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Replicação Do DNA
Replicação Do DNA
INTRODUO
Ambas as fitas de DNA que formam um duplex servem como molde para sntese de
uma fita nova complementar. Assim, durante um evento de duplicao so produzidas duas
molculas novas de DNA, cada uma delas consistindo de uma fita velha (do duplex
original) e uma nova (recm-sintetizada). Isso a replicao semiconservativa.
A replicao de DNA sempre tem incio num ponto nico na molcula, caracterizado por uma
sequncia de bases especficas denominadas origem da replicao, a partir de onde a dupla
fita se abre. As terminaes destes so pontos dinmicos, chamados de forquilhas de
replicao, onde as fitas de DNA so separadas e replicadas.
3.1. NUCLEASES
So enzimas que tem a capacidade de clivar (cortar) cidos nuclicos, sendo, portanto,
responsveis pela degradao do DNA. Existem inmeros tipos, que esto dividas em duas
classes principais: Exonucleases, que degradam cidos nuclicos a partir da extremidade da
molcula e Endonucleases, que degradam a partir de qualquer stio (local) da molcula de
DNA.
O estudo das polimerases revelou que para polimerizao ocorra so necessrios dois
elementos principais: uma fita molde de DNA e um primer (iniciador). O molde, lido na
direo 3 5, determina a sequncia dos nucleotdeos da fita nova, obedecendo as leis de
pareamento de Watson e Crick ( A = T , G = C). Ele normalmente representado pela fita
velha. Desta forma, as caractersticas de complementaridade e antiparalelismo so mantidas
no novo duplex de DNA. O primer necessrio porque a polimerase no consegue iniciar o
alongamento de uma cadeia de polinucleotdeos a partir de nucleotdeos livres; ou seja, um
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pedao de fita nova j deve existir. O primer um pequeno segmento de RNA, sintetizados
pela enzima primase, que depois ser substitudo.
O papel especfico de cada polimerase pode ser simplificado da seguinte maneira:
Polimerase I: funo de reparo nos processos de replicao e recombinao.
Polimerase III: a principal enzima envolvida no processo. Tm uma estrutura mais
complexa, com vrias subunidades com funes especficas.
As helicases fazem a separao das duas fitas parentais para que a replicao possa ter
incio.
Esta separao cria um estress topolgico que aliviado pela ao das topoisomerases,
enzimas que atuam no enrolamento do duplex de DNA. J as SSB (single strand binding
proteins ou protenas de ligao do DNA de fita simples) mantm as duas fitas separadas
estabilizadas.
3.4. PRIMASES
Sintetizam a pequena poro de RNA que servir como primer para incio da
replicao.
4. ESTGIOS DA REPLICAO
4.1. INICIAO
A origem da replicao da E. coli, chamada de OriC, consiste numa sequncia de 245
pb altamente conservada (isto , aparece em diversos organismos e manteve-se idntica
durante o processo evolutivo) entre as origens de replicao.
As sequncias chave deste segmento consistem em duas sries altamente repetidas: 3
repeties de 13 pb e e 4 repeties de 9 pb. Pelo menos 6 enzimas ou protenas participam na
iniciao da replicao. Elas abrem o DNA na origem e estabilizam o complexo que se forma
junto com as outras enzimas envolvidas na replicao (complexo pr-priming) para
que ocorram as reaes subseqentes. O componente chave para no processo a protena
DnaA. Um complexo de 20 DnaAs se liga s 4 repeties de 9 pb na origem, depois
reconhece e abre o DNA na regio das trs repeties de 13 pares de base. A DnaB ento se
liga a regio aberta e funciona como uma helicase criando assim uma forquilha de replicao
e separando progressivamente a dupla fita, numa reao quere quer DnaC como co-fator.
A iniciao nica fase regulada da replicao, de forma que ela a replicao s
ocorra uma vez por ciclo celular. O tempo de incio da replicao afetado pela metilao do
DNA. Imediatamente aps o trmino da replicao o DNA hemimetilado; a oriC da
fita parental metilada mas da fita nova no. Enquanto a regio oriC da fita nova no for
metilada no pode ter incio um novo processo de replicao.
4.2. ALONGAMENTO
Esta fase inclui duas operaes distintas, mas relacionadas: a sntese da fita lder e a
sntese da fita tardia.
A sntese da fita lde um processo mais simples, iniciando com a sntese de um
pequeno segmento de RNA pela primase na origem de replicao. Depois os
desoxirribonucleotdeos so adicionados ao primer pela DNA polimerase III obedecendo s
regras j mencionadas. A sntese da fita lder ento prossegue continuamente at o final da
molcula. O primer retirado e substitudo por DNA.
4.3. TERMINAO
Tomando-se como um modelo a E. coli e tendo em vista seu DNA circular, haver
um momento em que as duas forquilhas de replicao (que progridem direncionalmente)
finalmente se encontraram um uma sequncia chamada Ter. Para que possa dar fim a
replicao, ela foi arranjada de maneira a formar uma espcie de armadilha, em que a
forquilha de replicao entre e no possa sair. Isso obtido pela ligao da protena Tus ao
regio Ter. Como as forquilhas de replicao tm direo opostas e normalmente halt quando
colidem, as sequncias talvez Ter no fossem essenciais, mas impedem que a replicao do
DNA recomece ou continue.
Nos eucariotos a terminao da replicao dos cromossomos lineares enfrenta o
problema de replicar a extremidade da fita tardia, que est sendo sintetizada em sentido
oposto. A soluo envolve a sntese das partes terminais dos cromossomos, chamadas
telmeros. Os telmeros possuem vrias cpias de uma seqncia consenso, as quais so
adicionadas por uma enzima especfica (telomerase) na fita tardia, quando a replicao estiver
prxima ao final. Na fita lder, a terminao ocorre naturalmente quando ao final do molde
parental.
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Teoria conservativa: Cada fita do DNA sofre duplicao e as fitas formadas sofrem
pareamento resultando num novo DNA dupla fita, sem a participao das fitas "parentais".
Assim, fita nova com fita nova formam uma dupla hlice e fita velha com fita velha formam a
outra dupla fita;
Teoria semiconservativa: Cada fita serve de molde para replicar uma nova fita
complementar, produzindo duas molculas de DNA filhas. Cada molcula filha contm duas
fitas de DNA com orientao antiparalela. Este processo chamado de replicao
semiconservativa, porque o par parental separado em duas metades. A nova molcula filha
contm apenas uma fita parental intacta (CHAMPE, 1996);
Teoria dispersiva: Haveria quebras continuadas na espinha-dorsal de acar-fosfato e
subseqente reconstituio aps a duplicao que poderia resultar numa mistura de segmentos
velhos e novos na mesma fita (Bonato, 2003).
REFERNCIAS
SUMRIO
1 INTRODUO ..................................................................................................................... 1
2 REGRAS FUNDAMENTAIS DA REPLICAO ........................................................... 2
2.1 A Replicao do DNA um processo semiconservativo ................................................ 2
2.2 A replicao tem incio em uma origem e a partir dela continua bidirecionalmente ... 2
2.3 A sntese de DNA procede na direo 5 para 3 e semidescontnua ................... 3
3 ENZIMAS ENVOLVIDAS NA REPLICAO ............................................................... 4
3.1 Nucleases ......................................................................................................................... 4
3.2 DNA Polimerases ......................................................................................................... 4
3.3 Helicases, Topoisomerases, SSB ............................................................................. 5
3.3 Primases ............................................................................................................... 5
4 ESTGIOS DA REPLICAO .......................................................................................... 5
4.1 Iniciao ............................................................................................................................ 6
4.2 Alongamento ................................................................................................................. 6
4.3 Terminao ............................................................................................................... 7
5 REPLICAO NOS EUCARIOTOS ................................................................................ 8
6 TRS HIPTESES TENTARAM EXPLICAR A REPLICAO DO DNA ................ 8
REFERNCIAS ....................................................................................................................... 9
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