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Pós-graduação em Ciência dos Alimentos - UFLA

Biotecnologia das Fermentações – Prof. Rosane / Prof. Carla


Aluno - Alex Uzêda de Magalhães
Isolamento de bactérias ácido láticas termofílicas
cultiváveis de queijos produzidos com starter
mesofílico e comparação molecular com
produtos lácteos relacionados com cepas de
Lactobacillus helveticus.

M.P. Jensen, Y. Ardo¨ and F.K. Vogensen

Department of Food Science, Faculty of Life Sciences,


University of Copenhagen, Frederiksberg C, Denmark
Introdução
• Bactérias termofílicas são usadas
como culturas adjuntas na cura de
queijos de massa cozida a
temperaturas menos altas.
• Estas bactérias são rapidamente
substituidas por mesofílicos não
starter no processo de cura
Introdução
• O trabalho enfatiza as cepas de
lactobacillus hevelticus em queijos
curados comerciais produzidos com
starter mesofílicos.
Materiais e Métodos
• Amostras
– 2 marcas de queijo cheddar e 5 queijos
semi duros
• Isolamento de lactobaccilus helveticus
– Amostragem 10g
– Homogeneização
– Diluição em série
– Meio MRS (42oC, aerobiose, 3 dias)
Materiais e Métodos
• Isolamento de bactérias termofílicas
– Amostra de 50g
– Homogeneizado em 50ml
– Meio MRS (42oC , anaerobiose, 48h)
• Cepas de Lact. Hevelticus de
coleções.
– MRS (40oC, anaerobiose, 48h)
Materiais e Métodos
• REP-PCR
– A técnica de REP-PCR é baseada no uso de
primers sintetizados a partir de sequências
repetidas de DNA, chamadas depalindrômicas
extragênicas repetidas (REP), e têm sido
descrita como um método o qual gera
impressões digitais (fingerprints) de DNA que
podem diferenciar bactérias entre gêneros e
espécies.
– Método Christiansen et. Al (2006)
Materiais e Métodos
• O sequenciamento do gene 16S rRNA
– determina a posição taxonômica das estirpes
– Tuma et. Al (2007)
• PFGE (Pulse Field Gel Eletroforesis)
– técnica usada para separar essencialmente
cadeias longas de DNA de acordo com seus
tamanho
– Jacobsen et. Al (1999)
Materiais e Métodos
• Análise de Dados
– Software Bionumerics ver. 4.5
Resultados
Discussão
• Pequeno número de bactérias termóofilas nas
amostras
• Rep-PCR é o método mais rápido.
• Provavelmente as bactérias encontradas foram
oriundas de contaminação.
• PFGE é o método mais descriminatório
• Foi encontrada uma nova versão mutante de
Lact. Helveticus (MI 2359)