IMUNIDADE HUMORAL

3- Fazer um resumo sobre a resposta imune humoral com

nfase nos seguintes pontos:
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CARACTERIZAO DE IMUNOGENICIDADE, ANTIGENICIDADE, HAPTENO E

EPTOPO;
Imungeno pode ser definido como uma substncia capaz de
desencadear uma resposta imune (especfica) de tipo humoral ou celular e
tem tambm a capacidade de desencadear memria imunolgica.
O antgeno uma substncia que reconhecida como estranha
por uma imunoglobulina, anticorpo ou TCR, e que vai desencadear uma
resposta imunolgica (uma resposta imune inata imunolgica e
posteriormente uma resposta adaptativa, do tipo celular ou do tipo
humoral).
Na protena vamos poder definir locais de ligao imunoglobulina
que se chamam eptopos. Tambm conhecidos como determinantes
antignicos, os eptopos so pores do antgeno que renem aspectos
fsicos e qumicos que favorecem o reconhecimento a regies especficas
dos anticorpos ou TCRs.
Uma nica molcula antignica normalmente possui vrios eptopos
diferentes.
Substncia que no tem imunogenicidade o Hapteno. Os haptenos
reagem de forma apropriada com produtos da resposta imune, porm so
incapazes de inici-la. Quando ligados covalentemente a protenas
imunognicas apropriadas (carreadores) possuem a capacidade de induzir
essa resposta.

DIFERENCIAO DA CLULA B;
Os linfcitos B se originam de clulas-tronco pluripotentes da
medula ssea, que do origem s clulas progenitoras mielides e
linfides. Os progenitores linfides, por sua vez, do origem aos linfcitos
B, T e clulas NK. Os linfcitos B so inicialmente produzidos no saco
vitelino, posteriormente, durante a vida fetal, no fgado e finalmente na
medula ssea. Na medula ssea a seqncia de rearranjos das
imunoglobulinas e as alteraes fenotpicas ocorrem durante a ontogenia
das clulas B, de maneira anloga s clulas T do timo. As clulas que vo
diferenciar-se em linfcitos B (LB) permanecem na medula ssea durante
seu processo de maturao ao contrrio dos LT que migram para o timo.
Aps a maturao as clulas B deixam a medula e caem na circulao,
migrando para os rgos linfides secundrios.
A maturao dos linfcitos B tem incio a partir das clulas pr-B que
expressam trs genes, TdT, RAG1 e RAG2, que comandam a recombinao
gnica necessria para a produo de imunoglobulinas. A montagem da
cadeia pesada se inicia com a combinao aleatria de um segmento D e
um J, que a seguir se unem a um segmento V, definindo a especificidade

de reconhecimento do anticorpo que ser formado, independentemente

da poro constante que far parte da cadeia completa. Essa cadeia
pesada se associa a uma cadeia invarivel e expressa na superfcie
como um pr-BCR, juntamente com as molculas assessrias Ig e Ig.
Em seguida ocorre o rearranjo da cadeia leve k e, na falha desta, da
cadeia . Cada LB apresenta, portanto, um nico tipo de cadeia leve
associado cadeia pesada. O sucesso na expresso de uma IgM completa
na superfcie do LB leva progresso da maturao com subseqente
produo de IgD de membrana.
importante ressaltar que todo rearranjo gnico ocorre no incio da
maturao do LB, no estgio pr-B, ainda na medula ssea, e de modo
totalmente independente de qualquer contato com antgeno. O processo
combinatrio dos diferentes segmentos que compem as pores
variveis das cadeias pesadas e leves e as diferentes possibilidades de
associao entre elas resultam em cerca de 1011 especificidades
diferentes de reconhecimento pelas imunoglobulinas. A fim de restringir
esse repertrio, mecanismos de seleo positiva e negativa atuam
durante a maturao dos LB.
Na seleo positiva, os LB imaturos expressando molculas
funcionais de Ig de membrana recebem sinais de sobrevivncia para
prosseguir a maturao. No processo de seleo negativa, os LB imaturos,
ainda na medula ssea, que reconhecem antgenos prprios com alta
afinidade sofrem apoptose ou entram em um processo denominado edio
de receptor, no qual os genes RAG so novamente ativados e outra
combinao V-J de cadeia leve gerada em substituio anterior, autoreativa.
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FASES DA RESPOSTA IMUNEHUMORAL;

Activao dos linfcitos B Quando o antgeno entra no organismo, ao
encontrar linfcitos B, estimula uma frao destes linfcitos, aqueles que
possuem na membrana receptores capazes de interagir e reconhecer os
seus eptopos.
Proliferao clonal dos linfcitos activados cada um dos linfcitos
ativados entra em vrios ciclos celulares rpidos, o que, aps vrias
mitoses, origina muitas clulas a partir da inicial, todas com o mesmo tipo
de receptor na membrana, constituindo um clone. No entanto, como cada
antgeno reconhecido por linfcitos B diferentes, cada um desses
linfcitos expande-se num clone. Resumindo, a resposta normal a um
antgeno envolve a expanso de vrios clones, isto , uma resposta
policlonal.
Diferenciao dos linfcitos B Uma parte das clulas de cada clone
diferencia-se em plasmcitos, que so clulas secretoras de anticorpos. Os
plasmcitos ativos podem produzir 5000 molculas de anticorpos por
segundo, pois possuem um reticulo endoplasmtico muito desenvolvido. A

produo de anticorpos d-se nos gnglios linfticos, que ficam

hipertrofiados devido multiplicao dos linfcitos ativados e presena
de plasmcitos. Os anticorpos formados so libertados no sangue ou na
linfa circulando at ao local da infeco. Nem todos os linfcitos B
estimulados se diferenciam em plasmcitos. Muitos constituem clulas de
memria, clulas com um prazo de vida bastante alargado que ficam
inativas, mas prontas a responder rapidamente caso o antgeno venha a
reaparecer no organismo.
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RECEPTOR DE CLULA B;
Os linfcitos B so responsveis pela imunidade humoral que se
caracteriza pela produo e liberao de anticorpos (Ac) capazes de
neutralizar ou at mesmo destruir os antgenos (Ag) contra os quais foram
gerados. Para a ativao dos LB, alm do reconhecimento do antgeno,
necessrio um segundo sinal de ativao.
Os linfcitos B virgens expressam duas classes de anticorpos ligados
a membrana, IgM e IgD, que funcionam como receptores para antgenos
associao com as protenas Iga e Igb, formando o complexo receptor da
clulas B (BCR). Os domnios citoplasmticos de Iga e Igb contm motivos
de ativao de imunorreceptores baseados em tirosina (ITAMs) que, aps
ligao do antgeno ao complexo BCR, so fosforilados e recrutam diversas
molculas sinalizadoras. A sinalizao induzida por receptores nas clulas
B ativa fatores que promovem a transcrio de genes cujos produtos esto
envolvidos na proliferao e diferenciao das clulas B

TRANSDUO DE SINAL PELO BCR;

O agrupamento dos receptores de membrana Ig induzido pelos
antgenos d origem a sinais bioqumicos que so transduzidos pelas
molculas de sinalizao associadas ao receptor. Sendo assim, nas clulas
B, a transduo de sinal mediada pelo receptor de Ig, requer a unio
(ligao cruzada) de duas ou mais molculas receptoras. A ligao cruzada
ocorre quando duas ou mais molculas de Ag em um agregado, ou a
repetio de eptopos (parte do Ag que se liga com a parte Vh e Vl dos Ac),
se ligam s molculas de Ig de membrana da membrana de uma clula B.
Polissacardeos, lipdeos e outros Ag no proticos com freqncia
apresentam diversos eptopos idnticos, e so, portanto, capazes de ligar
diversos receptores de Ig numa clula B ao mesmo tempo. Assim, os sinais
iniciados pela ligao cruzada do antgeno com o receptor sofrem
transduo por meio das protenas associadas ao receptor. J os
receptores de membrana das clulas no efetuam a transduo de sinal,
duas protenas que apresentam ligao no covalente com esses
receptores, chamadas de Ig e Ig, que formam o complexo receptor da
clula B (BCR), realizam essa funo.
Os domnios citoplasmticos de Ig-alfa e Ig-beta contm peas
tirosnicas de ativao de receptores imunolgicos (ITAMs), que so

encontrados nas subunidades de sinalizao de muitos outros receptores

de ativao imune (p. ex. CDR, protenas do complexo zeta e do complexo
TCR). Quando dois ou mais receptores de Ag de uma clula B esto
aglomerados, as tirosinas no ITAMs de Ig-alfa e Ig-beta so fosforiladas
pelas cinases associadas ao BCR, estas fosfotirosinas se tornam locais
receptores para as protenas adaptadoras, que por sua vez, so
fosforiladas e recrutam diversas molculas sinalizadoras.
O resultado da sinalizao induzida por receptores nas clulas B a
ativao de fatores de transcrio que ligam os genes cujos produtos
proticos esto envolvidos na proliferao e diferenciao das clulas B.
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PAPEL DO COMPLEMENTO NA ATIVAO DA CLULA B;

Os linfcitos B expressam um receptor para uma protena do sistema
de complemento que fornece sinais para a ativao das clulas. O sistema
complemento um conjunto de protenas plasmticas ativadas por
microorganismos e por anticorpos ligados aos microorganismos e cuja
funo como mecanismos causadores da defesa do hospedeiro. Quando
esse sistema ativado por um MO, este ento revestido pelos produtos
de ruptura da protena mais abundante, C3.
Um destes produtos de ruptura o C3d, os linfcitos expressam um
receptor, chamado receptor de complemento tipo 2 (CR2 ou CD21), que se
ligam a C3d. As clulas especficas para um Ag identificam o Ag por meio
de seus receptores de Ig e ao mesmo tempo reconhecem o C3d ligado
pelo receptor CR2, o envolvimento de CR2 aumenta muito as respostas de
ativao dependentes de Ag das clulas B.
Assim, protenas do complemento fornecem sinais secundrios para
ativao das clulas B, funcionando junto aos Ag que o sinal primrio,
para iniciar a proliferao e diferenciao das clulas B. Do mesmo modo
que a co-estimulao necessria para ativao dos linfcitos T, a
ativao com auxilio do complemento (resposta imune inata), e a
sinalizao por protenas de membrana (Ig-alfa e Ig-beta) fundamental
para ativao das clulas B. As conseqncias da ativao das clulas B
pelo Ag (e sinais secundrios) consistem no inicio da proliferao e da
diferenciao das clulas B e em sua preparao para interagir com os
linfcitos T auxiliares (se o Ag for uma protena).

EVENTOS CELULARES INDUZIDOS PELA LIGAO CRUZADA MEDIADA PELO

ANTGENO NO COMLEXO BCR;
Complexo BCR e ativao da clula B. A partir da ligao cruzada
das imunoglobulinas na superfcie do LB so desencadeados eventos
bioqumicos que iniciam com a fosforilao dos ITAMS (Motivos de ativao
de imunoreceptores baseado em tirosina) com consequente ativao de
enzimas e intermedirios bioqumicos que culminaro na ativao de
fatores de transcrio que promovem a ativao celular. Interao do
linfcito B com linfcito T auxiliar aps processamento antignico pelas
clulas B. A produo de citocinas pelos linfcitos T auxiliares resultar na
ativao da Resposta Imune Humoral.

INTERAO ENTRE LT CD4 E LB; ATIVAO DE LB MEDIADA POR LTCD4;

A resposta mediada por anticorpos resultado de uma srie de
interaes celulares que ocorrem em uma sequncia ordenada. As clulas
T so ativadas quando os antgenos so apresentados pelas APC; as
clulas B interagem com as APC; os linfcitos B ativados proliferam e se
diferenciam em plasmcitos e clulas B de memria. A interao entre os
linfcitos T e B no um processo unidirecional, mas sim com duas vias
em que as clulas B apresentam o Ag para as clulas T e recebem sinais
provenientes destas para diviso e diferenciao em plasmcitos
produtores de imunoglobulinas.
Estudos em modelos murinos demonstraram que a resposta T
dependente requer a ativao dos TLRs das clulas B. Essa ativao
importante para direcionar a mudana de classe de imunoglobulinas,
principalmente mediada pelo TLRA-9, alm de estimular clulas B de
memria a se diferenciarem em plasmcitos de longa durao, mantendo
altas concentraes de anticorpos no soro, por um longo perodo. Foi
demonstrado ainda que os ligantes de TLRs so os estmulos mais
potentes para produo de citocinas pelas clulas B e que essa produo
pode ser aumentada pelo co-estmulo derivado de clulas T tal como a
interao CD40/CD40L.

ESTRUTURA
BSICA
DAS
IMUNOGLOBULINAS
IMUNOGLOBULINAS (ISOTIPOS);

CLASSES

DE

Embora as imunoglobulinas tenham algumas diferenas na sua

estrutura que caracterizam as suas classes, elas tm uma estrutura
bsica muito consistente e muito semelhante. Tm uma forma em Y que
constituda por 4 cadeias polipeptdicas: 2 cadeias pesadas e 2 cadeias
leves. As ligaes de hidrognio esto presentes entre as cadeias leves e
pesadas e nas cadeias pesadas entre si. Estas ligaes, bem como as
ligaes dissulfito vo possibilitar esta estrutura em Y.
Cada isotipo de imunoglobulina tem uma cadeia pesada
caracterstica; portanto a IgG ter uma cadeia pesada do tipo , a IgM ter
uma cadeia pesada do tipo , a IgA ter uma cadeia pesada do tipo , a
IgE ter uma cadeia pesada do tipo e a IgD ter uma cadeia pesada do
tipo . As 5 classes (ou istipos) diferem entre si na estrutura
(seqncia primria de aminocidos) das cadeias pesadas, sendo as
cadeias leves, iguais para todas as classes de imunoglobulinas.
Vale ressaltar que isotipos so as diferentes estruturas que
existem dentro da mesma espcie animal, constituindo um padro para a
espcie. Nos seres humanos, h cinco classes de cadeias pesadas que
constituem as cinco classes de imunoglobulinas (IgA, IgG, IgM, IgD e IgE).
Dentro de uma classe ou isotipo de imunoglobulina pode haver variaes
na estrutura da cadeia pesada. Estas variantes estruturais esto
presentes em todos os membros da mesma espcie animal: so as
chamadas
subclasses
e
se
enquadram
na
definio
de
isotipos. Conhecemse 4 subclasses de IgG humanas: IgG1, IgG2, IgG3 e
IgG4.
Quanto IgA, so conhecidas duas subclasses, designadas: IgA1
e IgA2.

TROCA DE CLASSE DE CADEIA PESADA;

As clulas T auxiliares estimulam a prognie de IgM + IgD quando
expressam linfcitos B para produzir anticorpos de classes de cadeias
pesadas diferentes. A importncia da troca de classe consiste em
possibilitar respostas imunes humorais para diferentes MOs, adaptando-se
de modo a combat-los mais eficazmente.
Por exemplo: um importante mecanismo de defesa contra os
estgios extracelulares da maior parte das bactrias e vrus revestir
(opsonizar) esses MOs com anticorpos e fazer com que sejam fagocitados
por neutrfilos e macrfagos. Esta reao mais bem mediada pelas
classes de anticorpos como, IgG1 e IgG3, que se ligam ao fagcito com
receptores Fc de alta afinidade especficos para a cadeia pesada gama,
em contra partira os helmintos so as bem eliminados por eosinfilos,
portanto a defesa contra esses parasitas envolve o seu revestimento com
anticorpos com os quais os eosinfilos se ligam. Esses anticorpos so os
IgE, por que os eosinfilos apresentam receptores de alta afinidade na
poro Fc da cadeia pesada psilon.
Dessa maneira, os linfcitos B virgens produzam diversos tipos de
isotipos de cadeias pesadas, mesmo que os seus Ig de membrana que so
IgM e IgD sejam receptores para qualquer antgenos, importante que
haja a troca de classes de cadeias pesadas. A troca de classe de cadeia
pesada iniciada com sinais mediados por CD40L e a troca para classes
diferentes estimulada por citocinas diferentes. Os sinais emitidos pelo
CD40L e pelas citocinas atuam nas clulas B ativadas e levam a uma troca
em parte da prognie destas clulas. Na ausncia de CD40 ou CD40L, as
clulas B secretam apenas IgM e deixa de trocar para outros isotipos,
indicando o papel essencial deste par de ligante-receptor. As citocinas
produzidas pelas clulas T determinam qual classe de cadeia pesada
produzida ao influenciar que gene de regio constante de cadeia pesada
participa na recombinao de troca.
Por exemplo, a produo de anticorpos de opsonizao que se ligam
para fagocitar receptores Fc estimulada pelo IFN-gama, a citocina
caracterstica das TH1, IFN-gama tambm uma citocina de ativao dos
fagcitos e estimula as atividades microbicidas dos fagcitos.
A troca de classe para IgE, influenciada pela IL-4, a citocina
caracterstica das TH2, a IgE funciona na opsonizao dos helmintos, com
auxilio dos eosinfilos que so ativados pela IL-5, tambm secretadas por
TH2. A natureza das classes de anticorpos produzidas tambm
influenciada pelo local das respostas imunes, por exemplo, IgA o
principal isotipo produzido nos tecidos linfides mucosos, isto ocorre talvez
porque os tecidos mucosos contm um grande numero de clulas B
capazes de trocar para IgA e clulas T cujas citocinas estimulam a troca
para IgA. A IgA a principal classe de anticorpo que pode ser ativamente
secretada pelo epitlio mucoso e presume-se que este seja o motivo pelo
qual os tecidos linfides mucosos so os principais locais de produo de
IgA.

CARACTERSTICAS DAS RESPOSTAS DAS IMUNOGLOBULINAS

ANTGENOS DEPENDENTES OU INDEPENDENTES DE LT;

A resposta imune humoral para antgenos proticos pode ser

considerada uma resposta T dependente, j que clulas T so
fundamentais para uma resposta efetiva. J antgenos no-protecos, como
polissacardeos e lipdeos, estimulam a produo de anticorpos sem que
haja necessidade de clulas T, esse tipo de resposta T independente.As
respostas T independente apresentam uma troca de classe pesada e uma
maturao da afinidade relativamente baixa.
As respostas dos anticorpos s primeiras e subseqentes exposies
a um antgeno, chamadas de primrias e secundrias, diferem de maneira
quantitativa e qualitativa. Sendo que, a quantidade de anticorpos
produzidas depois do primeiro contato, muito menor do que em uma
resposta secundria. Com antgenos proticos (T dependentes), as
respostas secundrias tambm mostram um aumento da troca de classe
de cadeia pesada e maturao da afinidade, pois estmulos repetidos, leva
ao aumento do nmero de linfcitos T.
Os polissacardeos, lipdios e outros antgenos no-proticos
provocam respostas de anticorpos sem a participao de clulas T. Esses
antgenos no-proticos no so capazes de ligar com molculas de MHC,
portanto, no se ligam ao TCR de clulas T. As bactrias que possuem
cpsulas de polissacardeos, geralmente necessitam desse tipo de
resposta, em que so envoltas por anticorpos e permite a fagocitose.
Acredita-se que esses antgenos possuem epitopos multivalentes
que so capazes de realizar diversas ligaes com anticorpos de superfcie
das clulas B, com intensidade suficiente para estimular sua proliferao e
diferenciao sem que necessite de uma clula T. Antgenos proticos em
geral no possuem epitopos multivalentes.
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CINTICA DA RESPOSTA HUMORAL PRIMRIA E SECUNDRIA;

Alguns dos linfoblastos formados por ativao de um clone de
linfcitos B no evoluem para formar plasmcitos, mas, em seu lugar,
formam quantidades moderas de novos linfcitos B similares quelas do
clone original. Em outras palavras, a populao de clulas B do clone
especificamente ativado aumenta consideravelmente. Os novos linfcitos
B juntam-se aos linfcitos originais do clone. Eles tambm circulam
atravs dos corpos para popular todo o tecido linfide, mas,
imunologicamente, permanecem inativos at serem ativados outra vez por
uma nova quantidade do mesmo antgeno. Estes linfcitos so chamados
de clulas de memria. A exposio subseqente ao mesmo antgeno
causar uma resposta muito mais rpida e potente porque existem muito
mais clulas de memria do que de linfcitos B originais do clone
especfico.
As diferenas entre a resposta primria, que ocorre na primeira
exposio ao antgeno especfico para a produo de anticorpos, e a
resposta secundria, que ocorre depois de uma segunda exposio ao
mesmo antgeno bastante relevante. A resposta secundria, ao
contrrio, comea rapidamente aps a exposio ao antgeno (geralmente

dentro de horas), mais potente e produz anticorpos para muitos meses,

e no para somente poucas semanas.
A potncia e a durao aumentadas da resposta secundria
explicam porque a vacinao normalmente realizada com a injeo do
antgeno em doses mltiplas com perodos de vrias semanas ou meses
entre as injees.
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FUNES EFETORAS DOS ANTICORPOS DE ACORDO COM OS ISTIPOS;

Os diversos isotipos e subtipos de anticorpos desempenham funes
efetoras diferentes. A explicao para isso que a maior parte das
funes efetoras dos anticorpos mediada pela ligao das regies C da
cadeia pesada a receptores Fc em vrias clulas, tais como os fagcitos,
clulas NK e mastcisto, e a protenas plasmticas, como as protenas do
complemento. Isotipos e subtipos de anticorpos possuem regies C
diferentes e, consequentemente, se ligam diferentes substratos e
desempenham funes efetoras diferentes.

PRODUO E TRANSPORTE DE IGA PELO EPITLIO;

Atravs de sua cadeia pesada, a IgA capaz de se ligar a uma
molcula chamada de cadeia J e, com isso, forma dmeros ou trmeros.
Isso lhe d uma maior capacidade de se ligar e aglutinar antgenos. A IgA
dimrica ou trimrica capaz de interagir com uma protena produzida
pelas clulas epiteliais, chamada de componente secretor(SC), que age
como receptor de transporte e passa a fazer parte da molcula (IgA
secretora).

ANTICORPO MONOCLONAL E POLICLONAL, ANTICORPO HUMANIZADO;

Anticorpos policlonais possuem vrios clones, ou seja, se originam
de diferentes linfcitos B, o que significa que reagem com vrios epitopos
do antgeno (por exemplo, vrias partes de uma protena). J anticorpos
monoclonais provm de somente um linfcito B, selecionado
artificialmente e replicado diversas vezes como um clone. Desta forma,
este anticorpo liga somente a um epitopo de uma nica forma.
As modernas tcnicas de engenharia gentica permitem, porm, que
esses anticorpos sejam humanizados, isto , os genes responsveis pela
produo dessas protenas sejam modificados de forma a eliminar essa
reao imunolgica do organismo humano. Assim so gerados os
chamados anticorpos monoclonais humanizados. O processo de
humanizao no deve alterar a afinidade do anticorpo com o respectivo
antgeno e possibilita assim o seu emprego continuado em procedimentos
teraputicos.