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Bacteriologia - 2/2014 21 e 28/08/2014

Aulas Tericas:

5 feira, 14:00 s 16:00 sala 03-A

Aulas prticas :

6 feria, 13:00 s 15:00 ou 15 s 17:00 Laboratrio de aulas prticas: ICB,


prdio branco, entrada pelo piso trreo, no corredor direita

Dia Hora Local Assunto Professor


21/08 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Apresentao do curso/ Morfologia e citologia bacteriana Cludio
22/08 6 feira ----------------- ----------- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------- -------------------
28/08 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Fisiologia e crescimento bacteriano Cludio
13 s 15 (A) Normas e materiais no laboratrio de microbiologia
29/08 6 feira Laboratrio* Juliana/Vanessa
15 s 17 (B) Ubiquidade microbiana
04/09 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Organizao do genoma bacteriano e variabilidade gentica Cludio
13 s 15 (A) Ubiquidade microbiana leitura e discusso
05/09 6 feira Laboratrio* Juliana/Vanessa
15 s 17 (B) Colorao de Gram
11/09 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Biofilmes bacterianos e sua ecologia Cludio
13 s 15 (A)
12/09 6 feira Sala 03 A Bactrias de estrutura atpica I - Mycobacteium e Nocardia Juliana/Vanessa
15 s 17 (B)
18/09 5 feira 14 s 16 Sala 03 A 1 TVC Cludio
13 s 15 (A)
19/09 6 feira Sala 03 A Bactrias de estrutura atpica II - Bactrias espiraladas Juliana/Vanessa
15 s 17 (B)
25/09 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Relao bactria-hospedeiro Vnia
13 s 15 (A)
26/09 6 feira Sala 03 A Bactrias de estrutura atpica III Clamidias, riqutsias, micoplasmas e ureaplasmas Juliana/Vanessa
15 s 17 (B)
02/10 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Controle de populao microbiana Vnia
13 s 15 (A)
03/10 6 feira Laboratrio* Controle da populao microbiana Juliana/Vanessa
15 s 17 (B)
09/10 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Diagnstico microbiolgico Vnia
13 s 15 (A) Controle da populao microbiana Leitura
10/10 6 feira Laboratrio* Juliana/Vanessa
15 s 17 (B) Reservatrios humanos de patgenos putativos
16/10 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Bastonetes Gram negativos e outras bactrias de importncia no TGI Vnia
13 s 15 (A) Reservatrios humanos de patgenos putativos Leitura
17/10 6 feira Laboratrio* Juliana/Vanessa
15 s 17 (B) Modelo de estudo de Gram positivos e Gram negativos
23/10 5 feira 14 s 16 Sala 03 A 2 TVC Vnia
13 s 15 (A) Modelo de estudo de Gram positivos e Gram negativos - Leitura
24/10 6 feira Laboratrio* Juliana/Vanessa
15 s 17 (B) Quantificao bacteriana
30/10 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Cocos Gram-positivos Aline
13 s 15 (A)
31/10 6 feira Laboratrio* Quantificao bacteriana Leitura Juliana/Vanessa
15 s 17 (B)
06/11 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Bactrias anaerbias Aline
13 s 15 (A)
07/11 6 feira Sala 03 A Neisseria, Haemophilus e Bordetella Juliana/Vanessa
15 s 17 (B)
13/11 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Aspectos ecolgicos, farmacolgicos e clnicos da antibioticoterapia Aline
13 s 15 (A)
14/11 6 feira Laboratrio* Antibiograma montagem Juliana/Vanessa
15 s 17 (B)
20/11 5 feira 14 s 16 Sala 03 A Aspectos biolgicos, ecolgicos e clnicos da resistncia bacteriana a drogas Aline
13 s 15 (A)
21/11 6 feira Laboratrio* Antibiograma leitura Juliana/Vanessa
15 s 17 (B)
27/11 5 feira 14 s 16 Sala 03 A 3 TVC Aline
12/12 6 feira A definir A definir 2a CHAMADA GERAL A definir

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Aproveitamento mnimo: 60%

1 TVC: 30 pts; 2 TVC: 30 pts; 3 TVC: 30 pts.

Participao nas aulas prticas: 10 pts.

Frequncia mnima: 75%.

Bibliografia:

TRABULSI, L.R. Microbiologia, 5 Ed., Atheneu, 2008.


JAWETZ, E.; MELNICK, J.L. & ADELBERG, E. Microbiologia Mdica. 22 Ed. McGraw-Hill
Interamericana do Brasil, 2001.
MURRAY, PATRICK R.; PFALLER, MICHAEL A.; ROSENTHAL, KEN S. Microbiologia Mdica.
5 ed. Ed. Elsevier, 2006.
TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R. & CASE, C.L. Microbiologia, 6 edio, Editora Artmed, Porto
Alegre, 2003.
PELCZAR, M.J.; CHAN, E.C.S.; KRIEG, N.R. Microbiologia Conceitos e Aplicaes.
Volumes 1 e 2. Ed. Makron Books, 1996.

Introduo Bacteriologia

Morfologia, citologia e
fisiologia da clula bacteriana

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Procariontes
Ausncia de compartimentos dentro da clula - metablitos dispersos no citoplasma
Ausncia de ncleo verdadeiro - cromossomo bacteriano disperso no citoplasma

Essenciais na biosfera, como componentes


indispensveis dos ecossistemas, e que torna
possvel o funcionamento da vida

Bactria Arqueia

Diferentemente dos animais e plantas, os procariotos so unidades autnomas


de matria viva, capazes de crescer e interagir com o ambiente com grande
versatilidade gentica.

Os procariotos so ubquos e coexistem entre si e com outros seres vivos nos


ambientes aquticos e terrestres mesoflicos;

Crescimento em ambientes extremos e complexos:

 ambientes glaciais,
 fontes termais,
 Crateras vulcnicas e fendas rochosas profundas;
 grandes profundidades em oceanos,
 condies de extrema salinidade
 Superfcies externas e internas do corpo humano e de outros animais

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Agentes causadores
de doenas
Meio ambiente Biotecnologia

Energia Indstria
qumica
Microrganismos
Indstria de
alimentos Agricultura

Indstria Recuperao ambiental


farmacutica biorremediao

 Robert Hooke (1665): microscpio rudimentar plantas e fungos.

 Antonie van Leewenhoek (1674): mundo microbiano

1683 publicao da primeira representao de uma bactria.

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O progresso da Microbiologia ficou vinculado ao desenvolvimento


de instrumentos e tcnicas pertinentes ao seu estudo:

 microscpios com maior poder de resoluo;

 tcnicas de cultivo;

 tcnicas de colorao de estruturas celulares.

 Sculo XIX: o qumico francs Louis Pasteur e o mdico alemo


Robert Koch desenvolveram estudos que estabeleceram as bases da
Microbiologia como cincia experimental estruturada e
especializada.

Postulados de Koch:

1. O mesmo patgeno deve estar presente em todos os casos da doena;


2. O patgeno deve ser isolado do hospedeiro doente e crescer em cultura pura;
3. O patgeno deve causar a doena quando inoculado em animal saudvel;
4. O patgeno deve ser isolado do animal inoculado e deve ser o organismo original.

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 Ignaz Philipp Semmelweis - mdico hngaro eternizado como


"salvador das mes Hospital Geral de Viena

 1847: reduo na incidncia de febre puerperal pela prtica


da anti-sepsia das mos. Os mdicos matavam 3x mais que as
parteiras naquela regio.

 Florence Nightingale 1854 - Guerra da Crimeia

(Conflito nos Blcs envolvendo o Imprio Russo e, uma coligao integrada pelo UK, Frana,
Itlia, Imprio Turco-Otomano e o Imprio Austraco)

 Alta mortalidade entre os soldados Britnicos. Associao entre


higiene e diminuio da mortalidade sanitarismo

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 Joseph Lister - mdico cirurgio e pesquisador ingls

 1865: o fenol era um efetivo agente anti-sptico que podia


auxiliar na reduo das mortes humanas por infeces ps-
operatrias

Microbiologia no sculo XXI


Fatores que contribuem para a emergncia de doenas infecciosas

 Alteraes ecolgicas;

 Comportamento e informao (educao);

 Globalizao;

 Produo/manipulao de alimentos em larga escala;

 Auto medicao e erros de prescrio mdica resistncia;

 Planejamento urbano infra-estrutura sanitria.

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Microbiologia Mdica e Diagnstica:


Descrio dos agentes etiolgicos;
Vias de transmisso;
Medidas de tratamento e preveno das doenas;
Desenvolvimento de estratgias teraputicas.

Microbiologia Ambiental:
Estudo dos papis dos microrganismos nos ecossistemas;
Descrio de fenmenos naturais;
Prospeco da diversidade microbiana

Microbiologia Industrial, Biotecnologia e de Alimentos:


Otimizao de processos microbianos;
Transformao de substratos pela ao de microrganismos;
Purificao de produtos microbianos;
Biorremediao e biolixiviao.

OMS - Desafios do sculo XXI na rea de sade

Desdobramento da Microbiologia:

Bacteriologia

Micologia
Virologia

Parasitologia (protozoologia)
Imunologia

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Organizao taxonmica dos seres vivos

Desenvolvimento da microscopia e tcnicas bioqumicas 1969


(Robert H. Whittaker)

Cinco reinos relacionados com estrutura celular e forma de obteno de nutrientes

Animlia (animais) Plantae (plantas)

Protista (algas e protozorios) Fungi (fungos)

Monera (procariotas)

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Organizao taxonmica atual


Sistema de classificao fundamentado no argumento de que a diviso
dos microrganismos em procariotos e eucariotos era insuficiente
1991 (Carl R. Woese)

Diviso dos procariotos em Archae e Bacteria - seqncia do RNAr 16S e 18S

Archaea (procariotas) Bacteria (procariotas)

Eukarya (eucariotas: fungos, algas, protozorios, plantas e animais)

As archaea so procariotas porque no possuem ncleo envolvido por


membrana, mas possuem lipdios e cidos nuclicos ribossomais diferentes
das bactrias e dos eucariotos

(Flavobacter)

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Morfologia bacteriana

Bactrias de importncia em sade humana


Caracterizadas morfologicamente pelo seu tamanho, forma e arranjo

- Cocos (formas esfricas): grupo homogneo em relao a tamanho

Ttrades: agrupamentos de quatro cocos


Diplococos: cocos agrupados aos
Sarcinas: agrupamento de oito cocos em
pares. Ex.: Neisseria (meningococo)
forma cbica. Ex.: Sarcina

Estreptococos: cocos agrupados Estafilococos: cocos em grupos


em cadeias. Ex.: Streptococcus irregulares, lembrando cachos de uvas.
Ex.: Staphylococcus

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- Bacilos ou bastonetes: cilndricos, forma de basto, podendo ser


longos ou delgados, pequenos e grossos, extremidade reta, afilada,
convexa ou arredondada.

Diplobacilos: bastonetes agrupados aos


pares.

Estreptobacilos: bastonetes agrupados em


cadeias.

Paliada: bastonetes agrupados lado a lado


como palitos de fsforos.

- Formas helicoidais ou espiraladas: clulas de forma espiral.

Helicobacter pylori
Espirilos: possuem corpo rgido e se
movem s custas de flagelos
externos, dando uma ou mais voltas
espirais em torno do prprio eixo.

Espiroquetas: so flexveis e locomovem-


se provavelmente s custas de contraes
do citoplasma, podendo das vrias voltas
completas em torno do prprio eixo. Ex.:
Gnero Treponema

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- Formas de transio

Bacilos muito curtos: cocobacilos.


Ex.: Prevotella

Espirilos muito curtos, assumindo formas


de vrgula: vibries. Ex.: Vibrio cholerae

A CLULA BACTERIANA

A observao interna das estruturas celulares d-nos uma idia de


como a bactria funciona no ambiente. A figura a seguir representa as
diversas estruturas bacterianas:

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ESTRUTURAS CELULARES EXTERNAS

Flagelos

Estruturas especiais de locomoo, constitudas de protena, que formam longos


filamentos que partem do corpo da bactria e se estendem externamente parede celular.

Fmbrias

Estruturas filamentosas mais curtas e delicadas que os flagelos, semelhantes a plos,


que se originam da membrana plasmtica, e so usados para fixao, e no para
motilidade.

Esto relacionadas com a aderncia s superfcies mucosas (fmbrias comuns) e com a


transferencia de material gentico durante a conjugao bacteriana (fmbrias ou pili
sexual).

Cpsula

Camada que circunda a clula bacteriana externamente a parede celular, de consistncia


viscosa e de natureza polissacardica (polissacardeo extracelular) ou polipeptdica.

Funes: proteo da clula bacteriana contra desidratao, permitir a fixao da bactria


em vrias superfcies, evitar a adsoro de bacterifagos na clula bacteriana.

Relacionada virulncia da bactria, pois confere resistncia fagocitose pelas clulas de


defesa do corpo em uma mesma espcie, amostras encapsuladas so mais virulentas
que as no-encapsuladas - AUMENTA A CHANCE DE INFECO.

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Parede Celular

Estrutura rgida que pode recobrir ou no a membrana citoplasmtica e d forma s clulas,


alm de proteo, mantendo a presso osmtica intrabacteriana e prevenindo expanso e
eventual rompimento da clula.

Funciona tambm como suporte de antgenos bacterianos.

Bactria Parede celular

Parede celular Parede celular


tpica atpica
Bactrias sem
parede celular
Gram + Gram -
Micobactrias
Espiralados
Micoplasmas Clamidias
Ureaplasmas Maioria das bactrias Riqutsias
de importncia mdica

Parede Celular

Composio: peptidioglicano (mucopeptdeo ou murena) estrutura rgida da parede:

- N-acetilglicosamina (NAG) - cido N-acetilmurmico (NAM) - tetrapeptdeo (4 aminocidos)

Bactrias de parede celular atpica podem apresentar estruturas dos tipos:

Mais complexas com a presena de ceras e carboidratos


Menos complexas camada de petdeoglicano muito delgada
Menos complexas com ausncia de algum componente do peptideoglicano
Com a presena de bainha de carboidratos complexos (glicosaminaglicana)

Gram +

Gram - Gram -

Micobacterias

Gram -

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Lipopolissacardeo das bactrias Gram negativas

3 segmentos ligados covalentemente: lipdio A, cerne do polissacardeo e antgenos O.

A poro lipdica do LPS tambm


chamada de ENDOTOXINA.

O LPS tem um papel protetor (bactrias


entricas), mas tambm podem atuar como
veneno, causando febre, diarria, destruio
de hemcias e um choque potencialmente
fatal.

Gram -

Implicao da estrutura da parede celular bacteriana - COLORAO DE GRAM


Baseado nas propriedades da parede celular (substncias lipdicas na camada externa)

1884 Hans Christian Joachin Gram

Experimentos com pneumococos corantes seletivos para


bactrias

Desenvolvimento de um protocolo de colorao de esfregaos


bacterianos

Permitiu a diviso destes organismos em 2 grandes grupos -


visualizao por microscopia ptica

 Revoluo no diagnstico das doenas infecciosas.

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Membrana Citoplasmtica

Desempenha importante papel na permeabilidade seletiva da clula


funciona como barreira osmtica.

Difere da membrana citoplasmtica dos eucariotos por: no apresentar


esteris em sua composio; ser sede de numerosas enzimas do metabolismo
respiratrio; controlar a diviso bacteriana atravs do mesossomo.

Mesossomos

Invaginaes da membrana citoplasmtica (dobras). Podem estar ligados


prximos membrana ou aprofundar-se no citoplasma.

Os mesossomos profundos e centrais parecem estar ligados ao material


nuclear da clula estando envolvidos na replicao de DNA e na diviso celular.

Papel na respirao bacteriana

ESTRUTURAS CELULARES INTERNAS

 rea citoplasmtica

- Citoplasma: 80 % de gua, cidos nuclicos, protenas, carboidratos, compostos


de baixo peso molecular, lipdios, ons inorgnicos. Stio de reaes qumicas.

- Ribossomos: ligados a uma molcula de mRNA, so chamados de


poliribossomos. Presentes em grande nmero nas clulas bacterianas.

- Grnulos de reserva (incluses): os procariotos podem acumular no citoplasma


substncias sob a forma de grnulos, constitudos de polmeros insolveis (ex.:
grnulos de glicognio, amido, lipdios, polifosfato, enxofre e xido de ferro) .

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 rea nuclear

- Nucleide: cromossomo bacteriano, constitudo por uma nica molcula dupla


fita circular de DNA no delimitado por membrana nuclear e sem a presena de
histonas.

- Contm as informaes necessrias sobrevivncia da clula, capaz de


replicao.

- Molculas de DNA extracromossomal: plasmdios, transposons e integrons

- Molculas menores de DNA, cujos genes no codificam caractersticas


essenciais, mas podem conferir vantagens seletivas para as bactrias que os
possuem (ex.: genes de resistncia a antibiticos, virulncia, resistncia a
metais txicos).

- Envolvidos nos processos de recombinao gentica bacteriana.

 Esporos
=> Tambm chamados de endsporos (porque se formam dentro da clula).

Funo: proteo da clula vegetativa das adversidades do meio ambiente


(limitao de nutrientes, temperatura, e dessecao).

Sua formao leva em torno de 6 horas.

Tm pouca atividade metablica, pode permanecer latente por longos perodos


- forma de sobrevivncia, e no de reproduo. Ex. Bacillus e Clostridium.

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NUTRIO DOS MICRORGANISMOS


Os microrganismos necessitam de um ambiente propcio com todos
os constituintes fsicos e qumicos necessrios para seu crescimento.

As substncias ou elementos retirados do ambiente so utilizadas como blocos


para a construo da clula.

NUTRIENTES

Os nutrientes podem ser de vrios tipos, dispostos em trs categorias, de acordo


com a sua concentrao e importncia na clula bacteriana: macronutrientes,
micronutrientes e fatores de crescimento.

MACRONUTRIENTES
Macronutrientes Funes
gramas
Carbono (Compostos orgnicos, CO2)
Oxignio (O2, H2O, comp. orgnicos)

Nitrognio (NH4, NO3, N2, comp. org.)


Constituintes de carboidratos, lipdeos,
Hidrognio (H2, H2O, compostos
orgnicos) protenas e cidos nuclicos
Fsforo (PO4)
Enxofre (SO4, HS, S, comp. enxofre)

mg
Potssio (K+) Atividade enzimtica
Clcio (Ca2+) Resistncia ao calor do endosporo
Magnsio (Mg2+) Cofator de enzimas, complexos com ATP,
estabiliza ribossomos e membranas
Ferro (Fe2+/Fe3+) Constituio de citocromos, cofator de
enzimas, cofator de protenas
transportadores de eltrons

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MICRONUTRIENTES

FATORES DE CRESCIMENTO

So compostos que alguns tipos celulares necessitam em quantidades muito


pequenas.

Embora a maioria dos microrganismos seja capaz de sintetiz-los, alguns


microrganismos necessitam que eles sejam adicionados ao meio de cultura.

Estes compostos entram na composio das clulas ou de precursores dos


constituintes celulares.

Aminocidos
Purinas e pirimidinas
Colesterol
Heme
Vitaminas

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Vitaminas requeridas pelos


microrganismos e suas funes

ENERGIA E CARBONO

Todas as clulas necessitam de energia, que pode


ser obtida de 3 maneiras:

Compostos qumicos orgnicos;

Compostos qumicos inorgnicos;

Energia luminosa.

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Vrios compostos qumicos orgnicos e


inorgnicos presentes na Terra podem ser
utilizados pelos procariotos na obteno de
energia.

A energia obtida a partir da oxidao dos


compostos, sendo conservada na clula na
forma de ATP.

ENERGIA

FOTOTRFICOS QUIMIOTRFICOS

Microrganismos que utilizam Microrganismos que utilizam energia


energia radiante (luz) qumica (compostos qumicos)

Compostos Compostos
orgnicos inorgnicos

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Todas as clulas necessitam de carbono


(C) como um dos principais nutrientes.
Heterotrficos: requerem compostos orgnicos como fonte de C;

Autotrficos: o CO2 corresponde fonte de carbono para a clula.

CARBONO

HETEROTRFICOS AUTOTRFICOS

Microrganismos que utilizam Microrganismos que utilizam


carbono orgnico carbono inorgnico (CO2)

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OXIGNIO
O oxignio pode ser incuo, indispensvel ou letal para as bactrias, o que
permite classific-las em:

OXIBINTICAS ANOXIBINTICAS

Aerbios Anaerbios
obrigatrios

Aerbios Extremamente
obrigatrios sensveis
Microaerfilos Aerotolerantes

Anaerbios
facultativos

FORMAS DE OBTENO DE ENERGIA


I Fermentao: processo no qual os compostos orgnicos so
parcialmente degradados

Ltica cido ltico

Alcolica etanol

Aceto-butrica cido butrico e acetona

Actica cido actico (vinagre)

Propinica cido propinico

=> Libera energia de acares (2 ATP)


ou molculas orgnicas;
=> No requer oxignio (mas pode
ocorrer na presena deste);
=> No requer o uso do ciclo de Krebs
ou cadeia de transporte de eltrons;
=> Utiliza uma molcula orgnica
como aceptor final de eltrons

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II - Respirao

a) RESPIRAO AERBICA:
processo onde os compostos
orgnicos so completamente
degradados, e o O2 o aceptor
final dos eltrons.

b) RESPIRAO ANAERBICA: processo no qual os compostos


orgnicos so completamente degradados, e uma molcula diferente
do O2 o aceptor final dos eltrons (SO4, CO3, NO3, fumarato, etc)

A quantidade de ATP gerada na respirao anaerbica varia de acordo


com o microrganismo e a via.

Devido a somente uma parte do ciclo de Krebs funcionar sob


condies anaerbias, o rendimento de ATP nunca to alto
quanto o da respirao aerbica.

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TOLERNCIA AOS AMBIENTES EXTREMOS

Outro aspecto envolvendo a diversidade fisiolgica dos


procariotos refere-se habilidade de sobrevivncia em
habitats caracterizados por condies ambientais
extremas.

Microrganismos podem ser encontrados em fontes termais


ferventes, no gelo, em solos com extremos de pH cido ou
bsico, ou em corpos de gua extremente salgados.

Temperatura

Cada tipo de bactria apresenta uma temperatura tima de crescimento. Acima


do limite, ocorre desnaturao proteica e consequente morte celular.
Temperaturas inferiores levam a uma desacelerao das atividades metablicas.

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pH

A maioria das bactrias cresce melhor dentro de variaes pequenas de pH, sempre perto
da neutralidade, entre pH 6,5 e 7,5.

Presso Osmtica

A capacidade dos microrganismos se adaptar a presses osmticas chama-se


OSMOADAPTAO.

Os microrganismos so frequentemente encontrados em ambientes onde a


concentrao do soluto igual o seu citoplasma (meio isotnico).

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Halotolerantes: toleram altas concentraes de sais-10% NaCl

Haloflicos: requerem altos nveis de NaCl (Vibrio cholerae).

REPRODUO BACTERIANA
As bactrias se multiplicam por CISSIPARIDADE, FISSO ou DIVISO BINRIA, um
processo devido formao de septos na regio do mesossomo, que se dirigem da
superfcie para o interior da clula, dividindo a bactria em duas clulas filhas.

A fisso precedida pela replicao do DNA, que se processa de modo


semiconservativo, e cada clula filha recebe uma cpia do cromossomo da clula-me. O
perodo da diviso celular depende do tempo de gerao de cada bactria

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CURVA DE CRESCIMENTO A Fase LAG: pouca diviso celular,


os microrganismos esto se
BACTERIANO adaptando ao meio em que esto
crescendo. As clulas aumentam de
volume, mas no se dividem.

B Fase exponencial (log):


crescimento exponencial, divises
celulares sucessivas, grande atividade
metablica.

C Fase estacionria: decrscimo na


taxa de diviso celular, onde a
velocidade de crescimento =
velocidade de morte

D Fase de declnio ou morte:


condies imprprias para o
crescimento, meio deficiente em
nutrientes e rico em toxinas, onde as
clulas mortas excedem o nmero de
clulas vivas

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