MC – microcestinas

Retiraram MC de cianobactérias de um lago na china. 1 grama de células de cianobactérias isofilizadas

sãp adicionadas a acido glacial acético 5% (v/v) para extração. A homogeneização foram
estraidos por 2h e centrifugados a 8000g, 4ºC durante 10 minutos. O sobrenadante foi recolhido
e os resíduo foi reextraido 2 vezes como antes. Todo o sobrenadante é junto e sujeito a Sep-Pak
C18 cartridges (cartuchos) – método pré condicionado com 10 mL de metanol (100%) e 10
mL de água ultrapura. Depois disso a coluna foi lavada com 20% de metanol, e os cartuchos
foram eluídos com 100% de metanol com 0,1% de ácido triflioroacético.

As fraction(??) de MC foram evaporadas através de evaporação rotativa a 40ºC e depois dissolvidos em

1mL de água ultra pra. A Concentração total de MC foi medida pelo método ELISA(kit de pratos
de microcistina, beacon analytical Systems Inc.)

As sementes pepino (Cucumis sativus L.) – Cin jin yan 4 – produzidas numa emprea chinesa de sementes.
A esterilização e germinação das sementes de pepino foi realizada com Com HgCl2 (0.1% W/v)
disinfetou as sementes, depois foram lavadas com água desionizada 3 vezes. Depois de secr a
água destilada durante 8h, as sementes foram cultivadas para germinação em caixas de petri com
uma camada de papel de filtro numa incubadora a (25ºC). Depois de 6 dias, as sementes que
germinara são movidas para 6.88 L caixa turnover com vermilulita. Quando duas folhas
aparecem as sementes de pepino foram cultivadas com solução routine nutrient com hidroponia
(técnica de cultivar plantas de solo que recebem água e os nutrientes principais). As sementes
são cultivadas com hoagland nutrient numa camara com 16-h photoperiod (200 μ molm−2 s−1) a
uma temperatura média de 27± 1 °C durante o dia e 20 ± 1 °C À noite com uma humidade
relativa entre 60 a 70%.

Solução nutritiva é renovada 3 em 3 dias. Quando a 3ª folha de pepino está completamente desenvolvida
o pepino é tratado todos os dias com extrat de MC bruto com diferentes concentrações 7 dias. 1º
estádio
Quando a 6ª folha está completamente desenvolvida (começa a florescer) a o pepino é tratado
todos os dias com extrat de MC bruto com diferentes concentrações 7 dias. 2º estádio
Quando a 11ª folha está completamente desenvolvida (estado de fruta) o pepino é tratado todos
os dias com extrat de MC bruto com diferentes concentrações 7 dias. 3º estádio

Depois dos 7 dias de exposição metade dos pepinos foram medidos o índice de crescimento, a qualidade
dos frutos e a quantidade de MC nos casos de estudo. Os 3 grupos decorreram em paralelo com 6
plantas de pepino

Deferentes concentrações: control ,1, 10, 100, 100 μg/l

Qualidade – vê estes parametros - Vitamin C, organic acids, soluble sugar, soluble protein, and
nitrate

Determinação de MC – Cada raiz é lavada várias vezes com água desionizada e usa-se papel
absorvente na superfície. Depois teste ELISA (antes retira-se o sobrenadante) e para medir
a quantidade de MC . é medido pelo peso de MCna raiz por unidade de peso MCàgua

Bioconcetração(bcf) no pepino calcula-se : BCF= MCpepino ((μg/kg),) / MC água (μg/l)

Consumo diário estimado EDI – 40g de pepino num adulto 60kg.

EDI = MC40g(quantidade de MC em 40g de pepino) / BM60kg peso do adulto

Efeitos das MC no crecimento e a acomulação ans diferentes etapas de crescimento
comparativamente com o controlo 10 μg / 1 MCs têm um pequeno decréscimo no crescimento. Do 100 μg
e 1000 μg /1 MC há uma visibilidade do efeito da toxicidade no pepino e grande diminuição do tamanho
da raiz. Diminui também a altura da planta, numero de folhas e área, entre outros.

TESTE DO 7 DIAS – verifica-se que quanto mais aumenta a toxicidade menor são as folhas, semente, a
raiz nas 3 fases (primeiros dias, 6 folhas, 11 folhas)
Verifica-se que quando se tem MC nos testes na três fazes fica Semente>flor>fruto (quantidade de MC)

É possível ver que no longo prazo o controlo 1 μg e 10 μg não tem muitos problemas mas o 100 e 1000
tem

Discussão

MC pode ser dissolvido em água. A água contaminada com MC é provável de ser usada para irrigação de
culturas de agricultura de água. Isso interfere com o desenvolvimento da planta. 1 μg causa um aumento
daplanta relativamente ao controlo.
Com 10 μg o tamanho diminui nos diferentes estágios .

A exposição humana a MC não passou o limite estipulado pela a OMS de 0.4 μg/kg.