UTILIZAO DE LEO DE GIRASSOL OZONIZADO NO TRATAMENTO DE CERATECTOMIA LAMELAR EM COEHOS Rodrigo Barbosa de Souza1 Duvaldo Eurides1, Csar Augusto

Garcia1, Lorena Borges Alves1, Jordana Almeida Santana1, Luiz Antnio Franco da Silva2, Benito Juarez Nunes Alves de Oliveira2, Luiz Augusto de Souza2,
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Faculdade de Medicina Veterinria. Universidade Federal de Uberlndia Escola de Veterinria. Universidade Federal de Gois

RESUMO Doze coelhos adultos da raa nova Zelndia foram separados em dois grupos e submetidos ceratectomia lamelar. Nos animais do grupo I, as leses corneanas foram tratadas com trs gotas de leo de girassol ozonizado, uma vez ao dia. As do grupo II, com antibitico tobramicina, de seis em seis horas. No ps-operatrio (PO) as crneas dos animais dos dois grupos foram avaliadas atravs de exames clnicos e mensuradas com paqumetro. Nos do grupo I ocorreu intensa opacidade e neovascularizao com discreta secreo e edema. A ferida corneana cicatrizou, aparentemente, aps 12 dias PO. No do grupo II notou-se intensa opacidade, secreo, edema e discreta neovascularizao, com cicatrizao aos 24 dias de PO. O leo de girassol ozonizado mostrou-se eficiente no tratamento de ceratectomia lamelar em coelhos por reduzir o perodo de cicatrizao. Palavras-chave: crnea, oznio, cicatrizao. INTRODUO Medicamentos como antibiticos, inibidores de colagenase, antiinflamatrios e imunossupressores tm sido utilizados para auxiliar no processo de cicatrizao de crneas. As ceratites ulcerativas extensas ou profundas exigem recobrimentos ou aplicao de adesivos sintticos (Eurides et al., 2003) e enxertos xenlogo (Eurides et al., 2006). O oznio, gs natural da atmosfera terrestre, a variedade do oxignio que contm trs tomos obtidos atravs de reao endotrmica (Sunnen, 2009). Ao sofrer decomposio o oznio transforma-se em O 2, ou combina com outros elementos por oxidao-reduo, formando compostos inorgnicos e gua (Valacchi, et al., 2005). Apresenta propriedades antiinflamatrias, anti-spticas, moduladora do estresse oxidativo, de melhoramento da circulao perifrica e de oxigenao celular (Bocci, 1997). Sua molcula possui boa capacidade de penetrao e difuso tecidual (Travagli, 2006). Objetivou-se avaliar a reparao cicatricial da crnea de coelhos submetidos ceratectomia lamelar e terapia com leo de girassol ozonizado, por meio de avaliaes clnicas e mensuraes da evoluo cicatricial. MATERIAL E MTODOS Acondicionou-se 200mL de o leo de girassol no gerador de oznio com capacidade para produo de 0,00023g/O3/minuto e alimentado em oxignio com 99,5% de pureza, presso de 200Kgf/cm2 e fluxo de 1,0L/minuto. O leo ozonizado foi mantido sob refrigerao a 5 oC. Doze coelhos adultos saudveis da raa Nova Zelndia foram separados em dois grupos de igual nmero. Realizou-se os procedimentos de rotina como anti-sepsia, anestesia (cetamina, 30mg/kg, IM e xilazina 0,5mg/kg, IM), anestesia tpica (tetracana 1%) e bloqueio retrobulbar (cloridrato de lidocana a 1% com cloridrato de bupivacana a 0,5%). Foi praticada, no olho esquerdo de todos os animais, ceratectomia lamelar com trepano de Castroviejo de 5,0mm X 0,3mm. Nas crneas dos animais do grupo I foram feitas administraes tpicas de trs gotas do leo ozonizado, uma vez ao dia, e nos do grupo II e do antibitico tobramicina, de duas em duas horas e pomada noite. No PO os coelhos foram mantidos com colar elisabetano e as crneas avaliadas a cada trs dias com fonte luminosa e lupa para avaliaes clnicas e mesuradas com paqumetro depois de coradas com fluorescena. RESULTADOS E DISCUSSO O uso de colrio anestsico objetivou a suplementao do protocolo anestsico, melhorando a desensibilizao da crnea e conjuntiva aos procedimentos cirrgicos. Ainda, o bloqueio retrobulbar permitiu a centralizao do globo ocular que facilitou os procedimentos operatrios (Laus et al., 2000). Foi removida uma rea de 6,5mm da crnea, porm devido presso intra-ocular a mdia da rea passou para 8,4mm. Portanto, ocasionou aumento do dimetro da ceratectomia dos animais de ambos os grupos. Na presena de fio de sutura na crnea e o trauma cirrgico com exposio das fibras nervosas que sensibiliza a conjuntiva palpebral (Kern, 1990) observado blefarospasmo (Laus et al., 2000; Eurides et al. 2003). Neste experimento, nos animais do grupo I essa caracterstica foi

notada a at o 2o dia de PO, sendo mais acentuada nos animais do grupo II, desaparecendo a partir do 4o dia. No 3o dia de PO observou-se que as crneas tratadas com leo de girassol ozonizado apresentavam discreta secreo serosa e edema, moderado lacrimejamento e opacidade e intensa neovascularizao. Nos do grupo II, medicados com tobramicina notou-se opacidade, lacrimejamento, edema, secreo serosa intensa e moderada neovascularizao. As leses corneanas dos animais de ambos os grupos (100%) manifestavam-se coradas com fluorescena. Nos do grupo I, a rea lesionada apresentava em mdia 2,5mm e de 6,78mm nos do grupo II. No 6 o dia, as crneas dos coelhos do grupo I exibiam discreta opacidade e intensa neovascularizao. Nos do grupo II, intensa opacidade, lacrimejamento, secreo serosa e neovascularizao e moderado edema. Neste momento, as leses em ambos os grupos (100%) apresentavam reagentes a fluorescena. Nas do grupo I a rea apresentava 0,85mm e nos do grupo II de 5,08mm em mdia. O edema de crnea e a opacidade circunjacente rea da leso so esperados, pois a ceratectomia provoca a quebra da integridade da camada epitelial, alterando a manuteno da osmolaridade do estroma anterior. As crneas dos animais do grupo I, no 9 o dia de PO, exibiam apenas moderada opacidade e neovascularizao. As leses em quatro coelhos (66,66%) foram positivas a fluorescena, com a rea 0,24mm em mdia. Nos do grupo II, com intensa opacidade e lacrimejamento, moderada secreo serosa e intensa neovascularizao. Em seis coelhos (100%) a leso apresentava positiva a fluorescena com 4,08mm em mdia. Aps 12 dias de PO as crneas tratadas com leo de girassol ozonizado se encontravam com discreta opacidade e neovascularizao, sendo que apenas um dos coelhos (16,66%) a leso foi positivo a fluorescena com rea de 0,3mm em mdia. Nas crneas dos coelhos do grupo II (100%), notou-se moderada opacidade e neovascularizao, discreto lacrimejamento, secreo serosa, edema e positivos a fluorescena com a rea medindo 3,37mm em mdia (Figuras 1 e 2). Nos tratados com tobramicina notou-se ausncia de reao a fluorescena no 24 o de PO e uma rea de colorao esbranquiada no local da ceratectomia.
Evoluo cicatricial (mm) 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 0 3 6 9 12 leo de girassol ozonizado Tobramicina

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Perodo (dias)

Figura 1. Mdia dos perodos da evoluo e reparao cicatricial de crneas de coelhos submetidas ceratectomia lamelar tratada com leo de girassol ozonizado e com tobramicina.

Figura 2. Aspectos da evoluo cicatricial de crneas de coelhos submetidas ceratectomia lamelar. A crnea tratada com leo ozonizado no 6 o dia de PO apresentava pequena rea positiva a fluorescena (A) e com tobramicina nota-se intensa rea corada (C). No 12 o dia com a ozonioterapia observa-se ausncia de colorao (B) e reagente com o antibitico (D).

No tratamento de lceras de crneas de coelhos com implante de membrana amnitica canina (Pontes et al., 2007), cianocrilato (Eurides et al., 2003) e cpsula esplnica de bovino (Eurides et al., 2006), foi observado secreo e lacrimejamento at o 13 o dia e opacidade at o 15o dia de PO. O oznio, devido a sua capacidade de difuso e penetrao tecidual (Travagli, 2006) e eficincia da oxigenao celular (Bocci, 1997), pode ter otimizado a migrao das clulas epiteliais para a rea lesada com diminuio da opacidade. O aumento da circulao perifrica e ao anti-sptica provocada pelo oznio, possivelmente estimulou a neovascularizao, fibroplasia e mitose celular. Enxertos conjuntivais livres no reparo de leses corneanas ocasionam opacidade do implante e cicatrizes na crnea (Kuhns, 1979). Com implante de cpsula esplnica de bovino conservada em glicerina foi verificado opacidade corneal at o 40 o o dia de PO (Eurides et al., 2006). Neste experimento, com a utilizao do leo de girassol ozonizado foi observado boa transparncia corneal decorridos 12 dias de PO. As crneas apresentavam moderada neovascularizao e opacidade. Fato que pode ser atribudo a oxigenao celular que contribuiu com a migrao das clulas epiteliais e de linfcitos T que participam da neovascularizao (Bocci, 1997). Entretanto, as crneas tratadas com tobramicina apresentavam discreta opacidade at o 24 o dias de PO. Possivelmente, devido aos resultados obtidos, o leo de girassol utilizado neste experimento permitiu a manuteno e a ao do oznio na cicatrizao das crneas. Nenhum dos coelhos apresentou sinais de processo infeccioso ocular no ps-operatrio. Nos animais do grupo II, o achado pode ser justificado pelo esquema de administrao oftlmica do antibitico tobramicina. Nos do grupo I, pode ser devido ao oznio que apresenta propriedades antiinflamatrias, anti-sptica e antimicrobiana que ocorre por lise da membrana dos agentes aps oxidao (Bocci, 1997). CONCLUSO A administrao tpica do leo de girassol ozonizado mostrou-se eficiente na reparao de ceratectomia lamelar em coelhos por reduzir o perodo de cicatrizao. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS Bocci, V. Ozone as a bioregulator. Pharmacology and toxicology of ozonetherapy today. Journal of Biological Regulators and Homeostatic Agents, v.10, n.2/3, p. 31-53, 1997. Eurides, D. et al. Utilizao da cpsula esplnica de bovino na ceratoplastia lamelar em coelhos. Arq. Cin. Vet. Zool. Unipar. v.9, n,2, p.117-121, 2006. Eurides, D. et al. Utilizao do adesivo N-butil cianoacrilato e o do fio poliglactina na rafia de crnea em coelhos (Oryctolagus cunicullus) Braz. J. vet. Res. anim. Sci., v.40, n.p.334-340, 2003. Kuhns, E.L. Conjuntival pactch graft for treatment of corneal lesions in dogs. Medical Vet. Practice, v.60, p.301-307, 1979. Kern, T.J. Ulcerative keratitis. Vet. Clin. North Am.Smal. An. Prac., v.20, n.3, p.645-666, 1990. Laus, J.L. et al. Emprego de escama de sardinha (Sardinella brasiliensis - STEIDACHNER, 1859), conservada em glicerina, em ceratoplastias lamelares experimentais em ces. Braz. J. vet. Res. anim. Sci. [online]. 2000, v.37, n.1, pp.00-00. ISSN 1413-9596. doi: 10.1590/S141395962000000100007. Pontes, K.C.S. Membrana amnitica canina utilizada como bandagem em lcera superficial de crnea de coelhos. Aspectos clnicos. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec., v.60, n.5, 2008. Sunnen, G.V. Ozone in medicine: overview and future directions. Disponvel em: http://www.ozoneservice.com. Acesso em: 02 set. 2009. Travagli, V. et al. A realistic evaluation of the action of ozone on whole human blood. International Journal Biological Macromolecules, v.39, p. 317-320, 2006. Disponvel em: http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6T7J-4JKR6CR1&_user=687360&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_sort=d&view=c&_version=1&_urlVersion=0&_useri d=687360&md5=8967c9ec11bdffae1f5a82b0f8f85824. Acesso em: 04 fev. 2009. Valacchi, G. et al. The dual action of ozone on the skin. British J. Dermatol., v.153, p. 1096-1100, 2005.