Doutor em Microbiologia – ICB-UFMG

Mestre em Ciências da Saúde – NPGME - UFS

Bacharel em Ciências Biológicas – UFS
MICROBIOLOGIA APLICADA
SUMÁRIO
1. Isolamento e identificação de micro-organismos
patogênicos.
 DIAGNÓSTICO
MICROBIOLÓGICO
 Rapidez  melhor entendimento  diagnóstico
preciso
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS

LÍQUOR
- EXAME MACROSCÓPICO – ASPECTO
- EXAME MICROSCOPICO – GRAM E TINTA DA CHINA
- BATERIA PADRÃO  Semear em: AGAR CHOCOLATE
(Haemophillus influenzae e Neisseria meningitidis), AGAR SANGUE
(Streptococcus pneumoniae) e AGAR SABOURAUD (Cryptococcus
neoformans e Candida sp.).
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS

SANGUE
- Hemocultura.
- Septicemia: bacterimia ou fungemia. Endocardite. Suspeitas
clinicas: leptospirose, salmoneloses, brucelose e febre.
- Mais freqüente: Staphylococcus coagulase negativo,
Staphylococcus aureus, Streptococcus do grupo viridans,
Enterobactérias, Streptococcus beta hemolítico, Streptococcus
pneumoniae, Escherichia coli, Klebsiella sp., Enterobacter spp.,
Proteus spp., Bacteroides spp., Clostridium spp.
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS

SANGUE
- Uso de anticoagulante ?????
- Cultivo aeróbico: BHI . Anaeróbico: BHI ouCaldo Tioglicolato.
- Após crescimento - cultivo em Agar sangue, Agar chocolate e
Agar Teague e Agar Sabouraud ou outro meio mais especifico.
- Uso de sistema automatizados – Bactec.
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS

CATETERES
- Deve ser pesquisado ???
- Contaminação externa – técnica da rolagem em Agar Sangue e Agar
chocolate.
- Contaminação interna – meio liquido BHI.
- Aproximadamente 5cm. Acima de 15 colônias – INFECÇÃO.
- Destaques: Staphylococcus epidermitis, Staphylococcus
coagulase negativa, Staphylococcus aureus, Enterobactérias,
Pseudomonas spp., Candida sp., Corynebacterium sp., B.G.N.
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS
LÍQUIDO SINOVIAL, CAVITÁRIOS E
PERITONEAL, LINFA e TECIDO LESIONADO.
- Gram
- Exame macroscópico (liquido sobrenadante e coágulo).
- Exame de cultura: Agar Chocolate, Agar Sangue, Agar
Sabouraud e Agar Teague/EMB. Microaerofilia, 37ºC e 48 horas.
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS
UROGENITAL
- Exame definitivo: Sexo masculino – gonorréia uretral. (gram).
Sexo feminino – swab endocervical – não coletar do fluido vaginal.
realizar cultura Agar Thayer-martin (GC).

- SEXO MASCULINO: Amostras (líquidos, esperma e raspados)

 Realizar cultura: Agar Chocolate, Teague/Macconkey, Sabouraud,
Agar para Mycoplasma sp e Chlamydia sp. (não se cora em gram).
Semeio em outros meios específicos.
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS
UROGENITAL
- SEXO FEMININO: VA G I N I T E – Trichomonas sp.,
Candida sp., BGN. VA G I N O S E – Bactérias anaeróbicas, Gardenella
sp. C E R V I C I T E – Neisseria gonorrheae, Chlamydia sp.
- Realizar bacterioscopia, exame direto a fresco. Cultura idem a
masculina.
- Observação: Microbiota normal – Lactobacillus sp, verificar a sua
relação com a microbiota patogênica. Auxilia na defesa (manutenção
do pH). Presença de Anaeróbicos (Mobilluncus sp.) 
HIPERFLORAÇÃO.
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS

URINA
- CISTITE E PIELONEFRITE.
- 80% Enterobactérias, 10% Cocos gram positivos e 10%
Leveduras e outros.
- QUANTITATIVA X QUALITATIVA (0,1mL em Agar - FALHA)
- Alça calibrada. 15 mL no máximo.
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS

URINA
-CULTURA: AGAR CHOCOLATE OU SANGUE,
TEAGUE/MACCONKEY E ÁGAR CLED,
- USO: Agar reativos (evidenciação por cromogênese – bact screen
ou bioluminescência).
- ACIMA DE 100.000 UFC/mL – INDÍCIOS DE INFECÇÃO.
- Punção suprapúbica – acima de 3 UFC/mL – INFECÇÃO.
- SCREEN RÁPIDO. METODOS ENZIMÁTICOS. CULTIVO EM
LÂMINA. METODO DAS DILUIÇÕES.
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS PATÓGENOS

INFECÇÕES GASTROINTESTINAIS
- INFECÇÃO X INTOXICAÇÃO

INTOXICAÇÃO:
Enterotoxigenica ETEC
Staphylococcus aureus NÃO REALIZA COPROCULTURA
Bacillus cereus
Clostridium botulinum
- ANÁLISE DE ALIMENTOS e TESTE DE SANGUE OCULTO E
LEUCÓCITOS FECAIS.

?
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS

INFECÇÃO AGAR
- Salmonella sp., SS/VB
- Shigella sp., SS OU XLD
- Vibrio cholerae Swab retal. SBS
- Escherichia coli, CLED/TEAGUE/MACONKEY
enterohemorragica (EHEC), UTILIZAÇÃO DE SOROS
enteropatogenica (EPEC), MONOVALENTES E POLIVALENTES
OU REAÇÃO EM CADEIA DA
enteroinvasora (EIEC) e POLIMERASE PCR
enteroagregativa (EAEC).
- Yersinia enterocolítica ÁGAR SANGUE
- Campylobacter jejuni ÁGAR SANGUE
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS

INFECÇÕES GASTROINTESTINAIS
- Análise macroscópica das amostras. Microscopia: Gram.
- Utilização de meios de enriquecimento (isolamento de Shigella
spp.e Salmonella spp.). Processamento no máximo em 6 horas.
- Método da diluição. Inoculação.
- Pesquisa de rotavírus – imunoenzimática (látex).
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS
PATÓGENOS
ESCARRO
- PESQUISA DE B.A.A.R. – ZIEHL-NEELSEN (baciloscopia).
PESQUISA DE Campylobacter sp.
- MEIOS DE CULTURA: Bateria padrão (agar chocolate, agar
sangue, agar teague e agar sabouraud).
- PARA PESQUISA DE Mycobacterium tuberculosis – MEIO
Loewenstein - Jensen.
- Uso de agente depurante (NaOH + cisteina + SDS) –
eliminação de impurezas.
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS PATÓGENOS

MICOLOGIA
- Utilização de KOH 10 a 30% no raspado – exame a fresco.
- Uso de azul de metileno ou azul de lactofenol.
- Crescimento em cultura: Agar Sabouraud com ou sem
cloranfenicol e Agar Mycosel.
- Análise macroscópica da colônia e Microcultivo.
- Provas bioquímicas para identificação das leveduras.
 ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS PATÓGENOS

OROFARÍGEA
- Gram.
- BATERIA PADRÃO + AGAR CHAPMAN (Staphylococcus aureus).
- PESQUISA: Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae,
Neisseria meningitidis (portadores), Staphylococcus aureus e
Corynebacterium diphtheriae.
 Pós cultivo

MICROBIOTA
CONTAMINAÇÃO
NORMAL
- VIGILÂNCIA
- EPIDEMIOLOGIA
- ANTECIPAÇÃO SISTEMA DE
DE NOTIFICAÇÃO
DIAGNÓSTICO COMPULSÓRIA
- FALHAS
- SURTOS

CARACTERIZAÇÃO
LAUDO
DO PACIENTE
Pós cultivo
Diagnóstico Molecular
 ÁREAS DE INTERESSE
-Saúde vacinas,
diagnósticos, TÉCNICAS DE
BIOLOGIA MOLECULAR e
enzimologia.
Obrigado!!!!