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do Solo em Estudos da
Matria Orgnica
Embrapa Solos
Fracionamento Fsico
do Solo em Estudos da
Matria Orgnica
Renato Roscoe
Pedro Luiz Oliveira de Almeida Machado
Dourados, MS
2002
Embrapa Solos
Rua Jardim Botnico, 1024
22460-000 Rio de Janeiro, RJ
Fone: (21) 274-4999
Fax: (21) 274-5291
www.cnps.embrapa.br
E-mail: sac@cnps.embrapa.br
Roscoe, Renato
Fracionamento fsico do solo em estudos da matria orgnica / Renato Roscoe, Pedro
Luiz Oliveira de Almeida Machado. Dourados: Embrapa Agropecuria Oeste; Rio de
Janeiro: Embrapa Solos, 2002.
86p. : il. ; 21cm.
ISBN 85-7540-004-5
1. Solo - Matria orgnica - Fracionamento fsico. 2. Matria orgnica - Solo Fracionamento fsico. I. Machado, Pedro Luiz Oliveira de Almeida. II. Embrapa Agropecuria
Oeste. III. Embrapa Solos. IV. Ttulo.
CDD(21.ed.) 631.4
Embrapa 2002
Autores
Renato Roscoe
Eng. Agrn., Pesquisador, Dr.,
Embrapa Agropecuria Oeste,
Caixa Postal 661,
79804-970 - Dourados, MS.
Fone: (67) 425-5122, Fax: (67) 425-0811
E-mail: roscoe@cpao.embrapa.br
Pedro Luiz Oliveira de Almeida Machado
Eng. Agrn., Pesquisador, Dr.,
Embrapa Solos,
Rua Jardim Botnico, 1024
22460-000 - Rio de Janeiro, RJ.
Fone: (21) 274-4999, Fax: (21) 274-5291
E-mail: pedro@cnps.embrapa.br
Apresentao
Sumrio
Introduo, 11
Fracionamento Fsico: Base Conceitual, 15
Mtodo Densimtrico, 19
Frao leve livre (FL-livre), 19
Frao leve oclusa (FL-oclusa), 24
Frao pesada (FP), 28
Aspectos metodolgicos, 30
Mtodo Granulomtrico, 37
Fracionamento em COM-secundrios, 37
Aspectos metodolgicos, 42
Fracionamento em COM-primrios, 43
Composio e dinmica dos COM-primrios, 45
Aspectos metodolgicos, 52
Consideraes Finais, 63
Referncias Bibiogrficas, 65
Fracionamento Fsico
do Solo em Estudos da
Matria Orgnica
Renato Roscoe
Pedro Luiz Oliveira de Almeida Machado
Introduo
Embora contribua somente com uma pequena parcela da massa total dos
solos minerais, a matria orgnica do solo (MOS) componente essencial nos
diversos processos qumicos, fsicos e biolgicos de ecossistemas terrestres
(Piccolo, 1996; Christensen, 2000; Carter, 2001). Diversos trabalhos tm
ressaltado suas funes na manuteno da qualidade do solo (Christensen &
Johnston, 1997; Janzen et al., 1997), na sustentabilidade dos sistemas
naturais e agrcolas (Carter, 2001; Swift & Woomer, 1993) e no balano de
gases responsveis pelo efeito estufa (Wigley & Schimel, 2000; Lal et al.,
1997; Schlesinger, 1997). No Brasil, vrios pesquisadores tm ressaltado a
importncia da MOS em melhorar e manter as propriedades fsico-qumicas e
biolgicas de diversos tipos de solo (Raij, 1969; Morais et al., 1976; Igue et al.,
1984; Pereira & Peres, 1987; Castro Filho et al., 1998; Mendona & Rowell,
1994; Silva & Resck, 1997; Franchini et al., 1999; Amado et al., 1999).
Compreende-se por MOS todo o carbono orgnico presente no solo na forma
de resduos frescos ou em diversos estgios de decomposio, compostos
humificados e materiais carbonizados (ex.: carvo em solos de savana),
associados ou no frao mineral; assim como a poro viva, composta por
razes e pela micro, meso e macrofauna. Entretanto, esta uma conceituao
terica e na maioria das vezes o que se convenciona chamar de MOS
compreende somente parte dos componentes citados, dependendo
enormemente do preparo da amostra e da metodologia utilizada na
determinao. Por exemplo, em anlises de rotina de fertilidade do solo, as
amostras so destorroadas e tamisadas, eliminando-se todos os resduos
orgnicos maiores que 2 mm (incluindo-se toda a macro e parte da
mesofauna), e analisados por oxidao em via mida (ex.: Embrapa, 1997),
que pouco sensvel a fraes com alto grau de humificao e a formas
carbonizadas.
Devido a sua complexidade e diversidade estrutural (Saiz-Jimenes, 1996;
14
Introduo
15
16
17
Fracionamento Fsico:
Base Conceitual
funcionais e dinmicos, assim como ao isolamento de complexos organominerais, nos mais diversos ecossistemas (Turchenek & Oades, 1979;
Stevenson & Elliott, 1989; Balesdent et al., 1991; Gregorich & Ellert, 1993;
Golchin et al., 1997; Feller & Beare, 1997; Elliott & Cambardella, 1991;
Cambardella, 1997; Christensen, 1992, 1996a, b, 2000). Assim, trata-se de
um procedimento utilizado para relacionar a MOS com a agregao e
estabilidade de agregados ou para a quantificao de compartimentos da
MOS visando estudos sobre a dinmica da mesma. Segundo Christensen
(1992), o conceito por trs do fracionamento fsico enfatiza o papel das fraes
minerais na estabilizao e transformao da MOS. Existem vrios modelos
descritivos do arranjo espacial das partculas minerais e orgnicas no solo,
servindo de embasamento terico para os procedimentos utilizados em
diferentes esquemas de fracionamento fsicos (Oades, 1984; Oades &
Waters, 1991; Golchin et al., 1994a, 1997; Christensen, 1996a, b, 2000). Tais
modelos podem ser bem complexos, como o descrito por Golchin et al. (1997),
mas, em geral, um modelo relativamente simples (Fig. 1) serve de base para a
maioria dos esquemas de fracionamento fsico utilizados (Christensen,
1996a, b, 2000).
Em tal modelo, Christensen (1996a, b, 2000) postula que, dependendo do
grau de associao com a matriz do solo, a MOS pode estar livre ou
fracamente associada s partculas de solo, sendo chamada de matria
orgnica no-complexada (MONC); ou estar fortemente ligada s partculas
minerais, formando complexos organo-minerais (COM). Os COM so ditos
primrios, quando resultam da interao direta entre partculas minerais
primrias e compostos orgnicos. Juntamente com a MONC, os COMprimrios constituem as unidades bsicas de organizao das particulas
minerais e orgnicas do solo (Fig. 1). Em um segundo nvel hierrquico de
organizao, os COM-primrios agrupam-se, formando agregados ou COMsecundrios. Neste processo, pode ocorrer o aprisionamento de parte da
18
COM-Secundrios
COM-Primrios
Tamanho Areia
COM-Primrios
Tamanho Silte
COM-Primrios
Tamanho Argila
A
B
C
A
B
C
A
B
C
MONC-Oclusa A
B
MONC-Livre
19
20
Mtodo Densimtrico
21
Mtodo Densimtrico
22
23
Mtodo Densimtrico
Cerrado
Pastagem
(ppm)
Cerrado
Pastagem
(ppm)
13
Fig. 2. Espectros de C RNM em estado slido para (a) frao leve livre separada em uma
soluo de NaI (1,6 g cm-3) antes da completa disperso do solo com ultrasom, e (b) frao leve
oclusa, separada aps a disperso.
Fonte: Roscoe et al. (2002a).
24
Tabela 1. Tipo de solo, clima e vegetao, teor de argila (g kg-1), teor de carbono orgnico
total (CT, em g kg-1), peso de FL-livre em relao ao solo total (Peso, em g kg-1), teores de
carbono da FL-livre (C, em g kg-1 de frao) e quantidade de carbono na FL-livre expressa
em relao ao carbono total (C/CT, em percentagem).
Fonte
Solo
Clima
Vegetao
Argila
CT
FL-livre
Peso
C/CT
Aa
A
A
A
A
Natrixeralf
Hapludalf
Chromustert
Rhodoxeralf
Pellustert
Mediterrneo
Subtropical
Subtropical
Mediterrneo
Subtropical
Floresta
Floresta
Floresta
Pastagem
Pastagem
120
230
520
170
720
35,3
25,0
41,7
28,2
28,0
24
14
43
9
6
283
258
301
247
327
19
15
31
8
7
B
B
B
B
B
Inceptisol
Inceptisol
Inceptisol
Andisol
Andisol
Temperado
Temperado
Temperado
Temperado
Temperado
280
220
220
280
240
81,6
44,4
17,7
102,0
82,8
30
10
4
20
10
325
302
279
226
290
12
8
6
5
4
3 solos c
Temperado
23,0
3 solos c
Temperado
25,1
D
D
D
Oxisol
Oxisol
Oxisol
Tropical
Tropical
Tropical
Floresta
Pastagem
Milho-PC b
Pastagem
CevadaPCb
Milho/SojaPC
Milho/SojaPD
Floresta
Pastagem
Pastagem
550
550
550
73,0
51,5
84,0
12
15
23
307
269
234
5
8
7
E
E
E
E
LE
LE
LE
LE
Tropical
Tropical
Tropical
Tropical
Cerrado
Cerrado
Pastagem
Pastagem
870
870
880
840
64,7
61,4
32,3
24,9
67
56
8
12
344
345
257
289
36
32
6
10
F
F
F
LE
LE
LE
Tropical
Tropical
Tropical
Cerrado
Milho-PD b
Milho-PC b
870
850
850
41,9
31,4
31,1
29
6
7
258
210
240
18
4
5
LA
Tropical
Cerrado
580
46,8
18
LVdf
Subtropical
Floresta
560
45,0
32
(1)
25
Mtodo Densimtrico
Fonte
Uso do solo
Arado de aiveca
3.055 c (1)
563 c
Cultivo mnimo
3.494 b
681 c
Plantio direto
3.729 b
926 b
Pradaria nativa
4.237 a
1.671 a
-1
-------------------------------------
26,9 (1,1)
45,0 (4,3)
Floresta secundria
(1)
C FL
---------------------------------------g m 2 ---------------------------------------
-------------------------------------g kg
C total
1,2 (01)
3,9 (02)
14,6 (0,3)
26
2,0 g cm-3) era sempre muito prximo ao observado para o CO2 atmosfrico na
data de coleta das amostras, o que sugere uma rpida reciclagem deste
reservatrio de carbono no solo. Entretanto, conforme sugerido por Cadisch
et al. (1997) e Six et al. (1998), a FL-livre pode no ser dinamicamente
homognea. Materiais recalcitrantes, como carvo (Skjemstad et al., 1990,
1996; Cadisch et al. 1997; Schmidt & Noack, 2000; Roscoe et al., 2000,
2001), podem ser encontrados nesta frao, alterando sua dinmica como
um todo. Roscoe et al. (2001), utilizando a abundncia natural do isotopo
estvel 13C, observaram que somente 50% da FL-livre havia reciclado no
horizonte A, aps 23 anos de pastagem cultivada (Fig. 3b). Os autores
observaram ainda que, a ciclagem da FL-livre foi maior que a das fraes
pesadas somente nesta primeira profundidade (Fig. 3b, c, d, e). A
identificao por microscopia tica de fragmentos de carvo na FL-livre levou
os autores a conclurem que a dinmica dessa frao, no solo estudado,
altamente influenciada pela presena de material carbonizado.
Mtodo Densimtrico
27
Fig. 3. Contedo de carbono orgnico (g dm-3de solo) originrio da vegetao original (cerrado
stricto sensu denso) e da pastagem de Brachiaria spp. (barras slidas) e percentagem do C
orgnico proveniente da vegetao original (linha e tringulos), para cada horizonte, aps 23
anos de convero do cerrado em pastagem: (a) no solo total; (b) na FL-livre; (c) na FL-oclusa; e
nos COM-primrios do tamanho (d) areia, (e) silte e (f) argila.
Fonte: Adaptado de Roscoe et al. (2001).
28
29
Mtodo Densimtrico
Tabela 3. Tipo de solo, clima e vegetao, teor de argila (g kg-1), teor de carbono
orgnico total (CT, em g kg-1), peso de FL-oclusa em relao ao solo total (Peso, em g
kg-1), teores de carbono da FL-oclusa (C, em g kg-1 de frao) e quantidade de carbono
na FL-oclusa expressa em relao ao carbono total (C/CT, em percentagem).
FonSolo
te
Clima
Vegetao
Argil
a
CT
Fl-oclusa
Peso
C/CT
A (1)
A
A
A
A
Natrixeralf
Hapludalf
Chromustert
Rhodoxeralf
Pellustert
Mediterrneo
Subtropical
Subtropical
Mediterrneo
Subtropical
Floresta
Floresta
Floresta
Pastagem
Pastagem
120
230
520
170
720
35,3
25,0
41,7
28,2
28,0
82
108
181
69
126
394
384
402
396
347
9
17
18
10
16
B
B
B
B
B
Inceptisol
Inceptisol
Inceptisol
Andisol
Andisol
Temperado
Temperado
Temperado
Temperado
Temperado
Floresta
Pastagem
Milho-PC (2)
Pastagem
Cevada-PC(2)
280
220
220
280
240
81,6
44,4
17,7
102,0
82,8
160
70
20
260
110
199
219
168
117
119
39
28
21
15
16
C
C
3 solos (3)
3 solos (3)
Temperado
Temperado
Milho/Soja-PC
Milho/Soja-PD
23,0
25,1
13
21
D
D
D
Oxisol
Oxisol
Oxisol
Tropical
Tropical
Tropical
Floresta
Pastagem
Pastagem
550
550
550
73,0
51,5
84,0
67
43
20
440
460
450
4
4
1
E
E
E
E
LE
LE
LE
LE
Tropical
Tropical
Tropical
Tropical
Cerrado
Cerrado
Pastagem
Pastagem
870
870
880
840
64,7
61,4
32,3
24,9
1,3
2,0
1,0
1,6
442
378
352
442
1
1
1
2
F
F
F
LE
LE
LE
Tropical
Tropical
Tropical
Cerrado
Milho-PD (2)
Milho-PC (2)
870
850
850
41,9
31,4
31,1
1,7
1,4
1,1
404
407
436
2
2
2
LA
Tropical
Cerrado
580
46,8
1,7
LVdf
Subtropical
Floresta
560
45,0
2,4
(1)
30
Mtodo Densimtrico
31
32
Aspectos metodolgicos
Para o fracionamento densimtrico so utilizadas soluo orgnicas ou
salinas com densidades ajustadas entre 1,4 e 2,2 g cm-3 (Gregorich & Ellert,
1993; Christensen, 1992). Em uma ampla reviso sobre fracionamento
fsico, Christensen (1992) ressaltou as dificuldades de se estabelecerem
comparaes entre estudos, em funo dos diferentes procedimentos de
fracionamento densimtrico adotados. O autor identificou, entre os trabalhos
avaliados, 19 tipos de solues com ou sem aditivos, ajustadas para
diferentes densidades e utilizando distintos tratamentos de disperso. Os
lquidos orgnicos (ex.: tetrabromoetano, bromofrmio, tetracloroetano)
esto sendo substitudos por solues salinas inorgnicas (ex.: politungstato
de sdio, iodeto de sdio, brometo de zinco) devido alta toxicidade de
hidrocarbonetos halogenados (Six et al., 1999b). Spycher et al. (1983)
ressaltaram as vantagens, em termos de segurana e comodidade, das
solues inorgnicas. Solues de iodeto de sdio (NaI) tm sido largamente
utilizadas (Roscoe et al., 2000, 2001, 2002, 2003; Sohi et al., 2001; Freixo et
al., 2002b), principalmente devido aos menores custos, sendo at mesmo
recomendadas como padro por Gregorich & Ellert (1993) na separao de
fraes leves, com uma densidade ajustada entre 1,6 e 1,8 g cm-3. Entretanto,
o NaI ainda apresenta um considervel nvel de toxicidade, sendo
recomendado o uso de luvas e mscaras de proteo, evitando o contato
com a pele e inalao do iodo. Alguns autores vm recomendando o uso de
uma suspenso coloidal de Si, conhecida pelo nome comercial de LudoX, a
qual no apresenta nenhuma toxicidade, inclusive para a microbiota, o que
vem a ser extremamente vantajoso em estudos de incubao das fraes
Mtodo Densimtrico
33
34
Tubo Plstico
L de Vidro (1 cm)
Resina (7,5 cm)
L de Vidro (1 cm)
Carvo Ativado (7 cm)
L de Vidro (3 cm)
Tampa de Borracha
Regulador de Fluxo
Soluo de PTS
Limpa
Fig. 4. Diagrama da coluna de reciclagem do politungstato de sdio (PTS).
Fonte: adaptado de Six et al. (1999b).
Mtodo Densimtrico
35
oclusa e FP, conforme descrito por Sohi et al. (2001) (Fig. 5). O procedimento,
originalmente desenvolvido para quantificar fraes distintas da MOS para
modelos de simulao da dinmica da MOS, pode ser executado em solos na
umidade natural passados em peneira de 6 mm ou em terra fina seca ao ar (< 2
mm). Pode ainda ser aplicado a diferentes classes de agregados, aps a sua
separao por peneiramento mido ou seco (Six et al., 1998), ou a diferentes
classes texturais, aps o fracionamento granulomtrico (Baldock et al., 1992;
Six et al., 2000b). Conforme discutido anteriormente, as quantidades de FLlivre e FL-oclusa podem variar significativamente em funo do tipo de
preparao da amostra, antes do fracionamento densimtrico. A quebra de
agregados, passando-os em peneiras de 2 mm, como normalmente feito em
anlises qumicas de rotina, pode fazer com que parte da FL-oclusa seja
recuperada na FL-livre. Portanto, recomenda-se uma avaliao preliminar do
tipo de estrutura predominante no solo, para que se defina a malha da peneira
a ser utilizada. At o momento, nenhum estudo mais detalhado, envolvendo
diferentes tipos de solo, foi realizado para avaliar o efeito de diferentes pretratamentos na quantidade e qualidade do material recolhido em cada uma
das FLs.
O esquema de fracionamento densimtrico descrito por Sohi et al. (2001) (Fig.
5) apresenta duas fases distintas de disperso do solo. Na primeira, agita-se
levemente a suspenso de solo + NaI (1,6-1,8 g cm-3) por 30 segundos, sendo
um processo envolvendo baixo nvel de energia. Embora existam variaes
na literatura para esta primeira fase de disperso, o importante ter uma
quantidade de energia suficiente para colocar todas as partculas em
suspenso, porm insuficiente para quebrar os agregados, o que liberaria a
FL-oclusa. No segundo processo de disperso, o objetivo romper todos os
agregados, liberando assim o material ocluso. Vrios procedimentos tm sido
recomendados nesta fase, envolvendo agitao mecnica por longos
perodos (16-24 horas), na presena de esferas de vidro e/ou agentes
dispersantes (Balesdent et al., 1988, 1991, 1998; Feller et al., 1991;
Balesdent, 1996; Gale et al., 2000a, b; Six et al., 1998) ou, como representado
na Fig. 5, utilizando-se energia ultrasnica (Gregorich & Ellert, 1993; Parfitt et
al., 1997; Sohi et al., 2001; Roscoe et al, 2000, 2001, 2002, 2003). O ultrasom
vem sendo amplamente utilizado, sobretudo devido possibilidade de
quantificao da energia aplicada (North, 1976; S et al., 1999; Roscoe et al.,
2000). Embora no to crtico como para o fracionamento granulomtrico,
diferentes quantidades de energia podem afetar a quantidade de FL-oclusa
36
Frao Pesada
Iodeto de sdio
Mtodo Densimtrico
37
estudos onde o teor de cinzas de fraes leves podem ser superiores a 500 g
kg-1 ou o contedo de carbono ser menor que 250 g kg-1 (Christensen, 1992).
Em muitos casos, este elevado teor de cinzas est relacionado a
contaminaes por particulas minerais durante o fracionamento. Quando os
agregados so umedecidos, bolhas de ar podem ficar aprisionadas em
microporos no seu interior, reduzindo a sua densidade (Christensen, 1992).
Observa-se que o teor de C orgnico varia entre 210 e 350 g kg-1 na FL-livre
( T a b e l a 1 ) e e n t r e 1 2 0 e 4 6 0 g k g - 1
na FL-oclusa (Tabela 3). Na maioria das vezes, os teores so mais elevados
para a FL-oclusa. No entanto, em solos com elevados teores de aluminosilicatos amorfos (Andisols), a FL-oclusa pode apresentar reduzido teor de C
orgnico (referncia B - Tabela 3), devido a contaminaes por tais minerais.
Quando 13C NMR e pirlise CG/EM forem usadas na caracterizao da FL,
tratamentos suplementares para reduzir o teor de cinzas so recomendados
(ex. tratamento com HCl/HF e ditionito) (Oades et al., 1987; Bleam, 1991;
Saiz-Jimenez, 1996; Piccolo & Conte, 1998).
O mtodo granulomtrico empregado para a separao de COMsecundrios (agregados de diferentes classes de tamanho), por
peneiramento seco ou mido, ou para a separao de COM-primrios,
definidos em funo de classes texturais: areia, silte e argila (Fig. 1)
(Christensen, 1992, 1996a, 2000). De acordo com Feller (1998) foi o qumico
francs Schloesing, em 1874, quem primeiro publicou um mtodo de
fracionamento granulomtrico completo do solo para estudos de fatores
determinantes da estabilidade de agregados de solos cultivados. A
separao de COM-secundrios classicamente utilizada em estudos de
manejo do solo (Yoder, 1936; Kemper, 1965; Kemper & Chepil, 1965), mas
somente recentemente vem sendo empregada em estudos de dinmica e
composio de diferentes reservatrios da MOS (Tisdall & Oades, 1980,
1982; Elliott, 1986; Baldock et al., 1987; Elliott et al., 1991; Oades & Waters,
1991; Beare & Bruce, 1993; Cambardella & Elliott, 1992, 1993, 1994;
Christensen, 1996a, 2000; Feller & Beare, 1997; Six et al., 1998). A
separao em COM-primrios, por sua vez, mais difundida em estudos de
MOS, sendo um assunto mais debatido na literatura (ver revises de
38
C orgnico recuperado
(% C orgnico total)
12
10
0
20
40
60
120
300
600
Tempo (s)
Fig. 6. Efeito do tempo de sonificao na quantidade de FL-oclusa recuperada
em uma suspenso de politungstato de sdio (1,6 g cm-3).
Fonte: adaptado de Golchin et al. (1994b).
Mtodo Granulomtrico
39
Mtodo Granulomtrico
Christensen, 1992; Feller & Beare, 1997). Esses mtodos podem ser
facilmente adaptados aos procedimentos de rotina em laboratrios de fsica
do solo e apresentam grande praticidade em sua execuo.
Fracionamento em COM-secundrios
O uso de fracionamento do solo em COM-secundrios, no estudo de MOS,
baseia-se na hiptese hierrquica de formao e estabilizao de agregados
por compostos orgnicos, descrita por Oades & Waters (1991) e Oades
(1993), e formulada em um modelo conceitual por Golchin et al. (1997). Os
compostos orgnicos funcionam como agentes ligantes, sendo agrupados
em transitrios (principalmente polissacardeos), temporrios (razes e hifas)
e persistentes (polmeros orgnicos fortemente adsorvidos) (Christensen,
2000). As partculas primrias do solo, em um primeiro nvel de organizao,
formariam complexos organo-minerais muito estveis (COM-primrios) com
tamanho inferior a 20 m, sendo estabilizadas por agentes persistentes. Em
um segundo nvel hierrquico, esses COM-primrios estariam unidos por
materiais orgnicos humificados ou poderiam aglutina-se em torno de
fragmentos de resduos vegetais, em avanado estgio de decomposio.
Formaria, assim, microagregados de tamanho entre 20 e 250 m,
envolvendo agentes persistentes e transitrios. O ltimo nvel hierrquico
de agregao seria representado por macroagregados, maiores que 250
m, formados pela unio de microagregados. Os macroagregados
pequenos (250-2000 m) seriam formados em torno de fragmentos de
resduos vegetais ou hifas fngicas em estgios iniciais de decomposio
(agentes temporrios), cimentados por produtos metablicos da
decomposio destes resduos pela microbiota (agentes transitrios). Os
m a c r o a g r e g a d o s
m a i o r e s
q u e
2000 m seriam formados e estabilizados por foras mecnicas e pela
40
Mtodo Granulomtrico
41
42
Disco
Cerrado
Eucalipto
Pastagem
Plantio Direto
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0-5
0-10
10-20
20-30
230-40
Profundidades (cm)
Fig. 7. Percentagem de agregados > 2 mm em diferentes profundidades e sistemas
de manejo, para um Latossolo Vermelho distrfico (530 g kg-1 de argila) do Bioma
Cerrado.
Fonte: baseado na Fig. 11 de Resck et al. (1999).
43
Mtodo Granulomtrico
Tratamento
Plantio Direto
Convencional
Platio Direto
Convencional
2-1
1-0,5
0,5-0,25
< 0,25
Mdias seguidas de mesma letra nas colunas e dentro de uma mesma profundidade
no diferem entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.
Fonte: adaptado de Castro-Filho et al. (1998).
44
Aspectos metodolgicos
A separao de agregados por classes de tamanho e seus problemas
metodolgicos encontram-se discutidos na literatura (Yoder, 1936; Kemper,
1965; Kemper & Chepil, 1965; Beare & Bruce, 1993). A combinao do
fracionamento em COM-secundrios com a anlise detalhada da
composio da MOS nessas fraes tem contribudo bastante para um
melhor entendimento dos processos de agregao. Exemplos de anlises
comumente usadas nas diferentes classe de tamanho so o contedo de
polisacardeos, podendo ser dividido em celulsicos e no-celulsicos
(Tisdall & Oades, 1980, 1982; Baldock et al, 1987; Haynes & Swift, 1990;
Piccolo & Mbagwu, 1990; Oades & Waters, 1991; Lehmam et al., 2001), e o de
lignina, sendo possvel a avaliao de seu estado de oxidao (Lehmann et
al., 2001).
As possibilidades mais promissoras para a compreenso da relao entre
MOS e agregao, no entanto, vm da combinao da separao dos COMsecundrios com um fracionamento em COM-primrios ou um fracionamento
densimtrico de cada classe de COM-secundrio (Christensen, 1986; Six et
al., 1998). Um exemplo de esquema de fracionamento combinado foi descrito
por Six et al. (1998) (Fig. 8). Utilizando-se tais fracionamentos combinados,
pode-se separar MOS com diferentes naturezas (composio, funo e
dinmica), possibilitando uma melhor caracterizao dos diferentes
agregados presentes no solo. Tais estudos tm sido extremamente
relevantes para o entendimento das relaes entre MOS e os processos de
formao e estabilizao de agregados (Oades, 1984; Oades & Waters,
1991; Kay, 1997; Jastrow & Miller, 1997; Gale et al., 2000a), assim como na
elucidao do efeito protetor dos agregados contra a decomposio da MOS
(Gregorich et al., 1995; Golchin et al., 1997; Angers & Chenu, 1997; Gale et
al., 2000b).
Fracionamento em COM-primrios
O fracionamento do solo em COM-primrios baseia-se na hiptese de que,
devido a diferenas na composio mineralgica, as partculas em cada
classe textural do solo associam-se de forma distinta com a MOS
Mtodo Granulomtrico
45
46
Agregados < 53 m
Agregados 53-250 m
Agregados 250-2000 m
Flotao a
-3
1,85 g cm
FLL
FP
Flotao a
-3
1,85 g cm
FLL
Disperso em
HMP +
peneiramento
MOSmin
< 53 m
FLI + areia
53-250 m
FLI fina
FP
MOSmin
< 53 m
Flotao a
-3
1,85 g cm
FLL
Disperso em
HMP +
peneiramento
FLI + areia
53-250 m
FLI fina
MOSmin
< 53 m
FP
Disperso em
HMP +
peneiramento
FLI + areia
53-250 m
FLI fina
FLI + areia
250-2000 m
FLI grossa
FLI + areia
>250 m
FLI grossa
m;
Mtodo Granulomtrico
47
48
Solo
Tamanho
Frao
(mm)
Teor de C
orgnico
(mg g-1 )
Relao
C/N
C total
(%)
20-2000
2-20
0-2
< 10
20-40
50-70
20-2000
2-20
0-2
10-30
20-40
35-70
20-2000
2-20
0-2
16-44
48-84
17-26
23-30
13-14
10-11
15-21
17-31
45-56
20-2000
2-20
0-2
13-56
14-42
16-35
19-32
13-17
8-11
8-17
11-33
52-67
20-2000
2-20
0-2
5-15
30-63
15-36
15-25
10-15
8-12
10-23
22-28
54-70
20-2000
2-20
0-2
5-10
33-61
24-29
14-17
15-28
12-15
14-25
22-47
45-56
20-2000
2-20
0-2
2-3
26-37
39-43
23-27
20-23
13-15
2-4
39-45
51-59
250-2000
20-250
2-20
0-2
0,4-1,6
1,1-2,5
2,4-7,3
2,5-8,2
16-23
13-17
10-12
7-9
3-9
8-17
30-39
40-57
ABCDEFG-
Christensen (2000);
Feller & Beare (1997);
Kouakoua (1997), dados sumarizados por Freitas et al. (2000);
Feller (1995), dados sumarizados por Freitas et al. (2000);
Freitas et al. (2000);
Guggenberger et al. (1995);
Solomon et al. (2000).
49
Mtodo Granulomtrico
Clima
Solo
Vegetao/
uso
Argila
C
Total
-----g kg -1 solo--155
130
199
88
VSC
Areia
grossa
Areia
Silte
fina
Argila
-------------g kg -1 C total-----------19
25
14
7
32
16
7
3
Temper.
-4.1 oC
743 mm
Boroll
Flor. Con.
Pastagem
II
Tropical
26 oC
2200 mm
Oxisol
Savana
Pastagem
Past. Cons.
394
408
406
23
27
26
25
48
40
6
19
14
3
7
5
III
Tropical
26 oC
3600 mm
Typic
Humitropepts
Fl. Prim.
Pastagem
Fl. Sec. 3
Fl. Sec. 12
Fl. Sec. 18
665
645
658
610
619
72
58
71
75
81
52
54
44
53
45
14
19
17
19
16
6
8
8
6
5
IV
Tropical
20 oC
550 mm
Chromic
luvisols
Mata
Mata Man.
Cult. 3
Cult. 15
Org. 20
295
180
251
251
183
19
14
8
8
19
15
11
10
9
9
7
5
5
4
6
34
34
22
23
16
26
24
16
16
21
50
Contedo de carboidratos
Areia Areia Silte
grossa fina
Argila
----------/g kg -1 C total----------149
114
84
52
86
67
54
42
(galactose+manose)/(arabinose+xilose)
Areia
grossa
Areia
fina
Silte
Argila
1,0
1,7
1,5
1,2
1,9
1,5
2,2
1,5
Flor. Con.
Pastagem
II
Savana
Pastagem
Past. Cons.
124
171
237
103
115
110
215
210
212
0.39
0.26
0.28
1.27
0.80
0.94
2.13
1.90
2.38
III
Fl. Prim.
Pastagem
Fl. Sec. 3
Fl. Sec. 12
Fl. Sec. 18
187
197
179
165
177
153
159
121
122
138
184
204
167
169
159
0.73
0.77
0.68
0.77
0.67
0.99
0.97
1.11
1.12
1.09
2.09
1.41
1.69
1.52
1.47
IV
Mata
Mata Man.
Cult. 3
Cult. 15
Org. 20
79
69
97
78
31
131
109
172
183
88
1.54
1.55
0.84
1.02
1.13
1.63
1.76
1.14
1.50
1.63
84
85
101
101
79
91
92
100
99
82
0.58
0.31
0.24
0.18
0.29
0.70
0.45
0.15
0.39
0.65
Mtodo Granulomtrico
51
(referncia I - Tabela 7). Por outro lado, solos sob cultivo intenso podem
apresentar uma tendencia contrria, aumentando os teores de carboidratos
hidrolisveis com a diminuio do tamanho de partcula. Christensen (2000)
demonstrou que, para uma srie de solos dinamarqueses cultivados por
longos perodos, os valores aumentavam na ordem frao areia (37 g kg-1) <
silte (68 g kg-1) < argila (92 g kg-1). Tal fenmeno est relacionado com a perda
de MMO com o cultivo (Christensen, 2000). A origem dos carboidratos
hidrolisveis, no entanto, apresenta um mesmo padro de comportamento
independentemente do tipo de solo, vegetao ou clima (Tabela 7). Conforme
sugerido por crescente relao (galactose + manose)/(arabinose + xilose), os
carboidratos hidrolisveis de origem microbiana tendem a se acumular em
fraes mais finas. Por estes resultados conclui-se que os contedos de
carboidratos hidrolisveis exibem valores mais elevados na MMO, sendo
predominantemente de origem vegetal. Por outro lado, um notvel acmulo
tambm ocorre na frao argila, porm de materiais de origem microbiana. A
frao silte ocupa uma posio intermediria. Essas observaes esto de
acordo com os resultados observados para relao C:N (Tabela 5) e
monmeros de lignina (Tabela 6), sugerindo maior grau de transformao e
origem microbiana para o material orgnico presente nas fraes mais finas.
A composio qumica da matria orgnica presente nas diversas fraes
granulomtricas vem sendo amplamente estudada por CPMAS 13C RMN
(Baldock et al., 1992; Greggorich et al., 1995; Randall et al., 1995; Schulten &
Leinweber, 2000). Em geral, com a reduo no tamanho de partcula, observase um decrscimo na intensidade dos sinais atribudos a grupamentos Oalquil enquanto h um aumento nos sinais atribudos a aromticos e,
sobretudo, grupamentos alquil (Schulten & Leinweber, 2000). O sinal
atribudo a grupos carboxil, geralmente, no apresenta um padro consistente
em relao ao tamanho de partcula (Schulten & Leinweber, 2000). Baldock et
al. (1992), baseado em dados de CPMAS 13C RMN das fraes areia, silte e
argila, propuseram um modelo conceitual descrevendo o processo de
decomposio dos resduos vegetais no solo (Fig. 9). De acordo com tal
modelo, o grau de decomposio dos resduos orgnicos seguiria um
continuum da frao MMO (> 20 m) composta por materiais pouco
degradados, passando por compostos com degradao intermediria (2-20
m), culminando em uma frao com avanado grau de decomposio (< 2
m). Nos primeiros estdios de decomposio seriam degradados sobretudo
carboidratos (celulose e hemiceluose) e protenas. Esta mineralizao seria
responsvel pelo decrscimo relativo na intensidade dos sinais tribudos a O-
52
a
l
q
u
i
l
(45-110 ppm). A sntese de carboidratos e protenas pela microbiota garantiria
a manuteno de sinais O-alquil, porm em nveis bem inferiores. Com a
reduo na intensidade destes grupamentos haveria um aumento relativo dos
sinais atribudos a grupos aromticos (110-160 ppm) e alquil (10-45 ppm), em
razo da preservao relativa de lignina e polimetilenos, respectivamente.
Com a reduo dos carboidratos (celulose e hemicelulose) as molculas de
lignina ficariam expostas ao ataque microbiano, iniciando-se um segundo
estdio de decomposio. Nesta fase, a lignina seria decomposta,
acumulando-se materiais mais resistentes, dominadas por polimetileno (ex.:
cutina, suberina). Os autores ressaltam que esse acmulo de grupamento
alquil na frao argila seria produto no apenas da preservao relativa
destes compostos, mas tambm da formao de polimetilenos pela
microbiota (Baldock et al., 1989, 1990a, b).
O modelo de Baldock e colaboradores (Fig. 9) est de acordo com as
caractersticas das diferentes fraes apresentadas nas Tabelas 5, 6 e 7.
Estas diferenas em composio nas fraes granulomtricas sugerem que
tais fraes teriam, potencialmente, grandes diferenas em sua dinmica. De
fato, similar ao que ocorre com as fraes densimtricas, onde as fraes
leves ciclam mais rpidamente que as pesadas, as fraes areia (MMO)
tambm possuem uma dinmica mais rpida que as fraes silte e argila.
Feller & Beare (1997) gruparam os resultados de vrios estudos de
mineralizao de carbono e nitrognio em diferentes fraes granulomtricas
de solos tropicais. Segundo os autores, o potencial de mineralizao de C em
geral decresce da frao areia para as fraes silte e argila, no havendo
diferena entre as ltimas. Os mesmos autores, analisando os resultados de
diferentes trabalhos baseados na abundncia natural do istopo 13C aps
mudana na vegetao, observaram que o tempo necessrio para que
metade do C total fosse substitudo por C da nova vegetao foi em mdia de
12, 16 e 22 anos para solos tropicais e 25, 45 e 60 anos para solos
temperados, nas fraes areia, silte e argila, respectivamente. Balesdent
(1996) observou para uma cronoseqncia de solos franceses cultivados,
valores de 0,5, 3, 18 e 63 anos para as fraes > 2000 m, 200-2.000 m, 50200 m e 0-50 m (Fig. 10). Estes resultados ilustram a significativa diferena
na dinmica das fraes granulomtricas, sugerindo que estas fraes
poderiam ser incorporadas como reservatrios mensurveis em modelos de
dinmica da matria orgnica dos solo.
53
Mtodo Granulomtrico
200
160
110
45
10
Tamanho
Partcula
Relao
C/N
> 20 m
40
2 - 20 m
12
Fragmentos de plantas:
Carboidratos
Protenas
Lignina
Alquil (polimetileno)
Carboidratos
Protenas
Resduos parcialmente
decompostos:
Lignina
Alquil (polimetileno)
Lignina
Estruturas recalcitrantes:
<2m
Alquil (polimetileno)
Alquil
200
100
Chemical Shift
(ppm)
Dixido de
Carbono
Aspectos metodolgicos
O fracionamento em COM-primrios, envolve dois processos distintos:
disperso e separao das fraes. Em um primeiro momento, os COMsecundrios devem ser completamente dispersados em COM-primrios,
sendo, posteriormente, separados nas diferentes classes de tamanho
(Christensen, 1992). Esta disperso pode ser realizada por agitao
mecnica na presena de agentes dispersantes (Balesdent et al., 1991; Feller
et al., 1991; Christensen, 1992; Gale et al., 2000a, b) e energia ultrasnica
(Morra et al., 1991; Baldock et al., 1992; Christensen, 1992; Raine & So, 1993,
1994; Roscoe et al., 2000, 2001).
54
(1)
(2)
55
Mtodo Granulomtrico
> 2000 m
1,0
200 - 2000 m
0,8
50 - 200 m
0,6
0,4
0 - 50 m
0,2
0
0
15
10
Tempo (anos)
20
25
-23
Energia Aplicada /J ml -1
900
-27
-26
600
600
Energia Aplicada /J ml -1
300
300
900
(250-2000 m)
(100-250 m)
(50-100 m)
(2-50 m)
(< 2 m)
(d)
900
(250-2000 m)
(100-250 m)
(50-100 m)
(2-50 m)
(< 2 m)
(c)
Fig. 11. Efeito do aumento no nvel de energia ultrasonica aplicada (a) no contedo de C orgnico e (b) de N orgnico, (c) na
relao C:N e (d) nos valores de 13C de cada frao granulomtrica de um Latossolo Vermelho distrfico muito argiloso sob
cerrado.
0.5
(250-2000 m)
(100-250 m)
(50-100 m)
(2-50 m)
(< 2 m)
(b)
900
-25
600
600
300
300
16
24
32
-24
(250-2000 m)
(100-250 m)
(50-100 m)
(2-50 m)
(< 2 m)
(a)
1.5
10
15
20
25
56
Fracionamento Fsico do Solo em Estudos da Matria Orgnica
57
Mtodo Granulomtrico
(3)
58
D1
D1
Ea
Ea
para
Ea
Ea
D1
D2
Energia Aplicada /J ml
-1
este ir absorver durante a sonificao, pode ser acessada pelo mtodo das
misturas proposto por Duncan & Starling, citado por Raine & So (1993).
Roscoe et al. (2000) utilizaram o "calormetro" da Fig. 14, onde
50 g de gua destilada foram aquecidos a temperatura de 50-60oC, sendo a
exata massa de gua (m1) e temperatura (T1) devidamente anotadas. A massa
de gua foi ento rapidamente adicionada ao "calormetro" contendo outros
50 g de gua (m2) em temperatura ambiente (T2), sendo a tampa colocada
imediatamente (Fig. 14a). A temperatura da gua foi monitorada por um
termmetro inserido em um orifcio na tampa do recipiente (Fig. 14a) at que
uma temperatura de equilbrio (T3) foi atingida. A capacidade trmica do
recipiente foi ento calculada pela equao (4).
Crecp = [m1ca (T1 - T2)/(T3 - T2)] - (m2ca)
(4)
59
Mtodo Granulomtrico
15
10
5
20
30
40
50
60
70
Temperatura (C)
Fig. 13. Relao entre a energia aplicada (J ml-1) e a temperatura da gua. O aparelho
usado foi um Vibracell VC100, com uma sonda de 115 mm de comprimento e 3 mm de
dimetro, operando a 20 kHz, ajustado para a posio de 70% da capacidade total. O
recipiente usado foi um tubo de centrfuga com capacidade par 200 ml. Usou-se um
volume de 100 ml de gua e profundidade de imerso da sonda de 15 mm.
Fonte: Roscoe et al., dados no publicados.
(5)
60
Orifcio para
entrada do
termmetro
(a)
o
25.2 C
Tampa de Isopor
Termmetro
Digital
Tubo de centrfuca
(200 ml)
Haste metlica do
termmetro digital
gua
Sensor
Trmico
Corpo de Isopor
(b)
Sonda
Ultrasom
25.2 C
Crecip
Crecip
Crecip
Crecip
Mtodo Granulomtrico
61
(6)
62
do solo.
A redistribuio de MMO relacionada ao uso de altos nveis de energia
ultrasnica o maior problema desta metodologia. Entretanto, a flotao em
gua ou lquidos densos pode minimizar ou at eliminar esta desvatagem.
Roscoe et al (2000) no observaram evidncias de redistribuio da MMO
com densidade superior a 1 g cm-3 ao dispersarem o solo com elevados nveis
de energia (> 800 J ml-1), aps separao por flotao em gua da MMO de
densidade inferior a esse limite. Por outro lado, a possibilidade de
quantificao da energia aplicada e a elevada eficincia em dispersar solos
tropicais dominados por argilas de baixa atividade so duas vantagens
marcantes da metodologia.
A separao por sedimentao usada para as fraes silte e argila. Os
limites de tamanho entre as fraes so definidos em funo do dimetro
esfrico equivalente (DEE). Considera-se que as partculas em uma dada
classe de tamanho teriam uma velocidade de sedimentao equivalente a
partculas esfricas com uma densidade fixa (definida em funo da
mineralogia do solo em questo) e um dimetro dentro dos limites desta
classe. De acordo com a Lei de Stokes, so definidos tempos de
sedimentao para cada classe de tamanho em funo da temperatura da
suspenso e da densidade mdia das partculas consideradas (Elliott &
Cambardella, 1991). Entretanto, pressupostos bsicos da Lei de Stokes so
violados quando na separao de COM (Christensen, 1992), pois as
partculas de solo geralmente no so esfricas e a densidade dos COM pode
variar consideravelmente em funo da quantidade de material orgnico
associado ao COM (Golchin et al., 1994a). Apesar de o fracionamento
baseado nesta lei no representar fielmente a realidade, ou seja, as partculas
em uma dada classe no se encontrarem inteiramente dentro dos limites de
tamanho da mesma, os resultados so reproduzveis e comparveis. No
obstante, Christensen (1996a) ressalta que as limitaes da Lei de Stokes
tornam-se crticas quando so utilizados intervalos de classes de tamanho
muito reduzidos, como, por exemplo, na separao da frao argila em vrias
sub-fraes.
Durante o processo de separao por sedimentao, os compostos
orgnicos presentes podem ser parcialmente consumidos ou sofrerem
alteraes em sua composio em funo da atividade microbiolgica
(Baldock et al., 1990a, b). Isso ocorre devido ao elevado tempo de separao,
chegando a algumas semanas para partculas mais finas. Acredita-se que
este efeito seja anulado quando mdia alta energia utrasnica usada na
Mtodo Granulomtrico
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