MESTRADO INTEGRADO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICA

FARMACOGNOSIA E FITOQUÍMICA II

AULA PRÁTICA

TRABALHO 3ºA

ÓLEO DE PEIXE RICO EM ÓMEGA-3

FUNDAMENTO

O óleo de peixe rico em ómega-3 é um óleo purificado refrigerado e

desodorizado extraído de peixes gordos das famílias Engraulidae,
Carangidae, Clupeidae, Osmeridae, Scombridae, Ammoditydae e Gadidae,
isto é respectivamente, anchova, chicharinho, sardinhas, cavala, salmão,
arenque e bacalhau.
Sob o ponto de vista de nomenclatura os ácidos gordos insaturados
designam-se em nomenclatura vulgar por -3 (ómega 3) todos os ácidos
gordos cuja última dupla ligação se encontra a 3 átomos de carbono do
metilo terminal da cadeia.
Ex:

OH

Ácido timnodónico (AEP)

São considerados ácidos gordos Ómega-3 os ácidos:

-linolénico (cis,cis,cis-9,12,15-octadecanotrienóico) (C18:3 n-3)

Morótico (cis,cis,cis,cis-4,8,12,15-octadecatetrenóico) (C18:4 n-3)

Eicosatetrenóico (cis,cis,cis,cis-4,8,12,15-eicosatetrenóico) (C20:4 n-3)

Timnodónico (cis,cis,cis,cis,cis-5,8,11,14,17-eicosapentenóico) (C20:5 n-3)

(AEP)

Heneicosapentenóico(cis,cis,cis,cis,cis-5,8,11,14,18-heneicosapentenóico)
(C21:5 n-3)
Clupanodónico (cis,cis,cis,cis,cis-7,10,13,16,19 docosapentenóico) (C22:5
n-3)

Cervónico (cis,cis,cis,cis,cis,cis-4,7,10,13,16,19-docosahexenóico) (C22:6

n-3) (ADH).
Estes ácidos gordos são essenciais porque participam na construção
da membrana celular e na sua funcionalidade, intervindo na regulação do
metabolismo do colesterol, sendo precursores dos ácidos eicosanóicos que
são precursores das prostaglandinas, dos tromboxanos-3 e dos
leucotrienos-5, substâncias que funcionam como hormonas implicadas nos
processos inflamatórios, de cicatrização de feridas e agregação das
plaquetas sanguíneas.

DOSEAMENTO DE AEP E ADH (método modificado)

FUNDAMENTO
Ao ácidos gordos podem ser separados e doseados por cromatografia
gasosa de alta resolução usando como fase estacionária um
polietilenoglicol de elevado peso molecular, Macrogol 20.000 (Carbowax
20M) e como eluente Hélio de alta pureza (N50)

REAGENTES

Éster metílico do ácido 5Z,8Z,11Z,14Z,17Z- eicosapentenóico (éster

metílico do AEP)
Éster metílico do ácido 4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexenóico (éster
metílico do ADH)

PADRÃO INTERNO

Tricosanoato de metilo

SOLUÇÃO SOLVENTE

Dissolver 50 mg de trimetilpentano (isoctano) em 1000 ml de butil-

hidroxitolueno

SOLUÇÃO PADRÃO MÃE

1-Dissolver 55,0 mg do éster metílico do AEP, 70,0 mg do padrão

interno e 90,0 mg do éster metílico do ADH num balão aferido de
 10,0 ml na solução solvente e completar o volume com a mesma
solução

SOLUÇÃO PADRÃO DE TRABALHO A

1-Diluir 100 l da solução padrão mãe para um balão de 25,0 ml e

completar o volume com a solução solvente

SOLUÇÃO MÃE DA AMOSTRA

1-Dissolver 0,500 g da amostra, 70,0 mg de padrão interno num balão

aferido de 10,0 ml com a mistura solvente

SOLUÇÃO DE TRABALHO A DA AMOSTRA

1-Diluir 100 l da solução padrão da amostra para um balão de 25 ml e

completar o volume com a solução solvente

FASE ESTACIONÁRIA

Coluna de Carbowax 20M de 30mx0,25mmx0,2 m

FASE MÓVEL

Hélio N50 a 1ml/min

DETECTOR

Detector de Ionização de Chama a 250ºC

INJECTOR

Sistema de split-splitless a 250ºC

INJECÇÃO

1 l, usando o sistema de barril no caso da injecção ser manual

PROGRAMA

Temperatura inicial 80ºC

Aumentar a temperatura até 150ºC, com uma velocidade de 10ºC/min
Aumentar a temperatura até 230ºC, com uma velocidade de 6ºC/min,
durante 30 min

TÉCNICA

1-Ligar o aparelho seguindo as instruções do fabricante

2-Montar a coluna de cromatografia
3-Medir o fluxo do Hélio no sistema de split-splitless
4-Medir o fluxo de hélo na coluna de cromatografia
5-Colocar o detector e o injector à temperatura de 250ºC
6-Activar a coluna por aquecimento com a velocidade de 1ºC/min até 20ºC
abaixo da temperatura máxima permitida pelo fabricante (normalmente de
um dia para o outro)
7-Proceder à injecção de 1 l de eluente, acertando a atenuação da detecção
8-Injectar mais duas vezes o eluente
9-Injectar duas vezes 1 l do padrão de trabalho B
10-Injectar duas vezes 1 l da solução de trabalho B da amostra
11-Comparar os cromatogramas com o da Figura 1 e determinar a
concentração de AEP e ADH na amostra
 Figura 1
LIMITES

AEP, expresso em trigliceridos, mínimo 13,0%

ADH, expresso em trigliceridos, mínimo 9,0%

BIBLIOGRAFIA

Farmacopeia Portuguesa VIII edição pág 2608-2610

http://nogf.san-lorenzo.com/files/2007/07/ilipidialimentari.pdf Óleos
alimentares
http://pt.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_eicosapentaen%C3%B3ico
ácido timnodónico
http://www.gnldevents.com/pdf/SOPlus_8pg_SPN_sm.pdf Óleo de salmão
Gomez e al., estabilid oxidativa de huevos enriquecidos com ácidos grasos
poliinsaturados omega 3, frente a antioxidantes naturales, Revista
Brasileira de Ciências Farmacêuticas, vol 39,nº4, Out/Dez 2003