Bioinformática

Clonaje y caracterización molecular in silico de un

transcrito de fosfolipasa A2 aislado del veneno de

la serpiente peruana Lachesis muta

Abioluz Robson Behrend

 Metodos
• Veneno de Surucucu (400 mL)
• Purificação e Isolamento do RNA com o
KIT RNA Purification (AMRESCO) e
inibido com RNase e DNase conforme
instruções do fabricante.
• Amplificação do Gene sPLA2 (cDNA)
• Foi separado por eletroforese e
purificado com o it Cyclo-Pure-Gel
Extraction (AMRESCO)
• foi utilizado para a clonagem o Sistema
pGEM®-T Easy (Promega) 
• Extração dos plasmidios kit Cyclo-
Prep™ Plasmid DNA Purification
(AMRESCO)
• Seqüenciamento do cDNA
 Programas
• A seqüência de nucleotídeos programa blastn
• Banco seqüências de genes que
apresentaram maior similaridade com
GQ265920 foram alinhadas usando Clustal W
• Arvore filogenética programa Phylip
• Seqüência transcrita programa Translate tool 
• Peso molecular e seqüência molecular da
proteína programa Protparam
• Estrutura tridimensional programa SWISS
MODEL
 Referencia
• JIMENEZ, Karim L. et al. Clonaje y
caracterización molecular in silico de un
transcrito de fosfolipasa A2 aislado del veneno
de la serpiente peruana Lachesis muta. Revista
Peruana de Medicina Experimental Y Salud
Pública, Lima, v. 27, n. 4, dez. 2010. Disponível
em: <http://www.scielosp.org/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S1726-
46342010000400007&lng=pt&nrm=iso>. Acesso
em: 14 mar. 2011.