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UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS UFG

ESCOLA DE VETERINRIA E ZOOTECNIA


DEPARTAMENTO DE MEDICINA VETERINRIA
SETOR DE PATOLOGIA ANIMAL

Roteiro de necropsia e colheita de material


para laboratrio

Prof. Dr. Veridiana Maria Brianezi Dignani de Moura

GOINIA - GO

ESCOLA DE VETERINRIA E ZOOTECNIA DA UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS - UFG

Departamento de Medicina Veterinria Setor de Patologia Animal

Roteiro para realizao da tcnica de necropsia em pequenos animais

Paramentao
Luvas de ltex;
Macaco, jaleco ou avental;
Sapato fechado (botas de borracha);
Retirar anis, relgio ou outros acessrios;
Mscara, culos e touca (opcionais).

Material

faca Magarefe;

serra;

faca de rgos;

tbua de carne;

costtomo (alicate de jardinagem);

frasco com gua;

tesoura reta romba-romba;

esponja;

tesoura curva romba-fina;

frasco com formol a 10%;

entertomo;

rgua;

pina dente de rato

barbante para fixar o cadver

pina anatmica;

mesa.

Observaes:
Somente realizar o exame necroscpico aps a autorizao do proprietrio ou
responsvel e mediante a apresentao da ficha clnica ou pronturio do
animal.
A tcnica abaixo descrita pode ser utilizada para a abertura de cadveres de
grandes animais, podendo variar apenas na abertura (posicionamento), que
pode ser lateral, com o animal em decbito lateral direito.

TCNICA DE NECROPSIA
A) Exame externo
O exame externo consiste em observar e detectar alteraes quanto ao
estado geral do animal, incluindo estado nutricional, presena de ectoparasitas,
escaras e escoriaes, cicatrizes, presena de neoplasia, alteraes cadavricas,
exame da cavidade oral e situao das mucosas (oral, ocular, vaginal, peniana e
anal), portanto, qualquer alterao externa observada no cadver.
A1) Identificao: espcie, sexo, idade, raa, peso, marcas caractersticas*, estado
nutricional, rigidez e alteraes cadavricas;
A2) Pelame: cor, aspecto;
A3) Pele: colorao, elasticidade, corpo estranho, umidade, leses, parasitas;
A4) Cavidades naturais: olhos, narinas, boca, ouvidos, nus e genitais.

B) Posicionamento
O animal deve ser, quando possvel, fixado mesa com barbantes
posicionados acima das articulaes do carpo e tarso, com o cadver em decbito
dorsal (vista ventral Figura 1).

Figura 1 Posicionamento e fixao do cadver.


2

C) Exame interno
Abertura do cadver
(Instrumentos: faca magarefe e costtomo)

Molhar o cadver com o auxlio da


esponja

realizar

inciso

mentopubiana superficial (Figura


2). No caso de fmeas contornar a
vulva e, nos machos, contornar e
rebater o pnis junto poro
caudal do animal;

Figura 2 Inciso mento-pubiana superficial.

Realizar
abdominal

pequena
junto

inciso
cartilagem

xifide, introduzir os dedos mdio e


indicador no abdmen e seguir a
inciso muscular pela linha alba at
o pbis (Figura 3). A faca deve
deslizar entre os dedos que esto
sustentando

musculatura

guiando a inciso;

Figura 3 - Abertura abdominal. Machos:


rebater o pnis (seta).
3

Desarticular

os

posteriores

na

membros
articulao

coxofemoral e rebater os membros


anteriores lateralmente de maneira
que ocorra a exposio completa
da

pelve

trax.

Seguir

dissecando a pele e subcutneo


das

regies

submandibular

cervical;

Figura 4 Desarticulao dos membros


anteriores e posteriores.

Com

costtomo,

desarticulao

realizar

costocondral

a
em

todos os pontos de fixao das


costelas (Figura 4). Com o mesmo
instrumento,

cortar

os

ramos

cranial e caudal do pbis - forame


obturador (Figura 5). Retirar o
pbis e o esterno com a faca,
cortando
ventral

a
do

poro

semicircular

diafragma.

Figura 4 Desarticulao costocondral


bilateral e retirada do esterno.

Neste

momento, possvel visualizar os


rgos in situ nas cavidades
torcica, abdominal e plvica;

Figura 5 Desarticulao e retirada do pbis.


4

Com a faca magarefe realizar duas


incises junto aos ramos laterais
da

mandbula,

seccionando

musculatura local. Com o dedo


indicador inverter, retirar a lngua e
seguir com uma inciso em V
invertido

junto

insero

dos

palatos (Figura 6). Desarticular o


hiide em qualquer um de seus
ramos, isolando-o lateralmente;

Figura 6 Inciso em V invertido.

Em seqncia, soltar a traquia e o esfago entre as fscias musculares


cervicais at a entrada da cavidade torcica. Puxar o monobloco para que este
descole em toda a extenso torcica at o diafragma;

Seccionar o diafragma na poro semicircular dorsal, realizar pequena inciso no


rim direito e continuar seccionando o conjunto abdominal paralelamente coluna
vertebral at a cavidade plvica;

Contornar a cavidade plvica juntamente com a genitlia externa e nus de


forma que o monobloco seja liberado inteiramente do cadver;

Realizar exame dos msculos, ossos, articulaes e cabea, desarticulando-a


junto a articulao atlanto-occipital e, em seguida, descartar o cadver. Manter a
mesa e os instrumentos sempre limpos, colocar o monobloco em posio ventrodorsal (animal em posio de estao) e iniciar a separao dos conjuntos.

Separao do Monobloco em Conjuntos


(Instrumentos: faca de rgos, tesouras e pinas)
1) Aorta (pequena abertura na poro cranial da aorta, seguindo at a ramificao
das renais. Retirar a aorta aps a abertura);
2) Lngua, orofaringe, tero proximal de traquia e esfago (seccionar a traquia e o
esfago logo abaixo da tireide);
3) Separar o esfago, passando-o para a cavidade abdominal atravs do hilo
diafragmtico;
4) Traquia, pulmo e corao (remover o conjunto torcico cortando a veia cava e
os ligamentos que unem pulmo/diafragma);

5) Virar o monobloco na posio dorso-ventral;


6) Bao e omento (retirar bao e omento junto a curvatura maior do estmago,
contornando o pncreas);
7) Intestinos (realizar dupla ligadura com barbante no duodeno aps o pncreas e
no reto. Seccionar o pedculo mesentrico liberando o conjunto intestinos);
8) Geniturinrio (localizar as adrenais e seccionar os tecidos acima delas,
separando o conjunto geniturinrio do fgado, estmago, pncreas e diafragma,
que devem permanecer juntos, formando um nico conjunto a ser separado aps
a manobra de Virchow).
Exame dos rgos
1) Cabea: (Instrumentos: faca magarefe, serra, tesoura curva e faca de rgos).
Realizar inciso sagital da pele desde a regio supra-orbitria at o occipital.
Seccionar e retirar toda a musculatura craniana, expondo a superfcie ssea da
calota craniana. Posicionar a serra transversalmente, dois dedos acima das
rbitas oculares, e serrar em sentido ltero-lateral (linha pontilhada A). Realizar
mais duas linhas de corte laterais (linhas pontilhadas B e C), sempre seguindo a
face interna dos occipitais, fazendo com que as mesmas encontrem o corte
transversal. Retirar a calota craniana e as meninges. Com a tesoura curva, cortar
os nervos cranianos na base do encfalo e retirar o crebro inteiro da caixa
craniana (Figura 7).

Figura 7 - Cortes transversal e laterais para retirada da calota craniana e crebro.

2) Lngua: (Instrumentos: faca de rgos, pinas e tesoura reta). Iniciar o exame


com a inciso longitudinal da lngua em toda a sua extenso. Cortar e examinar a
regio de orofaringe (palato e amgdalas). Seccionar e examinar tero proximal
de esfago e traquia.
3) Trax: (Instrumentos: faca de rgos, pinas e tesoura reta). Traquia: abrir toda
a extenso na poro membranosa com o auxlio da tesoura. Seguir a abertura
at os principais ramos bronquiais de cada lobo pulmonar. Pulmo: realizar
cortes transversais em toda a extenso dos lobos pulmonares e examinar a
superfcie de corte. Corao: abertura do saco pericrdio e exposio do
corao. Iniciar a abertura com uma inciso que segue da base ao pice do
corao e examinar cmaras, msculos e vlvulas cardacas (Figura 8). Para
uma avaliao cardaca detalha o adequado abrir o corao seguindo o
caminho do fluxo sanguneo, iniciando pela abertura do trio direito e seguindo
com a abertura do ventrculo direito margeando a coronria direitas junto ao
septo ventricular at a abertura da artria pulmonar. Na sequncia, realizar
inciso no trio esquerdo e seguir com a abertura do ventrculo esquerdo
tambm margeando a coronria esquerda junto ao septo ventricular at a
abertura da aorta.

Figura 8 - Abertura e exame do corao.

4) Abdmen: (Instrumentos: faca de rgos, pinas e tesouras). Bao: Separar o


bao do omento e realizar inciso esplnica longitudinal completa, examinando a
superfcie de corte. Manobra de Virchow: Deve ser realizada antes da separao
do estmago e fgado. Abrir a poro proximal do duodeno na regio antimesentrica at o piloro, pressionar levemente a vescula biliar at o
extravasamento de bile pelo esfncter de Oddi. Separar fgado e diafragma do
estmago e pncreas. Fgado: cortes transversais em toda a extenso heptica e
exame da superfcie de corte. Abrir a vescula biliar com o auxlio de pina e
tesoura - examinar contedo e mucosa (Figura 9). Estmago: seguir a abertura
do piloro at a crdia pela curvatura maior do estmago, com o auxlio da tesoura
e examinar o contedo e a mucosa estomacal (Figura 10). Esfago: abrir em
todo o seu comprimento como uma extenso da abertura estomacal. Pncreas:
Realizar cortes transversais e examinar a superfcie de corte. Intestinos: devem
ser posicionados em forma de zig-zag em trs curvas de intestino delgado
(duodeno, jejuno e leo) e, em seguida, o intestino grosso. Abrir os intestinos
junto a poro mesentrica em toda a sua extenso com o auxlio do entertomo.
Examinar o contedo e as mucosas intestinais.

Figura 9 - Exame do fgado.

Figura 10 - Abertura do estmago e exame interno.

5) Genito-urinrio:

(Instrumentos:

Fmeas:

Realizar

abertura

faca de rgos, pinas e tesouras).

exame da vagina, crvix, cornos

Rins: fixando o rgo com a

uterinos e ovrios (Figura 12A).

esponja, realizar um corte sagital

Machos: Examinar testculos (corte

em ambos os rins, retirando suas

sagital) (Figura 12B), epiddimo e

respectivas cpsulas com o auxlio

prstata (cortes transversais).

da pina (Figura 11). Examinar a


superfcie de corte. Adrenais: corte
longitudinal e exame da superfcie
de corte. Bexiga: Suspender e
apoiar a bexiga com o auxlio da
pina, realizar abertura junto
cicatriz

do

raco

seguir

abertura da uretra, vulva ou pnis.


Figura 11 - Abertura e exame dos rins.

A)

B)

Figura 12A/B - Abertura e exame do tero e testculos.

Fonte Imagens: Popesko, P. Atlas de anatomia topogrfica dos animais domsticos. Ed. Manole. v. I,II e III, 1990.
VMBDM

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COLHEITA DE MATERIAL
EXAME HISTOPATOLGICO

A colheita de material para exame histopatolgico deve ser realizada logo aps
a morte do animal, pois quanto maior o tempo de morte, maior a possibilidade de autlise
dos tecidos. Em mdia, at 12 horas aps a morte possvel realizar a colheita, exceto
em casos onde a enfermidade principal acelera o processo autolco, como ocorre nas
clostridioses. Assim, se a suspeita envolve doenas que aceleram o fenmeno de
autlise, a colheita deve ser realizada, no mximo, at seis horas aps a morte do animal.
Quando a colheita envolve amostras a serem retiradas in vivo, estas devem
ser obtidas por meio de biopsia e imediatamente fixadas em formol tamponado a 10%.
Aps a colheita e fixao, o material pode ser imediatamente remetido ao
laboratrio ou aguardar a ocasio oportuna, pois materiais fixados em formol so
preservados ad eternum.

Fixador de eleio para colheita de material para exame histopatolgico:


formol tamponado a 10%

Preparo do formol tamponado:

Formol frmula comercial (37,5 a 40%)

100 ml

gua destilada

900 ml

Fosfato de sdio monobsico

4 gramas

Fosfato de sdio dibsico

6,5 gramas

Acertar pH em 7,0

Obs: O fixador pode ser preparado sem a formulao tamponada e sem correo de pH,
mas o ideal que siga a formulao descrita acima. Na impossibilidade de utilizar gua
destilada, opte pela gua filtrada. Caso no haja possibilidade de realizar a formulao
acima, utilize a que segue abaixo.

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Preparo do formol no tamponado:

Formol frmula comercial (37,5 a 40%)

100 ml

gua filtrada

900 ml

IMPORTANTE: Nunca enviar material para exame histopatolgico sob


refrigerao ou congelado. O material fixado em formol deve ser
encaminhado em temperatura ambiente, nunca sob refrigerao.
Obs: Outros fixadores podero ser utilizados em situaes especiais, como na colheita de
tecido glandular (prstata, testculos, adrenal, pncreas, etc). Neste caso, o Bouin uma
boa opo.

DICAS PARA A ESCOLHA DE UMA BOA AMOSTRA:

Leses focais: escolher rea leso x no leso (Figura 1);

Figura 1: Colheita de leso focal. Pulmo. Escolher rea de leso ( direita e acima dentro
da rea pontilhada) x no leso ( esquerda e abaixo dentro da rea pontilhada).

Leso difusa: escolher uma rea que represente o todo;

Tamanho: fragmentos de at 4cm3 (Figura 2);

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Identificao
do
material

Figura 2: Colheita de material. Fixao. Proporo fixador x amostra (20x1). Identificao.

Evitar reas de necrose (Figura 3) e procurar manter referencial do rgo;

Figura 3: Colheita de material. Evitar reas de necrose (x). Escolher reas intermedirias de
leso e tecido normal (rea pontilhada), gerando referencial do rgo.

Representatividade: amostras muito pequenas podem no ser adequadas. Da


mesma forma, amostras grandes podem no fixar adequadamente e sofrer
autlise. Ideal: seguir medidas propostas.

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IMPORTANTE

Proporo amostra x fixador: sempre utilizar o fixador em quantidade de 20


vezes o tamanho da amostra (Figura 2);

Identificao do material: A identificao do material pode ser fixada na parte


exterior do frasco (Figura 2) e deve conter a resenha do animal e a
especificao do material, ou seja, quais tecidos foram colhidos.

Frasco: O frasco que acondicionar o material colhido deve ter o tamanho que
suporte a proporo fixador/amostra sugerida (20x1). Contudo, deve sempre
apresentar boca larga, para que se possa retirar o material adequadamente, e
tampa de boa vedao, para evitar vazamentos e evaporao.

Amostras de animais diferentes ou mltiplas amostras de um mesmo tecido:


Amostras colhidas de diferentes animais devem ser encaminhadas em frascos
separados. Ainda, quando houver necessidade de identificao de rgos ou
fragmentos mltiplos, estes devem estar em frascos separados e devidamente
identificados. Ex: Colheu vrios fragmentos de pele de um mesmo animal, mas
de diferentes locais e deseja a anlise identificada de cada fragmento. Colher,
acondicionar em frascos separados, identificar todos e indicar o local anatmico
da colheita no respectivo frasco.

Tempo de fixao: a depender do tamanho da amostra, o tempo de fixao


varia de 6 a 48 horas. Amostras de biopsia apresentam fixao completa em
seis horas. Amostras maiores, de at 4cm3, estaro completamente fixadas em
48 horas.

Trocas de formol: caso a amostra contenha grande quantidade de sangue,


como por vezes ocorre com bao e fgado, realizar a troca do formol aps 24
horas de fixao. Se houver necessidade, realizar nova troca aps 48 horas.

rgos encapsulados: devem ser seccionados para que ocorra a penetrao do


fixador. Ex: testculos, prstata, rins, etc.
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Viabilidade tecidual: lembrar que os tecidos apresentam diferentes tempos de


viabilidade, ou seja, alguns entram em autlise imediatamente aps o bito e
outros apresentam viabilidade maior. Assim, se deseja colher, com sucesso,
rgos como a adrenal, executar a colheita logo aps a morte do animal, pois
trata-se de um tecido extremamente susceptvel ao processo de autlise.
rgos com grande capacidade de reserva sangunea (fgado e bao) tambm
autolisam com facilidade.

lcool 70: aps 48 horas no formol tamponado a 10%, o material pode ser
transferido e mantido em lcool 70, pois, aps este perodo, o mesmo estar
devidamente fixado, podendo ser mantido no lcool 70, especialmente se
houver a inteno de submet-lo a exame imunoistoqumico.

FIXAO DE MUCOSAS:
Mucosas (esfago, estmago, intestinos e bexiga) devem ser fixadas distendidas
sobre base reta e colocadas em contato com o fixador, para evitar dobramentos
aps a fixao em formol tamponado a 10% (Figura 4).

Figura 4: Fixao de mucosas. Distenso em base reta e contato com o fixador.

FIXAO DE TECIDO SSEO:


A fixao do tecido sseo deve ser semelhante aos tecidos compactos. Colher
segmento no tamanho proposto e fixar em formol tamponado a 10%.

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