HOSPITAL SO JOSE LABORATORIO DE PATOLOGIA CLINICA PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO

Hemog !m! Com"#e$o %T &000i Cdigo: POP-HC-003 'o#(!: ) de *

1 - Situao de Reviso: Implantado em 04/2014. 2 - Objetivo: Descrever o Procedimento Operacional Padro (POP) para a realizao de hemo rama completo. 3 - Campo de Aplicao: !s "reas onde este doc#mento se aplica esto de$inidos nos %#adrados a&ai'o marcados com ('). ' Diretoria do *a&orat+rio ' /arantia da 0#alidade 3ecepo 2oleta 6ecretaria/4misso de *a#dos ,io%#-mica ' 1ematolo ia Im#nolo ia 5icro&iolo ia Parasitolo ia .rin"lise 2itopatolo ia *ava em/4sterilizao

4 - Refer !cia: 4.1 7 POP7*,/7001 7 In$orma8es aos pacientes9 4.2 7 POP7*,/7002 7 2oleta de material9 4.: 7 POP7*,/700: 7 5an#seio; armazena em e preservao de amostras9 4.4 7 POP7*,/700: 7 ,iosse #rana9 4.< 7 POP7*,/7004 7 4misso; controle e entre a de la#dos9 4.= 7 POP7127001 > 1emo rama completo9 4.? 7 POP72I07001 7 2ontrole Interno da 0#alidade9 4.@ 7 POP72407001 7 2ontrole 4'terno da 0#alidade. " - #ermi!olo$ia% &efi!io e S'mbolo: <.1 7 6inonimiaA no aplic"vel9 <.2 7 *,/ 7 *a&orat+rio /eral9 <.: 7 BC, 7 Bicha CDcnica de ,ancada9 <.4 7 12 > 1emo rama completo9 <.< 7 2I0 7 2ontrole Interno da 0#alidade9 <.= 7 240 7 2ontrole 4'terno da 0#alidade. ( - &escrio: O sistema de hematolo ia a#tomatizado 6Esme' FC74000i #tiliza o poder da citometria de $l#'o $l#orescente e da tecnolo ia com $oco hidrodinGmico. .tilizando #m laser de diodo Hnico; de Hltima erao; a citometria de $l#'o $l#orescente da 6Esme' $ornece a sensi&ilidade necess"ria para medir e di$erenciar os tipos de cDl#las no san #e total e amostras de l-%#idos &iol+ icos. ! tecnolo ia $l#orescente e $oco hidrodinGmico permitem ao FC74000i di$erenciar de $orma consistente as pop#la8es de cDl#las &rancas; vermelhas e pla%#etas normais das pop#la8es anormais; dimin#indo assim o nHmero de interven8es man#ais.
4la&oraoA IomeA Jac+ 5es%#ita 2ar oA Patolo ista cl-nico DataA 0=/200K Listo !provao e *i&eraoA IomeA *Hcia *oiola 2ar oA ,io%#-mica DataA 0=/200K ListoA 3evisado IomeA Darcielle Dias 2ar oA ,io%#-mica Data A 2:/04/2014 ListoA

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()1 - *ri!c'pio do #este 6o #tilizados os se #intes mDtodos para a an"lise das amostrasA 5Dtodo de deteco de impedGncia o# 2orrente 2ont-n#a (22); com&inada com a tecnolo ia de $oco hidrodinGmico. > 3,2 (hem"cias) / P*C (pla%#etas)9 6*6 1emo lo&ina > 1/, (hemo lo&ina)9 2itometria de $l#'o com laser semicond#tor > M,2 (le#c+citos)9 2itometria de $l#'o $l#orescente > conta em di$erencial. !s hem"cias e pla%#etas so contadas em #m canal dedicado #sando como mDtodo de deteco impedGncia o# 2orrente 2ont-n#a (22); com&inada com a tecnolo ia de $oco hidrodinGmico. O hemat+crito D medido eletronicamente; &aseado no princ-pio de %#e a amplit#de do p#lso (variao na volta em); prod#zida por cDl#las %#e passam atravDs do canal D proporcional ao vol#me da cDl#la. O hemat+crito D determinado %#ando se compara o vol#me total o# ac#m#lado de eritr+citos com o vol#me de san #e na dil#io. ! hemo lo&ina D determinada pelo mDtodo de la#ril s#l$ato de s+dio (6*6). O (6*6) sol#&iliza as lipoprote-nas da mem&rana do eritr+cito; %#e se rompe; li&erando a hemo lo&ina. Os principais derivados da hemo lo&ina rea em com o (6*6) criando o composto (6*671/,); %#e D medido espectro$otometricamente. Listo %#e as determina8es de hemo lo&ina so $eitas a partir de #ma dil#io e na s#a pr+pria cGmara separada; no h" nenh#ma inter$erNncia de altas conta ens de cDl#las &rancas; lipemia o# prote-nas anormais. Determinao dos le#c+citosA o mDtodo de citometria de $l#'o com laser semicond#tor tem como &ase a deteco da l#z dispersa $rontal; da l#z dispersa lateral e da l#z $l#orescente lateral representada em #m dia rama de disperso e #m histo rama &idimensional. ()2 - Aplicao Cl'!ica O san #e D constit#-do por #m $l#ido no %#al e'istem cDl#las em s#spenso; molDc#las e -ons dissolvidos em " #a. O constit#-do de d#as $ra8es com&inadas; na proporo de <<P para o plasma e 4<P para as cDl#las. ! poro cel#lar apresenta trNs tipos de cDl#las em s#spenso no plasmaA l+&#los vermelhos (o# hem"cias o# eritr+citos); l+&#los &rancos (o# le#c+citos) e pla%#etas (o# trom&+citos). O hemo rama consiste na avaliao dos constit#intes cel#lares do san #e; por meio da conta em de hem"cias; le#c+citos e pla%#etas; dosa em de hemo lo&ina; determinao do hemat+crito e dos -ndices hematimDtricos; e conta em espec-$ica dos diversos tipos de le#c+citos. !s altera8es no nHmero de hem"cias por mm: compreendem as anemias e as policitemias. !s anemias se caracterizam por #ma red#o do nHmero de hem"cias; e esto
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$re%#entemente associadas a altera8es da mor$olo ia das hem"cias e &ai'a concentrao de hemo lo&ina. !s anemias so sempre sec#nd"rias. Pode7se #tilizar a classi$icao mor$ol+ ica das anemias para a#'iliar no dia n+stico etiol+ ico das mesmas. !ssim; temosA !nemia macroc-tica e normocrQmicaA de$iciNncia de vitamina ,12; de$iciNncia de "cido $+lico; doenas hep"ticas crQnicas; hipotireoidismo9 !nemia normoc-tica e normocrQmicaA hemorra ia a #da; hem+lise; hemo lo&inopatias9 !nemia microc-tica e normocrQmicaA in$lama8es s#&a #das e crQnicas; into'ica8es por dro as; neoplasias; doenas end+crinas9 !nemia microc-tica e hipocrQmicaA anemia $erropriva; envenenamentos; talassemias. !s policitemias correspondem a #m a#mento do nHmero de hem"cias; onde o denominador com#m D $re%#entemente a hip+'ia; com mecanismo compensador; a#mentando o nHmero de hem"cias; como nas doenas card-acas e p#lmonares crQnicas. Bisiolo icamente ocorre no recDm7nascido e nas randes altit#des. 0#ando relativas so sec#nd"rias R desidratao. ! policitemia vera o# doena de Las%#ez7Osler D prim"ria; de etiolo ia o&sc#ra. !s varia8es n#mDricas dos le#c+citos esto en%#adradas em dois r#posA !s le#cocitoses so caracterizadas por #m a#mento do nHmero de le#c+citos alDm dos limites normais. /eralmente ocorre o a#mento de #m tipo mor$ol+ ico %#e predomina so&re os demais. Ia pr"tica encontramos le#cocitoses caracterizadas por ne#tro$ilia; eosino$ilia e &aso$ilia; correspondendo ao a#mento de ne#tr+$ilos; eosin+$illos e &as+$ilos; respectivamente. 2om relao aos lin$+citos e mon+citos; temos a lin$ocitose e a monocitose. ! intensidade da elevao depende da nat#reza do a ente etiol+ ico; da resistNncia do indiv-d#o e do estado dos +r os hematopoDticos. Podem ser devidas a in$ec8es no pio Nnicas; into'ica8es; tra#matismos o# hemorra ias a #das (com o nHmero de le#c+citos se sit#ando entre 12.000 e 20.000 por mm:)9 a in$ec8es pio Nnicas (entre 1<.000 e :0.000 por mm:)9 e a le#cemias ( eralmente acima de :0.000 por mm:). !s le#copenias se caracterizam por #ma red#o do nHmero de le#c+citos circ#lantes a&ai'o dos limites normais. O o res#ltado da ins#$iciNncia da med#la +ssea em prod#zir le#c+citos. ! terminolo ia para cada tipo de le#c+cito DA ne#tropenia; eosinopenia; &asopenia; lin$ocitopenia e monocitopenia. 2a#sas $re%#entes de le#copenia soA in$ec8es como $e&re ti$+ide e parati$+ide; doenas virais como ripe e sarampo na $ase prodrQmica; mal"ria e septicemia com depresso med#lar9 #so de medicamentos como tio#racil; s#l$onamidas e dro as antineopl"sicas; o# contato com s#&stGncias t+'icas como inseticidas9 e invaso e s#&stit#io do tecido hematopoDtico por tecido neopl"sico. O a#mento do nHmero de pla%#etas o# trom&ocitose pode ocorrer nas hemorra ias; $rat#ras +sseas; trans$#so de san #e; hem+lise; in$ec8es a #das como monon#cleose in$ecciosa e septicemia; na policitemia vera; le#cemia miel+ide; doena de 1od Sin; ca%#e'ia; e na esplenectomia. ! red#o do nHmero de pla%#etas o# trom&ocitopenia pode ocorrer em in$ec8es a #das como pne#monia e mal"ria; no escor&#to; por ca#sas t+'icas (s#l$onamidas; &enzeno); devido a radia8es (raios F); de ori em mielop"tica (anemia perniciosa e apl"stica;
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plasmocitoma; in$iltrao metast"tica); por destr#io a#mentada (esplenop"tica; doena de /a#cher). ()3 - Amostra 6an #e total colhido em t#&o contendo anticoa #lante 4DC!. 4vitar estase prolon ada na coleta de san #e; pois pode levar a alterao na conta em de pla%#etas. #odas as amostras biol+$icas devem ser co!sideradas como pote!cialme!te i!fecta!tes) ()4 - *adr,es% Co!trole% Rea$e!tes e Outros -!sumos: ()4)1 - Rea$e!tes: 6ol#o dil#ente 1 7 2ellpacSA cloreto de s+dio (0;=4P); "cido &+rico (0;10P); tetra&orato de s+dio (0;02P); 4DC!72T (0;02P). 6ol#o dil#ente 2 > 6tromatolEser 4D*A s#r$actante no7iQnico (0;1@ /*); sal de amQnio or Gnico %#atern"rio (0;0@P). 6tromalEzer7B,A s#r$actante no iQnico 0;4P 6ol#o corante > 6tromatolEser 4D6A pi mento de polimetina (0;002P); metanol (:P); etileno licol (K=;KP). 6ol#o hemolisante 7 6#l$olEserA la#rils#l$ato de s+dio (1;? /*). 2ontrolesA : n-veis. ()4)2 - Arma.e!ame!to e /stabilidade dos Rea$e!tes: !rmazenar a temperat#ra de 1<7:0U2. 4st"vel atD a data de vencimento indicada no r+t#lo dos rea entes. ()4)3 - Cuidados e *recau,es com o uso dos rea$e!tes Codos os rea entes so somente para uso dia$!+stico in vitro. 4m casos de contaminao acidental; lavar a parte a$etada em " #a corrente. O descarte do material #tilizado dever" ser $eito o&edecendo7se aos critDrios de &iosse #rana esta&elecidos pelo la&orat+rio; de acordo com as normas locais; estad#ais o# $ederais. ()" - /0uipame!tos e 1ateriais 2ecess3rios !nalisador 6Esme' FC 4000i. ()( - *rocedime!to #4c!ico ()()1 5 Calibrao: O procedimento eral de cali&rao encontra7se descrito no man#al do analisador 6Esme' FC 4000i.

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()()2 - *reparo do rea$e!te e procedime!to t4c!ico: Codos os rea entes so l-%#idos e esto prontos para #so. ! pipeta em de amostras e rea ente; a homo eneizao; o processamento e a impresso de res#ltados so realizados a#tomaticamente pelo analisador 6Esme' FC 4000i. Para detalhes so&re este processamento cons#ltar o man#al do sistema 6Esme' FC 4000i. ()6 - Co!trole da 7ualidade: ()6)1 - Co!trole -!ter!o da 7ualidade da 8ematolo$ia: O controle interno da %#alidade do hemo rama D $eito de acordo com as diretrizes dadas no POP72I07001 ()6)2 - Co!trole /9ter!o da 7ualidade O 2ontrole 4'terno da 0#alidade D tratado em procedimento espec-$ico ; con$orme POP72407001. (): - ;alores de Refer !cia e ;alores Cr'ticos =.@.1 > Os Lalores de 3e$erNncia adotados pelo *a&orat+rio soA 1em"cias > 1A 4;<7=;< milh8es/mm:9 5A :;K7<;@ milh8es/mm:. 1emo lo&ina > 1A 1:;<71@;0 /d*9 5A 11;<71=;< /d*. 1emat+crito > 1A 407<4P9 5A :=74?P. L25 > @07K4 $l 125 > 2?7:2 p 2125 > :27:? /d* 3DM > 11;<714;< *e#c+citos > 4.000710.000/mm: Pla%#etas > 1<0.00074<0.000/mm: =.@.2 > Os Lalores cr-ticos adotados pelo *a&orat+rio soA 1emo lo&ina > 5enor %#e =;= /d*9 5aior %#e 1K;K /d*. 1emat+crito > 5enor %#e 1@P9 5aior %#e =1P. *e#c+citos > 5enor %#e 2.000 cDl#las/mm:9 5aior %#e <0.000 cDl#las/mm: Pla%#etas > 5enor %#e 20.000/mm:9 5aior %#e 1.000.000/mm: ()< - =i!earidade% =imite de &eteco e =imita,es !o 14todo: ()<)1 - =i!earidade: Io aplic"vel. ()<)2 5 =imites de deteco: 1em"ciasA 07@.000.000/mm: 1emo lo&inaA 072< /d* 1emat+critoA 07=0P *e#c+citosA 07400.000/mm: Pla%#etasA 07<.000.000/mm:
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()1> 5 Subst?!cias i!terfere!tes co!@ecidas Io aplic"vel. ()11 - Aso de Bits: Io aplic"vel. 6 - Ciblio$rafia: *ima; !.O. 5Dtodos de *a&orat+rio !plicados R 2l-nica > CDcnica e Interpretao. 4d./#ana&ara Too an; =V ed.; 1K@<. 2arvalho; M. B. CDcnicas 5Ddicas de 1ematolo ia e Im#no7hematolo ia. 2ooperativa 4ditora e de 2#lt#ra 5Ddica *tda; <V ed; 1K@@. Pa ana T.D.A Mosby's diagnostic and laboratory test reference, <K27<K4; 1KK2. 1enrE; J. ,. 2linical Dia nosis and 5ana ement &E *a&oratorE 5ethods. M. ,. 6a#nders 2ompanE; 20th ed; 2001. Ci&Hrcio; 1. 5.A Controle interno da qualidade analtica, Ped. maro/1KK<. : - Co!trole de Re$istros: Io aplic"vel. < - A!e9os: Io aplic"vel.

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