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TUIUTI
DO
PARAN
ROTEIRO
DAS
AULAS
TERICAS
DE
BIOQUMICA
1.
ON
HIDROGNIO
O
on
hidrognio
(H+)
o
on
mais
importante
nos
sistemas
biolgicos
A
[H+]
nas
clulas
e
lquidos
biolgicos
influencia
a
velocidade
das
reaes
qumicas,
a
forma
e
funo
das
enzimas
assim
como
de
outras
protenas
celulares
e
a
integridade
das
clulas
A
[H+]
nas
clulas
e
lquidos
biolgicos
deve
estar
em
torno
de
0,4nM
(0,4x10-7)
80mM
de
ons
hidrognio
so
ingeridos
ou
produzidos
pelo
metabolismo
por
dia
2.
CIDOS
Conceito
de
Arrhenius:
cido
toda
substncia
que
em
soluo
aquosa
libera
como
ction
o
on
hidrognio
(H+).
Ex.:
HCl
+
H2O
H3O+
+
Cl-
Conceito
de
Brnsted
e
Lowry:
cido
um
doador
de
prtons,
uma
substncia
que
pode
transferir
um
prton
para
outra.
3.
BASES
Conceito
de
Arrhenius:
Base
toda
substncia
que
em
soluo
aquosa
se
dissocia
liberando
nion
hidroxila
(OH-)
Ex.:
NaOH
+
H2O
Na+
+
OH-
Conceito
de
Brnsted
e
Lowry:
Base
um
receptor
de
prtons.
Um
cido
pode
transferir
um
prton
para
uma
base
Ex.:
NH3
+
H2O
NH4+
+
OH-
Profa
Daniela
Maluf
1
4.
CIDOS
E
BASES
CH3-COOH
+
H2O
CH3-COO
-
+
H3O+
(
CIDO)
(BASE)
O
on
acetato
a
base
conjugada
do
cido
actico
O
cido
actico
o
cido
conjugado
do
on
acetato
O
on
hidrnio
o
cido
conjugado
da
gua
A
gua
a
base
conjugada
do
on
hidrnio
cidos
aumentam
a
[H+]
de
uma
soluo
aquosa
e
bases
a
diminuem
H2O
+
H2O
OH
-
+
H3O+
A
gua
funciona
tanto
como
cido
quanto
como
base
Na
gua
pura
a
[H+]
igual
a
[OH-]
que
igual
a
10-7
5.
POTENCIAL
HIDROGENINICO
(pH)
A
[H+]
de
uma
soluo
quantificada
em
unidades
de
pH
O
pH
definido
como
o
logartmo
negativo
da
[H+]
pH
=
-log
[H+]
A
escala
de
pH
varia
de
1
at
14,
uma
vez
que
qualquer
[H+]
est
compreendida
na
faixa
de
100
a
10-14.
Escala
de
pH:
Hipoclorito
de
Sdio
NaOCl
Na+
+
OCl-
a) Alteraes
no
pH
b) Fontes
de
H+
decorrentes
dos
processos
metablicos
7.
MEDIDAS
DE
pH
Indicadores
de
pH
8.
ASPECTOS
ADICIONAIS
DOS
EQUILBRIOS
AQUOSOS
gua:
excepcional
habilidade
em
dissolver
grande
variedade
de
substncias
Solues
aquosas
encontradas
na
natureza:
fluidos
biolgicos
e
a
gua
do
mar
Contm
muitos
solutos
Muitos
equilbrios
acontecem
simultaneamente
nessas
solues
a)
O
EFEITO
DO
ON
COMUM
Concentraes
no
equilbrio
de
ons
em
soluo
contendo
um
cido
fraco
ou
uma
base
fraca
CH3COONa(aq)
CH3COO-(aq) + Na+(aq)
CH3COOH(aq)
CH3COO-(aq) +
H+(aq)
CH3COO-
uma
base
fraca
O
pH
da
soluo
aumenta
[H+]
diminui
EFEITO
DO
ON
COMUM
A
extenso
da
ionizao
de
um
eletrlito
fraco
diminuda
pela
adio
soluo
de
um
eletrlito
forte
no
qual
h
um
on
comum
com
o
eletrlito
fraco
A
ionizao
de
uma
base
fraca
tambm
diminui
com
a
adio
de
um
on
comum.
Por
exemplo,
a
adio
de
NH4+
(como
a
partir
do
eletrlito
forte
NH4Cl)
faz
com
que
o
equilbrio
de
dissociao
de
NH3
desloque
para
a
esquerda,
diminuindo
a
concentrao
de
OH-
no
equilbrio
e
abaixando
o
pH
Profa
Daniela
Maluf
5
OS
SISTEMAS
TAMPES
Tampo
qualquer
substncia
que
pode,
reversivelmente,
se
ligar
aos
ons
hidrognio.
Solues
formadas
por
um
cido
fraco
e
sua
base
conjugada
ou
por
um
hidrxido
fraco
e
seu
cido
conjugado
Tampo
+
H+
H+Tampo
Tampo
H+
+
OH-
H2O
+
Tampo
Um
tampo
resiste
s
variaes
no
pH
porque
ele
contm
tanto
espcies
cidas
para
neutralizar
os
ons
OH-
quanto
espcies
bsicas
para
neutralizar
os
ons
H+
As
espcies
cidas
e
bsicas
que
constituem
o
tampo
no
devem
consumir
umas
s
outras
pela
reao
de
neutralizao
Exigncia
preenchida
por
um
par
CIDO-BASE
CONJUGADO
CH3COOH
/
CH3COO-
NH4+
/
NH3
Preparao
Mistura
de
um
cido
fraco
ou
uma
base
fraca
com
um
sal
do
cido
ou
da
base
ons
OH-
so
adicionados
soluo-tampo:
X- (aq)
Quantidades
de
HX
e
X-
no
tampo
so
grandes
comparadas
com
a
quantidade
de
OH-
adicionada,
por
isso
a
razo
[HX]
/
[X-]
no
varia
muito,
tornando
a
variao
no
pH
pequena
H2O (l)
HX (aq)
[H+] = Ka
[HX]
[X-]
Geralmente
tentamos
selecionar
um
tampo
cuja
forma
cida
tem
pKa
prximo
do
pH
desejado
Mecanismos
de
Ao
dos
Tampes
Exemplos
de
Tampes
A
saliva
comporta-se
como
um
sistema
tampo
que
protege
a
cavidade
oral
de
duas
maneiras:
1) Muitas
bactrias
necessitam
de
um
pH
especfico
para
seu
crescimento
mximo;
a
capacidade
tampo
da
saliva
evita
a
colonizao
da
boca
por
microrganismos
potencialmente
patognicas,
por
negar-lhes
a
otimizao
das
condies
ambientais
2) Os
microrganismos
da
placa
podem
produzir
cido
a
partir
de
acares,
os
quais,
no
sendo
rapidamente
tamponado
e
limpos
pela
saliva,
podem
desmineralizar
o
esmalte
CAPACIDADE
DE
TAMPO
E
pH
Caractersticas
de
um
tampo:
a)
CAPACIDADE
b)
pH
a
quantidade
de
cido
ou
base
que
um
tampo
pode
neutralizar
antes
que
o
pH
comece
a
variar
a
um
grau
aprecivel
Depende
da
quantidade
de
cido
e
base
da
qual
o
tampo
feito
A
capacidade-tampo
da
saliva
(CTS)
a
propriedade
de
a
saliva
manter
o
seu
pH
constante
a
6,9-7,0,
graas
aos
seus
tampes,
mucinato/mucina,
HCO-3/H2CO3
e
HPO--4/H2PO-4,
que
bloqueiam
o
excesso
de
cidos
e
de
bases
conforme
os
mecanismos:
Excesso
de
cidos
(H+):
HCO-3
H2CO3
H2O
+
CO2
Excesso
de
bases
(HO-):
HO-
+
H2CO3
HCO-3
+
H2O
Profa
Daniela
Maluf
7
Os
tampes
mucinato/mucina
e
monofosfato/bifosfato
agem
da
mesma
forma
O
elevado
poder
tamponante
da
saliva
mantem
a
higidez
da
mucosa
bucal
e
dos
dentes
A
determinao
da
CTS
se
faz
por
titulometria,
medindo-se
o
volume
de
cido
lctico
0,1N
necessrio
para
baixar
o
pH
salivar
de
6,9
a
3,7
(ponto
de
viragem
do
alaranjado
de
metila).
Na
prtica,
colocam-se
10ml
de
saliva
num
erlenmeyer,
juntamente
com
o
alaranjado
de
metila,
e
verte-se,
na
saliva,
gota
a
gotra,
o
cido
lctico
0,1
normal
colocado
numa
bureta,
at
ser
atingida
a
cor
rsea
Fecha-se
ento
a
bureta
e
l-se
o
volume
de
cido
lctico
0,1N
gasto.
Para
exprimir
a
CTS
usa-se
multiplicar
por
10
o
volume
de
cido
lctico
gasto.
E
assim,
podemos
classificar
os
pacientes
em
trs
grupos:
Pacientes
medianamente
susceptveis
crie
dental:
CTS=
40.
Pacientes
resistentes
crie
dental:
CTS=
>40.
Pacientes
muito
susceptveis
crie
dental:
CTS=
<40.
Dentro
de
certos
limites,
a
CTS
funciona
como
um
ndice
relativo
de
atividade
de
crie
dental.
a)
pH
Depende
de
Ka
para
o
cido
e
das
respectivas
concentraes
relativas
de
cido
e
base
que
o
tampo
contm
Quanto
maior
as
quantidades
do
par
cido-base
conjugado,
mais
resistentes
s
mudanas
se
tornam
a
razo
de
suas
concentraes
e
o
pH
Poder
Tamponante:
Poder
tamponante
de
um
sistema
tampo
pode
ser
definido
pela
quantidade
de
cido
forte
que
necessrio
adicionar
para
fazer
variar
o
pH
de
uma
unidade
SISTEMAS
PRIMRIOS
REGULADORES
DO
PH
Os
principais
sistemas
tampes
presentes
no
organismo,
que
permitem
a
manuteno
da
homeostasia,
so:
sistema
bicarbonato
sistema
fosfato
protenas
sistema
da
amnia
SANGUE
COMO
UMA
SOLUO-TAMPO
Sistema
tampo
usado
para
controlar
o
pH
no
sangue.
SISTEMA
TAMPO
CIDO
CARBNICO-BICARBONATO
H2CO3
/
HCO3-
:
so
um
par
cido
base
conjugado
Equilbrios
importantes
no
sistema
tampo
cido
carbnico-
bicarbonato:
H+(aq) + HCO3-(aq)
H2CO3(aq)
H2O(l) + CO2(g)
CO2:
um
gs
que
fornece
um
mecanismo
para
o
corpo
se
ajustar
aos
equilbrios
A
remoo
de
CO2
por
exalao
desloca
o
equilbrio
para
a
direita,
consumindo
ons
H+.
Para
que
o
tampo
tenha
pH
de
7,4,
a
razo
[base]
/
[cido]
deve
ser
igual
a
um
valor
de
20
O
tampo
tem
alta
capacidade
para
neutralizar
cido
adicional,
mas
apenas
uma
baixa
capacidade
para
neutralizar
base
adicional
Os
principais
rgos
que
regulam
o
pH
do
sistema
tampo
cido
carbnico-bicarbonato
so
pulmes
e
rins.
Alguns
dos
receptores
no
crebro
so
sensveis
s
concentraes
de
H+
e
CO2
nos
fludos
corpreos
Quando
a
concentrao
de
CO2
aumenta,
os
equilbrios
deslocam-se
para
a
esquerda,
o
que
leva
formao
de
mais
H+
Os
receptores
disparam
um
reflexo
para
respirar
mais
rpido
e
mais
profundamente,
aumentando
a
velocidade
de
eliminao
de
CO2
dos
pulmes
e
deslocando
o
equilbrio
de
volta
para
a
direita
Os
rins
absorvem
ou
liberam
H+
e
HCO3-;
muito
do
excesso
de
cido
deixa
o
corpo
na
urina,
que
normalmente
tem
pH
de
5,0
a
7,0
Ismeros
pticos
D-
Aminocidos
Encontrados
em
antibiticos
produzidos
por
bactrias.
Ex.
Valinomicina
Gramicidina
Cadeias
laterais
(Grupo
R)
As
propriedades
das
cadeias
laterais
so
importantes
para
a
conformao
das
protenas
e,
portanto,
para
sua
funo
CLASSIFICAO
DOS
AA
EM
FUNO
DA
POLARIDADE
DO
GRUPO
R:
a)
Aminocidos
apolares
(R
hidrofbico)
R
=
cadeias
orgnicas
com
carter
de
hidrocarboneto
As
cadeias
no
interagem
com
a
gua
Gly,
Ala,
Val,
Leu,
Ile,
Met,
Pro,
Phe,
Try
b)
Aminocidos
polares
(R
hidroflico)
R
=
cadeias
laterais
hidroflicas
que
interagem
com
a
gua
R
pode
ter
carga
eltrica
ou
carga
residual
Trs
categorias:
AA
bsicos
=
carga
+
a
pH
7
AA
cidos
=
carga
a
pH
7
AA
polares
sem
carga
lquida
a
pH
7
Resumo
da
classificao
dos
aminocidos
com
base
na
polaridade
do
grupo
R
AA
apolares
AA
polares:
bsicos
cidos
sem
carga
3.
IONIZAO
DOS
AMINOCIDOS
pH
cido
pH
Neutro
pH
Bsico
Profa
Daniela
Maluf
11
Curva
de
titulao
de
um
aminocido
-Incio:
AA
em
pH
cido
-Adio
de
Base
-pH
aumenta
e
a
ionizao
do
grupo
carboxila
se
altera
-pI:
ponto
isoeltrico
carga
lqida
=
zero
-inicia
a
dissociao
do
grupo
amino
pI
=
pK1
+
pK2/2=
5,97
AMINOCIDOS
ESSENCIAIS
O
homem
sintetiza
10
dos
22
AA.
Os
11
AA
que
ele
no
sintetiza
so
denominados
AA
essenciais
Estes
devem
ser
suplementados
na
dieta.
Se
1
ou
mais
dos
AA
essenciais
no
for
administrado,
o
homem
degrada
suas
protenas
corporais
para
obter
os
AA
que
necessita.
Os
11
AA
essenciais
so
Arg,
His,
Ile,
Leu,
Lys,
Met,
Phe,
Thr,
Try,
Val,
Se-Met
Plantas
e
bactrias
so
capazes
de
sintetizar
todos
os
AA
Os
aminocidos
ligam-se
formando
cadeias
polipeptdicas
Os
aa
podem
formar
polmeros
atravs
da
ligao
entre
o
grupo
COOH
de
um
aa
e
o
grupo
NH2
de
outro
aa.
Profa
Daniela
Maluf
12
PEPTDEOS
No
de
aa
=
2
dipeptdeo
No
de
aa
=
3
tripeptdeo
No
de
aa
at
30
oligopeptdeo
No
de
aa
>
30
polipeptdeos
Ex.:
Hormnios-
vasopressina,
oxitocina
Aminocidos
Peptdeos
Protenas
Protena
vem
do
grego
protos
=
primeiro
So
macromolculas
resultantes
da
condensao
de
molculas
aminocidos
atravs
da
ligao
peptdica.
As
protenas
so
polipeptdios
que
resultam
na
condensao
de
milhares
de
aminocidos.
So
muitas
as
fontes,
e
o
nmero
de
protenas
existentes
na
Natureza
praticamente
infinito,
embora
o
nmero
de
aminocidos
que
as
constituem
seja
bastante
reduzido,
em
torno
de
25.
Isto
ocorre
porque
o
nmero
de
associaes
dos
aminocidos
(aa)
se
d
conforme
conforme
exemplo:
3
aa
diferentes:
A,
B
e
C,
Conduzem
a
6
tripeptdeos:
ABC,
ACB,
BAC,
BCA,
CAB
e
CBA.
(3!
=
3
x
2
x
1
=
6)
4
aa
diferentes:
A,
B,
C
e
D,
Conduzem
a
24
tetrapeptdeos
Profa
Daniela
Maluf
13
(4!
=
4
x
3
x
2
x
1
=
24)
10
aa
diferentes
conduzem
a
mais
de
trs
milhes
(3.628.800)
de
decapeptdeos,
sem
a
incluso
dos
possveis
ismeros
pticos.
(10!
=
10
x
9
x
8
x
7
x
6
x
...)
Insulina
Pncreas
Hemoglobina
Sangue
dos
vertebrados
Casena
Leite
Queratina
Chifres,
unhas
e
cascos
de
animais
Hemocianina
Sangue
dos
invertebrados
Pepsina
Suco
gstrico
Albumina
Ovo,
leite
e
sangue
Clorofila
Vegetais
verdes
Juntamente
com
os
glicdeos
e
os
lipdeos,
as
protenas
constituem
a
alimentao
bsica
dos
animais.
No
entanto,
podemos
dizer
que
as
protenas
so
ainda
mais
importantes,
pois
so
fundamentais
na
estrutura,
funcionamento
e
reproduo
de
todas
as
clulas
vivas.
As
protenas
so
substncias
slidas,
incolores,
insolveis
em
solventes
orgnicos,
e
algumas
solveis
em
gua.
ESTRUTURA
PRIMARIA
AT
QUATERNRIA
a) Estrutura
Primria
ou
Nvel
Primrio
a
seqncia
em
nmero
de
aminocidos
(cadeia
peptdica).
Direo:
amina
terminal
carboxila
terminal
ALA
SER
LYS
LYS
SER
ALA
Uma
variao
na
seqncia
conduz
a
uma
protena
diferente
e
com
ao
bioqumica
diferente.
Ex:
a
ocitocina
e
a
vasopressina
diferem
entre
si
na
seqncia
de
apenas
dois
aa;
a
ocitocina
provoca
as
contraes
uterinas
e
a
vasopressina
provoca
aumento
da
presso
sangnea.
Profa
Daniela
Maluf
14
d) Estrutura
Quaternria
ou
Nvel
Quaternrio
a
que
resulta
da
reunio
de
vrias
estruturas
tercirias
que,
em
conjunto,
assumem
formas
espaciais
bem
definidas.
OBS:
nem
todas
as
protenas
apresentam
esta
estrutura,
mas
de
uma
maneira
geral,
todas
as
enzimas
as
apresentam.
Algumas
protenas
formam
agregados
de
2
ou
mais
subunidades
Ex.
Hemoglobina:
1122
INTERAES
Ligaes
que
estabilizam
esta
conformao:
1. Pontes
de
hidrognio
(ligaes
fracas
porm
numerosas:
C=O
e
NH2)
2. Interaes
hidrofbicas
(As
protenas
se
enovelam
em
estruturas
globulares
e
excluem
H2O
de
seu
interior)
3. Ligaes
eletrostticas
ou
inicas
(entre
grupos
de
aa
cidos
e
bsicos)
ligao
inica
ligao de
hidrognio
A) INTERAES INICAS
Formadas
entre
duas
cadeias
laterais
de
aminocidos
carregados:
negativos
(Glu,
Asp);
positivos
(Lys,
Arg,
His).
So
interaes
dependentes
de
pH
(pKa)
B) LIGAES
DE
HIDROGNIO
H
HO
CH2
N
HN
CH2
S,T
HO CH
R
H
C,M
H
CH2
H
H
N
H
NH
NH2
E,G,N,Q
N CH2
C
R
H
H
O
N C
N,Q
C) INTERAES
HIDROFBICAS
A
QUIMIOTRIPSINA:
A
estrutura
3-D
de
uma
protena
determinada
por
sua
seqncia
de
aminocidos.
A
funo
de
uma
protena
depende
de
sua
estrutura.
Cada
protena
tem
uma
estrutura
nica.
Catalisa
hidrlise
de
ligaes
peptdicas.
DESNATURAO
DE
PROTENAS
A
desnaturao
de
uma
protena
a
desorganizao
das
estruturas
quaternrias,
tercirias
e
secundrias
Agentes
desnaturantes
so
os
que
provocam
a
desorganizao
So
eles:
- agentes
fsicos
(calor,
radiaes
UV,
alta
presso
e
ultra
som)
-
agentes
qumicos
(cidos
fortes,
bases
fortes,
metais
pesados
e
uria)
A
protena
desnaturada
apresenta
as
seguintes
alteraes:
a) Fsicas:
aumento
da
viscosidade
b) Qumicas:
maior
reatividade:
devido
a
exposio
de
grupos
qumicos
que
estavam
encobertos
por
estruturas;
diminuio
da
solubilidade
do
PHi
e,
conseqente
precipitao
c) Biolgicas:
perda
de
suas
propriedades
enzimticas,
antignicas
e
hormonais;
facilmente
digeridas
por
enzimas
hidrolticas
CLASSIFICAO:
A) Simples
Constituida
somente
por
aa
B) Conjugadas
Contm
grupos
prostticos,
(grupos
no
aa,
tais
como
carbohidratos,
ons,
pigmentos).
Grupo
Heme:
tomo
de
Fe
e
porfirina
A)
Fibrosas:
Forma
alongada
Insolveis
Funo
estrutural:
queratinas,
colgeno
B)
Globulares:
Formadas
por
cadeias
polipeptdicas
que
se
dobram
adquirindo
a
forma
esfrica
ou
globular
Funes:
enzimtica,
transporte,
defesa
e
hormonal
Profa
Daniela
Maluf
18
Os
sistemas
vivos
so
formados
por
uma
enorme
variedade
de
reaes
bioqumicas,
e
quase
todas
elas
so
mediadas
por
uma
srie
de
extraordinrios
catalisadores
biolgicos
ENZIMAS
A
manuteno
da
vida
celular
depende
da
contnua
ocorrncia
de
reaes
qumicas
Esta
reao
deve:
1-
Ser
especfica
para
gerar
produtos
definidos
2-
Ter
velocidade
adequada
catalisadores:
substncias
que
aumentam
a
velocidade
das
reaes.
A
atividade
cataltica
de
enzimas
tem
sido
utilizada
pelo
homem
h
milhares
de
anos
Fermentao
do
suco
de
uva
para
obteno
do
vinho;
Fabricao
de
queijo;
Fabricao
de
po.
No
entanto,
estas
eram
apenas
aplicaes
prticas,
uma
vez
que
o
conhecimento
do
modo
de
ao
dos
catalisadores
biolgicos
s
recentemente
foi
elucidado.
HISTRICO
1833
-
A
primeira
hidrlise
enzimtica
do
amido
Os
franceses
Payen
e
Persoz
isolaram
um
complexo
enzimtico
do
malte
que
catalisava
a
transformao
do
amido
em
glicose,
denominando-o
"diastase"
(do
grego
"separar").
O
sufixo
ase
de
diastase
passou
a
ser
usado
1835
-
o
qumico
sueco
Berzelius
descreveu
a
hidrlise
enzimtica
do
amido.
Demonstrou
que
o
amido
pode
ser
mais
eficientemente
decomposto
usando-se
extrato
de
malte
preferencialmente
ao
c.
sulfrico
e
cunhou
o
termo
catlise.
1836
-
Schwann
descobre
a
enzima
digestiva
Pepsina
Pasteur,
defendia
que
a
fermentao
alcolica
s
ocorria
em
presena
de
clulas
vivas
de
levedura.
Lienberg
defendia
que
os
processos
fermentativos
eram
reaes
qumicas.
1897
-
A
polmica
foi
resolvida.
Os
irmos
Buchner
demonstraram
que
um
extrato
de
levedura
livre
de
clulas
era
capaz
de
fermentar
o
acar.
O
extrato
continha
catalisadores
da
fermentao
alcolica.
- 1926
-
Cientistas
descobrem
que
as
enzimas
so
protenas
- James
Summers
isolou
e
cristalizou
a
primeira
enzima,
a
urease.
- A
partir
1960
-
A
evoluo
no
estudo
das
enzimas,
acompanhado
por
avanos
tecnolgicos,
possibilitou
o
isolamento
e
a
identificao
de
propriedades
das
enzimas.
Profa
Daniela
Maluf
19
2.
Transferases
-
Transferncia
de
grupos
Exemplo
Hexoquinase
Profa
Daniela
Maluf
21
4.
Liases
Adio
ou
remoo
de
grupos
(H2O,
NH4+,
CO2)
Ex:
Fumarase
5.
Isomerases
Transferncia
de
grupos
dentro
da
mesma
molcula,
formao
de
ismeros
Exemplo:
Triose
Fosfato
Isomerase
6.
Ligases
catalisam
a
ligao
de
duas
molculas
com
hidrlise
da
ligao
pirofosfato
na
molcula
de
ATP
(ou
uma
semelhante,
igualmente
trifosfatada)
Exemplo:
Piruvato
carboxilase
OUTRAS CLASSIFICAES
PROPRIEDADES
GERAIS
Diferenas
entre
enzimas
e
catalisadores
qumicos
Velocidade
de
reao
mais
rpida:
106
a
1012x
>
que
as
no
catalisadas,
So
varias
ordens
de
magnitude
>
do
que
as
reaes
catalisadas
quimicamente.
Diferenas
entre
enzimas
e
catalisadores
qumicos
Maior
especificidade
da
reao
Grau
de
especificidade
imensamente
>
em
relao
a
identidade
dos
seus
S
e
dos
seus
P
Reaes
enzimticas
raramente
produzem
subprodutos.
Estereoespecificidade:
Agem
em
grupos
funcionais
especficos
catalisando
reaes
de
forma
estereoepecfica,
formando
somente
um
dos
enantimeros
possveis
Condies
reacionais
mais
brandas
pH
Temperatura
INTERAO
ENZIMA-SUBSTRATO
Enzimas
so
macromolculas
muito
maiores
que
seu
substrato
A
ligao
com
o
substrato
d-se
apenas
em
uma
regio
pequena
e
bem
definida-
o
stio
ativo
Esta
regio
formada
por
resduos
de
aa
prximos
uns
aos
outros
pelos
dobramentos
das
cadeias
polipeptdicas
que
definem
a
estrutura
terciria
das
protenas
Profa
Daniela
Maluf
23
O
stio
ativo
da
enzima
constitui
uma
cavidade
de
forma
bem
definida
que
permite
reconhecer
o
substrato
Uma
molcula
para
ser
aceita
como
substrato
tem
que:
ter
uma
forma
espacial
complementar
ao
stio
ativo
da
enzima
ter
grupos
qumicos
capazes
de
realizar
ligaes/interaes
com
os
radicais
do
stio
ativo
da
enzima
Alta
especificidade
das
enzimas:
Enzimas
proteolticas
so
especficas
para
hidrlise
de
protenas,
no
atuando
em
carboidratos,
lipdeos...
Pepsina
hidrolisa
ligaes
peptdicas
Tripsina
hidrolisa
apenas
ligaes
peptdicas
formadas
por
arginina
ou
lisina
L-
aminoxidases
reconhecem
apenas
L-ismeros
MECANISMO
DE
AO
A
reao
enzimtica
ocorre
em
duas
etapas:
E
+
S
E
S
P
+
E
Modelo
Chave-fechadura
Emil
Fischer
em
1894
Relao
estrica
entre
enzima
e
substrato
Profa
Daniela
Maluf
24
Os
stios
de
ligao
aos
substratos
da
maioria
das
enzimas
so,
em
grande
parte,
pr-formados,
mas
sofrem
mudanas
conformacionais
no
momento
da
ligao
do
substrato
(um
fenmeno
denominado
ajuste
induzido).
Teoria
da
Coliso:
As
reaes
qumicas
acontecem
quando
ligaes
so
quebradas
ou
formadas
Para
isto
tomos,
ons
e
molculas
devem
colidir
Todos
os
tomos,
ons
e
molculas
esto
em
constante
movimento
e
portanto
colidindo
constantemente
A
energia
transferida
pelas
partculas
na
coliso
pode
desorganizar
suas
estruturas
eletrnicas
o
suficiente
para
que
as
ligaes
qumicas
sejam
quebradas
ou
novas
ligaes
se
formem.
Energia
de
ativao:
Quantidade
de
energia
requerida
para
romper
a
configurao
eletrnica
estvel
de
qualquer
molcula
especfica
para
que
os
eltrons
possam
ser
reorganizados.
G:
A
diferena
de
energia
entre
produtos
e
reagentes
No
depende
da
E.A.
Taxa
de
reao:
A
freqncia
de
colises
contendo
energia
suficiente
para
que
a
reao
acontea
A
taxa
de
reao
depende:
1- Da
temperatura:
AUMENTO
de
T
AUMENTA
a
freqncia
das
colises
e
o
n
de
molculas
que
vo
reagir;
2- Da
concentrao
Reagentes
esto
+
concentrados
=
Distncia
entre
as
molculas
menor,
maior
probabilidade
de
coliso
3- Da
energia
de
ativao:
Enzimas
so
catalisadores
capazes
de
diminuir
a
Energia
de
ativao
Profa
Daniela
Maluf
25
Enzimas
so
catalisadores
que:
Atuam
em
quantidades
mnimas
Participam
efetivamente
das
reaes
sofrendo
alteraes
em
sua
estrutura
tridimensional
e
retornando
ao
final
da
reao
ao
seu
estado
original
Os
substratos
tem
sua
molcula
tensionada
e
distorcida
aproximando-se
da
conformao
do
estado
de
transio.
Desta
forma,
a
reao
no
depende
dos
choques
entre
as
molculas
Enzimas
atuam
de
diversas
formas:
Baixando
a
E.A.,
atravs
da
criao
de
um
ambiente
no
qual
o
estado
de
transio
estabilizado
(ex.,
distorcendo
a
forma
da
molcula
do
S).
Providenciando
uma
via
alternativa
(ex.,
reagindo
com
o
S
formando
um
complexo
ES,
de
existncia
impossvel
sem
a
presena
da
E).
Reduzindo
a
variao
da
entropia
da
reao
ao
orientar
os
S
de
forma
correta
para
facilitar
a
reao.
Na
ausncia
de
E,
as
molculas
colidem
em
todas
as
direes
possveis
de
forma
aleatria.
Ex:
Decomposio
do
H2O2
1
molcula
de
Catalase
decompe
5
000
000
de
molculas
de
H2O2
pH
=
6,8
em
1
min!!!
Nmero
de
renovao
=
n
de
molculas
de
substrato
convertidas
em
produto
por
uma
nica
molcula
de
enzima
em
uma
dada
unidade
de
tempo.
Profa
Daniela
Maluf
26
2-
Temperatura
temperatura
dois
efeitos
ocorrem:
A
taxa
de
reao
aumenta,
como
se
observa
na
maioria
das
reaes
qumicas;
A
estabilidade
da
protena
decresce
devido
a
desnaturao.
Enzima
temperatura
tima
para
que
atinja
sua
atividade
mxima
4- Concentrao
da
Enzima
A
velocidade
mxima
da
reao
uma
funo
da
quantidade
de
enzima
disponvel
(existindo
substrato
em
excesso)
Profa
Daniela
Maluf
27
5- Concentrao
do
Substrato
INIBIO
ENZIMTICA
Substncias
que
reduzem
a
atividade
de
uma
enzima
de
forma
a
influenciar
a
ligao
do
substrato.
Grande
parte
do
arsenal
farmacutico:
Ex.
tratamento
da
AIDS
feito
com
drogas
que
inibem
a
atividade
de
certas
enzimas
virais,
sulfonamidas
na
enzima
bacteriana
Constituintes
normais
das
clulas
ou
substncias
estranhas
Classificao:
a) Inibio
Irreversvel
COX
Processo
inflamatrios,
ex.
sensao
de
dor
O
complexo
EI
jamais
gera
produto
Ex.
AZT
que
inibe
a
DNA
polimerase
do
vrus
HIV,
afetando
um
conjunto
de
reaes
sequenciais,
tornando
o
vrus
incapaz
de
se
replicar.
c) Inibio
Reversvel
No-Competitiva
O
inibidor
no-competitivo
pode
ser
uma
molcula
que
no
se
assemelha
com
o
substrato,
mas
apresenta
uma
grande
afinidade
com
a
enzima
O
ponto
de
ligao
a
cadeia
lateral
de
um
aminocido,
p.e.,
o
grupo
OH
da
serina
ou
o
grupo
SH
da
cistena
Esta
ligao
pode
distorcer
a
enzima
tornando
o
processo
cataltico
ineficiente
Ao
inespecfica:
inibio
de
vrias
enzimas
Exemplos:
Metais
pesados:
Hg,
Pb
e
Ag
Ingesto
causa
intoxicao
CO-FATORES
Quase
1/3
das
enzimas
requerem
um
componente
no
proteico
para
sua
atividade,
denominado
cofator
A
natureza
essencial
de
tais
co-fatores
explica
por
que
razo
os
organismos
necessitam
de
quantidades
diminutas
de
certos
elementos
nas
suas
dietas.
Isso
tambm
explica,
os
efeitos
txicos
de
certos
metais
pesados
(o
Cd2+
e
o
Hg2+)
que
podem
substituir
o
Zn2+
nos
stios
ativos
de
certas
enzimas
Algumas
enzimas
que
contm
ou
necessitam
de
elementos
inorgnicos
como
cofatores
Co-fatores
Coenzimas
Maioria
deriva
de
vitaminas
hidrossolveis
Muitos
organismos
no
conseguem
sintetizar
certas
pores
das
coenzimas
essenciais.
Tais
substncias
devem
estar
presentes
na
dieta
desses
organismos
e
so,
portanto,
chamadas
de
vitaminas.
Classificam-se
em:
a) transportadoras
de
hidrognio
Coenzima
Abreviatura Reao
Origem
catalisada
Nicotinamida adenina NAD+
Oxi-reduo Niacina ou
dinucleotdio
Nicotinamida adenina NADP+
dinucleotdio fosfato
Flavina adenina
FAD
dinucleotdio
Vitamina B3
Oxi-reduo Niacina ou
Vitamina B3
Oxi-reduo Riboflavina ou
Vitamina B2
Abrev.
Reao catalisada Origem
Pantotenato ou
CoA-SH Transferncia de
Biotina
Piridoxal fosfato
PyF
Metilcobalamina
Tetrahidrofolato
THF
Tiamina
pirofosfato
TPP
grupo acil
Transferncia de
CO2
Transferncia de
grupo amino
Transferncia de
unidades de carbono
Transferncia de
unidades de carbono
Transferncia de
grupo aldedo
Vitamina B5
Biotina ou
Vitamina H
Piridoxina ou
Vitamina B6
Cobalamina ou
Vitamina B12
cido flico
Tiamina ou
Vitamina B1
REGULAO
DA
ATIVIDADE
ENZIMTICA
Um
organismo
deve
poder
regular
as
atividades
catalticas
de
suas
enzimas
para
que
ele
possa
coordernar
seus
processos
metablicos,
responder
s
mudanas
no
meio,
crescer
e
diferenciar-se,
tudo
de
maneira
ordenada.
H
duas
maneiras
pelas
quais
isso
pode
ocorrer:
1) Controle
da
disponibilidade
da
enzima
A
quantidade
de
uma
enzima
em
uma
clula
depende:
a)
velocidade
de
sntese
b)
velocidade
de
degradao
Cada
uma
dessas
velocidades
diretamente
controlada
pela
clula
e
est
sujeita
a
mudanas
drsticas
em
perodos
que
vo
de
minutos
(em
bactrias)
at
horas
(em
organismos
superiores)
2)
Controle
da
atividade
da
enzima
A
atividade
pode
ser
regulada
por
meio
de
alteraes
estruturais
que
influenciem
a
afinidade
da
ligao
do
substrato
enzima.
A
afinidade
de
ligao
do
S
a
uma
E
pode
variar
tambm
com
a
ligao
de
pequenas
molculas,
chamadas
efetores
alostricos
que
podem
tanto
aumentar
como
dimunuir
a
atividade
Um
modelo
muito
comum
de
regulao
alostrica
a
inibio
por
"feed-back
Algumas
enzimas
podem
ter
suas
atividades
reguladas,
atuando
assim
como
moduladoras
do
metabolismo
celular.
Esta
modulao
essencial
na
coordenao
dos
inmeros
processos
metablicos
pela
clula
Profa
Daniela
Maluf
31
MECANISMOS
DE
CONTROLE:
1)
Induo:
A
presena
do
substrato
A
induz
a
sntese
da
enzima
a
3)
Represso
catablica:
Caso
haja
um
caminho
mais
conveniente,
a
sntese
de
todas
as
enzimas
reprimida
4)
Ajuste
Fino:
Cada
isoenzimas
pode
ser
regulada
independentemente
ALGUMAS
ENZIMAS
SO
SINTETIZADAS
NA
FORMA
INATIVA
Certas
enzimas,
cujo
local
de
ao
extracelular
(plasma,
trato
digestrio),
so
sintetizadas
como
precurssores
inativos-
zimognios
Para
que
este
adquira
as
propriedades
de
enzimas,
devem
passar
por
hidrlise
das
ligaes
peptdicas
Ex.
Pepsinognio
Pepsina
pepsinognio
Profa
Daniela
Maluf
32