Cromatografia Líquida

(em Coluna)

QUÍMICA ORGÂNICA EXPERIMENTAL

Curso de Licenciatura em Química
Profª Dra. Anna Maria Deobald
Vamos iniciar pelo vídeo?!!!

https://www.youtube.com/watch?v=pkAzBFWYg4c
 Cromatografia

O princípio básico da cromatografia é a separação de misturas, no qual os componentes a serem separados são
distribuídos entre duas fases, uma fase estacionária e uma fase móvel.

Esta separação depende da diferença entre o comportamento dos analitos entre a fase móvel e a fase
estacionária. A interação dos componentes da mistura com estas duas fases é influenciada por diferentes forças
intermoleculares, incluindo iônica, polar apolar, e específicos efeitos de afinidade e solubilidade.

A grande variabilidade de combinações entre a fase

móvel e estacionária faz com que a cromatografia
tenha uma série de técnicas diferenciadas. Para o
processo de separação de misturas, a mistura
passa por duas fases sendo uma estacionaria (fixa,
sendo um material poroso como um filtro, ou sílica
gel) e outra móvel (como um líquido ou um gás, que
ajuda na separação da mistura), sendo que os
constituintes dessa misturas interagem com as
fases através de forças intermoleculares e iônicas,
fazendo a separação.
 Tipos de Cromatografia Líquida

A Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE; em inglês: High performance liquid chromatography,
HPLC) é um método de separação de compostos químicos em solução, a qual é utilizada na química para
identificar e quantificar cada componente em uma mistura. Esta técnica consiste no bombeamento de um
solvente líquido pressurizado contendo uma mistura que passa através de uma coluna preenchida com
algum material adsorvente. Cada componente da amostra interage de forma diferenciada com o material
adsorvente, gerando diferentes velocidades para cada componente e levando à separação conforme eles
percorrem a coluna.
Cromatografia em Camada Delgada (CCD) (inglês:Thin layer chromatography, TLC) é uma técnica de
cromatografia usada para separar compostos químicos presentes em uma amostra. A cromatografia em
camada delgada é realizada sobre uma placa de cobre, plástico ou folha de alumínio, revestida com uma fina
camada de material adsorvente, geralmente sílica-gel, óxido de alumínio ou celulose. Esta camada de
adsorvente é chamada de fase estacionária.

Depois que a amostra é aplicada sobre a placa, um solvente ou mistura de solventes (chamada de fase
móvel) permeia a placa através de ação capilar. Os diferentes compostos presentes nas amostras percorrem
a placa de CCD de maneira diferentes, sendo possível a separação.

A CCD pode ser usada para monitorar o progresso de uma reação química, identificar os compostos
presentes numa mistura e determinar a pureza de uma substância.
Cromatografia em Coluna é uma prática laboratorial amplamente empregada em industrias, laboratórios,
entre outros, que utiliza a prática da interação de uma amostra a ser analisada com dois tipos de fases:
móvel e estacionária.
O método de cromatografia em coluna consiste na utilização de uma coluna de vidro na qual em seu interior
fora preenchido por uma substância adsorvente apropriada, sendo esta específica para cada tipo de
análise. Alguns adsorventes utilizados comumente são a sílica em gel, a alumina, carvão ativado e a
sacarose. Os eluentes, ou seja, a fase móvel da cromatografia, na qual os compostos a serem separados
são diluídos, em sua maioria são orgânicos, como éter de petróleo, clorofórmio, acetona, etanol, e por
vezes a água também pode ser utilizada como eluente. A metodologia consiste na adição da substância a
ser separada na parte superior da coluna e o eluente em seguida, com quantidade suficiente para a
realização da separação. Se as substâncias apresentarem espectros de bandas na faixa do visível, poder-
se-á ver zonas de espaçamento entre as substâncias separadas.
 O espinafre...

O espinafre é um vegetal verde-escuro rico em vitaminas A, C e E, e compostos

fenólicos, como luteína, zeaxantina e canferol, com propriedades antioxidantes e
anti-inflamatórias, que auxiliam no combate ao envelhecimento precoce da pele e
evitam o desenvolvimento de doenças cardiovasculares.

As folhas dos vegetais contêm vários pigmentos, em particular: clorofilas, xantofilas e carotenos.

Clorofila é a designação de um grupo de

pigmentos fotossintéticos presente nos cloroplastos
das plantas. A intensa cor esverdeada da clorofila
se deve a suas fortes absorções das regiões azuis
e vermelhas do espectro eletromagnético, e por
causa destas absorções a luz que ela reflete e
emite a cor verde. Ela consegue canalizar a energia
da luz solar em energia química através do
processo de fotossíntese. Neste processo, a
energia absorvida pela clorofila transforma dióxido
de carbono e água em carboidratos e oxigênio.
Xantofilas são pigmentos amarelos que formam uma das duas principais divisões do grupo carotenóide. O
nome vem do idioma grego xanthos ("amarelo") e phyllon ("folha"), devido à formação de sua banda amarela
visto no início de cromatografia dos pigmentos das folhas.

Sua estrutura molecular é semelhante a Carotenos, que formam outra grande divisão do grupo dos
carotenóides, mas as xantofilas contêm átomos de oxigênio, enquanto carotenos são puramente
hidrocarbonetos sem oxigênio. As xantofilas contém oxigênio, seja como grupo hidroxilo e/ou como pares de
átomos de hidrogênio que são substituídos por átomos de oxigênio atuando como uma ponte (epóxido). Por
essa razão, são mais polares do que os carotenos puramente de hidrocarboneto e é essa a diferença que
permite separá-las do carotenos em muitos tipos de cromatografia. Normalmente, os carotenos são na
maioria das vezes de cor laranja.

Violaxantina
Sugestão de vídeo para assistir!!!

https://www.youtube.com/watch?v=GrWLb7RCYaY