Biotecnologia

• Envolve técnicas que

permitem ao homem
utilizar organismos para a
obtenção de substâncias
de utilidade para o ser
humano.
• Por exemplo,
cruzamentos
experimentais para
obtenção de raças mais
apuradas de gado e
cavalos e também de
Biotecnologia vegetais mais ricos em
determinados
nutrientes.
 Engenharia
genética
• Envolve técnicas que
permitem o transplante de
genes do DNA de uma
espécie para o DNA de
espécie diferente.
• Dessa maneira, é formado o
chamado DNA recombinante,
que é a associação de duas ou
mais moléculas de DNA de
espécies diferentes que não
são encontradas juntas na
natureza.
 • Testes altamente precisos de
paternidade e de
identificação de criminosos.
• Localização de genes
associados a doenças
genéticas.
• Detecção de genes
relacionados com o
desenvolvimento de câncer.
• Terapia gênica.
• Produção de vacinas
sintéticas.
Aplicações da Engenharia • Obtenção de organismos
genética transgênicos.
 • São enzimas especiais, também
chamadas de ENDONUCLEASES,
que cortam a molécula de DNA em
pontos específicos.
• Com a ação das enzimas de
restrição é possível a retirada de
um gene do DNA permitindo a
introdução de outro gene
pertencente ao DNA de outra
espécie, obtendo o DNA
recombinante
• A enzima de restrição EcoRI, por
exemplo, corta o DNA entre as
bases G e A.
Enzimas de restrição • A EcoRI é uma endonuclease
descoberta a partir da Escherichia
coli (Eco). O R, vem da palavra
Restrição e I porque foi a primeira
DNA Fingerprint
• É considerado a “impressão digital” do
DNA.
• É semelhante a um código de barras.
• É obtido a partir da técnica denominada
Eletroforese
 • O DNA é submetido a enzima de
restrição.
• A enzima de restrição fragmenta o DNA
em segmentos com tamanhos diferentes,
sendo uns menores e outros maiores.
• Os fragmentos do DNA são colocados em
uma placa de gel ( agarose ) que é
submetida a uma campo elétrico,
gerando dois pólos (+ e - ).
• Os fragmentos do DNA, por serem
negativos, se movimentam em direção ao
pólo +.
• Os fragmentos menores se movimentam
mais rápido ficando na posição anterior;
em seguida, se situam os fragmentos
maiores.

Formação do DNA • Dessa forma, é obtido o DNA fingerprint

que permite a análise nos exames de

Fingerprint DNA em determinadas circunstâncias,

como em disputas de paternidade e em
investigação criminal.
Teste de DNA
• Utilizado em identificação de
pessoas:
• Investigações policiais
• Reconhecimento de
paternidade
• Realizado através de um gel
de eletroforese com a
técnica de PCR
 Teste de Paternidade
• Coletam-se amostras de DNA da criança, da mãe e do suposto pai
• Verificam-se as bandas coincidentes da mãe e da criança
• As bandas restantes do filho devem se alinhar e coincidir com as do
pai
 • É feita uma comparação
entre os DNAs
fingerprint dos
indivíduos em análise.
• Aqueles que tiverem o
maior número de
bandas em comum,
apresentam alguma
relação entre eles.

Teste de paternidade
Determine quem é o pai na imagem a
baixo:
 • consiste em selecionar e
aprimorar as características
das espécies visando a
utilização pelo ser humano
• é um processo antigo, que no
início era realizado por
maneira intuitiva
• Por exemplo, se um
agricultor desejava obter
espigas de milho com
maior número de grãos,
ele apenas selecionava as
sementes de milho com
tal característica
Melhoramento genético • Atualmente, o processo de
melhoramento genético é
feito baseado no
 Exemplo de melhoramento genético
Gado Santa Gertrudes,
produzido no King Ranch, em
Kigsville no Texas, EUA.
É um ótimo produtor de carne e
resistente a doenças parasitárias
e ao calor

Resultante do cruzamento
de dois tipos

Gado Shorthorn Gado Braham ( Zebu )

Ótimo produtor de carne, mas Menor produção de carne e é resistente
sensível a doenças e ao calor a doenças e ao calor
 • obtenção de linhagens
com baixa variabilidade
genética, ou seja, poucas
diferenças entre os
indivíduos da população
• Tal fato poderia levar a
uma diminuição da
adaptação dos indivíduos
a variações ambientais
Problemas em relação ao
melhoramento genético
 São organismos que recebem genes de outras espécies.

Transgênicos São obtidos visando a produção de substâncias de utilidade para o ser

humano.

ou Organismos
Geneticamente As plantas são muito utilizadas na obtenção de transgênicos que
produzam toxinas contra pragas.

Modificados Bactérias transgênicas vem sendo utilizadas para a produção de

(OGMs) insulina, hormônio de crescimento, anticorpos específicos, fator VIII
(necessários aos hemofílicos).
Pode-se, por exemplo, introduzir um gene humano em um
camundongo ou um gene de inseto em uma planta. Por esses
mecanismos foram obtidos camundongos gigantes e planta de fumo
que brilhava.
Produção de insulina a partir de bactérias
• O gene da insulina humana é isolado
utilizando-se enzimas de restrição para
cortar o DNA humano.
• O gene humano é inserido em um
plasmídeo bacteriano que também foi
submetido a enzima de restrição.
• Ativa-se o plasmídeo, para a transcrição
do gene e produção da proteína
(insulina).
• Retira-se a insulina da bactéria.
Exemplos de Organismos
transgênicos
• Planta de algodão:
• resistentes às lagartas.
• Reduz a necessidade de utilização de pesticidas.
• Os gastos de produção diminuem e a poluição
ambiental também é reduzida.
• Golden Rice:
• Arroz geneticamente modificado que contém
um gene que codifica a produção de β-caroteno.
• Foi produzido para evitar que as populações
pobres da Ásia adoecessem por avitaminoses.
Métodos de Utilização da bactéria
obtenção de • Agrobacterium tumefaciens
transgênicos
Biobalística

Eletroporação de
Protoplastos
 • Tal bactéria ocorre no solo
e possui a capacidade de
introduzir seu plasmídeo
no interior de células
vegetais.
• O plasmídeo se incorpora
ao material genético da
célula do organismo a ser
modificado.
• Atua, portanto, como um
vetor natural para
Utilização da Agrobacterium introdução do DNA no
tumefaciens organismo a ser
modificado.
 • Envolve a utilização de
microprojéteis de ouro ou
tungstênio associadas à
moléculas de DNA, que são
introduzidas nas células do
organismo que se deseja
modificar.
• Tal procedimento não traz
prejuízo para as células,
sendo, por isso, um método
muito utilizado hoje em dia.
• Vantagem: não utiliza
vetores como vírus e
Biobalística bactérias para a introdução
do DNA no organismo a ser
modificado.
 • Um plasmídeo e o
protoplasto (célula vegetal
sem parede celular) são
colocados em mesma
solução.
• A solução é submetida a
descargas elétricas de alta
voltagem, promovendo a
abertura de poros na
membrana plasmática do
protoplasto.
• Tal processo permite a
Eletroporação de introdução do plasmídeo
Protoplastos no protoplasto e sua
associação com o genoma
de tal célula.
Clonagem
• Técnica na qual inúmeros
indivíduos geneticamente
idênticos podem ser
formados a partir de um
mesmo organismo
Clonagem
reprodutiva
• visa a obtenção de um
organismo. Foi o caso da ovelha
Dolly ou da vaca Vitória
(EMBRAPA/DF)
Clonagem da
ovelha Dolly
Clonagem terapêutica
• visa a obtenção de células-
tronco embrionárias. Um clone
é formado, gera uma blástula
que nunca é implantada,
apenas serve como uma massa
de células que podem ser
consideradas células-tronco de
alta versatilidade
Terapia gênica
• Consiste na substituição do gene
anormal que leva à manifestação de
determinada doença, pelo gene normal.
• Atualmente, os estudos de terapia
gênica limita-se às células somáticas.
• Porém, no futuro pretende-se atuar
sobre os gametas, evitando a
transferência do gene anormal para
os descendentes
Exemplos de doenças-alvo da terapia
gênica
• Fenilcetonúria

• Hipercolesterolemia

• Anemia falciforme

• Imunodeficiência humana (AIDS)

 Técnica ex vivo

Principais
maneiras de
introdução Técnica in vivo
de genes em
humanos
 Uso de um vetor (Ex.: vírus) modificado que
contenha o alelo normal.

Em seguida, são coletados leucócitos do

sangue da pessoa afetada e permite-se que
Técnica ex os vírus alterados infectem essas células.
vivo Os vírus introduzem o gene normal nos
leucócitos.

Os leucócitos, agora modificados, se

multiplicam e são reintroduzidos no paciente.
 Consiste na clonagem do gene
normal e de seu preparo para
introdução no paciente por meio de
injeção intravenosa ou intramuscular.
Técnica in
vivo Dessa maneira, o gene incorpora-se
às células do paciente e dentro delas
passa a comandar a síntese da
proteína normal.
 • Genes de agentes causadores de
doenças e que codificam
proteínas responsáveis por
estimular o sistema imunológico
humano têm sido isolados.
• Tais genes são introduzidos em
bactérias e clonados.
• O produto da ação desses
genes, ou seja, a proteína, é
purificado para depois ser
introduzido no organismo,
estimulando a produção de
anticorpos, isto é, atua como
vacina.

Vacinas gênicas • Exemplo de doenças que já

estão produzidas vacinas
gênicas: Hepatite B e Meningite.
 • Quimera: organismos ou
tecidos formados por dois
ou mais conjuntos diferentes
de DNA, obtidos pela fusão
de diversos zigotos.
• Mosaicos: organismos
formados por pulações de
células geneticamente
diferentes, que se
desenvolveram de um único
zigoto.
• Híbridos: organismos
Quimeras, mosaicos e provenientes do cruzamento
híbridos de duas espécies diferentes.
 Objetivo:
determinar a
condição de
saúde do
feto.

• Gerenciar as semanas de gestação

Diagnóstico • Determinar o resultado da gravidez
Utilidades:
pré-natal • Planejar possíveis complicações
durante o nascimento

Técnicas • Ultrassonografia
utilizadas: • Amniocentese
Ultrassonograf
ia
Procedimento não
invasivo e inofensivo
para a mãe e feto
Amniocentese
Procedimento invasivo
Aconselhamento
genético
• Fornece informações e apoio para as
pessoas que apresentam risco de ter
doenças genéticas.
• Razões pela busca do aconselhamento:
• Ter uma história pessoal ou familiar
de condição genética ou alguma
doença congênita
• Já ter uma criança com doença
genética ou alguma doença congênita
• Ter sofrido dois ou mais abortos ou
um bebê que faleceu
Células-
tronco