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Original
Salame tipo italiano elaborado com culturas starters nativas
Fermented italian sausage elaborated with native starter cultures
Andria CIROLINI1*, Leadir Lucy Martins FRIES1, Nelcindo Nascimento TERRA1, Liana Ins Guidolin MILANI1,
Diala URNAU1, Bibiana Alves dos SANTOS1, Giovanna Dotta CERVO1, Ana Paula de Souza REZER1
Resumo
A pesquisa teve como objetivo acrescentar culturas starters nativas em salame tipo Italiano e avaliar o desempenho frente a culturas
comerciais quanto s caractersticas microbiolgicas, fsico-qumicas e sensoriais. As culturas utilizadas foram Staphylococcus xylosus,
isolado de salames coloniais, e Lactococcus lactis ssp. lactis, isolado de um produto lcteo e fermentado em meio de cultura de plasma
suno. Elaboraram-se os seguintes tratamentos: T1 adio de starters comerciais (Staphylococcus xylosus e Lactococcus lactis ssp. lactis);
T2 mistura de Staphylococcusxylosus isolado mais Lactococcus lactis ssp. lactis comercial; T3 mistura de Lactococcus lactis ssp. lactis
isolado mais Staphylococcus xylosus comercial; e T4 Staphylococcus xylosus e Lactococcus lactis ssp. lactis, ambos isolados. Os tratamentos
apresentaram uma queda de pH significativa e tambm uma reduo na Aw, garantindo uma segurana microbiolgica aos produtos. Em
relao oxidao lipdica, os tratamentos que continham Staphylococcus xylosus isolados de salames artesanais apresentaram valores menores
que os outros tratamentos. Os salames elaborados com Staphylococcus xylosus e Lactococcus lactis ssp. lactis, ambos isolados, apresentaram
melhores resultados sensoriais quando comparados com salames elaborados com culturas starters comerciais. Portanto, a adio de culturas
starters nativas pode ser utilizada na elaborao de salames, proporcionando produtos seguros e com flavor diferenciado.
Palavras-chave: culturas starters nativas; salame; Staphylococcus xylosus; Lactococcus lactis ssp. lactis.
Abstract
The objective of this paper was to add native starter cultures in fermented Italian sausages and evaluate the performance compared to
commercial cultures in terms of microbiological and physicochemical parameters and sensorial characteristics. The cultures used were
Staphylococcus xylosus, isolated from colonial sausages, and Lactococcus lactis ssp. lactis isolated from a dairy product and fermented
in pork plasma medium. The following treatments were performed: T1 addition of commercial starters (Staphylococcus xylosus and
Lactococcuslactisssp. lactis); T2 mixture of isolated Staphylococcus xylosus plus commercial Lactococcus lactis ssp. lactis; T3 mixture of
isolated Lactococcus lactis ssp lactis plus commercial Staphylococcus xylosus; and T4 Staphylococcus xylosus and Lactococcus lactis ssp lactis
both isolated. The treatments showed a significant decrease of pH and reduction in the Aw ensuring microbiological safety to the products.
With regard to lipid oxidation, the treatments that contained isolated strains of Staphylococcus xylosus presented significantly lower values
than the other treatments. The sausages elaborated with Staphylococcus xylosus and Lactococcus lactis ssp lactis, both strains isolated, presented
better sensorial results than the sausages elaborated with commercial starter cultures. Therefore, the addition of native starter cultures can
be used in the elaboration of fermented Italian sausages providing safe products with differentiated flavor.
Keywords: native starter cultures; sausages; Staphylococcus xylosus; Lactococcus lactis ssp. lactis.
1 Introduo
A fermentao uma das mais antigas tecnologias utilizadas Duas categorias de microrganismos so comumente
para conservao dos alimentos. No passado, a fermentao utilizadas como culturas starters, ou seja, as bactrias cido
era um resultado espontneo da microflora natural da carne lcticas que promovem a segurana e estabilidade do produto
e do ambiente. Entretanto, a fermentao descontrolada pode e Staphylococccus coagulase negativa responsveis por
produzir produtos inferiores ou mesmo inseguros para o estabilizar a cor, prevenir a rancificao e realar compostos
consumo (ESSID etal., 2007). aromticos dos produtos crneos (DROSINOS et al.,
2005).
Em 1957, ocorreu a introduo comercial de culturas puras
de microrganismos, chamadas culturas starters, aos produtos Terra (2003) destaca que a produo de salame do Brasil
fermentados permitindo uniformidade entre os produtos, depende da importao integral das culturas starters, o que
reduo do tempo de fermentao e uma alta conservao do acarreta um desequilbrio da balana comercial alm de levar
produto (VURAL, 1998). ao esquecimento do sabor genuinamente brasileiro.
Greco et al., (2005) e Moretti et al., (2004) acrescentam soluo de sorbato de potssio (20%) e encaminhadas para
que salames artesanais apresentam melhores caractersticas a cmara climatizada, com temperatura e umidade relativa
sensoriais que salames industriais, devido composio e controlada, onde permaneceram at atingir uma atividade
atividade metablica da microflora indgena. de gua de 0,87. A programao de temperatura e umidade
Portanto, o presente trabalho teve como finalidade relativa (T/UR%) foram as seguintes: primeiro dia, temperatura
acrescentar culturas starters nativas, em salame tipo Italiano 25C/UR 95%; segundo dia, 24 C/93%; terceiro dia, 23C/90%;
e avaliar seu desempenho frente a culturas comerciais, quanto quarto dia, 22 C/85%; quinto dia, 21 C/80%; sexto dia,
a suas caractersticas microbiolgicas, fsico-qumicas e 20 C/75%; e do stimo dia em diante, 18 C/75%. Concluda
sensoriais. a fabricao, retiraram-se as tripas e as peas dos embutidos
fermentados foram embaladas a vcuo e armazenadas
temperatura ambiente.
2 Material e mtodos
2.3 Avaliao microbiolgica
2.1 Culturas iniciadoras
Foram coletadas pores de 25 g de salame, que foram
As cepas usadas neste estudo foram a cultura de
homogeneizadas com 225 mL de gua peptonada (0,1%) em
Staphylococcus xylosus, anteriormente isolada de salames
Bag Mixer, por 2 minutos. Em seguida, foram feitas sucessivas
coloniais da regio central do Estado do Rio Grande do
Sul, multiplicada em gar Baird Parker (CIROLINI et al., diluies decimais.
2007a); a cultura de Lactococcus lactis ssp. lactis, isolada
anteriormente de um produto lcteo fermentada em meio de Contagem de bactrias cido lcticas
cultura de plasma suno (CIROLINI etal., 2007b); e as cepas A contagem de bactrias lticas foi realizada utilizandose
Lactococcuslactisssp.lactis, doada pela Fundao Andr Tosello, o gar de Man, Rogosa e Sharpe MRS. As placas foram
Campinas SP e Floracarn SX (Chr. Hansen), contendo o incubadas temperatura de +37 C por 5 dias. Foram feitas
microrganismo Staphylococcus xylosus. semeaduras em duplicata para cada diluio, sendo a superfcie
das placas recoberta com uma sobrecamada do mesmo meio
2.2 Preparo do salame para gerao de uma atmosfera microaerfila (SIQUEIRA,
As amostras de salame foram elaboradas de acordo com a 1995). As anlises foram realizadas nos dias 0, 3, 7, 14 e 21 aps
seguinte formulao: pernil suno (600 g.kg1), retalho bovino a fabricao do salame.
(200 g.kg1), toicinho congelado (200 g.kg1), cloreto de sdio
(30g.kg1), glicose (5 g.kg1), sacarose (5 g.kg1), mistura comercial Micrococcaceae
de cura, contendo nitrato e nitrito de sdio (3 g.kg1), ascorbato
A contagem de microrganismos da famlia Micrococcaceae
de sdio (2,5 g.kg1), pimenta branca (2 g.kg1), alho (5 g.kg1) e
noz moscada (0,2 g.kg1). A carne suna foi moda em disco de foi determinada pela tcnica em semeadura, utilizando Mannitol
12 mm e a carne bovina em disco de 8 mm. Aps a moagem, as Salt Phenol-red gar (MSA), incubadas a 30 C por 72 horas
carnes sofreram a adio de cloreto de sdio e foram misturadas (STAHNKE, 1995), nos dias 0, 3, 7, 14 e 21 aps a fabricao
em misturadeira durante 3 minutos para a extrao de protenas do salame.
miofibrilares. A seguir, foram adicionados os demais ingredientes,
com exceo do ascorbato de sdio que foi acrescentado por Staphylococcus xylosus
ltimo (TERRA, 2003).
O nmero de clulas viveis da cultura iniciadora das
Aps a mistura, pores iguais de massa foram divididas, amostras foi realizado nos dias 0, 3, 7, 14 e 21 aps a fabricao
originando os seguintes tratamentos: Tratamento 1 (T1), inoculado do salame, utilizando a tcnica de semeadura em superfcie com
com starters comerciais de Staphylococcusxylosus (FloracarnSX, MSA (Mannitol Salt Phenol-red gar) e incubadas a 30 C, por
Chr. Hansen) e Lactococcuslactisssp.lactis (Fund. Andr Tosello); 72 horas (STAHNKE, 1995).
Tratamento 2 (T2), mistura de Staphylococcus xylosus isolado
(CIROLINI et al., 2007a) mais Lactococcus lactis ssp. lactis
comercial (Fund. Andr Tosello); Tratamento 3 (T3), mistura Coliformes totais e fecais
de Lactococcus lactis ssp. lactis isolado (CIROLINI et al., Para a determinao de coliformes totais foi utilizada a
2007b) mais Staphylococcus xylosus comercial (Floracarn SX, tcnica do plaqueamento por incorporao do meio de cultura
Chr. Hansen); e Tratamento 4 (T4), inoculado com starters gar cristal violeta vermelho neutro bile com incubao a 37C,
isolados de Staphylococcus xylosus (CIROLINI et al., 2007a) e por 24 horas. A partir das placas com desenvolvimento de
Lactococcus lactis ssp. lactis (CIROLINI etal., 2007b). A matria- coliformes totais foram determinados os coliformes fecais em
prima apresentou uma contagem de bactrias aerbias mesfilas de
caldo EC (BRASIL, 2003). As anlises foram realizadas apenas
1,3 104 UFC.g1, sendo a quantidade de cultura starter adicionada
nos dias 0, 7, 14 e 21 aps a fabricao do salame.
de 106 UFC.g1.
A massa crnea dos tratamentos foi embutida em tripas Salmonella sp.
artificiais de colgeno, com 60 mm de dimetro e cortada em
peas de aproximadamente 15 cm de comprimento. Aps o Nos dias 0 e 21 foi realizado um pr-enriquecimento em
embutimento, as amostras foram submetidas a um banho em gua peptonada tamponada a 37 C por 24 horas a partir de 25g
da mostra. Aps esta etapa, foi feito um enriquecimento seletivo em expressos como L* (brilho), a* (ndice vermelho) e b* (ndice
caldo Tetrationato Verde Brilhante e Rappaport Vassiliadis e foram amarelo). As determinaes foram realizadas nos dias 0, 3, 7,
levados estufa por 24 horas, a 42,5 C. A partir destes, semeou-se 14 e 21 aps a fabricao dos salames.
uma alquota em placas com gar SS (Salmonella Shiguella) e gar
Rambach, e foram incubados a 37 C, por 24horas. As colnias 2.5 Anlise sensorial
tpicas de cada placa foram semeadas em tubos de gar estoque;
caldo ureia; gar lisina ferro (LIA); gar citrato de simmons; SIM, A anlise sensorial foi determinada com 21 dias de
para motilidade do indol; gar trplice acar ferro (TSI), para maturao do salame. Foram avaliadas as caractersticas
confirmao bioqumica (BRASIL, 2003). sensoriais de cor, aroma, sabor e textura atravs do teste de
comparao mltipla conforme descrito por Dutcosky (1996).
Staphylococcus coagulase positiva Para a avaliao das amostras, foram utilizados 20provadores,
no treinados, mas consumidores de salame.
A anlise de Staphylococcus coagulase positiva foi
determinada de acordo com BRASIL (2003), nos dias 0 e 21aps
a fabricao do salame, utilizando-se gar Baird-Parker a 37C, 2.6 Anlise estatstica
por 48 horas. Em seguida, foi realizado teste bioqumico da Os dados referentes s anlises microbiolgicas,
coagulase com plasma de coelho. fsicoqumicas e sensoriais foram submetidos Anlise de
Varincia (ANOVA) ao nvel de 5% de significncia, utilizandose
2.4 Anlises fsico-qumicas o Teste de Tukey para anlises microbiolgicas e fsico-qumicas
e o Teste Dunett para anlise sensorial (COSTANETO, 1977)
Determinao do pH atravs do pacote estatstico SPSS 8.0.
Tabela 1. Anlises microbiolgicas (Log UFC.mL1) durante o perodo de fabricao dos salames formulados com diferentes culturas starters.
Dias Trat* Bactrias cido Micrococcaceae Staph. xylosus Colif. totais** Colif. fecais**
lcticas
0 T1 (controle) 6,97a 6,20b 5,31b 3,73a <1,00
T2 7,02a 7,24a 6,22a 3,75a <1,00
T3 6,30b 6,19b 5,26b 3,91a <1,00
T4 6,52b 7,34a 6,43a 3,77a <1,00
3 T1 (controle) 7,64a 4,83c 3,92c - -
T2 7,55a 6,88a 5,96a - -
T3 7,83a 6,27b 4,82b - -
T4 7,70a 7,06a 6,01a - -
7 T1 (controle) 7,71a 5,66d 4,63c 1,36 <1,00
T2 7,78a 6,11c 5,09c <1,00 <1,00
T3 7,58a 6,59b 5,68b 1,32 <1,00
T4 7,76a 7,89a 7,04a 1,58 <1,00
14 T1 (controle) 8,05a 4,64c 3,55c <1,00 <1,00
T2 7,80ab 7,54a 6,78a <1,00 <1,00
T3 7,44b 5,61b 4,60b 1,3 <1,00
T4 7,59b 7,50a 6,42a <1,00 <1,00
21 T1 (controle) 7,66ab 4,88c 4,09b <1,00 <1,00
T2 7,90a 6,75b 6,00a <1,00 <1,00
T3 7,66ab 7,16a 6,24a <1,00 <1,00
T4 6,65b 7,25a 6,40a <1,00 <1,00
Mdias acompanhadas pela mesma letra, na mesma coluna, no mesmo dia, no apresentam diferena significativa (p 0,05) pelo teste de Tukey. *T1: inoculado com starters comerciais
de Staphylococcus xylosus (Floracarn SX, Chr. Hansen) e Lactococcus lactis ssp. lactis (Fund. Andr Tosello); T2: mistura de Staphylococcus xylosus isolado (CIROLINI et al., 2007a)
mais Lactococcus lactis ssp. lactis comercial (Fund. Andr Tosello); T3: mistura de Lactococcus lactis ssp. lactis isolado (CIROLINI et al., 2007b) mais Staphylococcus xylosus comercial
(Floracarn SX, Chr. Hansen) e T4: inoculado com starters isolados de Staphylococcus xylosus (CIROLINI et al., 2007a) e Lactococcus lactis ssp. lactis (CIROLINI et al., 2007b). **Anlise
de coliformes totais e fecais no foi realizada no 3 dia de fermentao.
T1, T2 e T4, que permanece at o final da maturao, sendo No terceiro dia de fermentao, todos os tratamentos
mais destacado no tratamento T1 (controle) com valor final apresentaram uma queda na contagem. Stahnke (1995) cita
de 4,88 Log UFC.mL1, diferindo estatisticamente dos outros que a sobrevivncia de Staphylococcus xylosus reduzida pela
tratamentos. Provavelmente este decrscimo na contagem de sensibilidade ao cido produzido pelas bactrias cido lcticas
Micrococaceae deve-se ao baixamento do pH durante o processo durante a alta temperatura de fermentao.
de maturao dos salames.
Essa queda permaneceu at o 21 dia de maturao nos
Estes resultados esto de acordo com Casaburi etal., (2007), tratamentos T1, T2 e T4, com destaque para o T1 (controle)
que realizaram um trabalho semelhante com o isolamento de que apresentou uma diferena significativa em relao aos
cepas de Staphylococcus xylosus de salames do sul da Itlia, que outros tratamentos (4,09 Log UFC.mL1). J no tratamento T3,
foram adicionados em salames e observaram que a contagem observou-se que houve um aumento de um ciclo logaritmo.
inicial de Micrococcaceae foi de 6 a 7 Log UFC.mL1, sendo Fontn etal. (2007) obtiveram contagem de Staphylococcus de
que, aps 5 dias de fermentao, houve um decrscimo para 2,36 a 4,74 Log UFC.mL1 em salames coletados com 20-30dias
5 Log UFC.mL1, afetado pela acidificao. Tambm Lizaso, de maturao.
Chasco e Beriain (1999) e Samelis etal. (1998) consideram que
Os valores iniciais de coliformes totais (Tabela 1) foram
a acidificao a causa principal da inibio do crescimento de
baixos, demonstrando uma boa qualidade higinico-sanitria
Micrococcaceae na maturao de salames.
da matria-prima. Os coliformes totais foram progressivamente
J no tratamento T3, observa-se que houve um aumento de eliminados em todos os tratamentos durante a fabricao. Estes
um ciclo logaritmo aos 21 dias de maturao. Trabalho realizado resultados ressaltam a rpida ao inibidora das culturas starters
por Cocolin etal. (2001) tambm demonstrou um constante frente aos microrganismos indesejveis. Tambm podemos
crescimento da famlia Micrococacceae durante a maturao observar que, durante todo o perodo de fabricao, no foi
de salames tipo Italiano. detectada, em nenhum tratamento, a presena de coliformes
fecais.
Em relao contagem de Staphylococcus xylosus (Tabela 1),
verifica-se que, no incio da fermentao, os tratamentos T2 e Em relao contagem de Staphylococcus coagulase positiva
T4 inoculados com Staphylococcus xylosus nativos apresentaram e Salmonella realizada no incio e no final da fabricao do
uma contagem de 6,0 Log UFC.mL1, significativamente maior salame, esses microrganismos no foram encontrados em
que os tratamentos T1 e T3 (5,0 Log UFC.mL1). nenhum tratamento (dados no apresentados).
mudanas nos valores de TBARS foram acompanhadas durante Campbell-Platt e Cook (1995) destacam que menos de
todo o perodo de fabricao do salame (Figura 5). 50 mg.kg1 de nitrito so suficientes para a obteno da cor
No incio da fabricao, os valores de TBARS dos caracterstica de cura para embutidos fermentados. Essa
tratamentos no apresentaram diferena estatstica. Entretanto, quantidade deve ser atingida antes da queda de pH, provocada
no 7 dia de fermentao, o tratamento T1 apresentou um pelo crescimento de bactrias lcticas, uma vez que a enzima
grande aumento no valor de TBARS, diferindo estatisticamente nitrato redutase bacteriana tem atividade insignificante em
dos outros tratamentos at o final da fabricao. O tratamento valores de pH menores que 5,4.
T3 tambm teve uma elevao no valor de TBARS no 14 dia Os valores da determinao da cor dos salames durante a
de fabricao, mantendo essa diferena estatstica at o final fabricao encontram-se na Tabela 2. Os valores de L* (brilho)
da maturao. diminuram em todos os tratamentos ao longo dos 21 dias
J os tratamentos T2 e T4, que contm cepas de de fabricao. No incio da fermentao, o tratamento T1
Staphylococcus xylosus isoladas, apresentaram valores de TBARS (controle) apresentou uma diferena significativa em relao aos
estatisticamente menores que os outros tratamentos a partir do tratamentos T2 e T4. No final da maturao, os tratamentos no
14 dia. Barrire etal. (2001) destacam que os Staphylococcus apresentaram diferena significativa. De acordo com Bozkurt
apresentam atividade catalase importante na decomposio e Bayram (2006), este decrscimo representa a formao
do perxido de hidrognio e para prevenir a oxidao lipdica. da cor escura em decorrncia de reaes de escurecimento.
Como cita Hammes (1990), os microrganismos isolados de Semelhantemente, Kayaardi e Gk (2003) verificaram que
produtos tradicionais so mais promissores para o uso como os valores de L* de salames geralmente decrescem durante o
culturas starters, pois se adaptam melhor ao ambiente da carne perodo de maturao. Casaburi etal. (2007) analisaram a cor
e so capazes de dominar a microflora dos produtos. de salames elaborados com cepas de Staphylococcus xylosus
Os valores de nitrito esto expostos na Figura 4. Podese artesanais do sul da Itlia e os valores de L* tambm decresceram
observar que os valores iniciais de nitrito estavam entre durante os 38 dias de anlise.
99,34 e 133,65 ppm, sendo que, no 7 dia de fermentao,
Os valores de a* (ndice de vermelho) aumentaram durante
houve uma grande reduo em seus valores. No 21 dia de
fabricao, observa-se que no houve diferena estatstica entre todo o perodo de fabricao. No incio da fermentao, o
os tratamentos, ficando em torno de 3,28 e 6,09 ppm. tratamento T3 apresentou o maior valor (17,42), diferindo
estatisticamente dos outros tratamentos. No final da maturao,
Estes valores esto de acordo com a Portaria n 1004 de o tratamento T2 e T3 no apresentaram diferena estatstica
11/12/98 do Ministrio da Sade, que permite nvel mximo
residual de nitrito de 0,015 g.100 g -1, ou seja, 150 ppm
(BRASIL,1998).
Figura 3. Evoluo da perda de peso dos salames formulados Figura 4. Valores mdios de TBARS dos salames formulados
com diferentes culturas starters. T1: inoculado com starters com diferentes culturas starters. T1: inoculado com starters
comerciais de Staphylococcus xylosus (Floracarn SX, Chr. Hansen) comerciais de Staphylococcus xylosus (Floracarn SX, Chr. Hansen)
e Lactococcus lactis ssp. lactis (Fund. Andr Tosello); T2: mistura e Lactococcus lactis ssp. lactis (Fund. Andr Tosello); T2: mistura
de Staphylococcus xylosus isolado (CIROLINI et al., 2007a) mais de Staphylococcus xylosus isolado (CIROLINI et al., 2007a) mais
Lactococcus lactis ssp. lactis comercial (Fund. Andr Tosello); Lactococcus lactis ssp. lactis comercial (Fund. Andr Tosello);
T3:mistura de Lactococcus lactis ssp. lactis isolado (CIROLINI etal., T3:mistura de Lactococcuslactisssp.lactis isolado (CIROLINI etal.,
2007b) mais Staphylococcus xylosus comercial (Floracarn SX, Chr. 2007b) mais Staphylococcus xylosus comercial (Floracarn SX, Chr.
Hansen) e T4:inoculado com starters isolados de Staphylococcus xylosus Hansen) e T4: inoculado com starters isolados de Staphylococcus
(CIROLINI etal, 2007a) e Lactococcus lactis ssp. lactis (CIROLINIetal., xylosus (CIROLINI et al., 2007a) e Lactococcus lactis ssp. lactis
2007b). (CIROLINIetal., 2007b).
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