FR - WAALER ROSE

Fator Reumatide
FINALIDADE:
Teste em placa para determinao qualitativa e semi-quantitativa de FR Waaler
Rose no soro humano.
PRINCPIO:
A prova rpida de FR-Waaler Rose uma tcnica de hemaglutinao em placa para a
determinao direta e semi-quantitativa de fatores reumatides (FR). O antgeno, uma
suspenso de hemcias de ovelha sensibilizadas com frao IgG de soro de coelho
anti-hemcias de ovelha, aglutina em presena de fatores reumatides.
REAGENTES:
Kit para 50 a 100 determinaes:

FR Waaler Rose - 1 x 2,5 ml ( tampa preta)

Suspenso de hemcias de ovelha sensibilizadas com IgG de soro de coelho antihemcias de ovelha e azida sdica 0,95 g/L. A sensibilidade do reativo tem sido
ajustada para detectar 8 (6-16) UI/ml e est padronizado frente ao Calibrador Internacional
de FR da Organizao Mundial de Sade (OMS ) - WHO 64/1 Rheumatoid Arthritis
Serum.

Controle Positivo - 1 x 0,5 ml ( tampa vermelha)

Soro humano, azida sdica 0,95 g/l.

Controle Negativo - 1 x 0,5 ml ( tampa branca)

Soro animal, azida sdica 0,95 g/l.

Placas de leitura

Esptula descartvel

OBS.: Para a realizao de 100 testes com este kit, o volume adicionado da amostra/controles e reagente
de 0,025ml (25l). Aps o uso, a placa dever ser desprezada. Placas que no forem utilizadas todas
as divises devero ser lavadas com pouco detergente e enxaguadas com grande quantidade de gua
para remover o resduo completamente.

Interpretao dos resultados:

Qualitativo: Examinar macroscopicamente a presena de uma discreta aglutinao
e a formao de um ntido halo central (concentrao das hemcias) dentro do minuto
seguinte da finalizao da reao, evitando mover ou levantar a placa durante a
observao. A presena de aglutinao indica um contedo de fator reumatide no
soro igual ou superior a 8 UI/ml. Os soros positivos podem ser titulados.
Para os soros negativos expressar o resultado como menor que 8UI/ml.
SEMI-QUANTITATIVO
1 - Diluir o soro em tubos, conforme esquema abaixo. Diluies adicionais podem
ser preparadas caso o resultado seja positivo at a diluio 1/64.
a)
Separar 6 tubos e adicionar 0,2mL de NaCl a 0,85% em cada tubo.
Transferir para o 1 tubo 0,2mL da amostra. Misturar, transferir 0,2mL do 1 tubo
para o 2 tubo, misturar e transferir 0,2mL do 2 para o 3 tubo e assim
sucessivamente at o 6 tubo desprezando 0,2mL restantes.

Tubos
Sol. Salina
Amostra
Diluio
Ul/mL

1
0,2 mL
0,2 mL
1/2
16

2
0,2 mL
1/4
32

3
0,2 mL
1/8
64

4
0,2 mL
1/16
128

5
0,2 mL
1/32
256

6
0,2 mL
1/64
512

MATERIAIS NECESSRIOS NO FORNECIDOS:

- Relgio
- Tubos de ensaio para titulaes
- Estantes para tubos de ensaio
- Salina 0,85%
- Pipetas sorolgicas
- Ponteiras

2 - Pipetar 50 l de cada tubo e adicionar nas divises da placa.

3 - Adicionar 50 l do Reagente sobre cada uma das divises.
4 - Misturar com a esptula descartvel, estendendo o lquido igualmente sobre
cada diviso da placa.
5Deixar a placa em repouso sobre uma superfcie plana durante 2 minutos. Logo
em seguida, inclinar suavemente a placa a 45 da horizontal uma nica vez e deixla novamente em repouso durante 1 minuto.
6 - Marcar os resultados.

ARMAZENAMENTO :
-A temperatura de armazenamento dever ser 2 a 8C, exceto as placas e esptulas
que podem ser armazenados temperatura ambiente.
-Manter ao abrigo da luz e evitar umidade
-No congelar
-Os produtos so estveis at a data de validade que consta no rtulo do produto

Interpretao dos Resultados:

Semi-Quantitativo: O ttulo aproximado corresponder a ltima diluio mais alta
do soro que apresentar aglutinao claramente visvel.
A faixa aproximada de FR presente na amostra pode ser obtida multiplicando-se o
limite de sensibilidade (8UI/mL) pelo ttulo obtido.

PRECAUES:

Usado para diagnstico In Vitro.

Todos os componentes de origem humana apresentaram resultados negativos

para anticorpo anti-HCV, antgeno de superfcie da hepatite B (HBsAg) e anti-HIV. No
entanto, devem ser tratados com precauo como potencialmente infecciosos.

A placa poder ser reutilizada desde queas divises sejam lavadas com pouco
detergente e enxaguadas com grande quantidade de gua para remover o resduo
completamente.

O FR Waaler Rose deve estar homogneo antes do uso. Isto pode ser realizado
por inverso cuidadosa do frasco de reagente. No agitar vigorosamente.

Os reagentes contm azida sdica. Este agente conhecido por reagir com
cobre e chumbo dos canos de pia para formar azidas explosivas. Os materiais ao
serem dispensados devem ser lavados com grande quantidade de gua para
prevenir acmulo de azida.

O descarte do material utilizado dever ser feito obedecendo-se os critrios de

biossegurana de acordo com a legislao vigente.

Seguir exatamente a metodologia proposta para obteno de resultados exatos.

Trocar as ponteiras para pipetar o reagente e os controles, para evitar

contaminao.
AMOSTRAS:
O teste deve ser feito no soro. Se a amostra de soro no for imediatamente testada
aps coleta, armazenar at 8 dias entre 2 e 8 C ou 3 meses a -20C.
Soros com forte lipemia, hemlise ou contaminao bacteriana no devem ser
usados para o teste.
Deve-se utilizar soro e no plasma, pois o fibrinognio pode causar aglutinao
inespecfica.
Os controles positivo e negativo so usados como controle visual das reaes
positiva e negativa.
Apesar do jejum prvio no ser necessrio, recomenda-se que o paciente seja
instrudo para manter o jejum prvio de 8 - 12 horas para evitar possveis interferentes
tais como a lipemia.
PROCEDIMENTO:
QUALITATIVO:
Nota:Deixar todos os reagentes e amostras atingirem a temperatura ambiente antes
do uso
Homogeneizar o FR Waaler Rose gentilmente at que no haja hemcias
aderidas na parede do frasco.
1 - Colocar 50 l do Reagente FR Waaler Rose em divises separadas da placa,
para as amostras a serem testadas, bem como para os controles positivo e negativo.
2 - Adicionar 0,05 ml (50 l) de cada amostra no diluda e 50 l de cada controle
no diludo.
3 - Misturar com auxlio da esptula descartvel, estendendo o lquido igualmente
sobre cada diviso da placa. Utilizar esptulas diferentes para cada amostra.
4Deixar a placa em repouso sobre uma superfcie plana durante 2 minutos. Logo
em seguida, inclinar suavemente a placa a 45 da horizontal uma nica vez e deix-la
novamente em repouso durante 1 minuto.
5 - Marcar os resultados.

CONTROLE DE QUALIDADE: Os controles positivo e negativo devem ser utilizados

com cada srie de testes e os resultados comparados com as amostras dos
pacientes.
VALORES DE REFERNCIA:
At 8 UI/mL
Estes valores devem ser usados como orientao, sendo que cada laboratrio
dever criar sua faixa de valores de referncia, de acordo com a populao
atendida.
LIMITAES DO PROCEDIMENTO:

A sensibilidade do teste diminui temperaturas baixas. Recomenda-se trabalhar

acima dos 10C.

A intensidade da aglutinao no indicativa da concentrao de FR nas amostras

testadas. Atrasos nas leituras podem ocasionar uma super valorizao da taxa de
fatores reumatides.

Se a concentrao de FR no soro muito elevada, podem aparecer falsas

negatividades (efeito pr-zona). Recomenda-se repetir o teste utilizando um volume
de amostras de 10l.

conveniente a combinao de vrias provas de laboratrio (p.ex.: FR-ltex

e FR turbidimtrico) juntamente com o exame clnico, para chegar a um bom
diagnstico da doena.

Os resultados obtidos com a prova de FR-Waaler Rose no so comparveis

com os obtidos na prova FR-Ltex. A diferena de resultados entre tcnicas no
reflete as diferenas quanto capacidade de ambas para detectar fatores reumatides

A incidncia de resultados positivos em soros de indivduos aparentemente

normais de 3 - 5%.

Podem aparecer falsas positividades em outras condies distintas artrite

reumatide como a mononucleose infecciosa, sfilis, hepatite e outras doenas,
assim como pessoas de idade avanada.
OBS: No se observa efeito prozona at 800 UI/mL.
INTERFERNCIAS
Nenhuma interferncia foi verificada at: Bilirrubina (20 mg/dL), Hemoglobina (10g/L)
e Lipdeos (10 g/L).
GARANTIA DE QUALIDADE
Este produto garantido pela Ebram Produtos Laboratoriais Ltda se conservado na
temperatura recomendada, utilizado durante o prazo de validade e seguindo
recomendaes do rtulo e dessa instruo de uso.
REFERNCIAS

Rose H.M. Proc.Soc.Exp.Biol.Med. 1948; 68: 1-14.

Waaler E. Acta. Pathol. Microbiol. 1940; 17: 172-179.

Singer J.M. et al. Amer. J. Med. 1956; 21: 888-892.

Waaler M. et al. Arth. Rheum. 1961; 4: 47-54.

Janeff J. Arth. Rheum. 1970; 13: 193-200.

Jones et al. Amer. J. Clin. Path. 1973; 60: 6

Arquivos Ebram.

FR WAALER ROSE
FATOR REUMATIDE

ed:abr/14

Teste de hemaglutinao para determinao qualitativa e

semi-quantitativa de Fator Reumatide no soro humano.

Ebram Produtos Laboratoriais Ltda.

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