Instituto Politcnico da Guarda

Escola Superior de Sade

Curso de Farmcia
2ano -2Semestre







Prtica Laboratorial de Microbiologia II


Relatrio n1 Epidemiologia transmisso de microrganismos










Docente: Miguel Pessanha Grupo de trabalho: Ana Amaral, n7003518
Ana Oliveira, n7003519
Liliana Reis, n7003541
Lus Botas, n 70033


Guarda, Abril de 2014




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ndice

Objetivos ....................................................................................................................................... 3
Introduo ..................................................................................................................................... 3
Materiais ....................................................................................................................................... 4
Procedimento experimental ......................................................................................................... 5
Resultados ..................................................................................................................................... 7
Discusso de resultados ................................................................................................................ 8
Concluso ...................................................................................................................................... 8
Bibliografia .................................................................................................................................... 9






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Objetivos

Esta atividade prtica teve como objetivo principal a avaliao da transmisso
de agentes microbianos atravs de contato direto, como por exemplo atravs das
mos, e indireto, atravs de fomites.

Introduo

Com esta actividade laboratorial pretendia-se avaliar a transmisso de agentes
microbianos, nomeadamente colnias de bactrias, atravs do contacto directo de
mos de pessoa para pessoa e indirecto, isto , atravs de fomites. Um fomite
qualquer objeto inanimado ou substncia capaz de absorver, reter e transportar
organismos contagiantes ou infecciosos (de germes e parasitas), de um indivduo a
outro.
Em microbiologia, designamos epidemiologia como o estudo de como um
agente infeccioso especfico sobrevive e se propaga atravs de um grupo de indivduos
susceptveis. A forma como ocorre a propagao do microrganismo o modo de
transmisso da doena. Sendo que o conhecimento destes pontos essencial para o
desenvolvimento de mtodos que diminuam ou interrompam a incidncia da doena
na populao.
Todos os agentes infecciosos tm o seu habitat natural. Este consiste num meio
no qual os organismos encontram as condies necessrias ou ideais para a sua
sobrevivncia, que podem ser no solo, na gua, no organismo de um dado animal, ou
at mesmo nos humanos, entre outros. Estes locais so designados por fontes de
infeco, pois atravs deles que os agentes conseguem penetrar no ser humano. A
maior parte dos agentes patognicos apenas consegue viver se estiver num local
favorvel, e morre caso seja exposto a condies adversas. No entanto, existem outros
que so capazes de resistir nessas circunstncias, encontrando formas de resistncia,
como por exemplo, a alterao da sua estrutura ou manterem-se em latncia at que
as condies do meio estejam favorveis para a sua sobrevivncia e proliferao.
Por norma, as fontes de infeco so exgenas, isto , situadas fora do
organismo do indivduo afectado, podendo encontrar-se na terra, gua, objectos
contaminados, entre outros. Noutros casos, as fontes de infeco so endgenas,
estando presentes no prprio indivduo, como por exemplo, na pele. Neste caso,
poder acontecer, por exemplo que a flora comensal, no prejudicial, encontre
condies favorveis sua proliferao num outro local do organismo, tornando-se
assim fonte de contaminao e infeco.




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Normalmente os meios mais comuns de entrada de um agente infeccioso no
organismo so atravs do tracto digestivo, como por exemplo na ingesto dealimentos
mal confeccionados, legumes mal lavados, gua contaminada, entre outros; e do
tracto respiratrio atravs do ar que respiramos. Ou ento atravs do uso de objectos
contaminados. Sendo que a tomada de medidas como a lavagem das mos antes e
depois das refeies, ou em contacto com objectos de extrema importncia para
evitar muitos microrganismos de entrarem nos nossos organismos.
Outra forma de transmisso de microrganismos atravs das fomites, que
como foi referido anteriormente, resume-se ao contacto directo com objectos ou
pessoas que estejam contaminados com um agente infeccioso e se podem transferir
de individuo para individuo. Existem diversos exemplos: um garfo, um prato, um
cateter, sendo que estas esto particularmente associadas a infees adquiridas nos
hospitais, pois so possveis vias de transmisso de agentes patognicos entre doentes
ou via profissionais de sade. Destacando mais uma vez a lavagem de mos como
prioridade no controlo da transmisso por fomites.
A bactria usada neste trabalho a Escherichia coli (abreviadamente, E. coli).A
E. coli uma das bactrias mais comuns no Homem. Assume a forma de bastonete e
pertence famlia Enterobacteriaceae. uma bactria Gram negativo, aerbia e
anaerbia facultativa. Possui mltiplos flagelos dispostos em volta da clula, e possui
tambm fmbrias ou adesinas que permitem a sua fixao. Muitas produzem
exotoxinas. O seu habitat natural encontra-se no lmen intestinal dos seres humanos e
de outros animais de sangue quente. So susceptveis aos ambientes secos, nos quais
no resistem. Tal como outras bactrias Gram negativo, possui lipopolissacrido (LPS),
que activa o sistema imunitrio de forma desproporcionada e a vasodilatao
excessiva provocada pelas citocinas produzidas pode levar ao choque sptico e morte
em casos de septicmia. A E. coli uma das principais responsveis pelo aparecimento
de gastroenterites, infeces urinrias, colecistite, apendicite, peritonite, meningite e
septicmia.
Materiais

Placas de Petri;
Meio de cultivo TSA (TrypticaseSoy Agar);
Inculo (meio de cultura contendo microrganismos, ex: E. coli);
Luvas de ltex;
Tubos de cultura;





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Procedimento experimental

1 - Dividir 2 placas, A e B, com meio de cultivo TSA, em quatro seces.
a. Na placa A, numerar as seces, A1, A2, A3 e A4
b. Na placa B, numerar as seces, B1, B2, B3 e B4

2 - Oito alunos calam, em ambas as mos, luvas de latex e colocam-se em duas filas,
Ae B, de 4 elementos cada (A1, A2, A3, A4 e B1, B2, B3, B4).

3 - O professor, que previamente tambm calou luvas de latex, toca com o polegar de
umadas mos num tubo de cultura que est contaminado no exterior e com o polegar
da outramo noutro tubo de cultura mas que no est contaminado no exterior.

4 - O professor toca com o polegar da mo direita no polegar da mo direita do aluno
A1(Figura 1).

5 - O aluno A1 toca com o polegar da mo direita no polegar da mo direita do aluno
A2.

6 - O aluno A2 toca com o polegar da mo direita no polegar da mo direita do aluno
B3.

7 - O aluno B3 toca com o polegar da mo direita no polegar da mo direita do aluno
A4.

8 - Todos os alunos A1, A2, B3 e A4, tocam, com o polegar da mo direita, na superfcie
do agar, no quadrante da placa de cultivo correspondente.

9 - Os alunos retiram assepticamente as luvas (com a mo esquerda retiram primeiro a
luvada mo direita (que pode estar contaminada) e depois com a mo direita, j sem
luva,retiram a luva da mo esquerda. As duas luvas devem ser imediatamente
colocadas numsaco de autoclave para posteriormente serem descontaminadas. Os
alunos devem lavarimediatamente as suas mos utilizando um desinfetante/anti-
sptico.

10 Seguidamente, o professor toca com o polegar da mo esquerda no polegar da
modireita do aluno B1.

11 - O aluno B1 toca com o polegar da mo direita no polegar da mo direita do aluno
B2.




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12 - O aluno B2 toca com o polegar da mo direita no polegar da mo direita do aluno
A3.

13 - O aluno A3 toca com o polegar da mo direita no polegar da mo direita do aluno
B4.

14 - Todos os alunos B1, B2, A3 e B4, tocam, com o polegar da mo direita, na
superfcie doagar, no quadrante da placa de cultivo correspondente.

15 - Os alunos B1, B2, A3 e B4 devem proceder como em 9.

16 - Incubar as placas invertidas a ~ 37C durante 48h.



A0
(mo direita do
professor)
B0
(mo esquerda do
professor)
A1
A2
A3
A4 B4
B3
B2
B1
Figura 1 Ilustrao do procedimento




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Resultados

Aps 48 horas de incubao, os resultados desta atividade laboratorial foram os
apresentados em seguida (Figura 2 e Figura 3).
Como se pode observar, os resultados obtidos so duas placas de petri, com
meio de cultura TSA (placa A e B), as quais foram divididas em 4 quadrantes,
enumerados de 1 a 4. Em cada quadrante encontra-se a marca do polegar direito dos
respetivos alunos. Foram analisadas as colnias obtidas, registando o nmero, tipo,
tamanho e cor das mesmas.

Figura 2 - Placa A, com as respetivas colnias
Figura 3 - Placa B, com as respetivas colnias




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Conforme a figura 2 (Placa A), podemos observar que existem diferentes
colnias em todos os quadrantes, facto que pode ser comprovado pela diferena de
cor, forma e tamanho das mesmas, presentes nos quadrantes da placa. Pudemos
observar a existncia de colnias amarelo-torradas e colnias com uma tonalidade
esbranquiada.
Na figura 3, que diz respeito placa B, pudemos observar o mesmo que na
figura 2, quanto s colnias de bactrias (no que diz respeito sua cor, tamanho e
forma), no entanto, nesta placa, tambm se encontram bactrias em todos os
quadrantes, algo que no era esperado.


Discusso de resultados

Da anlise das placas A e B podemos verificar que o tubo A era o que se
encontrava contaminado (tubo respectivo mo direita do professor). Sendo que a
placa A apresenta em todos os seus quadrantes colnias de bactrias, com excepo
do quadrante correspondente ao aluno A3 que foi o que contactou com o aluno B2,
que no se encontrava contaminado.
Podemos tambm, observar que os quadrantes respectivos placa A, nomeadamente
A1, A2 e A4 apresentam muitas mais bactrias que os da placa B, contrariamente aos
quadrantes B1, B2 e B4.
As colnias que se podem observar nos quadrantes da placa B, com excepo
do quadrante B3, (respectivo ao cruzamento com a fonte de contaminao) no era
suposto aparecerem. Isto pode ser explicado pelo uso de luvas no estreis, atravs do
contacto com o ar da sala que poderia estar contaminado com microrganismos,
contacto com superfcies ou roupas tambm contaminadas, levando a que a
preparao ficasse infetada com microrganismos que no os manipulados e,
consequentemente, no obtivssemos o resultado esperado.

Concluso

Atravs da realizao desta atividade experimental pudemos comprovar que o
meio onde nos encontramos est repleto de microrganismos, tanto no ar, como nas
superfcies e objetos, na gua e na terra. Deste modo, consideramos esta atividade
experimental de extrema importncia, j que atravs de uma prtica simples e




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didctica, pudemos observar o quanto o ar que nos rodeia est repleto de
microrganismos.
Aps a realizao desta atividade experimental pudemos verificar a presena
de diversas colnias e consequentemente, diferentes bactrias, com caractersticas
variadas e presentes em diferentes indivduos, quando apenas se esperava a presena
da bactria utilizada neste procedimento, a E. Coli. Este facto pode ser justificado pelo
simples facto da atividade experimental no ter sido realizada em ambiente estril e
haver sempre contaminaes no esperadas aquando da realizao de qualquer
atividade nestas condies. Podemos afirmar que nos encontramos na presena de
uma fomite, via de contgio indireta, quando o professor toca na placa contaminada,
estando, assim, a albergar bactrias nas suas luvas. Nos passos seguintes do circuito de
simulao de contgio, podemos observar contgio directo, j que este feito de
aluno para aluno diretamente, mais propriamente, de mo em mo.
Como j foi referido anteriormente, esta atividade no foi realizada em
ambiente estril, nem com as devidas precaues que se deveriam ter tido para evitar
a contaminao das luvas e restante material utilizado, sendo que por isso, as colnias
da placa B, com excepo do quadrante B3, apareceram contaminadas.
Esta atividade experimental foi-nos bastante til, j que permitiu-nos aprender
e investigar sobre as diferentes fontes de infeo por microrganismos, bem como as
vias de transmisso, sendo que alguns microrganismos apenas conseguem penetrar o
humano de uma forma, enquanto outros conseguem-no fazer das mais diversas
maneiras. Pudemos ainda reforar a ideia de que as mos so o principal veiculo de
transmisso de microrganismos e, portanto, a lavagem das mos um passo essencial
para o controlo de infees.



Bibliografia


Powerpoints fornecidos pelo docente Miguel Pessanha e respectivo protocolo
experimental da atividade;
http://pt.wikipedia.org/wiki/Infec%C3%A7%C3%A3o;
pt.wikipedia.org/wiki/Fmite
http://www.ccih.med.br/guia-isolamento2010/guia6.pdf;
http://www.anvisa.gov.br/hotsite/higienizacao_maos/conteudo/c_higiene.htm