ESCOLA SUPERIOR DE AGRICULTURA LUIZ DE QUEIROZ

LQI-800 MTODOS INTRUMENTAIS DE

ANLISE
Texto auxiliar para aulas tericas
Prof. Dr. ARAALDO AA1AIO RODELLA
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INDICE
1 CONTAMINAO EM LABORATORIOS DE ANALISES DE TRAOS DE METAIS..................... 4
1.1 Introduo............................................................................................................................................................ 4
1.2 O ambiente do laboratorio ................................................................................................................................... 4
1.3 Agua .................................................................................................................................................................... 5
1.4 Reagentes............................................................................................................................................................. 5
1.5 Frascos................................................................................................................................................................. 7
1.6 Equipamentos volumetricos ................................................................................................................................ 7
1.7 Amostradores automaticos .................................................................................................................................. 8
1.8 Testando as Iontes de contaminao.................................................................................................................... 8
2 AVALIAO DE METODOS ANALITICOS E CALIBRAO DE METODOS INSTRUMENTAIS
10
2.1 Introduo.......................................................................................................................................................... 10
2.2 Parmetros de avaliao de metodos analiticos................................................................................................. 11
2.3 Calibrao em metodos instrumentais ............................................................................................................... 15
2.4 Controle de qualidade dos resultados analiticos ................................................................................................ 19
3 AVALIAO DE DADOS ANALITICOS ............................................................................................. 22
3.1 Erros .................................................................................................................................................................. 22
3.2 Limites de conIiana.......................................................................................................................................... 24
3.3 Comparao de preciso e exatido................................................................................................................... 26
3.4 Comparao de preciso e exatido entre dois metodos.................................................................................... 27
3.5 Comparao de resultados analiticos empregando regresso linear .................................................................. 29
3.6 Propagao de erros aleatorios .......................................................................................................................... 31
3.7 Desvio padro de resultado estimado por regresso linear ................................................................................ 32
3.8 Problemas .......................................................................................................................................................... 33
4 PREPARO DE SOLUO DA AMOSTRA............................................................................................ 35
4.1 Dissoluo ......................................................................................................................................................... 35
4.2 Decomposio ................................................................................................................................................... 37
4.3 Preparo de soluo de amostra e interpretao do resultado analitico............................................................... 42
5 NATUREZA E PROPRIEDADES DA ENERGIA RADIANTE............................................................. 43
5.1 Radiao eletromagnetica.................................................................................................................................. 43
5.2 Parmetros de onda............................................................................................................................................ 44
5.3 Exemplos de calculos ........................................................................................................................................ 46
5.4 Modalidades de radiao eletromagnetica......................................................................................................... 47
5.5 Luz visivel ......................................................................................................................................................... 48
5.6 Radiao eletromagnetica e materia .................................................................................................................. 51
5.7 Historico ............................................................................................................................................................ 53
5.8 Relao de Boltzman......................................................................................................................................... 60
5.9 Absoro de energia por moleculas................................................................................................................... 61
5.10 Espectros ........................................................................................................................................................... 62
5.11 Perda da energia absorvida ................................................................................................................................ 67
6 INSTRUMENTOS PARA METODOS ESPECTROSCOPICOS ............................................................ 68
6.1 Fontes de radiao ............................................................................................................................................. 68
6.2 Recipientes de amostra ...................................................................................................................................... 71
6.3 Seletor de regio espectral ou de comprimento de onda.................................................................................... 72
6.4 Detectores de radiao....................................................................................................................................... 75
6.5 Sistema de leitura .............................................................................................................................................. 78
7 ESPECTROSCOPIA DE ABSORO MOLECULAR.......................................................................... 79
3
7.1 Lei de Beer ........................................................................................................................................................ 81
7.2 Absorbncia e Transmitncia ............................................................................................................................ 82
7.3 Desvios da lei de Beer ....................................................................................................................................... 82
7.4 Instrumentos ...................................................................................................................................................... 83
8 FOTOMETRIA DE EMISSO DE CHAMA E ESPECTROMETRIA DE ABSORO ATMICA.. 86
8.1 Atomizao em chama....................................................................................................................................... 89
8.2 Seleo de comprimento de onda e leitura do sinal ........................................................................................... 95
8.3 InterIerncias ..................................................................................................................................................... 97
8.4 Atomizao sem chama................................................................................................................................... 101
9 POTENCIOMETRIA E CONDUTIMETRIA........................................................................................ 107
9.1 Noes de Eletroquimica................................................................................................................................. 107
9.2 Potenciometria................................................................................................................................................. 112
9.3 Condutimetria.................................................................................................................................................. 121
10 CROMATOGRAFIA GASOSA............................................................................................................. 126
10.1 Introduo a cromatograIia.............................................................................................................................. 126
10.2 CromatograIia gasosa ...................................................................................................................................... 133
11 SISTEMAS DE ANALISES POR INJEO EM FLUXO FIA......................................................... 144
11.1 Introduo........................................................................................................................................................ 144
11.2 Componentes do sistema FIA.......................................................................................................................... 146
11.3 Parmetros caracteristicos de sistemas FIA..................................................................................................... 149
11.4 Variaes em sistemas em FIA........................................................................................................................ 152
11.5 Reatores ........................................................................................................................................................... 155
11.6 Determinao espectroIotometrica de algumas especies em sistemas FIA . ................................................... 155
Observao
Esta apostila no substitui a consulta e o estudo em livros textos de quimica. Ela no tem a
inteno de ser um trabalho publicado, nem auIerir meritos de autoria para seu organizador. Os topi-
cos so apresentados de Iorma sucinta e resumidos. Ela e to somente um guia preparado para auxi-
liar alunos com reIerncia a assuntos apresentados em sala de aula. E uma compilao que se baseou
em ideias obtidas em diIerentes Iontes.
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1 CONTAMINAO EM LABORATRIOS DE ANLISES DE TRAOS DE METAIS
1.1 Introduo
Estudos envolvendo o comportamento de especies quimicas no ambiente Iatalmente atingem
um ponto onde so requeridos metodos de analise com limites de deteco bem mais baixos do que
os adotados na analise quimica rotineira. Neste ponto, ao se escolher uma tecnica analitica adequa-
da, certamente vai se optar por um metodo instrumental, cuja Iaixa de trabalho envolve concentra-
es da ordem de micro ou ate mesmo nanograma por litro. No basta apenas adquirir um equipa-
mento e instala-lo numa sala qualquer de um laboratorio, onde se convive com o preparo e a mani-
pulao de amostras. E preciso estar atento para as implicaes que a escolha de um metodo analiti-
co sensivel e de baixo limite de deteco traz para a rotina de trabalho. O recurso para a compra do
equipamento sera certamente apenas a maior parcela de um total que sera exigido e investir na me-
lhoria das condies do local de trabalho e uma necessidade.
Quando se trabalha na Iaixa de concentrao de g L
-1
a
contaminao e o principal Iator que aIeta a exatido dos resulta-
dos analiticos. Existem equipamentos e tecnicas para o planeja-
mento e construo de 'salas limpas, nas quais a contaminao
pode ser completamente controlada. Esses recursos so em geral
muito caros e existem procedimentos 'caseiros que podem que
podem ser aplicados a laboratorios convencionais para reduzir a
contaminao a niveis bastante aceitaveis. Essas tecnicas podem
ser nada mais que a aplicao de puro bom senso, mas devem ser
usadas consciente e rigorosamente para serem eIetivas.
1.2 O ambiente do laboratrio
Material particulado do proprio ar e a Ionte de contaminao mais importante na determina-
o de varios elementos, como aluminio e zinco. Salas e capelas nas quais se opera sob um Iluxo de
ar Iiltrado podem ser instaladas no laboratorio. Se isso no Ior possivel, os instrumentos devero ser
localizados em uma sala isolada do corpo principal do laboratorio que no seja caminho de circula-
o para outras partes do mesmo, de preIerncia sem janelas que se abram para o exterior, Iazendo o
possivel para evitar a entrada de material particulado e limitando o acesso apenas as pessoas que
operam os instrumentos.
5
1.3 gua
Suprimento de agua ultrapura e essencial para lavagem de material, preparo de solues rea-
gentes e solues padro; diluio de amostras, entre outros. Equipamentos desionizadores, a partir
de agua corrente de condutividade eletrica cerca de 400 S cm
-1
produzem agua deionizada de con-
dutividade eletrica menor que 1 S cm
-1
. Agua ultrapura e obtida a partir de agua previamente puri-
Iicada e atinge condutividade eletrica menor que 0,055 S cm
-1
(resistividade eletrica maior que 18
MO cm
-1
e teor de carbono orgnico total (TOC) abaixo de 10 g L
-1
. Um sistema de pre-colunas,
livrando a agua da maioria dos constituintes dissolvidos, aumenta enormemente a vida util das colu-
nas de resina, que so caras. O sistema puriIicador deve ter capacidade de suprir as exigncias em
agua na medida em que Iorem necessarias, visto no ser conveniente se estocar agua de elevada pu-
reza.
1.4 Reagentes
Reagentes podem se constituir em importante Ionte de contaminao e devem ser do maior
grau de pureza disponivel. No preparo de amostras, quantidades relativamente grandes de acidos so
Filtro de
carvo
Osmose
reversa
Resina
catinica
Resina
aninica
Alimentao
Coleta
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empregadas e a contribuio de suas impurezas para o resultado obtido na amostra pode ser signiIi-
cativa. Mesmo produtos de elevada pureza podem exigir puriIicao no laboratorio atraves do pro-
cesso de sub-destilao (destilao 'sub-boiling), por exemplo. Usa-se neste caso um equipamento
para a produo de acidos e solventes muito puros, que promove destilao por evaporao superIi-
cial sem que ocorra ebulio. O aquecimento se da por radiao da regio do inIravermelho e os
vapores so condensados com um 'dedo Irio.
Pipetas, espatulas ou outros equipamentos no devem, em principio, serem introduzidos nos
Irascos de reagentes. Recomenda-se despejar uma quantidade conveniente do produto num recipien-
te limpo, para ento tomar medir as quantidades necessarias. O produto que sobra no devera retor-
nar ao Irasco original, que devera ser armazenado em local perIeitamente limpo e somente aberto
raramente, pelo minimo periodo de tempo possivel.
Todos os reagentes devem ser testados quanto a contaminao atraves de brancos e, uma vez
conIirmado o problema, eles devero ser descartados. Por isso mesmo, reagentes de elevada pureza
devem ser adquiridos em quantidades pequenas. Em geral eles so acompanhados de um certiIicado
de analise onde consta o numero do lote do produto, a lista dos elementos pesquisados, os metodos
empregados e seus limites de deteco e os elementos eIetivamente detectados como impureza e
suas concentraes. Por exemplo:
7
1.5 Frascos
Todos os Irascos destinados a conter amostras, padres ou reagentes devem ser testados para
determinar se esto perIeitamente limpos. Como norma, Irascos empregados na determinao de
traos de metais devero ser reservados apenas para essa Iinalidade. Frascos plasticos so em geral
preIeridos, desde que suportem a ao de acidos Iortes durante o processo de lavagem. Frascos plas-
ticos moldados podem conter traos de produtos organometalicos usados no processo de moldagem.
O material mais recomendado e sem duvida o PFTE, politetraIluoretileno, ou seus derivados Iluoro-
plasticos, seguindo-se o polipropileno de alta densidade. Nenhum Irasco deve ser considerado livre
de contaminao, exceto quando expressamente garantido pelo Iabricante.
Um procedimento basico de lavagem de Irasco e se iniciar usando um detergente de labora-
torio e enxaguar com agua deionizada. Em seguida devem ser imersos em soluo de HNO
3
10
por, no minimo, 8 horas. Pode ser conveniente deixar os Irascos nesse banho de acido e retira-los
apenas no momento de uso. Apos serem removidos da soluo acida sero lavados com varias pe-
quenas pores de agua deionizada e usados imediatamente. Se Ior essencial seca-los, os Irascos
tero um enxage Iinal com alcool ou acetona de elevada pureza e secados sob Iluxo de ar Iiltrado.
Apos secos, os Irascos so tampados e acondicionados em sacos plasticos selados para prevenir con-
taminao por impurezas presentes no ar.
1.6 Equipamentos volumtricos
Processos de preparo de amostra e padres devem ser planejados para minimizar o numero
de etapas de diluio, pois cada uma delas e uma Ionte potencial de contaminao. Micropipetas
Nitric Acid SpA
Standard Pack 500ml 2LT (F-treated glass)
HNO
3
MW 63.01 d 1.42 CAS |7697-37-2| EC |231-714-2|
Assav 67-69
Colour 10 Hazen (APHA)
Elemental impurities at time of manufacture.
Ag, As, Ba, Be, Bi, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Li, Mn, Mo, Ni, Pb, Sb, Se,
Sn, Sr, Th, Ti, U, J, Zr 1 ppb each
Zn 1 ppb (2)
B, Fe, Mg, K 1 ppb (5) each
Al 1 ppb (10)
Ca, Na 1 ppb (50) each
Jalues in parentheses indicate likelv maximum levels on storage
Application. Environment Analysis (eg, using AAS, ICP-AES,
ICP-MS), Trace Metal Analysis, Ion Chromatography
8
com ponteiras descartaveis de plastico so recomendadas para se eIetuar grandes diluies e so
preIeriveis as pipetas de vidro.
Mesmo as ponteiras descartaveis no devem ser consideradas livre de contaminao e devem
ser lavadas. Recomenda-se inserir a ponteira na pipeta e ajusta-la na maxima capacidade. Aspira-se
um ou dois volumes de agua deionizada, trs volumes de HNO
3
10 e mais trs volumes de agua
deionizada, descartando-se cada volume antes de se aspirar o proximo. Ajusta-se ento o volume no
valor desejado e lava-se a ponteira com no minimo dois volumes da soluo a ser medida, antes de
medir o volume Iinal e transIeri-lo para o Irasco receptor.
Uma opo bastante conveniente e o preparo de solues por pesagem. Uma massa de sal
pequena pode ser pesada com exatido satisIatoria em balana analitica, assim como a agua deioni-
zada, nos proprios Irascos que vo armazenar a soluo. Do mesmo modo, diluies podem ser eIe-
tuadas com Iacilidade e exatido.
1.7 Amostradores automticos
Muitos dos equipamentos para analise de traos dispem de sistemas de tomada automatica
de amostras, nos quais bandejas de cubetas contem solues de amostras e de padres de calibrao.
Esses sistemas podem ser Ionte de contaminao, apesar de disporem de um sistema de lavagem
para eliminar residuos de soluo de amostra do tubo aspirador. O sistema lavador e o proprio liqui-
do usado na lavagem pode ser causa de problemas, exigindo ateno constante na sua utilizao.
1.8 Testando as fontes de contaminao
Quando se suspeita de um problema de contaminao no laboratorio e necessario adotar um
procedimento sistematico, executa-lo passo a passo, para identiIicar a Ionte e controla-la.
Branco do instrumento: eIetuar uma serie de leituras no equipamento sem nenhuma so-
luo de amostra. Se algum sinal Ior obtido, o instrumento ou o ambiente ao seu redor es-
9
ta contaminado. Procedimentos de limpeza ou substituio de componentes contaminados
devem ser eIetuados consultando-se o manual do equipamento.
Branco da gua: eIetuar uma serie de medidas da agua tomada diretamente do equipa-
mento de puriIicao. Se algum sinal Ior obtido, a agua ou os equipamentos usados para
sua coleta esta contaminado. Equipamentos puriIicadores em geral dispem de sistema de
controle de qualidade da agua produzida por medida de condutividade eletrica.
Branco de cido: preparar uma soluo de branco tipica contendo 0,1 a 1 HNO
3
e tes-
tar a qualidade do acido empregado no preparo da amostra. Caso um sinal seja obtido ele
pode ser provocado pelo proprio acido ou ento ser conseqncia de Irascos contamina-
dos, uma vez que solues acidas removem com eIicincia traos de metais das superIi-
cies.
Branco da anlise: a etapa Iinal do processo e conIirmar se o preparo da amostra esta
adequado. Um branco de analise contendo todos os componentes presentes na soluo de
amostra, exceto ela propria, sera analisado.
10
2 AVALIAO DE MTODOS ANALITICOS E CALIBRAO DE MTODOS
INSTRUMENTAIS
2.1 Introduo
A aplicao de um metodo analitico e uma dentre as diIerentes etapas que compem a mar-
cha geral de uma analise quimica quantitativa. Essas etapas so:
Amostragem
Reduo da quantidade amostrada
Preparo da amostra
Medida de uma quantidade de amostra
Preparo da soluo da amostra
Remoo de interIerentes
Aplicao do metodo analitico
Interpretao do resultado
Ao analisar uma amostra no se pode perder a noo desse conjunto e alguns pontos impor-
tantes podem ser destacados, tais como:
todas as etapas citadas so igualmente importantes, pois ocorrendo uma Ialha em qual-
quer uma delas o resultado Iinal sera comprometido;
a amostragem, reduo e preparo da amostra so etapas cruciais, em geral eIetuadas Iora
do laboratorio, nas quais corre-se o risco de se cometer erros de identiIicao da amostra,
ou de contaminao por constituintes de moinhos, peneiras ou espatulas que entram em
contato com o material a ser analisado;
no preparo da soluo da amostra, reagentes impuros e perdas de elementos por volatili-
zao so Iontes de erros;
uso de equipamento soIisticado para detectar sinal analitico no e garantia de resultado
exato;
nem sempre o tempo total da analise pode ser abreviado ao se optar por um metodo anali-
tico rapido, pois outras etapas, como o preparo de soluo de amostra, podem ser bastante
morosas.
A opo por determinado metodo analitico deve ser Ieita com criterio, considerando: niveis
11
de preciso e exatido requeridos; quantidade de amostra disponivel; concentrao do elemento de
interesse na amostra; numero de amostras a ser analisado; custo e disponibilidade do equipamento;
exigncia de treinamento do operador, entre outros.
Os metodos analiticos podem ser classiIicados como classicos e instrumentais. A designao
metodos instrumentais leva a associao imediata com metodos que empregam instrumentao ele-
trnica, quase sempre soIisticada, com maior ou menor grau de automatizao, como espectroIoto-
metria, potenciometria, polarograIia, cromatograIia, entre outros. Entretanto, um metodo analitico
tradicional como a volumetria, que no seria qualiIicado com instrumental, pode ser conduzido atra-
ves de bureta automatica, registro de curva de titulao e deteco automatica de ponto Iinal. Prova-
velmente, uma Iorma de classiIicao mais coerente dos metodos analiticos e a que os distinguem
como:
metodos estequiometricos: so tambem chamados de classicos, pois Iazem uso dos prin-
cipios Iundamentais da quimica, a estequiometria. So baseados em reaes quimicas
bem deIinidas, como ocorre na gravimetria e a volumetria.
metodos no estequiometricos: nesses metodos, um sinal analitico, absoro ou emisso
de luz por exemplo, e diretamente relacionado a concentrao do elemento de interesse.
Nem sempre se conhece perIeitamente a reao quimica envolvida e, por isso mesmo, es-
ses metodos requerem calibrao.
2.2 Parmetros de avaliao de mtodos analticos
Preciso: e o grau de concordncia entre dados obtidos atraves de um mesmo procedimento.
ReIlete a ocorrncia dos erros indeterminados ou casuais, sendo expressa pelo desvio padro, vari-
ncia, erro padro da media, coeIiciente de variao. Existem dois parmetros diretamente relacio-
nados a preciso, mas que expressam condies diIerentes: a repetibilidade, que exprime a concor-
dncia entre os resultados obtidos no mesmo laboratorio e a reprodutibilidade, que exprime a con-
cordncia entre os resultados obtidos em laboratorios diIerentes.
Exatido: e o parmetro que indica o quanto o valor determinado diIere do valor exato, ou
daquele tomado como tal. Corresponde a expresso dos erros sistematicos ou determinados do me-
todo analiti co.
Sensibilidade: e dada pela inclinao da curva de calibrao na concentrao de interesse,
ou pelo coeIiciente angular quando se ajusta uma reta aos dados de sinal analitico e concentrao.
12
Por exemplo, a equao da curva de calibrao de metodo espectroIotometrico de determinao de
chumbo e:
A 1,12 |Pb| 0,312
onde A e a intensidade do sinal analitico expresso em absorbncia e a concentrao de Pb e expressa
em mg L
-1
, a sensibilidade do metodo e 1,12 unidades de absorbncia por unidade de concentrao
de Pb.
A sensibilidade e deIinida por vezes em metodos espectroIotometricos como a concentrao
de um elemento em soluo, expressa em mg L
-1
, que corresponde a absoro de 1 da radiao
emitida da Ionte de radiao, ou seja, 99 de transmitncia ou 0,0044 de absorbncia.
Limite de deteco: e a concentrao do elemento de interesse que produz um sinal analitico
distinguivel do ruido.
EIetuando-se um grande numero de leituras do branco, em geral pelo menos 10, calcula-se o
valor do desvio padro, s, das determinaes. Toma-se como ruido um valor igual a k igual a 2s ou
3s. Se k Ior 3, diz-se que o sinal correspondente ao limite de deteco se distingue do ruido em 98
de cada 100 determinaes. Com o coeIiciente angular da curva de calibrao calcula-se a concen-
trao correspondente ao sinal encontrado, que sera o limite de deteco.
Exemplo: em um metodo determinao de Pb, 24 repeties da leitura do branco Iorneceram
o sinal analitico medio S igual a 0,0296, com desvio padro s de 0,0082. A equao da curva de
calibrao, onde a concentrao de Pb e expressa em mg L
-1
, e;
S 1,12 |Pb| 0,312
Assumindo uma distribuio normal, considera-se que a um nivel de conIiana de 98 (i-
dentiIicado as vezes nos textos por 3o), o sinal analitico distinguivel da variao do branco ou ruido
e:
S 3 . 0,0082 0,0246
A concentrao correspondente a esse valor e:
|Pb| 0,0246/1,12 0,022 mg L
-1
O limite de deteco do metodo ao nivel de 98 de probabilidade (3o) e 0,022 mg L
-1
Pb
Limites de deteco para diIerentes tecnicas espectroscopicas (3o), Iornecidos por um Iabricante de
13
equipamentos
AAS-chama absoro atmica com chama; GFAA Iorno de graIite; ICP plasma
(*): valor para gerao de hidreto
Limite de determinao: e a menor concentrao determinavel, tomada como um valor i-
gual a cinco, ou dez vezes, o limite de deteco.
Faixa tima de trabalho: e o intervalo de concentrao da curva de calibrao, compreen-
dido entre o limite de determinao e o ponto onde comea o desvio da linearidade. Em metodos
AAS-chama GFAA ICP radial ICP axial
Elemento ---------------------------------- g L
-1
------------------------------------
Ca 1.5 0.03 0.15 2
Cd 0.8 0.02 1.5 0.2
Cr 3 0.08 3. 0.4
Cu 1.5 0.25 1.5 0.5
Hg 300 1.5 (0.009)* 30 0.5
Mg 0.15 0.01 0.15 0.05
Mn 1.5 0.09 0.6 0.1
Ni 6 0.8 6 0.9
Pb 75000 320 45 0.8
Sn 150 0.5 60 --
V 60 0.3 3 0.4
Zn 450 -- 1.5 0.1
mg L
-1
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
Faixa t ima de trabalho
14
espectroIotometricos, a Iaixa otima de trabalho e por vezes tomada como o intervalo de concentra-
o, em mg L
-1
, correspondente a absorbncias entre 0,2 e 0,8, intervalo esse onde erro Iotometrico e
mais baixo.
Seletividade:e o parmetro que indica em que medida um sinal analitico corresponde ap e-
nas a especie quimica de interesse. DiIerentes especies tambem podem ser responsaveis pelo sinal
analitico, pois uma reao quimica ou propriedade Iisica que serve de base para um metodo analitico
diIicilmente e especiIica para uma determinada especie quimica.
Este e um problema a ser resolvido durante o estudo do metodo e sua soluo pode requerer
processos que complicam a aplicao do metodo, podendo tambem limita-la a certas matrizes. Em
geral, no estudo de um metodo so deIinidas inicialmente as condies otimas para a maniIestao
do sinal analitico da especie que esta sendo determinada, para em seguida se estudar a seletividade
do metodo.
Resultados de estudo de interIerentes para metodo de determinao espectroIotometrica de
zinco Ioram obtidos com solues de concentrao 5 mg L
-1
Zn, na presena de diIerentes elementos
interIerentes
Al Fe Ca Mn K Cd
mg L
-1
A mg L
-1
A mg L
-1
A mg L
-1
A mg L
-1
A mg L
-1
A
0 0,402 0 0,402 0 0,402 0 0,402 0 0,402 0 0,402
5 0,394 5 0,399 50 0,396 10 0,399 200 0,398 1 0,478
10 0,398 10 0,396 100 0,389 20 0,399 400 0,405 2 0,553
15 0,390 15 0,378 150 0,387 30 0,394 600 0,395 3 0,639
20 0,385 20 0,353 200 0,387 40 0,385 800 0,401 4 0,709
25 0,378 25 0,342 300 0,370 50 0,377 1000 0,374 5 0,799
Com base nesses resultados, prepara-se uma tabela de seletividade do metodo, indicando a
relao entre concentraes de interIerente e de zinco, para a qual se tem um erro menor que certo
limite, geralmente 5:
elemento Al Fe Ca Mn K Cd
relao 4 3 40 8 160 0
15
Nesse exemplo, Al, Fe, Mn so serios interIerentes, ao contrario de Ca e K. Quanto ao Cd,
Iica evidente que ele reage com o reagente cromognico com a mesma intensidade que o Zn.
Tambem se avalia a seletividade de um metodo atraves do coeficiente de seletividade. Na
curva padro anteriormente mostrada para determinao de chumbo poderiam estar incluidos outros
termos, correspondentes a resposta de elementos interIerentes Cd , Fe e Zn:
S 1,12 |Pb| 0,08 |Cd| - 0,02 |Fe| 0,01 |Zn| S
branco
Colocando o valor 1,12 em evidncia tem-se:
S 1,12 (|Pb| 0,071 |Cd|- 0,018 |Fe| 0,0089 |Zn|) S
branco
Os valores 0,071; -0,018 e 0,0089 so denominados coeficientes de seletividade e expressam
o grau de interIerncia de cada elemento. Os coeIicientes podem negativos, quando o elemento cau-
sa uma reduo na intensidade do sinal analitico, caso do Fe. O coeIiciente de seletividade e mais
empregado para caracterizar o desempenho de eletrodos de membrana na potenciometria.
2.3 Calibrao em mtodos instrumentais
A calibrao e uma operao inerente aos metodos instrumentais, atraves da qual se relacio-
nam concentraes conhecidas do elemento a ser determinado e os correspondentes sinais analiticos.
Em grande parte dos casos, essas concentraes conhecidas devem ser Iornecidas por solues pa-
dro.
Solues padro usadas nas calibraes so normalmente de concentrao muito baixas para
serem preparadas diretamente. Prepara-se ento uma soluo padro estoque, que por diluio dara
origem as solues padro de trabalho. Emprega-se um composto quimico que seja padro prima-
rio, isto e, um composto quimico estavel, de elevada pureza, no higroscopico, no Iacilmente oxi-
davel e que possa ser dissolvido com Iacilidade.
Com exceo de Al e Cr, solues padro de metais podem ser preparadas pela dissoluo
em HNO
3
de metais na Iorma elementar, como ocorre para Zn, Fe, Pb, Ni, Cu, Ag, Mg. Nessas so-
lues, a concentrao usual e 1000 mg L
-1
de metal em meio de HNO
3
2. Solues de Cr podem
ser preparadas a partir do sal K
2
Cr
2
O
7
, no grau de padro primario.
Solues padro podem ser preparadas a partir de sais que no so padres primarios como
CuSO
4
.5H
2
0 e FeCl
3
para depois serem padronizadas por metodos classicos. Solues padro de
Ierro podem ser aIeridas por gravimetria, pois ele pode ser Iacilmente precipitado como Fe(OH)
3
16
com NH
3
, separado por Iiltrao e pesado como Fe
2
O
3
apos queima por ignio. Solues padro de
calcio preparadas a partir de CaCO
3
e de outros metais podem ser aIeridas por volumetria de com-
plexao com EDTA. Uma alternativa conveniente e bastante utilizada e a compra de solues pa-
dres estoque, preparadas por Iirmas idneas.
Solues padro de metais so mais bem conservadas em Irascos plasticos, TeIlon de preIe-
rncia. Solues padro estoque no devem ser conservadas por mais de um ano e solues padro
de trabalho no devem ser estocadas, porque normalmente no se recomenda armazenar solues de
concentraes inIeriores a 100 mg L
-1
.
2.3.1 Calibrao convencional ou padro externo
Prepara-se uma serie de solues, cujo intervalo de concentrao no elemento de interesse
inclui as concentraes das solues de amostra. O sinal analitico correspondente a cada soluo e
relacionado a respectiva concentrao atraves de um graIico, ou de uma equao. Normalmente uti-
liza-se o intervalo de calibrao no qual existe uma relao linear entre sinal e concentrao, no so
pela Iacilidade em se trabalhar com uma relao linear, mas principalmente porque a sensibilidade
diminui quando o desvio de linearidade se acentua. Recursos computacionais permitem o Iacil ajuste
de diIerentes Iunes aos dados de calibrao.
Uma vez obtida, a relao entre sinal analitico e concentrao sera aplicada para calcular a
concentrao das solues de amostra. O sinal analitico da amostra no pode exceder ao limite supe-
rior de calibrao e quando isso ocorre deve-se diluir a soluo da amostra.
E muito provavel que as caracteristicas Iisicas ou quimicas da soluo de amostra aIetem a
medida do sinal analitico, determinando uma interIerncia. Idealmente, soluo padro e soluo de
amostra devem ter as mesmas caracteristicas, tais como: densidade, viscosidade, acidez, conteudo de
solidos, concentraes das especies quimicas predominantes. E Iacil perceber, por exemplo, que no
se pode analisar uma amostra de agua do mar sem levar em considerao a presena de NaCl, ou
uma amostra de bebida sem considerar o teor de etanol.
Em muitos casos, contudo, a soluo padro de trabalho e preparada a partir da simples dilu-
io em agua da soluo estoque, sem que ocorram problemas. Na determinao espectroIotometri-
ca de IosIoro em tecido vegetal, a curva padro e preparada com solues diluidas em agua, pois
componentes da matriz no causam interIerncias e a acidez do meio no e aIetada por variaes de
acidez dos extratos.
17
Para se contornar interIerncias causadas por solues extratoras, as solues padro devem
apresentar as mesmas concentraes dos compostos presentes nas mesmas. Exemplo: na determina-
o de IosIoro soluvel em citrato ou em acido citrico, em Iertilizantes as solues padro so prepa-
radas nas mesmas concentraes dessas substncias.
Quando os elementos interIerentes provem da matriz, a concentrao deles evidentemente
varia de amostra para amostra e a soluo do problema pode requerer a separao do elemento por
precipitao, extrao por solvente, resina de troca inica ou ento, mantem- se o interIerente no
meio, promovendo sua inativao por oxidao, reduo ou complexao.
Na determinao de calcio por espectrometria de absoro atmica eIetua-se a adio de lan-
tnio para eliminao do eIeito do ion IosIato. Por outro lado, a determinao de potassio por Ioto-
metria de chama de emisso pode soIrer interIerncias de outros cations como sodio e magnesio e
para supera-las pode ser empregado um tampo de radiao, soluo contendo concentraes rela-
tivamente elevadas desses elementos de modo que variaes dos mesmos nas solues de amostras
sejam encobertas. Igualmente na potenciometria e empregado um tampo para ajuste da Iora inica
do meio.
2.3.2 Adio de padro
O eIeito dos constituintes da matriz pode ser contornado pela presena da soluo de amostra
em todos as solues padro de calibrao. Trata-se de um procedimento cuja aplicao a analise
rotineira de um grande numero de amostras pode ser complicado, pois no minimo duplica o numero
de leituras de sinal. Contudo, o procedimento pode ser Iacilmente incorporado em sistemas automa-
tizados de tomada de amostras.
No exemplo a seguir, adicionam-se os volumes indicados de soluo padro e de soluo de
amostra a bales de 50 mL, completando-se o volume.
soluo volume de soluo
de amostra
volume de soluo pa-
dro 10 mg L
-1
Cd
concentrao Iinal
de Cd (X)
Absorbncia
(Y)
1 2 mL 0 mL 0,0 0,075
2 2 mL 1 mL 0,2 0,155
3 2 mL 2 mL 0,4 0,248
4 2 mL 3 mL 0,6 0,325
18
Na equao de regresso obtida y e a absorbncia e x a concentrao Iinal do cadmio adicio-
nado em mg L
-1
. O teor do metal na amostra e calculado Iazendo y igual a zero , o que resulta em x
igual a -0,175. Esse valor corresponde a 0,175 mg L
-1
, isto e, a contribuio da soluo de amostra
para a concentrao Iinal e a concentrao da soluo de amostra sera:
0,175 . 50/2 4,38 mg L
-1
Cd
Como o sinal sempre Ioi lido na presena da soluo da amostra, o eIeito interIerente dos
componentes da matriz sera compensado, desde que o elemento adicionado soIra o mesmo nivel de
interIerncia que o elemento originario da matriz, o que nem sempre ocorre. O Iato de se obter uma
linha perIeitamente reta na calibrao por adio de padro no garante que o metodo esteja Iuncio-
nando bem e, alem disso, nos metodo espectrometricos seu uso e em geral restrito a eliminao das
interIerncias no espectrais.
2.3.3 Padro interno
Este metodo baseia-se na adio as solues padro e a soluo de amostra, de um elemento
ou substncia estranho a amostra, em concentrao conhecida. Na determinao de potassio por Io-
tometria de chama de emisso, adiciona-se litio em quantidades conhecidas e iguais as solues de
amostra e padres. Para ser padro interno o elemento no pode estar presente na amostra analisada.
O litio, no caso, e um elemento incomum em matrizes agronmicas.
y = 0.422x + 0.074
R
2
= 0.999
0
0.1
0.2
0.3
0.4
-0.2 0 0.2 0.4 0.6
mg L
-1
Cd
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
19
Assumindo que diIerentes condies instrumentais ou operacionais 1, 2, 3...aIetem na mesma
proporo e emisso de energia radiante dos atomos de potassio (E
K
) e de litio (E
Li
), pode-se estabe-
lecer a relao:
= = =
3 Li
3 K
2 Li
2 K
1 Li
1 K
E
E
E
E
E
E
constante
Na calibrao tambem se pode estabelecer a relao:
p Li
p K
am Li
am K
p K
am K
p
am
) E (
) E (
) E (
) E (
) E (
) E (
| K |
| K |
= =
pois como as quantidades adicionadas de Li so iguais normalmente (E
Li
)
am
(E
Li
)
p
.
p K
p Li
am Li
am K
p am
) E (
) E (
.
) E (
) E (
. | K | | K | =
Na tabela que se segue, so mostrados alguns exemplos de calculo:
Solues Sinal analitico de emisso
K Li
teor de K na
amostra (mg L
-1
)
padro 10 mg L
-1
K 10 mg L
-1
Li 25,1 24,2 --
amostra 1 10 mg L
-1
Li 12,7 25,7 4,76
amostra 1 10 mg L
-1
Li (*) 11,8 23.8 4.78
amostra 2 10 mg L
-1
Li 18.4 25,3 7.01
Observe-se que na segunda leitura da amostra 1, identiIicada pelo asteristico, uma variao
do instrumento Iez cair o sinal do potassio, a qual, tambem aIetando na mesma proporo o sinal do
litio, Ioi corrigida, pois a relao entre sinais desses elementos permaneceu constante. O metodo do
padro interno serve, por exemplo, para corrigir problemas associados a variao da velocidade de
nebulizao nos metodos de chama e de variaes de Iluxo nos metodos cromatograIicos..
2.4 Controle de qualidade dos resultados analticos
Um metodo analitico sempre Iornece um resultado, um certo valor numerico; o problema e
se deIinir o quanto ele e conIiavel. Para assegurar a qualidade dos resultados de laboratorio existem
alguns procedimentos que podem ser adotados.
As aes de carater geral so: laboratorio mantido em condies de limpeza e de segurana;
20
treinamento tecnico e manuteno de disciplina do pessoal envolvido; aquisio de insumos, reagen-
tes e vidraria, de boa qualidade, manuteno e calibrao periodica de equipamentos; ateno na
manipulao de dados e resultados, para evitar erros, entre outros. EspeciIicamente, os seguintes
procedimentos podem ser destacados
uso de sala branca: sala protegida da contaminao do ambiente, no que diz respeito a
poeira e material particulado em geral. Nesta sala admite-se apenas ar Iiltrado e se obede-
cem a regras estritas de limpeza.
puriIicao de reagentes: reagentes comuns so por vezes puriIicados para analises de ro-
tina. Para determinao de elementos a baixas concentraes (ppb) se exige que mesmo
reagentes puros devam ser tratados para eliminao de interIerentes, como a destilao
sub-boiling. Aqui tambem se enquadra a questo da pureza da agua empregada no labora-
torio
prova em branco: todo conjunto de amostras analisado deve ser acompanhado por uma
soluo preparada com os mesmos reagentes, submetida aos mesmos procedimentos que
Ioram eIetuados na amostra, com exceo da incluso da propria amostra. E o que se de-
nomina prova em branco. O sinal analitico registrado para a prova em branco deve ser
subtraido do sinal das amostras para eliminar eIeitos de interIerentes, mas isso pode ser
Ieito dentro de certos limites pois, de maneira geral, o sinal do branco no pode represen-
tar uma proporo elevada do sinal analitico.
repeties: resultados concordantes em repeties de uma mesma amostra no garantem
exatido, mas indicam apenas a preciso de um metodo.
uso de metodos alternativos: diIicilmente resultados obtidos por dois metodos baseados
em principios completamente diIerentes sero aIetados pelo mesmo tipo de erro. Deste
modo, eventuais duvidas sobre resultados podem ser solucionadas.
analise de amostras certificadas: so amostras cujo teor em determinados elementos e
garantido por entidades de reconhecida idoneidade. Estas amostras servem para aIerir a
exatido dos resultados obtidos em laboratorio ao se comparar procedimentos alternati-
vos, equipamentos, pessoas, entre outros.
analise de amostras padres: nas analises de rotina devem ser incluidas amostras que ja
Ioram analisadas diversas vezes no proprio laboratorio, das quais se conhece o teor medio
e o desvio padro do constituinte de interesse. Elas substituem os padres certiIicados,
21
que pelo custo elevado no podem ser utilizados com maior Ireqncia.
programas interlaboratoriais: apesar de toda precauo em sanar eventuais Iatores de er-
ro, resultados tendenciosos podem ser obtidos em um laboratorio devido a Iatores de diIi-
cil identiIicao, relacionados a alguma caracteristica especiIica do local. Uma Iorma tra-
tar essa questo e eIetuar analises de mesmas amostras em diIerentes laboratorios, apli-
cando uma mesma metodologia sob condies completamente distintas de equipamentos,
pessoal, reagentes.
22
3 AVALIAO DE DADOS ANALITICOS
3.1 Erros
Toda medida esta sujeita a erro. O valor medido (X) de uma grandeza corresponde sempre a
seu valor real (R) associado ao valor de um erro (E):
X R E
Os erros podem ser classiIicados como:
Erros indeterminados, aleatorios ou casuais: so os que no tem causa conhecida e so ine-
vitaveis. Variaveis aleatorias e Iora de controle sempre aIetam as medidas eIetuadas tanto no sentido
positivo como negativo e determinam a preciso de uma medida, ou seja, a disperso de repeties
em torno de um valor medio.
Erros determinados ou sistematicos: aqueles cuja origem pode ser determinada e, portanto
podem ser sanados ou minimizados. Cada erro determinado apresenta sempre a mesma direo e
magnitude, determinando a exatido da medida, ou seja, o quanto o valor medido se aIasta do valor
real.
As causas dos erros determinados podem ser:
pessoais: erros de manipulao de materiais, leitura em instrumentos, registro de dados,
calculo e identiIicao de amostras, entre outros. So minimizados por meio de treina-
mento.
instrumentais: eIeitos de variao de temperatura e de energia eletrica, contaminao e
Ialha em instrumentos, que aIetem o sinal num determinado sentido. So evitados pela
manuteno periodica preventiva.
metodo: reaes lentas e incompletas, reaes paralelas, especies instaveis, reagentes no
especiIicos. So contornados durante o estudo dos metodos analiticos
Erros determinados podem ser classiIicados como:
proporcionais: aqueles cuja magnitude e proporcional ao teor de constituinte determina-
do: uma pipeta descalibrada, livrando um volume 4 maior que o nominal, resultara em
erro positivo de 4 nos resultados do constituinte determinado.
23
aditivos: quando o erro e independente da concentrao do constituinte determinado: vo-
lumes iguais de HNO
3
impuro empregado na digesto de diIerentes amostras de tecido
vegetal introduziro uma quantidade Iixa de Pb nos extratos.
O valor real de uma grandeza no e conhecido, pois, em principio, toda medida esta sempre
sujeita a erro. Entretanto, pode-se tomar como valor real o teor determinando por um metodo anali-
tico conIiavel e bem conhecido, considerado como reIerncia, ou ento, o resultado obtido em amos-
tras certiIicadas.
Exemplo: determina-se calcio em uma amostra certiIicada de calcario, para qual o teor e
21,13 Ca. Admitindo a ocorrncia apenas de erros aleatorios, se a medida Iosse repetida varias
vezes por um analista, diIerentes valores poderiam ser obtidos:
repetio Ca Desvios
1 19,86 -1,13
2 21,86 0,87
3 20,44 -0,55
4 21,10 0,110
5 20,86 -0,13
6 21,49 0,50
7 22,56 1,57
8 19,75 -1,24
media 20,99 soma dos desvios 0.00
A media aritmetica das 8 determinaes, 20,99, se aproxima bastante do valor real 21,13,
pois, como erros aleatorios podem ser tanto negativos como positivos, eles tendem a se cancelar.
Assim, a media aritmetica e a melhor estimativa do valor real de uma grandeza atraves de medidas
aIetadas apenas por erros aleatorios.
O conjunto das repeties de determinaes de calcio constitui uma populao, caracterizada
por parmetros estatisticos como media e desvio padro. A media real dessa populao, representada
por , e 21,13 e o valor 20,99 e uma estimativa (m) dessa media verdadeira obtida a partir de uma
amostra de 8 elementos.
24
A media e um parmetro que nada inIorma sobre a variabilidade observada entre as diIeren-
tes repeties, ou seja, sobre a disperso dos dados. O desvio padro caracteristico da populao, o,
e o desvio padro verdadeiro e expressa essa disperso dos dados em trono da media verdadeira.
Obtem-se um desvio padro estimado s ao se considerar amostras contendo N individuos retiradas
de uma populao:
1 N
desvios dos quadrado do soma
s

=
A medida que N aumenta, s tende a o oo o e por esse motivo, s e tomado como boa aproximao
de o oo o para amostras compostas de muitos individuos (N~30). No exemplo em questo, o desvio pa-
dro s estimado a partir dos 8 valores citados e 0,972.
Uma populao caracterizada como normal e aquela para a qual a distribuio de Ireqncia
dos dados obedece a lei de distribuio normal de Gauss. A partir dessa lei podem ser estabelecidos
intervalos em termos de o em torno da media , que contem uma determinada proporo de indivi-
duos da populao:
intervalo em torno da media 0,67o 1,00o 1,96o 2,00o 2,58o 3,00o
de individuos abrangidos 50,0 68,0 95,0 96,0 99,0 99,7
3.2 Limites de confiana
Para uma populao que segue a lei da distribuio normal, para a qual se conhece a media
e o desvio padro verdadeiro o oo o, pode-se estabelecer um intervalo de conIiana (IC):
IC x z.o
Um resultado analitico pode ser a media m de uma serie de n observaes. Para este caso, a-
inda considerando o conhecido:
Exemplo: O teor de mercurio em uma especie de peixe Ioi determinado em 3 amostras, ob-
tendo-se a media 1,67 mg kg
-1
Hg. O desvio padro o na determinao de mercurio pelo metodo
n
. z
m IC
o
=
25
empregado e conhecido e igual a 0,10. Para probabilidade de 95, z e igual a 1,96, portanto:
11 , 0 67 , 1
3
10 , 0 . 96 , 1
67 , 1 IC = =
Assim, embora no conheamos o valor verdadeiro da media podemos estabelecer que ela se
situa entre 1,56 e 1,78 mg kg
-1
Hg, com 95 de certeza.
Na maioria das vezes, um conjunto de n dados x
i
extraidos da populao e empregado para
se obter a estimativa, m, da media verdadeira e tambem a estimativa, s, do desvio padro o oo o. O
intervalo de conIiana obtido a partir das estimativas m e s e deIinido agora em termos de um par-
metro t, por sua vez obtido em Iuno do numero de graus de liberdade (n-1):
n
s . t
m IC =
Comparaes de medias
Uma das aplicaes mais comuns da estatistica na quimica analitica e a comparao de resul-
tados de diIerentes amostras, procedimentos, equipamentos ou operadores. Um novo metodo analiti-
co para ser valido tem que ser comparado a um metodo considerado padro. Materiais de reIerncia,
que garantem o teor de um seu constituinte, podem ser analisados por um analista para testar a qua-
lidade de seu trabalho.
Exemplo: Em um material, o teor de potassio garantido pelo Iornecedor e 15,35 K, deter-
minando por um metodo tradicional e bem estudado, para o qual se atribui um desvio padro o de
0,17. Um comprador analisa o produto que recebeu e obtem para uma unica determinao 14,75K.
O teor de potassio determinado diIere do valor garantido com 99 de certeza?
No caso se conhece o desvio padro o e adota-se o parmetro z, obtido a partir da distribui-
o de Gauss. Como indicado anteriormente, z vale 2,58 para 99 de probabilidade, assim:
IC 15,35 2,58.0,17
O intervalo entre 14,91 e 15,79 no inclui o resultado 14,75; portanto, o material recebido
apresenta um teor de K menor que o valor certiIicado, a de 99 de probabilidade.
Exemplo: O teor de enxoIre em uma amostra de material vegetal determinado por um meto-
do de reIerncia e 0,157S. Trabalhando-se com um metodo analitico que esta sendo estudado, os
26
seguintes valores Ioram obtidos:0,143; 0,141; 0,149 e 0,139. Pode-se dizer que o metodo testado
Iornece valores concordantes com o metodo tradicional ao nivel de 95 de probabilidade?
Calcula-se para o novo metodo a media m e o desvio padro s :
m 0,143 s 0,00432 n 4
O valor tabelado de t para 3 graus de liberdade e 95 de probabilidade e 3,182. O intervalo
de conIiana calculado vai de 0,136 a 0,150 no inclui o valor real 0,157, portanto, o metodo testa-
do apresenta em erro sistematico e no tem a mesma exatido do metodo de reIerncia. Uma outra
Iorma de avaliar a exatido nesse problema seria obter um valor calculado de t para conIronta-lo
com o valor tabelado:
48 , 6
4
00432 , 0
143 , 0 157 , 0
t =

=
Como o valor calculado de t e maior que o tabelado, conclui-se que o valor 0,147 diIere sig-
niIicativamente de 0,157, com 95 de probabilidade.
3.3 Comparao de preciso e exatido
Dois tecnicos de laboratorio, A e B, trabalhando com o mesmo metodo, equipamentos e rea-
gentes, obtiveram os seguintes valores para o teor de potassio em porcentagem em 5 repeties de
uma mesma amostra:
Analista Dados Desvio padro
(s)
Varincia
(s
2
)
Graus de liber-
dade
A 1,37 1,33 1,31 1,33 1,30 0,0268 0,00072 4
B 1,28 1,36 1,35 1,40 1,31 0,0464 0,00215 4
A comparao de preciso entre os dois analistas e Ieita com base na medida da disperso
dos valores obtidos por cada um deles, ou seja, varincia ou desvio padro. O teste F eIetua a com-
parao de varincias:
31 , 1
00072 , 0
00215 , 0
s
s
F
2
A
2
B
= = =
Para 4 graus de liberdade do denominador e do numerador, o valor de F tabelado e 6,39, ao
nivel de 95 de probabilidade. Como o F calculado no excedeu o valor tabelado, conclui-se que
27
no ha diIerena de preciso entre os dois analistas.
Supondo-se que a amostra analisada e um material de reIerncia, com valor certiIicado de
1,305 K, pode-se discutir tambem a exatido desses analistas com base nas medias:
m
A
1,328 K m
B
1,340 K
O valor de t calculado para cada analista e conIrontado com o valor tabelado t 2,78, para 4
graus de liberdade e 95 de probabilidade:
337 , 3
5 / 02345 , 0
305 , 1 340 , 1
t 916 , 1
5 / 02683 , 0
305 , 1 328 , 1
t
B A
=

= =

=
O valor t calculado para o analista A no excedeu o valor tabelado e conclui-se que o valor
determinado e o valor certiIicado no diIerem entre si a 95 de probabilidade e o analista A e exato.
Isso no ocorre com o analista B e o resultado de sua determinao no e exato. Embora ambos os
analistas tenham a mesma preciso nas suas determinaes, no apresentam a mesma exatido.
3.4 Comparao de preciso e exatido entre dois mtodos
Foram eIetuadas 10 determinaes de cadmio em um material por dois metodos A e B, ob-
tendo-se:
Metodo Media (g kg
-1
Cd) Desvio padro Varincia g.l.
A 97,06 0,20656 0,0427 9
B 97,34 0,13500 0,0182 9
Para comparar esses dois metodos quanto a preciso emprega-se o teste F:
34 , 2
0182 , 0
0427 , 0
F = =
Como o valor de F tabelado (95) e 3,18, conclui-se assim, que os dois metodos no diIerem
entre si quanto a preciso.
Nesse mesmo exemplo pode-se eIetuar uma comparao entre medias atraves do teste t. Uma
vez que as varincias dos dois conjuntos de dados no Ioram signiIicativamente diIerentes, pode-se
calcular o desvio padro confunto atraves da Iormula:
28
( ) ( ) ( ) ( )
174 , 0
2 10 10
9 . 13500 , 0 9 . 20656 , 0
2 n n
gl . s gl . s
s
2 2
B A
B
2
B A
2
A
=
+
+
=
+
+
=
sendo o numero de graus de liberdade igual a (n
A
n
B
2). O valor de t calculado sera obtido atra-
ves da Iormula:
58 , 3
10
1
10
1
. 174 , 0
06 , 97 34 , 97
n
1
n
1
. s
m m
t
B A
B A
=
+

=
+

=
O valor de t tabelado para 18 graus de liberdade e 95 de probabilidade e 2,10, concluir que
a diIerena entre as duas medias e estatisticamente signiIicativa. Se o metodo A Iosse um metodo de
reIerncia, o metodo B no apresentaria exatido, sendo aIetado por um erro determinado. O calcu-
lo de t no requer que o numero de determinaes seja igual nos dois metodos testados.
Descoberta do Argnio
Lord Rayleigh recebeu o prmio Nobel em 1904 pela descoberta do Argnio, e ela Ioi resultado
de uma pequena discrepncia entre dois conjuntos de dados experimentais. Na epoca, admitia-se que o
ar atmosIerico era composto por 20 de O
2
e 80 de N
2
. Raleygh Iez passar ar sobre cobre metalico
aquecido para remover o oxignio, Iormando CuO e deixando sobrar N
2
'puro. A massa de volume
Iixo de gas Ioi medida sob presso e temperatura constantes. Paralelamente, ele produziu tambem o
mesmo volume de N
2
em laboratorio pela decomposio quimica de oxido nitroso (N
2
O) ou oxido ni-
trico (NO).
Massa de um volume V de N
2
isolado do ar
atmosIerico
Massa de um volume V de N
2
obtido por de-
composio quimica
2,31017 2,30143
2,30986 2,29890
2,31010 2,29816
2,31001 2,30182
2,31024 2,29869
2,31010 2,29940
2,31028 2,29849
2,29889
Media (m
1
) 2,31011 Media (m
2
) 2,29947
Desvio padro (s
1
) 0,000143 Desvio padro(s
2
) 0,00138
n
1
7 n
2
8
29
Rayleigh sabia que suas medies tinham sido Ieitas com cuidado e que a discrepncia ob-
servada estava Iora da margem de erro experimental do procedimento adotado. O N
2
isolado do ar
era mais denso que o N
2
obtido por decomposio quimica e isso seria conseqncia da presena de
um elemento mais pesado, desconhecido, existente no ar. Assim Ioi descoberto o Argnio!
O teste t pode ser empregado para decidir se o nitrognio do ar e signiIicativamente mais
pesado que o nitrognio obtido em laboratorio:
20 , 20
56
15
.
2 7 8
) 1 8 .( ) 00138 , 0 ( ) 1 7 .( ) 000143 , 0 (
29947 , 2 31011 , 2
t
.
n . n
n n
2 n n
) 1 n ( s ) 1 n ( s
m m
t
2 2
2 1
2 1
2 1
2
2
2 1
2
1
1
2
=
+
+

=
+
+
+

=
Tambem neste exemplo como as varincias no eram signiIicativamente deIerentes calculou-
se o desvio padro conjunto. O valor de t tabelado para 13 graus de liberdade e 99 de probabilida-
de e 3,012. Como o valor de t calculado excede o valor tabelado as medias so signiIicativamente
diIerentes.
3.5 Comparao de resultados analticos empregando regresso linear
Resultados analiticos obtidos em diIerentes amostras por dois metodos em conIronto podem
ser objeto de uma analise de regresso para determinar se esses metodos apresentam o mesmo grau
de exatido. Se um desses metodos Ior um metodo de reIerncia avalia-se a exatido do metodo al-
ternativo.
Exemplo: dez amostras de material vegetal Ioram analisadas para determinao de cobre por
espectrometria de absoro atmica (A) e por espectroIotometria (B), Iornecendo os valores indica-
dos a seguir. Existe diIerena signiIicativa entre os resultados Iornecidos pelos metodos?
Obtendo-se a equao de regresso y a x + b , caso o coeIiciente angular a Iosse 1 e coe-
Iiciente linear b Iosse zero os resultados Iornecidos pelos dois metodos seriam inteiramente concor-
dantes. Sendo o coeIiciente angular signiIicativamente diIerente de 1 isso corresponde a maniIesta-
o de um erro determinado proporcional; e caso o coeIiciente linear seja diIerente de zero isso
30
corresponde a ocorrncia de um erro determinado aditivo. Essas comparaes so Ieitas pelo teste t
e para tanto devem ser calculados: o desvio padro da regresso (s); desvio padro do coeIiciente
linear (s
b
) e desvio padro do coeIiciente angular (s
a
):
Amos tra
Absoro
atmica (x)
EspectroIo-
tometria (y)
x
2
xy y
2
y
est
y-y
est
(y-y
est
)
2
1 2,5 2,9 6,25 7,25 8,41 2,7251 0,175 0,0306
2 12,0 11,9 144,00 142,80 141,61 12,5950 -0,695 0,4830
3 5,7 6,2 32,49 35,34 38,44 6,0497 0,150 0,0226
4 8,4 8,9 70,56 74,76 79,21 8,8548 0,045 0,0020
5 3,1 3,2 9,61 9,92 10,24 3,3484 -0,148 0,0220
6 19,4 21,0 376,36 407,40 441,00 20,2832 0,717 0,5139
7 11,0 10,4 121,00 114,40 108,16 11,5561 -1,156 1,3365
8 3,1 4,2 9,61 13,02 17,64 3,3484 0,852 0,7251
9 5,7 6,0 32,49 34,20 36,00 6,0497 -0,050 0,0025
10 32,4 33,9 1049,76 1098,36 1149,21 33,7894 0,111 0,0122
E EE E 103,3 108,6 1852,13 1937,45 2029,92 108,5998 0,000 3,1505
Desvio padro da regresso ou de uma determinao:
6275 , 0
2 10
1505 , 3
2 n
) y y (
s
2
est
=

=

Desvio padro do coeIiciente linear:
31
3048 , 0
) 3 , 103 ( 13 , 1852 . 10
13 , 1852
. 6275 , 0
) x ( x . n
x
. s s
2 2 2
2
B
=

Desvio padro do coeIiciente angular:

02239 , 0
10
) 3 , 103 (
13 , 1852
6275 , 0
) x ( x
s
s
2 2 2
A
=

=

Para testar se o coeIiciente angular a e diIerente de 1 e o coeIiciente linear b e diIerente de
zero calculam-se os valores de t
B
para o coeIiciente linear e de t
A
para o coeIiciente angular
419 , 0
3048 , 0
) 0 12773 , 0 (
s
) 0 b (
t
B
B
=

= 739 , 1
02239 , 0
) 1 03894 , 1 (
s
) 1 a (
t
A
A
=

=
O numero de graus de liberdade e (n-1) igual a 8 e o valor de t tabelado e 2,306 para 8 graus
de liberdade e 95 de probabilidade. Como os valores de t calculados no excederam o valor tabela-
do, o coeIiciente angular no e estatisticamente diIerente de 1, nem o coeIiciente linear diIere esta-
tisticamente de zero. Deste modo, ambos os metodos conIrontados para determinao de cobre Ior-
necem resultados com preciso equivalente e no so aIetados por erros determinados proporcionais
ou aditivos.
Esses calculos podem ser Ieitos Iacilmente com auxilio da planilha Excel: opo Ierramentas
~ analise de dados ~ regresso. Deve-se observar contudo que o coeIiciente angular e comparado ao
valor zero e no a um como eIetuado anteriormente :
ANOVA
gl SQ MQ F F de significao
Regresso 1 847,3735 847,3735 2151,7135 5,15558 10
-11
Residuo 8 3,150507 0,393813
Total 9 850,524
Coeficientes Erro padro Stat t valor-P
CoeIiciente linear 0,12773 0,304814 0,419043 0,6862099
CoeIiciente angular 1,038942 0,022397 46,38657 5,156 10
-11
3.6 Propagao de erros aleatrios
Um resultado analitico e conseqncia de uma serie de etapas sobre cada qual incidem erros.
O calculo da incerteza, s, de um resultado x e eIetuado levando-se em conta as incertezas dos resul-
32
tados intermediarios p, q, r, de cada etapa, de acordo com as operaes matematicas envolvidas.
Quando o resultado Iinal x e obtido por operaes de soma e subtrao, x p q r, a incerteza
absoluta s
x
do resultado e dada pela expresso:
( ) ( ) ( )
2
r
2
q
2
p x
s s s s + + =
Estando envolvidas operaes de multiplicao e diviso, a incerteza relativa s
x
/x sera:
r
q . p
x =
2
r
2
q
2
p
x
r
s
q
s
p
s
x
s
|
.
|

\
|
+
|
|
.
|

\
|
+
|
|
.
|

\
|
=
Exemplo: qual sera a incerteza s
x
na concentrao de potassio em uma soluo de amostra,
calculada pela expresso dada a seguir?
x
s 24 , 10 01 , 0 20 .
1 , 0 0 , 25
1 , 0 8 , 12
x =

=
s
x
10,24 . 0,0088 0,09
3.7 Desvio padro de resultado estimado por regresso linear
A calibrao nos metodos instrumentais envolve o ajuste de uma Iuno matematica que na
maior parte das vezes e a Iuno linear. Uma questo interessante que surge ao usar a equao da
reta ajustada a curva de calibrao e o calculo do desvio padro de uma concentrao (s
c
) estimada
atraves dela:
( )
xx
2
2
c
y
C
s . a
y y
N
1
L
1
.
a
s
s

+ + =
( )
N
x
x s
2
2
xx
E
E =
s
y
, o desvio padro da regresso, pode ser obtido atraves da Iormula ja citada anteriormente
e a e o coeIiciente angular da equao da reta de regresso
S
xx
e dado pela Iormula indicada.
L e o numero de repeties do sinal analitico obtido para a amostra e que deram origem ao
valor y
c
e N e o numero de pontos da curva de calibrao.
_
y e a media dos N valores de sinais analiticos da curva de calibrao y a.x b
0088 , 0 = |
.
|

\
|
+ |
.
|

\
|
+ |
.
|

\
|
=
2
20
0,01
2
25
0,1
2
12,8
0,1
x
x
s
33
Exemplo: para um metodo espectroIotometrico Ioram obtidos os seguintes valores em uma
calibrao:
mg L
-1
(x) Absorbncia (y)
0,0 0,000
0,2 0,045
0,4 0,092
0,6 0,131
0,8 0,173
1,0 0,211
x medio 0,5 y medio 0,1087
A equao linear ajustada a esses dados e y 0,21114 x 0,00309. Na analise de uma a-
mostra Ioram eIetuadas 3 medidas de absorbncia, obtendo-se o valor medio de 0,157, o qual cor-
responde a uma concentrao estimada de 0,729 mg L
-1
. Como o valor de S
xx
e 2,15833, o desvio
padro associado ao valor de concentrao estimado pela equao da curva de calibrao sera:
15833 , 2 . ) 21114 , 0 (
) 10870 , 0 157 , 0 (
6
1
3
1
21114 , 0
003256 , 0
s
2
2
C

+ + = 0,0116 mg L
-1

3.8 Problemas
- Um carregamento de minerio de cobre Ioi amostrado para analise ao ser recebido pelo
comprador, obtendo-se os resultados 14,58; 14,61; 14,69 e 14,64 Cu. O vendedor Iorneceu como
teor certiIicado o valor 14,66 Cu, com desvio padro de 0,07 para cinco determinaes. O com-
prador deve aceitar o carregamento?
A analise eIetuada pelo comprador Iornece um teor medio de 14,63 Cu, com desvio pa-
dro de 0,05 e 3 graus de liberdade. O desvio padro conjunto e:
( ) ( )
062 , 0
2 5 4
4 . 07 , 0 3 . 05 , 0
s
2 2
=
+
+
=
O valor t tabelado e 2,37, para 7 graus de liberdade e 95 de probabilidade. Calcula-se agora
a diIerena entre medias prevista pelo valor t tabelado:
095 , 0
5 . 4
5 4
. 062 , 0 . 37 , 2
n . n
n n
s . t m
2 1
2 1
=
+
=
+
= A
A diIerena calculada e superior a diIerena observada de 0,03; conclui-se que no ha diIe-
34
rena signiIicativa entre os teores certiIicado e analisado.
- O teor de SO
2
no ar de uma industria Ioi determinado em dois dias sucessivos, obtendo-se
os valores medios de 8,63 e 8,84 mg L
-1
para 6 e 5 amostras respectivamente. Sabendo-se que esse
metodo apresenta um desvio padro de 0,093 mg L
-1
SO
2
, determinar se essas medias diIerem entre
si a 95 e 99 de probabilidade.
-Um metodo para determinao de zinco Ioi testado com uma amostra certiIicada contendo
0,082 mg Zn kg
-1
sendo obtido os seguintes valores: 0,083; 0,088; 0,087 e 0,086 mg Zn kg
-1
. O me-
todo estudado Iornece resultados exatos ao nivel de 95 de probabilidade?
-Um metodo para determinao de cromo em soluo do solo Iorneceu um valor medio de
0,06871 mg/L em sete repeties, com desvio padro de 0.00037. Um novo metodo aplicado a
mesma amostra Iorneceu os valores: 0,0682; 0,0677; 0,0685; 0,0685 e 0,0679 mg/L. Pode-se ter
90 de conIiana que o novo metodo Iornece resultado no diIerente do metodo padro? Pode se ter
99 de certeza?
- Soluo de HCl Ioi padronizada com diIerentes indicadores, obtendo-se os dados indicados.
As diIerenas entre indicadores 1 e 2 e entre 2 e 3 so signiIicativas a 95 de probabilidade?
Indicador Concentrao HCl desvio padro Numero de repeties
1. Azul de bromotimol 0,09665 0,00225 28
2. Vermelho de metila 0,086860,00098 18
3. Verde de bromocresol 0,086410,00113 29
- O teor de titnio em 5 amostras diIerentes Ioi determinado por dois metodos. As duas tecni-
cas analiticas diIerem ao nivel de 95 de probabilidade?
Amostra Ti - metodo 1 Ti - metodo 2
A 0,0134 0,0135
B 0,0144 0,0156
C 0,0126 0,0137
D 0,0125 0,0137
E 0,0137 0,0136
35
4 PREPARO DE SOLUO DA AMOSTRA
1
Algumas tecnicas analiticas, como espectrometria atmica de arco e Iluorescncia de raios
X, so conduzidas em amostras solidas, mas a grande maioria dos metodos analiticos e conduzida
em soluo aquosa.
Apesar das diIiculdades impostas pela necessidade de se obter um extrato de amostra nas a-
nalises quimicas usuais, o procedimento tambem tem suas vantagens. Assim, um pequeno volume
de soluo de amostra da ordem de alguns poucos microlitros pode ser tomado com preciso, permi-
tindo que uma quantidade muito pequena de amostra seja considerada. Quando uma amostra tem
seus componentes sejam postos em soluo para determinar constituinte de interesse, os interIeren-
tes tm chance de serem removidos ou de terem seu eIeito contornado. EIetuar diluies ou pre-
concentrao e ajustar as caracteristicas da matriz as das solues padro tambem so possiveis
quando se dispe de solues de amostras.
Matrizes orgnicas exigem a eliminao eIiciente dos compostos orgnicos, tanto para a libe-
rao de constituintes, como para eliminao de interIerncias. Estas ultimas so particularmente
importantes em tecnicas instrumentais como a voltametria, cromatograIia e principalmente na espec-
trometria de absoro atmica em Iorno de graIite e plasma ICP axial, nas quais ocorre o aumento
da interferncia de background.
4.1 Dissoluo
Essencialmente, este e um procedimento para o preparo de solues de matrizes inorgnicas.
A dissoluo pode ser conduzida diretamente em agua ou em soluo aquosa sem mudana quimica.
Um exemplo comum de aplicao desse processo em materiais de interesse agronmico e na deter-
minao de nitrognio e potassio em misturas de Iertilizantes minerais. Como as Iontes desses nutri-
entes so, em geral, sais inorgnicos bastante soluveis, como sulIato e nitrato de amnio, ureia, clo-
reto e sulIato de potassio, atraves da dissoluo em agua so determinados os teores totais daqueles
nutrientes.
Na analise de solos, solues aquosas de acidos, sais ou agentes complexantes colocam em
soluo apenas parte dos nutrientes, deIinindo teores soluveis ou disponiveis, que podem ser direta-
mente relacionados com a absoro dos mesmos pelas plantas.
1
baseado no II Worshop Sobre Metodos De Decomposio de Amostras realizado no CENA, Piracicaba, SP, em 1998.
36
A dissoluo pode ser Ieita empregando-se acidos ou mistura de acidos com mudana quimi-
ca. A solubilizao de rochas calcarias se enquadra neste caso. Amostras de calcarios so Iacilmente
dissolvidas em soluo HCl sob aquecimento com desprendimento de CO
2
. Outro exemplo e a dis-
soluo de metais em acidos.
Certas matrizes inorgnicas, como os silicatos, compreendendo argilas, rochas, minerais e
escorias, so de diIicil dissoluo mesmo em acidos concentrados a quente. Neste caso, pode se op-
tar pelo emprego de eletrolitos inorgnicos Iundidos, os Iundentes, que atuam como poderosos sol-
ventes a temperaturas elevadas, ao redor de 1000
o
C. O processo normalmente e conduzido em cadi-
nhos de platina, o que e uma desvantagem devido ao custo elevado desse material.
A Iuso pode ser eIetuada com reagentes basicos, tais como: LiOH, NaOH, KOH, Na
2
CO
3
,
NaHCO
3
. O Na
2
CO
3
e um Iundente comumente empregado. Apos Iuso com Na
2
CO
3
, um silicato
de calcio insoluvel resultara em CaO e Na
2
SiO
3
, que sero solubilizados em HCl.
Na determinao de silicio em material vegetal, a amostra pode ser incinerada em muIla e o
residuo Iundido em Na
2
CO
3
. O Si soluvel torna-se ento passivel de determinao espectroIotome-
trica.
A Iuso tambem pode ser conduzida com boratos: tetraborato de litio, Li
2
B
4
O
7
e metaborato
de litio, LiBO
2
, bem como com outros Iundentes acidos como NH
4
HSO
4
, NaHSO
4
, Na
2
S
2
O
7
,
K
2
S
2
O
7
ou oxidantes, NaNO
3
, K
2
S
2
O
8
.
37
4.2 Decomposio
O processo de decomposio mais importante em analises de materiais de interesse agron-
mico e a destruio da materia orgnica em matrizes como tecido vegetal: limbo Ioliar, bainhas,
colmos; tecido animal; alimentos; Iertilizantes orgnicos, residuos industriais, entre outros.
4.2.1 Combusto
Rotineiramente os procedimentos de combusto ocorrem em sistema aberto por incinerao
em muIla eletrica. Componentes orgnicos de amostras so oxidados pelo oxignio atmosIerico,
transIormando-se essencialmente em CO
2
e H
2
O. O residuo obtido e Iormado por oxidos, sulIatos,
IosIatos e silicatos de elementos no volateis.
Materiais orgnicos normalmente so incinerados de 450 a 550
o
C, devendo a elevao de
temperatura ser conduzida de modo progressivo. Os constituintes no volateis permanecem nas cin-
zas, as quais so atacadas com uma soluo acida para solubilizao dos elementos de interesse.
Nesse processo, o residuo insoluvel isolado por Iiltrao por vezes e considerado como SiO
2
.
Esse procedimento e adequado para quantidades relativamente elevadas de material vegetal
(1 ou 2 gramas), no soIre contaminao por impurezas provenientes de reagentes, mas apresenta o
problema de perda de elementos por volatilizao. O risco perda e maior com o aumento da tempe-
ratura, mas esta deve ser suIicientemente elevada o para se evitar combusto incompleta.
A perda de elementos de interesse pode decorrer de outros constituintes da propria matriz.
Na presena de ion cloreto ocorre Iormao de PbCl
2
e CdCl
2
volateis, determinando a perda desses
elementos. Certos reagentes podem ser adicionados para evita-las: acido sulIurico Iorma sulIatos de
Pb e Cd que no se volatilizam. Tambem, na determinao de cloreto em tecido vegetal se incinera a
amostra misturada a carbonato de sodio para se evitar perdas daquele elemento. Por outro lado, ni-
tratos podem ser adicionados a amostras com objetivo de acelerar a oxidao.
O processo combusto e conduzido em geral em Iornos eletricos denominados muIlas, mas
atualmente existem equipamentos onde a incinerao se processa por meio de microondas. O mate-
rial orgnico e normalmente colocado em cadinhos ou capsulas de porcelana, nos quais existe o ris-
co de reao desse material com a amostra. Isso e evitado em recipientes de quartzo e de platina,
mas o custo elevado torna restrito o uso dos mesmos.
4.2.2 Via mida
38
Matrizes orgnicas e biologicas so submetidas sob aquecimento a decomposio com acidos
minerais oxidantes concentrados ou misturas de acidos oxidantes, visando a oxidao da materia
orgnica. Emprega-se tambem a mistura de um acido oxidante e peroxido de hidrognio. Os acidos
oxidantes empregados so: HNO
3
, H
2
SO
4
e HClO
4
. Sendo aplicada a determinao de metais, estes
permanecem como cations simples em meio acido.
Neste processo, as possibilidades de perdas de elementos so minimizadas em relao a inci-
nerao em sistemas abertos, mas ainda assim alguns elementos importantes como boro e mercurio
podem ser perdidos.
O emprego de volumes relativamente elevados de reagentes concentrados introduz o risco de
contaminao, sobretudo na determinao de constituintes que ocorrem a baixas concentraes.
Neste caso sera necessario empregar acidos de elevada pureza.
4.2.2.1 Tcnicas de aquecimento convencional
Na analise de materiais orgnicos como tecidos vegetais, Iertilizantes e residuos orgnicos
emprega-se rotineiramente o processo que se denomina digesto nitrico-perclorica para determina-
o de P, K, Ca, Mg, S e micronutrientes, empregando-se os acidos nitrico e perclorico concentra-
dos.
Em sistemas abertos, a eIicincia de oxidao e limitada pela temperatura de ebulio do a-
cido empregado. O HNO
3
tem seu poder de oxidao limitado pela temperatura de ebulio do azeo-
tropo Iormado a 120
o
C.
Digestor para bales Kjeldahl
Bloco digestor
Na digesto nitrico-perclorica o HNO
3
atua inicialmente oxidando da maior parte dos com-
postos orgnicos, que apresentariam riscos de exploso caso Iossem postos em contato com o acido
39
perclorico. Apos a maior parte da materia orgnica ter sido eliminada, adiciona-se o acido perclori-
co, que sendo um agente oxidante mais energico completa o processo e por estar na presena de
quantidade pequena de materia orgnica apresenta menor risco. Como a temperatura de ebulio do
HClO
4
e maior que a do HNO
3
ele promove a expulso do HNO
3
residual. .Ao Iinal do processo a
temperatura sera mais uma vez elevada, pois tambem o HClO
4
deve ser eliminado, devido ao risco
de Iormao de perclorato de potassio, que e pouco soluvel.
Na determinao de nitrognio pelo metodo de Kjeldahl, a oxidao da materia orgnica de
amostras de solo, tecido vegetal e Iertilizantes orgnicos e eIetuada pela digesto com acido sulIuri-
co em combinao com catalisadores (Selnio elementar, selenito de sodio, HgO), sais como K
2
SO
4
para promover elevao da temperatura de ebulio do acido , ou ainda peroxido de hidrognio.
Na oxidao da materia orgnica, o nitrognio orgnico se converte em nitrognio amoniacal
para ser determinado pelo metodo de Kjeldahl. O nitrognio na Iorma nitrica e convertido a amonia-
cal pela ao de hidrognio nascente produzido a partir da reao entre crmio metalico, ou liga de
Raney, com H
2
SO
4
durante a digesto sulIurica. A reduo de nitrato a amnio pode ser Ieita em
meio alcalino, durante a destilao da amnia pela liga de Devarda.
Os processos de digesto nitrica perclorica ou sulIurica so conduzidos em tubos de vidro,
submetidos a aquecimento em blocos digestores ou, ento, empregando bales Kjeldahl, de volumes
variaveis entre 50 e 800 mL. A grande vantagem e, principalmente, a simplicidade e o baixo custo
dos equipamentos.
A mistura de acido sulIurico e de peroxido de hidrognio (H
2
O
2
) tambem pode ser emprega-
da para a digesto de material vegetal.
4.2.2.2 Decomposio em sistema fechado. Bomba de Teflon
Em sistemas Iechados a temperatura de ebulio do HNO
3
se eleva e isso aumenta seu poder
de oxidao, sendo possivel eliminar os riscos do uso do acido perclorico. Na destruio de materia
orgnica em sistemas Iechados so eliminadas as perdas por volatilizao e a oxidao a temperatu-
ras elevadas determina menor tempo e menor consumo de acidos, reduzindo com isso a introduo
de contaminantes na soluo de amostra.
O processo pode ser conduzido em Irascos de TeIlon PTFE a temperaturas que o material
suporta , entre 160 a 200
o
C. O Irasco de PTFE e contido num cilindro de ao e dispe de tampa que
se abre em caso de ocorrer presso excessiva durante o processo, sendo o conjunto aquecido em
40
bloco aquecedor ou estuIa. Um volume de 2ml de HNO
3
e suIiciente para oxidar 100 mg de carbono
a 170-180
o
C durante cerca de 3 horas. A materia orgnica pode ser completamente oxidada pelo
acido nitrico a 300
o
C, mas para isso devem ser usados Irascos de quartzo.
4.2.2.3 Decomposio assistida por microondas
A microonda empregada e a radiao eletromagnetica de Ireqncia 2450 MHz, comprimen-
to de onda de 12 cm, energia de 600 a 700 W (0,0016 eV). Microondas no so radiaes ionizantes,
pois apresentam energia insuIiciente para romper ligaes quimicas, cujas energias so bem maio-
res, tais como:
H-OH 5,2 eV
H-CH
3
4,5 eV
H-NH-CH
3
4,3 eV
H
3
C-CH
3
3,8 eV
Os eIeitos biologicos das microondas esto associados apenas ao superaquecimento do tecido
exposto, o que pode ocorrer ate 2 cm de proIundidade.
Os materiais interagem com as microondas basicamente de trs Iormas:, reIletindo-as sem se
aquecerem, como Iazem os metais; sendo transparentes a elas e tambem no se aquecendo, como os
plasticos e as cermicas e Iinalmente absorvendo-as e se aquecendo. O aquecimento de materiais por
microondas se da por conduo ionica, ou seja, a migrao de ions dissolvidos sob a inIluncia de
um campo eletromagnetico e por rotao de dipolo, quando moleculas com dipolo permanente ou
41
dipolo induzido se alinham a um campo eletromagnetico aplicado.
A habilidade de um material em converter a energia eletromagnetica de microondas em calor
a uma determinada Ireqncia e temperatura e expressa pelo parmetro tg o. Para agua a 25
o
C tg o e
igual a 0,157 enquanto que para o vidro borossilicato e 0,00106. No aquecimento convencional de
um liquido por conduo termica, a superIicie externa do Irasco tem que estar a uma temperatura
superior a temperatura de ebulio do liquido, enquanto no aquecimento por microondas ocorre o
aquecimento do interior do liquido para Iora.
O processo de oxidao de materia orgnica assistida por microondas pode ser conduzido em
sistemas Iechados, onde no ocorrem perdas por volatilizao e ao da microonda no e Iocalizada
sobre a amostra. O aumento da presso aumenta a temperatura de ebulio dos acidos e, conseqen-
temente, a eIicincia da oxidao, permitindo que menores quantidades de acidos possam ser em-
pregadas. No se recomenda empregar o acido perclorico em sistemas Iechados, devido aos riscos
de exploso dos Irascos sob presso.
No equipamento denominado Iorno de microondas Iocalizado, o processo e conduzido em
sistema aberto a presso atmosIerica. Os tubos de digesto so colocados em cavidades e submeti-
dos individualmente a ao de microondas direcionadas sobre a amostra, que recebe uma quantidade
conhecida e reprodutivel de energia.
O equipamento possibilita a adio automatizada de reagentes e como o controle de cada ce-
lula de digesto e independente, diIerentes processos e amostras podem ser conduzidos simultanea-
mente.
42
Na decomposio de material orgnico ocorre liberao de um grande volume de gases. Isso
limita nos sistemas Iechados a massa de material a quantidade de no maximo 0,5g, enquanto que nos
sistemas abertos pode-se decompor ate 5 g.
A decomposio de materiais em sistemas Iechados, ao no permitir a volatilizao de aci-
dos, resulta em extratos bastante acidos e isso pode complicar a utilizao de certos metodos analiti-
cos onde o controle das condies de pH e mais rigido.
4.3 Preparo de soluo de amostra e interpretao do resultado analtico
O preparo de soluo da amostra esta diretamente relacionado com a interpretao do resul-
tado da analise. O ataque de uma amostra de solo com acidos nitrico, cloridrico e Iluoridrico solubi-
liza a matriz completamente e no extrato obtido podero ser determinados os teores totais de Si, Fe,
Al, Ca, Mg, K, entre outros constituintes. Teores totais so uteis em estudos de mineralogia de solo,
ou, por exemplo, para determinar a contribuio dos constituintes potencialmente toxicos de um
Iertilizante ou de um residuo industrial para a contaminao de um solo. Nos estudos de nutrio de
plantas, contudo, os teores de elementos nas Iormas disponiveis no solo e nos Iertilizantes so mais
representativos do que os teores totais.
Deste modo, e no momento do preparo da soluo das amostras que os teores Iicam caracte-
rizados. Ao se agitar solo com soluo 1 mol L
-1
KCl, os cations Al
3
, Ca
2
e Mg
2
que Iazem parte
do complexo de troca do solo so deslocados e substituidos pelo ion K

, sendo por isso mesmo de-

nominados trocaveis. Por outro lado, ao se aquecer uma amostra do solo com soluo de HCl, o cal-
cio e o magnesio das particulas de calcario presentes no solo sero incluidos na determinao.
Na analise de Iertilizantes a simples agitao com agua de amostras contendo as Iontes mais
usadas de N e K, como ureia e KCl, permite considerar a determinao dos teores totais daqueles
nutrientes, Contudo, para as Iontes de IosIoro, a agua no e o extrator mais adequado e uma soluo
contendo o ion citrato permitira avaliar mais adequadamente o teor de P utilizavel pelas plantas.
Assim, ao se interpretar o resultado de uma analise de solo ou de Iertilizante, pode ser im-
prescindivel conhecer os detalhes da marcha analitica com relao ao metodo empregado para se
obter as solues das amostras para analise.
43
5 NATUREZA E PROPRIEDADES DA ENERGIA RADIANTE
5.1 Radiao eletromagntica
Radiao eletromagnetica e uma combinao de um campo eletrico e de um campo magneti-
co, variaveis em tempo e espao, que se propaga atraves do espao transportando energia. Radiao
eletromagnetica e a propagao de energia no espao, vacuo ou ar, na Iorma de um movimento on-
dulatorio, a velocidade constante quando o meio no varia. Existem inIinitos campos eletricos e
campos magneticos correspondentes que se situam em planos perpendiculares a direo de propaga-
o da radiao. Para a maioria das aplicaes analiticas evolvendo a interao da energia radiante
com a materia, e suIiciente considerar apenas o campo eletrico.
A radiao eletromagnetica e subdividida em diIerentes modalidades tais como: luz visivel,
raios gama, ondas de radio, microondas, raios x, ultravioleta, inIravermelho. Esses nomes so esta-
belecidos com Iins didaticos e praticos, pois no ha diIerenas abruptas entre as modalidades de
radiao e todas so, basicamente, o mesmo Ienmeno Iisico.
Denomina-se luz a radiao eletromagnetica visivel, que o ser humano percebe, pois se ca-
racteriza por comprimentos de onda ao qual olho humano e sensivel. Em suma, luz visivel e a radia-
o eletromagnetica que se situa entre o inIravermelho e o ultravioleta. A percepo das cores varia
muito de uma especie animal para a outra. Ces e gatos, por exemplo, no vm cores, apenas o preto
e o branco; as cobras so sensiveis ao inIravermelho e as abelhas ao ultravioleta. Mesmo entre os
seres humanos pode haver grandes variaes na percepo e por isto, os limites do espectro visivel
no so rigidos. Aparelhos de laboratorio denominados espectroscopios podem detectar comprimen-
tos de onda entre 2 e 2500 nm.
44
A radiao eletromagnetica exibe simultaneamente propriedades de particula e de onda. Es-
sas caracteristicas so mutuamente exclusivas e se aplicam separadamente em circunstncias diIe-
rentes. As caracteristicas ondulatorias aparecem quando a radiao eletromagnetica se propaga a
grandes distncias e e considerada numa ampla escala de tempo, enquanto as caracteristicas de par-
ticula so evidentes a pequenas distncias e escalas de tempo.
Os Ienmenos de reIlexo e diIrao da radiao eletromagnetica podem ser analisados tanto
pelos conceitos ondulatorio como corpuscular; a interIerncia, diIrao e polarizao so Ienmenos
interpretados apenas pelo modelo ondulatorio e o eIeito Iotoeletrico e explicado apenas pelo modelo
corpuscular. O modelo ondulatorio da luz explica entre outros Ienmenos triviais como a Iormao
do arco-iris, o Iuncionamento das lentes de aumento e a aparente distoro dos objetos quando i-
mersos em agua.
5.2 Parmetros de onda
Uma onda e caracterizada pela velocidade com que se propaga, a amplitude ou intensidade, o
comprimento de onda e a Ireqncia.
Velocidade
Todas radiaes eletromagneticas irradiam-se pelo espao com a mesma velocidade. No va-
cuo, a velocidade, representada por c, e conhecida como 'velocidade da luz, igual a 2,99792 10
8
m
s
-1
ou 3,00 10
8
m s
-1
.
As propriedades ondulatorias da radiao eletromagnetica so descritas por duas variaveis in-
terdependentes: Ireqncia e comprimento de onda. Essa interdependncia e expressa pela equao:
c v
Assim desde que c e uma constante e v tem uma relao reciproca entre si: radiao com
alta Ireqncia tem baixo comprimento de onda e vice-versa.
Freqncia (v, letra grega nu)
E numero de vezes que um ponto da onda, o pico, por exemplo, passa por um ponto do espa-
o na unidade de tempo, ou seja, e o numero de ciclos que a onda apresenta por segundo. A Ireqn-
cia e expressa nas unidades s
1
ou Hertz
Comprimento de onda (, letra grega lambda)
E a distancia entre qualquer ponto na onda e seu ponto correspondente na proxima crista ou
vale. Comprimento de onda e expresso em metros seus submultiplos como nanmetro (1 nm 10
- 9
45
metros). A radiao constituida por um unico comprimento de onda e denominada radiao mono-
cromatica. A luz do sol e constituida por uma ampla gama de comprimentos de onda e denominada
policromatica.
E importante ressaltar que a Ireqncia da radiao e caracteristica da Ionte emissora e no
varia em Iuno do meio. Assim, uma radiao com Ireqncia 6 10
14
Hz e velocidade 3 10
8
m s
-1

tera comprimento de onda:
c v
3 10
8
m s
-1
6 10
14
s
-1
.
5 10
-7
m 500 nm
Ao ser transmitida atraves do vidro, a radiao eletromagnetica mantem a mesma Ireqncia,
mas como a velocidade para 1,8 10
8
m s
-1
e enquanto estiver percorrendo o vidro seu comprimento
de onda se altera para:
c v
1,8 10
8
m s
-1
6 10
14
s
-1
.
3 10
-7
m 300 nm
Quando emerge do vidro, a radiao retoma sua velocidade e comprimento de onda iniciais.
Amplitude
Outra caracteristica de uma onda e a amplitude que e a altura da crista ou proIundidade do
vale.
alta amplitude
comprimento de onda
baixa amplitude
46
A amplitude e uma medida da Iora dos campos eletrico e magnetico da onda e esta
relacionada a intensidade da radiao, que nos caso da luz visivel se maniIesta como brilho. A luz de
uma cor particular, vermelho, por exemplo, tem Ireqncia e comprimento de onda especiIico, mas
pode ser brilhante (amplitude alta) ou Iraca (amplitude baixa).
De acordo com o modelo corpuscular, a radiao eletromagnetica e constituida por um con-
junto de pacotes discretos de energia chamados Iotons. A Ireqncia da radiao determina a magni-
tude da energia dos Iotons e a intensidade da radiao e proporcional ao numero de Iotons Como os
Iotos so absorvidos e emitidos eles atuam como transportadores de energia. A energia do Ioton e
dada pela equao:
E h v

c H
E
.
=
h constante de Planck 6,626 x 10
-34
J s
5.3 Exemplos de clculos
Um dentista usa raios X ( 1,0 Angstrom ) para tirar radiograIias de um paciente que escu-
ta a musica de um radio ( 325 cm) e olha pela janela para o ceu azul ( 473 nm). Qual e a Ire-
qncia em s
-1
da radiao eletromagnetica de cada Ionte? Assumir que a radiao de propaga a
velocidade da luz 3.00 x 10
8
m/s.
c v v c/
1 cm 10
-2
m 1 nm 10
-9
m 1 Angstrom 10
-10
m
1 A 1.0 x 10
-10
m 325 cm 325 x 10
-2
m 473 nm 473 10
-9
m
v 3 x 10
8
m s
-1
/ (1.0 10
-10
m) 3 x 10
18
s
-1
or Hz
v 3 x 10
8
m s
-1
/ (325 x 10
-2
m) 9,23 10
7
s
-1

v 3 x 10
8
m s
-1
/ (473 10
-9
m ) 6,34 10
14
s
-1

Uma cozinheira usa o Iorno de microondas para preparar uma reIeio. O cumprimento de
onda e 1,20 cm. Qual a energia de um Ioton da radiao de microonda ?
E h v v c/ E h c/
h constante de Planck 6,626 x 10
-34
J s
E (6,626 x 10
-34
J.s .3 x 10
8
m/s) / 1,20 10
-2
m
E 1,66 x 10
-23
J
47
5.4 Modalidades de radiao eletromagntica
A radiao eletromagnetica se propaga a velocidade constante num determinado meio, mas
diIerenas no comprimento das ondas, e conseqentemente na Ireqncia, resultam em tipos de ra-
diao que apresentam diIerentes caracteristicas, como o poder de penetrao dos raios X ou o a-
quecimento do inIravermelho.
O conjunto de radiaes com diIerentes comprimentos de onda constituem o espectro ele-
tromagnetico que e Iormado por diIerentes regies.
Ondas de radio so usadas para transmitir sinais de radio de TV com comprimentos de onda
de ate centenas de metros. Microondas de comprimento de onda so usadas rotineiramente no cozi-
mento dos alimentos por agirem sobre a rotao das moleculas de agua e assim provocando aqueci-
mento. As radiaes de inIravermelho incluem as radiaes termicas. Ao se passar corrente eletrica
atraves de um Iilamento metalico ele pode no emitir luz, mas emite radiao inIravermelha que e
sentida como calor. Tem uso cotidiano nos controles remotos. Para a regio do inIravermelho se usa
o numero de onda que e o inverso do comprimento de onda. A regio da luz visivel (400-750 nm),
que e detectada pelo olho humano, coincide com os comprimentos de onda de maior intensidade,
emitidos pelo Sol. A radiao ultravioleta corresponde a Iaixa de 400 a 10 nm. Uma Ionte importan-
te de radiaes ultravioleta e o Sol, sendo a maior parte delas bloqueadas pela camada de oznio na
parte superior da atmosIera da Terra. Os Raios X so radiaes eletromagneticas de grande poder de
penetrao, usadas em aplicaes medicas. Os raios gama so emitidos por atomos de elementos
radioativos e so mais penetrantes que os raios X e tambem usados na medicina.
As diIerentes Ireqncias caracterizam as diIerentes energias dos Iotons constituintes das di-
Ierentes regies do espectro eletromagnetico. Esses Iotons de energias diIerentes interagem de modo
distinto com a materia. Radiaes de comprimentos de onda mais curtos (maiores Ireqncias) tm
energia maior e, conseqentemente, aIetam o nucleo e os eletrons das camadas mais internas do a-
Comprimento de onda em metros
48
0
20
40
60
80
100
300 400 500 600 700 800
comprimento de onda
r
e
s
p
o
s
t
a

r
e
l
a
t
i
v
a

(

)
tomo. A medida que a energia dos Iotons diminui as interaes so mais Iracas, a ponto das radia-
es de microondas, por exemplo, apenas aIetarem a rotao das moleculas.
Tipo de radiao Freqncia
(Hz)
Comprimento de
onda
Interao com a materia
Raios gama 10
20
- 10
24
10
-12
m Nuclear
Raios X 3 10
20
- 3 10
16
1 pm - 10 nm Eletron interno
Ultravioleta 3 10
16
-7,5 10
14
10 nm - 400 nm Eletron externo
Visivel 7,510
14
- 4 10
14
400 nm - 750nm Eletron externo
InIravermelho pro-
ximo
4 10
14
- 1,2
10
14
750 nm - 2,5 m Eletron externo Vibrao. molecular
InIravermelho medio 1,210
14
- 6 10
12
2,5 m - 50 m Vibrao molecular
InIravermelho distan-
te
6 10
12
- 3 10
11
50 m -1000m Vibrao molecular
Microondas 3 10
11
- 3 10
8
1mm 1 m Rotao molecular
Ondas de radio 3 10
8
~1 m Spin nuclear
As radiaes so tambem classiIicadas como ionizantes e no-ionizantes. Ionizao e a re-
moo de um ou mais eletrons de um atomo ou de uma molecula de modo a produzir uma especie
positiva. Radiaes na regio visivel do espectro ou de comprimentos de onda maiores no apresen-
tam capacidade de ionizar e assim so classiIicadas de no-ionizantes. As radiaes comeam a se-
rem classiIicadas como ionizantes na regio do ultravioleta. O comprimento de onda exato depende
do atomo ou da molecula.
5.5 Luz visvel
A poro visivel do espectro eletro-
magnetico, detectavel pelo olho humano, esta
compreendida entre 400 e 750 nm.
As cores que se percebem so resultan-
tes da absoro pela materia de certos compri-
mentos de onda e da transmisso de outros.
Assim, a cor observada (cor complementar)
corresponde aos comprimentos de onda no
absorvidos por uma substncia.
49
A percepo das cores pelo olho humano e uma evidncia dos comprimentos de onda diIe-
renciados de diIerentes radiaes, mas no serve para Iinalidades analiticas precisas.
absorvido, nm Cor da luz absorvida Cor Complementar Transmitida
400 - 435 Violeta Amarela esverdeada
435 - 480 Azul Amarela
480 - 490 Azul esverdeada Laranja
490 - 500 Verde azulada Vermelha
500 -560 Verde Purpura
560 - 580 Amarelo esverdeada Violeta
580 - 595 Amarela Azul
595 - 650 Laranja Azul esverdeada
650 - 750 Vermelha Verde azulada
50
Um equipamento e capaz de eIetuar uma varredura e medir a energia absorvida por solues
em Iuno do comprimento da radiao incidente sobre ela, constituindo um espectro de absoro de
energia pelas moleculas presentes. Os espectros de absoro de algumas solues coloridas so a-
presentados a seguir (as cores so as mesmas das linhas da Iigura). Se as solues so coloridas elas
absorvem energia radiante no intervalo 400-750 nm.
Uma soluo vermelha, por exemplo, no absorve radiaes de 400 nm, mas a 450 nm ja o
Iaz. O pico de absoro ocorre a 520 nm e, portanto, a soluo vermelha retira do espectro de luz
visivel a cor verde azulada. A cor que se v e produzida parte restante desse espectro.
Solues incolores podem tambem apresentar um espectro de absoro de radiao eletro-
magnetica, mas que no estara evidentemente compreendido entre 400 e 750 nm. Uma soluo de
caIeina em etanol exibe um maximo de absoro proximo a 270 nm, na regio UV, ou seja, ela retira
uma Irao de comprimento de onda do espectro de energia radiante, mas isso no pode ser detecta-
do pelo olho humano, e, assim, a soluo e incolor.
0,00
0,10
0,20
0,30
0,40
0,50
0,60
0,70
400 450 500 550 600 650 700 750 800
Comprimento de onda (nm)
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a
51
5.6 Radiao eletromagntica e matria
Moleculas, ions e atomos so constituidos por cargas eletricas, eletrons e nucleos e um cam-
po eletrico como o das radiaes eletromagneticas exerce uma Iora sobre essas especies. A radia-
o eletromagnetica e a materia esto envolvidas com diIerentes Ienmenos , alguns dos quais so
comentados a seguir.
Transmisso
A transmisso de energia radiante atraves de um meio material no muda sua Ireqncia,
pois esta e determinada pela Ionte emissora. Durante a transmisso no ocorre transIerncia de ener-
gia da radiao para a materia, mas apenas uma interao temporaria do campo eletrico da radiao
com a estrutura eletrnica do meio. Essa interao altera a velocidade e, conseqentemente, o com-
primento de onda da radiao.
Espalhamento da radiao
Durante a transmisso de energia radiante no ha absoro e a maior parte dela mantem a di-
reo original do Ieixe, mas a parte da radiao temporariamente retida e re-emitida em todas as
direes. Quando as particulas do meio so muito pequenas, a radiao remitida e praticamente anu-
lada por interIerncia destrutiva, mas se as particulas Iorem maiores pode haver transmisso de e-
nergia em todas as direes causando o que se denomina espalhamento da radiao.
0
0,12
0,24
0,36
0,48
0,6
240 250 260 270 280 290 300 310 320
comprimento de onda (nm)
a
b
s
o
r
b

n
c
i
a
Soluo 10 mg L
-1
de caIe-
ina em etanol
52
Reflexo e Refrao
Quando um Ieixe de radiao incide a um determinado ngulo sobre a superIicie de separao entre
dois meios uma parte pode ser reIletida com mesmo ngulo de incidncia. Outra parte e transmitida
atraves do meio soIrendo uma mudana de direo, ou seja, soIrendo reIrao.
Polarizao
Na radiao eletromagnetica ocorrem inIinitos campos eletricos se situam em planos perpen-
diculares a direo de propagao. Ao atravessar certos meios, ditos polarizantes, a radiao passa a
vibrar em um unico plano, denominando-se ento radiao polarizada.
Difrao
Ao atravessar um oriIicio relativamente estreito uma onda se irradia como se ali Iosse uma
Ionte pontual de ondas, e esse Ienmeno se denomina diIrao. A intensidade da diIrao aumenta a
medida em que a abertura do oriIicio se aproxima do comprimento de onda da radiao. Na diIrao
ocorrem interIerncias construtivas e destrutivas, que resultam em zonas, linhas ou pontos escuros e
brilhantes dependendo da geometria do objeto que causa a diIrao.
01 01
02
Luz incidente
Indice de reIrao n1
Indice de reIrao n2
Luz reIletida
Luz reIratada
Normal
53
Absoro e emisso de energia por tomos
As diIerentes regies do espectro eletromagnetico interagem de modo bastante diIerencia
com a materia. Para haver absoro a Ireqncia da onda incidente coincidir com uma Ireqncia
natural de um tipo de oscilao do sistema. Ainda devem ser respeitadas as regras de seleo qunti-
cas atinentes ao sistema e a Iaixa de Ireqncias envolvida.
5.7 Histrico
Isaac Newton demonstrou em 1665-66 que a luz branca, como a luz do Sol, ao passar por um
prisma se decompe em luz de diIerentes cores, Iormando um espectro como o arco-iris. Carl Schee-
le em 1777 observou que a luz de cor violeta, localizada ao Iinal do espectro da luz visivel, enegre-
cia uma maior quantidade de cloreto de prata na reao de Iotolise, que e a base da IotograIia
Em 1802, William Hyde Wollaston (1766-1828) observou que, passando a luz solar por uma
Ienda e depois por um prisma, apareciam algumas linhas escuras no espectro, que ele interpretou
como o limite das cores. Estas linhas so imagens da Ienda do espectrograIo em diIerentes compri-
mentos de onda. Ate 1820, o Iabricante de instrumentos de vidro (lentes, prismas, microscopios e
telescopios) alemo Joseph von FraunhoIer (FrauenhoIer) (1787-1826), de Munique, ja havia conta-
do no espectro solar 574 linhas escuras, chamadas depois de linhas de FraunhoIer. Para 324 destas
linhas, FraunhoIer deu o nome de letras maiusculas: A, B, C ... para as linhas mais Iortes e minuscu-
las para as mais Iracas, comeando com A no vermelho.
FraunhoIer tambem observou linhas nos espectros das estrelas Sirius, Castor, Pollux, Capel-
la, Betelgeuse e Procyon. Cerca de 40 anos depois as linhas Ioram identiIicadas como sendo:
Linha
A B C D1 D2 D3 E b1 F G H K
(A) 7594 6867 6563 5896 5890 5876 5270 5184 4861 4308 3968 3934
Elemento O O H u Na Na He Fe,Ca Mg H Fe,Ca Ca Ca
54
Em 1856, o quimico alemo Robert Wilhelm Bunsen (1811-1899) inventou o bico de gas
(bico de Bunsen), cuja vantagem era a de ter chama incolor. Quando um elemento quimico era colo-
cado sobre a chama, as cores emitidas eram as da substncia, e no da chama. Bunsen tinha um co-
laborador mais jovem, o Iisico Gustav Robert KirchhoII (1824-1887), que em 1856 sugeriu que as
cores seriam mais bem distinguidas se passadas atraves de um prisma. Eles colocaram um prisma na
Irente de um conjunto de lentes e passaram a identiIicar as linhas com os elementos quimicos.
Os gases quentes observados por KirchhoII e Bunsen no emitiam um espectro continuo. E-
les descobriram que cada elemento gerava uma serie de linhas diIerentes. Por exemplo, o nenio
tinha linhas no vermelho, o sodio tinhas linhas no amarelo e o mercurio tinha linhas no amarelo e no
verde.
Estas linhas eram todas brilhantes, enquanto as linhas de FraunhoIer eram escuras. KirchhoII
queria conIirmar que as linhas escuras D descobertas por FraunhoIer eram linhas de sodio.
Bunsen KirchhoII
55
Para isto ele passou a luz do Sol atraves de uma chama de sodio, esperando que as linhas do
sodio preenchessem as linhas escuras do Sol. Para sua surpresa, as linhas D Iicavam mais Iortes,
mais escuras. Ele ento substituiu o Sol por um solido quente. A luz do solido que passava pela
chama apresentava as mesmas linhas escuras do Sol, na posio das linhas do sodio. Ele ento con-
cluiu que o Sol era um gas ou solido quente, envolto por um gas mais Irio. Estas camadas mais Irias
e que produziam as linhas escuras do Sol. Comparando o espectro, ele descobriu linhas de Mg, Ca,
Cr, Co, Zi, Ba e Ni no Sol.
De suas experincias, KirchhoII Iormulou as trs leis empiricas da espectroscopia, para de-
terminar a composio de uma mistura de elementos.
1) Um corpo opaco quente, solido, liquido ou gasoso, emite um espectro contnuo.
2) Um gas transparente produz um espectro de linhas brilhantes (de emisso). O numero e
a posio destas linhas depende dos elementos quimicos presentes no gas.
3) Se um espectro continuo passar por um gas a temperatura mais baixa, o gas Irio causa a
presena de linhas escuras (absoro). O numero e a posio destas linhas depende dos elementos
quimicos presentes no gas.
E importante notar que as linhas escuras no signiIicam ausncia de luz, somente o contraste
de menos luz. O gas mais Irio absorve mais radiao que emite e, portanto, gera linhas escuras. Se
estiver em equilibrio, isto e, nem aquecendo nem esIriando, um gas absorve a radiao vinda em sua
direo e a re-emite em todas as direes, causando um decrescimo de Iluxo na direo da Ionte. Se
no estiver em equilibrio, o gas aquece.
56
A observao dos espectros estelares tomou impulso a partir de meados do seculo XIX. Em
1862, o astrnomo sueco Anders Jonas Angstrm (1814-1874), identiIicou as linhas de hidrognio
no Sol, elemento descoberto em 1766 pelo Iisico e quimico ingls Henry Cavendish (1731-1810).
Em 1868, o astrnomo ingls Sir Joseph Norman Lockyer (1836-1920) descobriu uma linha inexpli-
cada no espectro do Sol, que ele identiIicou com um novo elemento quimico, helio, do grego helios,
Sol. Somente 27 anos mais tarde o elemento helio Ioi descoberto na Terra, pelo quimico ingls Sir
William Ramsay (1852-1916) quando o espectro de um minerio de urnio contendo helio produziu
uma linha na posio exata daquela encontrada por Lockyer no espectro do Sol. Hoje em dia sabe-se
que o helio e o segundo elemento mais abundante no Universo. O primeiro e o hidrognio.
O espectro emitido no centro da estrela, pelas reaes nucleares, e denominado "duro", cons-
tituido de raios gama, mas logo vai ser "abrandado" ou Iicar mais "mole" (de comprimento de onda
maior e energia menor por "Ioton"). Como a energia total se mantem e cada Ioton tem menos ener-
gia, o numero de Iotons e muito maior. Nesse processo, que envolve um enorme numero de eventos
ou colises entre os Iotons e a materia, o espectro sera continuo, distribuido em todas as Ireqncias.
Ao migrar para camadas mais externas e Irias, o espectro se torna cada vez mais "mole", passando a
ser principalmente em raios X, ultravioleta e, Iinalmente, perto da superIicie, no visivel.
A "superIicie" de uma estrela (IotosIera) no e uma camada de propriedades quimicas e Iisi-
cas distintas, como nos planetas. Toda a estrela e um gas, que absorve e reemite a radiao, de acor-
do com a sua temperatura. Mais no centro, o gas (na maioria hidrognio e helio) esta todo ionizado,
sendo composto de nucleos e eletrons livres. Porem a temperatura e menor na superIicie, havendo
atomos que podem ter eletrons em diIerentes energias. Mas os eletrons no podem Iicar em qualquer
nivel de energia - e um Iato basico e muito intrigante. Eles so "aceitam" energia de comprimento de
onda bem determinado e ento "pulam" para um nivel mais alto, absorvendo o Ioton dessa energia.
No "servem" os Iotons de menos energia, nem tampouco os de mais energia, a no ser de energia
bem maior, que permite "pular" dois niveis para cima.
Assim, quando a radiao passa pela camada externa, menos densa e mais Iria, os atomos
dessa camada absorvem apenas os Iotons de comprimentos de onda caracteristicos, que sero remo-
vidos da radiao que se desloca da camada mais interna para Iora da estrela. Alem da IotosIera, o
gas esta to rareIeito que, na pratica, no mais absorve a radiao visivel. Assim, a "superIicie" e
apenas um Ienmeno otico, relacionado com a emisso e absoro da luz da estrela.
57
Portanto, superpostas na radiao continua emitida pela estrela, aparecem linhas escuras ca-
racteristicas dos elementos quimicos das camadas superIiciais da estrela, que so as linhas que Frau-
nhoIer identiIicou, classiIicou e estudou a partir de 1814,. Porem, o gas que absorve a luz tambem
se aquece. Na IotosIera do Sol, a temperatura e superior a 5000 K. As linhas escuras nunca so to-
talmente escuras ou desprovidas de luz. Elas tm a contribuio da luz emitida pelo gas que absorve
a luz, mas que tambem a reemite.
WOOD, em 1902, mostrou como atomos de sodio podiam emitir e absorver radiaes atra-
ves de uma experincia ilustrativa, se bem que no inedita. Nela se produzia vapor de sodio no inte-
rior de um bulbo de vidro, aquecendo-se uma pastilha de sodio metalico, sem que nenhum eIeito
otico Iosse perceptivel. Juntando-se ions sodio a uma chama, e com ela irradiando o bulbo, notava-
se emisso de luz amarela de dentro do mesmo. A luz emitida pela chama era capaz de levar atomos
de sodio do estado Iundamental para um nivel mais elevado de energia, ou seja, um estado excitado
instavel. Quando os atomos excitados de sodio retornavam ao estado Iundamental emitiam radiao
luminosa. A experincia de WOOD serve para introduzir uma serie de conceitos que so importan-
tes para se entender os Iundamentos dos metodos espectrometricos de chama.
O aquecimento do sodio metalico produziu atomos de sodio no interior do bulbo. No estado
Iundamental, os 11 eletrons do atomo de sodio esto distribuidos de acordo com a seguinte conIigu-
rao eletrnica:
1s
2
2s
2
2p
6
3s
1
A excitao desses atomos correspondeu a uma mudana estado de energia eletronica. O
menor grau de excitao do atomo de sodio corresponde a mudana do eletron localizado no orbital
3s, o mais externo, para orbitais de maior energia.
Demais eletrons podem ser ignorados, pois a quantidade de energia Iornecida nos metodos
em considerao, e insuIiciente para aIeta-los. Apesar da possibilidade de promoo para estados de
maior energia, a excitao do atomo de sodio, em chama ou por radiao luminosa, corresponde
essencialmente a promoo do eletron para o proximo orbital em ordem crescente de energia:
Na 3,36923.10
-19
Joules Na
*
1s
2
2s
2
2p
6
3s
1
1s
2
2s
2
2p
6
3s
0
3p
1
58
Atomos apresentam niveis ou estados de energia bem deIinidos, tipicos de cada elemento
quimico. A Ireqncia v da energia emitida, ou absorvida, pelo atomo e proporcional a diIerena
entre os valores das energias, Ei e EI, de dois estados energeticos:
h
Ei EI
= v
Na experincia de WOOD, essa energia Ioi Iornecida pela luz proveniente de uma chama,
quando nela eram introduzidos ions sodio, Na

. O que ocorreu na chama pode ser entendido con-

Iorme indicado a seguir:
Na

Cl
-
NaCl (solido) NaCl (liquido) NaCl (gasoso) Na
o
Cl
o
Na
o
energia termica (3,36923.10
-19
J) Na
*
Na
*
Na
o
radiao luminosa (589,59 nm; 3,36923.10
-19
J)
Na chama os ions sodio (Na

) se transIormaram em atomos no estado Iundamental (Na

o
),
que podem ser excitados (Na
*
) atraves da energia liberada em colises com particulas de alta veloci-
59
dade da chama, passando do orbital 3s para o orbital 3p. A tendncia natural e retornar ao estado
Iundamental, mais estavel, e isso se da com cada atomo devolvendo a energia extra adquirida de
3,36923.10
-19
J, atraves da emisso de radiao luminosa. Foi essa radiao que Iorneceu exatamen-
te a energia necessaria e suIiciente para excitar os atomos de sodio dentro do bulbo. Em resumo, na
experincia de WOOD atomos de sodio percorreram diversas vezes o mesmo caminho, indo e vol-
tando, ganhando e devolvendo a mesma quantidade de energia.
Para ter seu eletron mais externo promovido do orbital 3s para 3p, o atomo de sodio tem de
absorver 1 Ioton de radiao luminosa de determinado comprimento de onda, de modo a obter
3,372.10
-19
joules. Essa quantidade de energia corresponde aos Iotons de radiao luminosa, cujo
comprimento de onda pode ser calculado pela equao:

=
c . h
E
onde : E energia em joules
h constante de Planck 6,626176.10
-34
J.s
c velocidade da luz 2,99792458.10
8
m.s
-1

comprimento de onda em metros
9 19
1 8
10 ). J ( 10 . 36923 , 3
) ms ( 10 . 99792458 , 2 ). s . J ( 626276 , 6

=
A radiao luminosa amarelada de 589,59 nm e tipica do elemento sodio, sendo empregada
para identiIica-lo na analise qualitativa. E importante ressaltar a 589,59 nm ocorre absoro de
3,36923. 10
-19
J para promover o eletron de 3s para 3p e havera emisso de radiao desse mesmo
comprimento de onda, no retorno ao estado Iundamental: (3s 3p)
Sob maior Iornecimento de energia, existem muitas possibilidades de excitao do atomo de
sodio. Depois de transio 3s 3p, aquela com maior probabilidade de ocorrer e a 3s 4p, que da
origem a uma linha de emisso na regio do ultravioleta a 330,23 nm.
Em outra transio, menos provavel, mas possivel, o eletron e promovido do orbital 3s para
3d, mas pode retornar ao estado Iundamental em duas etapas, atraves do orbital 3p, emitindo linhas a
819,48 nm e a 589,59 nm.
Os calculos eIetuados no so totalmente corretos, por no levarem em conta a ocorrncia de
multipletos, conIorme sera esclarecido mais adiante ao se discutir o espectro de linhas.
60
5.8 Relao de Boltzman
Quando uma populao de atomos e introduzida em uma chama a maior parte deles perma-
nece no estado Iundamental e uma pequena Irao passa para um estado excitado. A relao entre o
numero de atomos presentes em dois estados de energia possiveis e dada pela relao de Boltzmann.
Assim, a razo entre o numero de atomos em determinado estado excitado (N
*
), e o numero de ato-
mos no estado Iundamental (N
o
) e calculado pela expresso:
k.T
E
A
o
N
*
N

=
onde:
A constante (relao entre pesos estatisticos dos estados Iundamental e excitado)
E diIerena de energia entre os estados considerados.
T temperatura em graus Kelvin
k constante de Boltzmann 1,38062.10
-23
J.K
-1

e base dos logaritmos naturais 2,718
A relao de Boltzmann indica que a populao de atomos excitados depende da temperatura
e da diIerena de energia entre os estados atmicos considerados. Para atomos de sodio numa chama
a 2000 K, a relao entre populaes de atomos excitados (3s
0
3p
1
), e de atomos no estado Iunda-
mental sera de 1 atomo em cada 100.000:
5
10
.2000)|
23
10 /(1,38062.
19 -
0 |3,36923.1
2.e
o
N
*
N

=

=
A relao de Boltzmann e aplicavel diretamente na analise dos metodos espectroscopicos de
chama. Na Iotometria de emisso de chama detecta-se a energia liberada no retorno ao estado Iun-
damental de atomos excitados, cuja populao e altamente dependente da temperatura. Ja na espec-
342,71 nm
3s 3d
3s 3p 3d
589,59 nm 819,48 nm
61
trometria de absoro atmica, so os atomos no estado Iundamental que interagem com um Ieixe
de radiao, a variao de temperatura tem eIeito relativamente menor.
5.9 Absoro de energia por molculas
A mecnica quntica especiIica que uma molecula pode ocupar apenas estados discretos de
energia. Estes estados podem envolver orbitais de eletrons, vibraes entre atomos individuais e
rotaes da molecula como um todo. A energia total de uma molecula E
tot
pode ser expressa como:
E
t
E
rot
E
vibr
E
ele
Estado
eletrnico
Estados
vibracionais
Estado
eletrnico
excitado
Estados
vibracionais
Estados
rotacionais
~ 250 k1 mol
-1
~ 15 k1 mol
-1
~ 0,03 k1 mol
-1
Estados
rotacionais
Iundadamental
62
Para cada estado eletrnico existem muitos estados possiveis de energia vibracional e para
cada estado de energia vibracional existem varios estados de energia rotacional. Radiaes de com-
primento de onda relativamente grande, e de baixa energia, como microondas e inIravermelho aIas-
tado conseguem aIetar apenas a rotao de moleculas.
A absoro de energia de radiaes da regio do inIravermelho esta relacionada a vibrao
molecular, mas somente quando essa vibrao corresponde tambem a um momento dipolar oscilan-
te. Quando moleculas polares vibram, seu momento dipolar varia regularmente e resulta em um
campo eletrico; a absoro de energia se da quando o campo eletrico da radiao eletromagnetica se
acopla a aquele momento dipolar oscilante. Em outras palavras, se a Ireqncia de uma radiao
eletromagnetica se ajustar exatamente a Ireqncia vibracional da molecula a radiao e absorvida; a
transIerncia de energia Iaz alterar a amplitude da vibrao da molecula. Apenas moleculas com
momento dipolar permanente absorvem energia da regio do inIravermelho do espectro eletromag-
netico. Portanto, moleculas diatmicas homonucleares como Cl
2
e O
2
cujo momento dipolar e zero,
no interagem com radiao. Por outro lado, a vibrao de moleculas diatmicas heteronucleares so
acompanhadas de oscilao de momento dipolar e podem interagir com radiao e mudar seu estado
vibracional de energia.
Na regio visivel e ultravioleta a absoro de energia por moleculas ocorre em decorrncia
de transies eletrnicas nos atomos constituintes das moleculas. Atomos livres no possuem ener-
gia rotacional ou vibracional, sendo que as transies de energia ocorrem entre diIerentes niveis
eletrnicos puros e do origem a espectros na regio do visivel ou do ultravioleta. Isso ocorre porque
transies eletrnicas envolvem diIerenas relativamente mais elevadas de energia e, assim, corres-
pondem a absoro de radiao eletromagnetica de comprimentos de onda mais baixos.
Desde que, a cada nivel eletrnico das moleculas esta associado um conjunto de niveis de
energia vibracional, e a cada um destes, por sua vez, um conjunto de niveis de energia rotacional,
transies entre dois niveis eletrnicos moleculares diIerem entre si por pequenas quantidades de
energia vibracional e rotacional, dando origem a estrutura de bandas dos espectros moleculares.
5.10 Espectros
O conjunto de radiaes emitidas ou absorvidas por um elemento, relacionadas ao compri-
mento de onda, constitui seu espectro de emisso ou de absoro, respectivamente. Os seguintes
tipos de espectros podem ser distinguidos:
63
Espectro contnuo
Quando um corpo solido, como o Iilamento das lmpadas de tungstnio, e levado a incan-
descncia e se eIetua a disperso da energia radiante emitida, obtem-se um espectro continuo, com-
posto de todos os comprimentos de onda da Iaixa espectral estudada. Tambem e continuo o espectro
da lmpada de deuterio, empregada na correo de background na espectrometria de absoro at-
mica.
Se os atomos emitem em linhas espectrais, de onde vem o espectro continuo? Quando ato-
mos interagem com outros, as linhas espectrais so alargadas. Quando um agregado de atomos inte-
rage Iortemente, como em um solido, liquido, ou gas opaco, todas as linhas so to alargadas, que
produzem um continuo. Embora um atomo so emita um comprimento de onda, muitos atomos com-
primidos juntos num material emitem radiao em uma banda de linhas.
Espectro atmico ou de linhas isoladas
De maneira geral, atomos de diIerentes elementos quando convenientemente excitados libe-
ram a energia extra adquirida emitindo radiaes monocromaticas, de comprimentos de onda carac-
teristicos e cujo conjunto constitui um espectro atmico de emisso
Por outro lado, atomos em seu estado Iundamental podem absorver energia radiante para
promover transies entre estados eletrnicos de energia bem deIinidos. O conjunto de linhas de
absoro, de comprimentos de onda caracteristicos, constitui o espectro atmico de absoro. O es-
pectro atmico tipico e do tipo descontinuo e apresenta bandas muito estreitas, na verdade linhas,
64
correspondentes a determinados comprimentos de onda. Na exci-
tao por arco ou centelha eletrica, o atomo e levado a estados de
elevada energia e o retorno a condio normal pode ocorrer por
etapas, correspondentes a diIerentes comprimentos de onda. Ob-
tem- se ento um espectro de emisso complexo, com muitas
linhas.
A excitao dos atomos de uma chama por energia lumi-
nosa possibilita apenas transies do estado Iundamental, em que
a quase totalidade dos atomos se encontra, para estados excitados
de energias mais baixas. Registrando-se um espectro de absoro
nessas condies, obtem um espectro relativamente simples, com
poucas linhas de absoro.
Se energia aplicada para excitao atingir o potencial de
ionizao, isto e, Ior de intensidade suIiciente para remover o
eletron para longe da inIluncia do nucleo, sera obtido um ion.
No caso do atomo de sodio essa energia corresponde a 8,235 10
-19
J. Nos espectros de emisso mos-
trados existem linhas correspondentes a emisso por atomos e tambem por ions.
Comparando o espectro atmico de absoro de um elemento com o espectro de emisso
desse mesmo elemento, resultante da excitao termica ou eletrica, veriIicar-se-a que nos mesmos
comprimentos de onda das linhas de absoro ocorrero linhas de emisso. Entretanto, sob condi-
es mais energicas, muitas linhas de emisso podem ser observadas em comprimentos de onda que
no tem correspondente no espectro de absoro. A linha que corresponde a transio entre o estado
Iundamental e o estado excitado de mais baixa energia, e que e a mais provavel, e denominada linha
de ressonncia. Um exemplo hipotetico e mostrado a seguir.
Espectro de absoro
por atomos de silicio
65
Muitas linhas, aparentemente isoladas, so constituidas por varios componentes e se denomi-
nam multipletos. Esses componentes podero ser separados, dependendo do poder de resoluo do
monocromador empregado. No espectro do atomo de sodio a linha de ressonncia observada a 589
nanmetros e na realidade um dublete, pois e composta por duas linhas distintas e muito proximas,
localizadas a 588,99 e 589,59 nanmetros.
Espectro inico
A ionizao ocorre em chamas de elevada temperatura e o espectro de emisso de um ion se-
ra completamente diIerente do espectro do atomo que lhe deu origem, assemelhando-se ao espectro
do elemento de numero atmico precedente.
Na espectrometria de emisso por plasma so atingidas temperaturas muito elevadas, como
7000 K, e assim grande parte dos atomos se ioniza. Neste caso, essas linhas de emisso de ions so
utilizadas com Iinalidade analitica.
66
Espectro de bandas
Moleculas submetidas a excitao suIicientemente Iorte podem se romper e resultarem em
atomos. Caso as moleculas permaneam integras, sera produzido um espectro de emisso molecular,
no qual, grande numero de linhas de comprimentos de onda, bem proximos, Iormaro agrupamentos
chamados bandas. Deste modo, a energia radiante emitida aparece espalhada em um trecho do es-
pectro em vez de se concentrar em linhas isoladas. Emisses de bandas ocorrem mais Ireqentemen-
te em chamas, pois a energia relativamente baixa permite a ocorrncia de associaes de atomos.
Formas de excitao mais eIicientes podem dissociar moleculas em atomos, diIicultando a ocorrn-
cia de bandas.
Em Iogos de artiIicio pode-se observar espectro de emisso de bandas. As cores observadas
se devem a uns poucos compostos quimicos, ou melhor, as especies moleculares resultantes desses
compostos no momento da exploso. O sodio e exceo, pois a cor amarela que ele origina, vem da
excitao de eletrons no atomo de sodio.
A radiao de Iundo (background), observada em espectros, se deve a especies moleculares
como: OH, CO, O
2
, CH, C
2
, muitas das quais so tem existncia em chamas.
No espectro de emisso do calcio ocorre uma emisso molecular de 547 a 560 nm. Essa ban-
da apresenta um pico relativamente estreito a 554 nm, que tem praticamente o aspecto de uma linha
de emisso atmica, atribuida a especie CaOH. A transio eletrnica mais provavel do atomo de
calcio, ou seja, sua linha de ressonncia, ocorre a 422,7 nm envolvendo os orbitais
4s
2
4s
1
4p
1
Cor Especie emissora Comprimento de onda
Amarelo Linha D do sodio, emisso at-
mica
589 nm
Azul CuCl, bandas moleculares Varias bandas intensas entre 403-456 nm.
Bandas menos intensas entre 460- 530 nm
Verde BaCl, bandas moleculares 511-515 nm 524-528 nm 530-533 nm
Vermelho SrOH, bandas moleculares 600-613 nm
Vermelho SrCl, bandas moleculares 617-623 nm 627-635 nm 640-646 nm
Laranja CaCl, bandas moleculares Varias bandas entre 591-599 nm. Bandas
intensas entre 603-608 nm
67
5.11 Perda da energia absorvida
Um atomo, ou uma molecula pode perder sua excitao por diIerentes mecanismos. Pode o-
correr a simples re-emisso de um Ioton de mesma energia daquele que tinha sido absorvido. Mas
nem sempre a energia e devolvida na Iorma de radiao de comprimento de onda correspondente;
uma parte pode ser liberada na Iorma de calor e a quantidade de energia restante na Iorma de radia-
o eletromagnetica de maior comprimento de onda. De qualquer Iorma, essa energia radiante libe-
rada pode ser medida e constitui a base dos metodos de fluorescncia atomica e fluorescncia mole-
cular.
68
6 INSTRUMENTOS PARA MTODOS ESPECTROSCPICOS
Diversos metodos instrumentais se Iundamentam na interao da energia radiante com a ma-
teria, atraves de Ienmenos como: absoro, emisso, espalhamento, reIrao, diIrao, rotao do
plano de polarizao da energia radiante.
Originalmente, o termo mtodos ticos designava metodos instrumentais relacionados a e-
nergia radiante da regio visivel do espectro eletromagnetico. Posteriormente, a designao se es-
tendeu as regies do ultravioleta e inIravermelho, envolvendo Ienmenos de absoro, emisso de
energia, entre outros. Costuma-se considerar os instrumentos empregados nos metodos oticos em
conjunto, para, numa viso abrangente, ressaltar as similaridades que existem no esquema basico
dos mesmos.
Os componentes comuns dos instrumentos dos metodos oticos so: Ionte de radiao, recipi-
ente de amostra, seletor de regio espectral, detector de radiao e processador de sinal e leitura.
Embora essas partes nem sempre estejam em todos os instrumentos dos metodos oticos, quando
presentes desempenham essencialmente as mesmas Iunes.
6.1 Fontes de radiao
As Iontes de radiao esto presentes apenas nos metodos que envolvem medidas de absor-
o de energia radiante, uma vez que nos metodos de emisso a propria amostra atua como Ionte de
radiao.
As Iontes emissoras podem ser basicamente de radiao continua ou de linhas, como as lm-
padas de catodo oco. Na regio visivel do espectro a principal Ionte e a lmpada de Iilamento de
tungstnio, enquanto que para a regio ultravioleta emprega-se a lmpada de deuterio. Para a regio
do inIravermelho podem ser empregadas Iontes diversas, entre as quais Iilamentos de rodio e de
niquel- cromo.
Na espectrometria de absoro atmica o sinal analitico decorre da absoro de energia de
um Ieixe de radiao. Quanto maior Ior a concentrao do elemento a ser analisado na soluo de
amostra, maior sera a populao de atomos desse elemento na chama e maior sera a atenuao do
Ieixe luminoso que a atravessa.
69
E obvio, portanto, que na espectrometria de absoro atmica se deva dispor de uma Ionte de
energia radiante para excitao dos atomos presentes na chama. Sabe-se que para excitar atomos
deve-se Iornecer radiao de comprimento de onda bem determinado, que corresponda a energia
necessaria para levar o atomo do estado Iundamental para outro de maior energia. Deste modo, para
cada elemento a ser determinado pela espectrometria de absoro atmica sera exigida uma Ionte de
radiao especiIica. Na Iotometria de emisso isso no ocorre, pois os proprios atomos do elemento
a ser determinado se constituem em Ionte de radiao.
Em virtude das exigncias citadas, compreende-se porque uma opo adequada e a que em-
prega, por exemplo, a energia radiante emitida por atomos de calcio contidos numa Ionte de radia-
o, para excitar atomos de calcio, provenientes da amostra que esta sendo analisada, como ocorre
nas lmpadas de catodo oco.
LAMPADA DE DEUTERIO
D
2
energia eletrica D
2
*
D
2
* D
2
hv vv v
Faixa 160 - 360 nm
Lmpada de catodo oco
70
Lmpada de catodo oco
Uma linha de absoro tem largura espectral entre 0,002 e 0,005 nm. Para tornar viavel o
metodo de absoro atmica Ioi necessario desenvolver uma Ionte de linhas estreitas, ou seja, de
largura compativel com uma medida de absoro representativa. A Ionte de radiao que atende a
essa necessidade, e em geral utilizada na espectrometria de absoro atmica, e a lmpada de catodo
oco
Consiste em um cilindro de vidro preenchido com gas nobre, nenio ou argnio, a baixa
presso (7,5 mBar), contendo um catodo na Iorma de cilindro oco, Ieito do elemento para cuja de-
terminao a lmpada se destina, como Fe, Cu, Mn, Ni, ou ento o contendo numa liga. Existe ain-
da, um anodo, na Iorma de estilete ou aro. Para elementos que emitem linhas na regio do ultraviole-
ta, a lmpada deve ter janela de quartzo, para os demais a janela e de vidro.
Aplicando-se uma voltagem elevada, entre 400 a 600 volts, ocorre descarga eletrica e ioniza-
o do gas nobre. Os ions positivos produzidos, dirigidos pelo gradiente de voltagem, colidem com
o catodo, deslocando atomos do metal, os quais se excitando por meio de colises, emitem seu es-
pectro caracteristico ao retornarem ao estado Iundamental. O catodo em geral e protegido por um
isolamento em vidro ou cermica, para que a emisso se d do interior do catodo, melhorando a in-
tensidade e deIinio das linhas.
Na operao da lmpada, aplica-se uma corrente de intensidade especiIica para cada elemen-
to. Uma corrente elevada aumenta o numero de atomos excitados e, conseqentemente, a intensida-
de de emisso da lmpada, oIerecendo a vantagem de diminuio do ganho. A elevao da corrente,
contudo, causa o alargamento da linha emitida, problemas de linearidade na calibrao e diminuio
da vida util da lmpada. O emprego de corrente muito baixa gera radiao de baixa intensidade, exi-
gindo ampliIicao excessiva do sinal e aumentando o ruido. O Iabricante da lmpada em geral es-
peciIica a corrente otima e a corrente maxima permitida.
O uso de lmpadas pode ser um inconveniente da espectrometria de absoro atmica, pois
sem a lmpada especiIica no se Iaz a determinao desejada. Alem disso, seu custo e relativamente
elevado e a vida util e limitada. Exigem um tempo de aquecimento e isso pode diIicultar a determi-
nao de diversos elementos em uma mesma amostra. Existem lmpadas multi-elementos tais como:
CaMg, CaMgAl, FeCu, que podem Iacilitar as analises de rotina, mas deve ser considerado
que quando uma dessas lmpadas e daniIicada, varios elementos deixam de ser determinados.
71
Alem das lmpadas de catodo oco, emprega-se em espectrometria de absoro atmica a
lmpada de deuterio, que e uma Ionte de radiao continua empregada para medir e corrigir a "ab-
soro de background". Ao ser usada, a lmpada deve ter seu Ieixe luminoso perIeitamente alinhado
em relao ao sistema detector.
6.2 Recipientes de amostra
Em diversos metodos oticos soluo da amostra devera estar contida em um recipiente. A
exceo tambem aqui e para os metodos de emisso. As celulas destinadas a conter a amostra, de-
vem ser transparentes a radiao na regio espectral de interesse. Na regio visivel so empregadas
celulas ou cubetas de vidro e na regio do ultravioleta usam-se cubetas de quartzo. Cubetas descar-
taveis de plastico podem ser Iabricadas para serem usadas tanto na regio do visivel como UV. Para
o inIravermelho a amostra e conIinada entre janelas de NaCl, ou Iorma pastilhas com um sal como
KBr.
Os intervalos de comprimento de onda em que os diIerentes materiais podem ser utilizados
so apresentados a seguir
Tipos de material Intervalo (nm)
Optical Glass 334 2500
Special optical Glass 320 2500
Pyrex 325 2500
UV Silica 220 2500
Far UV Quartz 170 2700
Near inIra red Quartz 220 3800
Far UV - IR Quartz (water Iree) 170 3500
Poliestireno 350 - 900
Polimetil metacrilato (PMMA) 280 - 800
72
6.3 Seletor de regio espectral ou de comprimento de onda
Idealmente nos metodos oticos dever-se ia selecionar uma radiao de um unico comprimen-
to de onda, ou radiao monocromtica. Na pratica isso e praticamente impossivel, mas consegue-
se selecionar bandas por vezes bastante estreitas. O parmetro que caracteriza uma banda e sua lar-
gura efetiva medida a meia altura da banda. Quanto mais estreita a largura eIetiva da banda melhor
e o equipamento.
A seleo dos comprimentos de onda de uma radiao policromtica, como a emitida por
uma lmpada de Iilamento de tungstnio, pode ser eIetuada por Iiltros ou monocromadores.
Filtros
Filtros so seletores que permitem isolar bandas de comprimentos de onda Iixos, ou seja, ca-
da Iiltro e empregado para selecionar uma banda do espectro eletromagnetico. Os dois tipos princi-
pais so:
Filtros de absoro: materiais coloridos como vidro ou gelatina so capazes de absorver cer-
tos comprimentos de onda e deixar passar outros. Valores tipicos para a largura de banda eIetiva dos
Iiltros de absoro se situam entre 30 e 250 nm. Quanto mais estreita a banda menor a Irao de
energia radiante que os Iiltros transmitem.
Filtros de interferncia: constituidos por material dieletrico transparente, CaF
2
ou MgF
2
, co-
locado entre duas peliculas metalicas semitransparentes e o conjunto colocado entre placas de vidro.
A seleo do comprimento de onda se da por interIerncia construtiva das ondas da radiao inci-
dente, em Iuno da reIlexo sucessiva do Ieixe de radiao entre as peliculas metalicas. Filtros de
interIerncia Iornecem bandas mais estreitas e transmitem mais energia que os Iiltros de absoro.
73
Monocromadores
Os monocromadores diIerem dos Iiltros, na medida em que permitem obter diIerentes com-
primentos de onda dentro de um intervalo relativamente amplo. Com monocromadores pode se eIe-
tuar o registro, ou a varredura, de um espectro.
Os componentes de um monocromador tipico so: fenda (slit) de entrada (A), por onde a ra-
diao policromatica e admitida no monocromador; lentes ou espelhos colimadores (B), para se ob-
ter Ieixe de radiao paralelo; elemento de disperso de comprimento de onda (C), em geral um
prisma ou uma grade de difrao; lente ou espelho (D) para Iocalizar a radiao dispersa sobre uma
fenda (slit) de saida (E), isolando a regio de comprimento de onda desejado.
Prisma
Quando uma radiao policromatica incide e atravessa um prisma, os diIerentes comprimen-
tos de onda que a compes soIrem reIrao a ngulos diIerentes, de modo que a luz branca pode ser
decomposta em cores. De modo geral, comprimentos de onda mais curtos apresentam maiores indi-
ces de reIrao, desviando-se mais da direo original, que os comprimentos de onda mais longos.
Cor Comprimento de onda Indice de reIrao
Azul 434 nm 1,528
Amarelo 550 nm 1,517
Vermelho 700 nm 1,510
74
Grades ou redes de difrao
Nas grades de diIrao, a radiao policromatica e separada em diIerentes comprimentos de
onda por um processo de interIerncia construtiva de onda. As grades de diIrao podem ser de
transmisso ou de reIlexo, sendo estas ultimas as mais comuns.
Os prismas so peas de custo elevado e devem ser constituidos por material de elevada pu-
reza, pois, como a luz tem que atravessa-lo, pode ocorrer bastante absoro de radiao. Grades so
tambem peas de alta tecnologia, mas como podem ser produzidas como replicas, seu custo cai e
elas substituiram os prismas em muitos dos instrumentos oticos.
Uma grade de reIlexo e construida eIetuando-se uma serie de sulcos paralelos separados por
uma distncia d numa superIicie reIletora. Para um dado ngulo de incidncia i da radiao sobre a
grade de reIlexo, radiaes de comprimento de onda sero obtidos por interIerncia construtiva a
um certo ngulo r de reIlexo.
i

i
r

d
i ngulo de incidncia do
raio de luz
r ngulo de reIlexo do
raio de luz
d distncia entre linhas
n ordem de reIlexo
comprimento de onda
n d (sen i sen r)
75
O intervalo de comprimentos de onda selecionados depende da capacidade de disperso da
grade e da distncia d. E necessario considerar que quanto menor d melhor e a separao mas maior
e a reduo do poder radiante da radiao.
Suponha-se uma grade construida eIetuando-se 2380 sulcos paralelos por centimetro. A dis-
tncia d entre os sulcos sera de 4,202 10
-4
cm ou 4202 nm. Para uma radiao policromatica inciden-
te a um ngulo i de 40
o
, qual sera o cumprimento de onda obtido na direo do ngulo de reIlexo r
de 30
o
?
n
600
n
) 5000 , 0 6428 , 0 .( 4202
n
) 30 sen 40 .(sen 4202
=

= nm
O numero n , ou ordem de reIlexo, assume valores inteiros de 1, 2, 3...Portanto na direo
de um ngulo de reIlexo de 30
o
seriam obtidos os comprimentos de onda de 600, 300, 200 nm e
assim por diante. Ao contrario do que possa parecer, essa superposio no apresenta problemas
praticos.
DiIerentemente dos prismas, a disperso promovida pelas grades de diIrao e linear, de mo-
do que a eIicincia de separao de comprimentos de onda pelas grades e praticamente independente
do comprimento de onda de interesse.
6.4 Detectores de radiao
Para se quantiIicar a energia radiante emitida ou absorvida pela materia e necessario trans-
Iorma-la em outra modalidade de energia e isso e o que ocorre nos detectores. Eles podem responder
a luz ou ao calor, estes ultimos sendo empregados na regio do inIravermelho. Os detectores que
respondem a luz so denominados detectores fotoeletricos e so usados na regio visivel, ultraviole-
ta e inIravermelho proximo.
700 600 500 400 nm
Grade
Prisma
76
O olho humano e um detector de energia luminosa, mas que e sensivel apenas aos compri-
mentos de onda da regio visivel do espectro.
As caracteristicas desejaveis para um bom detector so: alta sensibilidade; alta relao sinal-
ruido; resposta constante dentro de Iaixa ampla de comprimento de onda; sinal eletrico proporcional
ao poder radiante da radiao incidente. Os principais detectores Iotoeletricos so discutidos a se-
guir.
Clula fotovoltaica
A radiao incidente desloca eletrons de um cristal semicondutor, como sulIetos de cadmio e
chumbo, ou selnio, criando lacunas que agem como cargas positivas. Prepara-se uma interIace en-
tre o semicondutor e um metal, para onde se movem os eletrons em direo oposta as lacunas, ge-
rando uma corrente eletrica. Esta corrente pode ser detectada sem ampliIicao, sendo a sensibilida-
de da Iotocelula semelhante a do olho humano.
Fototubos
Uma superIicie que atua como um catodo, e recoberta por um material que perde Iacilmente
eletrons sob inIluncia da energia radiante incidente. Um simples Iio metalico atua como coletor de
eletrons, o nodo, pois e mantido a um potencial mais positivo que o catodo. Sob um potencial cons-
tante, gera-se uma corrente eletrica proporcional ao poder radiante do Ieixe de radiao incidente. A
sensibilidade do Iototubo depende do material emissor de eletrons presente no catodo, existindo
Iototubos diIerentes para as regies especiIicas do espectro.
Fotomultiplicadoras
celula Iotovoltaica
Foto tubo
77
O detector Iotomultiplicador ou Iotomultiplicadora e sensivel a radiaes entre 190 e 800
nm. A radiao penetra no tubo Iotomultiplicador atraves de uma janela de quartzo e dirige-se para o
Iotocatodo, uma placa de material Iotossensivel que emite eletrons sempre que um Ieixe luminoso
incide sobre ela. Quanto maior a intensidade da radiao incidente, maior sera a quantidade de ele-
trons gerada. Adjacente ao Iotocatodo, existe um eletrodo mantido a um potencial eletrico mais
positivo, chamado dinodo. Os eletrons gerados no Iotocatodo dirigem-se ao dinodo, onde a coliso
de cada um liberta outros eletrons secundarios.
Como existem diversos dinodos arranjados convenientemente, mantidos cada um a um po-
tencial mais positivo que o outro, em cada estagio ocorrera ampliIicao de corrente, e a partir dos
eletrons inicialmente emitidos no Iotocatodo sero originados um numero muito maior de eletrons.
Um arranjo de 9 a 13 dinodos permite uma ampliIicao da corrente de 10
8
a 10
10
vezes. O
1
2
4
5
3
6
7
8
9
Catodo
Iotoemissor
Dinodo
(1-9)
anodo
Radiao
incidente
78
potencial aplicado a tubo Iotomultiplicador e tambem conhecido como ganho, e pode ser ajustado
automaticamente pelo instrumento.
A corrente produzida no tubo Iotomultiplicador e convertida num sinal de voltagem, em um
ampliIicador de alta impedncia.
Arranjo linear de diodos
Uma juno p-n, consiste basicamente na zona de transio, entre uma regio de material
semicondutor cuja condutividade eletrica e dominada por portadores de carga tipo-n (eletrons) e
uma regio cuja condutividade e dominada por portadores de carga tipo-p (buracos). A largura e a
simetria dessa regio, dependem dos processos de Iabricao e dos materiais envolvidos.
Um Iotodiodo e um conjunto de dois eletrodos, com juno sensivel a radiao em um mate-
rial semicondutor, destinado a transIormar luz em energia eletrica. Como ocorre Ireqentemente na
eletrnica de estado solido tem-se uma juno p/n. Para ser uma boa Ionte de corrente este aparato
deve Iuncionar no modo voltagem ou corrente reversa.
Os Iotodiodos so Ieitos com waIers de silicio cristalino similar aos dos circuitos integrados,
mas eles exigem um nivel muito maior de pureza para o silicio. Os Iotodiodos operam na Iaixa visi-
vel do espectro, podendo ser ainda melhorados para operar nas regies ultravioleta e inIravermelho
do espectro. Os Iotodiodos so construidos em silicio, indio, galio, arsenide, germnio, nitreto de
galio e carbeto de silicio.
Uma serie de Iotodiodos que atuam como sensores esto arranjados de tal modo, que todos
os elementos do Ieixe de radiao dispersos por uma grade podem ser medidos simultaneamente.
6.5 Sistema de leitura
Este componente capta o sinal ampliIicado do detector e o apresenta numa Iorma convenien-
te ao operador. O sistema mais simples e um medidor analogico, com resoluo de 0,1T. Medido-
res digitais so mais versateis e podem operar em conjunto com microprocessador, armazenando
inIormaes. Os registradores graIicos, por sua vez, permitem o registro continuo do sinal em Iun-
o do tempo ou do comprimento de onda.
79
7 ESPECTROSCOPIA DE ABSORO MOLECULAR
A espectroscopia molecular esta relacionada a processos de absoro e emisso de energia
por moleculas, termo esse que engloba especies quimicas poliatmicas como ions inorgnicos e
complexos. A espectroscopia de absoro molecular trata em geral da absoro de energia radiante
na regio de microondas, inIravermelho visivel e ultravioleta do espectro.
Na regio de microondas, a energia da radiao e to baixa que so se pode analisar as transi-
es entre niveis rotacionais de energia. Num nivel mais elevado de energia, a espectroscopia de
inIravermelho e utilizada, sobretudo com Iins qualitativos e envolve alteraes nos estados de ener-
gia vibracional das moleculas.
O espectro de absoro pelo composto dimetlsulIoxido, como e usual para a regio do inIra-
vermelho, esta apresentado em termos de numero de onda, que e o reciproco do comprimento de
onda ( numero de onda 1/ )
Nota-se que o composto citado transmite 80 e assim absorve 20 da energia radiante inci-
dente de 1000 cm
-1
, ou seja, 10 m, ou 10
-5
m de comprimento de onda. A energia correspondente e:
E h c/
h constante de Planck 6,626 x 10
-34
J s
80
E (6,626 x 10
-34
J.s .3 x 10
8
m/s)/ 10
-5
m E 1,99 x 10
-20
J
Por mol de moleculas de dimetilsulIoxido tem-se:
E 1,99 x 10
-20
6,02 10
23
J E 11,97 kJ mol
-1

Como mencionado no item 5.9 energia da ordem de 15 kJ mol
-1
esto relacionadas a transi-
es de energia vibracional. Da analise dos espectros de absoro de energia na regio do inIraver-
melho se ontem inIormaes sobre as estrutura das moleculas. Cada molecula pode ter vibrar de
diIerentes modos como nos exemplos:
A espectroscopia UV-visivel trata essencialmente de transies entre estados eletrnicos de
energia. As duas regies do espectro, ultravioleta e visivel podem ser consideradas em conjunto,
pois as interaes, inIormaes e equipamentos so bastante similares. O uso mais comum da espec-
troscopia UV-visivel e na analise quantitativa.
Compostos orgnicos saturados no absorvem na regio visivel ou ultravioleta e absoro de
energia radiante nessas regies e relacionada a uma deIicincia de eletrons na molecula.
Os complexos inorgnicos tm seus espectros de absoro interpretados pelas teorias de Ior-
mao de complexos entre metais e ligantes contendo pares de eletrons no compartilhados. Com-
plexos de transIerncia de carga tambem exibem absoro na regio UV-visivel.
Estiramento
simetrico
Estiramento
assimetrico
Tesoura
Inicio
81
7.1 Lei de Beer
A energia radiante pode ser absorvida por especies moleculares em soluo. Se a soluo Ior
colorida, isso indica absoro de radiao na regio visivel do espectro eletromagnetico.
A absoro de energia radiante e quantiIicada pelo decrescimo de seu poder radiante, P
o
, que
signiIica a quantidade de energia que incide sobre uma superficie na unidade de tempo.
O tratamento matematico do processo de absoro de energia por especies quimicas e Ieito
por meio da deduo da Lei de Beer.
Suponha-se uma celula de Iaces planas e paralelas, separadas
pela distncia b, contendo soluo de concentrao c de uma especie
absorvente. Radiao monocromatica de poder radiante P
o
, incidente
numa das Iaces da celula, apresenta um valor P apos atravessar o per-
curso b no interior da soluo. Como ocorreu absoro de energia
radiante, tem-se P P
o
.
Considerando-se uma Irao dx muito pequena do percurso b,
tem- se que a variao relativa de poder radiante P
x
neste trecho e diretamente proporcional a con-
centrao c e a dx:
k.c.dx
Px
dPx
=
O sinal negativo indica decrescimo do poder radiante e k e uma constante de proporcionali-
dade. Integrando-se Px entre os limites P e Po e dx entre os limites 0 e b tem- se:
-
} }
=
b
0
P
Po
dx . c . k
Px
dPx
-(ln P - ln Po) k c b
c b a
P
P
ou b c k
P
P
o o
. . log . . ln = =
O parmetro a e uma constante caracteristica da especie absorvente denominada absortivida-
de, que engloba o Iator de transIormao de logaritmos neperianos para logaritmos decimais. Quan-
do a concentrao c e expressa em mol L
-1
e o percurso b em centimetros, a constante a recebe o
Po
P
b
82
nome de absortividade molar, representada ento por c cc c. As expresses acima so a representao
matematica da chamada lei de Beer.
7.2 Absorbncia e Transmitncia
DeIine-se Transmitncia, T ou T, como a relao entre P e P
o
:
.100
o
P
P
T ou
o
P
P
T = =
Por sua vez, Absorbncia, A, e deIinida como:
P
P
log
T
1
log A
o
= =
Deste modo, a lei de Beer pode ser expressa como: A a.b.c
Nos antigos espectroIotmetros analogicos, preIeria-se registrar a leitura T em uma escala
linear, para depois converter a medida em absorbncia por calculo. Nos equipamentos digitais pode-
se Iacilmente ler diretamente valores de absorbncia. Nota-se que embora a absorbncia seja o pa-
rmetro mais conveniente nas aplicaes analiticas pela sua relao linear com a concentrao, os
equipamentos medem eIetivamente a transmitncia.
A expresso graIica da lei de Beer e a curva de calibrao de um metodo espectroIotometri-
co. Determinando-se a equao de regresso da absorbncia em Iuno da concentrao c, a inclina-
o da reta, ou seu coeIiciente angular, e a estimativa da absortividade da especie absorvente.
7.3 Desvios da lei de Beer
Se o graIico de absorbncia versus concentrao no e uma reta tem-se desvio na Lei de Be-
er. Acima de uma certa concentrao, a relao entre absorbncia e concentrao deixa de ser linear
e esse ponto deIine o limite superior da Iaixa otima de trabalho.
Os Iatores que causam desvios da lei de Beer so: interao dos centros absorventes da mo-
lecula entre si ou com outras especies; variao do indice de reIrao com variao da concentrao;
alterao da posio de equilibrio quimico entre especies absorventes por diluio e absoro de
radiao policromatica, ou seja, radiao com largura eIetiva de banda relativamente larga. Medidas
de absorbncia so de preIerncia eIetuadas no comprimento de onda de maxima absoro de ener-
gia, para minimizar o erro decorrente de impreciso no comprimento de onda.
83
7.4 Instrumentos
Os instrumentos que medem a absoro de energia radiante na regio visivel do espectro a-
presentam os componentes basicos anteriormente citados, que podem ser visualizados no esquema:
Fonte: produz radiao na
regio de interesse do espectro
eletromagnetico. Deve ser esta-
vel e reprodutivel. Na maioria
das vezes a Ionte emite muitos
cumprimentos de onda
Lentes, fendas e colimadores:
estreitam e alinham os Ieixes de
radiao.
Monocromador (seletor de
comprimento de onda): dispersa
as radiaes incidentes em um
continuo de comprimentos de
onda que so escaneados ou
individualmente selecionados
Amostra: absorve Irao do
comprimento de onda inci-
dente
0,580
Sistema de leitura:
converte o sinal em
dados de leitura
Detector: converte a radia-
o transmitida em um
sinal eletrico ampliIicado
84
Observe-se que a seleo do comprimento de onda e eIetuada antes da radiao atravessar a
amostra.
A medida de absoro e eIetuada a partir de duas leituras de energia transmitida P
o
e P. No
espectroIotmetro de Ieixe simples inicialmente a celula de leitura contem uma soluo de reIern-
cia, o solvente ou a prova em branco, para se medir Po. Nessa condio, ajusta-se no aparelho o
valor de 100 T ou 0,000 A, pois toda e qualquer absoro de energia que ocorra na ausncia da
especie quimica que esta sendo determinada sera desconsiderada. Feita a calibrao do equipamen-
to, coloca-se a soluo de amostra na celula de leitura para ento quantiIicarmos P. O sistema de
leitura apresenta ento automaticamente o valor de 100P/Po ou de log Po/P.
O esquema apresentado a seguir de um espectroIotmetro de Ieixe simples e baseado em um
instrumento muito popular, o Spectronic 20 da Baush-Lomb, que atualmente Ioi dotado de sistema
de leitura digital.
Nos espectroIotmetros de Ieixe duplo tipicos, a soluo de amostra e soluo de reIerncia
so lidas simultaneamente. O Ieixe de radiao monocromatica passa por um disco rotatorio, que
apresenta setores transparentes e reIletores alternados, Iaz com que a radiao seja alternadamente
enviada para a celula de reIerncia e para a celula contendo a amostra.
Equipamentos de Ieixe duplo apresentam a vantagem de no serem aIetados por Ilutuaes
no poder radiante da Ionte emissora ou na resposta do detector. So tambem especialmente adequa-
dos para o registro de espectros.
Certos espectroIotmetros podem eIetuar uma varredura inicial para registrar as absorbncias
85
de uma soluo de reIerncia para posteriormente subtrai-las das leituras eIetuadas na soluo de
amostra para assim se obter um espectro.
detector
Fonte de
radiao
Amostra
ReIerncia
Processamento do
sinal
Sinal do analito
A
1
-A
2
A
1
A
2
Esquema de um espectroIotmetro duplo Ieixe
86
8 FOTOMETRIA DE EMISSO DE CHAMA E ESPECTROMETRIA DE ABSORO
ATMICA
DiIerentes metodos instrumentais envolvem medidas de ab-
soro ou emisso de energia radiante por atomos ou ions atmicos.
Estas especies podem ser obtidas por processos eletricos, como ao
passar corrente eletrica de alta voltagem por amostra de substncia
gasosa contida em um tubo de vidro. Para amostras solidas, e possi-
vel, por exemplo, promover descargas eletricas entre eletrodos de
graIite nos quais se depositou o material a ser analisado.
Por outro lado, a produo de atomos de um elemento cuja
concentrao se quer determinar tambem pode ser eIetuada em uma
chama, como ocorre na espectrometria de absoro atmica e na Iotometria de emisso de chama,
metodos de utilizao rotineira nas analises de materiais de interesse agronmico.
A Iotometria de emisso de chama e mais antiga e quando a espectrometria de absoro at-
mica se diIundiu ela Iicou restrita a determinao de elementos mais Iacilmente excitaveis como Na,
K e Li, em analises clinicas e agronmicas. Ao Iinal da decada de 60 o uso da Iotometria de emisso
havia decrescido consideravelmente, parecendo que a espectrometria de absoro atmica ocuparia
amplos espaos. Contudo, a Iotometria de emisso de chama sempre Ioi de importncia Iundamental
nas analises agronmicas, pela sua convenincia na determinao rotineira do potassio. Com o de-
senvolvimento do plasma de argnio como Ionte de excitao, voltou-se empregar em larga escala a
medida de emisso de energia de atomos excitados, como tecnica analitica.
A Iotometria de emisso de chama e a espectrometria de absoro atmica podem ser rela-
cionadas entre si, porque ambas as tecnicas utilizam uma chama na etapa de atomizao. Assim, se
obtem atomos no estado Iundamental pelo Iornecimento de energia termica (Q). A diIerena mar-
cante e que na espectrometria de absoro atmica mede-se a Irao da energia radiante, Iornecida
por uma Ionte externa (hv), que e absorvida para excitao dos atomos produzidos.
87
Fotmetro de emisso em chama
Espectrmetro de absoro atmica
88
Na Iotometria de emisso, o sinal analitico decorre da energia liberada por atomos termica-
mente excitados ao retornarem ao estado Iundamental (-hv). Esquematicamente, tem-se para a Ioto-
metria de emisso:
Atomizao Excitao
M
n+
M
o
M`
Q hv
e na espectrometria de absoro atmica
Atomizao Excitao Emisso
M
n+
M
o
M` M
o
Q Q -hv
amplificador leitura
Lmpada de
catodo oco
Amostra
atomizada
detector
lentes
monocromador
Seletor de
comprimento de onda
Fonte de
excitao
Atomos
excitados
lente
detector
EMISSO A1OMICA
ABSORO A1OMICA
leitura
89
No presente texto tratou-se paralelamente das tecnicas de emisso e de absoro em chama.
Quando se consideram os aspectos instrumentais, a nIase e para os espectrmetros de absoro
atmica, pois o equipamento de Iotometria emisso de chama aqui considerado so aqueles mais
simples, que dispe de Iiltros apenas para a determinao de Na, K ou Li.
8.1 Atomizao em chama
Tanto na espectrometria de absoro atmica como na Iotometria de emisso de chama, a e-
ATOMOS
EXCITADOS M`
IONS M
+
AEROSOL
MX(s), gas
ATOMOS
NEUTROS M
AEROSOL
MX(l), gas
MOLECULAS
MX
ATOMOS
EXCITADOS M
`
MOLECULAS
EXCITADAS MX`
COMPOSTOS QUE
NO SE VAPORIZAM
COMPOSTOS QUE
NO SE FUNDEM
FORMAO DE
COMPOSTOS
QUE SE
FUNDEM OU
DISSOCIAM
COM
DIFICULDADE
DEVIDO A
REAES COM
ATOMOS OU
RADICAIS DA
CHAMA
EMISSO ATMICA
AEROSOL
M
+
(aq)X
-
(aq),gas
SOLUO
M
+
(aq), X
-
(aq)
COMBUSTIVEL
OXIDANTE
EVAPORAO DO SOLVENTE
FUSO
VAPORIZAO
ATOMIZAO
ABSORO ATMICA
90
tapa decisiva para o xito e a produo controlada de atomos do elemento a ser determinado, a ato-
mizao. ConIorme ja citado a chama no e o unico meio para obt-los e nela a maioria dos atomos
obtidos permanece no estado Iundamental, pois a temperatura atingida e relativamente baixa. Deste
modo, apenas linhas espectrais de baixo potencial de excitao, menores que 9.10
-19
J ou 5,5 eV,
sero emitidas.
O esquema apresentado mostra as etapas envolvidas na produo de atomos tambem indica
os processos que contribuem para diIiculta-la. Ao Iinal, os atomos produzidos estaro aptos para se
excitarem com energia termica, emitir energia radiante e Iornecer um sinal analitico na Iotometria de
emisso. Alternativamente, podem ser excitados por em Ieixe de radiao luminosa, absorvendo
nesse processo parte da energia radiante, Iornecendo uma medida de absorbncia na espectrometria
de absoro atmica.
8.1.1 Aspirao e nebulizao da soluo de amostra
A situao usual nos metodos de chama e se dispor de uma soluo aquosa de amostra, que
sera aspirada ate a chama, atraves de um conjunto que reune sistema de aspirao, de nebulizao e
um queimador.
Normalmente a aspirao se processa atraves de um sistema pneumatico, onde um Iluxo de
gas, escapando a alta velocidade por um oriIicio, promove uma queda de presso e, conseqente-
mente, aspirao da soluo de amostra por meio de um capilar. A saida do conduto de amostra e
posicionada de Iorma concntrica a saida do gas. A velocidade de aspirao da amostra se situa entre
2 a 8 mL min
-1
e como aIeta a magnitude do sinal analitico e um
parmetro a ser otimizado.
O sistema de nebulizao e queima, originalmente emprega-
do, sobretudo nos Iotmetros de emisso de chama, era do tipo
"queima total", assim denominado porque todo volume de soluo
aspirado chegava ate a chama simultaneamente com os gases
combustivel e oxidante.
Apresentava vantagens como: construo simples, baixo
custo, maior segurana por no haver risco de flash-back da chama e possibilidade de utilizao de
diIerentes misturas gasosas. Permitia tambem, concentrar a chama em uma pequena regio, o que
era vantajoso na Iotometria de emisso, por Iocalizar uma quantidade maxima de luz no detector.
Queima total
91
Por outro lado, eram extremamente barulhentos devido a turbulncia da chama, no permitiam a
otimizao independente da nebulizao e das condies da chama, nem o descarte das gotas de
maior tamanho, que acabavam por ser admitidas na chama.
O sistema queimador tipico dos espectrmetros de absoro atmica, tambem empregado
nos Iotmetros de emisso, e o denominado "pre-mix", Neste caso, antes da "queima", se eIetua a
nebulizao em uma cmara, onde so admitidos o combustivel e o oxidante. A chama e alimentada
por uma mistura previa de gases, o que a torna bastante estavel.
E importante que Iluxo dos gases seja mantido a velocidade superior a de queima, pois, caso
contrario, corre-se o risco de ocorrer retrocesso ou flash-back da chama, quando a combusto se da
na cmara de nebulizao. Nos instrumentos modernos existem dispositivos de segurana para pre-
venir esse tipo de acidente.
Apos a soluo ter sido aspirada no sistema "pre-mix", o Iilamento liquido e Iragmentado em
gotas de tamanhos variaveis, visando obter um aerossol com goticulas de dimetro entre 5 a 7 m,
para maxima eIicincia na evaporao do solvente e atomizao do componente a ser determinado.
Logo apos ser aspirada, a soluo pode ser projetada contra uma perola de vidro, colocada a uma
distncia regulavel, para Iragmentao das gotas. Com a mesma Iinalidade, so colocados anteparos
no percurso ate o queimador. Gotas de maior dimetro so descartadas atraves do dreno da cmara
de nebulizao e apenas 10 a 20 do volume aspirado contribui para a Iormao do aerossol.
92
A saida da cmara de mistura se acopla o queimador. No caso dos espec-
trmetros de absoro atmica, ele consiste em uma plataIorma retangular, com
uma Ienda central de poucos milimetros de largura e cerca de 10 cm de compri-
mento (chama de ar/acetileno) onde se localiza uma chama laminar. Obtem-se as-
sim, um maximo percurso atraves da chama, tornando eIiciente a absoro da e-
nergia radiante do Ieixe que a atravessa. A Ienda do queimador de oxido nitro-
so/acetileno e mais curta, para compensar a maior velocidade de queima dessa mis-
tura.
Para os Iotmetros de chama, o queimador mais adequado apresenta Iorma
de torre cilindrica, com oriIicios arranjados em circunIerncia, pois aqui o proposi-
to e concentrar a luz emitida pelos elementos excitados e Iocaliza-la eIicientemente
no detector. Menos conveniente seria a chama do tipo laminar, pois a maior area permite maior res-
Iriamento da chama, o que aIeta exponencialmente o numero de atomos excitados, conIorme indica-
do pela relao de Boltzmann.
8.1.2 Otimizao do sistema de nebulizao e queima
As regulagens que podem ser eIetuadas pelo operador no sistema nebulizador-queimador so
mais complexas no espectrmetro de absoro atmica do que nos Iotmetros de chama comuns,
que no permitem maiores ajustes, a no ser a velocidade de aspirao da amostra. Os parmetros do
sistema nebulizador-queimador so regulados para obter maximizao do sinal analitico e so os
seguintes:
velocidade de aspirao da amostra: regulada pelo movimento de uma rosca na parte ex-
terna do sistema nebulizador
posio da prola de impacto: ajusta-se a distncia entre a perola e a entrada de soluo
dentro da cmara de nebulizao,
ajuste horizontal e vertical do queimador: movimenta-se a cabea do queimador, para que
o Ieixe de radiao da lmpada de catodo oco atravesse o maximo comprimento da chama e na altu-
ra conveniente para interagir o mais eIicientemente possivel com os atomos do elemento a ser de-
terminado.
rotao do queimador: esse ajuste pode ser eIetuado com o mesmo objetivo anterior, isto e,
coincidir o Ieixe da lmpada com a chama. Entretanto, para evitar diluies de solues de amostras
93
concentradas, o queimador pode ser girado para diminuir a populao de atomos que entra em
contato com a radiao.
8.1.3 A chama
Uma chama e o resultado da reao exotermica, denominada combusto, entre um combusti-
vel e um agente oxidante, ou comburente, que no caso dos metodos analiticos em questo so gases.
Os gases produzidos nessa reao tornam-se luminosos pela liberao de energia quimica.
A energia liberada na reao de combusto eleva a velocidade de moleculas presentes no
meio. As colises inelasticas dessas moleculas com os atomos introduzidos na chama atraves de um
aerossol, promovem transIerncia de energia e excitao dos atomos.
Os gases mais comumente empregados como combustiveis so: acetileno, propano, butano,
gas de cozinha, hidrognio, enquanto que como oxidantes tem-se: ar, oxignio, oxido nitroso. As
reaes de combusto mais empregadas com Iinalidades analiticas, so as indicadas a seguir:
ar/butano : C
4
H
8
6,5 O
2
26 N
2
4 CO
2
5 H
2
O 26 N
2
ar/acetileno: C
2
H
2
O
2
4 N
2
2 CO H
2
4 N
2
oxido nitroso/acetileno: C
2
H
2
2 N
2
O 2 CO H
2
2 N
2
As principais Iunes da chama so: vaporizao do elemento de interesse, passando-o da Ia-
se solida para a Iase gasosa; atomizao, ou seja converso de moleculas em atomos e, na Iotometria
94
de chama, excitao de atomos do estado Iundamental para estados de maior energia. Para cumprir
essas Iunes a chama deve apresentar algumas caracteristicas como estabilidade, condio que de-
pende da perIeita regulagem da presso dos gases, e temperatura apropriada, deIinida principalmen-
te pela escolha dos gases combustivel e oxidante. Em medidas de emisso, o uso da chama como
meio de atomizao e restrito a comprimentos de onda superiores a 210 nm, pois o espectro de e-
misso da propria chama no deve interIerir na medida da emisso do elemento analisado.
Com relao ao ambiente quimico que prevalece na chama ela se classiIica em:
Estequiometrica: aquela que e quimicamente balanceada, ou seja, os gases so supridos na
proporo deIinida pela estequiometria da reao.
Oxidante: quando a proporo de oxidante e superior a de combustivel. E a chama de tempe-
ratura mais elevada e tem cor amarela.
Redutora: E a mais rica em combustivel, e de temperatura mais baixa. Apresenta cor azul cla-
ro
A eIicincia na atomizao no depende apenas da temperatura da chama, pois o ambiente
quimico exerce inIluncia decisiva. Uma chama ar/acetileno redutora e cerca de 150K mais Iria que
a chama estequiometrica, mas possibilita menor probabilidade de Iormao de monoxidos estaveis
que prejudicam a Iormao de atomos. Varias combinaes de gases combustiveis e oxidantes Ioram
estudadas e as mais comumente empregadas so as seguintes:
Ar/acetileno: ainda a mais utilizada na espectrometria de absoro atmica, apresenta uma
velocidade de queima relativamente baixa (160 cm/s), que propicia um bom tempo de residncia dos
atomos produzidos. Permite atingir em media temperaturas de 2300
o
C, considerada baixa para per-
mitir a emisso de muitos elementos e para impedir a Iormao de compostos reIratarios na chama.
Oxido nitroso/acetileno: apresenta temperatura relativamente elevada (2900 a 3000
o
C) o que
Iavorece a atomizao de compostos altamente reIratarios como os de aluminio, vanadio, molibd-
nio e titnio. A velocidade de queima e elevada, cerca de 460 cm/s, o que exige para esta chama
queimadores com Ienda menor que daqueles de ar/acetileno. Como inconveniente Iavorece a ioniza-
o de muitos elementos e apresenta auto-emisso relativamente Iorte.
Ar/(propanobutano): e a chama empregada nos Iotmetros de chama mais comuns, que se
restringem a determinao de sodio, potassio e de litio. O ar normalmente e Iornecido por um com-
95
pressor de diaIragma, para no se empregar oleo e evitar contaminaes, e o combustivel e o gas de
cozinha comum. Apresenta temperatura baixa (1700 a 1900
o
C) suIiciente apenas para excitar pou-
cos elementos. A velocidade de queima e reduzida, permitindo longo tempo de residncia.
Os gases empregados nas tecnicas analiticas de chama devem apresentar elevado grau de pu-
reza. Ao contrario da Iotometria de chama, na espectrometria de absoro atmica devero ser em-
pregados os gases manuIaturados especialmente para essa Iinalidade, apesar do elevado preo com
que so comercializados.
O acetileno e Iornecido dissolvido em acetona, embebido em material poroso e acondiciona-
do em cilindros metalicos, os quais devero permanecer imoveis por 24 h apos serem movimenta-
dos. No se deve utilizar o gas a presses inIeriores a 70 psi (5 bar), para prevenir o arraste de ace-
tona para o espectrmetro de absoro atmica. A linha de gases no pode ser constituida por tubu-
lao de cobre, nem ser submetida a presses superiores a 15 psi (1 bar), pois se corre o risco de
decomposio espontnea ou exploso do acetileno.
Quando se utiliza a mistura oxido nitroso/acetileno ocorrem problemas de congelamento na
saida do oxido nitroso dos cilindros, exigindo equipamento especial que promove aquecimento.
Comea-se por operar o aparelho com chama ar/acetileno, trocando-se em seguida o oxidante, ma-
nual ou automaticamente. ConIorme ja citado, deve-se utilizar ainda queimador especiIico para essa
mistura.
A otimizao da atomizao obviamente envolve os Iatores ja discutidos, como velocidade
de aspirao de amostra e ajustes de posicionamento do queimador. Com relao a chama especiIi-
camente, deve ser mencionada a importncia do ajuste da velocidade de Iluxo dos gases, a qual de-
termina a natureza quimica, ou estequiometria, da chama.
Enquanto que para alguns elementos, como o cobre, o sinal praticamente independe da este-
quiometria da chama, outros como o cadmio, que tem a absorbncia altamente dependente do Iluxo
de acetileno, que deve ser ajustado em Iuno da maxima sensibilidade obtida na leitura.
8.2 Seleo de comprimento de onda e leitura do sinal
Na Iotometria de emisso de chama, a Iuno do sistema monocromador e selecionar uma
determinada linha do espectro de emisso do elemento que esta sendo analisado. Normalmente se
empregam Iiltros de interIerncia, que so eIicientes na seleo de linhas de espectros relativamente
simples, como os dos metais alcalinos.
96
Na espectrometria de absoro atmica o sistema monocromador tem por Iuno selecionar a
linha de ressonancia das demais linhas emitidas pela lmpada de catodo oco e pelo gas inerte. Linha
de ressonncia e corresponde a transio entre o estado Iundamental e o estado excitado de mais
baixa energia. Certos elementos, como o cobre, apresentam espectro de absoro simples e a seleo
no apresenta problemas. Para outros, o isolamento da linha de interesse e diIicil, como e o caso da
linha a 232 nm do niquel.
Nas aplicaes mais comuns e suIiciente que o monocromador possa separar regies espec-
trais de ate 0,2 nm de largura ou, em outras palavras, que apresente poder de resoluo de pelo me-
nos 0,2 nm.
Um sistema monocromador comum nos espectrmetros de absoro atmica e o que utiliza a
conIigurao de CZERNY-TURNER. Nele, o Ieixe de radiao proveniente da lmpada de catodo
oco atravessa a chama, penetra no sistema monocromador atraves de uma Ienda, conhecida por slit
de entrada, e atinge um espelho esIerico que o direciona sobre uma grade de diIrao. Dependendo
do ngulo de rotao da grade sera selecionada radiao de um determinado comprimento de onda,
que sera direcionada a uma outra Ienda, o slit de saida, atraves de um segundo espelho esIerico. O
controle de abertura do slit permite selecionar, por exemplo, trechos de 0,2, 0,5, 1,0 ou 2,0 nanme-
tros do espectro, conIorme seja necessario. Os slit de entrada e saida devem ter a mesma abertura.
A escolha da largura de banda espectral, ou slit, depende de uma soluo de compromisso.
Uma largura de banda estreita seleciona mais acuradamente a linha de emisso, mas a quantidade de
energia que chega ate o detector sera relativamente baixa e as variaes de sinal, ou ruido, que nor-
malmente ocorrem, tornam-se proporcionalmente maiores. Alem disso, sera necessario maior ampli-
Iicao do sinal e a contribuio da parte eletrnica do equipamento para o ruido sera aumentada.
Por outro lado, selecionando-se uma largura de banda maior, transmite-se uma alta intensidade de
radiao, tem-se boa relao sinal/ruido, mas a seleo da linha de ressonncia sera ineIiciente,
comprometendo-se a linearidade da curva de calibrao.
O sistema de leitura mede a intensidade de radiao da lmpada de catodo oco, de compri-
mento de onda selecionado no sistema monocromador, quantiIicando a corrente eletrica gerada no
tubo Iotomultiplicador. Na ausncia de atomos do elemento analisado tem-se na chama o sinal de
reIerncia, de intensidade P
o
. A aspirao e nebulizao da soluo de amostra, seguida da atomiza-
o, resultaro em uma populao de atomos proporcional a concentrao do elemento na amostra,
posicionada no percurso do Ieixe de radiao emitida pela lmpada de catodo oco. Os atomos absor-
97
vem parte da radiao emitida pela lmpada e nessa condio o sinal detectado no sistema de leitura
tera intensidade reduzida de P
o
para P.
O sistema de deteco poderia registrar outras radiaes alem daquela proveniente da lmpa-
da de catodo oco, resultando em erro na determinao analitica. Esse problema e contornado codiIi-
cando a emisso da lmpada por modulao, que consiste basicamente na variao da intensidade de
radiao numa Ireqncia constante, por meios mecnicos ou eletrnicos. No primeiro caso, um
disco segmentado rotatorio interrompe periodicamente o Ieixe de radiao, enquanto que na segunda
alternativa a lmpada e ligada e desligada rapidamente numa Ireqncia constante. Deste modo,
isola-se a emisso intermitente da lmpada de catodo oco da emisso continua originada da chama e
o sistema de leitura no identiIicara como sinais analiticamente validos a radiao emitida por espe-
cies produzidas pela chama, ou por demais atomos e especies presentes.
Na Iotometria de emisso de chama, no existe possibilidade de discriminar sinais por modu-
lao, pois tanto a emisso do elemento de interesse como a radiao de Iundo provem da chama, o
que e uma seria limitao para essa tecnica analitica.
Nos equipamentos modernos, o sinal de absoro atmica corresponde a integrao de sinais
durante um periodo determinado de tempo. A preciso do resultado e inversamente proporcional a
raiz quadrada do tempo de integrao.
8.3 Interferncias
A exatido dos resultados em Iotometria de emisso e espectrometria de absoro atmica,
como ocorre nos metodos no-estequiometricos de maneira geral, depende Iundamentalmente da
calibrao. O xito do procedimento requer que o elemento de interesse se atomize do modo mais
similar possivel, nas solues de amostra e nas solues padres.
Analisando-se as etapas que se sucedem, desde a aspirao da soluo de amostra ate a mani-
Iestao do sinal analitico, nota-se que diIerentes processos podem prejudicar a transIormao dos
ions do elemento de interesse em atomos, bem como a interao destes com a radiao luminosa.
8.3.1 Interferncias espectrais
Ao se medir a radiao emitida pelo elemento que estas sendo analisado, pode ocorrer que
outra radiao de mesmo comprimento de onda coincida ou se sobreponha, constituindo uma inter-
Ierncia espectral. Esse tipo de interIerncia e bastante prejudicial as determinaes por Iotometria
98
de emisso de chama.
A interIerncia espectral mais drastica e quando uma linha de emisso coincide com a linha
de emisso do elemento determinado, sendo ambas detectadas conjuntamente. E o caso do aluminio
e vanadio a 308,2 e do antimnio e niquel a 231,2 nm. Para contornar o problema, deve-se selecio-
nar outras linhas de emisso no coincidentes, ou dispor de sistemas monocromadores de maior eIi-
cincia.
Uma ocorrncia mais comum e a coincidncia de bandas do espectro de emisso de molecu-
las ou Iragmentos, com as linhas de emisso de espectros atmicos. Assim, a banda de calcio, de 543
a 589,6 nm, aIeta as emisses do sodio a 589,0 nm, bem como a de bario a 553,6 nm.
A emisso do atomo do analito pode ser absorvida por outros atomos no estado Iundamental,
presentes em grande numero na chama, antes de ser detectada, resultando no Ienmeno denominado
de auto-absoro. Este processo diminui a intensidade do sinal quando se aumenta a concentrao
do elemento emissor na soluo de amostra, evidenciando uma curvatura na curva de calibrao.
DiIerentes autores chegam a aIirmar que espectrometria de absoro atmica praticamente
no ocorrem interIerncias espectrais, pelo menos em extenso similar a descrita para emisso, pois
seria improvavel a sobreposio de linhas de absoro. Tambem, a codiIicao da radiao da lm-
pada de catodo oco, diIiculta o registro de radiaes interIerentes pelo sistema de leitura.
A medida de absoro atmica pode, contudo, ser aIetada pela absoro de "background".
Neste caso, a medida de absoro por atomos da especie de interesse, que ocorre em uma Iaixa mui-
to estreita de comprimento de onda, e aIetada por absoro continua, ou de Iundo. Essa absoro de
background, ou no especiIica, se deve, sobretudo ao espalhamento de radiao e a absoro mole-
cular.
Quando a soluo de amostra apresenta concentrao elevada de solidos dissolvidos, particu-
las solidas podem ocorrer na chama, sobretudo quando sua temperatura e insuIiciente para comple-
tar a atomizao. Neste caso, havera espalhamento da radiao e, conseqentemente, a atenuao da
radiao da lmpada de catodo oco, que sera interpretada como absoro atmica pelo sistema de
leitura do instrumento. O espalhamento da luz, de acordo com a lei de Rayleigh, e inversamente
proporcional a quarta potncia do comprimento de onda, o que agrava este tipo de interIerncia
quando o reIerido parmetro apresenta valores inIeriores a 300 nm.
Se a temperatura da chama Ior insuIiciente para dissociao de moleculas em atomos, bandas
99
de absoro molecular podero se sobrepor as linhas de absoro atmica do elemento de interesse,
causando erro em sua determinao. A Iormao de moleculas e Iavorecida quando um elemento
presente em alta concentrao na matriz reage com gases da chama Iormando oxidos ou hidroxidos.
O problema de absoro molecular se torna mais serio abaixo de 250 nm.
A correo da "absoro de background" e Ieita comumente dispondo-se de uma lmpada de
deuterio, ou de maneira mais eIiciente atraves do eIeito "Zeemann". A lmpada de deuterio apresen-
ta um espectro de radiao continua, que sendo atenuada pela absoro de background, tambem con-
tinua, permite esta ultima seja quantiIicada e subtraida do sinal detectado de "absoro de back-
ground absoro atmica".
8.3.2 Influncia das propriedades fsicas da soluo de amostra
Suponha-se a determinao de cobre por espectrometria de absoro atmica em aguardente,
considerando-a como uma soluo hidro-alcoolica a 50 de etanol em volume. Se a calibrao do
instrumento Ior eIetuada com solues padres aquosas, ter-se-a uma condio de atomizao diIe-
rente daquela obtida ao se aspirar a soluo de amostra, contendo etanol. A Iorma mais simples de se
eliminar essa interIerncia e preparar solues padres e de amostra com propriedades Iisicas com-
paraveis.
Solues com diIerentes viscosidades e tenses superIiciais sero aspiradas e nebulizadas di-
Ierentemente, resultando em diIerentes populaes de atomos para uma mesma concentrao do
elemento de interesse. Cita-se que a viscosidade aIeta a velocidade de entrada da soluo no nebuli-
zador, enquanto que a tenso superIicial aIeta o numero de goticulas Iormadas, ou seja, a eIicincia
da nebulizao.
A situao e especialmente critica na Iotometria de emisso de chama, onde o aumento da
velocidade de aspirao de soluo de amostra diminui a intensidade de radiao de Iundo (back-
ground ) da chama, em Iuno do maior resIriamento.
Na determinao de metais em oleos lubriIicantes, a soluo de amostra e preparada por dis-
soluo em solventes orgnicos como xileno e metilisobutilcetona (MIBK). Para se preparar solu-
es padres, deve-se dispor de compostos organometalicos que possam ser considerados como pa-
dres primarios, soluveis nos mesmos solventes, obtendo-se assim solues padres e de amostra
com propriedades Iisicas similares. Quando se empregam solventes orgnicos, ha que se levar em
conta que eles atuam tambem como combustiveis, devendo ser alterada portanto a relao combus-
100
tivel/oxidante, aumentando-se o Iluxo deste ultimo.
8.3.3 Interferncias qumicas
Componentes da amostra podem reagir com o elemento de interesse Iormando compostos
que se Iundem, vaporizam, ou que se dissociam com graus variados de diIiculdade, denominados
compostos reIratarios, que evidentemente prejudicam a atomizao. Os processos descritos aIetam
tanto a Iotometria de emisso como a espectrometria de absoro atmica.
O exemplo mais relacionado com as analises agronmicas se reIere a determinao de calcio
e de magnesio em matrizes que contem ions IosIato, sulIato e aluminio, como solo, material vegetal,
misturas de Iertilizantes, entre outros. A Iormao de CaAl
2
O
4
, por exemplo, prejudica a transIorma-
o do calcio presente na amostra em atomos.
Para contornar o problema, em geral adiciona-se ao meio um elemento que Iorma compostos
reIratarios mais Iacilmente que o elemento de interesse, como o lantnio ou o estrncio. Cita-se ain-
da a possibilidade de se quelatar com EDTA o elemento que se esta determinando, de modo que no
se Iormem compostos reIratarios com ions IosIato ou sulIato. Finalmente, uma chama de temperatu-
ra conveniente pode dissociar compostos reIratarios eventualmente Iormados.
Especies produzidas na chama a partir dos gases, ou de compostos da amostra, tambem po-
dem exercer o mesmo papel.
8.3.4 Interferncia de ionizao
A Iormao de ions diminui o numero de atomos disponiveis para a produo do sinal anali-
tico e, conseqentemente, a sensibilidade analitica. Isso ocorre porque o ion apresenta um espectro
de absoro completamente diIerente do atomo que lhe deu origem.
A ionizao e mais intensa a concentraes mais baixas e e aIetada tambem pela presena de
outros elementos. Ao se determinar potassio em amostra com elevados teores de sodio, a ionizao
do potassio sera reprimida.
A ionizao do elemento M que esta sendo determinado, ocorre segundo o equilibrio:
M M
n
n eletrons
Se Ior adicionado ao meio um elemento, denominado supressor de ionizao, que se ioniza
mais Iacilmente que M, por apresentar um menor potencial de ionizao, o maior numero de ele-
101
trons presentes deslocara o equilibrio de ionizao do elemento M para a esquerda, diIicultando a
Iormao de ions M
n
.
A determinao de calcio e de magnesio por espectrometria de absoro atmica, em chama
de ar/acetileno, e aIetada pela Iormao de compostos reIratarios com ions IosIato, sulIato e alumi-
nio. Esse problema no ocorre na chama de oxido nitroso/acetileno, mas neste caso a temperatura
mais elevada aumenta a ionizao do calcio de 3 para 43. Devera ser adicionado a soluo de a-
mostra um supressor de ionizao, que podera ser o ion potassio, litio, entre outros, para que a ioni-
zao do calcio no represente problema. Os supressores so adicionados a soluo de amostra em
concentraes elevadas, da ordem de alguns g L
-1
.
8.4 Atomizao sem chama
Uma chama e um meio conveniente para atomizao de um elemento mas existem limita-
es. Ela requer um agente oxidante e assim no Iornece um ambiente quimicamente inerte, pois as
especies que nela se originam levam a Iormao de compostos reIratarios. Os processos de nebuli-
zao de soluo e queima, promovem uma diluio da soluo de amostra aspirada e os atomos
Iormados permanecem pouco tempo no percurso da radiao. Esses Iatores contribuem para que a
eIicincia da atomizao no seja satisIatoria. Estima-se que, dos 10
15
ions Cu
2
existentes em 1 mL
de soluo de cobre 1 mg L
-1
, apenas 10
-3
so atomizados na chama de ar acetileno. Conseqente-
mente, e compreensivel que a sensibilidade no seja adequada para certas aplicaes, como na de-
terminao de metais pesados, caracterizados como contaminantes, normalmente eIetuadas a con-
centraes inIeriores a 1 mg L
-1
.
Para contornar os problemas citados Ioram desenvolvidas tecnicas mais eIicientes de atomi-
zao, possibilitando que uma populao signiIicativa de atomos Iosse originada diretamente no
percurso do Ieixe de radiao da lmpada de catodo oco, a partir de uma quantidade muito pequena
de amostra. Com esse recurso aumentou-se bastante a sensibilidade analitica.
8.4.1 Forno de grafite
Na tecnica de atomizao por Iorno de graIite, um volume de 1 a 100 L de soluo de a-
mostra e introduzido no oriIicio de um tubo de graIite oco, o Iorno de graIite, de preIerncia atraves
de um sistema automatico, para garantia de reprodutibilidade.
A introduo de um volume de soluo diretamente no tubo elimina os problemas devido a
viscosidade, tenso superIicial, densidade, que aIetavam signiIicativamente a nebulizao na atomi-
102
zao em chama. O cilindro de graIite e montado entre dois eletrodos, acomodados em um bloco de
metal, por onde circula agua para reIrigerao, conIorme indicado na Iigura. O tubo e aquecido pela
passagem de uma corrente de grande intensidade e baixa voltagem, obedecendo-se a uma escala
progressiva de aumento de temperatura, relacionada as diIerentes etapas do processo.
A primeira etapa objetiva-se essencialmente a evaporao do solvente. O aquecimento e len-
to e gradual para evitar a Iormao de bolhas e borriIos, permitindo a Iormao de um Iilme delgado
e uniIorme nas paredes do tubo, contendo praticamente todos os componentes da amostra.
A seguir vem o estagio de carbonizao,
durante o qual so removidos os componentes or-
gnicos da matriz analisada. Assim, sero removi-
das substncias que exerceriam um ativo papel
como interIerentes na tecnica de chama. Pode-se
dizer que a carbonizao deixa o elemento de inte-
resse isolado, em situao ideal para ser atomizado.
Desde o inicio do processo, circula atraves
do interior do tubo um Iluxo de gas inerte, o argnio, promovendo uma atmosIera inerte, que con-
trasta com o ambiente altamente reativo de uma chama, onde os atomos do elemento de interesse
tinham ocasio de reagir com moleculas, radicais, ions e demais especies provenientes dos gases.
Apos os estagios de secagem (1) e carbonizao para decomposio da matriz (2, 3 e 4), pro-
move-se uma rapida elevao da temperatura, ate 2000-3000K, para se eIetuar a atomizao.
Nesta Iase se interrompe o Iluxo de gas inerte para que a populao de atomos Iormados se
acumule em um volume relativamente pequeno. Tem-se, portanto, uma maior populao de atomos,
103
disponiveis para interagir eIicientemente com o Ieixe da radiao luminosa da lmpada de catodo
oco, cujo eixo coincide com o eixo longitudinal do tubo de graIite. Todo o volume de soluo de
amostra e empregado para produo de atomos concentrados no caminho da radiao, gerando um
sinal analitico de intensidade suIiciente para permitir a determinao de baixas concentraes. O
tempo de atomizao e baixo, pois deve ser menor que o tempo de residncia dos atomos no tubo.
Obtem-se um sinal analitico transiente, ou seja, dependente do tempo, na Iorma de pico, do
qual se pode medir a altura ou a area, para se correlacionar com a concentrao. Cita-se que a tecni-
ca de atomizao por Iorno chega a atingir sensibilidade 10000 vezes superior a tecnica de chama.
Gerao de hidretos e de vapor
Alem dos processos de chama e eletrotermico pode-se
empregar outros meios de atomizao. Elementos como antim-
nio, arsnico e estanho reagem com borohidreto de sodio e Ior-
mam hidretos metalicos. Esses compostos evoluem da soluo de
amostra carreados por gas inerte, como nitrognio ou argnio, ate
um tubo de quartzo cujo eixo coincide com o Ieixe de radiao da
lmpada de catodo oco. Aquecendo-se o tubo de quartzo com a
chama do queimador de ar/acetileno convencional, os hidretos se
decompem e liberam atomos no estado Iundamental. Note-se que a chama no e empregada com as
mesmas Iinalidades descritas na tecnica de atomizao em chama.
0
1000
2000
3000
0 30 60 90 120 150 180 210 240
tempo (s)
o
C
1
2
3
4
5
104
Na determinao de mercurio, utiliza-se o mesmo
equipamento descrito para gerao de vapor, mas no ha
necessidade de Iormao de hidreto volatil, nem de aque-
cimento pela chama, pois o mercurio elementar ja e volatil.
Necessita-se apenas reduzir o mercurio presente na Iorma
inica, empregando-se soluo de cloreto estanoso. Uma
corrente de nitrognio ou de argnio conduzira os atomos
de mercurio ate o tubo de quartzo para produo do sinal.
Comparando-se a atomizao com e sem chama, observa-se que na atomizao com chama,
o sinal e grandemente aIetado pela composio, Iluxo e presso dos gases e pela estabilidade na ne-
bulizao. Entretanto, e relativamente simples de se operar, oIerece boa estabilidade e em grande
parte dos casos oIerece sensibilidade e adequada.
Com os devidos cuidados, uma preciso de 0,2
pode ser obtida e o eIeito dos interIerentes e controlado
pela escolha da chama apropriada. A atomizao sem
chama proporciona grande sensibilidade, em Iuno do
maior tempo de residncia dos atomos no percurso do
Ieixe de radiao, o ambiente e quimicamente inerte e se
requer quantidade pequena de amostra. Entretanto, o pro-
cesso e complicado do ponto de vista operacional, se destina exclusivamente a determinao de tra-
os e a preciso diIicilmente e melhor que 1, variando segundo alguns autores entre 5 a 10.
8.4.3 Espectroscopia de emisso atmica em plasma
O enIoque neste item e para a emisso de radiao visivel e ultravioleta em decorrncia da
excitao termica de atomos. Aplicaes quantitativas da espectroscopia de emisso atmica em
arco eletrico Ioram desenvolvidas por Norman Lockyer (18361920) no comeo de 1870, e a apli-
cao quantitativa baseada na emisso em chama Ioi iniciada por H. G. Lundegardh em 1930. A
emisso atmica baseada em plasma se iniciou em 1964.
ConIorme ja discutido, a emisso atmica pode ser observada pelas linhas e um espectro de
emisso, sendo a intensidade de cada linha proporcional ao numero de atomos excitados.
105
Um espectrmetro de absoro atmica pode ser usado em medidas de emisso, em chama
simplesmente desligando-se lmpada de catodo oco. Mas comumente, contudo, espectrmetros de
emisso so construidos para tirar partido das caracteristicas vantajosas das medidas de emisso
atmica como analise multielementar. Embora Iontes de excitao como arcos e centelhas e lasers
sejam utilizados, atualmente a Ionte de excitao mais emprega na rotina de emisso atmica e o
plasma.
Plasma e um gas aquecido parcialmente ionizado, contendo alta concentrao de eletrons e
cations, o que o torna um condutor eletrico. A elevada temperatura de um plasma resulta do aqueci-
mento resistivo do movimento de eletrons e ions de argnio. Como o plasma opera a temperaturas
muito mais elevadas que uma chama, ele pode produzir mais atomos e excita-los em maior quanti-
dade. A temperatura mais elevada produz tambem ions do elemento de interesse.
A tocha de plasma consiste de
trs tubos de quartzo concntricos, ro-
deados no topo por uma espiral de in-
duo por radio-Ireqncia. A soluo
de amostra e misturada com uma cor-
rente de argnio em uma cmara de
nebulizao e carregada ate o plasma
pelo tubo central da tocha.
A Iormao do plasma e iniciada
por uma centelha eletrica obtida em
uma bobina Tesla. Uma corrente alter-
nada de radio Ireqncia cria um campo
magnetico Ilutuante que induz um mo-
vimento circular aos eletrons e ions argnio. Como resultado de inumeras colises com o gas no
ionizado se origina um calor resistivo que promove temperaturas da ordem de 10000 K na base do
plasma e de 6000 a 8000K a cerca de 15 a 20 cm da bobina, onde a emisso e eIetivamente medida.
Nessas temperaturas elevadas, a parte externa da tocha deve ser termicamente isolada, o que e Ieito
por meio de um Iluxo tangencial de argnio.
A espectroscopia atmica de emisso e apropriada para analises multi-elementares porque
varios componentes da amostra so excitados simultaneamente. Um monocromador pode ser pro-
106
gramado para Iazer uma varredura localizando varias linha de emisso e medindo sua intensidade e
assim quantiIicando 3 ou 4 componentes por minuto. E o que se chama de analise seqencial.
Numa outra abordagem, varios detectores podem ser posicionados para eIetuar leituras si-
multneas de varias linhas de emisso. Ento, neste caso, uma grade de diIrao pode direcionar
energia radiante, reIerentes a linhas de emisso selecionadas, para 48 ou 60 Iendas em arranjo se-
micircular, cada uma delas posicionada Irente a um detector. Neste caso se denomina analise simul-
tnea.
Comparada a excitao em chama, o plasma permite limites de deteco muito menores, com
exceo dos elementos sodio e potassio, alem de minimizar interIerncias quimicas e espectrais.
A seleo de um cumprimento de onda depende da necessidade de sensibilidade da analise e
da eliminao de interIerncia. Como os espectros atmicos de emisso, particularmente no plasma,
contem muitas linhas e inevitavel que uma certa sobreposio ocorra. Aberturas de slit mais estreitas
melhoram a resoluo. Deve-se, portanto, examinar o espectro de emisso e selecionar as linhas
mais intensas e mais resolvidas.
A interIerncia espectral mais importante na emisso atmica so as bandas de emisso de
especies moleculares. Essa radiao continua de background e particularmente severa nas chamas.
No plasma, a temperatura muito elevada torna a interIerncia de background menos problematica.
Pelo mesmo motivo as interIerncias quimicas do plasma so tambem menos expressivas que na
emisso em chama.
107
9 POTENCIOMTRIA E CONDUTIMETRIA
A quimica eletroanalitica compreende um grupo de metodos analiticos baseado nas proprie-
dades eletricas das solues: corrente, resistncia e diIerena de potencial. Em alguns casos as pro-
priedades eletricas so medidas em Iuno do tempo. As caracteristicas desses metodos so: baixos
limites de deteco, possibilidade de especiao quimica e instrumentao relativamente barata. Os
metodos potenciometricos e condutimetricos se inserem dentro da categoria dos metodos
eletroanaliticos.
9.1 Noes de Eletroqumica
Reaes de oxidao-reduo so aquelas em ocorrem transIerncia de eletrons entre as es-
pecies participantes, de modo que sempre existe pelo menos uma especie doando e outra recebendo
eletrons. E o que ocorre quando uma barra de cobre metalico Iica recoberta de prata metalica ao ser
imersa numa soluo de ion Ag

.
MTODOS ELETRO-ANALITICOS
Metodos no
interIaciais
Metodos de
interIace
No ocorrem reaes nos eletrodos:
CONDUTIMETRIA
Metodos
Estaticos
Metodos
dinmicos
Corrente
constante
Corrente
variavel
Reaes de eletrodo em equilibrio, medida de volta-
gem a corrente zero: POTENCIOMETRIA
Medida de corrente vs tempo: COULOMETRIA
Medida de corrente vs voltagem VOLTAMETRIA
Tecnicas envolvendo reaes nos eletrodos
Reaes no eletrodo no esto em equili brio
108
Essa mesma reao de oxidao-reduo pode ser estudada em uma celula eletroquimica,
denominada celula galvnica, na qual o Iluxo de eletrons percorre um condutor, gerando uma diIe-
rena de potencial que pode ser utilizada para produzir trabalho mecnico. Na Iigura a seguir tem-se
uma celula eletroquimica envolvendo eletrodos de cobre e prata mergulhados nas solues de seus
cations.
Os componentes de uma celula eletroquimica so em geral: dois condutores imersos em uma
soluo contendo eletrolitos (eletrodos); um condutor eletrnico externo para permitir o Iluxo de
eletrons e um condutor inico, a ponte salina, para evitar o contato direto dos reagentes e permitir o
Iluxo de ions. A diIerena de potencial e a medida da tendncia da reao ocorrer em direo ao
equilibrio
Note-se que eletrons migram do eletrodo de cobre metalico para o eletrodo de prata metalico.
Cu
o
Ag
+
Ag
+
Cu
o
Ag
o
Cu
2+
Eletrodo de Cobre
e
-
e
-
Eletrodo de Prata
Ponte
Salina
(KCl sat.)
Cu(s) Cu
2+
+ 2e
-
Ag
+
+ e
-
Ag(s)
[Cu
2+
] = 1.00 mol/L
[Ag
+
] = 1.00 mol/L
Eletrodo de Cobre
e
-
e
-
Eletrodo de Prata
Ponte
Salina
(KCl sat.)
Cu(s) Cu
2+
+ 2e
-
Cu(s) Cu
2+
+ 2e
-
Ag
+
+ e
-
Ag(s)
Ag
+
+ e
-
Ag(s)
[Cu
2+
] = 1.00 mol/L
[Ag
+
] = 1.00 mol/L
nodo (oxidao) Catodo (reduo)
109
O ion Ag
2
se reduz a prata metalica e o cobre metalico se oxida a ion cuprico. Uma ponte salina,
contendo um sal como KCl e conectando os dois recipientes, e necessaria para garantir a eletroneu-
tralidade das solues que Iormas o sistema. Ela contrabalana a deIicincia de cargas positivas
decorrentes do consumo de ions Ag

no recipiente da direita, liberando ali ions K

. No Irasco da
esquerda, a liberao de ions Cl
-
contrabalana o excesso de cargas positivas, decorrentes da Iorma-
o de ion Cu
2
.
As especies quimicas envolvidas nesse sistema, esto representadas nas semi-reaes indica-
das a seguir, ambas escritas por conveno como reduo:
Cu
2
2e
-
Cu
o
Ag

e
-
Ag
o
Experimentalmente sabe-se que as reaoes que ocorem so:
Cu
o-
Cu
2
2e
-
Ag

e
-
Ag
o
A reao completa e: Cu
o
2Ag

Ag
o
Cu
2
O cobre metalico doou 2 eletrons e se oxidou, dando origem ao ion Cu
2
, enquanto que o ion
prata Ag

recebeu 1 eletron por ion e se reduziu, produzindo prata metalica. O cobre metalico atua
portanto como redutor pois reduziu o ion prata, enquanto que o ion prata e o oxidante. Essa reao
que ocorre na pilha eletroquimica e espontnea, sendo que os eletrons caminham do eletrodo de co-
bre para o eletrodo de prata. O eletrodo onde ocorre a oxidao e chamado anodo enquanto que a-
quele em que ocorre a reduo e chamado catodo. No caso da celula eletroquimica exempliIica-
da,esse as concentraes das solues de Ag

e de Cu
2
Ior 1 mol L
-1
, a diIerena de potencial medi-
da e AE 0,462 Volts
Se no circuito externo Ior inserida uma Ionte de potencial de 0,462 Volts em oposio ao
Iluxo de eletrons a reao e paralisada. Se a diIerena de potencial Ior superior a 0,46 Volts o senti-
do da reao se inverte, ocorre ento uma eletrolise e a celula eletroquimica sera denominada de
celula eletrolitica. Na celula galvnica o trabalho quimico gera uma diIerena de potencial, enquanto
que na celula eletrolitica uma diIerena de potencial aplicada a mesma gera trabalho quimico.
A representao esquematica da celula galvnica citada e:
Cu
o
| Cu
2
(aq, 1 mol L
-1
) || Ag

(aq, 1 mol L
-1
) | Ag
o
anodo catodo
e
-
110
Para qualquer celula:
AE E
catodo
E
anodo
Se o eletrodo de prata Iosse substituido por outro de zinco ocorreria uma mudana no proces-
so, pois o zinco que passaria a atuar como doador de eletrons e o cobre como receptor. Nota-se, por-
tanto, que uma especie atua como agente oxidante ou agente redutor, dependendo de como se rela-
ciona com a outra especie envolvida no sistema.
As reaes de oxidao-reduo podem ser desmembradas em semi-reaes, reIerentes aos
processos de oxidao e de reduo. Assim, a celula eletroquimica e composta de 2 reaes de meia-
cela e cada reao de meia-cela possui um potencial de eletrodo, associado, medido em relao a um
padro de reIerncia
Potencial de Eletrodo: Potencial de uma cela onde o eletrodo em questo atua como catodo e
o EPH atua como nodo Se as atividades de todos os reagentes e produtos e igual a 1 tem-se Poten-
cial de Eletrodo Padro (E
o
). O potencial padro de eletrodo, E
o
, se reIere a uma condio especial
das especies quimicas envolvidas: solidos na sua Iorma mais estavel, especies em soluo com ati-
vidade unitaria, ou, de modo simpliIicado, na concentrao de 1 mol L
-1
e gases na presso de 1 at-
mosIera. Para se prever qual especie quimica vai atuar como oxidante e qual vai atuar como redutor
deve-se consultar uma tabela de potenciais padro de eletrodo, nas quais as semi-reaes so nor-
malmente representadas sempre como processos de reduo:
Cu
2
2e
-
Cu
o
E
o
0,339
Ag

e
-
Ag
o
E
o
0,799
No processo de oxidao-reduo uma dessas semi-reaes tera que ser invertida, ou seja,
escrita como oxidao. Para a reao de oxidao-reduo ocorrer como um processo espontneo, a
variao de potencial padro da celula, AE
o
, resultante da soma algebrica dos potenciais padro,
devera ser positiva. A unica possibilidade de se obter valor positivo para AE
o
sera:
Cu
o
Cu
2
2e
-
E
o
- 0,339
Ag

e
-
Ag
o
E
o
0,799
AE
o
0,460 V
111
tempo
A medida que a reao espontnea ocorre na celula eletroquimica o potencial da celula de-
cresce ate que atinge o valor zero e o sistema entra em equilibrio
Inicio da Reao Equilibrio
|Ag

| 1,00 mol L
-1
|Ag

| 1,9 x 10
-8
mol L
-1
|Cu
2
| 1,00 mol L
-1
|Cu
2
| 1,50 mol L
-1

A equao de Nernst Iornece a relao entre potencial da celula, AE, e as atividades das es-
pecies em soluo, sob qualquer condio:
m A n B p C q D
m
A
n
B
q
C
p
D o
) a ( ) a (
) a ( ) a (
ln .
nF
RT
E E A = A
onde:
F constante de Faraday: 96500 coulombs eq.
R constante dos gases perIeitos 8,316 J mol
-1
grau
-1

E
o
potencial padro de eletrodo
E potencial do eletrodo
n numero de eletrons envolvidos
Para temperatura de 25
o
C, trabalhando-se com logaritmos decimais e concentrao no lugar
de atividade tem-se:
n m
p q
o
| B | | A |
| C | | D |
log .
n
0592 , 0
E E A = A
Quando Ior atingido o equilibrio, AE 0 e assim:
E
cel
ncio da Reao
[Ag
+
] ~ [Cu
Z+
] ~ I moI L
-I
Equilbrio
K =
[Cu
2+
]
[Ag
+
]
2
= 4,1x 10
15
K =
[Cu
2+
]
[Ag
+
]
2
= 4,1x 10
15
0,462 V
0
112
K log .
n
0592 , 0
E A
o
=
9.2 Potenciometria
Metodos potenciometricos de analise baseiam-se na medida do potencial de uma cela eletro-
quimica na ausncia de corrente. A equao de Nernst Iornece uma relao simples entre o potencial
de eletrodo e concentrao de especies inicas em soluo, evidenciando a possibilidade de uso ana-
litico das medidas de potencial. O potencial de um eletrodo no pode ser deIinido isoladamente,
devendo sempre estar associado a um outro eletrodo numa celula galvnica.
Num Iio de metal, imerso em uma soluo de seus ions, desenvolve-se um potencial propor-
cional a concentrao desses ions e o potencial de eletrodo e calculado por meio da equao de
Nernst. Considerando-se a reao:
M
n
ne
-
M
o
) M ( a
) M ( a
log .
n
0592 , 0
E E
n
o
o
+
=
mas a(M
o
) 1
) M ( a log .
n
0592 , 0
E E
n o
) Mn / M (
+
+
+ =
Para que seja possivel eIetuar a medida de concentrao, deve-se associar ao eletrodo em que
se mede eIetivamente a concentrao da especie de interesse um outro eletrodo de potencial cons-
tante. Suponha-se assim, que um Iio de prata esta imerso em uma soluo de ions prata, cuja, ativi-
dade ou concentrao deseja-se avaliar e que este eletrodo de prata esteja ligado a outro eletrodo de
potencial constante 0,246 V.
VeriIica-se experimentalmente que, nessa situao o eletrodo de prata e o eletrodo positivo,
para onde se dirige o Iluxo de eletrons, ou seja o catodo. Assim, sendo a medida do potencial da
celula 0,400 V, tem-se:
E
cel
E
Ag
E
reI
0,400 E
Ag
- 0,246V
E
Ag
0,400 0,246 0,646V
113
sendo o valor tabelado de E
o
Ag/Ag
igual a 0,799V, tem-se :
| Ag log| .
1
0592 , 0
E E
o
) Ag / Ag ( Ag
+
+
+ =
0592 , 0
E E
| Ag log|
0
Ag Ag

=
25 , 2
0591 , 0
779 , 0 646 , 0
| Ag log| =

=
+
|Ag

| 0,0057 mol L
-1

Na verdade esse procedimento e pouco utilizado porque um eletrodo desse tipo e pouco sele-
tivo, respondendo a outros cations que podem ser reduzidos presentes na soluo. Alem disso, po-
dem dissolver em meio acido ou basico e tambem podem ser Iacilmente oxidados em algumas so-
lues. Esse eletrodo sera deIinido posteriormente como eletrodo indicador de primeira classe.
9.2.1 Eletrodos
Nas medidas potenciometricas so utilizados essencialmente dois tipos de eletrodos: reIe-
rncia e indicadores.
Eletrodos de referncia:
Em aplicaes eletro-analiticas, e desejavel que um dos eletrodos tenha potencial conhecido
e constante, ou seja, completamente insensivel a composio da soluo em estudo.O eletrodo de
reIerncia ideal e reversivel; obedece a equao de Nernst; exibe potencial constante com o tempo;
retorna ao seu potencial original apos submetido a pequenas correntes e exibe baixa histerese com
variaes de temperatura.
Eletrodo padro de hidrognio (EPH)
Como um eletrodo padro, o EPH e extremamente reprodutivel e o potencial medido se a-
proxima bastante do teoricamente esperado, mas no e conveniente para medidas de rotina.
Consiste de uma pea de platina recoberta por platina Iinamente dividida (negro de platina),
que se encontra imersa em uma soluo onde a atividade de H

e 1,0, e atraves do qual se passa hi-
drognio a presso de 1 atmosIera. A platina absorve o H
2
, devido a grande area superIicial propor-
cionada pelo negro de platina. No eletrodo desenvolve-se um potencial determinado pela tendncia
relativa do H

se reduzir e do H
2
se oxidar, ao qual se atribui o valor zero a qualquer temperatura.
114
Eletrodo padro de hidrognio Eletrodo de calomelano saturado
Quando numa celula galvnica esta ligado ao EPH um eletrodo de zinco, imerso em soluo
onde a atividade do ion Zn
2
e 1, ocorre oxidao do Zn. O eletrodo de zinco e o catodo ou eletrodo
negativo. A voltagem medida nessa condio se atribui sinal negativo, isto e -0,761V.
Eletrodo de calomelano saturado (ESC)
Consta de um Iio de platina imerso em cuja ponta se adere suspenso de Hg
2
Cl
2
solido mis-
turado a mercurio liquido, sendo o conjunto imerso em soluo saturada de KCl.
Hg
2
Cl
2
2e
-
2 Hg(l) 2 Cl
-
2 0
Hg / 2 Cl 2 Hg
) Cl ( a log .
2
0592 , 0
E E

=
O potencial do eletrodo depende da concentrao de Cl
-
, mas como a soluo de KCl e satu-
rada, cerca de 4,2 mol L
-1
, o potencial permanece constante. Podem ser empregadas tambem solu-
es 1,0 ou 0,1 mol L
-1
KCl.
Eletrodo Ag/AgCl:
Consiste em um Iio de prata, recoberto com AgCl, imerso em
soluo de KCl saturada com AgCl.
AgCl e
-
Ag(s) Cl
-
) Cl ( a log .
1
0592 , 0
E E
o
Ag / AgCl

=
115
Eletrodos indicadores
Nos eletrodos indicadores o potencial e sensivel a concentrao da especie quimica de inte-
resse. E o eletrodo, portanto, onde eIetivamente se determina especie quimica de interesse.
Podem ser de dois tipos: eletrodos indicadores de metal, ou eletrodos baseados em sistema de
oxidao- reduo, nos quais se desenvolve-se um potencial determinado por uma semi-reao de
oxidao- reduo na superIicie do eletrodo e eletrodos indicadores de membrana onde o potencial
determinado por diIerena de concentrao entre os dois lados de uma membrana especial.
Os seguintes tipos de eletrodo indicador de metal podem ser enumerados:
Eletrodos de primeira classe: metal em contato com a soluo de seus ions:
Cu
2
2e
-
Cu
o
Eletrodos de segunda classe: Metal, sal insoluvel do metal, em contato com soluo do -
nion do metal.
Como exemplo temos o eletrodo de Ag/AgCl, que pode ser usado de Iorma a responder a
concentrao de ion cloreto em soluo:
AgCl e
-
Ag (s) Cl
-
) Cl ( a log .
1
0592 , 0
E E
o
=
Eletrodos de terceira classe: metal, sal pouco soluvel do metal, sal contendo nion do pri-
meiro sal, soluo de cation do segundo sal
Ag/Ag
2
C
2
O
4
, CaC
2
O
4
, Ca
2
Ag
2
C
2
O
4
2 e- 2 Ag
o
C
2
O
4
2-

) O C ( a log .
2
0592 , 0
E E
2
4 2
o
=
como Ks a(C
2
O
4
2-
) . a(Ca
2
):
) Ca ( a
Ks
log .
2
0592 , 0
E E
2
o
+
=
E Constante 0,0296 log a(Ca
2
)
116
Eletrodos inertes: metal inerte em contato com soluo contendo Iormas oxidada e reduzida
de um sistema de oxidao reduo. O Iio metalico e um simples condutor de eletrons.
Pt|Fe
2
,Fe
3
Fe
3
e- Fe
2
) a(Fe
) a(Fe
log .
1
0592 , 0
E E
3
2
o
+
+
=
na Iorma generica a equao do eletrodo inerte se torna:
) ox ( a
) red ( a
log .
n
0592 , 0
E E
o
=
Eletrodos indicadores de membrana
Permitem a determinao rapida e seletiva de varios cations e nions atraves de medida po-
tenciometrica direta. DiIerentemente de um eletrodo metalico, no qual o potencial no eletrodo meta-
lico deriva da tendncia de uma reao redox ocorrer na superIicie do metal, em eletrodos de mem-
brana o potencial se deve a um potencial de juno entre a membrana que separa a soluo do ele-
trodo da soluo da especie a ser analisada. Em outras palavras, o potencial neste tipo de eletrodo
resulta da maniIestao desigual de cargas eletricas dos dois lados de uma membrana especial.
A grande vantagem desse tipo de eletrodo e a possibilidade de se operar com membranas que
apresentam consideravel seletividade em relao a ions especiIicos, produzindo potenciais que obe-
decem a equao de Nernst. Por esse motivo so conhecidos como eletrodos seletivos.
Eletrodos de vidro para pH
A medida de pH e eIetuada com ba-
se na medida da diIerena de potencial a-
traves de uma membrana de vidro que se-
para a soluo desconhecida de uma solu-
o de reIerencia cuja |H

| e conhecida
Uma membrana vidro especial, sele-
tiva a ions H

, separa duas solues de ions

H

, uma interna de concentrao constante

pH-metro
eletrodo
de vidro
Iio de prata com
ponta recoberta
com AgCl
HCl O,1 M
saturado c/
AgCl
soluo de pH
desconhecido Fina membrana de
vidro (responsavel pela
resposta ao pH)
ECS-eletrodo de
calomelano saturado.
Eletrodo de reIerncia
117
e outra externa, cuja concentrao variavel se quer determinar, o que Iaz ocorrer uma diIerena de
potencial. E bastante seletivo ao ion H

, no soIrendo interIerncias de substncias oxidantes ou

redutoras. As interIerncias so, devidas a substncias presentes no proprio vidro: Na, K, etc. A se-
qncia de seletividade e: H

~~~ Na

~ K

, Rb

, Cs

, ~~ Ca
2
.
Observe-se que para medir a diIerena de potencial que ocorre na membrana e necessario se
dispor de um eletrodo interno denominado eletrodo de reIerncia interno, que no exemplo e um ele-
trodo Ag/AgCl. Alem desse, e claro, tambem se necessita de um eletrodo de reIerncia externo, para
compor a celula galvnica.
A diIerena de potencial devido a diIerena de concentraes de ions H

no e a unica detec-
tavel. Como as superIicies interna e externa da membrana no so exatamente iguais, isso Iaz apare-
cer uma diIerena de potencial adicional, denominada potencial assimetrico. A equao de Nernst
para o eletrodo de vidro pode ser ento escrita como:
E K 0,0592 a(H

)
onde K e uma constante representa a soma dos potenciais assimetrico e do eletrodo de reIerncia.
Muito embora o eletrodo de vidro seja altamente seletivo em relao ao ion H

, a valores e-
levados de pH ele comea a responder ao sodio, dependendo da composio do vidro empregado
para se construir a membrana. Vejamos como isso interIere na medida de pH de solues alcalinas:
para |H

| 10
-12
mol L
-1
e |Na

| 0,1 mol L
-1
, como k
H,Na
10
-11
temos:
E constante 0,0592 log (aH

k
H,Na
aNa

)
E constante 0,0592 log ( 10
-12
10
-11
.10
-1
)
E constante 0,0592 log ( 2.10
-12
)
Portanto em vez de pH 12 tem-se pH 11,7, caracterizando o que se denomina erro alcali-
no.
Na rotina da determinao do pH em solues aquosas, se emprega geralmente um eletrodo
de vidro combinado, onde eletrodo indicador e eletrodo de reIerncia so montados em uma mesma
estrutura. O esquema de celula e:
Ag,AgCl|Cl
-
, |H

| cte|amostra |H| ?||KCl 3 mol/L| Hg

2
Cl
2
, Hg
Neste exemplo, a celula tem-se um eletrodo de Ag,AgCl como eletrodo de reIerncia interno
118
e um eletrodo de reIerncia externo de calomelano. Para trabalhos de preciso recomenda-se a utili-
zao de eletrodos de vidro simples, separados do eletrodo de reIerncia externo.
Eletrodos de membrana slida: o exemplo mais interessante e o eletrodo de Iluoreto, con-
tendo como membrana solida um cristal de LaF
3
dopado com Eu(II), respondendo ate concentrao
de 2 10
-6
mol L
-1
F
-
. A qualidade do eletrodo depende da pureza do cristal: quanto mais puro melhor
ele Iunciona. O esquema da celula e:
Ag|AgCl,Cl
-
(0,1 mol L
-1
),F
-
(0,1 mol L
-1
)|LaF
3
|amostra|F-|? ||elet.reI.comum
o eletrodo Ag|AgCl e, no caso, o eletrodo de reIerncia interno.
Eletrodos de membrana lquida: o mais in-
teressante e o eletrodo de calcio, no qual o composto
bis-(2 etil hexil) acido IosIorico, e um composto
orgnico trocador liquido de ions Ca
2
. O eletrodo
de membrana liquida em geral Iuncionam pior que
os de membrana solida
Eletrodo de membrana sensiveis a gases:
no se trata de um eletrodo de gas no sentido classi-
co, so construidos com membranas permeaveis a gases como CO
2
e NH
3
, por exemplo.
Eletrodo de enzima (biossensores): so constituidos basicamente por uma eletrodo de vidro
recoberto por uma matriz enzima. Podem ser empregados, por exemplo, na determinao de auca-
res.
9.2.2 Caractersticas dos eletrodos indicadores de membrana
Jantagens: so de baixo custo, apresentam simplicidade operacional e instrumental e se
constituem em boa opo para ions que so diIiceis de se determinar por metodos alternativos.
Desvantagens: apresentam desvantagens como a instabilidade na leitura em um determinado
sentido (driIt)
Resposta nernstiana: a relao potencial concentrao pode ser expressa pela Iormula geral:
E K + S log a
i
quando o valor de S se encontra proximo a 0,0591 V, ou seja entre 0,055 e 0,063V, diz-se que a
119
resposta do eletrodo e nernstiana. Pelo envelhecimento a resposta do eletrodo pode Iicar abaixo do
limite inIerior desse deste intervalo.
Seletividade: indicada pela intensidade com que o eletrodo responde a concentrao de ou-
tros ions A, B, etc., que no o analito M:
........| ) B ( a . K ) A ( a . K ) M ( a | log .
n
0592 , 0
E E
rb
B
ra
A
n o
) Mn / M (
+ + + =
+
+
o coeIiciente de seletividade k expressa a ordem de grandeza da interIerncia, quanto maior seu va-
lor menos seletivo e o eletrodo
Tempo de resposta: e o tempo que a leitura do sinal demora a se estabilizar; um eletrodo bom
para uso deve ter um tempo de resposta de no maximo 10 minutos.
Medidas potenciomtricas
Na pratica raramente se avalia a concentrao de uma especie de interesse em Iuno da me-
dida de potencial de eletrodo, com base na aplicao direta da equao de Nernst, pois seria necessa-
rio conhecer todas as propriedades do eletrodo, o qual deveria ter ainda um comportamento ideal.
Quando um eletrodo e mergulhado em uma soluo, contendo a especie i ao qual e sensivel,
desenvolve-se um potencial que, medido contra um eletrodo de reIerencia esta relacionado a ativi-
dade dessa especie:
E K + S log a
i
mas : a
i
c
i ,
onde e o coeIiciente de atividade inica, por sua vez altamente dependente da Iora
inica I da soluo. Se a Iora inica Ior mantida elevada e constante em relao a concentrao c
i
pode-se escrever que:
E K + S log c
i
Assim, na determinao do ion cloreto recomendao a adio de 2mL de soluo 5 mol L
-1

de NaNO
3
a cada 100 mL de soluo padro e de amostra. Se as amostras tiverem Ioras inicas
superiores a 0,1 mol L
-1
as solues padro devero ser ajustadas as condies das amostras.
Como o eletrodo responde ao nivel da especie na Iorma livre em soluo, a determinao da
concentrao total pode exigir mais que o ajuste da Iora inica. Na determinao do ion Iluoreto
pode-se recomendar a adio de soluo contendo: tartarato de sodio para complexar ions Ierro e
aluminio, os quais Iormariam complexos com o ion Iluoreto, alem de HCl e TRIS (hidroxi metil
120
aminometano) para controle do pH. Caso a Iormao de complexos no Iosse problema, o emprego
de uma soluo tampo de acetato pH 5,0-5,5 e suIiciente.
Uma tecnica comumente empregada e a curva de calibrao, medindo-se o potencial para
uma serie de solues padro, devendo-se lembrar que, devido a natureza logaritmica de equao de
Nernst, a concentrao dos padres deve variar por um Iator de 10, por exemplo 1, 10, 100, 1000 mg
L
-1
. Note-se a resposta nernestiana do eletrodo empregado, bem como a ampla Iaixa de trabalho ob-
tida para a determinao potenciometrica de cloreto.
y = 153.39 - 55.07x
R
2
= 0.9987
-40
0
40
80
120
160
0 1 2 3
Iog CI
-
(mg L
-1
)
E

(
m
V
)
A sensibilidade no e constante e depende da magnitude da concentrao considerada. E da-
da pela derivada dE/d|Cl
-
| e para o exemplo em questo sera 23,91/|Cl
-
|:
A tecnica de adio de padro e Iacilmente empregada em metodos potenciometricos pois a-
liquotas de soluo padro podem ser adicionadas consecutivamente ao mesmo volume inicial de
soluo de amostra, considerando-se o eIeito de diluio, registrando o valor do potencial para cada
adio. Em geral se admite o emprego de uma unica adio de padro.
Medida do pH
Na medida direta do pH de solues aquosas nos equipamentos denominados pH-metros
emprega-se uma escala em unidades de pH estabelecida segundo a equao de Nernst que e calibra-
da antes das medidas das amostras. Emprega-se para tanto como padro uma soluo tampo na
qual a atividade de ions H

e conhecida, 10
-7
mol L
-1
por exemplo, e atraves de um controle conver-
te-se a medida de potencial em milivolts para 7,00.
Este seria o caso de uma calibrao de pH de ponto unico, ainda encontrada em equipamen-
tos antigos. Essa calibrao so sera valida se a resposta do eletrodo Ior perIeitamente nernstiana.
121
e
-
= dQ/dt
Condutor inico
Condutor Eletrnico
e
-
= dQ/dt
Condutor inico
Condutor Eletrnico
Nos equipamentos modernos, executa-se uma segunda calibrao com uma outra soluo tampo,
10
-4
mol L
-1
H

por exemplo, acertando-se na escala do aparelho o valor de pH 4,00. Essa calibrao

de dois pontos no requer que o eletrodo tenha resposta nernstiana, e garante que a relao entre pH
e concentrao de H

e linear no intervalo de pH 4 a 7. Os padres de calibrao de pH devem ser

escolhidos de modo que o intervalo de calibrao inclua as amostras a serem analisadas.
9.3 Condutimetria
A conduo da eletricidade pode-se se dar por
meio de condutores eletrnicos e condutores ini-
cos. Nos condutores eletrnicos a diIerena de po-
tencial esta relacionada ao movimento de eletrons,
enquanto que nos condutores inicos ela se relacio-
na ao movimento de ions.
Assim, ao contrario da agua pura, solues
de eletrolitos so capazes de conduzir corrente eletrica pela migrao de ions sob a inIluncia de um
campo eletrico. Uma soluo de eletrolito pode conduzir eletricidade como um Iio metalico, mas
com uma diIerena marcante: soIre um Iorte eIeito da temperatura.
Considerando-se um condutor eletrico metalico de comprimen-
to l e seo s, Iazendo parte de um circuito eletrico e aplicando-se a lei
de Ohm, tem-se a expresso:
V R . i
onde R e a resistncia do condutor em ohms, i a intensidade da corren-
te em amperes que percorre o circuito e J a voltagem em volts aplica-
da ao condutor. A resistncia pode ser expressa em Iuno de suas
dimenses, l e s, e de uma propriedade do material do condutor, a resistncia especifica ou resistivi-
dade, representada por .
s
l
. R =
Quanto maior o comprimento do condutor maior e a diIiculdade para o caminhamento dos
eletrons; do mesmo modo, quanto maior a seo do condutor mais Iacil e o caminhamento dos ele-
l
s
V
i
122
trons.
De modo analogo, podemos deIinir condutancia, C, como o inverso da resistncia para ex-
primir a capacidade de um condutor em conduzir corrente eletrica e tambem a condutancia especifi-
ca ou a condutividade do condutor, c, atraves das expresses:
R
1
C =

=
1
c
de modo que:
s
l
. C c =
Solues de eletrolitos obedecem a lei de Ohm para baixos valores de corrente. Neste caso,
contudo, no existe um condutor solido e mede-se a resistncia a movimentao de eletrons promo-
vida por um volume de soluo, compreendido entre as placas paralelas de um eletrodo:
l
s
Essas placas so de platina platinizada, ou seja, recobertas por uma camada de platina negra,
depositada eletroliticamente a partir de uma soluo de cloreto de platina
O aparelho denominado condutivimetro mede a resistncia do segmento de soluo, cujo vo-
lume e deIinido pelo sensor, que e celula de medida desse aparelho. Esse equipamento consiste es-
sencialmente de uma ponte de Wheatstone, do tipo corrente alternada, apropriada para medidas de
condutividade.
Na verdade, no se esta interessado nas caracteristicas desse segmento de soluo, mas sim
na condutividade ou condutncia especiIica, c, que e caracteristica da soluo que estamos avalian-
do. A resistncia da soluo Iornece o valor de condutncia, C, que sera utilizando para calcular c
pela expresso:
s
l
. C c =
O quociente l/s e um valor constante, caracteristico do eletrodo ou celula de leitura emprega-
123
da e denominado constante de celula, u uu u , portanto:
c C . u
A unidade de resistncia e o ohm e a de condutncia e o Siemens (S). Empregam-se comu-
mente submultiplos como mili-ohm, mili-Siemens (mS) e deci-Siemens (dS). No so mais utiliza-
dos simbolos como O, equivalente a ohm para resistncia, ou mho, equivalente a Siemens, para
condutividade eletrica. A unidade mais comum para constante de celula e o cm
-1
, mas m
-1
e preIeri-
vel para atender ao SI. A condutividade eletrica pode ser expressa em unidades como: S cm
-1
ou dS
m
-1
( o mesmo que mS cm
-1
).
Exemplo: Uma soluo de KCl 0,01 mol L
-1
cuja condutividade e 1,409 mS cm
-1
apresenta
resistncia de 161,8 ohm, quando medida em determinada celula. Quando essa mesma celula e pre-
enchida com soluo 0,005 mol L
-1
NaOH, determina-se uma condutncia de 5,263 mS. Qual a con-
dutividade eletrica da soluo de NaOH?
A condutncia da soluo de KCl e o inverso de sua resistncia, igual a:
mS 18 , 6 S 00618 , 0
8 , 116
1
R
1
C = = = =
Sabendo-se a condutividade eletrica calcula-se a constante da celula utilizada:
c C . u
u 1,409 mS cm
-1
/6,18 mS 0,228 cm
-1

A condutividade eletrica da soluo de NaOH:
c C . u 0,228 . 5,263 1,20 mS cm
-1

Modelos mais antigos de condutivimetro Iornecem a leitura de resistncia ou condutncia da
soluo que preenche uma determinada celula, de constante u conhecida, cabendo ao operador cal-
cular a condutividade eletrica da amostra. Em aparelhos modernos, a soluo padro de KCl e lida
numa etapa inicial de calibrao e em seguida, durante a leitura das amostras, se l diretamente na
escala do aparelho a condutividade eletrica das mesmas.
A condutividade eletrica e proporcional, embora em relao no linear, a concentrao inica
de uma soluo, pois quanto maior a quantidade de ions na soluo, maior o numero de unidades
condutoras de eletricidade.
124
Na Iigura a seguir pode-se observar valores de condutividade eletrica de trs solues sali-
nas, para a temperatura de 25
o
C. Solues de NaCl e de KCl de mesma concentrao molar tm o
mesmo numero de ions por unidade de volume, mas as condutividades eletricas so diIerentes. Isso
ocorre porque o ion potassio tem maior habilidade em conduzir a corrente eletrica do que o sodio,
por ter maior mobilidade. Por outro lado, solues de CaCl
2
tem, obrigatoriamente, maior conduti-
vidade eletrica do que solues de NaCl e de KCl de igual concentrao molar, pois apresenta mai-
or numero de ion por unidade de volume.
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6
concentrao ( mol L
-1
)
c
o
n
d
u
t
i
v
i
d
a
d
e

e
l

t
r
i
c
a

(

m
S

c
m
-
1
)
Normalmente, a constante de uma celula no e determinada ou aIerida diretamente, a partir
da area e da distncia entre seus eletrodos. Para tanto, utiliza-se uma soluo padro de KCl da qual
se conhece a condutividade eletrica: por exemplo, a soluo 0,01 mol L
-1
KCl (7,456 g L
-1
) que
apresenta condutividade de 1423 mS cm
-1
a 25
o
C.
A escolha do valor da constante de celula e Ieita em Iuno da concentrao inica da solu-
o a ser analisada. Solues com baixa concentrao de eletrolitos apresentaro baixos valores de
condutncia e para se obter valores mais conIiaveis desse parmetro, sero mais adequadas celulas
com baixos valores de u, ou seja, placas de area relativamente grande, separadas por uma pequena
distncia. Por outro lado, solues concentradas exigiro celulas com elevado valor de constante de
celula. Como recomendao, podem ser citados os valores:
Condutividade (mS cm
-1
) Constante de celula (mS cm
-1
)
0,01 a 2 0,01
0,1 a 20 0,10
CaCl
2
KCl
NaCl
125
1 a 200 1,0
E muito importante observar que a condutividade eletrica no e uma medida especiIica pois
reIlete a contribuio de todos os ions presentes, em Iuno da concentrao e das caracteristicas de
cada um deles. Apenas quando um dos ions em uma soluo aquosa esta presente em concentrao
bem maior que os demais, a condutividade eletrica pode servir como Iorma de estimativa da concen-
trao desse elemento na soluo.
De Iorma aproximada, a medida de condutividade de uma soluo, pode ser empregada para
estimar:
Concentrao de cations ou nions totais (mg L
-1
) 10 x c
Concentrao salina (mg L
-1
) 640 x c
Presso osmotica (bar) 0,39 x
A medida da condutividade eletrica de solues de eletrolitos soIre Iorte eIeito da temperatu-
ra, aumentando em media 1,9 para cada grau centigrado de aumento de temperatura. Como cada
ion, tem seu coeIiciente de temperatura caracteristico, o melhor e padronizar uma temperatura para
se eIetuar as medidas, usualmente 25
o
C.
Os condutivimetros podem operar com um sensor de temperatura que promove correo au-
tomatica para 25
o
C atraves de um Iator de correo sobre a leitura obtida a temperatura ambiente.
Na determinao da condutividade eletrica do solo, como na determinao de pH, esta-se re-
Ierindo a uma condio particular, na qual se mede um extrato ou uma suspenso de solo preparada
obedecendo a um determinado criterio. Assim, pode-se ter a condutividade de extratos preparados
em relao solo:agua de 1:1 ou 1:5, ou outras propores. Recomenda-se, contudo, que se trabalhe
com o extrato de saturao, obtido a partir de uma pasta saturada preparada com uma relao so-
lo:agua deIinida pelas caracteristicas Iisicas da amostra de solo sob analise. Como reIerncia, se
condutividade eletrica de extrato de saturao estiver entre 4 e 8 mS cm
-1
a produtividade de plantas
sensiveis e restringida.
126
10 CROMATOGRAFIA GASOSA
10.1 Introduo cromatografia
CromatograIia e o processo de separao que envolve a interao entre constituintes de uma
amostra (solutos) e duas Iases: a fase movel, um gas ou um liquido e a fase estacionaria, um solido
ou um liquido que no se move, que pode estar conIinada em uma coluna. Um dos criterios empre-
gados para se deIinir os diIerentes tipos de cromatograIia e baseado na natureza da Iase movel e da
Iase estacionaria:
Iase movel Iase estacionaria tipo de cromatograIia
Gas solida,adsorvente em coluna cromatograIia gas-solido
gas liquida cromatograIia gas-liquido
liquido solida, adsorvente cromatograIia liquido-solido
liquido solido, resina de troca inica cromatograIia de troca inica
liquido liquida cromatograIia liquido-liquido
liquida liquido ligado a papel cromatograIia de papel
liquida solida, adsorvente em placa cromatograIia de camada delgada
Mikhail Semenovich Tswett, nascido em Asti, Italia, a 14 de Maio de 1872,
A cromatograIia, Iormada pela juno das palavras escrita e cor, Ioi originalmente descrita
por Tswett em 1906, que separou pigmentos de plantas usando tubo preenchido com CaCO
3
.
No processo de separao, os componentes da amostra so carregados pela Iase movel que
passa atraves de um leito de Iase estacionaria. Esses componentes tm seu deslocamento retardado
pela Iase estacionaria, atraves de interaes como: adsoro, solubilidade diIerencial, carga eletrica,
127
entre outros.
Dos tipos de separao possiveis, o processo denominado eluio e o que interessa ao abor-
dar a cromatograIia gas-liquido, no qual ocorre distribuio do soluto entre duas Iases, estabelecen-
do-se um equilibrio de partio; a separao ocorre com base na reteno relativa, e, em principio,
quanto mais longa a coluna maior o grau de separao.
Na eluio ocorrem diversos tipos de competio entre a Iases pelo soluto. Na cromatograIia
gas-liquido, por exemplo, o processo se baseia no conIronto entre a presso do vapor do soluto (ten-
dncia de se volatilizar e passar para a Iase movel) contra a solubilidade do soluto na Iase estaciona-
ria.
Na cromatograIia gasosa, uma mistura de componentes, solutos, e vaporizada sobre uma su-
perIicie relativamente grande de sorvente ativo, a Iase estacionaria, contida em coluna. Um Iluxo de
gas, a Iase movel, arrasta os vapores dos solutos ao longo da coluna, os quais interagem diIerenci-
almente com a Iase estacionaria, Iazendo com que a velocidade de chegada ao Iinal da coluna seja
variavel, o que, em suma, promove a separao.
No interior da coluna o deslocamento dos componentes da amostra ocorre na Iorma de uma
banda na qual, em geral com boa aproximao, a concentrao se distribui de Iorma gaussiana.
Fase es-
tacionaria
Amostra Fase movel
(solvente)
Coleta dos componentes
128
Quando o componente sai da coluna, o perIil de concentrao e registrado na Iorma de um pico. O
objetivo Iundamental no processo e se obter um pico para cada componente de interesse presente na
amostra, com maxima altura e minima largura, num periodo de tempo conveniente em termos de
metodo analitico. Os picos cromatograIicos so caracterizados pelo tempo de reteno, altura e area,
conIorme ilustrado.
t
M
e o tempo de reteno de um material que no interage com a Iase estacionaria contida na
coluna, ou seja, e o tempo que a Iase movel demora a sair da coluna desde a injeo.
tr
A
e tr
B
so os tempos de reteno dos componentes A e B da amostra.
Esses tempos devem ser corrigidos em relao a t
M
: o tempo de reteno corrigido e dado
por tr
A
-t
m
e tr
B
-t
M.
Para a separao ter xito e necessario que os picos produzidos estejam bem separados ou re-
solvidos. A resoluo, R, e dada pela expresso:
) tr tr ( 2
w w
2
) w w (
Z
R
A B
B A
B A

+
=
+
A
=
Para se obter uma separao R deve ser teoricamente igual a 1, embora na pratica se exijam
valores um pouco superiores, em torno de 1,5.
Modelo dos pratos tericos
Este modelo supe que a coluna cromatograIica seja constituida por um numero de segmen-
tos chamados pratos teoricos e Ioi estabelecido por Martin & Synge em 1941. Admite-se que ocor-
rem equilibrios individuais da amostra entre a Iase movel e a Iase estacionaria em cada prato teorico.
Dessa concepo surgiram os termos prato teorico e altura de prato teorico que tomados da teoria da
destilao, ainda persistem na terminologia da cromatograIia. Em outras palavras, o prato teorico e o
129
comprimento de segmento de coluna necessario para que ocorra equilibrio do soluto entre as Iases
cromatograIicas.
O processo de separao na cromatograIia pode ser comparado a destilao e a extrao li-
quido-liquido e assim uma coluna cromatograIica pode tambem ser comparada a uma serie de Iunis
de separao. O problema principal e que na extrao liquido-liquido atinge-se o equilibrio em cada
etapa de extrao ou em cada Iunil, o que no ocorre na cromatograIia. Ainda, a extrao liquido-
liquido consiste de uma serie de etapas individuais e descontinuas em contraste com o carater conti-
nuo da cromatograIia. E importante ressaltar que na coluna no existem pratos; eles so um artiIicio
que ajudam a entender o processo que ocorre na coluna. Portanto, considerar uma coluna cromato-
graIia como um conjunto de Iunis de separao pode ser interessante do ponto de vista didatico, mas
no corresponde a realidade.
Para avaliar separao entre os componentes de um sistema e necessario comparar o centro
do perIil de concentrao ou banda, com a extenso do alargamento desse perIil, que obrigatoria-
mente ocorre. A teoria da cromatograIia se ocupa basicamente em considerar os Iatores que contri-
buem para esse alargamento.
Na teoria dos pratos o equilibrio do soluto entre Iase movel e Iase estacionaria e deIinido a-
traves de um coeIiciente de partio K dado pela Iormula:
concentrao do soluto na Iase estacionaria
K
concentrao do soluto na Iase movel
Quanto maior o valor de K, mais tempo o soluto demora a percorrer a coluna. Essa caracte-
ristica pode ser expressa como pelos parmetros volume e tempo de reteno, deIinidos respectiv a-
mente como volume de Iase movel e o tempo necessario para eluir o soluto da coluna. Pode-se de-
monstrar a equao citada a seguir, atraves da qual se observa que a velocidade v do soluto na colu-
na e diminuida (ou a reteno do soluto aumentada), com o aumento do volume de Iase estacionaria,
Vs, e a diminuio do volume da Iase movel, Vm. Por outro lado, a reteno sera diminuida quanto
maior Ior a velocidade u da Iase movel:
(
(
(

+
=
Vm
Vs K
1
1
v u
130
Volumes de Iase movel e Iase estacionaria, Vm e Vs, sero conseqncias do volume e do
dimetro da coluna. A velocidade da Iase movel e ajustada pelo controle de seu Iluxo na coluna.
Finalmente, cada soluto tera seu valor de coeIiciente de partio K, e, quanto maior seu valor, mais
demorada sera a saida do soluto da coluna.
0
0.1
0.2
0.3
0 10 20 30 40 50
0
0.1
0.2
0.3
0 10 20 30 40 50
0
0.1
0.2
0.3
0 10 20 30 40 50
0
0.1
0.2
0.3
0 10 20 30 40 50
40 transferncias
20 transferncias 10 transferncias
60 transferncias
A eIicincia de separao na extrao em contra corrente esta relacionada ao numero de eta-
pas de equilibrio, ou seja, o numero de tubos ou Iunis de separao empregados. Na cromatograIia a
eIicincia de separao esta igualmente relacionada ao numero de etapas de equilibrio, ou em outras
palavras, ao numero de pratos de teoricos, N, ou a altura dos pratos teoricos, H, que uma coluna de
comprimento L teria. Assim:
H L/N
ConIorme mencionado anteriormente, quando uma das Iases esta sempre em movimento,
como no caso a Iase movel gasosa, o equilibrio entre ela e a Iase estacionaria no pode ser rigoro-
samente estabelecido, como admitido no modelo dos pratos teoricos.
O numero de pratos teoricos de uma coluna e calculado com base no pico cromatograIico ob-
F
r
a

o

d
a

m
a
s
s
a


t
o
t
a
l

d
o

s
o
l
u
t
o
Numero do tubo
131
tido apos a eluio:
2
2 / 1
2
R
) w (
) t .( 55 , 5
N =
onde w
1/2
e a largura do pico cromatograIico a meia altura.
Teoria da velocidade cromatogrfica
Um tratamento mais realista do processo cromatograIico leva em considerao o tempo para
o soluto se equilibrar entres as Iases movel e estacionaria, em contraste com a teoria dos pratos que
admite que esse equilibrio e instantneo.
As caracteristicas do pico cromatograIico so aIetadas pela velocidade de eluio u e tam-
bem outros Iatores como os diIerentes percursos disponiveis para o soluto percorrer entra as particu-
las da Iase estacionaria. Considerando-se ainda, a contribuio dos diIerentes Iatores de alargamento
da banda A, B e C, a altura de prato teorico H e obtida atraves da equao de Van Deemter:
H A B / u C u
A EIeitos dos percursos multiplos
A Iase movel se move atraves de uma coluna empacotada com Iase estacionaria. As molecu-
las do soluto tomaram diIerentes percursos ao acaso atraves dela. Isto causa alargamento de pico do
soluto porque diIerentes caminhos apresentam diIerentes comprimentos.
B DiIuso Longitudinal
A concentrao do soluto e menor nos limites da ban-
da do que no centro. O soluto se diIunde do centro para as
margens e isso causa alargamento do pico. Se a velocidade da
Iase movel e elevada o soluto passa menos tempo na coluna e isso diminui os eIeitos da diIuso lon-
gitudinal.
132
C Resistncia a transIerncia de massa
O soluto demora um certo tempo para se equilibrar entre as
Iases movel e estacionaria. Se a velocidade da Iase movel e elevada
e o soluto apresenta aIinidade Iorte com a Iase estacionaria o soluto
na Iase movel se movera mais a Irente do que o soluto na Iase esta-
cionaria e isso causara alargamento d epico. Quanto maior a velo-
cidade da Iase movel pior o alargamento se torna
Um graIico que relaciona a altura de
prato e a velocidade de Iase movel permite
determinar a velocidade otima que corres-
ponde a minima altura de prato e resulta em
maior eIicincia na separao.
O alargamento da banda cromatogra-
Iica pode ser analisado considerando as mu-
danas de concentrao, a medida que o
soluto se move atraves da coluna, por meio
de um balano de massa, ou a nivel molecu-
lar pelo chamado modelo do percurso casual ou percursos multiplos. O modelo do percurso casual
estabelece que o alargamento do pico cromatograIico, que, considerado como expresso da lei de
Gauss, sera quantiIicado pelo desvio padro, o, e calculado pela expresso:
o
2
H . L
que evidencia que o alargamento da banda cromatograIica e proporcional a raiz quadrada da distn-
cia percorrida pelo soluto na coluna, ou seja, do tempo de reteno.
Por esse motivo, o emprego de coluna mais longa no signiIica obrigatoriamente melhor eIi-
cincia de separao, uma vez que a resoluo depende do compromisso entre a distncia entre os
picos, e a largura dos mesmos, w, dada por 4o pela distribuio de Gauss. Dai vem uma expresso
para se calcular o numero de pratos teoricos, N, de uma coluna:
A teoria da velocidade cromatogrfica, que se ope a dos pratos tericos, leva em conta os
conceitos de diIuso do soluto e os caminhos de percurso da Iase movel pela coluna e permite predi-
zer o eIeito sobre a separao de Iatores como: tamanho e porosidade das particulas do suporte, es-
133
pessura da Iase estacionaria, velocidade de Iluxo da Iase movel, entre outros. A equao de Van
Deemter permite prever que a altura do prato teorico pode ser minimizada:
com empacotamento com particulas de tamanho regular, de pequeno dimetro, e sem permitir
espao morto na coluna.
a velocidade da Iase movel deve ser mantida to elevada quanto possivel para diminuir o tempo
de diIuso do soluto, mas, por outro lado, ela deveria ser to baixa quanto possivel para permitir
que o soluto atinja o equilibrio entre as Iases movel e estacionaria. Assim existe uma velocidade
de Iluxo otima que permite obter a altura minima de prato teorico
empregar um Iilme Iino de Iase estacionaria pouco viscosa sobre suporte solido.
10.2 Cromatografia gasosa
A cromatograIia gasosa e uma tecnica analitica importante, pois e: eIiciente; seletiva; larga-
mente usada; rapida, simples, barata; de Iacil quantiIicao; requer pequena quantidade de amostra e
e uma tecnica no destrutiva.
Dentre as desvantagens pode ser comentado que as amostras tm que ser volateis ou volatili-
zaveis; a tecnica no e apropriada para amostras termicamente labeis; a base teorica no e adequada
e requer aes de tentativa e erro.
Do ponto de vista de aplicaes de interesse agronmico, uma classe importante da cromato-
graIia gasosa e a cromatograIia gas-liquido (CGL), na qual uma Iase estacionaria, um liquido no
volatil, se mantem como uma camada Iina sobre um suporte solido, idealmente inerte com relao
ao processo de separao.
Representao esquematica de um cromatagraIo a gas
Um cromatograIo gasoso apresenta a seguintes partes principais:
10.2.1 Controle de fluxo
134
A vazo da Iase movel deve ser controlada cuidadosamente o que pode ser Ieito de modo re-
lativamente Iacil. Dos sistemas disponiveis o mais simples e o medidor de bolha, que e colocado
apos a coluna. A medio do Iluxo pode ser eIetuada antes da coluna por rotmetro, um tubo cali-
brado no interior do qual Ilutua uma bolinha.
10.2.2 Introduo de amostras
As amostras devem ser materiais volateis ou volatilizaveis. A intro-
duo de amostra e uma etapa critica da cromatograIia gasosa pois a amos-
tra deve entrar rapidamente na coluna, como um 'plug de vapor, no po-
dendo ocorrer decomposio ou Iracionamento da amostra.
Uma amostra liquida e introduzida por uma micro-seringa que per-
Iura um septo de borracha, que da acesso a uma cmara aquecida, em geral
a uma temperatura 50
o
C superior a da coluna, onde a amostra e volatilizada instantaneamente. Vo-
lumes injetados de amostras liquidas variam na Iaixa de 0,1 a 2 L
A injeo pode ser eIetuada por
meio de valvulas, que permitem uma
preciso de cerca de 0,1 contra 1 das
seringas. Em colunas capilares o volume
da amostra pode ser excessivo e pode
usar a split infection quando apenas uma
Irao precisa da amostra, entre 0,1 a
10 do volume injetado, eIetivamente
chega a entrar na coluna.
10.2.3 Forno
As colunas so instaladas no in-
terior de um Iorno para controle da tem-
peratura na separao.
A separao pode ser isotermica,
mas como, em geral, a solubilidade de
um gas em um liquido diminui com o
aumento de temperatura sob variao programada de temperatura diminui-se o tempo de reteno e
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 min
48
o
95
o
142
o
190
o
237
o
285
o
processo
isotrmico
135
o alargamento dos picos mais tardios, aumenta-se a altura dos picos, Iavorecendo sua deteco.
Os Iatores que devem ser considerados so as variaes na solubilidade, volatilidade e esta-
bilidade dos solutos as alteraes no Iluxo do gas de arraste e na estabilidade da Iase estacionaria.
Obviamente a programao de temperatura deve se localizar entre os limites de temperatura maxima
e minima da Iase estacionaria. Um programa simples e deIinido por periodos inicial e Iinal de tem-
peratura constante entre os quais se eIetua uma rampa de aquecimento.
10.2.4 Colunas
O processo de cromatograIia gas-liquido ocorre
no interior de colunas, as quais so basicamente de dois
tipos:
empacotadas: tubos de vidro, ao, cobre ou
aluminio de comprimento entre 0,5 a 5 m e dimetro
interno entre 2 a 4 mm, preenchidas com Iilme de 1 a
10 m de estacionaria sobre suporte (CGL) ou com solido adsorvente (CGS). O Iluxo de gas de ar-
raste varia de 10 a 60 mL min
-1
e presso de 10 a 40 psig na cabea da coluna. So simples, baratas
de baixa resoluo (4000 pratos teoricos) e alta capacidade (10g pico
-1
)
capilares: tubos de silica, vidro ou ao inox, com 5 a 100 m de comprimento e 0,1 a 0,7 mm
de dimetro interno, nos quais um Iilme de 0,1 a 8 m de Iase estacionaria se adere a parede
(WCOT) ou sobre um suporte aderido a parede (SCOT). O Iluxo de gas de arraste varia de 0,5 a 15
mL min
-1
e presso de 3 a 40 psig na cabea da coluna So de alta tecnologia, caras, alta resoluo
(250.000 pratos teoricos) e baixa capacidade (0,1g pico
-1
) .
Picos de mesma area aparecem mais altos e mais estritos em colunas capilares o que deter-
mina maior sensibilidade e melhor relao sinal ruido.
10.2.5 Suportes
Os materiais para empacotamento das colunas na cromatograIia gas-solido, incluindo carvo
ativado, so empregados para separao cromatograIica de substncias em misturas com base nos
processos de adsoro-desoro, que ocorrem na interIace entre a Iase movel gasosa (gas de arraste)
e a superIicie solida sorvente. A reteno e a seletividade so largamente dependentes da area super-
Iicial do sorvente.
Empacotada
Abertas (capiIares)
WCOT
waII coated
open tube
SCOT
suport coated
open tube
136
Por outro lado, na cromatograIia gas-liquido a separao e baseada na distribuio de subs-
tncias entre duas Iases. Neste caso, o material de preenchimento da coluna atua como mero suporte
da Iase liquida a qual determina as propriedades de seletividade da coluna cromatograIica. Assim o
suporte deve ser to inerte quanto possivel e no deve apresentar atividade de superIicie muito em-
bora em alguns casos essa atividade do suporte possa ate ter um eIeito beneIico para a separao
Varios tipos de terra diatomacea calcinada (kieselguhr) so empregados na cromatograIia ga-
sosa sob os nomes de Chromosorb A, G, P e W. os quais apresentam as seguintes propriedades:
Chromosorb Parmetro
A G P W
densidade aparente |g/ml| 0,40-0,48 0,47-0,58 0,38-0,47 0,18-0,24
superIicie especiIica |m
2
/g| 2,7 0,5 4,0 1,0
Carga maxima 25 5 30 15
Chromosorb tipo G, muito inerte, mecanicamente estavel, e tipo W (white) so apropriadas
para separaes analiticas. Os tipos A e P (pink) so destinados para separaes em escala prepara-
tiva.
Os suportes soIrem tratamento para maximizar a inercia como a lavagem com acidos e a si-
lanizao. Nesse sentido so empregadas as designaes: AW, lavagem com acido; AW-DMCS,
lavagem com acido e tratamento com dimetildiclorosilano; HMDS, lavagem com acido para remo-
o de Ierro; HP, tratamento com hexametildisilazano que conIere "high perIormance" com relao
a inativao da superIicie e NAW, somente calcinao sem lavagem com acido e portanto com rea-
o alcalina.
Em resumo os suportes em cromatograIia gas-liquido no devem interagir com a amostra,
apresentar grande superIicie, particulas regulares para empacotamento uniIorme, mecanicamente
resistente, Iaceis de recobrir e de manter a Iase estacionaria. Alem das terras diatomaceas so usa-
dos: tijolos reIratarios, celite, polimeros porosos, perolas de vidro, etc.
10.2.6 Fase mvel
A Iase movel, gas de arraste, deve ser altamente pura, quimicamente inerte, Iacilmente dis-
ponivel e de baixo custo e adequada para o detector empregado. As principais so: nitrognio, usado
no detector de ionizao de chama (DIC); hidrognio, que e inIlamavel, usado no detector de condu-
137
tividade termica (DCT); helio, de alto custo usado em DIC e DCT e a mistura argnio-5 e metano
CH
4
, para o detector de captura de eletrons (DCE).
10.2.7 Fase estacionria
O principal papel da Iase estacionaria e garantir a seletividade na separao. Assim devem
dissolver diIerencialmente os componentes da amostra, mas no reagir irreversivelmente com eles.
Deve proporcionar boa separao em tempo razoavel, no pode degradar e nem introduzir impure-
zas na coluna.
As vantagens do uso de Iases estacionarias liquidas so o grande numero de opes existen-
tes; o alto grau de pureza em que so encontradas; possibilidade de se usar quantidades variaveis e a
simplicidade do preparo. A principal desvantagem e a volatilidade, que pode ser contornada com
Iases que se ligam quimicamente a um suporte solido. Freqentemente na pratica, a Iase liquida e
escolhida devido a sua baixa presso de vapor, de modo que liquidos de alta temperatura de ebulio
e polimeros so escolhidos. O limite minimo de temperatura e o ponto de solidiIicao do liquido ou
uma temperatura na qual a viscosidade aumenta tanto que altera as caracteristicas do solvente. As
Iases estacionarias podem ser:
no polares: hidrocarbonetos ramiIicados (Esqualano) ou com grupos aromaticos (Apie-
son L), metilsiliconas (DC200), polimeros de carborano-silicone (Dexil 300 GC);
polaridade baixa a moderada;
polaridade media. polimero de etileno-glicol (Carbowax 20M);
polaridade elevada: EGA 90-220, DEGS 20-200, etc
A escolha da Iase estacionaria baseia-se na sua seletividade, a qual pode ser avaliada pelo
seu grau de reteno de solutos em relao a uma Iase no polar. Como regra geral, a escolha inicial
deve recair sobre uma Iase no polar e caso esta no Iuncione, passa-se para Iase pouco polar. Al-
guns conselhos gerais podem ser sugeridos: conversar com quem ja tentou uma separao similar;
perguntar levando dados preliminares obtidos em alguma coluna; com amostras liquidas comear
com Iase apolar e pouco polar; consultar a literatura e....rezar
Em relao a concentrao da Iase estacionaria, valores abaixo de 10 em geral permitem
maior eIicincia, menor sangramento, menor tempo de determinao. Concentraes de 15 a 20
permitem analisar um maior numero de amostras e maior Iacilidade em reproduzir a coluna. O reco-
brimento do suporte pela Iase estacionaria e Ieito pela dissoluo desta em um solvente orgnico
138
como acetona, cloroIormio, metanol, diclorometano, que e misturado ao suporte, promovendo-se
posteriormente a volatilizao do excesso de solvente.
10.2.8 Detectores
O detector e o elemento do cromatograIo que responde a presena do componente no mo-
mento em que ele sai da coluna. Podem responder a concentrao de uma substncia, como o detec-
tor de condutividade termica (DCT),ou a unidade de massa que passa por ele na unidade de tempo,
como o detector de ionizao de chama (DIC). As caracteristicas desejaveis de um detector so:
sensibilidade: relao entre resposta ou sinal e a quantidade (ou concentrao) do com-
ponente determinado.
estabilidade: e a capacidade de produzir uma linha de base estavel e de baixa intensidade.
E diIicil se obter adequada estabilidade em detectores muito sensiveis (DIC e DCE)
linearidade: intervalo no qual para cada incremento minimo de concentrao correspon-
de um incremento proporcional no sinal.
faixa de temperatura: o detector deve tolerar temperaturas altas o suIiciente para impedir
condensao em seu interior.
Alem disso, devem ter pequeno volume interno, pequeno tempo de resposta, serem Iaceis
de usar, a prova de erros e robusto.
Os detectores mais importantes so:
Detector de condutividade trmica (DCT):
E um detector de uso geral, simples robusto, no
destrutivo, barato, mas de moderada sensibilidade. Um
gas de arraste, como hidrognio ou helio, que sendo
otimos condutores de calor so os ideais governa a
transmisso de calor entre um Iilamento aquecido e um
bloco metalico. A condutividade termica do gas hidro-
gnio e mais Iavoravel, mas o helio pode ser escolhido
em Iuno de ser menos reativo.
Quando um componente esta presente na Iase movel, a condutividade termica e diminuida e
139
o componente detectado. Para o benzeno, por exemplo, a condutividade termica e 9,9 da do helio.
Variaes na transmisso de calor so detectadas por termistores (sensores cuja resistncia eletrica
varia com a temperatura) que constituem os braos de uma ponte de Wheatstone.
O sinal do DCT e dependente da concentrao do soluto, o que condiciona uma relao in-
versa entre sinal e Iluxo do gas de arraste. Como a resposta e em Iuno da condutividade termica de
cada substncia, deve-se ter um padro para cada soluto de interesse.
Detector de ionizao de chama (DIC)
Este detector Iunciona com dois gases, hidrognio e oxi-
gnio, para produzir uma chama, a qual vem ter acesso o Iluxo de
gas de arraste, Nitrognio ou Helio, por exemplo. As reaes que
ocorrem na chama idealmente no produzem eletrons e assim no
ocorre corrente eletrica entre os eletrodos existentes. Uma alta
voltagem e aplicada aos eletrodos e quando os componentes da
amostra saem da coluna, hidrocarbonetos por exemplo, sua quei-
ma produz ions e eletrons que so coletados pelos eletrodos ge-
rando uma corrente eletrica, cuja intensidade e proporcional a quantidade de especies carregadas
Iormadas, por sua vez proporcional a quantidade de substncia queimada. Como a corrente gerada e
de baixa intensidade, entre 10
-12
a 10
-9
A, ela tem que ser ampliIicada para ser detectada.
O detector de ionizao de chama apresenta alta
sensibilidade, mas requer dois gases a mais que o detec-
tor de condutividade termica, necessita ampliIicador e
trabalha com alta voltagem, sendo por isso mais comple-
xo.
Detector de captura de eltrons (DCE)
O eIluente da coluna passa por cmara que con-
tem dois eletrodos. Nela, moleculas do gas de arraste, em
geral 90 argnio 10 metano, sob a ao de uma Ionte ionizante radioativa (inicialmente o tritio
e atualmente Ni
63
) produzem ions e eletrons livres:
Ar Ar

e
-
.
coIetor
ar
hidrognio
finaI da
coIuna
ignitor
140
Como os eletrodos so polarizados as especies carregadas se dirigem ate eles, se descarre-
gam, originando uma corrente constante entre os mesmos.
Quando moleculas com Iorte aIinidade por eletrons presentes na amostra entram no detector
elas capturam eletrons, diminuindo o numero deles que seriam coletados pelo eletrodo, diminuindo
portanto a intensidade da corrente eletrica de reIerncia:
CX e
-
CX
-
Se ocorrer uma tenso constante entre os eletrodos, os eletrons seriam acelerados e isso di-
minuiria a Ireqncia de choque com as especies do analito. Por isso so aplicados pulsos de tenso
de durao e Ireqncia adequadas, durante os quais os eletrons no so acelerados, o que aumenta a
probabilidade de interao e o sinal analitico tambem. O metano permite trabalhar com pulsos ex-
tremamente rapidos (~ 1mS), criando um meio que Iavorece a desacelerao dos eletrons.
A sensibilidade do DCE e extrema para compostos com alta aIinidade eletrnica, o que o
torna especialmente adequado para a deteco de compostos halogenados, como pesticidas. O sinal
do detector varia com a temperatura, para mais ou para menos, conIorme a substncia, o que requer
controle de 0,3
o
C.
Exige-se precauo por se trabalhar com um radioisotopo, perIeita limpeza de tubulaes,
septos e colunas e ter um cromatograIo dedicado apenas ao DCE.
10.2.9 Quantificao
A cromatograIia, separa componentes, indica a presena de uma substncia mas no a identi-
Iica. Mesmo assim, a analise qualitativa pode ser eIetuada empregando-se, por exemplo, os valores
de tempo de reteno, que so caracteristicos das substncias. A analise quantitativa abrange varios
metodos, aplicaveis quando se tem idealmente um ou mais picos bem resolvidos, ou seja, nos quais
se possa deIinir o comeo, o Iim e o maximo.
Em colunas capilares pode-se relacionar a altura de pico com a concentrao do analito, com
a vantagem de ser um processo simples e rapido, mas que Iornece menor preciso que a medida de
area. A medida de area de pico e mais empregada, sendo determinada por metodos manuais de corte
e pesagem, triangulao e por meios automaticos, como integrao mecnica ou digital e por com-
putador. Uma vez obtida a medida de pico, altura ou area, deve-se estabelecer sua relao com a
141
concentrao do elemento de interesse.
Metodo do padro externo: ao aplicar este metodo deve-se dispor de solues padres con-
tendo todos os componentes da amostra a serem determinados e em concentraes similares a destes
ultimos. Solues padro e amostra devero ser to similares quanto possivel. O calculo baseia-se na
expresso abaixo, assumindo que a resposta seja linear na Iaixa de trabalho e que o mesmo volume
Ioi injetado tanto para amostras como para os padres.
padro
padro
amostra
amostra
| A .|
AREA
AREA
| A | =
A relao entre concentrao de padro e area de pico pode ser obtida por meio de uma curva
de calibrao.
Metodo do padro interno. Uma substncia conhecida e adicionada sob concentrao Iixa
tanto as solues de padres como de amostras. Como o padro interno esta presente em quantidade
constante, ele pode contornar variaes de volume injetado, variaes na coluna e no detector. O
padro interno deve ser estavel e mensuravel sob as condies da analise sem interIerir nela nem
eluir juntamente com os componentes da amostra.
Prepara-se soluo contendo 11,3 mg L
-1
de padro X e 12 mg L
-1
de um padro interno I. In-
jetando-se volumes de 2 L desse padro e de soluo de amostra mais padro interno obtem-se:
Area de pico Componente
Soluo padro Soluo de amostra
X 635 990
I 1009 1071
1
L mg 60 , 16 3 , 11 .
635
990
.
1071
1009
| X |

= =
Note-se que neste exemplo o sinal do padro interno I variou em 6,1 denunciando alguma
alterao das condies do sistema cromatograIico. Esta variao e computada no calculo da con-
centrao de X como um Iator de correo.
142
Existem variaes do procedimento de calibrao com padro interno, inclusive empregando
curva de calibrao.
So apresentados a seguir, resultados de analise de aguardente por cromatograIia gasosa
com detector de ionizao de chama, sob as condies de temperatura: detector, 250
o
C, injetor
200
o
C, coluna: 95
o
C. Fluxo de gases em mL min
-1
: Nitrognio (gas de arraste), 40; Hidrognio, 40 e
ar sintetico,400.
pico
-------------- soluo padro --------
-----
---------- amostra 1 -------
---
------ amostra 2 ---------
compo-
nente
tempo
(min)
area mg/
100mL
Iator A/C tempo
(min)
area mg/
100mL
tempo
(min)
area mg/
100mL
1 aldeido 1.83 4082 7.72 0.001891 1.85 5572 10.54 1.86 3391 7.43
2 acetona 2.75 2064 1.97 0.000954 2.71 522 0.5 2.78 661 0.63
? 3.14 781 - - 3.18 734 - 3.19 - -
3 ester 3.45 3412 8.96 0.002626 3.49 5622 14.76 3.51 5089 13.36
4 metanol 3.79 3340 3.93 0.001177 3.80 5893 6.93 3.81 4217 4.96
ETANOL 4.26 8.56 10
6
- - 4.29 1.05 10
7
- - - -
5 propanol 7.15 64591 19.80 0.000307 6.88 5779 1.77 6.84 1485 0.46
propanol - - - 0.000307 7.28 43945 13.49 7.27 31285 9.59
? 7.54 28931 - - 7.68 15486 - 7.69 15462 -
6 isobutanol 9.69 20915 12.03 0.000575 9.86 38550 22.17 9.87 29857 17.17
7 n-butanol 13.12 2898 2.01 0.000694 13.33 636 0.44 13.32 943 0.65
8 isoamilico 18.99 61670 40.10 0.000650 19.26 111680 72.61 19.19 106730 69.40
9 n-amilico 23.92 6081 4.01 0.000659 - - - - - -
11 SISTEMAS DE ANALISES POR IN1EO EM FLUXO - FIA
11.1 Introduo
A tecnica de analise por injeo em Iluxo, conhecida pela sigla FIA, do ingls Flow
Infection Analvsis, Ioi desenvolvida em 1974 por J. Ruzicka e E.H. Hansen na Universida-
de Tecnica da Dinamarca, Lungby, como uma Iorma especial de analises em Iluxo. FIA
diIere de outra tecnica de analise em Iluxo que se denomina Segmented Flow Analvsis
(SFA), na qual bolhas de ar separam os segmentos individuais de soluo de amostra, resul-
tando em intensa mistura entre amostra e reagentes.
No sistema FIA, um volume conhecido e reprodutivel de soluo de amostra e inje-
tado em um Iluxo continuo de uma soluo transportadora. Em pontos deIinidos do sistema
solues reagentes so introduzidas e se misturam, possibilitando reaes quimicas com a
amostra a medida em esta vai sendo transportada ate o detector. A diIerena Iundamental
com o procedimento manual e que, nem a mistura, nem a reao entre amostra e reagentes,
tem que ser completa. Entretanto, para ser obter um sinal analitico reprodutivel, o tempo de
residncia e a disperso da zona de amostra tm que ser precisamente controlados. O con-
ceito do FIA de baseia em trs principios:
reprodutibilidade na injeo de uma soluo de amostra em um Iluxo continuo
(no segmentado);
reprodutibilidade no tempo de residncia da zona de amostra no sistema e nos
processos que aIetam a amostra;
controle da disperso da amostra, e, conseqentemente, de sua mistura com a so-
luo reagente entre o injetor e o detector.
Mantendo-se constantes parmetros como velocidade de Iluxo, comprimento e di-
metro de tubos, obtem-se reprodutibilidade em um processo dinmico, onde os parmetros
da reao devem ser mantidos constantes. O sistema FIA diIere dos sistemas estacionarios,
pois nestes os processos Iisicos e quimicos devem atingir o equilibrio.
Os metodos espectroIotometricos na regio UV-visivel constituem a maior parte dos
metodos analiticos aplicados em sistemas FIA. Entretanto, a potenciometria, condutimetria
e espectrometria de absoro e emisso atmica so tambem usadas.
145
Pode-se considerar que, em principio, o sistema FIA reproduz as etapas de uma
marcha analitica de um metodo manual. Ele apresenta vantagens de maior preciso nos
resultados, menor consumo de reagentes, maior Ireqncia analitica, menor suscetibilidade
a erros humanos e a contaminaes, menor gerao de residuos, possibilidade de gerencia-
mento de dados por computador e Iinalmente, a possibilidade de emprego de procedimen-
tos inviaveis ou muito diIiceis de serem conduzidos manualmente.
Como exemplo, para determinao de silicio por um metodo espectroIotometrico,
uma aliquota de amostra e transIerida para um balo de 100mL e adiciona-se soluo de
molibdato de amnio em acido sulIurico e espera-se 10 minutos para a Iormao do com-
plexo entre silicio e molibdato de cor amarela. Se o ion IosIato estiver presente, o complexo
entre IosIoro e molibdato tambem ira se Iormar, resultando em interIerncia do mesmo. Em
seqncia, adiciona-se soluo de acido oxalico que destroi o complexo Iormado com o ion
IosIato, eliminando sua interIerncia. Finalmente, adiciona-se soluo de acido ascorbico
para reduzir o complexo amarelo de silicio para um complexo de cor azul, o que aumenta a
sensibilidade do metodo. Espera-se um tempo suIiciente para que a reao se complete,
ajusta-se o volume a 100 ml com agua destilada e mede-se a absorbncia da soluo azul
obtida a 800 nm. Observe-se como essas etapas da marcha analitica esto reproduzidas em
um sistema FIA..
bomba
peristltica
Espectrofotmetro
800 nm
C
R1
R3
R2
200cm 80cm 200cm
amostra
Esquema de sistema FA para determinao de silcio
Um volume de soluo de amostra e injetado na soluo transportadora (C), no caso
e agua destilada. A soluo de molibdato de amnio em acido sulIurico (R1) e admitida no
Iluxo e entra em contato com a amostra na primeira bobina de reao com 200 cm de per-
146
curso. Em seguida so admitidas no Iluxo as solues de acido oxalico (R2) e acido ascor-
bico (R3) e apos cada ponto de conIluncia e colocada uma bobina de reao. O complexo
azul Iormado passa ento pelo espectroIotmetro onde a absorbncia e detectada como um
sinal transiente na Iorma de pico.
A reao de Iormao do complexo azul no se completa, mas mesmo assim um si-
nal de absorbncia reprodutivel e proporcional a concentrao de silicio e obtido. A deter-
minao quantitativa e possivel, pois amostras e solues padres de calibrao reagem da
mesma Iorma no sistema.
11.2 Componentes do sistema FIA
11.2.1 Sistema propulsor das solues
A soluo carregadora, que recebe a amostra, e as solues reagentes incorporadas
posteriormente, so continuamente bombeadas em direo ao detector atraves de uma tubu-
lao plastica. Nesse percurso, o controle exato do tempo entre injeo da amostra e detec-
o do sinal analitico e imprescindivel. Bombas peristalticas com varios canais so as mais
usadas em sistemas FIA para essa Iinalidade, permitindo bombear diIerentes solues ao
mesmo tempo.
Solues reagentes nunca entram em contato com partes da bomba, pois so prope-
lidas pela compresso de tubos plasticos Ilexiveis que as transportam. A vazo de cada so-
luo e estabelecida em Iuno da velocidade de rotao da bomba e do dimetro dos tubos
usados e um codigo de cores dos segmentos que os prendem a bomba Iacilita a identiIica-
147
o da vazo, conIorme se exempliIica na tabela a seguir, para de tubos de Tygon.
----- Vazo (mL min
-1
) ----- Codigo de cores Dim. Int.
(mm)
50 rpm 75 rpm 100 rpm 120 rpm
0,19 0,12 0,17 0,23 0,29
0,38 0,40 0,60 0,79 0,96
1,14 2,80 4,33 5,67 7,00
2,06 7,20 10,60 14,0 16,80
11.2.2 Injetor da amostra
Um volume de amostra deve ser inserido na soluo carregadora ou no Iluxo de re-
agente e isso pode ser eIetuado atraves de um injetor manual. Equipamentos comerciais
para analise em Iluxo empregam valvulas automaticamente controladas.
Esquema de um injetor manual simples
Ala de
amostragem
Tomada de amostra Insero da amostra
descarte
detetor Carregador
Amostra
O volume de soluo de amostra e deIinido por uma ala de amostragem, um seg-
mento de tubo plastico que Iornece volumes variaveis, na maioria das vezes entre 30 a ou
200 L.
Durante a injeo da amostra outros processos podem ocorrer simultaneamente no
148
injetor. Na Iigura a seguir, ilustra-se um processo de remoo de interIerentes por resina de
troca inica em um injetor manual.
H
2
O
L
E
A
L
C
D
L
R
L1
L2
A amostra A e aspirada, passa pela resina R, onde os interIerentes so retidos antes
do preenchimento da ala de amostragem L
2
, que deIine o volume de amostra a ser injetado
no sistema. Enquanto isso, uma soluo eluente E passa pelo injetor e vai a direo ao des-
carte L e a soluo carregadora C Ilui atraves da tubulao e passa pelo detector D. Quando
o injetor e movimentado para a posio de injeo, a amostra e inserida no Iluxo de carre-
gador, se mistura aos reagentes e vai para o detector, enquanto o eluente E passa pela resina
recuperando-a, deixando-a apta para reter os interIerentes da proxima amostra.
valvula de injeo automatica, mostrando as posies de carregamento (A) da amostra e injeo (B)
11.2.3 Tubulao
A B
149
Entre o injetor e o detector existe no sistema FIA um conjunto de tubos que trans-
portam e acessorios que reunem ou separam os Iluxos de solues carregadoras e reagentes.
Nesse percurso so intercaladas bobinas de reao e de mistura de solues, com compri-
mentos variaveis, em geral entre 30 e 200 cm. Esse conjunto por vezes e designado pelo
termo em ingls manifold.
Os tubos usados so em geral de polietileno ou teIlon com dimetro interno entre
0,3 e 1,0 mm, comumente 0,8 mm. ConIorme sera visto mais adiante, existem varios es-
quemas de tubulao nos quais podem ser inseridas colunas de reduo ou de troca de ions,
celulas para diIuso gasosa e unidades de extrao por solvente, entre outros.
11.2.4 Detector
Qualquer sensor que possa ser inserido em uma linha de Iluxo po-
de ser empregado em sistemas FIA. Os detectores oticos so os mais co-
muns, eIetuando medidas de absoro molecular na Iaixa UV-visivel e
absoro atmica, mas tambem so comuns os sensores para medidas
eletroquimicas.
Qualquer espectroIotmetro que possa ser acomodar celulas de
Iluxo continuo pode ser empregado. O volume dessas celulas varia entre
8 a 40 L e o percurso otico e, em geral, de 10mm.
11.2.5 Avaliao do sinal
O sinal obtido em sistemas FIA e do tipo transiente, registrado na Iorma de pico. A
avaliao do sinal e Ieita comumente pela medida altura, mas pode ser Ieita pela area de
pico, ambos em relao a uma linha de base, reIerente a concentrao zero de amostra, ou
seja, ao sinal das solues reagentes. Medidas de area de pico so mais recomendadas para
sinais de baixa magnitude.
A altura do pico registrado graIicamente em papel pode ser medida manualmente
com regua, mas em sistemas comerciais a medida e eletrnica e pode incluir correo de
desvios da linha de base.
11.3 Parmetros caractersticos de sistemas FIA
150
11.3.1 Disperso, tempo de residncia, tempo de lavagem e freqncia analtica
Desde quando introduzida no Iluxo de soluo carregadora e a medida que se mistu-
ra as solues reagentes, a zona de amostra se alarga durante o percurso ate o detector. O
termo usado em sistemas FIA para se avaliar esse alargamento e disperso, a qual traduz ao
mesmo tempo o quanto amostra se dilui e o quanto se mistura com as solues reagentes.
Numericamente a disperso e quantiIicada atraves de um coeIiciente de disperso, D, deIi-
nido pela expresso:
max
o
max
o
H
H
C
C
D = =
onde C
o
e a concentrao do constituinte na amostra e C
max
e a concentrao do constituinte
no elemento de volume correspondente ao maximo do pico.
Na determinao experimental do coeIiciente de disperso se utiliza uma soluo de
um pigmento no lugar da amostra e agua no lugar das solues carregadora e de reagentes.
Injetando-se um volume deIinido de soluo de pigmento registra-se o pico de absorbncia
e determina-se a sua altura maxima H
max
a qual e ento relacionada a absorbncia H
o
da
soluo de amostra no diluida. CoeIicientes de disperso entre 3 a 10 so classiIicados
como medios e indicam que o centro da zona de amostra estara eIetivamente misturado aos
reagentes como requerido na maioria das reaes de Iormao de compostos coloridos.
CoeIicientes menores que 3 so indicativos de disperso limitada e usados em detectores
seletivos, como eletrodo ion seletivo ou em absoro atmica e aqueles acima de 10 so
utilizados para diluies.
Outro parmetro importante e o tempo de residncia, Tr, que corresponde ao tempo
entre a injeo da amostra e o maximo do sinal analitico, ou seja, o apice do pico. O tempo
de lavagem, Tl , corresponde ao tempo entre o maximo do sinal ate o ponto de retomada da
linha de base e ele deIine a Ireqncia analitica, ou seja, o numero de amostras analisadas
por hora. Se Tl e medido em segundos a Ireqncia analitica sera 3600/Tl. Com base na
Ireqncia analitica, vazes e concentraes das solues reagentes calcula-se o consumo
de reagentes por amostra analisada.
Em sistemas FIA a disperso, ou a Iorma do pico, pode ser aIetada pelos Iatores es-
151
peciIicados a seguir, os quais devem otimizados para deIinir sistemas FIA para diIerentes
determinaes analiticas.
11.3.2 Velocidade de fluxo
A velocidade de Iluxo e determinada pelo dimetro interno do tubo e pela velocida-
de de rotao da bomba peristaltica. A medida que a velocidade diminui aumenta-se o tem-
po de residncia da amostra no sistema e a reao se aproxima do equilibrio; a sensibilidade
aumenta, pois picos com maiores alturas so obtidos. Contudo, como o rendimento analiti-
co vai decrescendo, deve-se buscar um compromisso entre esses parmetros visando obter
uma determinao rapida e sensivel.
11.3.3 Volume de amostra injetado
Em uma experincia cujos resultados so mostrados na tabela a seguir, injetaram-se
diIerentes volumes de soluo de um pigmento colorido.
Volume
(L)
H max
(absorbncia)
Disperso Tempo de resi dncia
(s)
50 0,131 2,14 5,7
100 0,169 1,65 6,5
200 0,207 1,35 7,8
400 0,257 1,09 12,6
Maiores volumes de amostra promovem menor disperso: a altura de pico e maior e
a sensibilidade aumenta. Entretanto, a largura do pico tambem aumenta e igualmente o
tempo de residncia, resultando em menor rendimento analitico.
11.3.4 Volume da clula
Para celulas de Iluxo continuo de 8 e 18 L, as mais empregadas em espectroIoto-
metria no existem diIerenas apreciaveis de sensibilidade e tempo de residncia. Para vo-
lumes muito maiores, como 160 L, o pico diminui a altura e se alarga, ou seja, a sensibili-
dade diminui e o tempo de residncia aumenta.
11.3.5 Comprimento de bobina de reao
Injetando-se como amostra um volume de soluo colorida em um Iluxo de agua
como soluo carregadora num sistema FIA simples, observa-se que quanto maior o com-
152
primento L de uma bobina de reao colocada no sistema, menor sera a altura e maior a
largura do pico de absorbncia obtido, resultando em menor sensibilidade, e maior o tempo
de residncia, causando queda do rendimento analitico.
Quando se tem uma reao quimica Iormando um composto colorido, contudo, o
comprimento da bobina deIine o tempo de reao de Iormao do mesmo. Assim sendo a
escolha do comprimento L e uma soluo de compromisso.
11.3.6 Nmero de espiras da bobina de reao.
Um mesmo comprimento L de tubo pode resultar em bobinas com numeros varia-
veis de espiras. O maior numero de espiras aumenta a disperso da zona de amostra, o que
no caso de uma reao quimica resulta em melhor mistura entre amostra e reagentes, con-
seqentemente em maior sensibilidade.
11.3.7 Dimetro interno dos tubos
Maior disperso e obtida para tubos condutores de soluo com maiores dimetros
inter nos, entre 0,5 a 1,0 mm. Para se obter uma disperso limitada so usados tubos de 0,3
ou 0,4 mm de dimetro interno,
11.3.8 Pontos de turbulncia
Pontos de turbulncia na tubulao dos sistemas FIA causam disperso da zona de
amostra e alargamento do pico. Esses pontos de turbulncia ocorrem nas mudanas bruscas
entre um tubo e outro, como nos injetores, conectores e cubetas; dobras nos tubos e na co-
nexo entre tubos de diIerentes dimetros.
11.4 Variaes em sistemas em FIA
11.4.1 Sistema FIA no ramificado
153
amostra
reagente
bobina de
reao
bomba
peristltica
detetor
descarte
A soluo de amostra e injetada diretamente no Iluxo de soluo reagente. Este sis-
tema no permite uma mistura eIiciente entre solues de amostra e de reagente, necessaria
para que uma reao ocorra e seria mais adequado para medida de propriedades basicas da
soluo de amostra como pH e condutividade eletrica.
11.4.2 Sistema FIA ramificado
carregador
reagente
amostra
bobina de
reao
Bomba
peristltica
detetor
descarte
Nos sistemas FIA convencionais, a soluo de amostra e injetada diretamente no
Iluxo de carregador, ou ento continuamente bombeada, seguindo-se mistura com uma ou
mais solues de reagentes e Iinalmente a deteco do produto da reao. A concentrao
do analito e diminuida devido a disperso da zona de amostra durante o percurso para atin-
gir o detector e, conseqentemente, a sensibilidade e reduzida. O inevitavel alargamento do
pico e compensado pela mistura entre as solues de reagentes e amostra.
11.4.3 Sistema FIA reverso
154
bomba
peristltica
carregador
amostra
reagente
bobina de
reao
detetor
descarte
A amostra e usada como Iluxo carregador e o reagente e introduzido no sistema por
uma valvula de injeo; a zona de reagente e diluida pelo Iluxo de amostra. A amostra entra
progressivamente em contato com o reagente a medida que caminha para o detector.
Quando a cinetica da reao e lenta, o aumento do percurso ate o detector, ou seja,
do tempo de residncia, no causa diluio da amostra. O volume de reagente injetado deve
garantir a quantidade necessaria para a reao; o reagente e usado em pequenas quantidades
mas a soluo de amostra deve estar disponivel em grande quantidade.
11.4.4 Mistura de zonas
carregador
reagente
amostra
bobina de
reao
detetor
descarte
bomba
peristltica
carregador
Solues de amostra e de reagentes so introduzidas simultaneamente, ou a diIeren-
tes intervalos de tempo, em dois Iluxos de solues carregadoras. O Iluxo dos dois carrega-
dores deve ser precisamente sincronizado de maneira que reagente e amostra se encontrem
no ponto exato para que a reao entre eles ocorra. Esta tecnica e apropriada quando se
pretende eIetuar determinaes simultneas de diIerentes componentes em diIerentes amos-
tras, evitando a perda de tempo de troca de solues. As quantidades usadas de reagentes e
amostra so bastante reduzidas.
155
11.4.5 Sistemas FIA em duas fases
Os sistemas FIA anteriormente descritos sempre envolveram apenas solues aquo-
sas, mas e possivel se trabalhar com sistemas em duas Iases. A extrao por solventes org-
nicos pode ser conduzida em sistemas FIA, com a vantagem de se trabalhar em sistema
Iechado e utilizar menor quantidade de solvente. Neste caso, uma unidade de extrao e
posicionada antes do detector para separao da Iase orgnica, a qual pode ser de diIerentes
tipos como separao por gravidade, separador T ou por membranas.
A tecnica de diIuso de gas pode ser descrita brevemente atraves de um exemplo
bastante interessante, a determinao de nitrognio amoniacal. Uma soluo de amostra
contendo ion NH
4

e injetada em uma soluo carregadora, a qual se mescla a soluo de

NaOH. A elevao de pH promove a Iormao de NH
3
gasoso, que se diIunde atraves de
uma membrana de PTFE para uma soluo aquosa de indicadores, promovendo a Iormao
de um composto colorido.
A diIuso gasosa pode ser ainda empregada na determinao de CO
2
e de sulIito,
entre outros. A dialise e outro tipo de metodo de separao que tambem pode ser emprega-
do em sistemas FIA..
11.5 Reatores
No esquema dos sistemas FIA podem ser usados reagentes solidos para Iinalidades
especiIicas, contidos em colunas tais como: cadmio metalico para reduo de ion NO
3
-
a
NO
2
-
, resinas de troca inica que podem reter interIerentes ou concentrar o analito, enzimas
imobilizadas, entre outros.
11.6 Determinao espectrofotomtrica de algumas espcies em sistemas FIA .
A maior parte das determinaes em sistemas FIA Iaz uso de metodos espectroIo-
tometricos na regio visivel do espectro eletromagnetico.
Amonio. O ion NH
4

presente na amostra reage com NaOH e a amnia produzida se

diIunde atraves de uma membrana de PTFE para um Iluxo que contem um indicador acido
base causando uma mudana de cor.
Boro: O ion borato Iorma um complexo amarelo com azometina H em tampo de
IosIato pH 7.
156
Cloreto: O ion Cl
-
reage com Hg(SCN)
2
Iormando HgCl
2
ou HgCl
4
2-
, enquanto o
ion SCN
-
liberado reage com ions Fe
3
Iormando um complexo vermelho.
Ferro: Reduo do ion Fe
3
para Fe
2
seguindo-se reao deste com 1,10 - Ienantro-
lina resultando num complexo laranja-vermelho.
FosIato: O ion PO
4
3-
reage com molibdato de amnio em meio contendo acido sul-
Iurico para Iormar um complexo, IosIo-molibdato, que e posteriormente reduzido com clo-
reto estanoso ou acido ascorbico, resultando em complexo de colorao azul.
Nitrato e Nitrito: O ion NO
3
-
e reduzido a NO
2
-
reagindo com Cd metalico contido
em uma coluna. O ion nitrito Iorma um composto diaznio com sulIanilamida e um pig-
mento vermelho-violeta e produzido pela reao com dicloreto de N-(1-naItil) etilenodia-
mina.
SulIato: Leitura de absorbncia resultante da turvao decorrente da Iormao de
BaSO
4
Sulfito. A reao do ion SO
3
2-
com H
2
SO
4
da origem a SO
2
, o qual se diIunde atra-
ves de uma membrana de PFTE para entrar em contato com um Iluxo de soluo de p-
rosanilina e Iormaldeido, Iormando um composto colorido.
Silicato. O ion SiO
3
2-
reage com molibdato de amnio em meio contendo acido sul-
Iurico para Iormar um complexo, silico-molbdato, que e posteriormente reduzido com aci-
do ascorbico, resultando em complexo de colorao azul. O ion IosIato e um interIerente
pois tambem Iorma um complexo inicial, mas ele pode ser destruido por meio da adio de
acido oxalico.