Externato de S.

Miguel de Refojos

Curso
TCNICO DE ANLISE LABORATORIAL

MDULO 8

Controlo de Microrganismos II
Disciplina de Qumica Aplicada

FUNDAMENTOS DO CONTROLO DE MICRORGANISMOS

IMPORTNCIA, DEFINIO DOS TERMOS, PADRO (E TAXA) DE MORTE MICROBIANA

Fundamentos do controlo de microrganismos

A condio sanitria de uma populao determinada, em larga
escala, pela sua capacidade em controlar eficazmente as populaes microbianas.

Os processos podem ser muito

especficos, como o fornecimento

de medicao eficaz na eliminao de microrganismos infetantes, ou
Controlo microbiano.

podem ser mais gerais, como as

prticas sanitrias utilizadas no lar e nos hospitais.

Fundamentos do controlo de microrganismos

Controlando-se os microrganismos, no s o produto de consumo
se torna seguro, sob o ponto de vista da sade pblica, como tambm o processo traz muitos benefcios para o bem-estar da comunidade. Os microrganismos so, igualmente,

capazes de destruir materiais valiosos,

como madeira e alimentos, com graves perdas econmicas e, do mesmo modo, requerem controlo efetivo.
Controlo microbiano.

Importncia do controlo microbiano

As principais razes para desenvolver o controlo de

microrganismos podem ser resumidas da seguinte forma:

1. Prevenir a transmisso de doena e infeo;

2. Prevenir a contaminao ou crescimento

de microrganismos nocivos;
3. Prevenir a deteriorao e dano de materiais por microrganismos.

Importncia do controlo microbiano

Os microrganismos podem ser removidos, inibidos ou mortos por
agentes fsicos ou qumicos. Uma grande variedade de tcnicas e de agentes pode ser utilizada, agindo de modos diferentes e tendo o seu prprio limite de aplicao prtica.

Controlo microbiano: definio de termos

Antes de discutir esses agentes, na tentativa de entender os seus
efeitos e as condies necessrias para a sua aplicao, deve-se compreender os diversos termos empregados para descrever os agentes e os seus efeitos. Estes termos so importantes no rtulo dos produtos qumicos usados contra microrganismos, porque a

sua utilizao pode ter implicaes legais.

Alm disso, tanto o produtor como o

consumidor dever entender essa terminologia.

Controlo microbiano: definio de termos

Esterilizao: Processo de destruio ou remoo de todas as
formas de vida microbiana, incluindo esporos bacterianos, que so as formas mais resistentes de vida.

Desinfeo: Processo que visa a destruio ou inibio do

crescimento de agentes patognicos em superfcies ou substncias

inertes. Um desinfetante um agente, normalmente qumico, que mata as formas vegetativas, mas no necessariamente esporos

bacterianos.

Controlo microbiano: definio de termos

Antissepsia: Processo que visa a destruio ou inibio do
crescimento de microrganismos vegetativos em tecidos vivos, pele e mucosas. O produto qumico utilizado denominado antissptico (por exemplo, lcool, gua oxigenada).

Assepsia: Assepsia significa ausncia de microrganismos vivos. A

tcnica assptica destina-se a eliminar e excluir todos os microrganismos infeciosos pela esterilizao de equipamentos,

desinfeo do meio ambiente e limpeza dos tecidos do corpo com

um antissptico.

Controlo microbiano: definio de termos

Microbicida: um agente que mata as formas vegetativas, mas
no, necessariamente, as formas esporuladas dos microrganismos; na prtica, um microbicida quase a mesma coisa que um desinfetante, embora o termo microbicida seja vulgarmente usado para todo o tipo de microrganismos e para qualquer aplicao.

Bactericida: um agente que mata as bactrias. De modo semelhante, os termos fungicida, viricida e esporicida referem-se a

agentes que matam fungos, vrus e esporos, respetivamente.

Controlo microbiano: definio de termos

Bacteriostase: uma condio na qual se previne o crescimento de
bactrias (adjetivo = bacteriosttico).

De forma semelhante, fungisttico descreve o

agente que inibe o desenvolvimento de fungos. Aqueles agentes que tm, em comum, a capacidade de inibir o crescimento de microrganismos, so designados, coletivamente, como agentes microbiostticos.

Controlo microbiano: definio de termos

Agente antimicrobiano: aquele que interfere com o crescimento
ou atividade dos microrganismos.

Na linguagem comum, o termo significa inibio do crescimento e, de acordo com o tipo de microrganismos sobre os quais agem,

recebem a designao de antibacterianos ou antifngicos.

Alguns agentes antimicrobianos so usados no tratamento de

infees e, ento, so chamados de agentes teraputicos.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

A palavra morte, tal como usada em Microbiologia, definida
como a perda irreversvel da capacidade de reproduo. Os microrganismos viveis so capazes de se multiplicar, enquanto os microrganismos mortos no se reproduzem. A determinao da morte requer

tcnicas laboratoriais que revelaro

se o crescimento ainda ocorre quando a amostra inoculada em meios slidos ou lquidos.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Para demonstrar a eficcia de um agente antimicrobiano, o teste realizado para detetar sobreviventes (aqueles microrganismos que so capazes de manifestar crescimento), considerando-se como mortas as clulas incapazes de se reproduzir.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Quando se goteja uma suspenso bacteriana numa garrafa contendo um cido forte ou num microincinerador, todas as bactrias podem morrer instantaneamente ou, ao menos, to rapidamente que no possvel medir a taxa de morte.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Entretanto, tratamentos menos drsticos no matam todas as
clulas no mesmo instante; as bactrias morrem durante um perodo de tempo, numa taxa constante e exponencial que , essencialmente, o inverso do seu padro de crescimento exponencial.

Padro de crescimento bacteriano.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

[A] A curva de morte aritmtica dos esporos bacterianos expostos soluo de fenol a 5% a uma temperatura constante mostra a populao de esporos que morre num perodo de tempo. [B] A curva de morte logartmica baseada nos mesmos dados da curva anterior.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Ambas as curvas mostram que uma

parte da populao morre numa determinada unidade de tempo, mas o que a representao logartmica tambm revela que a taxa de morte constante. Os pontos caem numa linha reta e a inclinao da curva a medida do ritmo de morte.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Resultados tais como os ilustrados so obtidos somente quando as
condies experimentais so mantidas estritamente uniformes, incluindo a idade e as condies fisiolgicas de todos os microrganismos da populao.

Se as clulas variam em idade ou em estgio fisiolgico, haver

diferenas na suscetibilidade ao agente. Como consequncia, a representao logartmica dos sobreviventes no formar uma

linha reta.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Tanto a inclinao da curva de morte como a sua forma so
afetadas pela espcie de microrganismos estudados e pela homogeneidade celular da populao.

Taxa de morte de trs populaes diferentes de microrganismos expostos a um mesmo agente microbicida.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

A morte exponencial pode ser entendida atravs de um simples
modelo:

Imagine-se que cada clula um alvo e

que um grande nmero de balas (agentes fsicos ou qumicos)

atirado, ao acaso, isto ,

ningum faz mira diretamente num determinado alvo.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

O bom senso dita algumas regras sobre a forma pela qual as bactrias morrero; para comear admitido que um nico projtil mata uma clula.

A probabilidade de se atingir um alvo proporcional ao nmero de alvos, isto , ao

nmero de bactrias presentes.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

A intuio diz que se atirarmos, ao acaso, em muitos alvos, teremos boa chance de abater um deles, mas, com o tempo, o nmero de alvos no s diminui prontamente, como se torna cada vez mais difcil

abater os remanescentes (no interessa atingir um

alvo mais de uma vez, pois a bactria pode ser morta uma vez apenas).

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Tome-se um simples exemplo numrico: admitindo que se tenha
uma populao inicial de 1 milho de alvos.

Atira-se, com balas, durante 1 minuto, morrendo 90% das bactrias e restando, obviamente, 100 000 sobreviventes. Repete-se a

operao por mais um minuto, ocorrendo a morte de 90 000 alvos,

com a sobrevivncia de 10 000 bactrias.

Este padro repete-se at que no haja mais alvos, como se v na

tabela seguinte.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

TEMPO MORTES POR TOTAL DE SOBREVIVENTE (min.) UNIDADE DE TEMPO MORTES
0 1 2 3 4 5 6 1 000 000 100 000 10 000 1 000 100 10 1 0 900 000 = 90% 90 000 = 90% 9 000 = 90% 900 = 90% 90 = 90% 9 = 90% 0 900 000 990 000 999 000 999 900 999 990 999 999

Um caso terico de desinfeo.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Salienta-se que to difcil matar as nove ltimas bactrias (ou os
ltimos nove dcimos de uma bactria) como foi matar as primeiras 900 000!

De facto, nunca se pode ter certeza de que foi atingido o ltimo

alvo, tudo o que se pode fazer dar aos alvos combate suficiente
para que se tenha maior hiptese de que a ltima clula tenha sido atingida.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

A probabilidade de atingir um alvo , tambm, proporcional ao
nmero de balas disparadas, ou seja, concentrao do agente qumico ou intensidade do agente fsico.

Outra vez a intuio que afirma: quanto mais projteis forem

atirados num determinado tempo, mais rapidamente os alvos

sero atingidos. Se os alvos so as bactrias e as balas so os raios X ou as radiaes ultravioleta, sabe-se que as clulas so

eliminadas mais rapidamente quando aumenta a intensidade das

radiaes.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Sendo os projteis representados por molculas de um agente
qumico, as bactrias morrero em menor tempo quando a concentrao do agente aumentar (at um certo limite, naturalmente).
O aumento da concentrao do desinfetante diminui a sobrevivncia bacteriana. Nesta experincia, Escherichia coli foi exposta a vrias concentraes de fenol, a 35C. O nmero de sobreviventes, expresso logaritmicamente, relacionado com o tempo.

Padro (e taxa) de morte bacteriana

Quanto mais tempo se atirar, mais alvos sero atingidos; quanto
maior o nmero de alvos existente, mais tempo ser necessrio para abat-los.

Esta uma regra, quase bvia, referente ao padro

de morte exponencial. Significa, simplesmente, que

necessrio tempo para destruir uma populao e, se houver muitas clulas, o tratamento

dever ser prolongado, visando a segurana da sua eliminao total.