Livro Tec de Analises Clínicas

LIDANGALIA NHA GUTI MADWALI / DHIBUKU DHA LYO KUDZIVA MADHULY / A BUKU GO KAMBA A MABABYI
Provncia de Inhambane, Moambique

MANUAL DE LABORATRIO CLNICO
LIDANGALIA NHA GUTI MADWALI / DHIBUKU DHA LYO KUDZIVA MADHULY / A BUKU GO KAMBA A MABABYI
Provncia de Inhambane, Moambique
MANUAL DE LABORATRIO CLNICO
COORDENAO DO CONTEDO DO MANUAL
Unitat de Medicina Tropical i Salut Internacional de Drassanes (UMTSID), Institut Catal de la Salut:
Jordi Gmez i Prat, UMTSID
Juan Cabezos Otn, UMTSID
Roser Navarro Garca, UMTSID
PARTICIPARAM NA ELABORAO DO CONTEDO
Textos e ilustraes dos participantes dos cursos
1 curso:
Enosse Jossias, Zamite Francisco, Ral Justino Ajuda, Raul Leonardo Nhampossa, Sebastio Quilimbe Hembe, Maria de Lurdes, Ruben
Sebastio Bomba, Joaquim Filimone, Ins Raquel Justino, Mussa Ussumane Analgy, Jose Paulo, Salomo R. Mondlane, Julio Amaral
Paulino, Jose Niquicene No, Horpandia Rosa Francisco, Valdemiro Domingos, Lucia Cndida R. Florncia, Isaac Miguel Foguete,
Belarmina R.Suplante, Ivone Sitoi, Celeste Ernesto, Arlindo Antonio, Samuel Alfiado Mucambe.
2 curso:
Afonso Pompeu Matola, Alzira Elias Simo Cambula, Alzira Xavier Mondlane, Armando Gomeio Fomele, Belinha Alfiado, Fenicela,
Carlitos Armando Mazive, Celso Barbosa Fco. Massingue, Chaharizade Chutumia, Eugenio Sultano Mussa, Fernanda Amade, Florinda
Damio Balane, Incio Zero Fernando, Joo Dinis Magals, Joaquim Jale, Joaquim Samuel, Matsinhe, Lucio Antonio Pedro, Menezes
Francisco Tomo Mesa, Naldo Amrico, Mudumela, Olinda Violante Licumbe, Pedro Elias Nassone, Rebeca Francisco, Resia Manuel
Chauque, Tiago Jos, Virgulino Jorge Homo.
Textos e ilustraes tcnicas
Jordi Gmez i Prat, UMTSID
Juan Cabezos Otn, UMTSID
Naftal Mrio Matusse, Centro de Formao de Sade de Inhambane
Roser Navarro Garca, UMTSID
Rui Alvaro Serra da Costa Reis, Agncia Catalana de Cooperaci al Desenvolupament, Moambique
. Vicens Martnez, Medicus Mundi Catalunya
REVISO TCNICA
Begoa Trevio Maruri, UMTSID
Francesc Zarzuela Serrat, UMTSID
Merc Claret Traid, Mster Medicina Tropical i Salud Internacional UAB-ICS
PROJETO GRFICO E MAQUETAO
Suzana Cersosimo
CRDITOS
Manual de Laboratrio Clnico
COM O APOIO DA GENERALITAT DE CATALUNHA E DA DIREO PROVINCIAL DE SADE DE INHAMBANE NO MARCO DO
PROGRAMA DE COOPERAO DIRETA NO SETOR DA SADE NA PROVNCIA DE INHAMBANE.
Agncia Catalana de Cooperaci al Desenvolupament
Departament de Salut
Institut dEstudis de la Salut
Unitat de Medicina Tropical i Salut Internacional de Drassanes, Institut Catal de la Salut
Medicus Mundi Catalunha
Generalitat de Catalunya. Departament de Salut
Edita: Institut dEstudis de la Salut
Autors: Institut Catal de la Salut - Unitat de Medicina Tropical i Salut Internacional Drassanes
Jordi Gmez i Prat, Juan Cabezos Otn, Roser Navarro Garca
Primera edici: Barcelona, novembre de 2008
Tiratge: 1000 exemplars
Dipsit legal:
Disseny: Suzana Cersosimo
Impressi:
Ficha Bibliogrfica
Contato
Unitat de Medicina Tropical i Salut Internacional de Drassanes (UMTSID)
jordigp.bcn.ics@gencat.cat
NDICE
PREFCIO
INTRODUO
CAPTULO I O SISTEMA DE SADE EM INHAMBANE E MOAMBIQUE
Organizao do sistema de sade na provncia de Inhambane
Descrio dos diferentes nveis de atendimento
O papel do laboratrio dentro do sistema de sade
Necessidades de um laboratrio
Exerccios
CAPTULO II O LABORATRIO
O nosso laboratrio
O tcnico de laboratrio
As zonas do laboratrio
Os mtodos diagnsticos
O microscpio
Laboratrio no dia-a-dia
Consideraes gerais
Organizao geral
Segurana no laboratrio
Material
Exerccios
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CAPTULO III TCNICAS DE LABORATRIO
Sangue
Consideraes gerais sobre a hematologia
Consideraes gerais sobre o estudo hemoparasitolgico
Tcnicas utilizadas para o diagnstico
Descrio das tcnicas de diagnstico
Fichas: Parasitas do sangue
Exerccios
Fezes
Consideraes gerais sobre o estudo coproparasitolgico
Fichas: Parasitas das fezes
Exerccios
Urina
Consideraes gerais sobre a urina
Fichas: Parasitas da urina
Exerccios
Escarro
Consideraes gerais sobre a tuberculose
Ficha: Parasita do escarro
Exerccios
CAPTULO IV VAMOS COMPARTIR A INFORMAO / FORMANDO OUTROS TCNICOS
Como usar o livro?
Como usar as chas?
Orientaes gerais
Respostas exerccios
Fotos
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PREFCIO
Manual de Formao Contnua para Tcnicos de Laboratrio
Tropical na Provncia de Inhambane
A Agncia Catal de Cooperao para o Desenvolvimento
(a ACCD) gere a poltica de cooperao para o desenvolvimento,
a construo da paz e aco humanitria da Generalitat
da Catalunha de modo a contribuir para modificar as
relaes norte-sul.
A ACCD defende a perspectiva holstica da sade assim como o
apoio aos diferentes nveis de ateno sanitria. Neste sentido,
partilha os princpios expressos na Declarao de Alma Ata e
no objetivo de Sade para todos do ano 1978 assim como na
Cimeira Mundial sobre Desenvolvimento Social de Copenhaga do
ano de 1995 onde se estabeleceu o compromisso de alcanar o
grau mais alto possvel de sade desde uma perspectiva global
e o acesso de todas as pessoas ateno primria de sade,
retificando as desigualdades sociais.
O Plano Director da Cooperao para o Desenvolvimento da
Generalitat da Catalunha determina Moambique como um pas
prioritrio dentro da rea da frica Subsariana assim como a
sade como objetivo estratgico de desenvolvimento atravs da
cooperao na promoo e no fortalecimento dos sistemas de
ateno sanitria autctonos. O objetivo da cooperao catal ,
portanto, o de complementar as prprias iniciativas dos pases
receptores com a finalidade de procurar complementaridades
e impulsionar sinergias respeitando em todo o momento os
princpios do Comit de Ajuda ao Desenvolvimento (CAD)
que reconhece os pases receptores como aqueles aos quais
corresponde fixar as polticas e prioridades de desenvolvimento.
Em janeiro de 2006, a ACCD assina um Acordo Marco de
colaborao com a Direo Provincial de Sade de Inhambane
com o objetivo de institucionalizar o acompanhamento da ACCD
estratgia definida pela DPS-I de acordo com o MISAU de
melhoria do estado de sade da populao de Inhambane no
marco temporal 2005-2007. Esta estratgia de apoio integral
divide-se em trs objetivos especficos que so a melhoria do
acesso das populaes rede sanitria; a melhoria na gesto
de recursos e a melhoria na prestao e ateno nos servios
de sade.
Uma das atividades desenvolvidas durante o ano de 2007 foi a
formao contnua de tcnicos de laboratrio tropical no Centro
de Formao da Direo Provincial de Inhambane. A atividade
permitiu que especialistas da Unidade de Medicina Tropical
e Sade Internacional de Drassanes partilhassem as suas
experincias e conhecimentos com os tcnicos de laboratrio
dos diversos distritos da provncia de Inhambane. O resultado
das formaes, est presente neste manual que tem como
objetivo ser um material de referncia para a formao contnua
em tcnicos de laboratrio.
Andreu Felip i Ventura
Director de l'ACCD
8
O Departamento de Sade da Generalitat da Catalunha,
no seu papel de apoio identificao e gesto dos projectos
de cooperao em matria de sade da Agncia Catalana de
Cooperaci i Desenvolupament (Agncia Catal de Cooperao
para o Desenvolvimento), e o Institut d'Estudis de la Salut
(Instituto de Estudos da Sade), rgo autnomo adscrito ao
Departamento de Sade que planifica, desenha e gestiona a
formao dos profissionais do sistema sanitrio catalo, tem o
prazer de apresentar este Manual de Formao Contnua para os
Tcnicos do Laboratrio Tropical da Provncia de Inhambane.
A realizao deste manual um exemplo de boas prticas
no campo da cooperao em matria de sade e, mais
concretamente, no mbito da formao dos laboratrios clnicos.
Estes so, sem dvida, uma ferramenta indispensvel de apoio
a toda a estratgia de aco para a sade, atravs da proviso
de diagnsticos cuidados, neste caso, no que concerne s
doenas infecciosas e parasitrias. A sua misso centra-se no
s na disponibilidade de tcnicas e de material de diagnstico,
ou na organizao dos laboratrios para que estes tenham um
funcionamento eficiente, como tambm, e de uma maneira
muito especial, na existncia dos recursos humanos necessrios
para garantir uma informao fivel e de qualidade, que facilite
a tomada de decises clnicas, assim como o desenvolvimento
efectivo dos programas de aco comunitria.
A colaborao entre os tcnicos dos laboratrios do Centro de
Formao da Direco Provincial de Inhambane e da Unidade
de Medicina Tropical e Sade Internacional de Drassanes, em
Barcelona, permitiu a redaco deste manual, que aborda com
rigor e clareza, e de forma muito prtica e aplicada, os principais
aspectos que tornaro possvel o funcionamento ptimo de
um laboratrio clnico tropical no meio rural e urbano em
Moambique.
Desde o ponto de vista pedaggico, este Manual resulta um
material muito valioso para fortalecer a rede de formadores do
pas que tm que levar a cabo atividades educativas a pessoas
referentes dos laboratrios clnicos.
Como Departamento de Sade da Catalunha, sentimo-nos muito
orgulhosos por termos contribudo para tornar possvel este
Manual, uma ferramenta desenvolvida atravs da participao e
da cooperao internacional. Por isso, gostaramos de agradecer
a todos os profissionais que o fizeram possvel, pelo seu
excelente trabalho e pela generosidade do seu esforo conjunto,
que culminou numa ferramenta que, a nossa convico, ir
representar um passo em frente na consolidao dos avanos na
melhoria da sade de todos os cidados e cidads da Provncia
de Inhambane, e tambm um exemplo de referncia para outras
iniciativas semelhantes em Moambique.
Na Catalunha, renovamos assim o nosso compromisso de
continuarmos a fortalecer, atravs da cooperao internacional,
os recursos humanos e tcnicos que iro tornar possvel um
mundo mais justo e solidrio e que possa desfrutar de melhores
nveis de sade.

Mateu Huguet i Recasens
Director
Institut dEstudis de la Salut
9
10
INTRODUO
Nos meses de fevereiro e maro de 2007 foi realizado um curso para capacitao de tcnicos de laboratrio da Provncia de
Inhambane, Moambique. O objetivo geral da formao realizada foi: capacitar os tcnicos para diagnosticar com fundamento as
doenas infecciosas e parasitrias, ter a capacidade de organizar e realizar a gesto de um laboratrio em meio rural e urbano e
aprender a desenvolver uma estratgia para formar outras pessoas no mbito do diagnstico de doenas infecciosas e parasitrias.
Foi portanto, com este ltimo objetivo, que desenvolveu-se uma metodologia participativa com os participantes do curso como
complemento das aulas tericas e prticas de laboratrio.
Assim, desenvolveu-se um programa que abordou a temtica do sistema de sade de Inhambane na formao especfica de
laboratrio e finalmente, as necessidades de formao e estratgias de divulgao do contedo do curso.
No primeiro dia debateu-se sobre o sistema de sade existente na provncia ficando como ponto claro a relao entre o laboratrio
e todo o sistema de sade, em especial com os clnicos. No segundo e terceiro dias foram discutidos os temas principais que
configuram o contedo deste manual, desde um ponto de vista da anlise da realidade e do aprendido nos dias do curso. A partir do
quarto dia, e depois de discutir o entrosamento do laboratrio no sistema de sade e todas as suas funes, assim como as principais
tcnicas utilizadas, iniciamos o trabalho de construo do material da aprendizagem efetuada.
A primeira pergunta foi: Precisamos de um material? A resposta unnime foi que sim. A seguinte pergunta foi: Que tipo de material?
Responderam: "Uma brochura, livro feito de arranjos daquilo que foi til durante a formao, vai nos servir no campo.
Perguntamos posteriormente: Para quem? Eles responderam: "Para eles mesmos, para formar algum com segurana (estagirios,
outros tcnicos) e para discutir com o clnico/mdico".
INTRODUO
Antes do encerramento do curso, foi feito um concurso para escolher o nome do livro, os participantes apresentaram possveis
nomes. O nome final foi escolhido por votao.
As propostas foram as seguintes:
Autor / Nome do livro / Votos
Joaquim Jale / Manual de laboratrio clnico8
Joaquim Samuel Matsinhe / Manual tcnico do laboratrio para as doenas tropicais5
Tiago Jos / Manual de tcnicas de laboratrio3
Rebeca Francisco / Tcnicas bsicas de um laboratrio3
Pedro Elias Nassone / Manual de apoio ao tcnico de laboratrio2
Eugenio Sultano Mussa / Manual prtico de doenas tropicais2
Alzira Xavier Mondlane / O dia-a-dia no nosso laboratrio1
Fernanda Amade / Eu no laboratrio1
Este o incio de um caminho que precisa ser seguido para atingir os objetivos de forma natural e duradoura.
Parabns pelo caminho iniciado!
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Captulo I
Organizao do sistema de sade na Provncia de Inhambane
Exerccios
O SISTEMA DE SADE EM INHAMBANE E MOAMBIQUE
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O Sistema de Sade em Inhambane e Moambique
I. Aldeia comunal. Pacientes a caminho do Posto de Sade.
II. Posto de Sade manda uma gula de transferncia para o paciente recorrer ao Centro de Sade.
III. O Centro de Sade desconsegue e encaminha o caso complicado ao Hospital Rural.
IV. O Hospital Rural pede ao paciente que se encaminhe ao Hospital Provincial para ecografa.
V. O Hospital Provincial cuida do atendimento dos casos.
H
I
S
T
R
I
A
O SISTEMA DE SADE EM INHAMBANE E MOAMBIQUE
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Em Moambique, o SNS (Sistema Nacional de Sade) funciona como um sistema misto pblico/privado , envolvendo vrios
Ministrios, sendo o do MISAU (Ministrio de Sade de Moambique) o mais relevante. As funes do MISAU esto compartilhadas
pelos rgos Centrais, pelas Direes Provinciais de Sade e pelas Direes Distritais de Sade.
Conforme a complexidade dos cuidados de sade prestados, os servios se organizam em 4 nveis:
1 REDE PRIMRIA
ZONA RURAL
Centro de Sade Rural tipo II / CSR-II
Centro de Sade Rural tipo I / CSR-I
ZONA URBANA
Centro de Sade Urbano tipo C (com ou sem maternidade tipo II) / CSU-C
Centro de Sade Urbano tipo B (com ou sem maternidade tipo II ou I) / CSU-B
Centro de Sade Urbano tipo A (com ou sem maternidade tipo II ou I) / CSU-A
MATERNIDADES EM ZONA URBANA
Maternidade tipo II anexa a um CSU tipo B ou C / Maternidade-II
Maternidade tipo I anexa a um CSU tipo A ou B / Maternidade-I
2 REDE SECUNDRIA
Hospital Distrital / HD
Hospital Rural / HR
Hospital Geral / HG
3 REDE TERCIRIA
Hospital Provincial / HP
4 REDE QUATERNRIA
Hospital Especializado / HE
Hospital Central / HC
A rede sanitria nacional abrange umas 1200 Unidades Sanitrias (US).
Organizao do sistema de sade na Provncia de Inhambane
O sistema de sade est organizado seguindo referncias.
Os pacientes, em um primeiro momento vo ao Posto de Sade mais prximo que atua com os primeiros socorros. Se no
resolver a pessoa encaminhada para o Centro de Sade, que vai fazer a mesma atuao, se no resolver encaminhada
para o Hospital Rural e finalmente para o Hospital Provincial.
Posto de Sade ==> Centro de Sade ==> Hospital Rural ==> Hospital Provincial
16
Centro de Sade Rural de Jangamo
Hospital Rural Chicuque
Hospital Rural Chicuque
Faa suas observaes
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A rede sanitria de Inhambane est formada por 1 hospital de nvel tercirio, 3 hospitais de nvel secundrio e 103 unidades
sanitrias de nvel primrio.
Na escala de competncias as unidades sanitrias organizam-se em funo das diferentes atividades, contando com
um pessoal mnimo qualificado
1
.
DESCRIO
CENTRO DE SADE RURAL II (CSR-II)
Educao e promoo.
Controle de qualidade da gua.
Preveno, controle e vigilncia das doenas mais comuns.
SMI, consultas, vacinaes, rehidratao oral e assistncia ao parto.
Atividades curativas, consultas e distribuio de medicamentos; tratamentos; atendimento urgncias; transferncia para nveis
superiores.
Recolha e tratamento de dados.
Gesto de recursos.
Pessoal qualificado: 1 Agente de Medicina / 1 Enfermeira de Sade Materno-Infantil ou Parteira Elementar.
CENTRO DE SADE RURAL I (CSR-I)
Mesmas atividades que o CSR-II mais:
Cuidados em regime de internamento.
Testes laboratoriais da competncia do Agente de Laboratrio.
Cuidados de odonto-estomatologa e promoo da sade oral.
Atendimento e promoo da sade escolar.
Superviso e apoio s unidades sanitrias perifricas.
Inspees sanitrias.
Exames mdicos a trabalhadores, escolares e esportistas.
Pessoal qualificado: 1 Tcnico de Medicina / 1 Agente de Medicina / 1 Agente de Medicina Preventiva / 2-3 Enfermeiros Bsicos ou
Enfermeiros Elementares / 2-3 Enfermeiras de Sade Materno-Infantil Bsicas ou Parteiras Elementares / 1 Agente de Laboratrio ou
Microscopista / 1 Agente de Estomatologia / 1 Agente de Farmcia / 1 Agente de Radiologia / 1 Agente de Administrao Hospitalar.
1 - Caracterizao tcnica, enunciado de funes especificas, critrios e mecanismos para a classificao das instituies do SNS, aprovada pelo Diploma Ministerial
n 127/2002 MISAU, 2002, INM.
Segundo os participantes, na Provncia existem diferentes nveis de atendimento. Os principais so:
Hospital Provincial: (Hospital Inhambane). Presena de mdico e laboratrio. Tem maior capacidade, maior nmero e
diversidade de setores.
Hospitais Rurais: (Chicuque, Vilankulo). Presena de mdico e laboratrio.
Centros de Sade: Tem dois nveis diferentes (I e II). Em funo do nvel pode ter internao ou no. Nos Centros de Sade j
tem laboratrio e clnico. As vezes tambm tem mdico.
Postos de Sade: Os Postos de Sade normalmente tm s um clnico (sem mdico nem laboratrio) e tm a funo de
realizar os primeiros socorros.
A diferena principal est em funo dos nveis, capacidade, quantidade de setores e equipamentos.
D
E
P
O
I
M
E
N
T
O
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HOSPITAL DISTRITAL (HD)
Acolhimento e admisso de doentes da sua rea de influncia.
Preveno, tratamento e controle das principais doenas endmicas.
Diagnstico clnico por clnica geral atravs dos seguintes apoios:
- Testes laboratoriais da competncia do Tcnico de Laboratrio
- Radiodiagnstico
- Outros exames complementares simples
Cuidados de urgncia em regime de 24 horas em medicina e traumatologia que no impliquem grandes cirurgias.
Cuidados clnicos em regime de ambulatrio de doentes referidos.
Cuidados clnicos em regime de internamento de doentes referidos.
Disponibilidade de grande gama de medicamentos na farmcia do hospital.
Transferncia para nveis superiores.
Possibilidade de grande cirurgia se atendida por um tcnico de cirurgia.
Recolha e tratamento de dados estatsticos, epidemiolgicos, clnicos, de custos e recursos com elaborao de relatrios peridicos.
Gesto de recursos.
Superviso e apoio s Unidades Sanitrias de influncia.
Pessoal qualificado: 1-2 Mdicos / 1 Tcnico de Medicina Preventiva / 2 Agentes de Medicina / 1 Tcnico de Estomatologia / 1-2
Agentes de Estomatologia / 6-10 Enfermeiros / 5 Enfermeiras de Sade Materno-Infantil / 1 Tcnico de Laboratrio / 1-2 Agentes
de Laboratrio / 1 Tcnico de Farmcia / 1 Agentes de Farmcia / 1 Tcnico de Radiologia / 1 Agente de Radiologia / Agente de
Administrao Hospitalar.
HOSPITAL RURAL (HR)
Mesmas atividades que o HD mais:
Cuidados de urgncia em regime de 24 horas em medicina, traumatologia e cirurgia (mesmo que impliquem grandes cirurgias),
atendidas por um tcnico ou um cirurgio.
Disponibilidade de maior gama de medicamentos na farmcia do hospital.
Transferncia para nveis superiores.
Capacidade para realizar transfuses sanguneas.
Pessoal qualificado: 3-5 Mdicos / 2-3 Tcnicos de Medicina / 1-2 Tcnicos de Cirurgia / 1-2 Tcnicos Instrumentistas / 1-2 Tcnicos
de Anestesia / 2-3 Tcnicos de Estomatologia / 15-25 Enfermeiros / 5-8 Enfermeiras de Sade Materno-Infantil / 1-2 Tcnicos de
Laboratrio / 1-2 Agentes de Laboratrio / 1-2 Tcnicos de Farmcia / 1-3 Agentes de Farmcia / 1-2 Tcnicos de Radiologia / 1-3
Agentes de Radiologia / 1 Tcnico ou Agente de Medicina Fsica e Reabilitao / 2-4 Agentes de Administrao Hospitalar.
HOSPITAL GERAL (HG)
Mesmas atividades que o HR mas encontra-se em zona urbana.
HOSPITAL PROVINCIAL (HP)
Mesmas atividades que o HD e o HR mais:
Servios individualizados: medicina interna, pediatria, cirurgia, gine-obstetricia e traumatologia, sempre assistidos por mdicos
especialistas.
Atendimento ambulatrio: otorrinolaringologia, oftalmologia, psiquiatria e dermato-venerologia.
Meios auxiliares de diagnstico: ecografia, mamografia, ECG, etc.
Unidade de cuidados intensivos anexa ao servio de urgncias.
Pessoal qualificado: pessoal a ser definido para cada HP, e aprovado pelo MISAU.
HOSPITAL CENTRAL (HC)
Mesmas atividades que o HP mais:
Maior nmero de especialidades mdico-cirrgicas.
Melhores condies e equipamentos para exames complementares de diagnstico.
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HOSPITAL ESPECIALIDADE
Hospital de referncia para vrias provncias que dispensa cuidados muito diferenciados de uma nica especialidade.
CENTRO DE SADE URBANO C (CSU-C)
Mesmas atividades que o CSR-II mais:
Promoo da sade oral.
Pessoal qualificado: 1 Agente de Medicina / 1 Enfermeira de Sade Materno-Infantil ou Parteira Elementar / 1 Enfermeiro Bsico ou
Elementar.
CENTRO DE SADE URBANO B (CSU-B)
Mesmas atividades que o CSU-C mais:
Cuidados de odonto-estomatologa e promoo da sade oral.
Superviso e apoio aos CSU-C da sua rea de influncia.
Testes laboratoriais da competncia do Agente de Laboratrio.
Pessoal qualificado: 1 Tcnico de Medicina / 1 Agente de Medicina / 1 Agente de Medicina Preventiva / 1 Agente de Estomatologia
/ 1 Enfermeiro / 2 Enfermeiras de Sade Materno-Infantil / 1 Agente de Laboratrio / 1 Agente de Farmcia.
CENTRO DE SADE URBANO A (CSU-A)
Mesmas atividades que o CSU-B (rea de influncia mais populosa).
Pessoal qualificado: 1 Mdico / 2-4 Agentes de Medicina / 1 Tcnico de Medicina Preventiva / 1 Tcnico de Estomatologia / 1-2
Agentes de Estomatologia / 4-5 Enfermeiros / 5 Enfermeiras de Sade Materno-Infantil / 1 Tcnico de Laboratrio / 1-2 Agentes de
Laboratrio / 1 Tcnico de Farmcia / 1-2 Agentes de Farmcia / 1 Agente de Administrao Hospitalar.
MATERNIDADE TIPO II
Atendimento de partos.
Pessoal qualificado: 3 Enfermeiras de Sade Materno-Infantil.
MATERNIDADE TIPO I
Atendimento de partos.
Pessoal qualificado: 4-5 Enfermeiras de Sade Materno-Infantil.

Hospital Provincial Inhambane Hospital Provincial Inhambane
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TERMOS DE REFERNCIA (TR): FUNES E TAREFAS
MICROSCOPISTA
Formao: 12 meses.
Atualmente revogado a favor da carreira de Agente de Laboratrio.
AGENTE DE LABORATRIO (AL)
Formao: 20 meses (2.000 horas letivas).
A) Anlises hematolgicas: Colheita de sangue; hemograma completo e morfologia corpuscular; contagem de reticulcitos; testes
de coagulao; determinao da VS (velocidade de sedimentao); teste de falcizao; tipagem sangunea (sistema ABO e Rhesus) e
testes de compatibilidade sangunea.
B) Analises microbiolgicas: colheita, conservao e transporte do material biolgico; pesquisa direta de microorganismos em Gram,
Zielh-Neelsen e fluorescncia; preparao de reagentes, meios de cultura e corantes; cultura de diferentes materiais biolgicos;
cultura e interpretao de antibiogramas; exames micolgicos em pele, unha, cabelo, ndulos e leses (exame direto e culturas);
testes imunoserolgicos segundo kits fornecidos; testes parasitolgicos para diagnstico de enteroparasitoses, tricomonase,
candidase, bilharziose, malria, tripanosomase, filarase e borrelase; anlise de urina com fitas reagentes; sedimento urinrio; teste
imunolgico de gravidez.
C) Anlises bioqumicas: doseamento de ureia, creatinina, cido rico e bilirrubina, transaminases (AST e ALT), triglicrides,
colesterol, albumina, protenas totais e fracionais, glicose e fosfatase alcalina; anlise fsico-qumico do LCR.
Alm de realizar o trabalho tcnico de sua competncia, a nvel administrativo o Agente de Laboratrio dever estar capacitado para:
Gerir os recursos humanos e financeiros colocados a sua disposio.
Organizar e dirigir um laboratrio de nvel primrio ou levar uma ou mais sees de um laboratrio de nvel secundrio.
Gerir o stock de material, equipamento e reagentes.
Planificar as vrias atividades de laboratrio, elaborar relatrios e mapas estatsticos, organizar os registos, controlar e orientar o
trabalho do pessoal subordinado.
Zelar pela conservao e limpeza das instalaes do laboratrio e dependncias.
Conservar e fazer a manuteno dos equipamentos se for necessrio.
Levar o controle de qualidade das tcnicas laboratoriais tomando as medidas ao seu alcance para a correo dos desvios.
Zelar pela higiene e segurana no trabalho dirio.
Colaborar ativamente com os outros setores da sade, particularmente com o setor de Medicina Preventiva.
Orientar e motivar o pessoal subordinado em aes que visem a melhora do conhecimentos e da atitude.
Participar em atividades de formao.
Participar na divulgao dos principais acontecimentos tcnico-cientficos relacionados com a sua rea de atividades.
O laboratrio faz o que pede o clnico ou o mdico. Os exames so realizados em funo do que eles pedem.
Funes do laboratrio segundo sua ubiquao:
Posto de Sade: no tem laboratrio.
Centro de Sade (sede e periferia): Equipamento: microscpio solar, centrfuga manual, hemoglobinmetro.
Diagnsticos: hematozoarios (Plasmodium), BK, exame fresco fezes, urina (S. haematobium), Hb e leucograma, VSG.
Hospital Rural: o mesmo do anterior mais bioqumica + hematologia - parasitologia
Hospital Provincial: o mesmo do anterior mais LCR + bacteriologia (antibiograma) + CD
4
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TCNICO DE LABORATRIO (TL)
Formao: 30 meses (3.200 horas letivas).
Mesmas funes tcnicas que o Agente de Laboratrio mais:
A) Anlises hematolgicas: electroforese da hemoglobina e determinao de Hb anormal; dosagem de ferro srico, pesquisa
morfolgica de clulas L.E; mielograma; teste de Coombs direto e indireto.
B) Anlises microbiolgicas: serologia de VDRL ou RPR ou TPHA, ASTO, Widal, Weil Felix, PCR, RA teste, LTEX ou Waaler Rose,
Paul-Bunnel-Davidson, Hepatite A/B/C/D e E; HIV; rubola; toxoplasmose; cesticercose; amebase; leishmanioses; tripanossomase;
esquistossomiase; triuinelose; parasitose em fezes com mtodos de concentrao diretos; exames de urina e de secrees genitais;
exames coprolgicos funcionais para determinao de amido, gorduras, sangue oculto, flora idfila e fungos.
C) Anlises bioqumicos: determinao de gases em sangue (gasometria); determinao de ionograma (Na e K); ureia e creatinina
por mtodos enzimticos; assim como transaminases e CK; electroforese de protenas em soro; testes hormonais de T3, T4, TSH,
prolactina, etc.
Alm de realizar o trabalho tcnico da sua competncia, a nvel administrativo dever exercer as funes prprias do AL e mais:
Estabelecer os objetivos e metas anuais do laboratrio ou seo sob sua direo, contemplando as necessidades da Unidade
Sanitria e os equipamentos existentes.
Elaborar relatrios peridicos com dados estatsticos relativos ao nmero e tipo de exames realizados, promovendo o controle de
qualidade e apoiando os seus superiores na toma de decises que ultrapassem sua competncia.
Colaborar com as estruturas de organizao de vigilncia sanitria.
Garantir o funcionamento do coletivo de trabalho, atravs de reunies peridicas com o pessoal a seu cargo.
Promover reunies peridicas de estudos cientficos ou de reciclagem a fim de manter seu pessoal atualizado.
Participar na execuo de atividades educativas de vigilncia sanitria.
Formar e supervisar a execuo de tcnicas implementadas nos servios de rotina.
Divulgar as tcnicas e parmetros dos servios prestados pelo laboratrio.
Exercer funes de docncia se lhe so requeridas.
O MISAU o responsvel direto pela formao dos Tcnicos de Sade de nvel bsico e mdio atravs da rede de formao sanitria
constituda por 13 instituies de formao.
O Ministrio de Educao aprova os Programas de Formao, elaborados pelo Departamento de Formao do MISAU, e certifica os
graus de formao realizados nos Centros de Formao em Sade.
O Centro de Formao de Inhambane, ao que lhe so normalmente adscritas as carreiras de Enfermagem, Medicina Preventiva e
Sade Materno-Infantil, iniciou no ano 2006 o primeiro curso de Tcnicos de Laboratrio de nvel bsico.
Os Tcnicos de Laboratrio recm formados, so colocados nas US do pas conforme o plano de necessidades estabelecido pela
Direo de Recursos Humanos do MISAU.
D
E
P
O
I
M
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N
T
O1. Melhoria na parte de equipamento: secador de lmina eltrico, centrfugas eltricas, KX2i SIMEX, espectrofotmetro, banho
maria, agitador para RPR, estufa, geleiros (cadeia de frio), microscpio, cronmetro, centrfuga haemofen, balana analtica
2. Melhoria na infra-estrutura: armrios
3. Transporte
4. Recursos humanos
5. Formao continuada
6. Progresso na carreira
22
REDE SANITRIA PREVISTA 2008-2010
N
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l
Nvel de US
Hospital Central 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 1 3
Hospital Provincial 1 1 0 1 1 1 0 1 1 0 0 7
Hospital Psiquitrico 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 1 2
Hospital Geral 0 0 2 0 0 0 0 0 0 1 2 5
Centro de Sade Urbano A 2 2 3 2 4 1 9 1 4 2 8 38
Centro de Sade Urbano B 1 3 2 6 4 2 2 0 2 2 7 31
Centro de Sade Urbano C 8 3 11 2 5 3 7 2 2 4 8 55
Hospital Distrital 2 5 4 3 5 4 2 0 5 6 0 34
Hospital Rural 1 3 4 6 3 1 5 3 4 2 0 32
Centro de Sade Rural I 14 13 35 11 16 11 4 15 8 3 0 129
Centro de Sade Rural II 17 72 72 106 42 56 64 54 58 33 1 570
Total 46 102 135 137 80 79 94 76 84 53 28 909
Postos de Sade 57 9 55 37 20 0 58 31 25 9 7 308
Outros postos (privados)
0 0 2 0 5 0 26 0 0 8 0 41
Total geral 103 111 192 174 105 79 178 107 109 70 35 1258
Exerccios
1 Identifique e descreva os Centros de Sade na sua provncia.
23
2 Descreva e desenhe o seu Centro de Sade com nfase no laboratrio.
O nosso laboratrio
O tcnico de laboratrio
As zonas do laboratrio
Mtodos de diagnsticos
O microscpio
Consideraes gerais
Organizao geral
Material
Exerccios
Captulo II
O LABORATRIO
26
O Laboratrio
H
I
S
T
R
I
A
Nosso laboratrio
Mesa de trabalho
Microscpio
Uma pessoa chega na sala de espera, atendido na recepo, registrado, e da feita a coleta. Posteriormente
o material levado para o setor correspondente e da feita a preparao e leitura do material. Depois
registrado o resultado no setor e na recepo e entregue pessoa. O armazm funciona com um responsvel,
cadastrando as sadas e fazendo os pedidos, o importante no ter um armazm, e sim uma organizao das
entradas e sadas, um armazm sem organizao no presta.
O LABORATRIO
27
O Laboratrio
O nosso laboratrio
Coisas que devem ter em um labotatrio:
1 Infra-estrutura: sala de espera, recepo, sala de colheita, sala tcnica, armazm, casa de banho, lavatrio, vestirio, sala
de esterilizao, copa ou refeitrio, escritrio, biblioteca/sala de estudo.
2 Equipamento: microscpio, geleira, estufa, banho maria, centrfuga, autoclave, destilador de gua, agitador, cabine
de segurana, aparelho de bioqumica, aparelho de hematologia, balana.
3 Reagente.
4 Material.
5 Recursos humanos.
6 Transporte.
O TCNICO DE LABORATRIO
O tcnico deve ser responsvel, e ter a formao necessria
para cumprir com o seu trabalho, com capacidade de preciso
no cuidado das tcnicas.
Devem ser atualizados continuamente, formar a outros tcnicos
e poder explicar o seu trabalho aos doutores de referncia.
Os pontos vitais de um bom tcnico:
1 Executar bem a colheita
2 Executar bem as tcnicas
3 Executar bem a destruio de amostras
4 Limpar bem o laboratrio
O laboratrio deve ser organizado por mtodos de trabalho pessoal, ter protocolos de urgncias e trabalho ordinrio.
Servio Tcnico Ms de Janeiro
Urgncias e outros Sr. Barreto 1 - 31
Hematologia Sra. Lucinda 1 - 31
Parasitologia Sra. Isabelle 1 - 31
Urinas Sr. Pedro 1 - 31
Logsticas Sr. Finias 1 - 31
Um bom tcnico
28
O Laboratrio
AS ZONAS DO LABORATRIO
Um laboratrio correto deve ser organizado em duas reas. Uma rea protegida da contaminao externa e onde o tcnico trabalha
(rea de trabalho). E outra rea de trfico de pessoas, doentes e amostras, mais contaminada (rea de recepo de amostras).
Pacientes
Tcnico de Laboratrio
microscpios
cama
refrigerador
amostras
mesa de trabalho
sala de espera
sala de trabalho dos tcnicos
sala de extrao de amostras
centrfuga
mesa de trabalho
R
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A
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A

D
E

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R
A
B
A
L
H
O
REA DE TRABALHO
Entrada permitida somente aos tcnicos
Entram as amostras preparadas para sua observao
Refrigeradores, microscpios, balanas, etc
Zona de centrifugao, coloraes...
REA DE RECEPO DE AMOSTRAS
Entrada de pacientes
Zona de extraes
Recolha de pedidos
Colheita de amostras
Entrega de resultados
29
O Laboratrio
MTODOS DE DIAGNSTICOS
O laboratrio faz um papel importante de diagnose no trabalho hospitalrio.
Para a diagnose de hospital, o Tcnico de Laboratorio deve trabalhar em colaborao estreita com o mdico.
Para o diagnstico da maioria das doenas, o laboratrio deve ser capaz de examinar amostras de sangue, urina, fezes, escarros,
LCR e outros lquidos.
OS MTODOS MAIS FREQUENTES SO:
Macroscpico: observao visual direta.
Microscpico: utilizao de microscpio.
Reao Bioqumica: por meio de lquidos ou tiras preparadas.
Amostras bsicas de um laboratrio
Diagnstico macroscpico: larvas de moscas Diagnstico microscpico: ovo de
esquistossoma
Diagnstico de reao bioqumica: teste
rpido de HIV
Faa suas observaes
Faa suas observaes
30
O Laboratrio
Ocular
Macromtrico
Micromtrico
Objetivas
Condensador
Diafragma
Espelho
O MICROSCPIO
Microscpio ptico
Faa suas observaes
100X
40X
10X
31
O Laboratrio
CLASSIFICAO DAS PARTES DO MICROSCPIO
1 Sistema de suporte:
P ou base.
Corpo ou bastidor.
Objetivo do suporte ou porta-objetivo revlver.
Platina (para colocar a lmina).
Parte mecnica que segura e controla o movimento da lmina
O sistema de suporte mantm a parte ptica do microscpio.
2 Sistema de aumento
Consiste em um sistema de lentes que servem para aumentar
o tamanho do objeto que vamos observar.
Oculares: multiplicam o tamanho do objeto em 10 vezes.
Objetivas: 10X multiplica o tamanho do objeto em 10 vezes.
40X multiplica o tamanho do objeto em 40 vezes.
100X multiplica o tamanho do objeto em 100 vezes.
Com a objetiva 100X temos que colocar sempre leo de imerso
entre a lmina e o objetivo para poder ver a imagem.
Assim, se utilizamos a objetiva 100X e a ocular 10X, o aumento
total vai ser de 1000. Significa que a imagem ser aumentada
1000 vezes seu tamanho real e portanto poder ser vista no
microscpio por nossos olhos.
3 Sistema de iluminao ou sistema de luz:
Foco no espelho que envia a luz ao objeto. Pode ser luz eltrica
no caso do foco, ou solar no caso do espelho.
Condensador: dirige e concentra os raios de luz para a amostra.
Diafragma: est unido ao condensador e regula a quantidade de
luz que entra neste.
Quando fechamos o diafragma aumentamos a profundidade e
enfocamos melhor.
4. Sistema de ajuste:
Macromtrico: Rosca maior. Aproxima o enfoque da amostra.
Micromtrico: Rosca menor. Ajusta perfeitamente a imagen.
Rosca do condensador:
Se utiliza para subir o condensador (aumentar a luz), ou para
baix-lo (diminuir a luz).
Uso da objetiva 10X: condensador abaixo.
Uso do objetivo 40X: condensador ao meio.
Uso do objetivo 100X: condensador acima.
Rosca para a parte mecnica:
Uma rosca desloca a lmina direita ou esquerda.
Outra rosca desloca a lmina para frente e para atrs.
Isto permite fazer um percurso da amostra para poder examinar
boa parte dela, procurar diferentes estruturas e inclusive realizar
a contagem das mesmas.
MTODOS DE MICROSCOPIA
1 Microscopia de campo claro (ptica comum)
Consiste em uma fonte de luz, utilizada para iluminar o espcime
colocado em uma platina. Um condensador, utilizado para
focalizar a luz sobre a amostra. E dois sistemas de lentes:
objetivas e oculares.
2 Microscopia de campo escuro
As mesmas lentes, objetiva e ocular so utilizadas. Utiliza-se um
condensador especial, que impede que a luz transmitida ilumine
diretamente a amostra. Apenas a luz oblqua faz com que a
amostra se torne iluminada contra um fundo escuro. A vantagem
desse mtodo que o poder de resoluo da microscopia
significativamente superior (isto , 0.02 m versus 0.2 m).
3 Microscopia de fluorescncia
Alguns microorganismos contm compostos denominados
fluorocromos, ou autofluorescncia. Algumas tcnicas envolvem
a colorao dos microorganismos com corantes fluorescentes.
A observao se realiza en microscpios com anexos e
lmpadas especiais.
4 Microscopia de contraste de fases
Permite o exame dos detalhes internos dos microorganismos.
Consiste em feixes paralelos de luz que passam atravs de
objetos de diferentes densidades pela utilizao de anis
no condensador e na objetiva. Resulta em uma imagem
tridimensional que permite uma anlise mais detalhada
das estruturas.

5 Microscopia eletrnica
Diferentemente dos outros mtodos, aqui so utilizadas espirais
magnticas, em vez de lentes. As amostras so normalmente
coloridas por ons metlicos para criar um contraste.
Existem dois tipos:
a) De transmisso: os eltrons passam atravs da amostra.
b) De varredura: passam atravs da amostra em um
determinado ngulo, imagem tridimensional.
32
O Laboratrio
CONSIDERAES GERAIS
EXIGNCIAS DE UM BOM LABORTORIO
Um laboratrio bsico deve ter caractersticas necessrias e indispensveis para proporcionar uma proteo apropriada.
Todas as amostras em um laboratrio so uma possvel fonte de infeco.
As principais exigncias so:
Segurana pessoal
Destino do lixo
Esterilizao (autoclave)
Limpeza das intalaes diariamente
COLHEITA DE AMOSTRAS
Importncia da colheita
O mtodo de colheita fundamental para encontrar os parasitas. preciso existir uma relao direta com o clnico para que
em funo do que se est buscando, a colheita seja feita de uma maneira concreta e ento se proceda a busca.
Ex. 1: Para buscar o bacilo de Koch preciso informar aos clnicos do horrio, de que na primeira visita j se deve colher o
escarro, quantos escarros, de que forma a pessoa deve proceder (tosse profunda e pegar expectorao, no a saliva).
Ex. 2: Para buscar a W. brancofti precisa-se da suspeita pois nesse caso o horrio de colheita por extrao sangnea deve ser
entre as 23h e a 01h.
Ex. 3: Para buscar Esquistosomiasi necessrio colher urina fazendo exerccio previo.
Pedido clnico
importante que o mdico oriente o diagnstico e pea a prova especfica pra o parasita concreto. Os tcnicos acham que
os clnicos no sabem o que est sendo realizado no laboratrio. Precisamos resolver este ponto: reunies, saber o que pode
pedir cada um (explicando por escrito), tendo um mdico no laboratrio.
Ex. 1: O mdico pede fezes totais. Eles s vezes encontram oxiros. Nunca fazem a cinta de Graham porque alguns
desconhecem e porque nunca chega um pedido de pesquisa de oxiros.
Ex. 2: O mdico pede urina total. Eles encontram em urina vermelha S. haematobium. Nunca recebem uma orientao correta
pra buscar esquistosomiasi, provavelmente esto perdendo muitos casos.
Entrega de resultados
No caso da malria, sempre escrevem no se encontrou o parasita. Porque sempre escrevem no se encontrou o parasita?
Porque significa que naqueles campos por mim observados eu no vi nenhum parasita. Eles no escrevem "resultado
negativo por que significaria que em todo o sangue tm certeza que no tem nenhum parasita.
D
E
P
O
I
M
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N
T
O
33
O Laboratrio
ORGANIZAO GERAL
HORRIOS
Horrio de colheita de amostras.
Horrio de trabalho.
Horrio de entrega de resultados.
Exemplo: Horrio de colheita de amostras: de 7 a 10 h. Entrega de resultados: de 16 a 18h.
ORDENS DAS TCNICAS
Para dimunuir os erros no trabalho dirio, as ordens mdicas devem estar claras e simples, os 10 pontos mais importantes so:
1 Nome do doente
2 Idade e sexo
3 Lugar de procedncia no hospital
(dispensrio, n de cama,...)
4 Data da petio
5 Doutor que pede o teste
6 Servio
7 Amostra a examinar
8 Testes
9 Nome do tcnico responsvel
pelo resultado
10 Data do resultado
Dentro do laboratrio deve-se registrar todas as entradas do dia e o seus resultados.
Destino do lixo Segurana no laboratrio Segurana pessoal
Autoclave Limpeza das instalaes
Nome: Idade:
Sexo:
N lab:
Dr.:
Data de petio:
Servio: Cama:
sangue
urina
fezes
escarro
outros
Testes:
Lab: Sr. Data:
Autoclave
34
O Laboratrio
SEGURANA NO LABORATRIO
A DESINFECO
gua de Javel (hypochlorite)
Desinfetante bactericida
Ativo Gram (-)
Ativo Gram (+)
Sporocida
Fungicida
Virucida (hepatite e aids)
Preparao
1 Diluir um copo de 250 ml de gua de Javel a 12 em
8 litros de gua
2 Diluir um litro de Javel em 8 litros de gua Cont. forte
3 Repousar durante 20 minutos.
4 Enxaguar com gua destilada e depois secar
Observaes
Tem que ser uma atividade quotidiana.
Temos que nos acostumar a recolher os utenslios uma vez
utilizados e a usar a gua de Javel de maneira sistemtica.
Depois da toda manipulao contaminante (BK, meningitis...),
preciso limpar as superfcies com gua de Javel.
Ao terminar o trabalho no final do dia, preciso limpar o
cho, a mesa e as superfcies sujas com gua de Javel.
O microscpio deve ser coberto at a sua prxima utilizao.
B ESTERILIZAO
Limpar e proteger a esterilizao
Calor mido: fogo de presso
Calor seco: poupinel
Vapor saturado e debaixo de presso (20 minutos a 120 C.
Podem ser conservados at 3 meses). Mais seguro e mais
fcil controlar. Proteger bem.
C LIMPANDO NOSSO LABORTORIO
Ns sempre estamos manipulando amostras, potencialmente
produtos contaminados.
Devemos limpar com gua de Javel.
Cadeira de trabalho, cho, mesas, microscpio, bancadas
Esta limpeza pode ser muito tentadora de no ser praticada,
mas o que garante a sua segurana.
Se isto no for terminado, o tcnico ser o primeiro afetado.
D MATERIAL PARA PROTEO
Proteo durante as manipulaes: blusa, luvas, culos
protetores
Lavar mos e relgios
Respeitar as reas de trabalho e de extrao de amostras
Limpar tudo com gua de Javel
E DESTINO DO LIXO supervisar sua destruio
JOGAR O LIXO NO LUGAR APROPRIADO
Usar recipientes especiais para o lixo do laboratrio
Material de coleta
Lminas observadas
Panelas de trabalho 1, 2, 3,..
Lixo papelaria
Lixo lquidos contaminados
Lixo material recupervel
Lixo material recupervel pontudo
DESTRUIO FEITA CORRETAMENTE
Buraco no cho, longe de pessoas, protegido (fechado)
Queimar at que estejam cinzentos
Incinerador pequeno
F MATERIAL REUTILIZVEL
Eles so enxaguados
Emergido completamente na gua de Javel durante 20
minutos
Enxaguados em gua destilada
Secar protegidos
35
O Laboratrio
MATERIAL
LIVRO DE INVENTRIO
necessrio fazer um livro de inventrio para controlar as quantidades e despesasdos materiais utilizados no laboratrio.
As folhas de registros so classificadas em:
A Material permanente
Produto Marca Referncia Quantidade
Microscpio Olympus 2280 2
Geladeira Cassey 23 1
Centrfuga Marly 1200 3
Banho Maria Biomec 450 1
B Material de consumo
Data: 1-1-07
Produto Formato Quantidade Vencimento
Giemsa soluo 1 l 11-2010
Kit Hb teste reativo 200 u 12-2008
Portas pocote 50 u ---------
Seringas plstico 1000 u 9-2009
Luvas ltex-estril 3000 u 10-2020
Luvas plstico 5000 u ------
C Classificao de armrios
Produto
Material de escritrio Canetas, borrachas, cadernos, etc.
Material de limpeza gua de Javel, vassouras, escovas, esponjas
Material docente Cartazes, tbuas, protocolos
Material de lavanderia Blusas, lenis
Biblioteca Livros, protocolos, registros
D Material administrativo
Produto Data entrada Quantidade Data sada Quantidade Total
Canetas 2-1-07 20 10-2-07 5 15
Borrachas 10-1-07 10 15-1-07 1 9
Cadernos 10-1-07 20 19-1-07 2 18
36
O Laboratrio
E Classificao de estantes
Produto Formato Quantidade
cidos cido Sulfrico 3
Corantes Gram
Zielh-Neelsen
Giemsa
3
6
5
Material descartvel Tubos EDTA
Tubos Citrato
Tubos Urina
5000
3000
10000
F Livro de registro de entradas e resultados
Data N lab. Nome doente testes Resultados
12-1 40 Lucinda Ondo G.E
VSG
HB
Positiva. P. falciparum
20/80
9%
41 Evaristo
Modlane
GE Negativo
42 Thomas
Zabala
Glucosa
VhB
100g/L
Negativo
G Livro de estatsticas
Sempre deve ser feito.
Deve ser 100% real.
Eles so de interesse para o prprio laboratrio, para o hospital, para a regio sanitria e para o ministrio de sade.
Exemplo Ms de Janeiro / Ano: 2008
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
Total
Gota
Hb
Gluc
GR
GB
F.leuco
Uria
VHB
37
O Laboratrio
MATERIAL PERMANENTE
o material que normalmente est em um laboratrio de hospital.
Geralmente so materiais que podem ser utilizados toda sua vida se no se quebram e quase no precisam ser encomendados.
A lista de materiais para administrao no laboratrio :
Centrfuga Refrigerador Microscpio
Autoclave Coulter Fogo
Leitor de Elisa Bico de Bunsen Banho Maria
Folha da estatstica
Folha da encomendas
Livro do registros
Lapiseiras
Marcadores
Microscpio
Centrfuga
Refrigerador
Fogo
Autoclave
Coulter
Banho Maria
Leitor de Elisa
Bico de Bunsen
Pipetas
Frascos de vidro
Funil
Cilindros
Suportes para tubos
Baldes
Cronmetro
Centrfuga
Tubos de centrfuga
Hemoglobinmetro
Estufa
38
O Laboratrio
Exerccios
1) Descreva qual o procedimento que voc tomaria para mandar uma amostra ao Centro de Sade?
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39
O Laboratrio
2) Explique o seu dia-a-dia no laboratrio, detalhando suas tarefas.
___________________________________________________________________________________________________
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___________________________________________________________________________________________________
3) Desenhe o seu laboratrio, descrevendo todas as suas partes.
4) Anote as coisas necessrias em um laboratrio.
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Sangue
Consideraes gerais sobre a hematologia
Fichas: Parasitas do sangue
Exerccios
Fezes
Fichas: Parasitas das fezes
Exerccios
Urina
Fichas: Parasitas da urina
Exerccios
Escarro
Ficha: Parasita do escarro
Exerccios
Captulo III
TCNICAS DE LABORATRIO
42
Tcnicas de Laboratrio Sangue
EXEMPLO 1:
Pessoa com malria no campo: Quando ela tem febre vai pro Posto de Sade mais prximo, quando chega l
se tiver sintomatologia de malria o clnico d o remdio sem mandar a pessoa pro laboratrio (nos Postos
de Sade no tem), se no melhorar ento transfererida para o Centro de Sade, l ele nem sempre fala
que j tomou remdio. Ento no Centro de Sade se procede ao diagnstico.
EXEMPLO 2:
Pessoa com malria na sede de Funhaloma: Com as chuvas no mato, aparece muito mosquito, estes picam
as pessoas que ficam doentes e comeam a ter os sintomas da malria (febre, dor na juntas, ...). A vai para
o Centro de Sade de Funhaloma, onde o clnico recebe a pessoa. Com suspeita de malria manda fazer a
lmina no laboratrio, o laboratrio faz a lmina e entrega o resultado para o clnico, que com o diagnstico
de malria d o tratamento (se no est grave no precisa internao). Sete dias aps volta para o controle.
SANGUE
H
I
S
T
R
I
A
O ciclo da malria
43
Sangue Tcnicas de Laboratrio
Consideraes gerais sobre hematologia
atravs da circulao sangunea que as inumerveis clulas do organismo, em todos os tecidos, recebem a sua alimentao,
representada por componentes de protenas, gorduras, acares, gua e sais minerais.
Tambm o sangue retornando dos tecidos que conduz o gs carbnico e os resduos das clulas do corpo, eliminando-os atravs
da respirao, do suor, da urina ou das fezes.
Relacionados ao sangue esto:
Sistema de defesa do organismo
Controle da temperatura do corpo
Equilbrio da distribuio de gua
Os processos de absoro celular do organismo
Os componentes do sangue so:
Plasma
Glbulos vermelhos ou hemcias
Plaquetas
Glbulos brancos ou leuccitos:
- No granulosos ou mononucleares: moncitos, linfcitos
- Granulosos ou polinucleares: neutrfilos, eosinfilos e basfilos
Glbulo Branco Segmentado
Plaquetas
Glbulos Vermelhos
Componentes do sangue
Glbulo Branco Banda
Glbulo Branco Basfilo Glbulo Branco Linfcito Glbulo Branco Moncito
44
Glbulos brancos encontrados na corrente sangunea
No Granulosos Linfcitos (B e T) Forma esfrica, ncleo tambm esfrico. Participam nos processos de defesa
imunitria, produzindo e regulando a produo de anti-corpos.
Monocitos Forma esfrica, ncleo oval ou reniforme. Originam macrfagos e osteoclastos. Clulas
especializadas em fagocitose.
Granulosos Neutrfilos Forma esfrica, ncleo composto por trs lbulos. Efetuam a fagocitose de bactrias e
corpos estranhos.
Eosinfilos Forma esfrica, ncleo composto por dois lbulos. Participam nos processos de
reaes alrgicas, produzindo histamina.
Basfilos Forma esfrica. Ncleo irregular. Participam nos processos alrgicos, produzindo
histamina e heparina.
MORFOLOGA PATOLGICA DE LOS ERITROCITOS
eritrocito normal anisocitosis ovalocitosis falciformes macrocitosis poikilocitosis
pontilhado basfilo corpsculos de jolly clulas em diana hipocroma esferocitosis estomatocitosis
ANEMIAS
Considera-se anemia se:
Hemoglobina <13 g/dL em homens
Hemoglobina < 12 g/dL em mulheres
Hemoglobina < 11 g/dL em mulheres grvidas
Causas:
Anemias ferruginosas: carncia de ferro
Anemia megaloblstica: por falta de vitamina B12 ou cido flico
Anemia doenas crnicas: malria, TB, leishmania, esquistossoma
Anemias hemolticas: pouco tempo de vida dos eritrcitos
Anemia drepanocitica: alterao da hemoglobina
45
Podem ser encontrados diversos parasitas no sangue, o mais frequente o paludismo (malria) no interior dos glbulos vermelhos,
e as microfilrias e tripanossomas no plasma.
As tcnicas que devem ser utilizadas variam conforme o parasita em questo. Assim, para o paludismo deve ser utilizada a gota
espessa e extenso, para as leishmnias deve ser utilizada a colorao com Giemsa de uma extenso da medula ssea ou da marca
de um gnglio linftico (Kala-azar) e a raspagem de uma leso cutnea na leishmaniose cutnea. Para os tripanossomas, utilizamos
a tcnica de filtragem em coluna de DEAEC, tripla centrifugao, para o capilar de micro hematcrito, gota espessa e extenso e para
as microfilrias, a tcnica da saponina em sangue perifrico.
Dependendo do parasita a examinar, so usadas diferentes tcnicas.
As tcnicas mais utilizadas para o diagnstico direto em sangue e tecidos so apresentadas na Tabela I.
Por vezes uma pessoa chega em estado grave, porqu?
Porque comeou a sentir febre e demorou em ir ao Centro de Sade, motivos:
a) A pessoa no sabe nada acerca da malria. Na cidade isto ocorre com menos frequncia porque as pessoas tm mais
informao disponvel atravs da televiso e de outros meios, assim como atravs das escolas.
b) Por causa da distncia entre a casa e o Centro de Sade.
c) Primeiro vo ao curandeiro, que quando j no pode fazer mais nada, encaminha as pessoas para o Centro de Sade.
d) Tomam analgsicos em casa por conta prpria.
e) Fases da lua: epilepsia, quando acontece algo as famlias olham para a lua e pensam que o problema motivado por ela.
f) Comeam por tomar remdios tradicionais (ervas), se no resultar dirigem-se Unidade de Sade.
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Tcnica utilizada Parasita investigado
Gota espessa Plasmdio, tripanossomas, microfilria
Extenso simples Plasmdio (espcie), microfilria, tripanossomas
Gota fresca Microfilria, tripanossomas
Capilar de micro hematcrito Tripanossomas, microfilria
Concentrao de leuccitos (saponina ou formol) Microfilria
Coluna de DEAEC Tripanossomas, microfilria
Tripla centrifugao Tripanossomas
Aspirado medula ssea Leishmania
Raspado leso cutnea Leishmania
Tabela I
Procedimento:
GOTA ESPESSA RPIDA
1 Colocar uma gota de sangue num suporte de objetos e remov-
la com o ngulo de outro suporte para desfibrinar, durante 10-15
segundos.
2 Deixar secar a gota com ajuda de alguma fonte de calor
durante 30 minutos ( ao sol, numa estufa, ao lado ou em cima de
algum aparelho que desprenda calor)
3 Cobrir a preparao com Giemsa diluda em gua tamponada
ao 2% (aproximadamente 4 gotas de Giemsa em 10 ml. de gua
tamponada) e deixar atuar durante 1 hora.
4 Lavar suavemente e com cuidado para que a gota no se
desprenda do suporte de objetos.
5 Deixar secar e olhar ao microscpio com objetiva de imerso
(100X).
COLORAO DE GIEMSA PARA GOTA ESPESSA - 24h
1 Colocar numa lmina uma gota de sangue e retirar a gota com
o vrtice de outra lmina para desfibrinar, durante cerca de 15-20
segundos.
2 Deixar secar a gota temperatura ambiente e ao ar livre
durante cerca de 24 horas.
3 Tapar o preparado com soluo de Giemsa diluda em gua
tamponada (ph = 7,2) a 3%, durante 1 hora. (4 gotas com pipeta
de Pasteur em 10 ml de gua tamponada).
4 Lavar cuidadosamente com gua da torneira com o lado do
preparado virado para baixo.
5 Secar.
COLORAO DE GIEMSA PARA EXTENSO
1 Colocar uma gota de sangue num extremo da lmina (menos
quantidade que para a gota espessa) e estender com a aresta de
outra lmina at obter uma amostra o mais estreita possvel.
2 Deixar secar.
3 Cobrir com lcool metlico durante 2-3 minutos.
4 Decantar o lcool metlico e colocar Giemsa diluda a 10% na
gua tamponada (12 gotas de Giemsa, contadas com uma pipeta
Pasteur em 9 ml de gua tamponada).
5 Aps uma hora, lavar com gua da torneira durante 5-6
segundos e deixar secar.
Tcnica da Gota Espessa
Introduo:
uma tcnica de concentrao utilizada principalmente
no diagnstico do paludismo, embora possa ser til
na investigao de outros parasitas sanguneos como
tripanossomos e microfilrias.
A tcnica baseada na propriedade das membranas
biolgicas em igualar a presso osmtica em cada lado da
membrana. Se for colocado um meio hipotnico no exterior da
clula, as presses tendem a igualar-se, passando lquido do
exterior para o interior, pelo que num determinado momento
produz-se a rotura da membrana celular por no poder resistir
elevada presso produzida no interior.
Na prtica, a rotura da membrana produz-se ao ser introduzido
o preparado de gua destilada ou a soluo de Giemsa muito
diluda (no superior a 3%). As membranas dos glbulos
vermelhos no so as nicas que se rompem, os leuccitos e
plaquetas tambm so afetados, assim como os plasmdios
no caso de existirem.
Assim, uma vez tingida a amostra, possvel observar os
ncleos dos leuccitos, grupos mal definidos de plaquetas
e, no caso de existirem plasmdios, o ncleo de cromatina e
parte do citoplasma.
A grande vantagem da gota espessa no que se refere ao
esfregao estreito a concentrao (de 20 a 40 vezes). A gota
espessa no importante no que se refere parasitaes
muito elevadas, pois so rapidamente visualizadas na
extenso, na concentrao muito baixa que se encontra a
grande diferena entre a extenso e a gota espessa.
Paludismo (Malria)
GOTA ESPESSA E EXTENSO
46
O inconveniente da gota espessa a dificuldade na identificao
do plasmdio uma vez que ao destruir os glbulos vermelhos
no possvel visualizar as caractersticas do glbulo vermelho
parasitado. No entanto, com alguma experincia possvel
determinar se se trata ou no de P. falciparum. Na gota espessa
possvel observar os gametcitos de P. falciparum, os gros de
Schffner em P. vivax ou P. ovale e os caractersticos esquizontes
maduros de P. malariae.
recomendado realizar sempre uma extenso da gota espessa
para facilitar a identificao da espcie. Perante o exame de
rotina de uma gota espessa, necessrio ler toda a superfcie
com uma objetiva de aumento de 10X para descartar a presena
de microfilrias. Para investigar a presena de plasmdios ou
tripanossomas necessrio usar a objetiva de imerso (100X).
Antes de concluir que o resultado de uma gota espessa
negativo, devem ser examinados cerca de 200 campos com a
objetiva de aumento de 100X (cerca de 10 min, dependendo da
experincia do tcnico).
Para obter a melhor qualidade da gota espessa recomendado
deixar secar durante 24 horas. Em caso de urgncia,
aconselhado deixar secar a gota cerca de 20 minutos com a
ajuda de uma fonte de calor (estufa, secador de cabelo ou mos,
sol,...). Os pontos de cromatina dos plasmdios aparecem neste
caso como pontos isolados, que fazem lembrar plaquetas, e
apenas possvel observar o citoplasma do plasmdio.
necessrio informar no caso de apenas serem observados
gametcitos: Apenas so visveis gametcitos, uma vez que
do ponto de vista clnico a atitude diferente se existem ou
no formas assexuadas. So utilizadas porcentagens para
quantificar a parasitemia dos glbulos vermelhos parasitados
(utilizamos a extenso) ou no nmero de plasmdios por m/m3
(na gota espessa). Neste ltimo caso, necessrio saber quantos
leuccitos por m/m3 possui o paciente.
Quando no possvel saber o nmero exato de leuccitos,
a OMS recomenda para os estudos em zonas rurais que seja
considerado o valor standard de 8.000 leuccitos por m/m3
para todos os pacientes. Uma forma menos exata, mas que pode
ser til se existir uma boa comunicao entre os clnicos e o
laboratrio utilizar o nmero de cruzamentos (Tabela II).
Os erros mais frequentes na identificao do paludismo so a
confuso de uma plaqueta com um plasmdio, (por estar em
cima ou em baixo do glbulo vermelho) ou um leuccito com um
trofozito maduro de P. vivax ou P. ovale. (Num leuccito existe
sempre 1 ncleo e 1 citoplasma, no glbulo vermelho parasitado
existe sempre 1 ncleo e 2 citoplasmas).
Observaes:
Parasitas observados N de cruzamentos
0 em 200 campos Negativo para plasmdio
1-10 parasitas por 100 campos +
11-100 parasitas por 100 campos ++
1-10 parasitas por 1 campo +++
Mas de 10 parasitas por campo ++++
Tabela II
P. falciparum P. vivax P. malariae P. ovale
Tamanho do glbulo vermelho parasitado Normal Aumentado Normal Aumentado
Granulao no citoplasma do glbulo vermelho
parasitado
Ausncia de
Manchas de Maurer
Granulao de Schffner Ausncia de Granulao
de Schffner
Granulao de Schffner
N. de plasmdios por glbulo vermelho
parasitado
De 1 a 4 1 (Raro 2) 1 1
Gros de cromatina do trofozoto 1-2 1 (Raro 2) 1 1
Trofozoitos jvens Anis pequenos Anis pequenos e
grandes
Anis pequenos e
grandes
Anis pequenos e
grandes
Trofozoitos maduros Compactos. Raro en
sangue perifrico
Forma de ameba Compacto "em banda" Compacto
Formas intermdias em sangue perifrico No Sim Sim Sim
N. de merozotos por esquizonte 8-36 12-24 6-12 6-12
Forma dos gametcitos Falciforme Arredondada Arredondada Arredondada
Tanto por % de glbulos vermelhos parasitados 10-15 % 2 % < 2 % < 2 %
Tabela III - Diagnstico diferencial das quatro espcies de plasmdios que parasitam o homem
47
Sobre a doena:
produzida por Trypanosoma brucei gambiense da Gambia
(frica Ocidental e parte de frica Central) e Trypanosoma brucei
rhodesiense da Rodsia (frica Oriental e parte de frica Central).
Ambos tripanossomas so morfologicamente iguais mas tm um
percurso clnico diferente, muito mais agudo no caso do
T. b. da Rodsia. A tcnica mais sensvel a coluna de DEAEC,
em segundo lugar, a tripla centrifugao, depois o capilar do
hematcrito observado altura da interface plasma - clulas
sanguneas com uma objetiva de aumento de 10 vezes, e por
ltimo, a gota espessa e a extenso simples de sangue perifrico
tingidos com Giemsa.
Procedimento:
uma tcnica utilizada para o diagnstico direto da
tripanossomase africana. Utiliza a propriedade da dietilamino
etilcelulose para reter as clulas sanguneas por terem diferentes
cargas eltricas na superfcie, mas no o tripanossoma africano.
Atravs de uma coluna de dietilamino etilcelulose (DEAEC) so
filtrados 0,5 ml de sangue. O lquido filtrado recolhido num
tubo, que posteriormente centrifugado. No sedimento podem
ser observados os tripanossomas com uma objetiva de aumento
de 40 vezes.
COLUNA DE DEAEC
Tripanossomase africana
Procedimento:
1 Colocar 3 ml de sangue num tubo de centrifugao com um
anticoagulante que no seja heparina.
2 Adicionar 6 ml de soro fisiolgico e entre 4 e 6 gotas de uma
soluo de saponina concentrada a 2%.
3 Tapar e agitar o tubo para facilitar a hemlise no cone
terminal do tubo.
4 Centrifugar a 1.500 rpm durante 10 minutos.
5 Eliminar os resduos suprfluos.
6 Recolher o sedimento com uma pipeta e efetuar um
preparado entre a lmina e a cobertura.
Observaes:
a tcnica mais rentvel para o diagnstico de microfilrias.
(As microfilrias so visualizadas com vida, deslocando-se no
meio lquido do sedimento).
A observao efetuada com uma objetiva de aumento de
10 vezes. Se existirem imagens suspeitas necessria uma
confirmao com uma objetiva de aumento de 40 vezes.
Lembrar a periodicidade das microfilrias sanguneas ao efetuar
a extrao de sangue (filarase linftica: periodicidade noturna).
As caractersticas diferenciais entre W. bancrofti e M. perstans
so descritas na Tabela IV.
CONCENTRAO DE LEUCCITOS COM SAPONINA PARA MICROFILRIAS
Filrias
Caractersticas W. bancrofti M. perstans
Presena de vagem Sim No
Ncleos at o final da cauda No Sim
Grossura aproximada igual a um leuccito Sim Menor
Periodicidade em sangue perifrico Noturna Aperidica
Tabela IV
As leishmnias adotam duas formas diferentes conforme o
meio em que esto localizadas. Nos mamferos adotam a forma
amastigota, sem flagelo, e so intracelulares, enquanto que em
cultivo e no vetor possuem forma promastigota (com flagelo).
A demonstrao do agente etiolgico na leishmaniose visceral
realizada atravs de um esfregao da medula ssea, ou por
cultivo em um meio especial (NNN), enquanto que na forma
cutnea e mucocutnea realizada pela extenso da raspagem
dos bordes da leso e posterior colorao com Giemsa e tambm
em meio de cultivo (NNN).
FROTIS MEDULA SSEA OU CUTNEA
Leishmaniosis
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Exerccios
1) Que significado tem a hemoglobina no corpo humano?
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________________________________________________
2) Que caracterstica principal se encontra na anisocitosis?
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
3) Enumere os diferentes neutrfilos que podemos encontrar
em um frotis sanguneo tingido com Giemsa.
________________________________________________
________________________________________________
4) Que valor normal tem a Hb, em homens e em mulheres?
________________________________________________
________________________________________________
5) O que transporta o sangue?
________________________________________________
________________________________________________
6) Enumere os quatro componentes principais do sangue
venoso.
________________________________________________
________________________________________________
7) O que indica a cor vermelha das hemceas em um frotis
sanguneo?
________________________________________________
________________________________________________
8) Enumere cinco patologas que podem ser observadas nos
eritrocitos dos frotis.
________________________________________________
________________________________________________
9) Como se distingue uma falta importante de Hb nas
hemceas, observando um frotis sanguneo tingido com
Giemsa.
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
10) Que forma tem um drepanocito?
________________________________________________
11) Assinale a resposta correcta:
a) Os gametcitos de P. falciparum so os responsveis pela
febre na malria.
b) Todas as microfilrias possuem vagem.
c) Os tripanossomas encontram-se no interior dos glbulos
vermelhos.
d) A gota espessa uma tcnica muito mais sensvel que a
extenso para o diagnstico do paludismo.
e) Na gota espessa devem estar bem visveis os glbulos
vermelhos, os leuccitos e as plaquetas.
12) Desenhe um gametcito de P. falciparum ao lado de um
trofozoto tambm de P. falciparum numa extenso.
13) Desenhe os mesmos parasitas da pergunta anterior
numa gota espessa.
14) Desenhe um trofozoto maduro de P. vivax numa
extenso ao lado de um glbulo vermelho normal e de um
parasitado por um trofozoto jovem de P. falciparum.
15) Desenhe uma microfilria em gota espessa e indique
como se distinguem as diferentes espcies.
62
Tcnicas de Laboratrio Fezes
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Colheita e entrega de amostras de fezes no laboratrio
FEZES
I. Colheita de fezes s 6:00 da manh.
II. Transporte das amostras ao laboratrio.
III. Recepo e processamento das amostras para anlise.
IV. Observao ao microscpio com objetivas de aumento de 10, 40 e 100 vezes.
V. Levantamento dos resultados e devoluo ao clnico.
VI. Triagem.
63
Fezes Tcnicas de Laboratrio
Colheita da amostra: necessrio observar as amostras de fezes macroscopicamente de forma sistemtica, observando se existem
helmintos adultos (ascaris, tricocfalos, anis de tnias, oxiurose,...), ou produtos patolgicos: sangue e/ou muco.
Se h diarria, importante a observao em fresco e a quente (rejeitar a amostra se tiver transcorrido mais de meia hora aps
a emisso da mesma). O exame deve ser realizado com soro fisiolgico morno, procurando o movimento dos trofozotos, com uma
objetiva de aumento de 40 vezes (a emisso de pseudpodos nas amebas, os movimentos de Giardia intestinalis ou Balantidium coli
na forma de trofozoto). No colocar as amostras no frigorfico se forem diarricas e procurar trofozotos.
Leitura: A leitura da amostra de fezes deve ser iniciada com uma objetiva de aumento de 10 vezes, varrendo toda a extenso do
suporte de objetos e seguindo de forma sistemtica uma ordem pr-estabelecida (por exemplo, comeando no ngulo superior
esquerdo), para assim identificar quase todos os ovos de helmintos. Uma vez identificada uma possvel estrutura parasitria, passar
para uma objetiva de aumento de 40 vezes para confirmar o diagnstico. Posteriormente, necessrio fazer um outro preparado
com Lugol para descartar os possveis quistos de protozorios, e observar com uma objetiva de aumento de 40 vezes vrios campos
distribudos por toda a extenso da amostra (tambm possvel utilizar o mesmo preparado colocando uma gota de Lugol na periferia
do suporte de objetos).
Nas amostras de fezes, o primeiro que chama a ateno a quantidade de artefatos de grande variedade tanto na forma como no
tamanho. Algumas estruturas podem simular diferentes tipos de ovos, larvas ou quistos. ainda possvel observar gotas de gordura,
bolhas de ar, etc. Estes artefatos no devem ser confundidos com as estruturas parasitrias. Apenas a experincia vai ensinando a
diferenciar uns dos outros.
Outras estruturas que chamam a ateno (com uma objetiva de aumento de 40 vezes) so as bactrias e as leveduras. So normais
nas fezes. Para identificar a Cryptosporidium devemos utilizar, antes da observao, a colorao de Ziehl-Neelsen modificada.
Para a investigao de ovos de helmintos conveniente efetuar tcnicas de concentrao sobre a amostra fecal ( exceo de
Enterobius vermicularis e Taenia spp. cuja tcnica de eleio a fita de Graham). Lembrar de recolher a amostra fecal a processar
da periferia (no caso de fezes), j que na esquistossomase intestinal, os ovos so excretados pela mucosa do clon na parte distal e,
portanto, estaro localizados na zona perifrica do bolo fecal.
PROTOZORIOS:
Fresco
MIF
Formol-ter
Ziehl-Neelsen modificado
HELMINTOS:
Formol-ter
Tcnica de Kato-Katz
Flutuao
Cultivo Strongyloides
Fita de Graham
MTODO DE MIF (SAPERO, LAWLESS e STROME)
TCNICA DE CONCENTRAO COM FORMOL-TER (RIDLEY MODIFICADO)
COLORAO PARA Cryptosporidium (ZIEHL-NEELSEN MODIFICADO)
Reativos:
Soluo MF (Mertiolato-Formol)
Glicerina.....................................................5 ml
Formol comercial......................................25 ml
Tintura de Mertiolato (n 99 a 1% Lilly)....200 ml
gua destilada........................................250 ml
Soluo I (Iodo)
Iodo.............................................................5 g
Ioduro potssico........................................10 g
gua destilada.........................................100 ml
Guardar em frasco de topzio ao abrigo da luz.
Preparar uma nova soluo todos os meses.
O reativo MIF obtido misturando de forma extempornea
as duas solues anteriores em proporo de 0,3 ml de
soluo I em 4,7 ml da soluo MF.
Fixao:
Misturar aproximadamente 0,5 g de fezes (tamanho de uma
ervilha) em 5 ml do reativo MIF com a ajuda de uma esptula,
at obter uma mistura homognea.
Observaes:
Este mtodo tinge os parasitas alm de fixar.
A colorao ocorre em duas fases:
1 Colorao imediata. Os quistos e trofozotos adquirem uma
tonalidade verde-amarela ou amarelo-pardo.
2 Colorao retardada. A membrana nuclear adquire uma
cor vermelho escura, a cromatina no tingida mas fica muito
refringente e o citoplasma assume uma cor avermelhada.
Outra vantagem a de que os protozorios e os respectivos
quistos ficam concentrados principalmente nas capas superiores
do sedimento, o que facilita o encontro dos mesmos se a
amostra a examinar entre a lmina e a cobertura for extrada
desta zona com uma pipeta Pasteur.
Procedimento:
1 Colocar uma amostra de fezes de aproximadamente 1 cm de
dimetro em um tubo com 10 ml de formol a 10%.
2 Desfazer a amostra at obter uma mistura homognea.
3 Verter o contedo do tubo atravs de um coador metlico ou
de uma gaze dobrada em um tubo de centrifugao.
4 Adicionar 2 ml de ter ao contedo do tubo, tapar e agitar
vigorosamente durante 1 minuto.
5 Destapar com cuidado e centrifugar durante 3 minutos a
1500 rpm.
6 Decantar os resduos suprfluos e limpar as paredes do tubo
com uma gaze.
7 Diluir o sedimento com umas gotas de soro fisiolgico e fazer
um preparado entre a lmina e a cobertura.
Observaes:
Esta tcnica recomendada para a investigao de ovos de
helmintos e quistos de protozorios.
Procedimento:
1 Fazer uma extenso estreita sobre uma lmina a partir do
sedimento de uma amostra de fezes tratada pela tcnica do
Formol-ter e deixar secar.
2 Fixar com lcool metlico durante 3 minutos.
3 Tapar o preparado com Fucsina fenicada durante 30 minutos.
4 Lavar com gua da torneira e descolorir a extenso
tapando-a com cido sulfrico a 7% durante 1 minuto.
5 Lavar e tingir com verde de malaquite durante 5 minutos.
6 Lavar, secar e observar com a objetiva de imerso.
Observaes:
Os ooquistos adotam uma cor vermelha fcsia brilhante, mais ou
menos intensa conforme o tipo de descoloramento que contrasta
muito com o fundo verde. No interior dos ooquistos possvel
visualizar os quatro esporozotos e o corpo residual.
64
TCNICA DE KATO-KATZ PARA INVESTIGAO DE OVOS/LARVAS DE HELMINTOS
Procedimento:
1 Fazer uma extenso de fezes sobre um suporte de objetos,
procurando partir de vrios pontos da amostra, a extenso deve
ser moderadamente espessa.
2 Colocar por cima um papel celofane impregnado da soluo
de Kato. Expulsar as bolhas de ar apertando o preparado entre o
papel de filtro.
3 Passados de 20 a 30 minutos, observar com uma objetiva de
aumento de 10 vezes percorrendo toda a extenso, confirmar a
400 aumentos as estruturas suspeitas.
Material:
A) Soluo de Kato:
Glicerina...........................100 ml
gua destilada..................100 ml
Verde malaquite a 3%...........1 ml
B) Pedaos de papel celofane de aproximadamente 2 x 4 cm,
que so introduzidos em um recipiente com a soluo de Kato
pelo menos 24 horas antes da utilizao.
MTODO DE WILLIS (CONCENTRAO POR FLUTUAO DA AMOSTRA FECAL)
Procedimento:
1 Colocar uma amostra de fezes (aproximadamente do tamanho
de um gro de bico), em um recipiente de vidro de boca estreita
(1/1,5 cm de dimetro).
2 Adicionar uma pequena quantidade de soluo de
cloreto sdico saturado para dissolver a amostra e encher
posteriormente o recipiente at ao topo com a mesma soluo.
3 Colocar uma lmina sobre o recipiente de forma que fique em
contato com o lquido, procurando no deixar bolhas de ar.
4 Passados de 15 a 20 minutos, observar a lmina
ao microscpio, com prvia colocao de uma cobertura
sobre o preparado.
Observaes:
Esta tcnica no aconselhvel para a observao dos ovos
de trematodos e de ascaris no fecundados.
Para contornar este inconveniente, pode ser utilizada uma
soluo mais densa de sulfato de zinco.
CULTIVO DE LARVAS DE STRONGYLOIDES EM CARVO VEGETAL
Procedimento:
1 Misturar uma amostra de fezes sem fixar (aproximadamente
do tamanho de uma noz) com gua, at conseguir uma mistura
espessa.
2 Adicionar um volume similar de carvo vegetal granulado e
misturar homogeneamente. Colocar gua se necessrio.
3 Colocar um disco de papel de filtro, humedecido em gua, no
interior de uma placa de Petri.
4 Verter a mistura sobre o papel de filtro e tapar para evitar a
evaporao.
5 Guardar o preparado no escuro e vigilar diariamente, colocar
gua se necessrio.
6 Passados 5 ou 6 dias, adicionar uma pequena quantidade
de gua no fundo da placa de Petri e olhar em volta do disco
de papel com lupa ou com objetiva de aumento de 40 vezes no
microscpio.
Observaes:
Usar luvas com a placa de Petri, as larvas so infecciosas!
INVESTIGAO DE OXIUROS COM A FITA DE GRAHAM
Procedimento:
1 Utilizar uma tira ampla de fita adesiva aplicada a um
depressor, que deve ser aplicada pela parte adesiva sobre as
margens do nus, sem chegar a ser introduzida no mesmo.
2 Depois de aplicar vrias vezes, segurar no suporte de objetos,
cuidando para que a parte que esteve em contacto com a pele
fique no centro, recortando o papel que sobra com tesoura.
3 Colocar a lmina no microscpio e observar pela objetiva
de aumento de 10 vezes. Para facilitar a eliminao de bolhas,
que podem dificultar a viso, deve ser passado um algodo por
cima da lmina para eliminar-las ou ento colocar uma gota de
leo de imerso ou de xilol entre a lmina e a fita para evitar tais
artefatos.
4 Identificar as estruturas suspeitas e confirmar com a objetiva
de aumento de 40 vezes.
Observaes:
Na noite anterior colheita da amostra, necessrio fazer uma
lavagem com gua e sabo na regio genital e do nus. O exame
deve ser feito na manh seguinte.
65
A PROTOZORIOS B HELMINTOS C ARTEFATOS EM FEZES
PATOGNICOS
Entamoeba histolytica
Giardia intestinalis
Dientamoeba fragilis
Blastocystis hominis
Balantidium coli
Isospora belli
Sarcocystis hominis
Cryptosporidium parvum
Cyclospora spp.
NO PATOGNICOS
Chilomastix mesnili
Entamoeba dispar
Entamoeba coli
Entamoeba hartmani
Iodamoeba btschlii
Endolimax nana
Ascaris lumbricoides
Anquilostoma
Strongyloides stercoralis
Trichuris trichiura
Enterobius vermicularis
Trichostrongylus spp.
Taenia solium
Taenia saginata
Hymenolepis nana
Hymenolepis diminuta
Dipylidium caninum
Diphilobotrium latum
Paragonimus spp.
Fasciola sp.
Clonorquis sinensis
Heterophyes heterophyes
Opisthorchis filineus
Dicrocoelium dendriticum
Bolhas de ar
Bolhas de leo
Pelos vegetais
Gros de plen
Clulas vegetais
Espirais vegetais
Ovos de caros
Restos de refeies baritadas
PARASITAS QUE PODEMOS ENCONTRAR NAS FEZES
RELATRIO DE RESULTADOS
Os resultados devem ser informados com os nomes corretos e conforme a nomenclatura internacional de cada parasita. Um resultado
bem informado facilita a comunicao com o clnico e acredita-nos como peritos em relao aos diferentes parasitas.
Devemos escrever o nome do parasita acompanhado do elemento detectado (ovos, larvas, adulto, anel ou quistos). incorreto
informar acerca de quistos para nos referirmos a ovos ou larvas de helmintos e de ovos para nos referirmos a quistos de protozorios.
Faa suas Observaes
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1) Assinale a resposta correta:
a) Todas as larvas adultas do intestino podem ser observadas
nas fezes macroscopicamente.
b) Os quistos de protozorios intestinais devem ser tingidos com
Lugol (Iodo) para poderem ser diferenciados de clulas vegetais
e outros artefatos.
c) Nas amostras diarricas esperamos encontrar quistos de
protozorios e nas fezes formes (duras) os trofozotos.
d) Os adultos de Ascaris lumbricoides so planos e de 1cm de
comprimento.
e) Os geohelmintos no necessitam o cho para completar o seu
ciclo biolgico.
2) Desenhe as diferenas entre um ovo de Ascaris
lumbricoides decorticado e frtil e de um ovo de
Anquilostoma.
3) Desenhe um ovo de Schistosoma mansoni e marque onde
se localiza o espigo ou espcula.
4) Desenhe um ovo de Trichuris trichiura e ao lado um
quisto de Giardia intestinalis escala (que seja visvel
qual maior).
5) Desenhe uma larva de Strongyloides stercoralis e ao lado
um quisto de Entamoeba coli escala (que seja visvel qual
maior).
Exerccios
94
Tcnicas de Laboratrio Urina
URINA
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A
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Diagnstico de urina
(Tiago, Armando, Fernanda e Lcio)
Apareceu um doente na consulta no Centro de Sade de Morrumbene e explicou ao mdico que tinha dores
ao urinar com algumas gotculas de sangue. O mdico pediu o exame de urina. O doente apareceu no
laboratrio onde o tcnico passou as seguintes recomendaes:
Saltitar logo de manh antes de fornecer a urina no frasco, logo de imediato fornecer a urina e trazer ao
laboratrio no perodo das 7:30 s 8:30h. E o doente obedeceu recomendao do tcnico.
O tcnico processou a urina e a centrifugou por 10 minutos em 3000 rpm, e decantou o sobrenadante
ficando o sedimento. Observou ao microscpio usando a objetiva de 10X e 40X.
Obteve os seguintes resultados: leuccitos, eritrcitos, clulas epiteliais, ovos de Schistosoma haematobium.
Ento entregamos o resultado ao mdico.
95
Urina Tcnicas de Laboratrio
A urina humana composta principalmente por gua (96% em mdia), mas contm tambm uria, cido rico, sal e outras
substncias. O volume, a acidez e a concentrao de sais na urina so regulados por hormnios, entre os quais o hormnio
antidiurtico e o aldosterona, sendo que estes hormnios atuam nos rins para garantir que a gua, os sais e o equilbrio cido-
base do organismo se mantenham dentro de estreitos limites. A presena na urina de acar, albumina, pigmentos biliares ou
quantidades anormais de algumas substncias, incluindo os constituintes habituais, indicadora de doenas. A urina normalmente
estril quando expelida e tem apenas um vago odor. O cheiro desagradvel de urina deteriorada deve-se ao de bactrias que
provocam a liberao de amonaco.
Um adulto saudvel pode produzir entre 0,5 e 2L de urina por dia. Uma grande ingesto de lquidos aumenta a quantidade de urina
produzida; uma grande perda de lquido atravs da transpirao, vmitos oudiarria conduz diminuio da sua produo.
Colheita da amostras
A colheita da urina deve ser o mais limpa possvel. Lavar
bem a rea, descartar a primeira emisso de urina, apanhar
a urina em um frasco estril e fechar o frasco para o seu
transporte.

OBJETIVO DAS TCNICAS:
Buscar a presena da parasitas, infeces bacterianas e alteraes bioqumicas.
TCNICAS:
Sedimento Urinrio (exame citolgico, microbiolgico, parasitolgico)
Exame Bioqumico
Exame Bacteriolgico
Observao macroscpica das amostras
Procedimento:
1 Observar a cor da urina, a presena de sangue e o aspecto
transparente ou turvo.
2 Colocar 5 ml da urina em um tubo da centrfuga.
3 Colocar uma tira em contato com a urina. Esperar 2 minutos
e ler com a escala de cores que fica no frasco das tiras.
4 Escrever os resultados.
5 Centrifugar o tubo durante 5 minutos.
6 Atirar o sobrenadante (lquido) e depositar o sedimento obtido
sobre uma lmina. Cobrir com uma lamela.
7 Observar ao microscpio com a objetiva de 10X para detectar
a presena de ovos da Schistosoma.
8 Observar com a objetiva de 40X para detectar a presena de
hemcias, leuccitos, clulas epiteliais, bactrias e cristais.
9 Escrever suas caractersticas e quantidade.
Material necessrio
Tiras para bioqumica, lminas, lamelas, microscpio, centrfuga,
tubo especial da centrfuga, colorao de Gram.
Observao Macroscpica
Aspecto anormal: A urina turva pode dever-se a uma infeco
do trato urinrio e, nesse caso, tem um cheiro ftido. Os clculos
do trato urinrio podem tambm originar uma urina turva, mas
no necessariamente infectada. Quando a hematria (presena
de sangue na urina) d urina um aspecto escurecido pode
ser sinal de presena de esquistossomas. Quando a quantidade
de sangue na urina aumenta, esta torna-se avermelhada e
pode conter cogulos. Alguns corantes alimentares podem ser
expelidos pela urina e existe uma grande variedade de frmacos
que podem alterar-lhe a cor. Tambm pode ser sinal de malria.
Parasitologia:
Os ovos do parasita Schistosoma hematobium so detectados
com observao microscpica em fresco do sedimento da urina.
Citologia:
A presena dos leuccitos, hemacias, clulas epiteliais....
indicao de uma infeco.
A presena de cristais minerais uma indicao de alterao
metablica.
SEDIMENTO URINRIO
Tcnica especial de colheita de amostra para a
investigao de esquistossomiase.
Os ovos de esquistossomiase ficam colados na mucosa
da bexiga urinria. Quando fazemos exerccios de
contrao, os ovos caem e so liberados na urina. Por isso
muito importante colher a urina sempre depois de fazer
exerccio. Se no, os ovos ficam grudados na bexiga e no
os vemos no microscpio, dando um resultado de falso
negativo.
Este exerccio deve ser repetido 20 vezes.
96
COLORAO DE GRAM PARA BACTRIAS
A observao microscpica com a colorao de Gram permite a
deteco das bactrias que causam a infeco.
No caso de urina: tomar umas gotas do sedimento.
No caso de LCR: centrifugar o tubo durante 5 minutos e ento pegar
umas gotas do sedimento.
Procedimento:
1 Fazer uma preparao na lmina com a asa.
2 Deixar secar no ar.
3 Fixar com metanol 2 minutos, ou com o Bico de Bunsen.
4 Cobrir com cristal violeta 1 minuto.
5 Lavar com gua abundante para eliminar a soluo em excesso.
6 Tirar a gua e cobrir com Lugol-Iodina por 1 minuto (fixa a cor
violeta).
7 Lavar com gua abundante.
8 Descolorir rapidamente com Acetona-Ethanol por 1 minuto
(descolore as bactrias no fixadas ao violeta).
9 Cobrir com Carbol-Fucsina ou Safranina por 1 minuto (as
bactrias descoloridas ficam vermelhas).
10 Lavar com gua e deixar secar.
11 Observao com a objetiva 100X (leo de imerso).
EXAME BIOQUMICO
Consiste em umas tiras de plstico, onde esto colados papis
impregnados de qumica especial para diferentes anlises ao
mesmo tempo: glicose, protena, bilirrubina, urobilinogne, ph,
peso especfico, sangue, corpos cetniques, nitrites, leuccitos.
muito importante submergir bem as tiras inteiras e contar o
tempo exato, descrito no reagente.
Depois do tempo descrito o teste no vlido.
A presena de hemcias, leuccitos, glucosa, protenas, corpos
cetnicos, indicam uma sinal de patologia. Os outros parmetros
dependem da quantidade de leitura.
EXAME BACTERIOLGICO
BACTRIAS GRAM + :
COR PRPURA FORTE
BACTRIAS GRAM - :
COR VERMELHA
Observamos sempre a urina com a objetiva de 40X para detectar a presena de hemcias, leuccitos, clulas epiteliais, bactrias
e cristais. Em caso de presena de bactrias faremos uma colorao de Gram para determinar a morfologia das mesmas e sua
classificao em Gram + ou Gram .
Mas no ser seno com um urocultivo que se poder isolar o agente etiolgico e realizar um posterior antibiograma da cepa isolada
para saber a sensibilidade do mesmo.
97
Cocos Estafilococos
EXEMPLOS DE BACTRIAS
Diplococos Estriptococos Bacilos
PLANTILHA DE URINA
Leucocitos Hemceas Bactrias Tricomonas
Piuria Cristais Fungos Esquistossomas Clulas
Faa suas Observaes
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1) Qual a finalidade da colorao de Gram?
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2) Como informado um resultado na colorao de Gram?
________________________________________________
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3) O que significam as siglas BAAR?
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4) Com a colorao de Zielh-Neelsen, que possveis
patologias podem ser identificadas?
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5) O que expressamos com um resultado de Gram em uma
anlise de urina: flora mista cocobacilar?
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6) Que forma e que cor tem os Gonococos?
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7) Assinale que bactria podemos encontrar nos LCR.
a) Meningococo
b) Neumococo
c) Haemofilus influenzae
d) Todos podem ser encontrados
8) Podem aparecer bacilos Gram (+) numa colorao de
Zihel-Neelsen?
________________________________________________
________________________________________________
_______________________________________________
_______________________________________________
9) Desenhe a forma dos:
Estafilococos Estreptococos

Cocobacilos Diplococos
Bacilo de Koch Bacilos
10) Em que circunstncias deve ser realizado um Gram no
exame de urina?
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
________________________________________________
Exerccios
104
Tcnicas de Laboratrio Escarro
ESCARRO
Existia um senhor que vivia num bairro, comeou a tossir durante um ms. Ento ele dirigiu-se a um
curandeiro para fazer tratamento, s que a tosse nunca mais passava. Um amigo vizinho aconselhou ir ao
hospital e ele recusou confiando no curandeiro, s depois da doena estar numa fase mais avanada aceitou
ir ao hospital carregado em uma maca onde foi pedido para fornecer escarro.
Enviado o escarro ao laboratrio observou-se BK +++, e como era tarde demais acabou perdendo a vida.
Da apelamos a todos para quando tiverem a tosse para se dirigem ao hospital o mais cedo possvel.
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Quando algum tem tosse devemos lervar ao hospital
105
Escarro Tcnicas de Laboratrio
Doena grave, transmitida pelo ar, que pode atingir a todos os rgos do corpo, em especial os pulmes. O microorganismo causador
da doena o bacilo de Koch, cientificamente chamado Mycobacterium tuberculosis.
POR QUE NOS PULMES?
Como o bacilo de Koch se reproduz e se desenvolve rapidamente em reas do corpo com muito oxignio, o pulmo o principal
rgo atingido pela tuberculose.
PROCESSO DE DISSEMINAO DA TUBERCULOSE:
1 paso: Apesar de tambm atingir vrios rgos do corpo, a doena s transmitida por quem estiver infectado com o bacilo nos
pulmes.
2 passo: A disseminao acontece pelo ar. O espirro de uma pessoa infectada joga no ar cerca de dois milhes de bacilos. Pela
tosse, cerca de 3,5 mil partculas so liberadas.
3 passo: Os bacilos da tuberculose jogados no ar permanacem em suspenso durante horas. Quem respira em um ambiente por
onde passou um tuberculoso pode se infectar.
INFECO

Processo inflamatrio
O indivduo que entra em contato pela
primeira vez com o bacilo de Koch
no tem ainda resistncia natural,
mas adquire. Se o organismo no
esteve debilitado, consegue matar o
microorganismo antes que este se
instale como doena. tambm,
estabelecida a proteo contra
futuras infeces pelo bacilo.
Tuberculose primria
Aps um perodo de 15 dias, os
bacilos passam a se multiplicar
facilmente nos pulmes, pois ainda
no h proteo natural do organismo
contra a doena. Se o sistema de
defesa no conseguir encurralar
o bacilo, instala-se a tuberculose
primria, caracterizada por pequenas
leses (ndulos) nos pulmes.
Caverna tuberculosa
Com o tempo e sem o tratamento,
o avano da doena comea a
provocar sintomas mais graves. De
pequenas leses, os bacilos cavam
as chamadas cavernas tuberculosas
no pulmo, que costumam inflamar
com freqncia e sangrar. A tosse
nesse caso, no seca, mas com pus
e sangue. a chamada hemoptise.
106
Tcnicas empregadas para o diagnstico
PONTOS IMPORTANTES PARA O TCNICO DE LABORATRIO
Boa colheita de escarro
Procedimento
Exame da lmina
Registro
Frmulas dos reagentes
responsabilidade do tcnico dar instrues ao paciente de como fazer a colheita.
No se pode fazer dentro do laboratrio. S se deve fazer fora e longe de outras pessoas.
Informar o doente de fazer a colheita do escarro de manh.
Melhor fazer a colheita de p, no deitado.
Fazer a colheita em jejum.
Respirar profundamente.
Esvaziar os pulmes de uma vez, tossir forte e profundamente. Cuspir no frasco.
Realizar 3 baciloscopias para o diagnstico quando h suspeita de tuberculose:
1 amostra: entregar no momento da consulta no centro de sade.
2 amostra: no dia seguinte primeira hora da manh, quando acordar.
3 amostra: deve-se entregar no momento de fazer a entrega da 2.
FRASCO PARA O ESCARRO
Dar um frasco limpo ao paciente. Utilizar frascos de boca grande, plstico transparente e tampa de segurana.
Numerar o frasco com o mesmo nmero que figura na receita e que contenha os seguintes dados:
- Nome completo do paciente
- Data da colheita da amostra
- Nmero de registro
Os pacientes devem trazer a amostra com a correspondente receita onde conste o pedido do tcnico responsavel da TB.
Comprovar sempre a quantidade e qualidade da amostra.
A QUALIDADE DA AMOSTRA
Um bom escarro contm:
Partculas de pus (branco, amarelo ou verde), muco espesso e s vezes sangue.
Um mau escarro uma secreo lquida transparente (s saliva) que vem da boca. No fazer a anlise com estas amostras.
A QUANTIDADE DA AMOSTRA
Deveria recolher-se no mnimo 2 ml de amostra.
Procedimento:
1 Sempre usar lminas novas para evitar a contaminao.
2 Escrever em cada lmina: o nome do doente, o nmero da amostra e a data.
3 Colocar luvas e mscara.
4 Acender a chama da Bico de Bunsen.
5 Com muito cuidado, abrir o frasco o mais longe possvel da cara.
6 Com a asa, pegar um pouco de amostra, quanto mais slida melhor (pus) e espalhar na lmina.
7 Espalhar com um movimento em espiral no centro da lmina.
8 Aquecer a asa na chama at que fique vermelha para esterilizar completamente depois de cada amostra.
9 Fechar o frasco do escarro e jogar no recipiente de lixo contaminante.
10 Deixar secar a lmina num lugar protegido de poeira e insetos.
11 Fixar a amostra passando a lmina pela chama 3 vezes.
As amostras do escarro devem ser corretas Tcnica de fixao Colorao
NOME DA TCNICA
Colorao da amostra
1 Cobrir a preparao com Fucsina fenicada durante 5 min.
2 Aquecer com a chama at a emisso de vapores, sem ferver!
3 Fazer 3/4 vezes durante 5 minutos.
4 Lavar a lmina com gua abundante.
5 Descolorar com cido-Alcohol 3% durante 2 minutos, caso
no descolore bem, repetir o procedimento.
6 Cobrir con Azul de Metileno por 2 minutos.
7 Lavar com gua corrente.
A Fucsina tinge todas as bactrias mais ou menos segundo sua
estrutura.
O cido-Alcohol lava a cor de todos os organismos exceto os
bacilos cido-alcool resistentes (BAAR).
O azul de metileno tinge todos os organismos descolorados pelo
cido-Alcohol de uma cor azul.
Os BAAR continuam vermelhos.
Colorao de Ziehl-Neelsen
Este mtodo de colorao necessrio para investigar o
Mycobacterium tuberculosis em escarro ou urina. Esta colorao
detecta os bacilos cido-alcohol resistentes (BAAR).
Resultados
Lmina negativa:
Examinar a lmina por no mnimo 15 minutos.
Lmina positiva:
Se so observados BAAR na preparao, os resultados devem
ser registrados da seguinte maneira:
Nmero de BAAR observados:
0..........Nenhum bacilo encontrado
1-100 bacilos / 100 campos +
1-10 bacilos / 1 campo ++
Mais de 10 bacilos / campo +++
107
Reagentes para a colorao de Ziehl-Neelsen
1 Fucsina Fenicada
Soluo A
Soluo saturada de Fucsina
Fucsina Fenicada:.....3 g
Etanol 95 %:100 ml
Soluo B
Soluo de Fenol acuosa 5%
Fenol:.10 g
gua destilada:.200 ml
______________________________________
Soluo A:.....................................................10 ml
Soluo B:.................................................... 90 ml
2 cido e Etanol
Etanol 95%:.......97 ml
Acido clorhidrico concentrado.......3 ml
3 Azul de Metileno
Azul de Metileno:..........................................0,3 g
gua destilada:...........................................100 ml
Observao:
Filtrar a Fucsina fenicada para evitar a formao de precipitados
e evitar falsos positivos.
Livro de registro de tuberculose
Todos os seguintes dados deveriam ser escritos no livro:
nmero do paciente, data, nome do paciente, sexo, idade,
endereo, resultado do BK, nome do tcnico de laboratrio.
Faa suas Observaes
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111
Exerccios
1) Que aspecto deve ter um escarro, para seu exame de
investigao de TBC?
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2) Para que se utiliza a colorao de Zielh-Neelsen
modificado?
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3) Enumere 8 elementos indispensveis para realizar uma
preparao de Zielh-Neelsen correta.
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4) Que problema pode aparecer quando no se faz o frotis
corretamente?
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5) Quantos campos devem ser observados na lmina para
dar um resultado.
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6) Que diferena h entre um bacilo de Koch e um bacilo de
Hansen?
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7) Que corantes so necessrios para uma colorao de
Zielh-Neelsen?
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8) Que diferena h entre a colorao de Zielh-Neelsen
quente e a colorao de Kinyoun em frio?
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9) Quando queremos diagnosticar o bacilo de Hansen, de
onde escolhemos as amostras?
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10) Qual e o princpio da clorao de Zielh-Neelsen?
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Como usar o livro?
Como usar as chas?
Orientaes gerais
Respostas dos exerccios
Fotos
Captulo IV
VAMOS COMPARTIR A INFORMAO.
FORMANDO OUTROS TCNICOS.
114
Vamos Compartir a Informao / Formando Outros Tcnicos
VAMOS COMPARTIR A INFORMAO / FORMANDO OUTROS TCNICOS
Acham que precisa ser feito um material?
Sim, muito importante.
Pode servir para consultas, dvidas.
Agora no deu pra apontar tudo.
Servir como roteiro.
Caso duvidar, no lembrar, qualquer coisa que viram durante o curso, consulta.
Para lembrar quando vejam parasitas que faz muito tempo que no vem.
Que tipo de material?
Um livro, um manual, um manual tcnico.
Uma brochura: livro assim feito em arranjos daquilo que foi til durante a formao, vai nos servir no campo.
Quais temas devem de tratar o livro?
Sistema de sade.
Meio de transporte (ex: suspeita de um caso de clera).
O nosso laboratrio (componentes, funcionamento).
Interpretao de resultados.
Controle de qualidade.
Doenas.
Das doenas falar de:
Agente etiolgico, ciclo, tcnicas, reagentes, materiais.
Falar de:
Parasitologia no sangue: malria.
Fezes: helmintos e protozoos.
Urina: S. haematobium.
Bacteriologia: BK, bacilo de Hansen, Gram (-).
Fungos: criptococus, cndida.
LCR: anlises possveis.
Falar tambm daquelas doenas que no se tem notificao: leishmaniose, algumas filrias, tripanossomas.
Para quem?
Para ns mesmos.
Para formar algum com certeza (estagirios, outros tcnicos que no vieram).
Para discutir com o clnico/mdico.
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Como usar o livro?
O LIVRO TEM 3 GRANDES CAPTULOS:
1 Sistema de sade
2 Laboratrio
3 Tcnicas de laboratrio
O CAPTULO DAS TCNICAS DE LABORATRIO EST DIVIDIDO EM 4 PARTES.
Cada parte representa um fluido, identificada por sua cor (veja abaixo), e contm uma explicao geral e fichas dos parasitas
encontrados em cada fluido.
Sangue: vermelho
Fezes: marrom
Urina: amarelo
Escarro: azul
Como usar as fichas?
AS FICHAS TM:
Desenho do parasita
Explicao geral da doena
Fotografias do parasita
Explicao detalhada do parasita
rea de aprendizagem: "No esquecer", "Dvidas" e "Desenhe o parasita"
Identificao da cor do fluido
Desenho do parasita
Explicao geral da
doena: importante para
a relao com os clnicos
e entendimento da doena
Fotografias reais do
parasita
Explicao detalhada do
parasita: aqui encontram-se
os pontos mais importantes
para identificar o parasita
rea de
aprendizagem:
aqui pode-se anotar
as coisas mais
importantes, que no
se deve esquecer,
anotar suas dvidas
para perguntar ao
professor ou a um
colega, e desenhar
o parasita anotando
os detalhes
Cor identificativa
do fluido
116
Orientaes gerais
EDUCADOR
No final de cada captulo existem perguntas que podero ser utilizadas para dinamizar grupos de trabalho ou resolver dvidas
concretas. Tambm pode-se utilizar as fichas para incentivar o aluno a usar a rea de aprendizagem.
ALUNO
Leia atentamente todo o livro para:
Organizar seu laboratrio
Aprender como realizar as tcnicas
Use as fichas no seu dia-a-dia no laboratrio para identificar os parasitas
Anote as suas dvidas nas fichas
Anote as coisas mais importantes
Faa os exerccios com um colega
O seu trabalho muito importante para todas as pessoas! Disfrute fazendo-o!
117
Respostas Exerccios
SANGUE - pg 59:
1) A Hb no corpo humano a responsvel pelo transporte do oxignio e
do gs carbnico entre o aparelho respiratrio e o resto das clulas do
corpo.
2) caracterizado pela presena de formas muito diferenciadas entre
os glbulos vermelhos. So observados em um esfregao sanguneo
tingido com Giemsa.
3) Existem apenas duas classes de neutrfilos no sangue perifrico:
neutrfilo segmentado e neutrfilo caiado.
4) Valores de referncia > de 13 g/L nos homens e > de 12 g/ml nas
mulheres.
5) O sangue transporta os glbulos vermelhos, os leuccitos e todos os
componentes do soro humano: protenas, aminocidos, enzimas, etc.
6) Glbulos vermelhos, leuccitos, plaquetas e soro.
7) A cor vermelha indica o pigmento da concentrao de Hb, dentro do
glbulo vermelho. Quanto mais cor, mais Hb.
8) Micrcitos, poiquilocitose, clulas em diana, drepanocitos, hepatcitos
etc.
9) A falta de ferro identificada pela falta do pigmento vermelho dentro
do glbulo vermelho. Em uma anemia importante identificada uma
zona central completamente branca.
10) A forma de meia lua, forma de banana.
FEZES - pg 91:
1) Resposta correta a b.
URINA - pg 101:
1) Esta colorao realizada para identificar e poder classificar as
bactrias conforme a estrutura molecular. Esta colorao identifica-as
em azul e vermelho.
2) O resultado expressado consoante a morfologia (cocos, bacilos,
diplococos, etc.) Gram (+) ou Gram (-) ou ambos ao mesmo tempo:
Gram (+) e Gram (-).
3) Estas iniciais indicam Bacilos cido-lcohol Resistentes. o resultado
que expressado em uma colorao de Zielh-Neelsen, quando
investigado o Bacilo de Koch.
4) Com esta colorao podemos identificar: Tuberculose: bacilos de
Koch; Lepra: bacilos de Hansen; Imunodeficincia: Criptosporidium
(colorao de Zielh-Neelsen modificada).
5) Este resultado indica que nesta urina foi realizada a colorao de
Gram porque apresenta bactrias. No Gram aparecem bactrias Gram
(+) e bactrias Gram (-). Normalmente a estrutura composta por cocos
e bacilos.
6) Os Gonococos so sempre Gram (-). Aparecem na estrutura de cocos
em gros de caf agrupados. Normalmente aparecem intracelulares e
extra-celulares.
7) A resposta correcta a n 4. Todos podem ser encontrados nos LCR.
8) No. Nunca podemos encontrar um bacilo Gram (+). Quando
realizamos a colorao de Zielh-Neelsen, todas as bactrias ficam azuis
exceto o bacilo de Koch, que fica vermelho. Para identificar um bacilo
Gram (+) devemos realizar esta colorao.
10) Sempre que em um sedimento urinrio aparecem glbulos brancos
e bactrias.
TUBERCULOSE - pg 109
1) Aspecto purulento, espesso, sanguinolento. No deve apresentar
saliva.
2) Para a identificao do Criptosporidium em fezes.
3) 1-blusa, 2-luvas, 3-mscara, 4-bico de bunsen, 5-asa de
platino, 6-lmina estril, 7-algodo para queimar, 8-escarro purulento.
4) Se fica muito grosso ou muito fino, no se pode identificar bem o
bacilo, e o resultado falso.
5) Deve-se observar com pacincia toda a preparao.
6) Os dois apresentam a mesma morfologa em forma de basto e
alargados. S muda a sua disposio em observao da preparao:
Bacilo de Koch: sozinhos, em cadeias ou sobrepostos. Bacilo de Hansen:
agrupados em formas de bolsas ou globos. As vezes se apresentan
em grupos de 4/5.
7) Fucsina Fenicada, cido Sulfrico ou Clordrico, lcohol, Azul de
Metileno.
8) So os mesmos reagentes, mas na colorao em frio a Fucsina tem
maior concentrao e se deixa menos tempo de colorao.
9) Deve-se buscar ndulos. Pode-se encontrar os bacilos no lbulo da
orelha. Tambm se investigam em feridas, leses, ou em um frotis da
mucosa nasal.
10) Os bacilos de Koch ou de Hansen, so cido- lcohol resistentes.
Quer dizer, quando esto tingidos pela Fucsina, estas duass espcies
de bactrias, chamadas micobacterium, ficam vermelhas. Quando
se adiciona o cido e o lcohol, so as nicas que no perdem a cor
vermelha. Todas as demais ficam descoloradas.

118
Fotos
119
120
Faa suas Observaes
121
122

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LIDANGALIA NHA GUTI MADWALI / DHIBUKU DHA LYO KUDZIVA MADHULY / A BUKU GO KAMBA A MABABYI

Provncia de Inhambane, Moambique

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