BIOTECNOLOGIA

PROCESSOS FERMENTATIVOS

Processo Fermentativo:

Derivada da palavra FERMENTARE, inicialmente introduzido para processos que envolvia a ao microbiana em
material aucarado com formao de etanol e gs carbnico
Louis Pasteur
Com o passar do tempo, novos processos com ao microbiana foram sendo descobertos e essa denominao
empregada para outras vias bioqumicas
Transformao realizada por uma clula = obteno de um BIOPRODUTO
Fermentao industrial: explorao econmica da potencialidade dos microrganismos adaptveis a vrias condies
ambientais, capazes de produzir um n elevado de diferentes produtos
Biotecnologia x bioprocessos: produo de bens e servios
O desenvolvimento biotecnolgico tem proporcionado a produo de compostos de interesse industrial pela ao microbiana:
Biomassa microbiana (Single Cell Protein e cogumelos cosmetveis).
Inoculantes agrcolas.
Enzimas (importncia industrial e laboratrio de anlises clnicas caractersticas inerentes):
Proteases;
Amilases;
Pectinases;
Hemicelulases e celulases: indstrias de vinho e lcool de segunda gerao.
Glicose oxidase: determinao de concentrao de glicose no plasma sanguneo.
Metablitos (aminocidos, vitaminas, pigmentos, antibiticos, cidos orgnicos).
Vacinas (cultivo do microrganismo, toxina produzida pelo microrganismo e/ou microrganismo morto, ou vacinas de DNA).
Energia (etanol Saccharomyces cerevisae; metano decomposio anaerbica de materiais orgnicos por ao microbiana).
Processo Fermentativo compreende:

Fase de multiplicao de um dado microrganismo;

Fase em que ocorre a transformao de certas substncias em outras;
Pontos Fundamentais:
o Fontes de microrganismos de interesse
Isolamento de recursos naturais;
Compra em colees de culturas;
Obteno de mutantes naturais;
Obteno de mutantes induzidos por mtodos convencionais;
Obteno de microrganismos recombinantes por tcnicas de engenharia gentica.
o Caractersticas desejveis de microrganismos para a aplicao industrial
Elevada eficincia na converso de substrato em produto;
Permitir a rpida liberao e acmulo de produto no meio;
No produzir substncias incompatveis com o produto;
Comportamento fisiolgico constante;
No ser patognico;
No exigir condies de processo muito complexas;
No exigir meios de cultura dispendiosos
o Caractersticas desejveis dos meios de cultivo
Ser o mais barato possvel;
Atender s necessidades nutricionais do microrganismo;
Auxiliar no controle do processo;
No provocar problemas na recuperao do produto;
Ter composio razoavelmente fixa;
No causar dificuldades no tratamento final do efluente.
o Esterilizao e desinfeco
 Processo fsico ou qumico que destri ou inativa todas as formas de vida presentes em um
determinado material, especialmente microrganismos incluindo bactrias, fungos (tanto em suas
formas vegetativas ou esporuladas) e vrus.
Mtodos fsicos: calor mido; calor seco; radiao ultravioleta (220-230nm); radiao gama
Mtodos qumicos: germicidas qumicos, agentes gasosos
o Separao do produto e tratamento de resduos.

Produo de Etanol:

Obtm-se etanol por 3 maneiras: via destilatria, sinttica ou fermentativa.

No brasil, a via fermentativa a mais importante.

As bebidas fermento-destiladas possuem caractersticas prprias de aroma e sabor, conferidas por impurezas decorrentes do
processo fermentativo.

Tratamento da matria-prima para extrao dos

Preparo do Substrato
acares fermentescveis
Via Fermentativa

Processo comum aos substratos aucarados, cujo

Fermentao princpios a transformao dos acares em etanol e
CO2

Separa-se o etanol em duas operaes: 1. separa o

Destilao substrato fermentado e a 2. separa as impurezas do
etanol

Dornas Fermentativas:

So tanques construdos geralmente em ao carbono com capacidade varivel de acordo com a capacidade do processo.
Podem ser fechadas ou abertas:

Abertas: apresentam perda acentuada pois, com a eliminao do CO2 da fermentao, haver um arraste de lcool.

Tipos de Fermentao:

Fermentao descontnua:
o Em um determinado momento o processo interrompido para a retirada do produto.
Fermentao descontnua alimentada:
o No qual uma corrente de alimentao adicionada ao biorreator, sem que efluente e clulas sejam
removidos do sistema. Em um determinado momento o processo interrompido e todo produto recuperado.
Esta operao recomendada para minimizar/evitar os clssicos fenmenos de inibio por substrato ou
produto.
Fermentao contnua:
o Durante todo o tempo deste modo de operao ocorre entrada de uma corrente de alimentao e sada de
produto.

Fatores que Influenciam o Processo Fermentativo:

1. Temperatura da Fermentao:
Leveduras mesfilas temp tima 26-35oC (mx 38oC) = melhor rendimento
2. Espumas
3. Floculao:
As clulas se agrupam formando conglomerados de peso muitas vezes superior ao da clula individualizada.
Cessada a fase principal (tumultuosa) da fermentao, ou quando a agitao mecnica no fermento
interrompida.
Esses flocos sedimentam-se rapidamente.
Formao de flocos compromete a converso de acar em etanol e CO2 pela reduo da superfcie de
contato direto entre as clulas e o meio.
As operaes de recuperao de fermento ficam prejudicadas pela presena das estruturas (flocos),
comprometendo seriamente o desempenho industrial.
 Bactrias como Sporolactobacillus e Lactobacillus foram descritas como os AGENTES CAUSADORES DA
FLOCULAO.
Causas:
o Contato com gomas sintetizadas pelas bactrias;
o Contato entre bactrias indutoras da floculao e leveduras;
o Contaminao por leveduras floculantes.
o Obs: necessria a presena de ons clcio e movimentao entre as clulas para acelerao do
processo de floculao.
4. Leveduras Selvagens:
So leveduras que invadem o processo fermentativo, competindo com a levedura usada do processo e
passam a predominar na populao de clulas presentes;
Provocam redues da eficincia industrial;
Queda no rendimento fermentativo;
Aumento no tempo de fermentao;
Maior formao de espuma;
Principais gneros encontrados na cana de acar: Saccharomyces, Torula e Pichia.
MUITO IMPORTANTE: Leveduras Saccharomyces cerevisae que apresentam pseudohifas (brotos que no se
separam a clula me) so frequentes na fermentao e podem causar problemas no processo (inclusive
perdas no rendimento).
OBS: Dekkera bruxellensis Principal levedura contaminante de plantas de produo de etanol no Nordeste
(Responsvel pela diminuio na produo do etanol)

Produtos Biotecnolgicos Engenharia de Bioprocessos:

Enzimas
Gomas
Antibiticos
Hormnios
Vacinas
cidos orgnicos
Aminocidos
Vitaminas

cidos Orgnicos:

Diversos cidos orgnicos podem ser obtidos via fermentativa: actico, butrico, ctrico, fumrico, glicnico, itacnico, kjico,
ltico, mlico, propinico, succnico, tartrico, entre outros.
cidos caracterizados pela presena da carboxila (COOH).
Apresentam propriedades organolpticas importantes, tanto que o sabor azedo foi o primeiro critrio para classificao destes.
cido actico: o principal ingrediente do vinagre. Seu nome deriva do Latim acetum, que significa azedo. Conhecido
e usado h tempos pela humanidade, usado como condimento e conservante de alimentos.
A oxidao aerbica, por bactrias do gnero Acetobacter, do lcool a cido actico diludo (8%) um processo antigo,
que produz o vinagre, uma soluo de cido actico aromatizada, obtida pela fermentao do vinho, da cidra, do
malte ou do lcool diludo.
cido actico glacial (~99,5%) - assim chamado porque em dias frios se solidifica com aspecto de gelo.
Estima-se que cerca de 1,9 milhes de litros de vinagre contendo cerca de 10 % de cido actico (aproximadamente
190.000 toneladas de cido actico) sejam produzidas anualmente atravs de processos fermentativos.
cido acetilsaliclico: conhecido como aspirina e empregado como antipirtico e analgsico, produzido
concomitantemente com o cido actico, pela reao de esterificao do cido saliclico (2-hidrxibenzico) com o
anidrido actico.
Nome cido saliclico deriva do Latim e designa a rvore do salgueiro, salix. Os mdicos da Grcia Antiga conheciam
as propriedades antipirticas e redutoras da febre, da casca desta rvore.
Em 1829, o qumico francs Henri Leroux isolou da casca do salgueiro, o composto ativo na forma pura, a SALICINA,
que uma molcula estruturalmente semelhante aspirina.
cido ascrbico: conhecido como vitamina C, tem seu nome qumico representando duas de suas propriedades: uma
qumica e outra biolgica.
 Em relao primeira, um cido, embora este no pertena claramente classe dos cidos carboxlicos.
Adicionalmente, a palavra ascrbico representa seu valor biolgico na proteo contra a doena escorbuto.
Composio de cosmticos = ajuda a prevenir o envelhecimento precoce e tratar alguns tipos de manchas.
cido oxlico: um cido dicarboxlico txico e presente em plantas, como a carambola.
um bom removedor de manchas e ferrugem, sendo usado em vrias preparaes comerciais de limpeza.
Alm disso, a grande maioria dos clculos renais so constitudos pelo oxalato de clcio monohidratado, um sal de
baixa solubilidade derivado deste cido.

Hormnios e Fatores de Crescimento:

Hormnios: como a insulina (utilizada para o diabetes), o hormnio do crescimento e as gonadotrofinas.
Fatores de crescimento hematopoiticos como a eritropoietina, que so fatores relacionados com a produo de glbulos
vermelhos utilizados no tratamento das anemias causadas por falha renal crnica ou pela quimioterapia contra o cncer.
Fatores sanguneos como o Fator VIII e IX: utilizados como fator de coagulao para a hemofilia tipos A e B.
Peptdeos Antimicrobianos:
Mais de 700 peptdeos antimicrobianos j foram identificados em todas as espcies vivas, incluindo bactrias, fungos, insetos,
moluscos, crustceos, aracndeos, plantas, pssaros, anfbios, peixes, mamferos, entre outros.
Em geral, so molculas pequenas de at 5 kDa que exibem um alto teor de aminocidos bsicos e, pelo menos, 50% de
aminocidos hidrofbicos.
Mecanismos de ao: insero na membrana celular - causa a destruio ou a permeabilizao da mesma, levando o
microrganismo morte.
Aranha caranguejeira Acanthoscurria gomesiana: 4 peptdeos isolados da hemolinfa
Gomesina: Amplo espectro de atividade contra bactrias (14 Gram +, 10 Gram-), fungos (9 fungos filamentosos e 5
leveduras) e contra o parasita causador da leishmaniose.
Staphylococcus aureus (meningite), a Staphilococcus saprophiticus (infeces no trato urinrio), a Streptococcus
pyogenes (febre reumtica) e a Pseudomonas aeruginosa (imunocomprometidos).
Causa desestabilizao das membranas.
Carrapato de boi Boophilus microplus: fragmento da cadeia da hemoglobina bovina isolado no intestino do
carrapato.
 Age em concentraes micromolares contra bactrias Gram + e contra fungos.
Aminocidos:
Largo espectro de uso comercial aditivos ou suplementos alimentares;
Alimentao humana ou rao animal;
Medicina e cosmticos.
O organismo humano incapaz de sintetizar metade dos 20 aminocidos essenciais, e esses aminocidos devem, portanto, ser
introduzidos na dieta por meio da alimentao. Obtidos via fermentativa:
Glutamato
Lisina
Fenilalanina
Aspartato
Treonina
Isoleucina
Vitaminas:
Substncias orgnicas complexas de diferente classificao qumica encontradas em alimentos, geralmente em quantidades
pequenas e indispensveis para o metabolismo animal ou vegetal.
Atualmente tambm podem ser obtidas via fermentao.
Riboflavina (B2), cianocobalamina (vitamina B12), cido ascrbico (vitamina C) e biotina.
Antibiticos:
Mais conhecido Penicillium (penicilina) Alexander Fleming 2 Guerra Mundial.
Do grande n de antibiticos conhecidos de origem microbiana, somente 123 so produzidos atualmente por fermentao.
Grupos microbianos que produzem antibiticos: bactrias, actinomicetos e fungos.
Agentes teraputicos nas infeces causadas por microrganismos sensveis a eles.
Antitumorais - citostticos.
Preservantes de alimentos: pimaricina (fungicida aplicado superfcie dos alimentos); tilosina (eficaz contra os esporos de
Bacillus) e nisina (eficaz contra clostrdeos), sendo estes muito usados em conservas; clorotetraciclina, utilizada para manter o
pescado, a carne e as aves por congelamento.
Estimuladores do crescimento animal e na medicina veterinria: uso nas raes.
Biologia Molecular: inibidores seletivos.
Importncia econmica:
- 2013: produo mundial estimada em 100 mil toneladas.
- Vendas brutas anuais: s nos EUA, US$ 1 bilho (cefalosporina em primeiro lugar, seguida da ampicilina e da
tetraciclina).
- Como aditivos alimentares, acredita-se que estes tenham um mercado mundial de US$ 100 milhes.
Vacinas:
Classificadas em geraes:
1 GERAO: produzidas com microrganismos vivos atenuados e/ou mortos inativados.
2 GERAO: emprega antgenos purificados que podem ser provenientes de fontes naturais, sintticas ou pela tecnologia do
DNA recombinante.
3 GERAO: vacinas gnicas.