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Bacteria 3
Bacteria 3
Prof. IVAna
Crescimento Microbiano
CRESCIMENTO MICROBIANO:
Em microbiologia, o termo crescimento refere-se a um aumento do nmero de clulas e no ao aumento das dimenses celulares.
Crescimento Microbiano = associado ao crescimento de uma populao de clulas (uma clula dar origem a duas ao fim de um certo tempo, tempo de gerao ou de duplicao.)
Fatores fsicos
1. TEMPERATURA:
A maioria dos microrganismos cresce bem nas temperaturas ideais para os seres humanos.
Temperatura onde a espcie capaz de crescer onde a espcie apresenta melhor crescimento temperatura, onde ainda possvel o crescimento
Bactria: Bacillus cereus Respirao: aerbico facultativo Incubao: 1-6 horas (casos de vomito) 6-24 (casos de diarria) Principais Alimentos Associados: arroz cozido Observaes: produz esporos e toxinas
Bactria: Clostridium botulinum Respirao: anaerobico Incubao: 12-36 horas Principais Alimentos Associados: alimentos em conservas e embutidos de carne Observaes: produz esporos e toxinas termolbeis
Bactria: Clostridium perfringens Respirao: anaerobico Incubao: 10-12 horas Principais Alimentos Associados: carnes aquecidas e reaquecidas em temperaturas inadequadas Observaes: produz esporos e toxinas comum em alimentos servidos em escolas, hospitais e presdios
Bactria: Listeria monocytogenes Respirao: aerobica Incubao: 3 semanas Principais Alimentos Associados: derivados lacteos, frutos do mar e ostras Observaes: nao forma esporos mas resistente ao congelamento, secagem e calor
Bactria: Staphyloccus aureus Respirao: aerbico Incubao: 2 - 4 horas Principais Alimentos Associados: alimentos com alto grau de manipulao que permaneam por muito tempo em temperatura ambiente Observaes: produz toxina termoestavel
Bactria: Streptococcus spp (grupo A e D) Respirao: aerobico Incubao: grupo A 1-3 dias horas, grupo D 2-36 horas Principais Alimentos Associados: leite no pasteurizados e alimentos preparados por pessoas infectadas Observaes: Grupo A causa faringite estreptococica, Grupo D causa a sindrome semelhante a Staphylococcus
2. pH:
Maioria dos microrganismos cresce melhor perto da neutralidade (pH 6,5 7,5); Poucas bactrias so capazes de crescer em pH cido (como pH 4,0)
Bactrias acidfilas: alto grau de tolerncia acidez (Thiobacillus de 0,5 a 6,0 com timo entre 2 e 3,5) - Bactrias alcaliflicas: (Bacillus e Archaea) (pH 10 11). Fungos - tendem a ser mais acidfilos que as bactrias (pH <5).
3. PRESSO OSMTICA
No Halfilos: no necessitam de sal e no toleram a presena no meio. Halotolerantes:
Fatores Quimicos
CARBONO:
Essencial para a sntese de todos os compostos orgnicos necessrios para a viabilidade celular (elemento estrutural bsico para os seres vivos) organismos quimio-heterotrficos: obtm C a partir de materiais orgnicos como protenas, carboidratos e lipdeos. organismos quimioautotrficos organismos fotoautotrficos
NITROGNIO
Obteno de N:
- N, S: sntese de protenas
Decomposio de materiais orgnicos (protenas, aminocidos) utilizado para sintetizar os grupos aminos presentes nos aminocidos.
Amnia (NH4 +)
Nitrato (NO3-)
Fixao de N: algumas bactrias so capazes de utilizar N gasoso diretamente da atmosfera. Microrganismos do solo (ex. bactrias dos gneros Rhizobium e Bradyrhizobium) utilizam este processo para obteno de N, tanto para elas como para as plantas que convivem simbioticamente (algumas leguminosas soja, feijo). Cultivo de leguminosas: > fertilidade do solo sem a necessidade de implementao de fertilizantes qumicos
ENXOFRE
utilizado na sntese de aminocidos contendo S e de vitaminas (tiamina e biotina)
FSFORO
essencial para a sntese dos cidos nuclicos e para os fosfolipdios componentes da membrana celular.
2. GUA:
Essencial para os microrganismos - Disponibilidade varivel no ambiente
atravs do aumento da concentrao de solutos internos seja pelo bombeamento de ons para o interior celular ou pela sntese de solutos orgnicos (acares, alcois ou aminocidos).
3. OXIGNIO:
2. ANAERBIOS
Aerotolerantes: no necessitam de O2 mas crescem melhor sem O2 Estritos (obrigados): no toleram O2 (letal)
AERBIO ESTRITOS
baixa [O2]
Meios de cultura
meio de cultura: material nutriente preparado no laboratrio para o crescimento de microrganismos. cultura: microrganismos que crescem e se multiplicam no meio de cultura. meio definido:
MEIO SELETIVO: favorece o crescimento de uma determinada bactria de interesse, impedindo o crescimento de outras bactrias. ex: gar sabouraud dextrose, ph 5,6, utilizado no crescimento de fungos que so favorecidos, em relao as bactrias, pelo baixo ph. MEIO DIFERENCIAL: facilita a identificao de um determinado organismo. ex: meio gar-sangue, utilizado para a identificao de bactrias capazes de destruir clulas sangneas (anel claro em torno da colnia). MEIO DE ENRIQUECIMENTO: favorece o desenvolvimento de uma populao bacteriana que esta em desvantagem entre outras populaes.
MEIOS REDUTORES: meios com reagentes, como o tioglicolato de sdio, que capaz de se combinar com o oxignio dissolvido eliminando este elemento do meio de cultura (especfico para microrganismos anaerbicos).
DIVISO BACTERIANA:
FISSO BINRIA TEMPO DE GERAO FASES DE CRESCIMENTO: FASE lag FASE log FASE ESTACIONRIA FASE DE MORTE CELULAR
o tempo necessrio para uma clula se dividir (e sua populao dobrar de tamanho).
tempo varia de acordo com o organismo; depende das condies ambientais (nutricionais, temperatura, etc); maioria das bactrias: 1 3 h
FASE lag: Pouca ou ausncia de diviso celular (fase de adaptao) - 1 hora (estado de latncia, com intensa atividade metablica) FASE log: Incio do processo de diviso (perodo de crescimento ou aumento logaritmo). Reproduo celular extremamente ativa, sensveis as mudanas ambientais (* EFEITO DE ANTIBITICOS) FASE ESTACIONRIA: Velocidade de crescimento diminui o n de clulas vivas = n de clulas mortas FASE DE MORTE CELULAR: O n de clulas mortas excede o de clulas novas.
Figura 6. Curva de crescimento bacteriano mostrando as 4 fases tpicas.
QUANTIFICAO DIRETA:
CONTAGEM EM PLACAS FILTRAO MTODO DO NMERO MAIS PROVVEL CONTAGEM DIRETA AO MICROSCPIO
QUANTIFICAO INDIRETA:
TURBIDIMETRIA ATIVIDADE METABLICA PESO SECO
QUANTIFICAO DIRETA:
CONTAGEM EM PLACAS
tcnica mais utilizada na determinao do tamanho da populao bacteriana;
(2) FILTRAO
a amostra pode ser corada ou analisada a fresco. utilizam cmaras de contagem DESVANTAGENS:
no separa clulas mortas e vivas pode haver erros de contagem difcil contagem para bactrias mveis
QUANTIFICAO INDIRETA:
(1) TURBIDIMETRIA
quantidade de um certo produto (como cido ou CO2) diretamente proporcional ao nmero de clulas bacterianas.
A quantidade de luz que atravessa o detector inversamente proporcional ao n. de bactrias. Quanto > o n. de bactrias < a quantidade de luz que transmitida Figura 10. Determinao do n de bactrias por turbidimetria.
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