colheres); em ltimo caso pode se usar leite de magnsia.
- Frascos incolores / transparentes para a visualizar as alteraes de colorao
- Conta-gotas ou pipetas (no mnimo um para cada soluo)
Preparo das SoluesA) Infuso de repolho roxo:
Picar bem 2 a 3 folhas de repolho roxo (correspondente a uma xcara), colocar em gua
fervente e esperar alguns minutos, para que a gua torne-se colorida.

PROCEDIMENTO:
1. Colocar, em quatro frascos transparentes um pouco da soluo de repolho roxo
2. Acrescentar algumas gotas de vinagre. Observe o que acontece.
3.

Acrescente agora algumas gotas de soluo de NaOH (ou soluo de soda custica).

Acrescente tanta gotas at que no mude mais de cor.


4. Volte a adicionar gotas de vinagre.
5. Volte a adicionar NaOH.
6. Comparar e registrar as coloraes obtidas.
OBS.: O fenmeno de alterao de cores reversvel portanto, ocorrendo toda vez que o pH
ultrapassa o ponto de viragem do indicador.
Responda as questes:
1) Quais so os pHs que encontramos no sangue, na urina e no estomago humano?
2) O pH do sangue sofre variaes? Existe algum mecanismo de controle do pH no sangue?
3) E dentro da clula, as diferentes organelas tm o mesmo pH? D exemplos.
4) O que acontece com as protenas quando temos pequenas alteraes de pH ? E quanto as
protenas so submetidas a grandes alteraes de pHs, como quando colocadas em um meio com
pH muito cido ou muito alcalino?
5) Localize 5 propriedades biolgicas associadas com pH?
46

4 a Aula

ESTUDANDO A PASSAGEM DE SOLUTOS E SOLVENTES


PELA MEMBRANA PLASMTICA.
As clulas de qualquer organismo esto cobertas pela membrana celular. A constituio
dessa membrana promove a passagem controlada de substncias e o conseqente equilbrio
dinmico dentro do organismo.
A gua e outros ons pequenos podem passar sem gasto de energia (transporte passivo)
pelas membranas biolgicas (M.B).
Uma das formas de transporte passivo a osmose, que vem a ser a passagem do solvente
de uma soluo menos concentrada para a soluo mais concentrada, atravs de uma membrana
semi-permevel.
Observao importante:
O uso de sangue em aulas prticas, deve ser feito com muita cautela, principalmente
depois do aparecimento da AIDS. Mas pensamos que isto, ao invs de ser um obstculo, deve ser
um componente a mais para a formao dos alunos. Devemos fazer uso de agulhas estreis, o
chamar a ateno para que todos evitem, de toda maneira, usar a lmina dos colegas, ficando
restrito a manipulao do seu prprio sangue. O professor, e todos os que vo manipular sangue,
devem, sem exceo, usar luvas descartveis. Aps a atividade, todo o material deve ser
desinfectado com lcool.

Material necessrio:
Lmina, lamnula, agulha hipodrmica descartvel, lmina de barbear, conta gotas, gua
destilada, soro fisiolgico (NaCl 0,9%), soluo hipertnica (soluo saturada de NaCl e/ou
acar); papel filtro, MO, luvas descartveis, gua sanitria, algodo, glicerina.
Procedimento:
1) Coloque uma gota de soro fisiolgico em duas lminas limpas (o uso de soro fisiolgico
e opcional, se a gota de sangue for de um volume razovel -uma gota grande- no se faz
necessrio o uso de soro fisiolgico).
2) Fazer um pequeno furo na ponta de um dedo, com uma agulha descartvel estril e
colocar uma gota de sangue sobre cada lmina (todas as agulhas devem ser dispensadas em um
frasco com uma soluo 20% de gua sanitria).
3) Cubra com lamnula e observe ao MO. Descreva e desenhe as hemcias.

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4) Em uma das lminas, com um conta-gotas coloque uma gota de uma soluo
hipertnica em um dos lados da lamnula e encoste um papel filtro do outro lado para substituir o
soro da lmina. Dessa forma, o papel filtro puxar um pouco do sangue da lmina e no outro lado,
um pouco da soluo hipertnica entrar em contato com as clulas sanguneas.
5) Observe ao MO, principalmente na regio da lmina onde as hemcias mais entraram
em contato com a soluo hipertnica que as hemcias murcharam, ficando crenadas.
6) Na outra lmina, repita o mesmo procedimento anterior, s que em vez de soluo
saturada, use gua destilada. Observe na regio da lmina onde as hemcias mais entraram em
contato com a soluo hipotnica que as clulas esto trgidas, quase estourando (e as vezes
realmente estouram).
Terminada esta parte da prtica, as lminas devem ser mergulhadas em uma soluo de
gua sanitria 20% (ou lcool 96 GL) por no mnimo 1/2 hora, para depois ser limpo e
reaproveitadas.

Cada aluno deve passar um algodo com lcool, na mesa e demais partes

manuseadas do microscpio.
1) O que osmose? quando ocorre?
2) Porque ocorre hemlise (as hemcias estouram) quando as colocamos em gua destilada?
3) Porque as hemcias ficam crenadas na presena de uma soluo hipertnica?

48

5a aula

FRACIONAMENTO CELULAR
O emprego do microscpio, seja o microscpio ptico ou eletrnico, geralmente fica restrito
descrio das estruturas celulares. Para o estudo da composio qumica dos componentes
celulares e interpretao das interaes entre estes componentes para explicar o funcionamento
celular, se faz necessrio o emprego de outras metodologias que no o uso do microscpio. O
estudo bioqumico dos componentes celulares requer a separao e o isolamento cuidadoso das
vrias organelas e macromolculas celulares. As 3 principais tcnicas usadas para isto so a
centrifugao, cromatografia e eletroforese.

1) ORGANELAS E MACROMOLECULAS PODEM SEM SEPARADAS POR


CENTRIFUGAO.
As clulas podem ser rompidas de vrias maneiras, como por choque osmtico, vibraes
ultrasnicas, foradas a passar por um pequeno orifcio ou homogeneizadas por fora mecnica.
Quando cuidadosamente aplicadas, estes procedimentos deixam as organelas como ncleo,
mitocndrias, complexo de Golgi, peroxissomos... intactos. Assim como muitas vesculas derivadas
do retculo endoplasmtico, chamadas microssomos, mantm muito de suas propriedades
bioqumicas originais.
Como todos estes componentes tem grandes diferenas de tamanho, eles podem ser
separadas por centrifugao.
Postos em um tubo a girar em altas rotaes, os vrios componentes vo sofrer a ao da
fora centrfuga. Os componentes maiores como clulas intactas e ncleos vo sedimentar
primeiro no fundo do tubo (p/ ex: 1000 rpm por 5'); rotaes medianas em maior tempo faro
sedimentar componentes um pouco menores como mitocndrias, lisossomas e peroxissomas
(20.000 rpm por 10'). Altas rotaes em tempos ainda maiores (80.000 rpm por 3 horas)
sedimentam ribossomos e grandes macromolculas.
Ver esquema de fracionamento por centrifugao em Junqueira e Carneiro (2000).
Material Necessrio:
Folhas de Tradescantia; gral e pistilo; tubos de centrfuga; pipetas Pasteur; centrfuga;
soro fisiolgico; SDS 10% (sdio-duodecil-sulfato) ou detergente, gua destilada. lmina, lamnula
e microscpio.

49

Procedimento:
Primeira parte: Observao de um corte transversal de folha de Tradescantia
1) com uma gilete afiada, corte transversalmente uma folha de Tradescantia, o mais fino
possvel.
2) Coloque o corte em uma lmina com uma gota de gua, cubra com lamnula e leve ao
microscpio.
3) Observe: a) que clulas tem pigmento roxo. Desenhe
b) Que clulas tem cloroplastos. Identifique os cloroplastos e desenhe.
Segunda Parte: Fracionamento por centrifugao.
1) Coloque 3 ml de soro fisiolgico em um gral;
2) Esmague nesta soluo 3 a 4 folhas de Tradescantia com um pistilo;
3) Coloque o lquido em um tubo de centrfuga e centrifugue rapidamente (15 seg) para retirar
fibras de celulose e restos de tecidos;
4) Transfira o sobrenadante para um novo tubo, e centrifugue por 5 minutos a 7.000 rpm.
6) Desenhe e descreva o que encontramos no tubo aps a centrifugao.
7) Passe o sobrenadante para um novo tubo.
8) Ressuspenda o precipitado com dois ml de soro fisiolgico.
9) Faa uma lmina com o sobrenadante e com o precipitado, observe ao microscpio e
desenhe.
10) Acrescente uma gota de SDS 1% ou detergente no tubo com lquido verde, agite por um
minuto.
11) Centrifigue os tubos, sobrenadante e o precipitado (agora ressuspenso) por 5 mim a 7.000.
12) Observe e desenhe o que encontramos nos tubos
13) Faa uma lmina com o precipitado do tubo verde.

Responda as questes:
1) Que mtodo usamos para romper as clulas, nesta prtica?
2) Porque usamos soro fisiolgico e no gua?
3) O que encontramos no sobrenadante aps a primeira centrifugao? E no precipitado?
4) Por que usamos o SDS?
5) Por que o sobrenadante agora verde e o precipitado incolor?
6) o que uma ultracentrfuga?
7) Faa um esquema de fracionamento celular, que voc poderia fazer se tivesse uma
ultracentrfuga, e desejasse fracionar hepatcitos nos seus vrios componentes.
6a aula

50

FRACIONAMENTO MOLECULAR POR CROMATOGRAFIA


Como podemos isolar uma protena ou uma outra molcula da clula?
Para o desenvolvimento da Biologia Celular, foi crucial obter as molculas que compe a
clula, como as protenas, em seu estado puro, isto , isolado das outras molculas da clula. Mas
mesmo uma bactria bem simples possui mais de 2000 tipos de protenas, como podemos isolar
s uma enzima que nos interesse?
Um dos mtodos mais utilizados para este fim a cromatografia de coluna, na qual uma
mistura de molculas em soluo aplicada na parte superior de uma coluna, que contm uma
matriz slida, porosa. Posteriormente, um grande volume do solvente passa pela coluna e
coletado em tubos separados, medida que emerge na parte inferior da coluna. As diferentes
molculas so retardadas diferencialmente, pela sua interao com a matriz, molculas diversas
atravessam a coluna com velocidades diferentes e so ento fracionados em uma srie de tubos.

Depois de passar em algumas dessas colunas, a enzima de nosso interesse estar


isolada de todas as outras molculas, em um dos diferentes tubos que foram coletados.

Atividade experimental:
1- Coloque um pequeno pedao de esponja na ponta de uma pipeta Pasteur.

51

2- Faa uma soluo de Slica gel em um copo volumtrico ou becker, usando gua de torneira
levemente acidulada com 1 gota de vinagre para cada 10 ml. Com um conta-gotas, coloque a
resina (slica gel) na coluna. A este procedimento chamamos empacotamento da coluna.
3- Em um gral, coloque uma folha de manto-de-viuva (Tradescantia), com umas gotas de guaacidulada e esmague com o pistilo.
4- Colocar aproximadamente um ml desse lquido na coluna
5- Com uma pipeta de Pasteur coloque gua na ponta superior da coluna e observe que um lquido
roxo comea a descer, enquanto uma camada verde se deposita na ponta superior da coluna.
Aps algum tempo comea a pingar uma soluo roxa (antocianina). Colete amostra desta fase.
6- Substitua o lquido que passa pela coluna, coloque etanol na parte superior da coluna e observe
que o pigmento verde comea a descer
7- Quando comear a pingar o pigmento verde, colete uma amostra deste.

Responda:
1) Faa um desenho esquemtico representando o experimento e explique-o.
2) Porque o pigmento roxo diludo primeiro na coluna?
3) Por que o pigmento verde fica retido no coluna enquanto estava passando gua pela coluna?
4) Por que ele desceu na presena de lcool?
5) Qual a localizao intracelular das antocianinas?
6) Qual a localizao intracelular das clorofilas?
7) Qual a solubilidade desses pigmentos?

ISOLAMENTO DE DNA NA COZINHA


Em um laboratrio de Biologia Molecular, o primeiro passo para se estudar um gene o
isolamento do DNA. Voc tambm pode fazer isto na sala de aula ou em sua cozinha.

Procedimento:
1) Pique uma cebola grande (250g) em pequenos pedaos (ou rale com um ralador). Faa uma
soluo misturando 10 ml de detergente de loua, 1/2 colher de sopa de sal e complete com gua
at 100 ml. Aquea a soluo at +/- 60oC e adicione esta mistura ao picadinho de cebola,
deixando 10 minutos em banho-maria a 60oC.

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2) Resfrie rapidamente a mistura colocando o recipiente em uma bacia contendo gua e gelo. Coe
a mistura em um filtro de papel para caf, aparando o filtrado em um vidro.
3) Adicione delicadamente lcool (gelado) no filtrado de cebola, deixando o etanol escorrer pela
parede do vidro. Observe a formao de fios esbranquiados que sobem para onde est o lcool.
Estes fios correspondem aos cidos nuclicos - DNA e RNA.
4) Voc pode retirar o DNA da soluo enrolando em um basto.
5) Deixe o basto secar ao ar e coloque o basto em um tubo com gua para re-dissolver o DNA.
Aplique este DNA no processo de eletroforese explicado a seguir.

Atividades Propostas e Perguntas


1) Faa um desenho esquemtico com todas as fases do experimento. - Em detalhe, mostre o que
vai acontecendo com as clulas e com as macromolculas.
2) Porque usamos detergente?
3) Qual a funo do sal e da gua quente?
4) Por que baixamos a temperatura, aplicando gelo?
5) Por que coamos em um filtro de caf?
6) Qual a finalidade de acrescentarmos o lcool?
7a aula

ELETROFORESE
Molculas que possuem carga eltrica, como as protenas e os cidos nuclicos, podem
ser separadas por eletroforese. Eletroforese o movimento de molculas eletricamente carregadas
em um campo eltrico.
Geralmente, em um processo eletrofortico, as protenas ou cidos nuclicos so
colocadas a migrar sob um campo eltrico, no interior de um suporte gelatinoso (um gel) de
poliacrilamida, agarose ou amido.
A seguir ser apresentado o processo de eletroforese vertical para separao de protenas. O que voc
vir em aula ser eletroforese horizontal de cidos nuclicos, preste ateno na aula e faa as devidas
observaes das diferenas entre a tcnica descrita para protenas e a feita em aula para DNA.

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As amostras contendo uma mistura de protenas so aplicadas em um gel. Posteriormente uma


corrente eltrica aplicada neste gel por algumas horas, as protenas mais negativas e menores
migraro mais rapidamente que as positivas e maiores.

Posterior a migrao, o gel colocado em uma soluo contendo corantes especficos


para protenas (A). Aps a colorao, podemos visualizar diferentes bandas que correspondem a
protenas que possuem cargas ou tamanhos diferentes (B).
Alguns processos de eletroforese podem revelar mais de 1000 diferentes protenas em um
nico gel. Esta grande sensibilidade torna esta tcnica muito til para identificar quais as protenas
so responsveis por diferenas genticas ou fisiolgicas em qualquer organismo.

Atividade experimental:
1) Montar um gel de agarose 0,8% da seguinte forma:
Ferver em microondas 0,8 gramas de agarose, em 100 ml de uma soluo tampo (TAE) e
aps fundir a agarose, acrescentar 25 microlitros de Brometo de etdio. (usar luvas sempre que
usar esta droga, pois ela cancergena).
Colocar a agarose ainda quente em uma placa com um pente

54

Esperar esfriar e colocar o gel na cuba eletrofortica de gel horizontal


2) Misturar 5l de uma soluo de DNA com 5l de uma soluo de tampo de amostra
(Glicerina e azul de bromofenol) . Aplicar com uma micropipeta em um dos pocinhos do gel.
3) Ligar a fonte de eletroforese a 100 volts e deixar o azul de bromofenol migrar
aproximadamente 3 cm
4) Observar o gel no transluminador ultravioleta (UV).
RESPONDA e Faa os desenhos do que foi visto em aula.
1) Quantas diferentes bandas foi possvel ver em cada aplicao?
2) Quem migrou mais rpido o DNA ou o RNA? Porqu?
3) Por que os cidos nuclicos migram em direo ao plo positivo?
4) Qual a funo do azul de bromofenol?
5) O que uma soluo tampo?
6) Por que colocamos brometo de etdio no gel?
7) Quais as semelhanas e diferenas dos processos de eletroforese horizontal de cidos
nuclicos e o sistema de eletroforese vertical de protenas descrito?

8a Aula

OBSERVAO DE CICLOSE E CLOROPLASTOS EM


CLULAS DE Elodea
Elodea uma planta usada como ornamental em aqurios, facilmente adquirida em lojas
que vendem produtos para aquariofilia. uma monocotilednea pertencente famlia
Hydrocharitaceae. As folhas dessa planta so timas para observao de ciclose que o
movimento contnuo do citoplasma no interior da clula, assim como de cloroplastos.
Geralmente, os componentes das clulas so incolores. Por isso, ao se observar direto ao
microscpio, pouco se pode observar de seus constituintes. Para se superar este problema,
geralmente fazemos uso de corantes que vo evidenciar alguma parte da clula.
Os cloroplastos, organela presente somente nas clulas vegetais e responsveis pela
fotossntese, so naturalmente corados. Em virtude disto, e tambm por serem organelas bastante
grandes, os cloroplastos podem ser facilmente visualizados ao microscpio.
As folhas de Elodea apresentam apenas duas camadas de clulas, em que se pode
observar com facilidade os cloroplastos.
As clulas eucariontes possuem um citoesqueleto que promove o movimento dos
componentes no interior da clula. s vezes estes movimentos so correntes citoplasmticas que
chamamos CICLOSE. Se todos os componentes do interior da clula so incolores, muito difcil
se observar os movimentos citoplasmticos. A presena dos cloroplastos que so naturalmente

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corados torna possvel a visualizao da ciclose. Devemos lembrar que a ciclose o movimento do
citoplasma causado pela ao do citoesqueleto. Os cloroplastos so levados por essa corrente do
citoplasma.
Procedimento
1) Com o auxlio de uma pina ou gilete, retire uma folha de Elodea.
2) Em uma lmina para microscopia com uma gota de gua, coloque a folha de Elodea, por
sobre a gota.
3) Cubra com lamnula, e leve ao microscpio para observao.
4) Observe o tamanho e forma dos cloroplastos. Geralmente aps alguns minutos de
observao, podemos ver a ciclose. Descreva como a ciclose.

Observao de ciclose em clulas do plo estaminal de Tradescantia (mantode-viuva).


As clulas do plo estaminal de manto-de-viva (trapoeraba) tambm apresentam ciclose
bastante ativa. Vale salientar que nessas clulas existe a presena de um grande vacolo. O
citoplasma da clula fica restrito a alguns canais internos da clula, o restante ocupado pelo
vacolo.
Procedimento:
1) Com uma pina, retire um plo do estame de uma flor de manto-de-viva.
2) Coloque sobre a lmina com uma gota de gua e cubra com uma lamnula.
3) Observe ao microscpio, desenhe e descreva a ciclose.

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Responda as questes:
1)

Por que podemos ver facilmente os cloroplastos, mas no outros componentes do


sistema de endomembranas como o complexo de Golgi, retculo endoplasmtico ou
mitocndrias?

2)

Que parte do citoesqueleto est envolvida na ciclose? De que forma?

3)

Por que a ciclose nas clulas da Elodea ocorrem no interior de toda a clula enquanto
na clula da Tradeschantia ocorre apenas dentro de estruturas que lembram canais?

9a Aula

OBSERVANDO CLIOS E SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS


Podemos observar com facilidade a atuao do citoesqueleto, atravs dos clios e dos
pseudpodes em protozorios de vida livre. Nos Paramecium podemos ver os clios e em Amoeba
os pseudpodes. Alm disso, vrios componentes do sistema de endomembranas, como vacolos
digestivos (e pulstil em Paramecium) so tambm facilmente observveis.
Paramecium o nome genrico de um protozorio ciliado muito comum em mananciais de
gua como os audes e riachos. Estes protozorios so de fcil cultivo, se alimentando
principalmente de bactrias, pequenas algas e outros protozorios menores. Podem ser mantidos
em recipientes com um pouco de gua e uma pequena pitada de leite em p (+/- 60mg para cada
100 ml de gua). Como a qualidade da gua importante para este protozorio, devemos trocar
um pouco da cultura velha (mais ou menos a metade) por gua nova com leite, a cada semana.
Assim, podemos manter infinitamente o Paramecium. Outro meio de cultivar este ciliado colocar
um pouco de grmen de trigo na gua a cada semana, e sempre trocando a metade do volume da
cultura por gua nova a cada semana.
Por ser de fcil cultivo e apresentar clios e o sistema de endomembranas facilmente
observvel, alm de ter uma taxa de reproduo assexual bem alta, este protozorio um
excelente recurso para atividades prticas de Biologia Celular. Antes, porm, de descrever estas

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prticas, vamos mencionar alguns aspectos importantes sobre a biologia e estrutura dos
Paramecium.
As espcies mais comuns de Paramecium possuem em torno de 0,5 mm de comprimento.
Os ciliados so excepcionais entre os eucariontes, uma vez que possuem no mnimo dois ncleos
com funes distintas. O macroncleo participa das atividades do dia a dia como crescimento,
metabolismo e reproduo. O microncleo permanece relativamente dormente at que a clula
entre em reproduo sexuada. Os Paramecium possuem dois tipos de reproduo; a) diviso
binria: em condies favorveis a clula se divide em duas. As duas novas clulas,
geneticamente idnticas, crescem rapidamente e voltam a se dividir. Mantendo as condies
favorveis estes organismos podem se dividir duas a trs vezes em um dia; b) conjugao: em
condies ambientais desfavorveis, dois indivduos de sexos diferentes entram em contato e
formam uma ponte citoplasmtica temporria, por meio da qual trocam microncleos.

Observando os clios e o sistema de endomembranas:


Nos Paramecium podemos observar com facilidade a atuao do citoesqueleto, atravs
dos clios, assim como o movimento intracelular dos vacolos digestivos e contrtil. Alm disso,
vrios componentes do sistema de endomembranas, como vacolos digestivos e pulstil so
tambm facilmente observveis.
Material necessrio:
Cultura de Paramecium; microscpio, lmina lamnula; infuso de cigarro.
Procedimento:
1) Encher um tubo de centrfuga com uma cultura de Paramecium. Centrifugar por 60
segundos.
2) Retirar o sobrenadante, deixando apenas uma pequena gota de meio lquido.
3) Acrescentar, na gota que restou no tubo em que os Paramecium foram centrifugados,
uma gota de uma soluo de narctico feito da seguinte maneira: ( deixar um cigarro em infuso
em 30 ml de gua por 12 horas). A finalidade desta infuso de cigarro e diminuir a atividade dos
Paramecium , uma vez que estes protozorios so muito rpidos e sem este narctico muito
difcil segui-los ao microscpio.
Outra opo colocar alguns fios de algodo entre a lmina e a lamnula. Os Paramecium
no podem nadar to livremente entre os fios de algodo, facilitando a sua observao.
4) Faa um desenho com as principais partes de um Paramecium.
5) Observe o batimento dos clios e desenhe (observe e descreva os tricocistos)
6) Identifique e observe a contrao dos vacolos contrteis.
7) Identifique os vacolo digestivo.

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8) Identifique e desenhe o citostoma e a citofaringe. (O que so fagossomas e onde estes


se formam nos Paramecium ?
9) Faa um desenho comparando a ultra-estrutura de um clio e de um centrolo.

10a Aula

PREPARAO DE LMINAS PERMANENTES

(aula demonstrativa).

Estruturas biolgicas grandes no podem ser vistas diretamente ao microscpio, por que a
luz no pode atravess-las. Precisamos, ento, fazer cortes o mais fino possvel, para que a luz
possa passar pelas estruturas, e assim ser visto ao microscpio. Para sofrer tais cortes, o material
deve ser fixado, emblocado em parafina ou outra resina e, imerso neste suporte, cortado em
pequenas "fatias", atravs de um aparelho chamado micrtomo. Posteriormente este material
corado e a lmina montada.
Nesta prtica, vamos visitar os laboratrios de anatomia vegetal do Dep. de Biologia, em
que lminas permanentes de vegetais so preparadas.
Preste ateno as explicaes (e faa as perguntas que achar necessrio) e
posteriormente responda as seguintes questes:
1) O que a fixao do material? Qual a funo da fixao?
2) lcool etlico, clorofrmio, formol, cido actico, cido pcrico, e cido smico so as
principais substncias usadas como fixadores. Quais so as principais caractersticas de cada um
destas quanto a sua capacidade de fixao?

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3) As substncias citadas na pergunta anterior, geralmente no so usadas em conjunto,


constituindo fludos fixadores. Alguns destes fludos so muito usados, como o Fluido de Carnoy; o
F.A.A; o Bouin. Diga qual a composio destes fixadores e suas caractersticas.
4) Porque desidratamos o material em uma srie alcolica antes de emblocar em parafina?
5) Para que emblocar em parafina?
6) Que outros suportes ou estratgias podem sem usadas no lugar do emblocamento em
parafina?
7) O que orientao do corte?
8) Para que re-hidratar o material antes de cora-lo?
9) Qual a importncia do uso de corantes na preparao de lminas?
10) O que significam: colorao vital; corante acidfilo; corante basfilo?
11) Entre os principais corantes podemos citar: Carmim; hematoxilina; azul de metileno;
Cristal violeta (violeta genciana); Eosina; Fast Green; Fucsina cida, safranina; Sudan black; diga
quais as caractersticas principais destes corantes (que estruturas eles coram, solubilidade,
concentraes usadas...)

11a Aula

OBSERVAO DE COMPLEXO DE GOLGI EM LMINAS


PERMANENTES DE EPIDDIMO.
Material fornecido: lminas permanentes de epiddimo de rato.

Procedimento:
1) Localize e desenhe as clulas nos tbulos de epiddimo.
2) Observe e desenhe a posio do ncleo.
3) Observe e desenhe a posio e a forma do complexo de Golgi.
Responda as questes:
1) Por que foi escolhido o epiddimo para observar o complexo de Golgi? Que outro tipo de
clula poderia ser usada?
2) Que mtodo de colorao foi usada e por que?
3) Como se forma o Complexo de Golgi?

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Observao de neurnios em cerebelo de camundongo.


Material fornecido: lminas permanentes de cerebelo de camundongo.

Procedimento:
Observe ao microscpio a regio entre as substncias branca e cinzenta, nela existem
alguns neurnios gigantes em que podemos ver perfeitamente o corpo celular (com ncleo), o
axnio e dendritos.
Responda:
1)Observe e desenhe estas clulas, suas partes, e descubra como so chamadas estas
clulas.
2)Qual a relao existente entre forma e funo nestas clulas?

12a Aula

OBSERVAO DE CLULAS MUSCULARES ESTRIADAS


O desenho esquemticos de clulas presente nos livros so muito comuns e teis. Porm,
muitas vezes os alunos tem dificuldade de reconhecer que em um ser pluricelular, a diferenciao
celular a regra. Muitas clulas acabam com formatos muito diferentes. As clulas musculares
estriadas esquelticas so um exemplo.
Clulas musculares estriadas so clulas muito longas, polinucleadas apresentando os
ncleos na periferia da clula.

O citoesqueleto hipertrofiado, sendo que os microfilamentos de

actina e miosina, vo ocupar a maior parte da fibra muscular, constituindo estruturas especficas
das clulas musculares estriadas, que so os sarcmeros. Essas estruturas que do uma
aparncia estriada a essas clulas quando vistas ao microscpio.
Material necessrio:
Lmina, lamnula, agulha histolgica e lmina de barbear, abelhas (ou outro inseto grande),
soluo de verde Janus (0,7% em etanol 70%).

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Procedimento:
1) Com uma gilete, abra o trax de uma abelha, vespa ou outro inseto voador grande
(previamente morta em vapores de ter).
2) Com uma agulha histolgica retire algumas fibras musculares e transfira para uma
lmina com uma gota de corante.
3) Cubra com lamnula, deixe corar por 3 minutos, e observe ao microscpio.
Alguns questionamentos :
a) Como esto organizados os sarcmeros e como estes funcionam? (faa um desenho).
b) Quais as fases da contrao muscular?
c) Como est organizado o citoesqueleto em uma clula muscular lisa?
d) Relacione as regies estriadas que podemos ver nas fibras musculares com o sarcmero.
e) Qual a funo do Verde Janus?

13 a aula

OBSERVAO DE MITOSE EM PONTA DE RAIZ DE CEBOLA,

Allium cepa (2n = 16).


COLETA E FIXAO DAS PONTAS DE RAZES DE CEBOLA
O procedimento mais fcil encher um frasco com gua colocar a cebola com a parte das
razes imersa na gua (figura abaixo) e esperar at que as razes comecem a crescer.
Dependendo da poca isso pode ocorrer em 24 horas ou em alguns dias.

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Quando as razes tiverem atingido pelo menos cinco milmetros podero ser facilmente
destacadas do bulbo, com auxlio de uma lmina de barbear, estilete ou mesmo agulha. No
necessrio deixar as razes crescerem mais do que os cinco milmetros, pois o material que nos
interessa est na ponta.

As pontas de raiz devem ser imediatamente fixadas em soluo de lcool e cido actico
(3:1). Essa soluo no dever ser estocada, recomenda-se que seja preparada no momento em
que vai ser usada.
O tempo mnimo que as pontas de raiz devem ficar no fixador duas horas, as vezes, se o
material fica muito tempo no fixador ocorre um amolecimento excessivo do tecido dificultando a
preparao da lmina.
Aps o tempo de imerso no fixador as pontas de raiz podem ser estocadas em lcool 70%
(de preferncia em refrigerador) ou ento preparadas para a observao das mitoses.

2. HIDRLISE DO MATERIAL FIXADO


Transferir as pontas de raiz de cebola para uma soluo de cido clordrico 1N e deixar em
imerso por 15 minutos. Depois disso lavar em gua (imerso por um ou dois minutos); remover o
excesso de gua com um papel absorvente e transferir para uma lmina de microscopia.
3. COLORAO
Antes de adicionar o corante sobre a ponta de raiz, pode-se remover (ou simplesmente
romper com uma agulha) a parte mais extrema do material (correspondente regio da coifa), pois
isso facilitar a colorao e a observao ao microscpio.
Para colorao um dos corantes mais usados a orcena actica 2% (outros corantes
produzem o mesmo efeito e podem substituir a orcena). Uma gota desse corante suficiente para

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uma boa colorao, desde que se espere no mnimo vinte minutos, antes de bater ou esmagar
o tecido.
Ao colocar a lamnula deve-se cuidar para deixar o menor nmero possvel de bolhas de ar
para que a observao do material no seja prejudicada.
Depois que o corante atuou sobre o tecido pode-se envolver a lmina com um papel filtro e
pressionar com o dedo polegar a regio onde est a lamnula. Esse movimento far com que o
tecido se espalhe pela lmina e seja possvel observar camadas de clulas isoladas. Nesses
grupos de clulas que ser possvel observa as mitoses. No se deve colocar uma quantidade
muito grande de tecido na lmina pois isso ira dificultar o espalhamento. Dois milmetros de ponta
de raiz produz material suficiente para observao.
Outra forma de realizar o espalhamento segurar a regio da lamnula com um papel
absorvente e bater com um lpis borracha ou com a ponta da tampa de uma caneta.
Aps o esmagamento do material, a lmina deve ser observada inicialmente em menor
aumento (x10), para que se localize rapidamente onde esto as clulas em diviso.
5. LAMINAS SEMI-PERMANENTES
As lminas que estiverem boas podem ser temporariamente conservadas (uma semana)
se forem vedadas com esmalte para unhas ou cola para cmera de pneu de bicicleta.
6. LMINAS PERMANENTES
As lminas semi permanentes podem ser transformadas em permanentes, para isso basta
remover o vedante (esmalte ou cola) e colocar as lminas no freezer at que seja possvel soltar a
lamnula.
Aps a remoo da lamnula, mergulhar rapidamente as lminas em alcool absoluto e
deixar secar. Colocar uma gota de Resina para microscopia (Permonte; Entelan ou Balsamo do
Canad) na regio onde est o material. Fechar com uma lamnula e deixar secar.

Procedimento:
1) Pegue uma raiz j fixada
2) Hidrlise: coloque as pontas de raiz em uma soluo 1N de HCl por 5 min.
3) Lavagem: deixe as razes em gua por 5 min.
4)Corte com uma gilete +/- 3mm da ponta da raiz, logo aps os 2 primeiros mm (coifa).
5) Coloque este material em uma lmina com uma gota de orceina actica, deixe corar por
5 minutos.
6) Cubra com uma lamnula, colocando a lmina entre papel higinico e aperte fortemente
para espalhar o material ( com o polegar).
7) Vede as bordas da lamnula com luto (ou esmalte de unha).
8) Observe ao microscpio.

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Questes:
a) Descreva e desenhe o que ocorre na: interfase; prfase; metfase; anfase; telfase.
b) O que uma clula 2n=16?
c) O que centrmero e qual sua funo?
d) O que so cromtides? o que representam?

Vvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvv

Atividades de Prticas de Biologia como componente de formao


pedaggica.
Atividade 1

Biologia na cozinha.
A cozinha de nossa casa pode ser um excelente laboratrio. As experincias feitas nas 2a e 3a
aula so exemplos disso. Em grupos, a turma elaborar um experimento relacionado ao programa
de biologia celular e apresentar em aula em data a ser marcada.
Atividade 2:

O USO DE MODELOS DIDTICOS E SIMULAES.


(com marcao da data para apresentao dos modelos)
Simulaes e modelos didticos so excelentes recursos didticos, principalmente se
conseguimos colocar os alunos a construir os modelos ou montar as simulaes.
Os modelos didticos, por representarem bidimensionalmente ou tridimensionalmente de
modo macroscpico estruturas e/ou funes, permitem um entendimento mais fcil de fenmenos
microscpicos que de outra forma so apresentados e entendidos apenas de forma abstrata. Os
modelos permitem uma visualizao das estruturas, tornando o assunto mais concreto. Desta
forma os modelos facilitam o aprendizado e a discusso sobre o tema em estudo.
As simulaes correspondem representao dinmica de processos, com ajuda de materiais e
dos alunos. Nas simulaes, podemos, por exemplo imprimir uma longa seqncia de DNA em

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papel e com a participao dos alunos pedir que eles encontrem uma seqncia correspondente
ao stio de clivagem de uma enzima de restrio. Podemos pedir que os alunos cortem com
tesoura este stio e posteriormente o mesmo stio de um plasmdeo. Posteriormente podemos
simular como seria uma reao de ligao de todos esses fragmentos, e uma transformao
bacteriana com os plasmdeos gerados. Por fim podemos discutir conceitos como clonagem de
genes e bancos genmicos.
Apresentamos exemplos de alguns dos modelos que podem ser construdo na pgina
www.ufsm.br/auladebio

BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR PARA A PARTE PRTICA:


LORETO, E.L.S. & SEPEL, L. M.N. Atividades experimentais e didticas de Biologia Molecular e
Celular. Ribeiro Preto, ed. Da Sociedade Brasileira de Gentica. 2003. 2a ed.

www.sbg.org.br
DEPARTAMENTO DE BIOQUMICA, UFPR. Bioqumica: aulas prticas. 5 ed.Curitiba, Ed. da
UFPR, 1997.
JORDO, B.Q e colaboradores. Prticas de Biologia Celular. Londrina, Editora UEL, 1998.
JUNQUEIRA, L.C.U e JUNQUEIRA, L.M.M.S. Tcnicas Bsicas de Citologia e Histologia. So
Paulo, Ed. Santos, 1983.
MANARA, N.T.F. Roteiro de aulas prticas de citologia vegetal. Santa Maria, Faculdade de
Agronomia-UFSM, (mimeografado-sem data).
MELLO, M.L.S. e VIDAL, B.C.; Prticas de Biologia Celular. So Paulo, Edgar Blcher, 1980.
POLIZELI, M.L.T.M., Manual Prtico de Biologia Celular. Ribeiro Preto, Holos editora, 1999.
QUESADO, H.L.C. e colaboradores. Biologia: Prticas. Fortaleza, Edies UFC, 1996.
SLATER, J. Experiments in molecular biology. Clifton, N.J., The Humana Press, 1986.
VALLE, F.C., Prticas de citologia e gentica. Rio de Janeiro, MEDSI, 2001.

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