INDICE

Pg.
1. INTRODUO....................................................................................................................................2
1. 1 Objectivos do trabalo.......................................................................................................................2
2. !ETODO"O#I$ DO TR$%$"&O....................................................................................................'
'. CRO!$TO#R$(I$ ) !*todos de se+ara,-o .................................................................................../
/. Cro0atogra1ia co0 1ase l234ida )C"....................................................................................................5
/. 1. Caracteristicas das 1ases 06veis 4sadas e0 C"...............................................................................5
/. 2. Caracteristicas das 1ases estacio7rias 4sadas e0 C".....................................................................8
/. ' Caracter2sticas das col47as 4sadas e0 C".........................................................................................8
/. / E34i+a0e7to +ara C"........................................................................................................................8
/. 5. $s t*c7icas 4sadas 7a C"..................................................................................................................9
/. 5. 1. Cro0atogra1ia l234ido:s6lido o4 +or adsor,-o ; C"<..................................................................9
/. 5. 2. Cro0atogra1ia de troca i67ica ; CTI............................................................................................=
/. 5. ' Cro0atogra1ia l234ido:l234ido o4 +or +arti,-o : C"".................................................................1>
/. 8 $s va7tage7s e li0ita,?es da C".....................................................................................................1>
/. @ $+lica,?es da C".............................................................................................................................11
5. CRO!$TO#R$(I$ E! C$!$D$ (IN$ ; T"C...........................................................................12
8. CRO!$TO#R$(I$ CO! ($<E #$<O<$ ; C#...........................................................................1'
8. 1. T*c7icas 4sadas e0 C#..................................................................................................................1'
8. 2. (ase estacio7ria 06vel s6lida.......................................................................................................1/
8. '. (ase estacio7ria l234ida.................................................................................................................1/
8. /. E34i+a0e7tos +ara C#..................................................................................................................1/
8. 5. $7lise 34alitativa..........................................................................................................................1@
8. 8. $7lise 34a7titativa........................................................................................................................19
8. @. $+lica,?es.......................................................................................................................................19
$7lise co0+arativa e7tre a C" e a C#..................................................................................................1=
@. E"ECRO(ORE<E..............................................................................................................................21
@. 1. Di1ere7tes ti+os de electro1orese....................................................................................................22
@. 2. Classi1ica,-o da electro1orese.........................................................................................................2'
@. '. $+lica,?es +rticas da electro1orese...............................................................................................2'
CONC"U<O........................................................................................................................................2/
%I%"IO#R$(I$....................................................................................................................................25
1. INTRODUO
Os +rocessos de se+ara,-o de 0ist4ras co7stit4e0 objecto de est4do 7o 047do 0oder7oA dado a s4a
co0+leBidade +ara certas 0ist4ras. Por 40 ladoA +roc4ra;se ide7ti1icar os co0+o7e7tes das 0es0asA e
+or o4tro ladoA +roc4ra:se +4ri1ic:los +ara +osteriores est4dos a +artir das s4as +ro+riedades.
Dada a co0+leBidade de certas 0ist4rasA te0 se est4dado vrias t*c7icasA +ara dar vaC-o a essa
de0a7da. U0a dessas t*c7icas * a cro0atogra1iaA 34e * 04ito 4sada +ara a se+ara,-o de 0ist4ras
co0+leBas 7o 047do act4al e0 +rocessos i7d4striais e de a7lise 3420ica.
$l*0 de se abordar a cro0atogra1ia co0o 0*todo de se+ara,-o de 0ist4rasA * i0+orta7te
co0+ree7der o co0+orta0e7to das +art2c4las 34a7do s4b0etidas a 40 ca0+o el*ctricoA 34e +ode ser
eB+licado a +artir de 40 1e760e7o de7o0i7ado electro1orese.
O +rese7te trabalo 1aC 40a abordage0 sobreD
$ cro0atogra1ia co0o 0*todo de se+ara,-o de 0ist4rasE
$ electro1orese co0o 40a +ro+riedade el*ctrica das sol4,?es.
1. 1 Objectivos do trabalho
1. 1. 1. Objectivos gerais
$bordar a cro0atogra1ia co0o 0*todo de se+ara,-o de 0ist4rasE
$bordar a elecrtro1orese co0o +ro+riedade el*ctrica das sol4,?es.
1. 1. 2. Objectivos especficos
!e7cio7ar os ti+os de cro0atogra1iaE
CaracteriCar os ti+os de cro0atogra1iaE
Descrever alg47as va7tage7sA li0ita,?es e as t*c7icas 4sadas 7a cro0atogra1iaE
Descrever os e34i+a0e7tos e os 0odos de 147cio7a0e7to de alg47s cro0at6gra1osE
De1i7ir a electro1oreseE
!e7cio7ar os ti+os de electro1oreseE
!e7cio7ar alg40as a+lica,?es da cro0atogra1ia e da electro1orese.
2
2. !TODO"O#I$ DO TR$%$"&O
Co7s4lta bibliogr1ica ; co7sisti4 7a recola e a7lise de todo 0aterial bibliogr1ico
dis+o72velA relacio7ado co0 os te0as a abordar.
Pes34isa 7a I7ter7et.

'
'. (RO$TO#R$)I$ * +todos de separa,-o .
O botF7ico r4sso !icail <e0e7ovic TsGett * 7or0al0e7te tido co0o descobridor da cro0atogra1ia
7o i72cio do s*c. HH. Uso4 40a col47a de carbo7ato de clcio +ara se+arar +ig0e7tos de 1olas
arrasta7do:os co0 40 solve7te e se+ara7do:os 740a s*rie de ba7das coloridas.
Crio4 assi0 o ter0o cro0atogra1ia )do grego Iro0aJgra+iaA o registo da cor). De+ois de TsGettA
04itos cie7tistas 1iCera0 vrias co7trib4i,?es +ara o ava7,o da teoria e da +rtica da cro0atogra1ia e
esti0a:se 34e act4al0e7te cerca de 8>K das a7lises 1eitas 7o 047do e7volve0 a cro0atogra1ia.
$ cro0atogra1ia * esse7cial0e7te 40 0*todo 12sico de se+ara,-o e0 34e os co0+o7e7tes a sere0
se+arados s-o distrib42dos e7tre d4as 1asesA 40a das 34ais estacio/0ria )40 s6lido o4 40 l234ido. e
o4tra 12vel ) 34e co7siste e0 40 1l4ido gasoso o4 l234ido. atrav*s da +ri0eira. $ cro0atogra1ia
ocorre co0o res4ltado de +rocessos re+etidos de adsor,-o e desor,-o d4ra7te o 0ovi0e7to dos
co0+o7e7tes da a0ostra ao lo7go da fase estacio/0riaA e a se+ara,-o * devida L di1ere7,a de
co7sta7tes de distrib4i,-o de cada 40 dos co0+o7e7tes da a0ostra.
$ disti7,-o e7tre os +ri7ci+ais 0*todos cro0atogr1icos * 1eita e0 ter0os das +ro+riedades da 1ase
06vel. Deste 0odo te0os os seg4i7tes ti+os de cro0atogra1iaD
Tipos )ase 12vel )ase estacio/0ria
Cro0atogra12a e0 +a+el "234ido <6lido
Cro0atogra12a e0 ca0ada 1i7a "234ido <6lido
Cro0atogra12a de gases #s <6lido o4 l234ido
Cro0atogra12a l234ida
e0 1ase i7versa
"234ido )+olar.
<6lido o4 l234ido
)0e7os +olar.
Cro0atogra12a l234ida
e0 1ase 7or0al
"234ido
)0e7os +olar.
<6lido o4 l234ido
)+olar.
Cro0atogra12a l234ida
de i7tercF0bio i67ico
"234ido )+olar. <6lido
Cro0atogra12a l234ida de eBcl4s-o "234ido <6lido
/
Cro0atogra12a l234ida
de adsor,-o
"234ido <6lido
Cro0atogra12a de
1l4idos s4+ercr2ticos
"234ido <6lido
3. (ro1atografia co1 fase l45ida *(".
$ C" e o 0ais 7ovo e 0ais i0+orta7te 0e0bro de 40a 1a02lia i7teira de tec7icas de se+ara,-o.
Mrios 7o0es te0 sido 4tiliCados +ara de7o0i7ar esta 7ova t*c7ica deA tais co0oD
$lta velocidadeE
$lta +ress-oE
$4to dese0+e7oE
$lta resol4,-oE
$lta e1iciN7cia
3. 1. (aracteristicas das fases 12veis 5sadas e1 ("
$s +ri7ci+ais caracteristicas 34e deve0 a+rese7tar toda 1ase 06vel +ara ser Otil 7a C" s-oD
<er de alto gra4 de +4reCa o4 de 1cil +4ri1ica,-o ; +er0ite realiCar a7lises de alta
se7sibilidade co0 detectores +or 1l4orescN7cia o4 +or absordF7cia 7o 4ltravioleta.
Dissolver a amostra sem decompor os seus components ; a a0ostra deve ser solOvel 7a 1ase
06vel e 7-o so1ra deco0+osi,-oA +ara 34e +ossa ser tra7s+ortada atrav*s da col47a se0 34e
se4s co0+o7e7ts se 0odi1i34e0.
No decompor ou dissolver a fase estacionria.
Ter baixa viscosidade ; a baiBa viscosidade da 1ase 06vel * 04ito i0+orta7te 7a e1iciN7cia da
se+ara,-oA +or34e a viscosidade i71l4i 7o e1eito de tra7s1N7cia da 0assa e7tre a 1ase
estacio7ria e a 1ase 06vel.
Ser compatvel com o tipo de detector utilizado ; a 1ase 06vel deve ser co0+act2vel co0 o
detector e0+regadoA o 34al * +artic4lar0e7te i0+orta7te 7o caso de el4i,-o +or gradie7teA
+or34e a 04da7,a 7a co0+osi,-o da 1ase 06vel +ode a1ectar o 147cio7a0e7to do detector.
Ter +olaridade ade34ada +ara +er0itir 40a se+ara,-o co7ve7ie7te dos co0+o7e7ts da a0ostra.

5
3. 2. (aracteristicas das fases estacio/0rias 5sadas e1 ("
$s +ri7ci+ais caracteristicas 34e deve0 a+rese7tar toda 1ase estacio7ria s-oD
<6lidos rig2dos )<ilica.A se0i:rig2dos )Poliestire7o e7tre cr4Cado co0 Divi7ilbe7Ce7o. o4 7-o
rig2dos )$garose o4 DeBtrose.E
Part2c4las +orosas o4 +el2c4laresE
Part2c4las es1*ricas o4 irreg4larsE
Part2c4las co0 di1ere7tes diF0etro
3. ' (aractersticas das col5/as 5sadas e1 ("
$s col47as s-o co7stit4idas de 40 +eda,o de t4bo de alg40 0aterial i7erteA de dia0etro i7ter7o
47i1or0e ca+aC de resistir Ls +ress?es e0 34e ser 4sado. O a,o i7oBidvel * o 0ais 4sado e7tre todos
os 0ateriais.
EBiste0 ta0b*0 alg40as col47as 1eitas co0 vidro de +aredes grossasA 0as a+rese7ta0 o
i7co7ve7ie7te de 7-o se co7seg4ir co7ec,?es ade34adasA e7tre o vidro e o 0etalA 34e resista0 a altas
+ress?es se0 vaCa0e7to.
$ ca+acidade da col47a * deter0i7ada +elo se4 co0+ri0e7toA diF0etro e 0aterial de receio.
3. 3 !45ipa1e/to para ("
8
1. eservat!rio da fase m!vel ; +ode:se 4tiliCar reci+ie7tes de vidroA a,o i7oBidvel o4 +lsticos
i7ertes. $ ca+ta,-o da 1ase 06vel geral0e7te * 1eita atrav*s de 40 1ilroA +ara re0over +art2c4las 34e
+ode0 obstr4ir e estragar o siste0a de bo0beaa0e7to e col47a. $ 1ase 06vel * 1iltrada a7tes de
e7cer 7o reservat6rio.
". Sistema de bombeamento ; a bo0ba te0 34e +ro+orcio7ar 40a vaC-o raCovel atrav*s da col47a
+ara 34e a a7lise 7-o seja le7ta e 40a vaC-o co7sta7te +ara 7-o atra+alar o siste0a de detec,-o.
EBiste0 dois ti+os de bo0basA as 0e7F7icas e as +7e40ticas.
#. $edidor e controlador de presso ; a +ress-o de+e7de da +er0eabilidade da col47aA da viscosidade
de 1ase 06velA do diF0etro das +art2c4las de 1ase estacio7ria e do co0+ri0e7to de o7da da col47a.
Os 0o7itores de +ress-o s-o i0+orta7tesA serve0 +ra o diag76stico +ara o+ti0iCar a se+ara,-o e
i7dicar +roble0as co0 o siste0aA be0 co0o os vaCa0e7tos. EBiste0 dois ti+os de 0edidor 34e s-oD
bo4rdo7 o4 dia1rag0a e tra7sd4tor da +ress-o.
%. &lvulas para amostragem ; a a0ostrage0 * i7trod4Cida 7a vlv4la +or 0eio de 40a
0icrosseri7gaA 34e deve e7cer o es+a,o i7ter7o de 40a +e34e7a +or,-o de t4bo ca+ilar de a,o. $
a0ostra * i7jectada 7a col47aA deste 0odo +ode:se i7jeitar a 40a +ress-o 34al34er. $s vlv4las +ara
a0ostrage0 s-o 1abricadas so0e7te de 0eteriais i7ertesA co0o te1lo7 e a,o i7oBidvelA e se4
dese0+e7o * tal 34e resiste0 a +ress?es 04ito elevadas.
'. Detectores usados na () ; 40a i7str40e7ta,-o 0elor * re34erida +ara a C" e0 relac,-o L
se7sibilidade dos detectores +ara 0o7otoriCa,-o do e1l4e7te 34e sai da col47aA +or34e i71eliC0e7te as
+ro+riedades 12sicas o4 12sico:3420icas da a0ostra e 1ase 06velA 04itas veCesA s-o si0ilares.
Ti+os de detectoresD
Detectores +or absor,-o 7o UM e 7o vis2vel ; s-o 4sadas +ara co0+ostos 34e absorve0
co0+ri0e7tos de o7da selectivoE
Detectores +or 1l4orescN7cia ; s-o 4sadas +ara co0+ostos o4 derivados 34e 1l4orece0E
Detectores +or absor,-o 7o IM ; s-o 4sadas +ara a7alisar siste0as de C"E
@
Detectores +or 27dice de re1ra,-o ; * 4sada +ara todo ti+o de a0ostra
*. egisto dos dados ; +ara registar os dados obtidos +elo detectores 7a C" +ode:se 4sar 40
registrador o4 40 i7tegrador o4 40 0icroco0+4tador. $ 147,-o * re+rese7tar e0 40 registro gr1ico o
si7al electrico e0itido +elo detector.
3. 6. $s t+c/icas 5sadas /a ("
& ci7co ti+os di1ere7tes de 1ases estacio7rias 34e i0+lica0 e0 ci7co 0eca7is0os di1ere7tes de
realiCar a C". !edia7te a si0+les troca de col47a e 1ase 06vel * +oss2vel 4tiliCar cada 40 deles.
Mrios +roble0as e0 se+ara,-o +or cro0atogra1ia +ode0 ser resolvidos +or 0ais de 40 0*todo.
O4tros +ode0 so0e7te ser tratados +or 40 0*todo es+ec21ico. $s ci7co t*c7icas 4tiliCadas 7a C" s-oD
Cro0atogra1ia l234ido:s6lido o4 +or adsor,-oE
Cro0atogra1ia l234ido:l234ido o4 +or +arti,-oE
Cro0atogra1ia l234ida co0 1ase ligadaE
Cro0atogra1ia +or eBcl4s-oE
Cro0atogra1ia +or troca i67ica.
$ seg4ir ser-o citadas alg40as 7o,?es gerais sobre os 0eca7is0os da C" e as classes de co0+ostos
o7de eles s-o 0ais e0+regados.
3. 6. 1. (ro1atografia l45ido7s2lido o5 por adsor,-o 8 ("9
O 0eca7is0o de se+ara,-o da C"< o4 +or adsor,-oA baseia:se 7a co0+eti,-o 34e eBiste e7tre
0il*c4las da a0ostra e as da 1ase 06vel e0 oc4+ar os s2tios activos 7a s4+er12cie de 40 s6lido )1ase
estacio7ria. O e34il2brio estabelecido *D
$dsorve7te
<olve7te <ol4to
Para a 0aioria das se+ara,?es realiCadas +or adsor,-o 4sa:se +art2c4las total0e7te +orosas. P4ase
todas se+ara,?es s-o li0itadas a alg47s ti+os de adsorve7tesD a <ilica e a $l40i7a. $ rete7,-o e a
se+ara,-o 7estes adsorve7tes s-o geral0e7te si0ilares. De +re1ere7cia s-o retidos os co0+o7e7tes
0ais +olares da a0ostra. $ orde0 4s4al de el4i,-o *D idrocarbo7etos sat4radosA ole1i7asA
9
idrocarbo7etos aro0ticosA aletos orgF7icosA s4l1etosA *teresA *steresA alde2dosA ceto7asA lcooisA
a0i7asA a0idasA cidos carboB2licos.
<e o adsorve7te +oss4i 40a s4+er12cie +olarA gr4+os a+olares ter-o +o4ca a1i7idade +or esta s4+er12cie
e 7-o ir-o deslocar a 0ol*c4la da 1ase 06vel ; 7-o ser-o retidos. #r4+os 147cio7ais +olaresca+aCes de
1or0ar +o7tes de idrog*7io ter-o 1ortes a1i7idades +ela s4+er12cie ; ser-o 1orte0e7te retidos.
3. 6. 2. (ro1atografia de troca i2/ica 8 (TI
Na cro0atogra1ia de troca i67ica )CTI.A a 1ase estacio7ria * co7stit4ida +or gr4+os cati67icos o4
a7i67icos ligados 34i0ica0e7te a +art2c4las +orosas de resi7as +oli0*ricas )7or0al0e7te 40a resi7a
Poliestire7o e7tre cr4Cada co0 Divi7ilbe7Ce7o ; DM%.A a <ilica co0 ca0ada +elic4lar )+art2c4la
v2trea de 1or0a es1*rica recoberta co0 ca0ada 1i7a do co+ol20ero Poliestire7o.A as 0icro+art2c4las
+orosas de <ilica co0 gr4+os trocadores 34i0ica0e7te ligados.
Os gr4+os 34i0ica0e7te ligadosA +rese7tes e0 todo ti+o de 0aterial de traca i67icaA s-oD
: <O'
:
: trocadores 1ortes de cati?esE
:CO2
:
: trocadores 1racos de cati?esE
:NR'
J
: trocadores 1ortes de a7i?esE
:N&2R
J
: trocadores 1racos de a7i?es.
$s liga,?es catiQ7icas s-o ad34iridas co0ercial0e7te 7a 1or0a de sais de s6dio )Na
J
. o4 de i-o
idrQ7io )&J. e as a7iQ7icas 7a 1or0a de cloretos )Cl
:
..
Os gr4+os i67icos tN0 40 co7tra:i-o )co0 carga o+osta. 34e +ode ser deslocado +elos i?es da 1ase
06vel de carga si0ilar a ele. Por eBe0+loA +ara 40a resi7a trocadora de cati?esA te0:se o e34il2brio
e7tre o co7tra:i-o Na
J
e o cati-o da a0ostraA !
J
D
!
J
J R:<O'
:
Na
J
Na
J
J R:<O'
:
!
J
EBe0+los caracter2sticos dos co0+ostos se+arados +or CTI s-o cidos carboB2licosA a,4caresA
a7alg*sicosA vita0i7asA a7i?es i7orgF7icos e cati?es 0etlicos o4 co0+leBos. Co7t4doA esta t*ci7ica
+ode ser ta0b*0 a+licada 7a se+ara,-o de +e+t2deosA a0i7ocidos e cidos 74cl*icosA 34e +ode0 se
io7iCar e0 sol4,?es co0 +& devida0e7te ta0+o7ado.
=
3. 6. ' (ro1atografia l45ido7l45ido o5 por parti,-o 7 (""
$ C"" * 4sada +ara a se+ara,-o de vrios a0i7ocidosA 4sa7do 40a 1ase estacio7ria de g4a e0
<ilica e Cloro16r0io co0o 1ase 06vel. O 0eca7is0o de se+ara,-o 7este ti+o de cro0atogra1iaA o4
0eca7is0o de distrib4i,-o co0o ta0b*0 * ca0adaA baseia:se 7as di1ere7tes sol4bilidade 34e
a+rese7ta0 os co0+o7e7tes da a0ostra 7a 1ase 06vel e 7a 1ase estacio7ria.
Os co0+o7e7tes 0ais solOveis 7a 1ase estacio7ria s-o selectiva0e7te retidos +or elaA e734a7to os
0e7os solOveis s-o tra7s+ortados 0ais ra+ida0e7te +ela 1ase 06vel. $ C"" * 4tiliada +ara co0+ostos
leve0e7te +olaresA c4jas 0assas 0olec4lares s-o i71eriores a 2>>>.
O 0aior i7co7ve7ie7te desta t*c7ica * a sol4bilidade da 1ase estacio7ria 7a 1ase 06velAo 34e
ra+ida0e7te deteriora a col47aA leva7do a 7-o re+rod4tividade 7as se+ara,?es re+etitivas. Para
resolver este +roble0a aco7sela:se o seg4i7teD
<at4rar a 1ase 06vel co0 a 1ase estacio7ria +or 0eio de 40a +r*:col47aA colocada a7tes do
i7jectorA34e co7te7a 40a alta +erce7tage0 da 1ase estacio7riaE
UtiliCar 0ateriais 34e co7te7a0 a 1ase estacio7ria 34i0ica0e7te ligada a 40 s4+orte s6lido.
3. : $s va/tage/s e li1ita,;es da ("
Co0o toda t*c7icaA C" te0 alg40as li0ita,?ea as 34aisA j47to co0 as s4as va7tage7s a alg40as s-o
citados a abaiBo.
Ma7tage7sD
Co7seg4e:se se+ara,?es realiCadas e0 +o4cos 0i74tosE
R +oss2vel a a7lise de 0ist4ras co0+leBasA co0o a 4ri7a 40a7aA o7de se +ode detectar 0ais
de d4Ce7tos co0+ostos di1ere7tesE
R +oss2vel 4tiliCar detectores 34e +er0ite0 0edidas e 17g de a0ostraE
$7lises 34a7titativas s-o de 1cil eBec4,-o e gra7de +recis-oE
$ C" +ode ser a+licada ta7to +ara co0+ostos orgF7icos co0o +ara i7orgF7icos. $s a0ostras
+ode0 ser l234idas o4 s6lidasA i67icas o4 covale7tes. Os gases s-o as O7icas a0ostras 7-o
deter0i7adas +ela C".
1>
"i0ita,?esD
$ a34isi,-o da i7str40e7ta,-o re+rese7ta 40 alto i7vesti0e7toA 7e0 se0+re co0+e7sador +ara
alg47s labortorios devido a 40 7O0ero red4Cido de a7lises a sere0 realiCadosE
N-o * 40 0*todo 04ito bo0 de ide7ti1ica,-o. Para se e1ect4ar a ide7ti1ica,-o * 7ecessrio o
e0+rego de o4tras t*c7icasA tais co0oA es+ectro0etria de 0assaA es+ectrosco+ia i71raver0elo
o4 resso7F7cia 0ag7*tica 74clear +ara co71ir0ar as ide7ti1ica,?esE
$i7da 7-o se dis+?e de 40 detector 34e sejaA si04lta7ea0e7teA 47iversal e se7s2velE
Para se obter o 0Bi0o de a+roveita0e7to do siste0a de C" * 7ecessrio 34e o o+erador te7a
40a gra7de eB+eriN7cia co0 ele. Isto co7stit4i 40 1actor 04ito 7egativoA +or34e +ara 40
o+erador ati7gir este 72vel de vivN7cia 7ecessita de +elo 0e7os 8 0eses de trei7a0e7to.
EBa0i7a7do de 40a 0a7eira geralA 7ota:se 34e as li0ita,?es da C" 7-o tN0 i0+edido o
a+roveita0e7to ade34ado de s4as va7tage7s e +or issoA a t*c7ica te0 sido cada veC 0ais e0+regada.
3. < $plica,;es da ("
$+esar da C" ser 40a t*c7ica relativa0e7te 7ovaA j co7ta co0 40 e7or0e 7O0ero de +4blica,?es e0
P420ica e %io3420ica 34e descreve0 as 0ais diversas a+lica,?es. Estas a+lica,?es co7siste0 e0
deter0i7a,?es de s4bstF7cias c4jas a7lises +or i4tras t*c7icas s-o 04ito di12cies o4 de0oradas o4
0es0o i0+oss2veis. $ C" * 4sada 7aD
Na a7lise 3420ica dos a,4cares do 0elA co0o de o4tros ali0e7tosA visa7do a s4a
caracteriCa,-o e ta0b*0 o co7trolo de s4a 34alidadeE
Na a7lise de co0+ostos vita027icos * +oss2vel atrav*s da C" e0 40 c4rto i7tervalo de te0+oE
$ct4al0e7te * 4sado sol4,-o de +roble0as relacio7ados co0 a co7ta0i7a,-o a0bie7talA
alg47s +esticidas s-o 1acil0e7te deter0i7ados atrav*s da C".
11
6. (RO$TO#R$)I$ ! ($$D$ )IN$ 8 T"(
$ rete7,-o das s4bstF7cias deve:se L absor,-o so1rida 7a s4+er12cie da 1ase estacio7riaA colocada
sobre 40 dos lados de 40a +laca de vidro o4 0etal.
Neste ti+o de T"C a 1ase estacio7ria * 40 s6lido )<2lica o4 $l40i7a. de+ositado e0 ca0ada 1i7a e
47i1or0e sobre 40 s4+orte s6lido i7erte. $ 1ase 06velA * 40 l234ido de baiBa viscosidadeA evol4i
atrav*s da 1ase estacio7riaA 0ais v4lgar0e7te de baiBo +ara ci0aA +or ca+ilaridade.
Para acelerar o +rocesso +ode ta0b*0 ser 4sado 40 dis+ositivo e0 34e atrav*s da a+lica,-o de 40a
alta velocidade circ4lar L 1ase estacio7riaA a 1ase 06vel e a a0ostra evol4ie0 radial0e7te +or i7*rcia.
$ i71or0a,-o obtida de 40 e7saio cro0atogr1ico * dada 740 cro0atogra0aA isto *A 40 registo da
co7ce7tra,-o o4 da 0assa dos co0+o7e7tes da a0ostra e0 147,-o do te0+o o4 do vol40e de 1ase
06vel.
$ i71or0a,-o obtida de 40 cro0atogra0a i7cl4i 40a i7dica,-o da co0+leBidade da a0ostra co0 base
7o 7O0ero de +icos o4 0a7casA i71or0a,-o 34alitativa co0 base 7a +osi,-o 7a deter0i7a,-o da
+osi,-o dos +icos o4 0a7cas.
I71or0a,-o 34a7titativa co0 base 7o valor do i7tegral da varia,-o da co7ce7tra,-o do co0+o7e7te e0
147,-o do te0+o )rea do +ico o4 i7te7sidade da 0a7ca. e ai7da 40a i7dica,-o do estado de
co7serva,-o do siste0a cro0atogr1ico.

12
:. (RO$TO#R$)I$ (O )$9! #$9O9$ 8 (#
R 40 +rocesso 7o 34al se se+ara 40a 0ist4ra 7os se4s co7stit4e7tes gra,as L +assage0 de 1ase gasosa
06vel sobre 40 solve7te estacio7rio. $ cro0atogra1ia gasosa est dividida e0 d4as categorias
+ri7c2+ais 34e s-oD
1. (ro1atografia g0s 8 l45ido *(#".
Ocorre a +arti,-o de 40a a0ostra e7tre 40a 1ase gasosa 06vel e 40a ca0ada de l234ido 7-o
voltil 34e recobre 40 s4+orte i7erte. $ 4tiliCa,-o da C#" corres+o7de cerca de =5K das
a+lica,?es.
$ C#" * Otil +ara se+arar 2o7s o4 0ol*c4las dissolvidas e0 40 solve7te. <e a sol4,-o de a0ostra
estiver e0 co7tato co0 40 seg47do s6lido o4 1ase l234idaA os di1ere7tes sol4tos i7terage0 co0 a
o4tra 1ase e0 di1ere7tes gra4sA devido a di1ere7,as de adsor,-oA i7tercF0bio de 2o7sA +arti,-oA o4
ta0a7o. Estas di1ere7,as +er0ite0 34e os co0+o7e7tes da 0ist4ra se se+are0 4sa7do estas
di1ere7,as.
2. (ro1atografia g0s 8 s2lido *(#9.
E0+rega 40 s6lido co0 gra7de rea s4+er1icial co0o a 1ase estacioria. $ se+ara,-o se baseia 7a
adsor,-o das s4bstF7cias.
$ t*c7ica 4sada 7a C# baseia:se 7a di1ere7te distr4i,-o das s4bstF7cias da a0ostra e7tre a 1ase
estacio7ria )s6lida 4o l234ida. e 40a 1ase 06vel )gasosa..
$ C# * 40a eBcele7te t*c7ica 34a7titativaA se7do +oss2vel a obte7,-o de res4ltados 34a7titativos e0
co7ce7tra,?es 34e varia0 de +ico gra0as a 0iligra0as.
:. 1. T+c/icas 5sadas e1 (#
$ t*c7ica de dese7volvi0e7to 0ais 4sada e0 C# * a elui+o.
U0a corre7te de gs +assa co7ti74a0e7te +ela col47a e 34a7do a a0ostra va+oriCada * i7trod4Cida
ra+ida0e7te 7esta corre7te de gsA ela * arrastada atrav*s da col47a. $s s4bstF7cias +rese7tes 7a
a0ostra de+ois de se+aradasA cega0 ao detectorA 34e gera 40 si7al +ara 40 registador.
1'
D4ra7te a a7liseA a te0+erat4ra da col47a +ode +er0a7ecer co7sta7te )C# isot*r0ica. o4 so1rer 40a
varia,-oA li7ear o4 7-o )C# co0 te0+erat4ra +rogra0ada..
:. 2. )ase estacio/0ria 12vel s2lida
Na C#<A 40 s6lido 1i7a0e7te dividido 147cio7a co0o 1ase estacio7ria. $ se+ara,-o baseia:se 7a
adsor,-o 1is2ca e 34Si0ica das s4bstF7cias +rese7tes 7a a0ostra deste s6lido e 7as s4as velocidaes.
$lg40as s4bstF7cias 4sads 7a 1ase estacio7ria e0 C#< s-oD
Pol20eros +orosos )0ais 4tiliCados act4al0e7teE
Carv-o gra1iti7iCadoE
<ilicaE
$l40i7aE
Resi7as.
:. '. )ase estacio/0ria l45ida
U0 l234ido +o4co voltilA recobri7do 40 s4+orte s6lido 147cio7a co0o 1ase estacio7ria.
O l234ido deve sol4biliCar as s4bstF7cias +rese7tes 7a a0ostra de 0a7eira selectivaA +ara 34e 7-o aja
a el4i,-o das 0es0as se0 a devida se+ara,-o. $ 1ase estacio7ria deve ser ter0ica0e7te estvel e
34i0ica0e7te i7erte.
$ se+ara,-o das s4bstF7cias +erse7tes 7a a0ostra baseia:se 7as s4as di1ere7tes sol4bilidades 7a 1ase
estacio7ria e 7as di1re7tes volatilidades.
:. 3. !45ipa1e/tos para (#
O es34e0a bsico de 40 cro0atogra1o a gs * 0ostrado 7a 1ig4ra a seg4irD
1/
"ege7da D
a. ; 1o7te do gs de arraste
b. ; co7trolador da vaC-o e reg4lador de +ress-o
c. ; siste0a de i7jec,-o da a0ostra
d. ; col47a cro0atogr1ica
e. ; siste0a de detec,-o
1. ; registradores
g. ; te0ostato +ara i7jector )1.A col47a )2. e detector )'.
a. 8 )o/te do g0s de arraste
$ 1ase 06velA se7do gasosaA tor7a +oss2vel 40 e34il2brio e7tre ela e a 1ase estacio7ria.
U0 cili7dro co7te7do o gs sob alta +ress-o serve co0o 1o7te de gs de arraste )1ase 06vel.A 34e
levar as s4bstTa7cias +rese7tes 7a a0ostra +ara 1ora da col47aA 34a7do elas 7-o estivere0
i7teragi7do co0 a 1ase estacio7ria. Os gases de arrastre +ara cro0at6gra1os deve0 ser de alta
+4reCa e 34i0ica0e7te i7ertesA +or eBe0+loA *lio )&e.A argQ7io )$r.A 7itrogN7io )N2. e idrogN7io
)&2..
$ +rese7,a de i0+4resas 7a 1ase 06vel o4 7o gs de arraste 7-o a1ecta a se+ara,-o cro0atogr1ico
de 0a7eira sig7i1icativaA 0ais si0 a estabelidade a res+osta do detector.
b. 8 (o/trolador da va=-o e reg5lador de press-o
$ vaC-o do gs do arraste deve ser co7sta7te d4ra7te a a7liseA a i7de+e7de0e7te da +ress-o 7a
e7trada e saida do detectorA te0+erat4raA etc. O co7trole de vaC-o * 1eita +or co7troladores de
+ress-o co0 o4 co7troladores de 1l4Bo.
c. 8 9iste1a de i/jec,-o da a1ostra
15
$ i7jec,-o de gases * co040e7te 1eita atrav*s de 40a seri7ga o4 de vlv4las. Us veCes 4sa:se a
i7jec,-o de gases e0 sol4,-o. $ 34a7tidade da a0ostra i7jectadadeve ser re+rod4t2vel +ara tor7ar
+oss2vel a a7lise 34a7titativa. $ i7jec,-o * 1eita +or seri7gasA vlv4las e 0icrosseri7gas.
$ 34a7tidade da a0ostra i7jectada 7-o deve 4ltra+assar a ca+acidade da col47aA deter0i7ada +ela
34a7tidade de 1ase estacio7ria. $ i7jec,-o da a0ostra deve ser 1eita de tal 0a7eira 34e se obte7a
40a ba0ba O7ica e estreitaA se7do 34e 1alas 7as t*c7icas de i7jec,-o +ode0 ca4sar assi0*tria 7os
+icos.
d. 8 (ol5/a cro1atogr0fica
$ col47a cro0atogr1ica * 40 t4boA co7te7do a 1ases estacio7rias. O t4bo +ode ser de CobreA $,o
i7oBA <ilica 147didaA te1lo7A $l4027ioA vidroA etc.
$s col47as +ode0 ser classi1icadas e0 receiadas )a7liticas e +re+arativas. e ca+ilares.
$ct4a0e7te as col47as receiadas s-o co7str4idas +re1ere7cial0e7te co0 a,o e as ca+olares
+ode0 ser co7str4idas a +artir do N234elA $,o i7oBA vidro o4A +re1erivel0e7teA <ilica 147didaA +or
ser alta0e7te i7erteA +4ra e +rod4Cir col47as 1leB2veis
e. 8 9iste1a de detec,-o
$s s4bstF7cias +rese7tes 7a a0ostra +assa0 atrav*s da col47a o7de s-o se+arados e cega0 ao
siste0a de detec,-o.
Os detetores caracteriCa0:se +orD
<electividade ; os detectores selectivos res+o7de0 a+e7as 40a classe de s4bstF7cias e s-o
0ais selectivos 34e os 47iversais. Os 47iversais s-o a34eles 34e +ode0 res+o7der a todas
s4bstF7ciasA geral0e7te 0edi7do a varia,-o da co0+osi,-o do gs de arraste 34e sai da
col47a.
<e7sibilidade ; * a 04da7,a 7a res+osta do detector e0 147,-o da 34a7tidade detectada. $
0edida da se7sibilidade * 4sada co0o ter0o de co0+ara,-o e7tre detectores da 0es0a
es+e*cie.

Os detectores +ode0 ser classi1icados e0 D
I7tegrais o4 di1ere7ciais ; os detectores i7tegraisA ta0b*0 ca0ados de c404lativosA
res+o7de00 a 0assa total da s4bstF7cia e0 Co7a el4ida
18
Detectores di1ere7ciais o4 i7sta7ta7ea ; s-o os 0ais 4sados e0 cro0atogra1ia gasosa.
Res+o7de0 de 0a7eira +ro+orcio7al L co7ce7tra,-o o4 ao 1l4Bo de 0assa da s4bstF7cia
el4idaA gera7do +icosA c4ja rea o4 i7te7sidade do si7al el*ctrico * +ro+orcio7al a
co7ce7tra,-o o4 ao 1l4Bo de 0assa.

EBiste0 34atro ti+os de detectores 34e s-oD
1. Detectores +or co7d4tividade t*r0ica ; 7este ti+o de detector 4sa0:se as seg4i7tes
s4bstF7cias $rgo7A Di6Bido de carbo7oA &*lioA &idrog*7io e Nitrog*7io co0o gs de
arrasteE
2. Detector +or io7iCa,-o e0 ca0aA s-o 4sados +ara detectar idrocarbo7etos )&C. co0o o
0eta7o )C&/.A eta7o )C2&8.A acetile7o )C2&2.A etc. Pode0 ser 4sadas os gases co0
&idrogN7io )&2.A &idrogN7io 0ais &*lio )&e. o4 &idrogN7io 0ais NitrogN7io )N2.E
'. Detector +or ca+t4ra de electr?es ; 7este ti+o de detector 4sa:se o Nitrog*7io co0o gs
de arrasteE
/. Detector ter0iQ7ico.

f. 8 Registradores
o si7al gerado +elo detectorA 34a7do a a0ostra +assa +or ele a+6s el4ir da col47aA * registada
gra1ica0e7te.
Os si7ais +ode0 ta0b*0 ser +rocessados e0 i7tegradores o4 0icroco0+4tadores aco+lados ao
detector 34eA al*0 de a+rese7tare0 os cro0atogra0asA regista0 os te0+os de rete7,-o e as rea de
cada +ico.
g. 8 te1ostato para i/jector *a.> col5/a *b. e detector *c.

:. 6. $/0lise 45alitativa
$ C# * 40a t*c7ica 34e +er0ite a se+ara,-o de s4bstF7cias +rese7tes 7a a0ostraA +ode7do ser 4sados
+ara s4a ide7ti1ica,-o. Os co0+ostos s-o coletados res1ria7do:se 40 t4bo o7de +assa o gs el4e7te
co0 ba7o de gelo seco o4 Nitrog*7io l234idoA e de+ois ide7ti1icadosA 4sa7do:se t*c7icas a4Biliares
co0o es+ectro1oto0etria 7o IMA vis2vel UMA R!N o4 es+ectro0etria de 0assas )E!..
1@
:. :. $/0lise 45a/titativa
E0 40a a7lise 34a7titativa deve:se to0ar c4idado e0 todas as eta+as +ara evitar erros. $ a0ostra a
ser a7alisada deve ser re+rese7tativa do totalE 7-o deve aver +erdas e 7e0 co7ta0i7a,?es d4ra7te se4
+re+aro. $+6s a obte7,-o do cro0atogra0aA 1aC:se a i7tegra,-o dos si7aisA 34e te0 +or 1i7alidade
tra7s1or0ar a i7te7sidade do si7al e0itido +elo detector e0 40a 0edida relacio7ada co0 a 34a7tidade
da s4bstF7cia a7alisada 7a a0ostra.
:. <. $plica,;es
$ C# * act4al0e7teA 40a t*c7ica de a7lise de 0aior 4so 7a se+ara,-o e 34a7ti1ica,-o de +rod4tos
diversos. $ssi0 a C# est se7do 4sada 7as diversos reas co0oD
$/0lise a1bie/tal ; +ara o co7trolo da +ol4i,-o do arA g4aA solosA etc.
$ +ol4i,-o do ar co7trib4i 7o a40e7to de doe7,as crQ7icas tais co0oD ca7cer de +4l0-oA
bro734ite e as0a. $ C# +ode ser 4sada +ara a deter0i7a,-o de vrios +ol4e7tes co0oD $lde2dosA
Ceto7asA &idrocarbo7etosA co0+ostos +olic2clicos aro0ticos. $ se+ara,-o cro0atogr1ica de
tra,os de solve7tes 7o arA a detec,-o * 1eita +or io7iCa,-o e0 ca0a.
$ C# +ode ser 4sada 7a a7lise de co0+ostos clorados 7a g4a +otvel +ara a a7lise de
res2d4os de +estecidasA erbicidas e 147gicidas e0 g4aA solosA ali0e7tosA etc.
Nas i/d?strias 451icas e far1ac@5ticas ; +ode0 4tiliCar a C# desde a a7lise de 0at*ria
+ri0a at* ao +rod4to acabadoA assi0 co0o a7lise de vita0i7a %'.
Na i/d?stria ali1e/tar ; +ode:se 4sar a C# +ara a7lise de alg47s co7stit4e7tes de ali0e7tos
co0oD l2+idos e carboidratos. Co0 t*c7icas ade34adas de co7tra,-o da a0ostraA +ode0 ser
detectadas co7stit4e7tes ali0e7t2cios a 72vel de tra,os co0o +or eBe0+lo a Ester6ides e
Mita0i7as. $ cro0atogra1ia de gs * Otil ta0b*0 7a a7lise de co7ta0i7a7tes do arA lcool 7o
sa7g4eA 6leos esse7ciais e +rod4tos ali0e7t2cios.
Na 1edici/a ; 4sa:se a C# 7o est4do de s4bstF7cias e7dQge7as e 7o co7trole de tera+eOtico
de certas drogas o4 e0 casos de i7toBica,?es.
R ta0b*0 4sada +ara a7lises 34a7titativos e 34alitativos de es+*cies 3420icas e +ara a deter0i7ar
co7sta7tes ter0o3420icas tais co0o calores de sol4,-o e va+oriCa,-oA +ress-o de va+or e coe1icie7tes
de actividade.
19
$/0lise co1parativa e/tre a (" e a (#
$ct4al0e7teA a C# * 40a t*c7ica a0+la0e7te di147dida e 0ais 4tiliCada do 34e a C".
$s +ri7c2+ais caracter2sticas de a0bas as t*7icas est-o res40idas 7a tabela abaiBoD
)$(TOR (# ("
Re45isitos para a1ostra $0ostra o4 derivado voltil
ter0ica0e7te estvel 7a
te0+erat4ra de o+era,-o do
siste0a cro0atogr1ico
$0ostra solOvel 7a 1ase 06vel
Tipos de a1ostra #asesA l234idos e s6lidos co0
0assa 0olec4lar de 2 L 12>>
"234idos e s6lidos i67icos o4
covale7tes co0 0assa 0olec4lar
de '2 L /.>>>.>>>
A5a/tidades 1/i1as
detect0veis
1+g +or io7iCa,-o e0 ca0a o4
+or ca+t4ra de el*ctr?es
17g +or absorvF7cia do UM
(apacidade a/altica EBcele7te. <e+ara,-o de
a0ostras at* 2>> co0+o7e7tes
EBcele7te. <e+ara,-o at* 5>
co0+o7e7tes 740a a0ostra
Na C# * 7ecessrio 34e a a0ostra seja s41icie7te0e7te voltilA a 1i0 de 34e +ossa +assar atrav*s da
col47a 7a 1or0a de va+orA e estvel ter0ica0e7te +ara 7-o se deco0+or 7as co7di,?es da se+ara,-o.
I7de+e7de7te0e7te da li0ita,-o da volatilidade o4 estabilidade t*r0icaA a C" re34er so0e7te 34e a
a0ostra sej solOvel 7a 1ase 06vel. $ssi0A a C" * 40 0*todo ideal +ara a se+ara,-o de es+*cies
i67icas o4 0acro0ol*c4las de i7teresse biol6gica e +rod4tos 7at4rais lbeisA be0 co0o 40a i0e7sa
variedade de o4tros co0+ostos.
$s se+ara,?es di12ceis s-oA 1re34e7te0e7teA dese7volvidas 0ais 1acil0e7te +ela C" do 34e a C#A
se7do 34e a C"D
Poss4i d4as 1ases cro0atogr1icas de i7tera,-o selectiva co0 as 0ol*c4las da a0ostraA
so0e7te 40a e0 C#E
Poss4i 40a 0aior variedade e0 +oss2veis 0aca7is0os de se+ara,-oE
Per0ite a se+ara,-o de co0+ostos ter0ica0e7te i7stveis a baiBas te0+erat4ras.
1=
Os 0*todos de detec,-o 4tiliCadas e0 C# s-o 0ais r+idas e se7s2veisA a a+arelage0 * 0ais 1cil de
ser 0a7i+4lada e e0 geral 0ais barata. $ C" 7-o * t-o se7s2vel e 7e0 t-o r+idaA 0as se4 ca0+o de
a+lica,-o * 0ais a0+lo e734a7to o i7str40e7to * co7sideravel0e7te 0ais caro.
Real0e7te 7-o eBiste0 co0+eti,?es e7tre a C" e a C#A +or34e estas d4as t*c7icas se co0+le0e7ta0 e
geral0e7te a7alisa0 di1ere7tes ti+os de a0ostras.

2>
<. !"!(RO)OR!9!
Ca0a:se electro1orese ao tra7s+orte de +art2c4las 740 ca0+o el*ctrico. !igra,-o di1ere7cial de
co0+ostos co0 carga 34a7do s4jeitos a 40 ca0+o el*ctrico.
O +rocesso * 1or0al0e7te idN7tico sedi0e7ta,-oA j 34e e0 a0bos os casos 40 ca0+oA 34e * o
gradie7te de 40 +ote7cialA +rod4C o tra7s+orte das 0ol*c4las.
No tra7s+orte electro1or*ticoA L 1or,a do ca0+o o+?e:se a resistN7cia viscosa do 0eioA +rod4Ci7doA
34a7do se ig4ala0A 40a velocidade co7sta7te das +art2c4las. U0a variedade de 0ol*c4las +ode ser
i7divid4aliCada +or 0eio desta t*c7ica.
$ velocidade de 0igra,-o * co7sta7te e de+e7de do e34il2brio de 1or,as e ao retarda0e7to +or atrito
e7tre a a0ostra e o 0eio circ47da7te.
$ corre7te * 0a7tida do circ4ito +ela electr6lise 34e ocorre 7os el*ctrodos.
$ velocidade da +art2c4la 740 ca0+o el*ctrico calc4la:se +ela 16r04laD
vB
C e !
C 7 7V de cargas de 47idade e
! 7 ca0+o el*ctrico
v 7 velocidade da +art2c4la
f 7 coe1icie7te de atrito
f
De1i7e:se !obilidade electro1or*tica )U. co0o a velocidade de 0igra,-o +or 47idade de ca0+o
el*ctricoA 740a 0es0a sol4,-oA +art2c4las co0 a 0es0a carga +ode0 ter 0obilidade electro1or*tica
disti7ta +ois +ode0 +oss4ir +esos 0olec4lares di1ere7tesD
UB v D !>
s4bstit4i7do v te0osD
U B CeDf
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E0 34e o coe1icie7te de atrito )1. de+e7de de do ta0a7o e 1or0a da 0ol*c4la e da viscosidade do
0eio.
<. 1. Difere/tes tipos de electroforese
1. !lectroforese livre *fre/te 12vel. 8 !*todo i7trod4Cido +or Tiseli4s e0 1='@. $s
s4bstF7cias a se+arar i7trod4Ce0:se 740 t4bo e0 UA dissolvidas 740 ta0+-o de +& ade34ado.
Estabelece:se 40 li0ite e7tre a dissol4,-o +roteica e o ta0+-o electro1or*tico. $o a+licar:se a
corre7te a 1re7te +roteica desloca:se +or ac,-o do ca0+o. O ava7,o da 1re7te +ode seg4ir:se
0edia7te observa,-o UM.
2. !lectroforese de =o/a 8 Na d*cada de 1=/5:55 de4:se 40 gra7de dese7volvi0e7to 7a
0etodologia electro1or*tica co0 a i7trod4,-o de s4+ortes i7ertes 7o 0eioA co0 o objectivo de
evitar corre7tes de co7vec,-o +rod4Cidas +elo a34eci0e7to 7a electro1orese livre. Ta0b*0 o
s4+orte +er0ite a a+lica,-o da a0ostra e0 ba7das 1i7asA co0 o 34e se co7seg4e se+ara,?es
0ais 72tidas.
2.1. !lectroforese e1 papel 8 O +a+el de 1iltro 1oi o +ri0eiro s4+orte 4tiliCado 7os 0*todos
electro1or*ticos de Co7a. O +a+el e0+a+a:se co0 a sol4,-o ta0+-o e coloca:se de 0odo
co7ve7ie7te e7tre os el*ctrodos. $ a0ostra a+lica:se 7o ce7tro o4 e0 34al34er das
eBtre0idades do +a+elA de+e7de7do das s4bstF7cias a se+arar e do +& do ta0+-o.
P4a7do se 34ere0 se+arar s4bstF7cias de baiBo +eso 0olec4larA co0o a0i7ocidos o4
+e+t2deosA a di14s-o +rod4Cida +ode evitar:se a40e7ta7do a di1ere7,a de +ote7cial e7tre os
el*ctrodos red4Ci7do o te0+o de se+ara,-o. Este ti+o de electro1orese ca0a:se electro1orese
de alta voltage0.
$ electro1orese e0 +a+el +ode ta0b*0 4tiliCar:se +ara o clc4lo de +o7tos isoel*ctricos.
2.2. !lectroforese e1 acetado de cel5lose 8 $s +el2c4las de acetado de cel4lose traCe0 sobre
o +a+el as va7tage7s de ser 34i0ica0e7te 0ais o0og*7eo e tor7ar:se tra7s+are7teA co0 o 34e
as s4bstF7cias a se+ararA 40a veC ide7ti1icadasA +ode0 34a7ti1icar:se 0edia7te de7sito0etria.
UtiliCa:se oje co0 gra7de relevo 7os laborat6rios de a7lises 3420icas devido s4a 1cil
0a7i+4la,-o e ra+ideC.
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2.'. !lectroforese e1 gel 8 $ 4tiliCa,-o dos g*is de a0ido e +oliacrila0ida 7a electro1orese de
Co7a 1oi 40 gra7de ava7,o devido a 34e co0 estes 0eios o gel 7-o * 40 0ero s4+orte 34e
evita a di14s-o co0o ta0b*0 varia7do as co7ce7tra,?es do 0o760eroA +ode0 co7seg4ir:se
+ol20eros co0 crivage7s di1ere7tes. Desta 1or0a a se+ara,-o 7-o se +rod4C s6 +or di1ere7,a de
carga 0as ta0b*0 +or di1ere7,a de ta0a7o.
&oje e0 dia a electro1orese e0 gel * 40 0*todo 04ito 4tiliCado +ara o clc4lo dos +esos
0olec4lares das +rote27as oligo0*ricas.
<. 2. (lassifica,-o da electroforese
$ electro1orese +ode ser classi1icada e0D
a. (ataforese ; * a 0igra,-o de 40a +art2c4la +ositiva de 40a 0ol*c4la +ara o ctodo. <e a
carga da +art2c4la * +ositivaA ela dirige:se +ara o ctodo )34e te0 si7al 7egativo. e +ode0os
a1ir0ar 34e esta0os +era7te 40a cata1orese. Poss40 carga +ositivaA +or eBe0+loA as +art2c4las
co7stit4idas +or &idr6Bido 0etlito e e0oglobi7a.
b. $/aforese ; * a 0igra,-o de 40a +art2c4la 7egativa de 40a 0ol*c4la +ara o F7odo. <e a carga
da +art2c4la * 7egativaA ela dirige:se +ara o F7odo e +ode0os a1ir0ar 34e co7stit4i 40a
a7a1orese. Poss4e0 carga 7egativaA +or eBe0+loA as +art2c4las 0etlicas e os s4l14retos.
<. '. $plica,;es pr0ticas da electroforese
$ electro1orese 1oi a+licada co0 gra7de s4cesso Ls 0ol*c4las de +rote27as +ara obter i71or0a,?es a
res+eito do ta0a7o e da 1or0a das 0ol*c4las. $lg40as +rote27asA co0o a 1ibri7ogN7io )age7te
coag4lador do sa7g4e.A a+rese7ta0 1or0a se0ela7te L de 40 car4to. O co7eci0e7te do ta0a7o e
da 1or0a das 0ol*c4las de +rote27as aj4da a co0+ree7der o se4 co0+orta0e7to.
UtiliCa:se a electro1orese 7a dactilosco+ia ge7*tica +ara se+arar 1rag0e7tos de $DN. Os 1rag0e7tos
se+arados a+rese7ta0 40 +adr-o Ls riscasA di1ere7te de +essoa +ara +essoa. Co0o 40a i0+ress-o
digital. R assi0 +oss2vel +roceder L ide7ti1ica,-o de +essoas a +artir de 1rag0e7tos de +eleA cabelo o4
sa7g4e.
2'
(ON("U9O
$ cro0atogra1ia * 40 0*todo de se+ara,-o de 0ist4ras co0+leBasA e0 34e os se4s co0+o7e7tesA tN0
40 +oder adsorve7te di1ere7ciado. Esta t*c7ica te0 0aior a+lica,-o 7a I7dOstria e 7a a7lise 3420ica.
$ electro1orese * 40a +ro+riedade el*ctrica das sol4,?es. EstaA * 04ito 7a !edici7a e 7a a7lise
3420ica +ara a deter0i7a,-o das cargas dos siste0as coloidas.
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