Biotecnologia das Fermentações – Prof. Rosane / Prof. Carla
Aluno - Alex Uzêda de Magalhães Isolamento de bactérias ácido láticas termofílicas cultiváveis de queijos produzidos com starter mesofílico e comparação molecular com produtos lácteos relacionados com cepas de Lactobacillus helveticus.
M.P. Jensen, Y. Ardo¨ and F.K. Vogensen
Department of Food Science, Faculty of Life Sciences,
University of Copenhagen, Frederiksberg C, Denmark Introdução • Bactérias termofílicas são usadas como culturas adjuntas na cura de queijos de massa cozida a temperaturas menos altas. • Estas bactérias são rapidamente substituidas por mesofílicos não starter no processo de cura Introdução • O trabalho enfatiza as cepas de lactobacillus hevelticus em queijos curados comerciais produzidos com starter mesofílicos. Materiais e Métodos • Amostras – 2 marcas de queijo cheddar e 5 queijos semi duros • Isolamento de lactobaccilus helveticus – Amostragem 10g – Homogeneização – Diluição em série – Meio MRS (42oC, aerobiose, 3 dias) Materiais e Métodos • Isolamento de bactérias termofílicas – Amostra de 50g – Homogeneizado em 50ml – Meio MRS (42oC , anaerobiose, 48h) • Cepas de Lact. Hevelticus de coleções. – MRS (40oC, anaerobiose, 48h) Materiais e Métodos • REP-PCR – A técnica de REP-PCR é baseada no uso de primers sintetizados a partir de sequências repetidas de DNA, chamadas depalindrômicas extragênicas repetidas (REP), e têm sido descrita como um método o qual gera impressões digitais (fingerprints) de DNA que podem diferenciar bactérias entre gêneros e espécies. – Método Christiansen et. Al (2006) Materiais e Métodos • O sequenciamento do gene 16S rRNA – determina a posição taxonômica das estirpes – Tuma et. Al (2007) • PFGE (Pulse Field Gel Eletroforesis) – técnica usada para separar essencialmente cadeias longas de DNA de acordo com seus tamanho – Jacobsen et. Al (1999) Materiais e Métodos • Análise de Dados – Software Bionumerics ver. 4.5 Resultados Discussão • Pequeno número de bactérias termóofilas nas amostras • Rep-PCR é o método mais rápido. • Provavelmente as bactérias encontradas foram oriundas de contaminação. • PFGE é o método mais descriminatório • Foi encontrada uma nova versão mutante de Lact. Helveticus (MI 2359)