Modelagem livre de calibrao inversa de cromatografia de troca

inica em purificao industrial de anticorpo

Introduo
O processamento em escala industrial enfrenta o desafio de purificar
eficientemente um produto fora de uma mistura muito heterognea.

Esta abordagem garante desenvolvimento rpido processo e reduz o

tempo de mercado, mas provvel que a explorao reduzida do
projeto espao leva a processos de qualidade inferior.
Como a integrao de ferramentas de modelagem para o
desenvolvimento do processo tambm uma parte essencial da
estratgia para a implementao da qualidade de abordagem de
design, ferramentas de modelagem esto ganhando cada vez mais a
ateno da indstria farmacutica.

Existem protocolos calibrao do modelo de componentes puros, [8],

o que permitem a determinao dos parmetros especficos para
cada componente de uma forma consecutiva. Como no temos
conhecimento sobre o comportamento dos componentes dentro de
misturas, o mtodo inverso uma opo adequada, que altera os
parmetros de forma sistemtica para alcanar uma competio de
cromatograma medindo e prevendo modelos. Num estudo
comparativo [9], foram encontrados na abordagem direta e o mtodo
inverso para alcanar a mesma qualidade de predio de tal modo
que de tal modo que este ltimo recomendado para o
desenvolvimento do processo rpido.
O potencial da modelagem matemtica e otimizao numrica de
cromatografia foi demonstrada em set-ups acadmicas para as
misturas de molculas pequenas [10, 11], protenas modelo [12], e
anticorpos [13, 14], bem como para as etapas do processo industrial
[15, 16]. Todas as aplicaes tm em comum, que as calibraes do
sensor existiam para todos os componentes, permitindo transformar
os valores de absoro de UV em concentraes de massa ou
molares. Este artigo discute os desafios na aplicao de modelagem
mecanicista e otimizao numrica a um conjunto de dados de
cromatografia preparativa industrial sem o conhecimento da
composio da alimentao em termos de concentraes molares.
Experimentos e anlises adicionais so evitados pelo emprego de
uma abordagem de modelagem que estima os coeficientes de
absoro a partir dos dados UV gravados.
O estudo de caso baseia-se em uma permuta catinica
cromatogrfica (CEX) etapa do processo (resina Poros 50 HS). A
mistura de anticorpo alimentada em CEX eludo uma protena A
aps condicionamento e incubao de baixo pH. A mistura contm
diversas variantes deanticorpo, diferindo em tamanho e a carga, que
todos eluir em um pico comum. Frao de recolha e anlise tem de
ser realizada tambm blain obter informaes sobre a localizao das
impurezas. Pode ser distinguida usando cromatografia de excluso, o
alvo monmero e trs impurezas, duas espcies de um baixo peso
molecular (HBPM) e alto peso molecular (HMW). Os parmetros do
modelo encontrado foram usados na otimizao de silico e
eventualmente coincidam com otimizao convencional pela
avaliao do cromatograma.