Acoplamento entre

estímulo / resposta:
Ciclose em células de folha de Elodea

Biologia Molecular e Celular

2º Semestre
Ano Letivo 2011 | 2012

  A motilidade celular, enquanto movimento de circulação

promovido pelo citoplasma, é um sistema de transporte
essencial na célula que assiste inúmeras funções desde
o transporte de nutrientes até à deslocação da própria
célula.

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Objectivo:  
Avaliar   as   alterações   induzidas   por   fatores   ambientais   da   corrente  
protoplasmática   ou   ciclose   em   folha   de   Elodea   por   observação   ao  
microscópio   ótico   do   movimento   de   circulação   promovido   pelo  
citoplasma  dos  cloroplastos  ao  redor  do  vacúolo  central.    

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Ciclose:  
Tipo  de  movimento  de  geração  de  correntes  citoplasmáticas  
por   ação   de   microBilamentos,   observando   o   movimento   de  
cloroplastos.  
Avaliar  de  que  forma  são  afectadas  por  factores  externos  

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 Porquê a Elodea (Elodea canadensis)?

  Planta aquática que reage muito bem a

factores externos
  Extremamente atractiva para
microscopistas pois facilmente permite a
demonstração da ciclose ou movimento
citoplasmático.
  As folhas apresentam normalmente duas
camadas de células.
  Montar entre lâmina e lamela uma folha
saudável e verde com a quantidade de
água suficiente para manter a humidade.
  O movimento de plastídeos em cada célula
é facilmente observado usando uma
objectiva de 40x.
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  Observe ao microscópio óptico

(ampliação 400 x), folhas novas de
Elodea previamente exposta à luz durante
1 hora.

  Identifique preparações em que a

corrente protoplasmática seja observável
e idêntica.

  Para o efeito, conte o número de

cloroplastos que passam por um
determinado ponto fixo durante 5 minutos.

  Mantenha essas preparações iluminadas

e húmidas (evite as perdas de água por
aquecimento):

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  Preparação nº 1:
  Observe a corrente protoplasmática (conte o número de cloroplastos que passam
por um determinado ponto fixo durante 5 minutos).

  Preparação nº 2:
  Observe a corrente protoplasmática (conte o número de cloroplastos que passam
por um determinado ponto fixo durante 5 minutos).
  Coloque a preparação sobre gelo durante 15 minutos e observe de imediato a
corrente protoplasmática.
  Repita a contagem do número de cloroplastos que passam por um determinado
ponto fixo durante 5 minutos quando a temperatura da preparação for igual à
temperatura ambiente.

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  Preparação nº 3:
  Observe a corrente protoplasmática (conte o número de cloroplastos que
passam por um determinado ponto fixo durante 5 minutos).
  Promova a passagem de água a pH 8,3 pela preparação, uma gota de
solução de um dos lados da lâmina e uma tira de papel de filtro do outro lado.
  Após duas lavagens com água, repita o procedimento com água a pH 7,0 e
com água a pH 5,8.
  Observe permanentemente a corrente protoplasmática.

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  Preparação nº 4:
  Observe a corrente protoplasmática.
  Adicione uma gota de CaCl2 30 µM. Observe a corrente protoplasmática.
  Após duas lavagens com água, repita a contagem do número de cloroplastos que
passam por um determinado ponto fixo durante 5 minutos.
  Preparação nº 5:
  ...
  Adicione uma gota de EGTA 1 mM.
  Preparação nº 6:
  ...
  Adicione uma gota de ATP 2 mM.
  Preparação nº 7:
  ...
  Adicione uma gota de DMSO a 4%.
  Preparação nº 8:
  ...
  Adicione uma gota de colchicina 1 µM.

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