A INFLUNCIA DO CONSUMO DE LCOOL DURANTE A GESTAO E A

LACTAO NA APRENDIZAGEM DE FILHOTES

SILVA, Liliane Maria da; ALMEIDA, Agostinha Mariana Costa de
Resumo: O presente trabalho tem como objetivo comparar o desempenho em
tarefas de aprendizagem em discriminao complexa com estmulos de luz e som,
de filhotes de gestantes submetidas ao uso de lcool. O mtodo utilizado ser o
experimental, sendo que na 1 fase do experimento sero utilizados 8 ratos Wistar
fmeas, primparas e adultas pesando em mdia 250 gramas, onde o grupo
experimental receber soluo alcolica e o grupo controle somente gua. Na
segunda fase do experimento sero retirados oito filhotes de cada grupo para tarefa
de aprendizagem de discriminao complexa que ser realizada nas Caixas de
Skinner, quando os filhotes estiverem com 90 dias de nascidos. A influncia que o
lcool pode ter sobre filhotes de ratas Wistar submetidas ao uso de lcool durante o
processo

de

aprendizagem

gestao
nestes,

amamentao

principalmente

sendo

em

avaliadas

procedimentos

dificuldades
que

de

envolvam

discriminao complexa. Portanto, o presente estudo faz-se necessrio em modelos

animais para se investigar possveis modificaes decorrentes do uso de lcool, e
sua possvel influncia no processo de aprendizagem sobre seus descendentes.
Palavras - chave: aprendizagem; discriminao, ratas Wistar, filhotes e lcool.
1- Introduo
O consumo abusivo de bebidas alcolicas - alcoolismo considerado um
problema de sade pblica no mundo. Estima-se que quase 14% da populao
preencham os critrios para dependncia ou abuso de lcool em alguma poca da
vida. O uso de lcool constitui a terceira causa de mortalidade que poderia ser
prevenida. O hbito de beber um dos costumes mais antigos da humanidade,
datando desde 6.000 A.C. e que apesar de todos os males que esse vcio provoca
permanece at hoje no campo social.
O etanol um componente comum das bebidas alcolicas e est
disposio da populao humana para ser consumido. Mulheres grvidas, muitas
vezes, no se abstm do uso dessa droga, o que causar consequncias para o
desenvolvimento embrionrio e fetal como prematuridade e natimortalidade. O

etanol causa danos nos rgos em geral e nos neurnios adultos ou em

desenvolvimento e induz importantes efeitos neurotxicos no desenvolvimento do
crebro (Ferreira & Silva, 2005).
Segundo Surkan et al. (2012) o consumo de lcool um importante fator
de risco para a doena nos pases desenvolvidos. Alm de suscetibilidade gentica,
o consumo de lcool moldado pelo ambiente social e familiar. A qualidade das
relaes parentais pode ser um dado importante para o abuso de lcool.
De acordo com Santos et al. (2010), o alcoolismo definido como uma
sndrome multifatorial com comprometimento fsico, mental e social. Estima-se que
mais de dois teros das pessoas em pases ocidentais bebem alm do que apenas
ocasionalmente. Estudos apontam que nos Estados Unidos aproximadamente 10%
das mulheres e 20% dos homens preenchem critrios diagnsticos para abuso do
lcool, e 3% a 5% das mulheres e 10% dos homens preenchem critrios para
dependncia ao longo da vida.
Segundo Santos et al. (2010), o alcoolismo um problema que afeta de 1 a
2% das mulheres em idade frtil. O consumo de lcool, tanto moderado como alto,
durante o incio da gravidez, pode ocasionar alteraes do crescimento e do
desenvolvimento morfolgico do feto, sendo considerado, atualmente, como um
problema de sade pblica. Apesar de gerar um grande custo social, ainda h
carncia de estudos epidemiolgicos sobre efeitos do lcool sobre o feto no Brasil. A
metabolizao do etanol feita principalmente no fgado e se inicia imediatamente
aps a ingesto.

Gestao com lcool

Santos et al. (2010) afirmam que devido a seu pequeno tamanho e suas
propriedades de dissociao e polarizao, o lcool solvel em gua e
relativamente solvel em solventes no polares. Por esta razo, pode atravessar as
membranas celulares e se difundir por todos os lquidos e tecidos do organismo.
Dessa forma, atravessa livremente a barreira placentria e se distribui pelo lquido
amnitico, atingindo os tecidos do feto. Os nveis sanguneos materno e fetal so
aproximadamente iguais aps a ingesto materna de lcool. A difuso passiva do

lcool ocorre por gradiente de concentrao de tal maneira que os nveis materno e
fetal so similares at que todo o etanol seja metabolizado.
De acordo com Santos et al. (2010), os efeitos teratognicos do lcool vm
desde a antiguidade, e no decorrer da histria, houve um evidente aumento da
incidncia de abortos, natimortos e malformaes congnitas em recm-nascidos de
mes alcoolistas. H uma associao bem documentada entre a ingesto materna
de lcool e o desenvolvimento da Sndrome Alcolica Fetal (SAF), que
caracterizada por dficit de crescimento, dismorfismo facial e evidncia de
anormalidades do sistema nervoso central.
Ainda de acordo com o autor, no Brasil, h poucos dados sobre efeitos
teratognicos do lcool. Estima-se a incidncia de alcoolismo materno em 6/1.000
gestantes e a incidncia de SAF em 1/1.000 recm-nascidos (RNs). No entanto,
calcula-se que um quarto das grvidas deste pas faa uso espordico de bebida
alcolica. H diversos estudos mostrando os efeitos do etanol em descendentes de
ratas nas quais foi administrado lcool durante a gestao, claramente
demonstrando a associao entre alcoolismo na gravidez e defeitos teratognicos
encontrados nos fetos. A comparao entre os achados em descendentes humanos
expostos ao etanol durante a vida uterina bastante consistente e justifica a escolha
de roedores para os estudos animais.
De acordo com Santos et al. (2010), o estudo dos efeitos do lcool em
condies controladas torna-se importante para se reconhecer os diferentes efeitos
dessa substncia sobre o organismo. No entanto, sabe-se que a suscetibilidade fetal
ao lcool modulada por quantidade ingerida, poca da exposio, estado
nutricional e capacidade de metabolizao materna e fetal.
Segundo Guerri e Sanchis (1985) o etanol atravessa livremente a barreira da
placenta, mas existe um gradiente de concentrao de acetaldedo entre me e feto
que varia com a idade de gestao.
De acordo com Travis et al. (1995) o consumo crnico de lcool em ratas
grvidas produziu um acmulo de etanol elevado em fluidos fetais e alteraes na
atividade do fgado (ADH), dependendo da situao fisiolgica (gravidez,
desenvolvimento, estado virgem).

Discriminao Complexa
Segundo Bueno et al. (2007), vrios estudos envolvendo condicionamento
Pavloviano e operante, em procedimentos de discriminao condicional, tm sido
utilizados com o objetivo de melhor se entender os processos envolvidos no
estabelecimento das associaes entre seus elementos primrios: estmulo,
resposta e reforo. Em outras palavras, Pavlov descobriu que estmulos podem
controlar respostas reflexas quando h pareamento e associaes entre um
estmulo neutro e o estmulo incondicionado (US), e com isso, o estmulo neutro
adquire a propriedade de estmulo condicionado (CS). O estmulo CS capaz de
ativar a representao do US.
Ainda segundo o autor a distribuio de respostas durante as prticas sugere
que apesar de o animal poder estar sob controle do tempo total de durao da
prtica, seu repertrio comportamental modulado pelos estmulos presentes no
decorrer da prtica: acelerao positiva de respostas condicionadas em prticas de
discriminao condicional positiva.
Segundo Feliciano apud Skinner (2006) diferentemente de uma situao de
discriminao simples definida como aprendizagens que derivam de processos de
controle de estmulos mais simples, em que se estabelece uma relao constante
entre um estmulo antecedente e uma resposta, nas discriminaes condicionais
essa relao muda de acordo com o contexto, isto , o papel de um estmulo
depende de outros que forneam o contexto para ele (CATANIA, 1999, p. 163). Em
uma discriminao condicional deve-se reforar uma resposta a um determinado
estmulo especfico apenas na presena de outro estmulo.
Ainda segundo o autor, outros autores descrevem esses tipos mais complexos
de discriminao como se um estmulo (o condicional) funcionasse como um seletor
de discriminaes, mais do que seletor de respostas individuais. Respostas a um
estmulo discriminativo especfico (SD1) e no outro (SD2) seriam seguidas de
reforo apenas se estiver presente um estmulo condicional especfico (SC1). Alm
disso, para Cumming e Berryman (1965), o estmulo condicional teria uma funo
seletiva que momentaneamente fortalece uma discriminao especfica.

Segundo Bueno (1997), o fator temporal pode afetar os processos

associativos subjacentes ao comportamento do animal, dependendo das variaes
com que ele ocorre, ou seja, o animal parece ser capaz de armazenar em sua
memria uma representao temporal dos estmulos, e utiliz-la como estratgia de
soluo para os problemas que seu meio coloca. Esta possibilidade se estende a
procedimentos de aprendizagem complexa, incluindo a representao da durao
do tempo no imaginrio animal.
O presente trabalho foi delineado a partir de um piloto para dar direo para a
futura pesquisa a ser desenvolvida.
2- Objetivos:
Comparar o grau de dificuldade de aprendizagem de animais, filhotes de
mes submetidas ao uso de lcool durante a gestao e amamentao.
3 - Justificativa e Relevncia do tema
O presente trabalho prope-se a investigar se existe relao entre exposio
pr-natal ao lcool e problemas de aprendizagem, assim como tambm problemas
de memria, para esta investigao o feto ser exposto ao lcool, ingerido pela me,
durante toda a gestao, fmea esta que mesmo antes da gravidez j ingeria lcool,
para que deste modo possamos entender se h problemas de aprendizagem
causados pela exposio ao lcool intra-tero. Para a verificao de possveis
problemas de aprendizagem utilizamos como mtodo o modelo de discriminao
complexa positiva, com estmulos de luz e som.
4 Metodologia
1 fase
4.1 - Materiais e mtodos
4.1.1 - Sujeitos:
Os sujeitos utilizados nesta fase do experimento sero 8 ratos Wistar fmeas,
mantidos no Biotrio Central, das Faculdades Adamantinenses Integradas, em uma
temperatura ambiente de 21 C, com idade de 90 dias e peso aproximado de 250
Kg.

4.1.2 - Mtodo
O mtodo utilizado ser o experimental, onde o grupo experimental receber
soluo alcolica e o grupo controle somente gua.
4.1.3 - Materiais necessrios:
lcool (etanol)
gua
4.1.4 - Procedimento
Os sujeitos sero divididos em dois grupos, controle e experimental, ambos com
quatro fmeas cada, mantidas em dupla por caixa, onde a troca da maravalha ser
feita trs vezes por semana, e em cada troca haver a pesagem dos sujeitos (sendo
que a manipulao dos sujeitos ter durao de 10 minutos). Os sujeitos sero
identificados por C1 e C2 do grupo controle e E1 e E2 do grupo experimental. Esses
sujeitos sero submetidos a uma dieta diferenciada, onde o grupo controle receber
gua e rao, disponibilizando 500 ml de gua todos os dias para cada dupla de
ratas durante todo o experimento e o grupo experimental recebero rao e soluo
de gua e lcool 70%, disponibilizando 500 ml de soluo para cada caixa, sendo
que a proporo de lcool em soluo com gua ser aumentada gradativamente de
2% a 10% nos 15 primeiros dias, onde ser estabilizada a proporo de lcool em
10% at o fim do experimento. De acordo com tabela abaixo:
Protocolo de Pesquisa lcool 2012
Qtde de dias

Protocolo

Dia

2 dias

Experimental = incio etanol 2% (v/v)

1 ao 2

Controle = gua
6 dias

Experimental = incio etanol 4% (v/v)

3 ao 8

Controle = gua
7 dias

Experimental = incio etanol 8% (v/v)

9 ao 15

Controle = gua
At o final da 1 fase

Experimental = incio etanol 10% (v/v)

16 at o final

Controle = gua

A soluo com lcool ser preparada diariamente e oferecida aos animais no

mesmo horrio. Ser anotada a quantidade ingerida e calculado a ingesto mdia
diria.
Aps 30 dias do incio do experimento, onde as fmeas do grupo experimental
j se encontraro alcoolistas, sero postas pra cruzar, com um macho para cada
duas fmeas. Uma semana aps o incio do cruzamento as fmeas sero
separadas, sendo colocada uma em cada caixa. Lembrando que durante o
cruzamento, a gestao e a amamentao, as fmeas continuaro recebendo a
soluo com lcool.
O desmame ser feito 21 dias aps o nascimento, onde as fmeas mes e as
fmeas que nascerem sero sacrificadas com dixido de carbono. Assim restaro 16
ratos Wistar machos.
2 fase
4.2 Materiais e Mtodos
4.2.1 Sujeitos
Os sujeitos utilizados nesta fase sero 16 ratos Wistar machos remanescentes
da prole das fmeas da primeira fase, com idade de 90 dias e uma mdia de peso
de 250 kg.
4.2.2. Materiais
O material utilizado ser uma Caixa de Skinner, contendo uma barra e um
bebedouro, sendo esta uma caixa de madeira com sistema de ventilao contendo
uma cmara de acrlico internamente onde se encontram a barra e o bebedouro:
gua como estmulo reforador e luz 25% e som como estmulos condicionados.
4.2.3 Procedimentos

Os sujeitos sero divididos em grupos experimental e controle e mantidos em

duplas por caixa, no Biotrio Central, das Faculdades Adamantinenses Integradas,
em uma temperatura ambiente de 21 C com uma dieta padro de gua e rao.
Inicialmente, os sujeitos sero submetidos s sees de manipulao at que
cheguem idade de 90 dias e ao peso ideal.
Com a idade de 90 dias, os sujeitos sero levados para o biotrio do
Laboratrio de Psicologia Experimental, onde se iniciar o processo de modelagem,
treino ao bebedouro, onde o sujeito ser retirado do biotrio com privao de 48
horas, que ser realizado em 7 sesses de 40 minutos, com todos os sujeitos,
depois de modelados os sujeitos sero submetidos a uma tarefa de discriminao
condicional complexa, com dois estmulos discriminativos, luz sendo x e som sendo
y, esta tarefa ser realizada em 16 sesses. Antes de iniciar o procedimento de
discriminao com o animal, o mesmo ser retirado do biotrio do Laboratrio de
Psicologia Experimental, das Faculdades Adamantinenses Integradas com privao
de 48 horas. Verificaremos ento o funcionamento da caixa de Skinner e
colocaremos o animal na mesma. Ento iniciaremos o procedimento de
discriminao condicional complexa, o bebedouro ficar na posio manual e o
sujeito, ainda sem estmulo, ficar sem reforo, logo depois sero apresentados dois
estmulos para ele (xy) e a chave do bebedouro colocada em posio automtica,
reforando as suas respostas, depois retiraremos um dos estmulos e colocaremos
novamente a chave em posio manual e assim sucessivamente.
4.3 Tarefa
Na tarefa de discriminao condicional complexa, o sujeito ter que
discriminar entre dois estmulos luz (x) e som (y), sendo que ele receber o estmulo
reforador gua - somente quando os dois estmulos (xy) forem apresentados
juntos, quando apenas um estmulo discriminativo for apresentado (x) ele no
receber o reforo. A resposta esperada do animal a presso barra da Caixa de
Skinner, apenas quando os estmulos forem apresentados juntos (xy).

Sujeito desenvolvendo tarefa na Caixa de Skinner

6 Resultados Esperados
O presente trabalho tem como resultado esperado comprovar que o
uso de lcool durante o perodo intra-tero pode causar danos
aprendizagem de filhotes de ratas submetidas ao uso contnuo de lcool.

7 - Formas de anlise dos resultados

Se baseando nos resultados obtidos, ser feito o uso da estatstica
(mdia, desvio padro e coeficiente de varincia) para verificar se os
resultados dos grupos controle e experimental possuem uma diferena
significativa, confirmando ou no a hiptese levantada no objetivo deste
trabalho.

Referncia Bibliogrfica
BUENO, J.L.O. (1997). O Imaginrio Animal. Psicologia USP. Vol. 8, n. 2, pgs. 165180.
BUENO, Jos Lino Oliveira, WAGATSUMA, Alexandre, MARTINS, Mateus
Russomanno Estimao de Tempo em Ratos Submetidos a um Procedimento de
Discriminao Condicional. Revista Psicologia: Reflexo e Crtica, v. 20 n. (2), pg.
238-245, 2007.
FELICIANO, E.A. DE OLIVEIRA. Discriminaes simples e complexas: efeitos da
desnutrio protica e da estimulao Tese (Doutorado) Faculdade de Filosofia,
Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo, Ribeiro Preto,
2006.
FERREIRA, Tales Alexandre Aversi, SILVA, Nilson Penha. Efeitos do Etanol Sobre a
Migrao Neuronial na Formao do Neocrtex Cerebral. Biosci. J.Uberlndia, v.21,
n.1, p. 151-157, Jan. /Abril 2005.
GUERRI, Consuelo, SANCHIS, Rosa. Acetaldehyde and alcohol levels in pregnant
rats and their fetuses. Alcohol. Volume 2,(2), 267-270,1985.
SANTOS, Ariane Melare Ramos dos; MOTTA, Clber de Moraes; SOUZA, Elen
Cristiane Augusto de; MORAES, Suzana Guimares de. Anlise Histomorfolgica do
Fgado de Ratas e de seus Fetos Expostos ao lcool Durante a Gestao. Rev. Fac.
Cincias Mdicas. Sorocaba, v. 12, n. 4, p. 10-14, 2010
SURKAN,

Pamela

J.,

MILLER,

Rebecca

Fielding,

MELCHIOR,

Maria

Parental.Addictive Behaviors. Volume 37, (3), 313-317.2012.

TRAVES, Carmem, LAURA, Camps, TEJERO, Dolores Lpez .Liver alcohol

dehydrogenase activity and ethanol levels during chronic ethanol intake in pregnant
rats and their offspring. Pharmacology, Biochemistry and Behavior. Volume 52, (1),
93-99, 1995.