Cintica dos

Processos
Fermentativos
Cintica dos Processos Fermentativos
O estudo de um processo fermentativo
consiste inicialmente na anlise da evoluo
dos valores de concentrao de um ou mais
componentes do sistema de cultivo em funo
do tempo de fermentao;
Microrganismo ou biomassa (X);
Produtos do metabolismo (P);
Nutrientes ou substratos (S)
Cintica dos Processos Fermentativos
Os valores experimentais de concentrao
(X, P e S), quando representados em funo
do tempo, permitiro traar as curvas de
ajuste e assim poder determinar suas
concentraes instantneas:
X=X(t);
P=P(t);
S=S(t).
Cintica dos Processos Fermentativos

Curvas de crescimento de biomassa, de consumo de

substrato e de formao produto
Cintica dos Processos Fermentativos

Fases de crescimento de biomassa

Cintica dos Processos Fermentativos

Fases de crescimento de biomassa

Cintica dos Processos Fermentativos
Dentre os produtos formados escolhe-se para
o estudo cintico o produto de intersse
econmico e o substrato limitante;
Cintica dos Processos Fermentativos
Quando determinados somente os valores
finais e iniciais destes parmetros, no se
pode dizer que houve um estudo cintico;

Para um estudo cintico de fato , necessrio

determinar os valores intermedirios, para
definir os perfis das curvas e o modelo
matemtico do processo.
COMO MEDIR A BIOMASSA?

CMARA DE NEUBAUER

Ao microscpio aumento de 400X

COMO MEDIR A BIOMASSA?
COMO MEDIR A BIOMASSA?
Matria seca;
Medidas ticas.

Separao de clulas por filtrao

 COMO MEDIR A BIOMASSA?

Fonte Filtro Amostra Detector Leitura dos

de luz contendo sensvel resultados
clulas luz em absorbncia
microbianas ou transmitncia
no
espectrofotmetro

DETERMINAO DE CRESCIMENTO MICROBIANO POR

TURBIDIMETRIA
COMO MEDIR A BIOMASSA?

CURVA-PADRO PARA O CLCULO DE CRESCIMENTO

MICROBIANO POR TURBIDIMETRIA
 COMO MEDIR A BIOMASSA?

Colorao com azul de metileno para evidenciar clulas viveis de leveduras

clulas azuis esto mortas;
clulas sem colorao so clulas vivas
 DIFICULDADES
O microrganismo promove tranformaes dos componentes
do meio em produtos, graas a milhares de enzimas;

As snteses so controladas pelo meio externo, portanto

identificar que medidas so realmente representativas do
processo de transformao muito dificil, mesmo em
sistemas em que o sistema bastante homogneo;

Muito mais complicado quando o sistema for constitudo

por cultura mista, meios com slidos em suspenso, como por
exemplo em tratamentos de efluentes; (DQO e DBO);

Sistemas de fermentao onde as clulas so filamentosas,

clulas imobilizadas, clulas em meio semi-slido;

Substratos parcialmente insolveis, como hidrocarbonetos

lquidos ou slidos, polmeros, minrios, etc.
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
Velocidades instantneas de transformao:
Podem ser calculadas em qualquer tempo pela
inclinao das tangentes das respectivas curvas

dX
rx = (1)

dt
dS
rs = (2)
dt

dP
rp = (3)

dt
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
Uma velocidade especial e de interesse prtico
a Produtividade de Biomassa:
Xm X0
PX = (4)
tt

O mesmo pode ser aplicado para o Produto:

Pm P0
PP = (5)
ttP
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
Velocidades especficas transformao proposta
por Gaden:

1 dX
x= (6)

X dt
1 dS
S = (7)

X dt
1 dP
P= (8)

X dt
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
Fatores de Converso

X X0
YX / S = (9)
S0 S

X X0
YX / P = (10)
P P0

P P0
YP / S =
S0 S (11)
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
Fatores de Converso: se tais valores permanecem
constantes durante o cultivo, no final da fermentao,
onde X= Xm, P=Pm e S=0, tem-se:
Xm X0 (12)
YX / S =
S0

Xm X0
YX / P = (13)
Pm P0

Pm P0
YP / S =
S0 (14)
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
Eliminando Xo, pela Combinao das equaes 9 e 12, vem:
X X0 (9)
YX / S =
S0 S Xm X0
YX / S = (12)
S0

Tem-se: Xm X
YX / S = (15)

S
A equao 15, pode ser mais confivel, porque, X0 apresentam,
erro experimentais mais elevados do que Xm.
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
O fator de converso

YX / S
Foi originalmente definido por Monod, e tem sido til nas anlises
de alguns processos, como protenas unicelulares a partir
carboidratos ou hidrocarbonetos.
Conhecido o fator de converso, pode-se determinar X ou S,
quando conhecido um deles.
Muito til para a determinao do substrato limitante
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
O fator de converso
Xm X0
YX / S = (12)
S0

O substrato limitante que definir a concentrao mxima de Xm,

Ento a equao 12, poder ser escrita como:

X m = YX / S S 0 + X 0 (16)

Em condies especiais, em meio homognio, sem alterao de pH, e concentrao de

S no muito elevada, pode-se verificar a constncia de YX/S com o a equao 15
X m X
YX /S =
S
Tranformada em X = X m YX / S S
 PARMETROS DA TRANSFORMAO

X = X m YX / S S (17)

Representao dos valores experimentais de X em funo de S

PARMETROS DA TRANSFORMAO
Porm, se Y X / S ; Y X / P ;YP / S no forem constantes,

devero ser levados em conta os valores instantneos:

dX
YX / S = (18)
dS

dX
YX / P = (19)
dP
dP
YP / S = (20)
dS
PARMETROS DA TRANSFORMAO
Das equaes:

X X0
YX / S = (9)
S0 S
X X0
YX / P = (10)
P P0

P P0
YP / S = (11)
S0 S

X X 0 P P0 X X 0
* = = Y X / P * YP / S = Y X / S
P P0 S S 0 S S 0

OU SEJA: Y X / S = Y X / P .YP / S
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
Em fermentaes industriais, dificilmente so observados valores constantes destes
fatores de converso;
Embora estes fatores dependam do microorganismo e da relao com o substrato,
outros fatores interferem , como tempo de mistura, tranferncia de oxignio, e
outros;
Alm disso, os microrganismos utilizam energia de oxidao do substrato tambm
para sua manuteno:
Parte do substrato (So-S) no implica em aumento populacional (X-X0);
Mas esta frao do substrato, vai para manuteno das atividades vitais do
microorganismo;
Esse conceito introduzido por Pirt, atravs do consumo especfico para a
manuteno (m):

(rS )m , onde (rs)m= Velocidade de consumo de

(25)
m= substrato para manuteno
X
 PARMETROS DA TRANSFORMAO
Ento, a velocidade de consumo de substrato :

rS = (rS ) C + (rS ) m (26)

(rs ) m = mX
rS = (rS ) C + m. X (27)

rX YX/S:
Y X / S =
Um novo fator de converso para

(28)
(rS ) C Fator de Converso Verdadeiro
PARMETROS DA TRANSFORMAO
Sua introduo na equao 27, vem:

rX
rS = + m. X (29)
Y X / S

(30)
X
= + m
Y X / S
S

Se, m=0, ento

Y X / S = Y X / S
PARMETROS DA TRANSFORMAO
Uma generalizao mais ampla pode ser introduzida, ou seja o consumo
de substrato para gerao de produto:

rS = (rs ) CP + (rs ) P + (rs ) mP (31)

(32)
rp
Y p / s =
(rs ) p

Aplica-se ento um novo coeficiente especfico para a manuteno

(rs )mP
mp = (33)

X
PARMETROS DA TRANSFORMAO
Tambm surge um novo fator de converso para o crescimento:

rx (34)
Yx / s =
( rs ) CP

(35)
rx rp
rs = + + mP * X
Y x / s Y P / S

As velocidades especficas ento ficam:

x p
S = + + mP (36)
Y x / s Y P / S
 CALCULO DAS VELOCIDADES
1. TRAAR AS CURVAS

Componentes do sistema de cultivo

[biomassa] = X;
[produdo] = P;
[substrato] = S em funo do tempo de fermentao
200 60 1,08

3 1,07

Densidade do mosto (g/mL)

160 1,06

40
Extrato aparente (g/L)

1,05

Clulas (g/L)
120 2

Etanol (g/L)
1,04

1,03
80 20
1
1,02

40 1,01

0 0 1,00
0 20 40 60 80 100
0
0 20 40 60 80 100 Tempo (h)

Tempo (h)

Figura 1 - Consumo de Extrato Aparente - S Figura 2 - Clulas Totais em Suspenso - X

() e Produo de Etanol - P (), pela
Levedura S. cerevisiae 308 tipo lager, durante
a fermentao do mosto com adjunto de
banana a 17,50 0P e 15 0C, no ponto otimizado
da adio de nutriente (Carvalho, 2009).
(), da levedura S. cerevisiae 308 tipo lager,
e Densidade do mosto com adjunto de banana
() durante a fermentao a 17,50 0P e 15
0
C, no ponto otimizado da adio de nutriente
(Carvalho, 2009).
2. AJUSTE DAS CURVAS PARA DETERMINAO DAS
VELOCIDADES INSTANTNEAS
(dx/dt); (-ds/dt) e (dp/dt)

Le Duy & Zajic propem um mtodo de ajuste

 3. Parmetros que Podem ser Determinados
Yx/s: Fator de Converso de Substrato em Clulas (ex: gx/gs).

Yp/s: Fator de Converso de Substrato em Produto (ex: gp/gs).

Yx/p: Fator de Converso de Produto em Clulas (ex: gx/gp).

Yx/s: F. C. Verdadeiro de Substrato em Clulas (ex: gx/gs).

rx; rs e rp: Velocidades Instantneas de Consumo de Substrato; Crescimento Celular e

Formao de Produto (ex: g/L.h).

x; s; p: Velocidades Especficas de Crescimento Celular (ex: h-1); Consumo de

Substrato (ex: gs/gx.h) e Formao de Produto (ex: gp/gx.h).

Qp: Produtividade Volumtrica do Produto (ex: g/L.h).

m: Consumo Especfico para a Manuteno (ex: h-1).

Tg: Tempo de Gerao do Microrganismo (ex: h).

X: Concentrao de Microrganismo (g/L)

 dX
= max *X
dt

X
n = max (t t i )
Xi

1. Fase Lag: Perodo de adaptao do mo.

(X=Xo);
2. Fase de Transio: inicio da reproduo
celular;
3. Fase Exponencial ou Logartmica: (x=mx)
velocidade especfica constante e mxima:

X = X i * exp[ max (t t i )]
Juntamente com a velocidade especfica mxima, a fase
exponencial ou logartmica de crescimento caracterizada
pelo tempo de gerao, que o tempo necessrio para o
microrganismo dobrar o valor da concentrao celular (tg)
Ento X=2Xi
2. Xi n 2 0,693 Conclui-se ento, que o
n = max (t g ) max = = tempo de gerao
Xi tg tg
constante, porque max
est nesta fase.
4. Fase Linear: velocidade de reproduo
constante:

dX
rX = = rk
dt X = X C + rk (t t C ) = rk * t + X C rk * tc
X
deduz, que X uma funo linear do tempo.
dX =
Xi
rK

X t

dX = r dt
Xi
K
tc
4. Fase Linear: velocidade de reproduo
constante: X = X C + rk (t t C ) = rk * t + X C rk * tc
dX deduz, que X uma funo linear do tempo.
rX = = rk
dt
X

dX =
Xi
rK 1 dX rk
= =
rk
X t
X dt X rk * t + X C rK * t C
dX = r dt
Xi
K
tc
, nesta fase no constante, porque
diminui com o tempo de cultivo
5. Fase de Desalerao: diminuio de
crescimento celular (rX) e a velocidade
especfica de crescimento celular (X),
diminuem devido ao esgotamento de um
ou mais componentes do meio de cultura,
ou devido ao acmulo de metablitos
6. Fase Estacionria: Nesta fase X, alcana
um valor mximo Xm, onde h um equilibrio
entre a velocidade de crescimento e a
velocidade de morte do microrganismo.
7. Fase de Declnio ou Morte: A concentrao
celular diminui a uma velocidade que
excede a velocidade de produo de
clulas, ocorrendo lise celular, autlise, ou
rompimento dos microrcanismos,
provocado pela ao de enzimas
intracelulares.
 Cintica dos
Processos
Fermentativos