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Microbiologia

A clula bacteriana procarionte e tem as seguintes


caracterstica:
O material gentico no est envolvido por uma membrana; ele um
cromossomo nico e circular. As Organelas no so revestidas por
membranas. A parede celular possui um polissacardeo complexo
denominado peptideoglicano. Dividem-se por difuso binaria.

Tamanho e Forma e Arranjo das Clulas Bacterianas


H muitos tamanhos e formas entre as bactrias. A maioria das bactrias
varia de 0,2 a 2,0 micrometro de dimetro e de 2 a 8 micrometro de
comprimento.

As formas bsicas so:


Cocos (esfricos)
Bacilos (forma de basto)
Espiral (espiralado)

Cocos:
Geralmente so redondos, mas podem ser ovais, alongados ou achatados
em sua extremidade. Quando os Cocos se apresentam aos pares so
denominados de Diplococos. Quando os cocos se apresentam em cadeia
so denominados de Streptococos. Quando os cocos formam cachos
so denominados de Stafilococos. Os que formam grupos de quatro
so denominados de ttrades. E os que dividem e formam oito
bactrias unidas como cubo so denominados de sarcinas.

Bacilos:
Se dividem ao longo de seu eixo curto. A maioria dos bacilos se
apresenta isolados. Os Diplobacilos aparecem aos pares aps a diviso.
E os estreptobacilos ocorrem em cadeias. H bacilos que so ovais e
muito parecidos com cocos e so denominados de cocobacilos.
Alguns bacilos tem a extremidade pontiaguda e outros tem extremidades
arredondadas ou retas.

Espirilos:
So bactrias de forma espiralada (como uns saca rolhas). Algumas formas
so rgidas e outras flexveis (espiroquetas). Uma forma que se parece com
uma virgula chama-se vibrio.

Parede Celular:
A principal funo da parede celular prevenir a ruptura das clulas
bacterianas e ajuda a manter a forma da bactria. A parede Celular
importante pois contribui para algumas espcies causarem doenas, sendo
o local de ao de alguns antibiticos e tambm para diferenciar os

principais tipos de bactrias. A parede celular de uma clula bacteriana


uma estrutura complexa semi-rigida, responsvel pela forma da clula. A
parede celular circunda a membrana plasmtica frgil subjacente,
protegendo-a. parede celular composta por uma macromolcula de
peptideoglicana, tambm conhecida como mureina.

Parede Celular de Bactrias Gram-Positiva:


A parede celular neste tipo de bactria consiste de muitas camadas de
peptideoglicana, formando uma estrutura espessa e rgida. Alm disso, so
encontradas protenas e cidos teicicos que podem representar at 50% de
massa seca da parede.

As funes dos cidos teicicos:


Facilitar a ligao e a a regulao da entrada e sada de ctions na clula;
regular a atividade das autolisinas durante o processo de diviso celular. As
autolisinas atuam sobre os peptideoglicano, rompendo seus componentes.;
construir stios receptores de bacterifagos; servir de stios receptores com
o epitlio do hospedeiro em algumas bactrias patognicas; construir
antgenos celulares tornando possvel a identificao sorolgica de muitas
bactrias Gram positivas.

Paredes Celulares de Bactrias Gram Negativas:


A parede celular das bactrias Gram Negativas mais complexa. As paredes
celulares das bactrias gram-negativas consistem de uma ou poucas
camadas de peptideoglicana, tornando a mais susceptvel ao rompimento
mecnico. A membrana externa constituda de duas camadas lipdicas.
Um externa composta de fosfolpides e uma interna composta de
lipopolissacarideo e protenas.

Lipopolissacarideo:
constitudo de um lipdio complexo (lipdio A) o qual est ligado a um
polissacardeo chamado de um antgeno o. O LPS tambm chamado de
endotoxina, pois toxico.
Colorao de Gram
Foi desenvolvida em 1884 pelo bacteriologista dinamarqus Hans Christian
Gram. um procedimento til e classifica as bactrias em dois grandes
grupos: Gram positivas e Gram negativas. Neste procedimento, um
esfregao fixado pelo calor recoberto com um corante bsico prpura,
usualmente a violeta de genciana. Aps um curto perodo de tempo, 0
corante prpura lavado e o esfregao recoberto com iodo, um mordente.
Quando o iodo lavado, tanto as bactrias gram-positivas quanto as
bactrias gram-negativas aparecem em cor purpura ou violeta escura. A
seguir a lmina lavada com lcool-acetona. Esta soluo um agente
descolorante, que remove a prpura das clulas gram-negativas. O lcool
lavado e a lamina ento corada com safrarina, um corante bsico
vermelho. O esfregao lavado novamente, seco com papel e examinado
microscopicamente.

Fator de Crescimento Microbiano


Psicrfilos
Os microrganismos psicrfilos crescem melhor em temperaturas entre 0 a
15C. Estes tipos de microorganismos so encontrados em guas frias e
solos, como os oceanos e regies polares.

Mesfilos
A maioria dos microorganismos so mesfilos e crescem melhor em
temperaturas que variam entre 25 a 40c. as que so patognicos para o
homem crescem melhor em torno da temperatura corporal (37c).

Termfilos
A maioria dos Termfilos crescem a temperaturas em torno de 40 a 85c,
so encontrados em reas vulcnicas, em mistura de fertilizantes e em
nascentes quentes.

Ph
O Ph timo para o crescimento microbiano depende para cada espcie. A
maioria das espcies cresce melhor dentro de variaes pequenas de Ph
sempre perto da neutralidade, entre 6,5 a 7,5.
cido 1, 2, 3, 4, 5 Neutro 6 a 7 e Alcalino 8 a 14

Fatores Qumicos
Carbono:
O carbono, junto com a gua um dos elementos mais importantes para o
crescimento microbiano. O carbono essencial para a sintese de todos os
compostos orgnicos necessrios para a viabilidade celular, sendo
considerado o elemento estrutural bsico para os seres vivos.

Nitrognio, Enxofre e Fsforo:


Para a sintese de material celular dos microrganismos necessrio alm de
carbono, a presena de outros elementos. A sintese de protenas, por
exemplo, necessita de grandes quantidades de nitrognio e enxofre. Para a
sintese de DNA e RNA se faz necessria, tambm , a presena de nitrognio
e fsforo.

Outros Elementos
Os microrganismos necessitam de pequenas quantidades de outros
elementos minerais como ferro, cobre, molibdnio e zinco.

Oxignio
De acordo com a resposta ao oxignio gasoso, os microrganismos so
divididos em 4 grupos fisiolgicos:

Microorganismo aerbico; Aerbicos facultativos; Anaerbicos e


Microaerfilos

Microorganismo Aerbicos:
Os microorganismos que normalmente requerem oxignio para o
crescimento so classificados como aerbicos. Os aerbicos, podem crescer
mais lentamente quando a quantidades de oxignio fornecido limitada.

Microorganismo aerbicos facultativos:


So aqueles que crescem na presena do ar atmosfrico e podem tambm
crescer em anaerobiose, ou seja podem utilizar oxignio quando este est
disponvel, mais, na sua ausncia, so capazes de continuar seu
crescimento atravs da respirao anaerbica ou fermentao. (Escherichia
Coli).

Microorganismos Anaerbicos:
Os microorganismos anaerbicos so aqueles que podem ser mortos pelo
oxignio e no podem crescer em presena de ar. Alguns anaerbios podem
tolerar baixas concentraes de oxignio, mas os anaerbios estritos so
mortos por uma breve exposio ao oxignio. Clostridium perfringens
tolerante ao oxignio; Clostridium tetani moderadamente tolerante;
Methanobacterium so anaerbios estritos.

Microorganismos Microaerfilos:
Os Microaerfilos so organismos que assim como os aerbicos podem
utilizar oxignio para a produo de energia, mas os nveis de oxignio
presentes na atmosfera menor.

Reproduo de Microorganismos procariticos:


A maioria das bactrias se multiplica pelo processo de reproduo
assexuada, um processo que no envolve clulas sexuais (gametas). Em
microorganismos unicelulares cada clula se divide em duas filhas idnticas,
na maioria dos procariotos unicelulares o modo de reproduo assexuada
a fuso binaria transversa, na qual a clula se se dividem individualmente
em duas clulas filhas de tamanho aproximadamente igual.

Crescimento de uma Cultura Bacteriana


Fases do Crescimento:
Fase Lag
Durante um certo perodo de tempo, o nmero de clulas sofre pequenas
variaes, pois as bactrias no se reproduzem imediatamente quando so
colocadas em um novo meio de cultura. Este perodo em que ocorre pouca
ou ausncia de diviso celular denominado Fase Lag podendo se estender
por uma hora at vrios dias.

Fase Log

A partir de um determinado momento as clulas iniciam se processo de


diviso entrando no perodo de crescimento ou aumento logartmico
denominado de fase log ou fase de crescimento exponencial. Durante
este perodo a reproduo celular encontra-se extremamente ativa onde o
tempo de gerao atinge um valor constante.
O crescimento bacteriano utiliza uma progresso geomtrica do seguinte
modo: 1 2 2 2 onde o expoente n se refere ao nmero de geraes.

A fase estacionaria
Se a fase de crescimento exponencial continua durante um longo perodo
ocorrera a formao de um grande nmero de clulas. Para que isso no
ocorra, em um determinado momento a velocidade de crescimento diminui,
o nmero de morte celular equivalente ao nmero de clulas novas e a
populao se torna estvel. Este perodo denominado de fase
estacionaria. Diversos fatores poderiam estar interferindo como o trmino
de nutrientes, acmulo de produtos de degradao e alterao do Ph.

Tempo de Gerao
O tempo de gerao o intervalo de tempo necessrio para que cada
Microorganismo se dvida. Os tempos variam de Microorganismo.
Escherichia coli 20min ; Mycobacterium tuberculosis 13 a 15horas.

Meio de cultura
O meio de cultura assim denominado para o material nutriente preparado
no laboratrio para crescimento de Microorganismo. Algumas bactrias
podem crescer normalmente em qualquer meio de cultura, outras
necessitam de meios especiais. Para o crescimento de microorganismos h
uma variedade de meios de cultura que so vendidos e todos devem conter
todos os componentes necessrios para o crescimento. Os meios podem ser
lquidos ou slidos quando so adicionados gar a ele. Um meio contendo
gar normalmente utilizado em tubos de ensaio ou em placas de petri.

Meio Complexo
Os meios complexos so definidos como compostos de nutrientes como
extrato de levedura, de carne ou de plantas ou produtos de digesto
proteica das diversas fontes. Os extratos de carne e os extratos de levedura
fornecem as vitaminas e os outros fatores de crescimento orgnico.

Meio Quimicamente Definido


Para permitir o crescimento, o meio dever conter uma fonte de energia,
uma fonte de carbono, nitrognio, enxofre, fsforo e todos os fatores
orgnicos para o crescimento. Um meio quimicamente definido aquele no
qual a composio qumica exata conhecida, estes meios so tambm
denominados de meios seletivos, pois impedem o crescimento de certos
tipos de microrganismos e favorecem crescimento de outros.

Meios de Cultivo para Anaerbicos

O cultivo de bactrias anaerbicas pode causar problemas porque o contato


com oxignio, pode causar a morte destas bactrias, para tanto so
utilizados meios de cultivo especiais denominados de meios redutores.
Estes meios contem reagentes, como o tioglicolato de sdio que capaz de
se combinar com o oxignio, eliminando este elemento do meio de cultura.
O crescimento e a manuteno rotineira realizada em laboratrios so
realizados em jarras especiais que comportam vrias placas de petri em
uma atmosfera livre de oxignio.

Meio de Enriquecimento
Para o isolamento de bactrias presentes em pequeno nmero necessria
a utilizao de meios de enriquecimento, este meio normalmente liquido,
contendo todos os nutrientes necessrios para favorecer a multiplicao de
bactrias.

Obteno de cultura Pura


A maioria dos matrias infecciosos, como pus, escarro, fezes e urina
apresentam grande variedade de bactrias. Para isolamento das bactrias
necessrio o material seja plaqueado em meio de cultura slido. Isolar a
colnia desejada e efetuar o crescimento. O mtodo para obteno de
cultura puras utilizado o mtodo de semeadura por esgotamento,
onde uma ala de inoculao estril utilizada para ser mergulhada na
cultura mista, contendo mais de um tipo de microrganismo e
posteriormente semeada em placa de meio nutriente slido.
Tcnica de esgotamento por estrias (TSA).

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