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Aminoácidos e Proteínas
Recife
1999
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AMI-OÁCIDOS
2.Fórmula geral:
O
//
R − CH − COO− ou R − CH − C
α α \
NH3 NH2 OH
+
O H COOH H O R’
// ||
R _ CH − C + N − C H > R − C − C − N − C − COOH
α \
N H2 OH H R’ NH2 H
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etc. Adotaremos a classificação dos aminoácidos de acordo coma
polaridade dos grupos R.
CH3
1) H 2) \
CH − CH − COOH
CH3 − C − COOH /
CH3 NH2
NH2)
alanina (Ala) Valina (Val) *
3
7) − C − CH 2 − CH − COOH
C NH2
NH H
Tripófano (Trp)*
3)
HO − − CH2 − CH − COOH Tirosina (Tyr)
NH2
4) H − S − CH2 − CH − COOH
Cisteína (Cys)
NH2
4
5) H2C −COOH 6) O = C − CH2 − CH − COOH
| Glicina (Gly ) | | Asparagina(Asn)
NH3 NH2 NH2
2) --
OOC − CH2 − CH2 −CH − COOH Ac. Glutâmico (Glu)
|
NH2
5
2) H2N − C − NH − CH2 −CH2 − CH2 −CH − COOH Arginina (Arg)*
|| |
+
NH2 NH2
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4.Propriedades Físicas dos Aminoácidos
4.1-Solubilidade
Todos são solúveis em água e em solventes polares como metanol e etanol.
Encontram-se ionizados em solução aquosa.
4.2-Caráter Anfótero
+
OH -
↓
(Amino ácido)-
proteínas)
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5-Separação e Análise de Misturas de Amino ácidos
Tyr-Gly-Gly-Phe-Met ou Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu
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a seqüência dos mesmos em peptídeos e polipeptídeos que determina sua
especificidade de ação e efeitos biológicos.
Outros exemplos de peptídeos com intensa atividade biológica são:
Glucagon - Hormônio pancreático que se opõe a ação da insulina
Corticotrofina- Estimula o córtex adrenal.
Curiosidade:
A parede celular de bactérias tem como estrutura peptídeos ligados a
açúcares .
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Proteínas
DEFI-IÇÃO:
São polímeros de amino ácidos unidos entre si por ligações
peptídicas. Devido ao caráter dessa ligação, as proteínas tem, em
geral, apenas uma conformação espacial em suas condições
biológicas normais (pH, temperatura) , conhecida por conformação
nativa ou proteína nativa.
Funcões:
Armazenamento: Ferritina (Fe → baço)
Catalítica : Urease; amilase; lipase
Contrácteis: Actina e Miosina; Flagelina
Estrutural: Queratinas; Colágeno; Elastinas; Proteoglicanas
Protetora: frinogênio, Trombina(coagulação do sangue);
Ricina; Gossipina. Anticorpos
Reguladora: Insulina; oxitocina (útero e glândulas mamárias)
Vasopressina (rim, artérias)
Transportadoras: Hemoglobina (O2); Albumina do soro;
Mioglobina; Citocromos
Nutritivas e de reserva: Gliadina (trigo); Ovoalbumina;
Caseína (leite); Ferritina (Fe)
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Classificação das Proteínas de acordo com a forma:
Globulares Fibrosas
Solúveis em água e soluções Insolúveis em água, resistentes à
salinas diluídas ação proteolítica
Forma esférica, Cadeia compridas e filamentosas,
polipepitídica enrolada em Cadeia polipeptídica estendida
forma globular ao longo de um eixo
Quase todas as enzimas e Proteínas estruturais
proteínas de reserva
Ex: Hexoquinase, γ-Globulinas Ex: ∝-Queratinas ,Colageno
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Classificação das Proteínas de acordo com a Composição
Simples Conjugadas
Contém apenas Amino-ácidos Possuem grupos químicos que
ligados em cadeia polipeptídica não são Amino-ácidos ligados à
e nenhum outro grupo químico cadeia polipeptídica
Porção não protéica chama-se
GRUPO PROSTÉTICO
queratinas, lipoproteínas ( no sangue),
colágeno, glicoproteínas (γ-Globulinas),
insulina fosfoproteínas(caseína do leite)
hemoproteínas (hemoglobina),
Metaloprotínas (Ferritinas)
R1 R2 R3 R4 R5 R6 etc
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polipeptídica. Esta estrutura apresenta arranjo espacial α-hélice ou
conformação-β (folha pregueada). Ex:
α-hélice β-pregueada
α-hélice conformação-β
Aumentam de tamanho ao serem
aquecidas. Em presença de calor Não aumentam de tamanho ao serem
húmido podem adquirir conformaçã-β aquecidas
(reversível)
Ligações entre aac. intracadeia Ligações entre aac intercadeia
ricas em liações cistina não há liações cistina entre cadeias
flexibilidade variável das β-queratinas. Flexíveis e moles
são ricas em aac com grupos R Os grupos R projetam-se para fora,
hidrofóbicos estrutura em zig-zag
insolúveis em H2O
Ex: α-queratinas encontradas nas Ex: β-queratinas encontradas em
unhas, pele, lã, cabelos, casco de teia de aranha, seda (fibroína)
tartaruga.
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ligações hidrofóbicas, pontes de hidrogênio, ligações
covalentes entre os radicais R de amino ácidos que compõem a
proteína. São geralmente proteínas globulares. Ex: mioglobina,
lisozima, Quimiotripsina, ribonuclease, citocromo c.
Ex:
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Causa : Mudanças de pH significativas
Mudanças de Temperatura
Radiações U.V
Raio X
Vibrações ultra-sônicas
Agitação
Solvantes orgânicos (Etanol, acetona, éter)
Ácidos
Propriedades Proteicas
1- Anfoterismo:
+
(PROTEÌNA)- + H+ → +
(PROTEÌNA)
+
OH-
↓
(PROTEÌNA)-
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condições, é chamada íon dipolar ou Zwitterion . Esta molécula
não se move em um campo elétrico, tende a precipitar.
2- Solubilidade
Pode ser alterada pela presença de uma solução salina. A
afinidade da proteína pode ser melhorada ou não pela adição de
sais, como (NH4)2SO4, NaCl entre outros, mas a concentração do
sal deve ser bem avaliada de modo a se obter proteína solúvel ou
precipitada.
“Salting-in” - a adiçao de sal, em pequenas quantidades, diminui a
interação proteína - proteína, aumentando a interação proteína -
H2O, solubilizando o polipeptídeo.
“Salting-out”- A adição de sal em grandes quantidades, aumenta a
interação proteína - proteína, diminuindo a interação proteína -
H2O, resultando numa “desidratação da H2O ativa” e precipitação
do polipeptídeo.
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Purificação das Proteicas
As proteínas podem ser separadas e purificadas em seu estado
nativo através de diferentes processos:
1- Diálise: separ as proteínas de moléculas de baixo peso
molecular presentes no extrato das células.
2- Filtração em gel (peneira molecular): separação das
diferentes proteínas por peso molecular.
3- Eletroforese: Separação das diferentes proteínas com base
no sinal e número de cargas elétricas de cad uma delas
4- Cromatografia de troca iônica: fundamenta-se nas
diferenças entre as densidades e o sinal de suas cargas
elétricas em determinado pH.
Dosagens proteicas
As mais tradicionais são :
Método de Kjeldahl
Absorção no U.V.
Método de Biureto
Método de Lowry
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Referências Bibliográficas
Lehninger, A L.; Principios de Bioquímica.São Paulo. Ed.
Savier, 1993
Garret, R.G. & Grisham, C.M.; Biochemistry. Nova York.
Saunders College Publishing, 1995
Brock, T. D. & Madigan, M. T.; Biology ofMicrorganisms.
Nova Jersey. Prentice-Hall International, Inc.1991.
Elliott, W. H. & Elliott, D. C.; Biochemistry and Molecular
Biology. Oxford. Oxford University Press, 1997
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