Utilizao de metodologias Problem-based Learning

(PBL), no ensino de anlise instrumental II: Anlise de

Bixinas em extrato de urucum mediante LC, GC, HPLC,
EC
e
MS/MS.
Vargas, D.A.; Schwerz, L; Catai, J.R.; Ishikawa, A.A.;
Santos-Neto, A.J.; Carrilho, E.
Resumo
A metodologia de Problem Based Learning (PBL) uma estratgia moderna de aprendizagem ativa que, surgiu como contraproposta metodologia tradicional
de ensino e busca estabelecer uma alternativa pedaggica na qual o estudante seja o ator principal do seu processo de aprendizado. Nesta abordagem, os
docentes propem um casode estudo, uma situao problema especfica, e os estudantes identificam oproblema, investigam, debatem, interpretam e
propem possveis solues. Neste caso, como tarefa complementar e paralela s prticas previamente estabelecidas, os estudantes enfrentaram o desafio de
analisar, mediante as diferentes, tcnicas abordadas no curso da disciplina, o extrato de urucum utilizado na primeira prtica da disciplina (cromatografia
lquida clssica). Assim, aps realizar a primeira coluna e coletar as respetivas fraes separadas, os estudantes investigaram, consultaram a literatura e
propuseram condies de anlise apropriadas, que permitiram a identificao de bixina, metil-bixina e nor-bixina no extrato de urucum fazendo uso de
cromatografia gasosa (GC), cromatografia lquida de alta eficincia HPLC, eletroforese capilar (EC) e espectrometria de massas (MS). Finalmente os estudantes,
depois de avaliar as diferentes alternativas, estavam em condies de estabelecer qual ou quais das tcnicas abordadas seriam as mais apropriadas para
realizar uma anlise deste tipo.
Palavras chave: Cromatografia, Urucum, Bixinas.

REVSISO BIBLIOGRAFICA

Durante esta primeira etapa, os estudantes deveram consultar na

literatura, as informaes disponveis referentes composio
qumica do extrato de bixa orellana, principais componentes,
mtodos e condies de analise .

Bixina e norbixina so os carotenos responsveis pela colorao do

extrato de bixa orellana, legando a representar at o 80% da sua
composio
Resultados da pesquisa na base de
dados Scopus, sobre o nmero de
publicaes referentes ao analise de
extratos de Bixa orellana, mediante
mtodos
cromatogrficos,
eletroforticos ou de espectrometria
de massas.

PRTICA 1: CROMATOGRAFIA L
LQUIDA
CLSSICA
Um soluo preparada
a partir de
500 mg de extrato de Urucum,

dissolvidos em uma soluo 4% de etanol em diclorometano, foi

eluida em uma coluna preenchida com silica-gel . No total, foram
coletadas 96 fraes-, de estas foram selecionadas algumas
(segunda a mudana na colorao)para anlise mediante
cromatografia em camada delgada (TIC), usando estes resultados
como critrio para o reagrupamento das fraes. As fraes finais
assim obtidas seriam analisadas, mediante outras tcnicas no
transcorrer das praticas posteriores.
Derivatizao do extrato bruto de
Cromatograma do extrato
Bixa orellana
derivatizado

PRTICA 2: CROMATOGRAFIA
GASOSA (GC-FID)

Cromatograma do extrato bruto de Bixa

orellana
(GC-FID)

Solven
te

Possveis produtos de
decomposio trmica

Tempo
(min)

Obteno de metil steres de

cidos graxos (FAMES), mediante
reao com metanol em meio
acido:
A uma amostra de colorfico de
urucum (0.1 g) foi dissolvida em
metanol (10 mL) se adicionaram 5
gotas
de
acido
clordrico
concentrado e levada a ebulio
em refluxo, durante 2 horas.
O produto de reao foi extrado
ter vezes com hexane e analisado
mediante GC-FID.
PRTICA 5:

PRTICA 3: CROMATOGRAFIA
LIQUIDA DE ALTA EFICINCIA (HPLCCromatograma do extrato bruto de
UV/Vis)
Bixa orellana
(HPLC UV/Vis)

(GC-FID)
produtos de
Hexan Possveis
derivatizao
e

Durante esta prtica, ao igual que

no caso de GC e EC,
os
estudantes deveram investigar,
propor e testar condies de
operao
que
levaram

separao das bixinas

com
adequada resoluo.

PRTICA 4: ELETROFORESE CAPILAR

(EC)

Tempo
(min)

ESPECTROMETRIA DE
MASSAS (MS)
cis-norbixin
(MW:380 Da)

transnorbixin
(MW:378 Da)

bixin (MW:394
Da)

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
GIRIDHAR , P.; VENUGOPALAN ,A.; PARIMALAN, R. A Review on Annatto Dye
Extraction, Analysis and Processing A Food Technology Perspective. Journal of
Scientific Research and Reports, v. 13, n. 2, p. 327-348, 2013.
TOCCHINI, L.; ZERLOTTI MERCADANTE, A. Extrao e determinao, por CLAE, de
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