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Microextração em Fase Sólida
Microextração em Fase Sólida
SPME, SOLID PHASE MICRO-EXTRATION. Fundamental aspects of Solid Phase Micro-Extraction (SPME) are discussed in the present paper. The application of SPME as a microtechnique of
sample preparation for gas chromatographic analysis is considered and related to existing theoretical models. Both research prototypes and commercial SPME devices are considered.
Keywords: solid phase micro-extraction (SPME); sample preparation; solventless analyte extraction.
INTRODUO
A qualidade de um mtodo analtico determinada, como
representado na Figura 1, pela qualidade de suas etapas, com
seus erros experimentais. Por um lado, esta qualidade depende
da tcnica de amostragem, com a qual seleciona-se uma frao
presumivelmente representativa da amostra primria. Nesta frao devem-se identificar e quantificar analitos, que so os componentes qumicos que, tambm presumivelmente, a definem.
comum no se analisar quimicamente matrizes na forma bruta, pois elas costumam ter e gerar interferncias e incompatibilidades com equipamentos analticos. Para contornar tais problemas so empregados procedimentos de preparo da amostra,
com os quais procura-se isolar e concentrar os analitos a nveis
adequados e obter um nvel de limpeza da amostra que no
comprometa a sua anlise qumica. Portanto, o preparo da
amostra tambm inclui a sua compatibilizao com a tcnica
que fornecer os dados qumicos. A SPME uma opo relativamente recente1, que tem sido empregada para essas operaes que criam o elo entre a matriz qumica e o instrumental
analtico, sendo particularmente interessante para Cromatografia Gasosa.
B
tubo de fixao
da fibra (interno
ao hipodrmico
mola
tubo hipodrmico
(agulha)
d.e. ~
~ 0,56 mm
fibra
retrada
10 mm
fibra
exposta
300
m
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524
retirar
perfurar
septo
extrair
para
o
cromatgrafo
retirar
dessoro
injetor do cromatgrafo
EXTRAO
ANLISE CROMATOGRFICA
Composio Qumica
No-polares
Polares
Bi-polares
Polidimetilasiloxano (PDMS)
Lf / m
ToC
Aplicao sugerida
o
100;
30;
7
200-270 C
220-320oC
Poliacrilato (PA)
85
220-310oC
Carbowax/divinilbenzeno
(CW-DVB)
65
200-260oC
PDMS-DVB
65
200-270oC
Carboxen-PDMS
75
a. No esto relacionadas fibras para Cromatografia Lquida. b. ToC = faixa de temperatura indicada dessoro.
matriz aquosa (e equilbrio), neh no headspace e nef na fibra.
A conservao de massa no processo expressada como:
n0 = nme + nhe + n ef
(1)
Abaixo, a Equao 2 correlaciona as constantes de distribuio fibra-matriz, Kfm = Cef/Cem, fibra-headspace, Kfh = Cef/
Ceh e headspace-matriz, Khm = Ceh/Cem ; esta equao obtida
da Equao 1 com as substituies dos volumes e concentraes das fases em equilbrio, respectivamente, para a matriz, o
headspace e a fibra, Vem e C em, Veh e C eh, Vef e Cef 9:
K fm = K fh Khm
(2)
Aps substituio das constantes de distribuio e da Equao 2 na Equao 1 e rearranjos algbricos, obtm-se a Equao 39, que fornece a quantidade de analito extrado no sistema
em equilbrio.
n ef =
K fmVf C0Vm
K fmVf + KhmVh + Vm
(3)
L2f
2Df
(4)
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Frao Extrada
equilbrio
Frao Extrada
Extrao / min
(5)
(6)
526
Massa extrada / ng
t e t 95 = 3
Extrao / min
20 x 104
15 x 10
Por exemplo, na extrao de humuleno e cariofileno de lpulo18 a opo natural foi a extrao do headspace, por tratar-se
de matriz slida. Para matrizes aquosas limpas ambas alternativas mencionadas devem ser verificadas. Um critrio geral
o de que a SPME de headspace indicada para analitos de
mdia e alta volatilidade12. No entanto, numa anlise de COVs
(compostos orgnicos volteis) em gua a SPME direta foi a
melhor opo pois, com fibra PDMS 100 m as relaes entre
as quantidades recuperadas por extrao direta e de headspace
foram de 30:1 para cloreto de vinila, 13:1 para clorofrmio,
10:1 para benzeno e 6:1 para tolueno4. Portanto, eventualmente a SPME direta pode ser aplicada para compostos volteis9,11.
PDMS 100 m
10 x 104
5 x 10
Etanol
Acetona
Isopreno
1000 x 10 4
PDMS/DVB
75 x 104
50 x 10 4
25 x 10 4
Etanol
Acetona
Isopreno
Umidade relativa
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exemplo, o desenvolvimento da fibra Carboxen/PDMS facilitou a extrao compostos volteis, como os de aromas50 e gases sulfurosos4.
Recentemente foi proposto um modelo matemtico que permite estimar a concentrao desse analito, a partir do seu fator
de resposta para o detector por ionizao em chama e a rea do
seu pico cromatogrfico, obtido aps uma extrao por SPME
de headspace51. Este estudo, baseado em experimentos com 71
compostos funcionalmente diversos, evidencia as vantagens de
aplicar SPME na anlise de volteis biolgicos. O modelamento
matemtico da dinmica do processo de adsoro em SPME, em
condies de agitao experimental demonstra que anlises quantitativas podem ser efetuadas antes de ser atingido o equilbrio
de extrao32. So relatados tempos para equilbrio de at 1 h
(SPME direta) e at 40 min (SPME headspace); os quais, pela
modelagem estudada, podem ser substancialmente abreviados.
Num estudo usando fibras PDMS, para quantificar no headspace
hidrocarbonetos de petrleo presentes em gua, demonstrada a
possibilidade do clculo das Kfm desses analitos a partir de sua
reteno cromatogrfica22. Num trabalho similar com seis tipos
de fibras sugerido que a quantificao a partir do headspace
pode ser dfcil pela variabilidade da Kfh dos analitos23. Foram
propostos os modelamentos do equilbrio de soro e da cintica
de extrao utilizando como analitos 11 compostos orgnicos
volteis, considerando-se os efeitos salino (em gua do mar) e
efeitos de matriz devido presena de cidos hmicos52. Num
estudo envolvendo extrao de headspace em condies de fluxo, foi demonstrado que os tempos de equilbrio so menores do
os obtidos com extraes de headspace esttico convencional,
por minimizao da dependncia com a difuso do analito no
ar12. Os fundamentos da amostragem dinmica de ar tambm
foram avaliados, concluindo-se que este tipo de amostragem pode
ser realizada sem agitao12,19. A extrao de aldedos, pirazinas, piridinas e tiazis (produtos da reao de Maillard) por
PDMS 100 m e CBW/DVB 65 m, incluindo avaliao do
efeito salino, foi objeto de avaliao sistemtica, em que se discutem vrios fatores experimentais que afetam as extraes tanto para fins quantitativos quanto para qualitativos23. Num estudo
sobre extrao de pirazinas de cacau torrado foi evidenciado que
o rendimento de extrao maior quando feita no headspace do
slido ao invs de no headspace de sua suspenso aquosa53. As
condies de injeo splitless no CG foram exploradas, demonstrando-se, p.ex, que o tempo de dessoro no CG importante
na recuperao de analitos de diferentes volatilidades54,55. Em
aromas de mas, 29 componentes foram extrados e
quantificados por PDMS 100 m / CG-EM37; menciona-se um
efeito de matriz devido competio dos analitos pela fibra, que
pode afetar a condio de saturao da fibra. Na determinao
de nitrocompostos utilizados como almscares artificiais em vrios tipos de cosmticos so discutidos efeitos de matriz para
diversos tipos de cosmticos56.
Para a otimizao de um mtodo para quantificao de 31
aromatizantes tpicos de tabaco foram testadas as fibras PDMS
100 m, PA 65 m, PDMS/DVB 65 m, CBX/DVB 65 m57;
observou-se pronunciado efeito de matriz e que fibras polares
se mostraram as mais adequadas nas extraes. No mesmo trabalho, determinou-se que o efeito salino afeta de modo diferente a extrao dos diversos analitos testados. A SPME de
headspace foi aplicada, com resultados melhores do que a
SPME direta, para anlise quantitativa de componentes de aroma produzidos por bactrias derivados de carne34; as extraes
com fibra PA foram melhores do que com PDMS, devido ao
carter polar (cidos orgnicos) desses analitos.
Vrias descries de aplicao da SPME incluem valiosas
informaes sobre a comparao desta tcnica com outras. Para
a anlise de constituintes dos aromas de refrigerantes tipo
cola, a SPME de headspace comparada com o headspace
dinmico convencional seguido de adsoro em Tenax35.
demonstrado que a SPME um mtodo mais rpido, embora
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