Preparacao Resposta Virus Chikungunya Brasil

ISBN 978-85-334-2157-8
MINISTRIO DA SADE
9 788533 421578
Preparao e Resposta Introduo do Vrus Chikungunya no Brasil
Biblioteca Virtual em Sade

do Ministrio da Sade
www.saude.gov.br/bvs
Preparao e Resposta Introduo

do Vrus Chikungunya no Brasil
Baseado no livro Preparacin y respuesta ante la eventual
introduccin del virus chikungunya en las amricas
Braslia / DF 2014
MINISTRIO DA SADE

Braslia / DF 2014
MINISTRIO DA SADE
Secretaria de Vigilncia em Sade
Departamento de Vigilncia das Doenas Transmissveis

Braslia / DF 2014
2014 Ministrio da Sade.
Esta obra disponibilizada nos termos da Licena Creative Commons Atribuio

No Comercial Compartilhamento pela mesma licena 4.0 Internacional.
permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte.
A coleo institucional do Ministrio da Sade pode ser acessada, na ntegra, na Biblioteca Virtual em Sade do
Ministrio da Sade: <www.saude.gov.br/bvs>.
Tiragem: 1 edio 2014 10.000 exemplares
Elaborao, distribuio e informaes
MINISTRIO DA SADE
Departamento de Vigilncia das Doenas
Transmissveis
Coordenao-Geral do Programa Nacional de
Controle da Dengue
Esplanada dos Ministrios, bloco G, Edifcio Sede
1 andar, sala 141
CEP: 70058-900 Braslia/DF
Site: www.saude.gov.br/svs
E-mail: svs@saude.gov.br
Produo
Ncleo de Comunicao/GAB/SVS
Colaborao
Fabiano Geraldo Pimenta Jnior
Giovanini Evelim Coelho
Haroldo Srgio da Silva Bezerra
Ima Aparecida Braga
Joo Bosco da Siqueira Jnior
Jos Lus San Martin
Lvia Carla Vinhal Frutuoso
Otvio Oliva
Pedro Fernando da Costa Vasconcelos

Ricardo Loureno de Oliveira
Rita M. R. Nogueira
Rivaldo Venncio da Cunha
Roberta Gomes Carvalho
Rodrigo Fabiano do Carmo Said
Capa e diagramao
Fred Lobo Nucom/GAB/SVS
Editora responsvel
MINISTRIO DA SADE
Secretaria-Executiva
Subsecretaria de Assuntos Administrativos
Coordenao-Geral de Documentao e Informao
Coordenao de Gesto Editorial
SIA, Trecho 4, lotes 540/610
CEP: 71200-040 Braslia/DF
Tels.: (61) 3315-7790 / 3315-7794
Fax: (61) 3233-9558
Site: http://editora.saude.gov.br
E-mail: editora.ms@saude.gov.br
Equipe editorial
Normalizao: Daniela Ferreira Barros da Silva
Reviso: Khamila Silva e Tatiane Souza
Impresso no Brasil / Printed in Brazil

Ficha Catalogrfica
Brasil. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Departamento de Vigilncia das Doenas
Transmissveis.
Preparao e resposta introduo do vrus Chikungunya no Brasil / Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia
em Sade, Departamento de Vigilncia das Doenas Transmissveis. Braslia : Ministrio da Sade, 2014.
100 p. : il.
Baseado no livro Preparacin y respuesta ante la eventual introduccin del virus chikungunya en las amricas.
ISBN 978-85-334-2157-8
1. Vrus Chikungunya. 2. Epidemiologia. 3. Agravos sade. 4. Sade pblica. I. Ttulo.
CDU 616-022
Catalogao na fonte Coordenao-Geral de Documentao e Informao Editora MS OS 2014/0471
Ttulos para indexao
Em ingls: Preparation and response to introduction of Chikungunya virus in Brazil.
Em espanhol:Preparacin y respuesta a la introduccin del virus Chikungunya en Brasil.
SUMRIO
EPIDEMIOLOGIA
1.1 Surtos recentes

1.2 Dinmica de transmisso
2
CLNICA
6
7
8
10
2.1 Apresentao clnica da doena

2.2 Manifestaes atpicas
2.3 Grupos de risco
2.4 Diagnstico diferencial
11
14
15
16
18
LABORATRIO
3.1 Tipos de exames laboratoriais disponveis e amostras exigidas

3.2 Vigilncia laboratorial
3.3 Interpretao e comunicao dos resultados
19
23
24
26
MANEJO DOS CASOS
4.1 Tratamento
4.2 Capacidade assistencial e hospitalar a surtos epidmicos
4.3 Segurana de sangue, rgos e tecidos
27
28
32
34
VIGILNCIA E RESPOSTA AO SURTO
5.1 Modos de vigilncia

5.2 Deteco de casos
5.3 Definio de casos
5.4 Notificao de casos
5.5 Regulamento Sanitrio Internacional e Medidas de Fronteira
35
36
37
37
39
42
VIGILNCIA E CONTROLE DO VETOR
6.1 Reduzir o risco de CHIKV

6.2 Resposta introduo CHIKV
47
49
CONCLUSO
50
REFERNCIAS
52
APNDICES
62
Apndice A Protocolo de isolamento viral (para cultura de clula)

Apndice B Protocolo da reao da polimerase em cadeia em tempo real
Apndice C Protocolos sorolgicos IgM e IgG
Apndice D Exemplo de um formulrio de notificao de casos
Apndice E Relatrio de evento/surto de importncia para sade pblica
Apndice F Procedimentos de controle de vetores
Apndice G Controle de vetores de conteno do CHIKV
Apndice H Modelo de risco e plano de comunicao em caso de surto
63
66
69
82
84
85
87
91
1 EPIDEMIOLOGIA
O CHIKV um vrus RNA que pertence ao gnero Alphavrus da famlia Togaviridae.

O nome chikungunya deriva de uma palavra em Makonde que significa aproximadamente
aqueles que se dobram, descrevendo a aparncia encurvada de pacientes que sofrem de
artralgia intensa.
Casos humanos com febre, exantema e artrite aparentando ser CHIKV foram relatados
no incio de 1770. Porm, o vrus no foi isolado do soro humano ou de mosquitos at a
epidemia na Tanznia de 1952-53. Outros surtos ocorreram subsequentemente na frica e
na sia. Muitos ocorreram em pequenas comunidades ou comunidades rurais. No entanto,
na sia, cepas de CHIKV foram isoladas durante grandes surtos urbanos em Bangkok e
Tailndia em 1960 e em Calcut e Vellore, na ndia, durante as dcadas de 60 e 70.
1.1 Surtos recentes

Aps a identificao inicial do CHIKV, surtos ocorreram esporadicamente, e uma
pequena transmisso foi relatada aps metade dos anos 80. Todavia, em 2004, um surto
originrio da costa do Qunia, espalhou-se pelas Ilhas Comoros, Runion e muitas outras
ilhas do Oceano ndico durante os dois anos seguintes. Da primavera de 2004 ao vero de
2006, ocorreu um nmero estimado em 500 mil casos.
A epidemia propagou-se do Oceano ndico ndia, onde grandes eventos emergiram em
2006. Uma vez introduzido, o CHIKV alastrou-se em 17 dos 28 estados da ndia e infectou
mais de 1,39 milho de pessoas antes do final do ano. O surto da ndia continuou em
2010 com novos casos aparecendo em reas no envolvidas no incio da fase epidmica.
Os casos tambm tm sido propagados da ndia para as Ilhas de Andaman e Nicobar,
Sri Lanka, Ilhas Maldivas, Singapura, Malsia, Indonsia e numerosos outros pases
por meio de viajantes virmicos. A preocupao com a propagao do CHIKV atingiu
um pico em 2007, quando o vrus foi encontrado em transmisso autctone (humano-para-mosquito-para-humano) no norte da Itlia aps ser introduzido por um viajante
com o vrus advindo da ndia. As taxas de ataque em comunidades afetadas em recentes
epidemias variaram de 38% a 63% e, embora em nveis reduzidos, muitos casos destes
pases continuam sendo relatados. Em 2010, o vrus continua a causar doena na ndia,
na Indonsia, em Myanmar, na Tailndia, nas Maldivas e reapareceu na Ilha Runion.
Casos importados tambm foram identificados no ano de 2010 em Taiwan, na Frana,
nos Estados Unidos e no Brasil, trazidos por viajantes advindos, respectivamente, da
Indonsia, da Ilha Runion, da ndia e do sudoeste asitico.
Durante os recentes surtos, indivduos virmicos com CHIKV foram encontrados no

Caribe (Martinica), nos Estados Unidos e na Guiana Francesa. Todos esses indivduos
estavam retornando de reas com endemia ou epidemia de CHIKV e, portanto, a
transmisso no ocorreu de forma autctone. Porm, todas essas reas tm mosquitos
vetores competentes e hospedeiros suscetveis aumentando o risco da transmisso
endmica do CHIKV nas Amricas. Diante desses fatores, o CHIKV tem a capacidade
de emergir, reemergir e propagar-se rapidamente em novas reas, dessa forma, torna-se
necessrio a implantao e o aprimoramento das aes de vigilncia do vrus no Brasil.
1.2 Dinmica de transmisso

Vetores
Existem dois vetores principais do CHIKV, Ae. aegypti e Ae. albopictus. Ambos os
mosquitos so amplamente distribudos por todos os trpicos com Ae. Albopictus, sendo
tambm presentes em latitudes mais temperadas. Dada a distribuio dos vetores pelas as
Amricas, toda a regio suscetvel introduo e propagao do vrus.
Reservatrios
Humanos servem como o principal reservatrio do CHIKV durante perodos de
epidemia. Durante perodos interepidmicos, um nmero de vertebrados tem sido
implicados como potenciais reservatrios, incluindo primatas no humanos, roedores,
pssaros e outros pequenos mamferos.
Perodos de incubao
Os mosquitos adquirem o vrus de um hospedeiro virmico. Aps um perodo de
incubao mdio de dez dias, o mosquito torna-se capaz de transmitir o vrus a um
hospedeiro suscetvel, tal como um humano. Em humanos picados por um mosquito
infectado, os sintomas da doena tipicamente aparecem aps um perodo de incubao
intrnseco mdio de 3-7 dias (intervalo 1-12 dias) (Figura 1).
Figura 1 Perodos de incubao extrnseca e intrnseca para o vrus Chikungunya
O mosquito se alimenta /
adquire o vrus
O mosquito se realimenta
/ transmite o vrus
Perodo
de
incubao
intrnseco
Perodo de
incubao
extrnseco
Viremia
Viremia
Doena
12
16
20
DIAS
Humano 1
24
28
Doena
Humano 2
Fonte: Centres for Disease Control and Prevention/CDC e Organizao Pan-Americana da Sade.
Suscetibilidade e imunidade
Todos os indivduos no previamente expostos ao CHIKV (indivduos suscetveis) esto
sob o risco de adquirir infeco e desenvolver a doena. Acredita-se que, uma vez exposto
ao CHIKV, indivduos desenvolvero uma imunidade duradoura que os proteger contra
uma nova infeco.
2 CLNICA
10
2.1 Apresentao clnica da doena

A partir da picada por mosquito infectado com o CHIKV, a maioria dos indivduos
apresenta doena sintomtica aps um perodo de incubao de dez dias. Porm, nem
todos os indivduos infectados com o vrus desenvolvem sintomas. Anlises sorolgicas
indicam que 3% a 28% das pessoas com anticorpos antiCHIKV apresentam infeco
assintomtica. Indivduos agudamente infectados por CHIKV, seja clinicamente
aparentes ou assintomticos, podem contribuir para a propagao da doena se os vetores
que transmitem o vrus estiverem presentes e ativos na mesma localidade.
O CHIKV pode causar doena aguda, subaguda e crnica.
Fase aguda
A doena aguda mais comumente caracterizada por febre de incio sbito
(tipicamente maior que 39C) e dor articular intensa. Outros sinais e sintomas podem
incluir cefaleia, dor difusa nas costas, mialgia, nusea, vmito, poliartrite, erupo
cutnea e conjuntivite (Tabela 1). A fase aguda do CHIKV dura de 3-10 dias.
Tabela 1 Frequncia de sintomas agudos da infeco por CHIKV
Sinal ou sintoma
Faixa de frequncia
(% de pacientes sintomticos)
Febre
76-100
Poliartralgia
71-100
Cefaleia
17-74
Mialgia
46-72
Dor nas costas
34-50
Nusea
50-69
Vmito
4-59
Exantema
28-77
Poliartrite
12-32
Conjuntivite
3-56
Fonte: (BORGHERIN et al., 2007; STAIKOWSKY et al., 2008; STAIKOWSKY et al., 2009; REZZA et al., 2007).
Nota: Tabela compilada de uma srie de estudos.
11
A febre dura de poucos dias at uma semana. Pode ser contnua ou intermitente;
porm, a queda de temperatura no associada piora dos sintomas. Ocasionalmente,
pode ser associada a uma bradicardia relativa.
Sintomas articulares so comumente simtricos e ocorrem frequentemente nas mos e
nos ps, mas podem afetar articulaes mais proximais. Edema tambm pode ser visto e
frequentemente associado com tenossinovite. Os pacientes podem ficar incapacitados
devido dor, fragilidade, ao edema e rigidez, sendo incapazes de executar tarefas
normais ou ir ao trabalho, e podem ficar confinados devido a esses sintomas.
Exantemas normalmente ocorrem de dois a cinco dias aps o incio da febre
em aproximadamente metade dos pacientes. As erupes so tipicamente
maculopapulares, envolvendo o tronco e as extremidades, mas tambm podem incluir
as regies palmar, plantar e a facial. Tambm podem se apresentar como eritema
difuso que cede sob presso. Em crianas, as leses do tipo vesculo-bolhosas so as
manifestaes cutneas mais comuns.
No h achados hematolgicos patognomnicos significativos observados em
infeces por CHIKV. Achados laboratoriais anormais podem incluir trombocitopenia
leve (>100.000/mm3), leucopenia e testes de funo heptica elevados. A taxa de
sedimentao de eritrcitos e a protena C-reativa esto frequentemente elevadas.
Raramente formas graves da doena podem ocorrer com manifestaes atpicas.
Mortes relacionadas infeco por CHIKV so incomuns. Entretanto, um aumento
na taxa de bito absoluto foi relatado durante as epidemias de 2004-2008 na ndia e
na Ilha Maurcio.
Doena subaguda e crnica

Aps os primeiros dez dias, a maioria dos pacientes sentir uma melhora na sade
geral e na dor articular. Porm, aps este perodo, uma recada dos sinais pode
ocorrer com alguns pacientes reclamando de vrios sintomas reumticos, incluindo
poliartrite distal, exacerbao da dor em articulaes e ossos previamente feridos e
tenossinovite hipertrfica subaguda nos punhos e tornozelos. Isso muito comum
entre dois e trs meses aps o incio da doena. Alguns pacientes tambm podem
desenvolver distrbios vasculares perifricos, como a sndrome de Raynaud. Alm
dos sintomas fsicos, a maioria dos pacientes reclama de sintomas depressivos,
cansao geral e fraqueza.
12
A doena crnica definida por sintomas que persistem mais de trs meses. A
frequncia de pessoas relatando sintomas persistentes varia substancialmente por
estudo e pela quantidade de tempo decorrido entre o seu incio e o tratamento.
Estudos da frica do Sul mostraram que 12%-18% dos pacientes tero sintomas
persistentes de 18 meses a 3 anos. Em estudos mais recentes na ndia, a proporo de
pacientes com sintomas persistentes dez meses aps o incio da doena foi de 49%.
Dados da Ilha Runion demonstraram que 80%-93% dos pacientes se queixam de
sintomas persistentes trs meses aps o incio da doena; o que diminui para 57% aos
15 meses e 47% aos dois anos. (F. Simone, Departamento de Doenas Infecciosas e
Medicina Tropical, Hospital Militar de Laveran, Paris, Frana, comunicao pessoal).
O sintoma persistente mais comum artralgia inflamatria nas mesmas articulaes
afetadas durante os estgios agudos. Geralmente, no h mudana significante em
testes laboratoriais e nas radiografias das reas afetadas. Porm, alguns indivduos
desenvolvem artropatia/artrite semelhante artrite reumatoide ou artrite psoritica.
Outros sintomas da fase crnica da doena podem incluir cansao e depresso6.
Fatores de risco para a no recuperao so: idade avanada (maiores de 65 anos),
problemas de articulao preexistentes e doenas agudas mais graves.
13
2.2 Manifestaes atpicas

Embora a maioria das infeces por CHIKV resultem em febre e artralgias, manifestaes
atpicas podem ocorrer decorrentes dos efeitos diretos do vrus, resposta imunolgica
e/ou toxicidade dos medicamentos (Quadro 1).
Quadro 1 Manifestaes atpicas da infeco por CHIKV
Sistema
Manifestaes Clnicas
Neurolgico
Meningoencefalite, encefalopatia, convulses, sndrome

de Guillain-Barr, sndrome cerebelar, paresia, paralisia,
neuropatia.
Ocular
Neurite ptica, iridociclite, episclerite, retinite, uvete.
Cardiovascular
Miocardite, pericardite, insuficincia cardaca, arritmias,

instabilidade hemodinmica.
Dermatolgico
Hiperpigmentao fotossensvel, lcera aftosa

intertriginosa, dermatose vesculo-bolhosa.
Renal
Nefrite, insuficincia renal aguda.
Outro
Discrasias hemorrgicas, pneumonia, insuficincia

respiratria, hepatite, pancreatite, SSIHA,
hipoadrenalismo.
Fonte: Adaptado por Rajapakse et al.
Certas manifestaes atpicas so mais comuns em certos grupos. Por exemplo,

meningoencefalite e dermatose vesculo-bolhosa so mais observadas em crianas e
bebs, respectivamente.
14
2.3 Grupos de risco

CHIKV pode afetar indivduos de todas as idades e ambos os sexos. Entretanto, a
apresentao clnica conhecida por variar de acordo com a idade, sendo a muito jovem
(neonatal) e a idade avanada os perodos considerados como fator de risco para as
doenas mais graves. Alm da idade, as comorbidades (doenas subjacentes) tambm
vm sendo identificadas como fator de risco para pior evoluo da doena.
A maioria das infeces por CHIKV que ocorre durante a gravidez no resulta na
transmisso do vrus para o feto. Existem, porm, raros relatos de abortos espontneos
aps a infeco maternal por CHIKV. O risco maior de transmisso parece ser quando
mulheres so infectadas durante o perodo de intraparto. Bebs so tipicamente
assintomticos ao nascimento e ento desenvolvem febre, dor, erupo cutnea e edema
perifrico. Aqueles infectados durante o perodo intraparto podem tambm desenvolver
doenas neurolgicas (por exemplo, meningoencefalite, leses de substncia branca,
edema cerebral e hemorragia intracraniana), sintomas hemorrgicos e doena do
miocrdio. Anormalidades laboratoriais incluram testes de funo heptica aumentados,
plaquetas e contagem de linfcitos reduzidos e nveis de protrombina diminudos.
Neonatos que sofrem de doena neurolgica geralmente desenvolvem incapacidades em
longo prazo. No h evidncia de que o vrus seja transmitido atravs do leite materno.
Indivduos maiores de 65 anos tiveram uma taxa de mortalidade 50 vezes superior
quando comparados ao adulto jovem (menores de 45 anos de idade). Apesar de no ser
claro por que os adultos mais velhos tm um risco aumentado para doena mais grave,
pode ser devido frequncia de comorbidades ou resposta imunolgica diminuda.
15
2.4 Diagnstico diferencial

Febre com ou sem artralgia uma manifestao muito comum em vrias outras doenas.
CHIKV pode no ter manifestaes tpicas ou pode coexistir com outras doenas
infecciosas como a dengue ou a malria (Quadro 2).
Quadro 2 Doenas ou agentes no diagnstico diferencial de CHIKV
Agente ou doena
Apresentao
Malria
Periodicidade da febre e alterao de

conscincia.
Dengue
Febre e dois ou mais dos seguintes:

dor retro-orbital ou ocular, cefaleia,
exantema, mialgia, artralgia, leucopenia
ou manifestaes hemorrgicas.
Leptospirose
Mialgia severa localizada na panturrilha

com congesto/hemorragia conjuntival
ou subconjuntival com ou sem ictercia ou
oligria. Considerar histria de contato
com gua contaminada.
Infeces alphavirais (vrus Mayaro, vrus

Ross River, vrus Floresta de Barmah, vrus
Onyong nyong e vrus Sindbis)
Apresentao clnica semelhante ao

CHIKV; use histria de viagem e reas
sabidamente afetadas pelo vrus Mayaro
nas Amricas.
Artrite ps-infecciosa (inclusive febre

reumtica)
Artrite de uma ou mais, tipicamente

grandes articulaes devido a doenas
infecciosas tais como clamdia, shigella,
gonorreia, entre outras. Febre reumtica
(FR) vista mais frequentemente em
crianas como poliartrite migratria
predominantemente afetando grandes
articulaes. Considerar ttulo de ASO
e histria de amigdalite com critrio de
Jones para FR.
Artrite reumatoide juvenil
Febre de incio sbito e envolvimento

articular subsequente em crianas.
16
Sobreposio e confuso com a dengue

CHIKV deve ser diferenciada da dengue, a qual tem um potencial para resultados muito
piores, incluindo a morte. As duas doenas podem ocorrer juntas no mesmo paciente.
Observaes de surtos prvios na Tailndia e na ndia tm demonstrado as principais
caractersticas que distinguem o CHIKV de dengue. Em CHIKV, choque ou hemorragia
grave raramente observado; o incio mais agudo e a durao da febre muito mais
curta. Tambm em CHIKV, exantema maculopapular mais frequente que na dengue
(Tabela 2). Embora as pessoas possam se queixar de dor corporal difusa, a dor muito
mais pronunciada e localizada nas articulaes e tendes em CHIKV, quando comparadas
a dengue.
Tabela 2 Comparao das caractersticas clnicas e laboratoriais de infeces do vrus de
Chikungunya e da dengue*
Caractersticas Clnicas
e Laboratoriais
Infeco pelo vrus

de Chikungunya
Infeco pelo vrus

da dengue
Febre (>102F ou 39C)
+++
++
Mialgias
++
Artralgias
+++
+/-
Cefaleia
++
++**
Erupo cutnea
++
Discrasias hemorrgicas
+/-
++
Choques
Leucopenia
++
+++
Neutropenia
+++
Linfopenia
+++
++
Hematcrito elevado
++
Trombocitopenia
+++
Fonte: Tabela modificada a partir de Staples; Breiman; Powers, 2009.

*
Frequncia mdia dos sintomas de estudos, onde as duas doenas foram diretamente comparadas entre pacientes que
procuravam ajuda; +++ = 70%-100% dos pacientes; ++ = 40%-69%; + = 10%-39%; +/- = <10%; - = 0%.
**
Geralmente retro-orbital.
17
3 LABORATRIO
18
3.1 Tipos de exames laboratoriais disponveis e amostras exigidas

Trs tipos principais de testes de laboratrio so utilizados para diagnosticar CHIKV:
isolamento do vrus, reao em cadeia da polimerase (RT-PCR) e sorologia. As amostras
colhidas durante a primeira semana aps o incio dos sintomas devem ser testadas por
dois mtodos: sorolgico (IgM e IgG ELISA) e virolgico (RT-PCR e isolamento). As
amostras so geralmente sangue ou soro, mas nos casos neurolgicos com caractersticas
meningoencefalticas, lquido crebro-espinhal tambm podem ser coletados. Para
a deteco do vrus por isolamento e por RT-PCR a partir de tecidos e/ou rgos a
informao limitada. Na suspeita de casos fatais, a deteco de vrus pode ser testada
nas amostras disponveis.
A seleo do teste laboratorial adequado baseia-se na origem da amostra (humana ou
coleta de mosquitos) e na data de incio dos sintomas, no caso de seres humanos.
O isolamento do vrus
O isolamento do vrus pode ser realizado em mosquitos coletados no campo ou em
amostras de soro na fase aguda (8 dias). O soro obtido de sangue total colhido durante
a primeira semana de doena deve ser transportado refrigerado (entre 2C-8C ou gelo
seco) o mais rapidamente possvel (dentro de 48 horas) para o laboratrio, para ser
inoculado em uma linhagem de clulas sensveis ou uso de camundongos. CHIKV
produzir efeitos citopticos tpicos dentro de trs dias aps a inoculao em uma
variedade de linhagens de clulas, incluindo clulas Vero, BHK-21, e as clulas HeLa.
O isolamento do vrus pode ser realizado em frascos T-25 ou frascos estreis (veja
Apndice A). No entanto, dados recentes sugerem que o isolamento em frascos estreis
mais sensvel e produz efeitos citopticos (CPE) antes de isolamento comparado com
frascos tradicionais. O isolamento de CHIKV deve ser confirmado por IFI utilizando
antissoro CHIKV especfico ou por RT-PCR do sobrenadante de cultura ou de suspenso
de crebro de rato. O isolamento do vrus s pode ser realizado em laboratrios BSL-3
para reduzir o risco de transmisso viral.
19
RT-PCR
Diversos ensaios de RT-PCR para a deteco de RNA CHIKV foram publicados na
literatura. PCR em tempo real com ensaios fechados devem ser utilizados devido sua
maior sensibilidade e menor risco de contaminao. O Laboratrio de Diagnstico no
Center for Disease Control and Prevention (CDC), Division of Vector-borne Diseases
(DVBD), rotineiramente utiliza o ensaio publicado no Apndice B que demonstra uma
sensibilidade de menos de 1 PFU ou 50 cpias do genoma. Soro de sangue total utilizado
para os testes de PCR, assim como o isolamento do vrus.
Testes sorolgicos
Para o diagnstico sorolgico, o soro obtido a partir de sangue total utilizado em
enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) e o teste de neutralizao por reduo de
placas (PRNT). A amostra de soro (ou sangue) deve ser transportada entre 2C-8C, sem
congelamento. O diagnstico sorolgico pode ser feito pela demonstrao de anticorpos
IgM especficos para CHIKV ou por um aumento de quatro vezes no ttulo de PRNT em
amostras da fases aguda e convalescente. Anticorpos IgM especficos para CHIKV so
demonstrados pela utilizao de tcnicas que detectam o anticorpo imunoglobulina M
(IgM) como o ELISA de captura (MAC-ELISA) seguida do PRNT (protocolos detalhados
para IgM e IgG ELISA esto apresentados no Apndice C). O PRNT necessrio para
confirmar os resultados do MAC-ELISA pelo fato de reatividade cruzada no MAC-ELISA entre alguns membros do sorogrupo do vrus da Floresta Semliki (SFV) ter sido
observado. Testes de PRNT, utilizado para confirmar o MAC-ELISA ou demonstrar um
aumento de quatro vezes em amostras nas fases aguda e convalescente, deve sempre
incluir outros vrus dentro do sorogrupo SFV (como por exemplo, o vrus Mayaro) para
validar a especificidade da reatividade. Em situaes em que o ensaio PRNT no estiver
disponvel, outros testes sorolgicos (por exemplo, inibio da hemaglutinao) podem
ser usados para identificar uma infeco recente com alfavrus, porm PRNT necessrio
para confirmar uma infeco recente com CHIKV.
20
O soro da fase aguda deve ser coletado imediatamente aps o incio da doena e o soro
na fase convalescente entre 10 e 14 dias aps. O IgM especfico do CHIKV e anticorpos
neutralizantes normalmente se desenvolvem no final da primeira semana de doena.
Portanto, para excluir definitivamente o diagnstico, as amostras na fase convalescente
devem ser obtidas em pacientes cujas amostras na fase aguda testem negativas.
Coleta, armazenamento e transporte de amostras

Coleta apropriada, tratamento, armazenamento e transporte das amostras so aspectos
essenciais do diagnstico laboratorial.
Coleta de amostras para sorologia, isolamento e diagnstico molecular

Amostra: Soro
Tempo de coleta
Fase aguda: dentro dos primeiros oito dias de doena; fase convalescente: entre 10 e 14
dias aps a coleta da amostra em fase aguda.
Para a coleta de soro:
Coletar assepticamente 4-5 ml de sangue venoso em um tubo ou um frasco.
Deixar o sangue coagular em temperatura ambiente e centrifugar a 2.000 rpm para
separao do soro. Coletar o soro em um frasco limpo e seco.
Todas as amostras clnicas devem ser acompanhadas das informaes clnicas e
epidemiolgicas dos indivduos.
21
Outros tipos de amostras para investigao laboratorial

Espcimes: Lquido crebro-espinhal em casos de meningoencefalite
O lquido sinovial na artrite com derrame
Autpsia material soro ou tecidos disponveis
[Nota: Os mosquitos coletados em campo tambm sero tratados usando as mesmas
tcnicas descritas aqui].
Transporte das amostras:
O transporte das amostras para o laboratrio deve ser a 2C-8C (caixa com gelo), o
mais rapidamente possvel.
No congelar o sangue total, pois a hemlise pode interferir no resultado do teste
de sorologia.
Se mais de 24 horas de atraso ocorre antes de amostras serem enviadas para o
laboratrio, o soro deve ser separado e armazenado em temperatura refrigerada.
As amostras de soro para isolamento viral e o diagnstico molecular devem ser
armazenados congelados (ou a -20C para armazenamento de curto prazo ou a -70C
para armazenamento de longo prazo).
22
3.2 Vigilncia laboratorial

O Quadro 3, a seguir, descreve os testes ideais a serem realizados em diversos contextos
epidemiolgicos.
Quadro 3 Vigilncia laboratorial de vrus Chikungunya em um cenrio epidemiolgico
Cenrio Epidemiolgico
Testes a serem realizados
Amostras para testar
Nenhum sinal de
transmisso
IgM ELISA, IgG ELISA
Todas as amostras de
pacientes apresentando
doena clinicamente
compatvel.
Protocolo Unidades
Sentinelas que utilizam o
teste Ns1 para dengue.
Doena CHIKV suspeita
IgM ELISA, IgG ELISA, RT-PCR

em tempo real, isolamento
de vrus, PRNT
Todas as amostras de
pacientes apresentando
doena clinicamente
compatvel.
Protocolo Unidades
Sentinelas que utilizam o
teste Ns1 para dengue.
Transmisso continuada

em tempo real; isolamento
de vrus limitada
10% de amostras de casos

clssicos de CHIKV.
Amostras de todos os
casos atpicos e/ou graves.
Grupos de risco: maiores
de 65 anos, menores de 15
anos, gestantes e pacientes
com comorbidades.
Epidemias peridicas (uma

vez que CHIKV foi detectado
em uma rea) ou vigilncia
ativa em reas prximas a
transmisso de CHIKV

em tempo real; isolamento
limitado de vrus
10% de amostras de casos

clssicos de CHIKV.
Amostras de todos os
casos atpicos e/ou graves.
Grupos de risco: maiores
de 65 anos, menores de 15
anos, gestantes e pacientes
com comorbidades.
Fonte: Adaptado de Centres for Disease Control and Prevention/CDC e Organizao Pan-Americana da Sade.
23
3.3 Interpretao e comunicao dos resultados

Viremia e resposta de anticorpos tpicos de seres humanos so ilustradas na Figura 2,
e a Tabela 3 descreve os resultados tpicos de amostras de teste em vrios intervalos
de tempo.
Tabela 3 Resultados tpicos das amostras testadas em vrios intervalos de tempo
aps infeco
Dias aps o incio
da doena
Dia 1-3
Dia 4-8
>Dia 8
Teste de vrus
Teste de anticorpos
RT-PCR = Positivo
IgM = Negativo
Isolamento = Positivo
PRNT = Negativo
RT-PCR = Positivo
IgM = Positivo
Isolamento = Negativo
PRNT = Negativo
RT-PCR = Negativo
IgM = Positivo
Isolamento = Negativo
PRNT = Positivo
24
Figura 2 Viremia e resposta imune seguida de infeco por vrus Chikungunya
20
-14 to -2
10
Os resultados dos seguintes testes laboratoriais confirmariam uma infeco recente com
CHIKV:
Isolamento da CHIKV, incluindo a identificao e confirmao (IFA, RT-PCR
ou sequenciamento).
Deteco de RNA de CHIKV por RT-PCR em tempo real.
Identificao de um resultado positivo de IgM em um paciente com sintomas
agudos de CHIKV, seguido da demonstrao de anticorpos especficos para CHIKV
determinado pelo PRNT com vrus nos sorogrupo SFV.
Demonstrao de soro converso ou um aumento de quatro vezes no PRNT, HI,
ou ttulos de ELISA (novamente usando outros vrus do sorogrupo SFV) entre as
amostras nas fases aguda e convalescente.
A comunicao de casos autctones para a OMS deve ser relatada de acordo com o
Regulamento Sanitrio Internacional (ver Seo 6F).
25
4 MANEJO DOS CASOS
26
4.1 Tratamento
No h tratamento antiviral especfico para CHIKV. Tratamento sintomtico
recomendado aps a excluso de condies mais graves tais como malria, dengue e
infeces bacterianas.
Doena aguda
O tratamento sintomtico ou de suporte, consistindo de repouso e uso de acetaminofeno
ou paracetamol para aliviar a febre, e ibuprofeno, naproxeno ou outro anti-inflamatrio
no hormonal para aliviar o componente artrtico da doena. Uso de aspirina no
recomendado devido ao risco de hemorragia em um baixo nmero de pacientes e risco
de desenvolvimento de sndrome de Reye em crianas menores de 12 anos de idade. Em
pacientes com dor articular severa que no cede com anti-inflamatrios no hormonais,
o uso de narcticos (morfina) ou corticosteroides de curto prazo podem ser indicados
aps avaliar o risco-benefcio desses tratamentos. Pacientes devem ser orientados a
ingerir lquidos em abundncia a fim de recuperar fluido perdido por sudorese, vmitos
e outras perdas imensurveis.
Doena subaguda e crnica

Se por um lado a recuperao da febre do Chikungunya o resultado esperado, a
convalescncia pode ser prolongada (algumas vezes at um ano ou mais) e dor articular
persistente pode exigir gerenciamento, incluindo terapia anti-inflamatria prolongada.
Embora um estudo mais antigo tenha sugerido que fosfato de cloroquina oferea algum
benefcio, um estudo recente duplo-cego controlado por placebo e randomizado concluiu
que este agente no apresenta benefcio no tratamento de sintomas articulares. Artrite
perifrica debilitante com tendncia a persistir por meses, se refratria a outros agentes,
pode ocasionalmente responder a corticosteroides de curto prazo. A fim de limitar o uso
de corticosteroides orais, injees locais (intra-articulares) de corticosteroides ou antiinflamatrios no hormonais tpicos podem ser usados. Em pacientes com sintomas
articulares refratrios, terapias alternativas tais como metotrexate podem ser avaliadas.
Alm de farmacoterapia, casos de artralgia prolongada e rigidez articular podem
se beneficiar de um programa de fisioterapia graduada. Movimentao e exerccio
leve tendem a melhorar a rigidez articular matinal e dor, mas exerccio intenso pode
exacerbar os sintomas.
27
4.2 Capacidade assistencial e hospitalar a surtos epidmicos

No pico de um surto epidmico recente, 47 mil casos suspeitos foram identificados,
em apenas uma semana, em uma populao de 766 mil habitantes. Adicionalmente,
pode haver uma acumulao de pacientes com sintomas buscando assistncia de longo
prazo. Com tal volume potencial de casos por semana, enormes demandas sobre o
sistema de sade so esperadas durante surtos da doena. Sistemas de triagem devem
ser considerados em vrios nveis de assistncia a fim de facilitar o fluxo de pacientes
durante um surto.
Antes da introduo do CHIKV, os seguintes itens devem ser considerados (adaptados
do Plano de Pandemia por Influenza da Organizao Pan-americana da Sade e do Health
and Human Services (HHS), nos Estados Unidos):
Desenvolver e implementar mtodos para identificar e investigar a introduo do
CHIKV utilizando sistemas de vigilncia existentes (Unidades Sentinelas, Ambulatrio
de Viajantes e Sociedades Mdicas).
Informar profissionais de sade e oficiais de sade pblica sobre a ameaa potencial do
CHIKV e capacit-los sobre a apresentao clnica, o diagnstico e o gerenciamento
dos casos em unidades de assistncia mdica.
Desenvolver estruturas de planejamento e tomada de decises em unidades de sade
para responder a um potencial surto.
Desenvolver planos institucionais para abordar vigilncia, comunicaes hospitalares,
capacitaes, triagem e avaliao clnica, acesso a unidades de sade, sade
ocupacional, capacidade para surto (a leitos e acesso assistncia mdica), cadeia
de suprimentos e acesso a necessidades crticas de inventrio.
28
Aps a introduo do CHIKV em uma rea, unidades de sade devem:

Ativar planos de contingncia com assistncia do Ministrio da Sade.
Garantir comunicao rpida e frequente dentro de unidades de sade e entre
unidades de sade e secretarias de sade.
Implementar planos de capacidade em surto que abordem fora de trabalho,
capacidade de leitos, suprimentos durveis e perecveis e continuao de servios de
sade essenciais (ver seo sobre Planejamento em Sade no Plano de Pandemia por
Influenza da Opas e do HHS para maiores detalhes).
Princpios de orientao para o manuseio do estgio agudo da doena foram previamente
descritos, em detalhes, na publicao da Organizao Mundial da Sade (OMS)
Guidelines on Clinical Management of Chikungunya Fever. Informaes-chave, incluindo
consideraes sobre triagem desse documento, so sumarizadas a seguir.
Quem deve procurar assistncia hospitalar?

Qualquer pessoa com sinais neurolgicos ou sintomas incluindo irritabilidade,
sonolncia, cefaleia severa ou fotofobia.
Qualquer pessoa com dor torcica, falta de ar ou vmitos persistentes.
Qualquer pessoa com febre persistindo por mais de cinco dias (indicativo de outra
doena como a dengue).
Qualquer pessoa que desenvolva qualquer um dos seguintes sintomas, especialmente
uma vez encerrada a febre:
Dor severa intratvel
Tontura, fraqueza extrema ou irritabilidade
Extremidades frias, cianose
Fluxo urinrio diminudo
Qualquer sangramento sob a pele ou atravs de algum orifcio
Mulheres grvidas no ltimo trimestre, recm-nascidos e pessoas com comorbidades,
pois essas pessoas ou seus recm-nascidos possuem maior risco de doena severa.
29
Triagem no primeiro ponto de contato (Ateno primria ou ambulatrio/

unidade de urgncia)
Afastar a possibilidade de outras doenas por histrico, exame fsico e investigao
laboratorial incluindo, mas no limitado, o hemograma, os testes de funo heptica e
os eletrlitos. Deve-se avaliar com cuidado a presena de sinais de alerta para dengue
grave ou malria. Se presente, referir o paciente imediatamente assistncia hospitalar.
Avaliar estado de hidratao e fornecer reidratao adequada, conforme necessrio.
Avaliar estado hemodinmico e estabilizar o paciente. Referir imediatamente
pacientes com repercusso capilar defasada, pulso fino, hipotenso, oligria, sensrio
alterado ou manifestaes hemorrgicas.
Tratar sintomaticamente (paracetamol/acetaminofeno).
Para aqueles com dor articular prolongada (trs dias aps tratamento sintomtico)
considerar gerenciamento mais agressivo da dor, com agentes tais como morfina e
corticosteroides de curto prazo.
Considerar referncia para pacientes de maior risco a uma evoluo insatisfatria
(pessoas acima de 60 anos, aqueles com doena crnica, gestantes e crianas).
Coletar amostra de sangue para teste sorolgico para CHIKV e outras doenas no
diagnstico diferencial (por exemplo, vrus da dengue).
Triagem no nvel secundrio (hospital local ou regional)

Tratar sintomaticamente (de acordo com os tratamentos acima mencionados).
Investigar o paciente para insuficincia renal, sinais e sintomas neurolgicos,
insuficincia heptica, doena cardaca, trombocitopenia e malria.
Avaliar o estado hemodinmico e de hidratao e fornecer suporte de cuidados
adequados e reidratao, conforme necessrio.
Considerar puno lombar em caso de suspeita de meningite.
Coletar amostra de sangue para teste sorolgico para CHIKV e outras doenas no
diagnstico diferencial (por exemplo, vrus da dengue).
30
Revisar histrico clnico e avaliar se o paciente tem sinais de alerta para dengue grave.
Se presentes, administrar suporte de cuidados em uma unidade que possa monitorar
sinais vitais de acordo com o protocolo de manejo de pacientes com suspeita de
dengue do MS.
Encaminhar para uma unidade assistencial avanada os seguintes caos: gravidez,
oligria/anria, hipotenso refratria, sangramento clnico significativo, sensrio
alterado, meningoencefalite, febre persistente de mais de uma semana de durao e
sinais de descompensao de doenas de base.
Triagem no nvel tercirio (centros avanados ou centros com especialistas

em doenas infecciosas)
Garantir que todos os procedimentos acima tenham sido seguidos e que uma equipe
mdica extensa esteja disponvel para acompanhar o manuseio de pacientes com
doena grave ou atpica.
Coletar amostra de sangue para sorologia e/ou reao em cadeia de polimerase via
transcriptase reversa (RT-PCR).
Considerar a possibilidade de outras doenas reumticas (artrite reumatoide, gota,
febre reumtica) ou infecciosas (meningoencefalite viral ou bacteriana).
Tratar complicaes graves (desordem hemorrgica com componentes do sangue,
insuficincia renal com dilise).
Avaliar incapacidades e recomendar procedimentos de reabilitao.
31
Dada a severidade da dor e o potencial de longo prazo devido ao CHIKV, a assistncia

psicolgica deve estar disponvel e considerada no desenvolvimento de protocolos,
equipes e centros de tratamento de dor crnica.
Autpsias devem ser consideradas em todos os bitos com o envolvimento de patologistas.
4.3 Segurana de sangue, rgos e tecidos

A transmisso sangunea possvel. H casos documentados de infeco em pessoal de
laboratrio que manusearam sangue infectado e de um profissional de sade que retirou
amostra de sangue de um paciente infectado. Esses casos suportam a opinio de que o
CHIKV capaz de se transmitir por meio de componentes do sangue.
A fim de determinar o impacto do CHIKV na segurana dos suprimentos de sangue,
considerar:
1. Incidncia de viremia em doadores de sangue (a qual pode variar dependendo do
perodo do surto).
2. Impacto clnico em receptores de transfuso que se tornem infectados.
3. Disponibilidade de medidas para reduzir transmisso por transfuso (por exemplo,
teste de amplificao de cidos nuclicos (NAT) ou terapia fotodinmica de inativao
de micro-organismos).
4. Disponibilidade de fornecimento alternativo de sangue (de reas no afetadas).
5. Custos associados a estas medidas.
32
Alm de solicitar que a comunidade de assistncia mdica local promova o uso adequado
de componentes do sangue, possveis consideraes em relao segurana do sangue
em reas com CHIKV devem incluir:
Continuar a obter doaes de sangue de cidados locais at que se atinja uma
inaceitvel incidncia ou prevalncia* de infeco na comunidade.
Realizar triagem de doadores de sangue para sintomas antes da doao.
Solicitar aos doadores que relatem qualquer doena que ocorra aps a doao e
ao mesmo tempo manter guardado o sangue doado por vrios dias (2-5), antes da
liberao.
Se possvel, interromper qualquer doao sangunea na rea sabidamente afetada por
CHIKV e obter componentes de sangue de reas no afetadas.
Instituir triagem para CHIKV (por exemplo, NAT) no suprimento sanguneos. Este
procedimento requer uma plataforma preexistente e liberao regulamentar, sendo
provavelmente indisponvel na maior parte das reas.
* A ser determinado por bancos de sangue e oficiais de sade pblica do local.
Medidas semelhantes devem ser consideradas em transplantes de rgos e tecidos (enxertos).
33
5 VIGILNCIA E RESPOSTA AO SURTO
34
O principal objetivo da vigilncia detectar, em tempo adequado, casos de CHIKV nas

Amricas. A deteco precoce permitir resposta adequada, caracterizao do surto e
identificao das cepas virais em circulao.
5.1 Modos de vigilncia

1. Fase de preparao
Reforar centros sentinelas de vigilncia febril existentes com a habilidade de detectar
casos de CHIKV. Uma porcentagem de pacientes que se apresentam com febre e artralgia
de etiologia desconhecida (por exemplo, com teste negativo para malria ou dengue),
deve ser testada para CHIKV nos laboratrios de referncia nacional (ver Seo 4 para
mais detalhes em relao ao laboratrio de vigilncia diagnstica proposto).
2. Fase de resposta
Introduo
Uma vez que um caso autctone de CHIKV for detectado, uma profunda investigao
epidemiolgica deve ser conduzida a fim de:
acompanhar a propagao do vrus;
monitorar possvel introduo em reas circunjacentes;
descrever caractersticas epidemiolgicas e clnicas-chave;
avaliar severidade clnica e impacto na sociedade (dias de trabalho perdidos,
fechamento de escolas etc.);
identificar fatores de risco para infeco ou doena severa;
identificar linhagens circulantes de CHIKV.
Essas aes so a base para o desenvolvimento de medidas de controle efetivas.
Vigilncias ativa, passiva e laboratorial devem ser usadas para calcular e monitorar
indicadores tais como: incidncia, taxa de propagao, taxa de hospitalizao (por
infeco), proporo de casos severos, taxa de mortalidade e taxa de incapacitao.
35
Transmisso sustentada
Uma vez que o vrus tenha sido identificado por todo um pas, a diminuio dos nveis
de teste e de vigilncia ativa pode ser considerada (ou seja, testar apenas uma frao de
casos suspeitos dependendo da capacidade laboratorial, casos atpicos ou severos, recmnascidos, casos em novas regies), a fim de evitar custos desnecessrios em regies com
recursos limitados. Porm, vigilncia contnua deve ser persistida a fim de monitorar
mudanas na epidemiologia e na ecologia da transmisso do CHIKV. Qualquer mudana
na vigilncia a nvel nacional deve ser imediatamente comunicada aos demais parceiros
de vigilncia e de preveno, tais como especialistas de controle de vetores, para assegurar
a qualidade e a uniformidade dos dados coletados.
5.2 Deteco de casos

Profissionais de sade devem considerar CHIKV no diagnstico diferencial de indivduos
que apresentem febre e artralgias no explicadas por outra etiologia ou com apresentao
atpica, por exemplo, uma dengue de apresentao atpica com dor articular mais severa
ou conjuntivite. O ndice de suspeita deve ser maior no caso de viajantes ou aqueles que
entraram em contato com um viajante que tenha recentemente retornado de uma rea
com infeces por CHIKV (para obter informaes atualizadas sobre locais com surto
de infeces por CHIKV visite <www.who.int/csr/don/en/index.html> ou <wwwnc.cdc.
gov/travel/default.aspx>.
Pessoal de laboratrio deve considerar CHIKV, se houver uma baixa proporo de
amostras soropositivas, para uma etiologia com quadro clnico semelhante, tal como a
dengue, ou se houver certo nmero de amostras de tecido sinovial que sejam estreis em
cultura bacteriana.
Autoridades de sade pblica devem ser alertadas em relao a pequenos acmulos
de doena (febre e artralgia ou artrite) associado a um viajante de retorno de uma rea
endmica ou a um aumento no nmero de hospitalizaes por febre e artralgia ou artrite
em uma rea localizada em um curto perodo de tempo.
36
5.3 Definio de casos

Caso suspeito: um paciente com febre de incio sbito >38,5C e artralgia ou artrite intensa
no explicados por outras condies e residindo ou tendo visitado reas endmicas at
duas semanas antes do incio dos sintomas.
Caso confirmado: um caso suspeito com um dos seguintes testes especficos para
diagnstico de CHIKV:
Isolamento viral.
Deteco de vrus de RNA por RT-PCR.
Deteco de IgM em uma nica amostra de soro (coletada durante a fase aguda ou
convalescente).
Aumento de quatro vezes no ttulo de anticorpos especficos antiCHIKV (amostras
coletadas com pelo menos 2-3 semanas de diferena).
Critrio clnico epidemiolgico.
Uma avaliao da sensibilidade e da especificidade do critrio clnico para infeco
por CHIKV foi feita durante um grande surto da doena. A combinao de febre e
poliartralgia teve a melhor sensibilidade e especificidade de 84% e 89% respectivamente,
e permitiu a correta identificao de 87% dos indivduos com confirmao sorolgica de
infeco por CHIKV.
5.4 Notificao de casos

No Brasil, a febre do Chikungunya uma doena de notificao imediata de acordo com
o anexo II, da Portaria MS/GM n 2.472, de 31 de agosto de 2010. A ocorrncia de casos
suspeitos pode indicar um possvel surto, portanto as autoridades de sade pblica mais
prximas devem ser imediatamente notificadas, de acordo com as recomendaes do
Regulamento Sanitrio Internacional. (Figura 3)
37
Figura 3 Esquema de notificao de uma suspeita de surto de CHIKV

Caso
suspeito
Laboratrio
Negativo
Excluir e considerar
outras etiologias
Notificao
Positivo
Caso
confirmado
Autoridade
de sade
local
Alertar controlde
de vetores
Autoridade
de sade
nacional
Confirmar surto,
investigar e controlar
Epidemiolgicos
Idealmente, relatrios epidemiolgicos devem ser estabelecidos a nvel nacional com o
suporte de autoridades de sade pblica locais e regionais. Aps a introduo do CHIKV
em uma rea, uma lista de casos suspeitos e laboratorialmente confirmados deve ser
mantida e atualizada diariamente. Os relatrios devem ser coordenados a nvel nacional
com o estabelecimento de uma lista baseada na web, se possvel, contendo algumas
variveis obrigatrias e variveis adicionais, conforme necessrio. Um formulrio de
notificao padronizado, com dados demogrficos e laboratoriais, deve ser desenvolvido
rapidamente e compartilhado com parceiros-chave a fim de facilitar a coleta de dados
(ver exemplo no Apndice D). Uma vez que um pas tenha identificado transmisso
autctone dentro de suas fronteiras, seu centro de operaes de emergncias deve ser
ativado (sala de situao) para servir como uma fonte de rpida comunicao e tomada
de decises.
38
5.5 Regulamento Sanitrio Internacional e medidas de fronteira

Regulamento Sanitrio Internacional (RSI)
Um nico caso importado (ou seja, viajante) de CHIKV nas Amricas no deve
necessariamente constituir uma emergncia de sade pblica de importncia
internacional, de acordo com o Regulamento Sanitrio Internacional; embora esse caso
deva ser minuciosamente investigado a fim de minimizar risco de introduo do CHIKV
no pas. Porm, a suspeita de transmisso autctone de CHIKV nas Amricas atende
aos critrios de emergncia de sade pblica de importncia internacional e deve ser
notificado de acordo com o RSI (ver exemplo no Apndice E). Tal evento teria um impacto
significativo de sade pblica devido possibilidade de causar uma epidemia com altas
taxas de acometimento em uma populao imunologicamente suscetvel, e porque vetores
so suficientemente abundantes para potencialmente permitir o estabelecimento do vrus
e transmisso durante o ano todo. O evento seria tambm incomum para as Amricas,
pois declararia o aparecimento de um patgeno previamente ausente e sinalizaria um
risco significativo de propagao internacional dado o montante de viagens entre pases
dentro das Amricas. Embora o CHIKV no leve a uma alta taxa de mortalidade, ele
causa altas taxas de morbidade associadas a artralgias persistentes que podem levar a
incapacidade e a reduo de produtividade. O estabelecimento do CHIKV em um pas-membro pode tambm afetar fontes de renda crticas, tais como o turismo. Por exemplo,
a Ilha Runion observou um declnio de 60% em turismo aps um surto de CHIKV.
Pases-membros devem garantir que qualquer caso suspeito de CHIKV, sem conexo
de viagem a outro pas, seja minuciosamente investigado e excludo da possibilidade
de transmisso interna de CHIKV. A Organizao Pan-Americana da Sade (Opas)
recomenda que pases-membros devem considerar a notificao compulsria de CHIKV
a fim de viabilizar e promover uma resposta em tempo hbil.
39
Medidas de fronteira
Fechamento de fronteiras devido suspeita de casos de CHIKV seria contraproducente,
no sendo recomendado pela Organizao Mundial da Sade e inconsistente com a RSI,
a qual enfatiza deteco e conteno na nova fonte de transmisso em vez de controlar
pontos de entrada. Os custos associados triagem por CHIKV em pontos de entrada
superam os benefcios. A triagem insuficientemente sensvel e especfica, e muito cara
para ser considerada uma ferramenta na preveno da introduo e na propagao de
CHIKV. A previso da prevalncia baixa entre viajantes provenientes de reas no mundo
com atividade de CHIKV, os sintomas so no especficos e o valor preditivo positivo
da triagem seria baixo. A experincia relatada de triagem de entrada para CHIKV, em
Taiwan, valida este argumento. Em 2006, mais de 11,7 milhes de passageiros chegaram a
Taiwan. Entre estes passageiros, 6.084 foram identificados com febre por meio do uso de
cmeras de imagem trmicas com infravermelho; exames laboratoriais, tambm nesses
passageiros, detectaram 44 casos de dengue, 13 casos de shigella, 1 caso de malria,
1 caso de febre paratifoide e 1 caso de CHIKV (JW Hsieh, Centro de Controle de Doenas,
Ministrio da Sade, Taiwan, comunicao pessoal, 2007).
Algumas jurisdies, fora das Amricas, instituram atividades de abatimento de
mosquitos em aeroportos internacionais e aplicao de adulticidas na cabine dos
passageiros de voos de chegada internacional, como medida de preveno contra a
importao de dengue. Entretanto, mosquitos infectados por vrus chegando a aeronave
de passageiros no so considerados fontes significativas para a maioria das importaes
de arbovrus. Para arboviroses com um ciclo de transmisso humano-mosquito-humano,
a fonte de importao viral mais importante o viajante virmico. Em uma regio como
as Amricas, onde vetores competentes j esto presentes na maioria dos pases, medidas
de abatimento de mosquitos e a vigilncia de vetores predominantemente focadas em
aeroportos e portos internacionais, com a inteno de prevenir a importao de CHIKV,
podem ser implementadas por autoridades nacionais, mas no so recomendadas pela
Opas. Semelhantemente, na presena de casos de CHIKV e transmisso viral local,
no h necessidade de se colocar quaisquer restries nas bagagens, carga, contineres,
bens e/ou encomendas postais, alm das prticas usuais, a fim de evitar interferncias
desnecessrias no trfico internacional na ausncia de qualquer benefcio especfico para
a sade pblica. Entretanto, recomendvel estabelecer comunicaes entre autoridades
de sade pblica e operadores de transporte (mar e ar, carga e passageiros) e outras
organizaes porturias, no caso de haver necessidade de implementar uma campanha
de comunicao a respeito do CHIKV.
40
Pases podem decidir distribuir orientaes de controle sanitrio de viajantes para

viajantes internacionais, se houver uma preocupao quanto transmisso de CHIKV
ou se a transmisso ativa houver sido detectada. Esta informao ofereceria orientaes
aos viajantes sobre como reduzir o risco de contgio pelo CHIKV, a fim de seguir passos
com o objetivo de reduzir a chance de serem picados por mosquitos ou para procurar
diagnstico precoce na presena de sintomas e sinais compatveis com CHIKV.
Ser importante monitorar padres de viagens areas entre pases onde o CHIKV est
circulando e qualquer pas ou regio das Amricas a fim de identificar reas de maior
risco introduo do vrus. Em uma anlise preliminar que foi limitada ao uso de
dados de voos diretos, dados de voos comerciais agendados mostraram que pases que
importavam CHIKV tm 23 vezes mais assentos de passageiros agendados que pases
que no importavam CHIKV originando de pases com atividade de CHIKV (CDC,
dados no publicados). Anlise subsequente usando dados especficos de passageiros, que
incluem conexes e volume real de passageiros, poderiam fornecer informaes mais
precisas nas quais se basearia em uma avaliao de risco importao de CHIKV.
41
6 VIGILNCIA E CONTROLE DO VETOR
Na ausncia de uma vacina eficaz contra o vrus Chikungunya (CHIKV), a nica

ferramenta disponvel para prevenir a infeco a reduo do contato homem-vetor.
Os principais vetores da CHIKV so o Ae. aegypti e o Ae. albopictus. O Ae. aegypti o
vetor principal nas reas da frica, onde o vrus considerado endmico. No entanto, o
Ae. albopictus foi incriminado durante as epidemias recentes, aps a introduo do vrus
na Europa temperada e algumas reas tropicais do Oceano ndico. Estes surtos foram
associados com a adaptao de cepas CHIKV ao Ae. albopictus. Ambos, Ae. aegypti e Ae.
albopictus esto presentes nas Amricas (figuras 4 e 5). Ae. aegypti, provavelmente ser o
mais importante vetor em reas urbanas, e Ae. albopictus, provavelmente desempenhar
um papel mais significativo em reas temperadas e nas reas onde est bem estabelecido.
Ambos os mosquitos podem, potencialmente, transmitir o vrus em uma variedade de
reas geogrficas do continente a partir da introduo de pessoas em viremia. Portanto,
os esforos para o planejamento de controle de vetores devem concentrar-se na supresso
de ambas as populaes de Ae. aegypti e Ae. albopictus para evitar a possibilidade de
estabelecimento do CHIKV, e lanar as bases para as intervenes de emergncia no caso
de um surto.
43
Figura 4 Distribuio de Ae. aegypti nas Amricas
Fonte: (ARIAS, 2002, adaptado).
44
Figura 5 Distribuio aproximada de Ae. albopictus nas Amricas
Fonte: (BENTO et al., 2007, adaptado).
45
Existem algumas diferenas significativas entre Ae. aegypti e Ae. albopictus que devem
ser consideradas no desenvolvimento de vigilncia e de procedimentos de controle. Ae.
aegypti est mais estreitamente associado com o homem e as suas casas, alimentando-se preferencialmente em seres humanos. O mosquito adulto Ae. aegypti encontra-se,
geralmente, dentro dos domiclios humanos e outros tipos de imveis onde a presena
humana frequente nas cidades e os habitat das larvas so, frequentemente, recipientes
localizados nesses mesmos ambientes ou ao seu redor. O Ae. albopictus se alimenta tambm
de humanos, mas pode utilizar uma gama mais ampla de hospedeiros. Normalmente suas
larvas so depositadas no peridomiclio, bem como em habitat naturais ou modificados
adjacentes. Algumas populaes de Ae. albopictus demonstraram poder hibernar no
estgio de ovo e, portanto, serem capazes de ocupar regies mais temperadas que Ae.
aegypti. Essas espcies tm diferentes caractersticas morfolgicas, e a identificao de
espcimes coletados durante os programas de vigilncia e de controle nas Amricas pode
ser facilmente realizada.
Quando o vetor transmissor for o Ae. aegypti, um programa operacional de controle
da dengue eficaz fornece a base da preparao para o combate ao CHIKV. Porm, nas
localidades onde o Ae aegypti se torne escasso, devido s medidas de controle, o Ae
albopictus pode assumir o papel de transmissor e, neste caso, as medidas de controle
devem ser diferenciadas, uma vez que a proliferao deste mosquito ocorre em
habitat peridomiciliares, bem como nos habitat naturais ou modificados adjacentes.
Recomendaes para vigilncia e controle desenvolvidas para a gesto de dengue
podem ser utilizadas e implementadas a fim de responder a uma introduo do CHIKV.
Programas de controle bem-sucedidos requerem uma equipe de profissionais e tcnicos
bem treinados e recursos financeiros suficientes. Alm disso, um programa independente
de avaliao da qualidade deve ser incorporado ao manejo integrado de vetores (MIV).
Para ser bem-sucedido, o programa de MIV do CHIKV deve incluir a participao
intersetorial (colaborao) em todos os nveis de governo e entre sade, educao, meio
ambiente, desenvolvimento social e as agncias de turismo. Os programas MIV tambm
se beneficiam da participao de ONGs e de organizaes privadas. A comunidade
deve ser informada sobre o programa de controle do CHIKV, a fim de ser mobilizada.
A participao comunitria um componente essencial do MIV. Uma estratgia MIV
deve ser desenvolvida e estar em funcionamento antes da introduo do CHIKV para
ser eficaz.
46
6.1 Reduzir o risco de CHIKV

Componentes de um programa MIV para reduzir o risco do CHIKV incluem:
1. Controle de vetores e identificao de reas de alto risco

Em reas onde a dengue endmica, uma anlise retrospectiva de transmisso do vrus
DEN nos anos anteriores deve ser efetuada durante a fase de planejamento para o CHIKV,
a fim de fornecer uma indicao das reas em que o CHIKV poder circular (dada a
semelhana entre os ciclos de transmisso desses vrus), no entanto, o vrus CHIKV
poder se comportar de forma diferente do vrus DEN; reas onde a incidncia de casos
de dengue so elevadas podem no ter altas incidncias para Chikungunya, uma vez que
o Ae. albopictus pode assumir a funo de transmissor do CHIKV nas localidades onde
o Ae. aegypti estiver escasso. As reas podem ser estratificadas em termos de risco de
transmisso e de valores de infestao vetorial de ambas as espcies do mosquito, com
vistas para planejar e organizao a vigilncia e as aes de controle. A estratificao
ento utilizada para alocar recursos e prioridades.
O programa deve ter a capacidade de coletar sistematicamente dados de vigilncia
sobre a densidade relativa do Ae. aegypti e do Ae. albopictus. Os mtodos de vigilncia
para o Ae. aegypti e o Ae. albopictus so variados e incluem mtodos para monitorar
a produo de ovos, locais com presena de larvas, abundncia pupal e de mosquitos
adultos. Esses mtodos so analisados no Captulo 5, das Orientaes sobre a Dengue
da OMS e nas Diretrizes Nacionais para a Preveno e Controle de Epidemias de Dengue.
Novas armadilhas e mtodos de amostragem esto sendo desenvolvidos que podem
proporcionar uma vigilncia mais precisa dos dados. Os programas devem ser capazes
de detectar e identificar criadouros potenciais, inclusive aqueles mais ocultos e de difcil
controle (por exemplo, locais crticos, fossas, bueiros, as bombas de depsito e terrenos
baldios), e outros locais produtivos, bem como os habitat prontamente identificados e
onde comumente so encontradas larvas desses dois mosquitos.
47
2. Preveno domiciliar
Deve-se eliminar totalmente a possibilidade de contato entre mosquitos e gua
armazenada em qualquer tipo de depsito, impedindo o acesso das fmeas grvidas por
intermdio do uso de telas/capas ou mantendo-se os reservatrios ou qualquer local
que possa acumular gua, totalmente cobertos. Em caso de alerta ou de elevado risco de
transmisso, a proteo individual por meio do uso de repelentes deve ser implementada
pelos habitantes.
3. Preveno na comunidade
Nas Amricas, a preveno do CHIKV na comunidade deve ser baseada em mtodos
desenvolvidos para o controle da dengue, utilizando-se estratgias eficazes para reduzir
a densidade de mosquitos vetores. Um programa de controle da dengue em pleno
funcionamento ir reduzir a probabilidade de um ser humano virmico servir como
fonte de alimentao sangunea, e de infeco para Ae. aegypti e Ae. albopictus, levando
transmisso secundria e a um possvel estabelecimento do vrus nas Amricas.
Os programas de controle da dengue para o Ae. aegypti, tradicionalmente, tm sido
voltados para o controle de mosquitos imaturos, muitas vezes por meio de participao
da comunidade em manejo ambiental e reduo de criadouros. essencial que o
envolvimento da comunidade seja incorporado em um programa MIV.
Procedimentos de controle de vetores

As orientaes da OMS e do Ministrio da Sade do Brasil para a dengue fornecem
informaes sobre os principais mtodos de controle de vetores e devem ser consultadas
para estabelecer ou melhorar programas existentes. O programa deve ser gerenciado por
profissionais experientes, como bilogos com conhecimento em controle vetorial, para
garantir que ele use recomendaes de pesticidas atuais e eficazes, incorpore novos e
adequados mtodos de controle de vetores segundo a situao epidemiolgica e inclua
testes de resistncia dos mosquitos aos inseticidas.
48
6.2 Resposta introduo CHIKV

Imediatamente aps a notificao do primeiro caso suspeito de CHIKV, a vigilncia
epidemiolgica deve fornecer informaes sobre a data de incio dos sintomas e o local de
ocorrncia do caso para o programa MIV. Os procedimentos de controle do vetor devem
ser intensificados para reduzir efetivamente densidade vetorial e infestao de vetores
infectados, a fim de interromper a transmisso nas reas de ocorrncia do(s) caso(s).
Simultaneamente, as comisses de resposta de emergncia em nvel local e nacional
devem ser informadas sobre a situao e ativadas. O esforo inicial dever concentrar-se na conteno da transmisso do vrus e impedir a sua expanso (Apndice G). Se a
conteno do vrus falhar ou se os casos no forem detectados at que o surto se espalhe
por uma grande rea geogrfica, os esforos de intensificao do controle de vetores
devero ser ampliados para um programa de larga escala.
49
CONCLUSO
50
No momento, no existe conhecimento sobre a circulao do CHIKV nas Amricas;

entretanto, o risco de introduo alto devido importao por viajantes, vetores
competentes (mesmos vetores da dengue) e populao suscetvel. Dada a probabilidade
de introduo do CHIKV, a preparao em antecedncia essencial. Deteco de casos em
tempo hbil e resposta rpida e apropriada com participao ativa de todos os interessados
sero necessrias para minimizar o risco de importao e transmisso sustentada na regio.
Este guia de recomendaes para a preparao e a introduo do CHIKV nas Amricas
foi desenvolvido a fim de instituir as estratgias mais apropriadas na preveno da
importao e da propagao do CHIKV na regio. Cada pas-membro encorajado a
usar e adaptar este guia de recomendaes para permitir deteco precoce de um surto
da doena, conduzir investigaes epidemiolgicas pertinentes e prevenir ou minimizar
a expanso da doena nas Amricas.
51
REFERNCIAS
52
ANGELINI, P. et al. Chikungunya epidemic outbreak in Emilia-Romagna (Italy) during

summer 2007. Parassitologia, [S.l.], v. 50, n. 1-2, p. 97-98, June 2008.
ARIAS, J. R. Dengue: How are we doing? Celebrating 100 Years of PAHO. Washington,
D.C.: PAHO, 2002.
BARRERA, R. Simplified pupal surveys of Aedes aegypti (L.) for entomologic
Surveillance and dengue control. The American Journal of Tropical Medicine and
Hygiene, [S.l.], v. 81, n. 1, p. 100-107, 2009.
BARRERA, R. et al. Unusual productivity of Aedes aegypti in septic tanks and its
implications for dengue control. Medical and Veterinary Entomology, [S.l.], v. 22, n. 1,
p. 62-69, 2008.
______. [Stratification of a hyperendemic city in hemorrhagic dengue]. Revista
Panamericana de Salud Pblica, Washington, DC, v. 8, n. 4, p. 225-233, 2000.
BEATY, B. J.; CALISHER, C. H.; SHOPE, R. S. Arboviruses. In: SCHMIDT, N. J.;
EMMONS, R. W. (Ed.). Diagnostic procedures for viral, rickettsial and chlamydial
infections. 6th ed. Washington, DC: American Public Health Association, 1989. p. 797-856.
BEESOON, S. et al. Chikungunya fever, Mauritius, 2006. Emerging Infectious Diseases
Journal, Atlanta, GA, v. 14, n. 2, p. 337-338, 2008.
BENEDICT, M. Q. et al. Spread of the tiger: global risk of invasion by the mosquito
Aedes albopictus. Vector-Borne and Zoonotic Diseases, Larchmont, NY, v. 7, n. 1, p.
76-85, Spring 2007.
BORGHERINI, G. et al. Outbreak of chikungunya on Runion Island: early clinical and
laboratory features in 157 adult patients. Clinical Infectious Diseases, [S.l.], v. 44, n. 11,
p. 1401-1407, June 1 2007.
BOUQUILLARD, E.; COMBE, B. Rheumatoid arthritis after Chikungunya fever: a
prospective follow-up study of 21 cases. Annals of the Rheumatic Diseases, [S.l.], v. 68,
n. 9, p. 1505-1506, 2009.
BRAGA, I. A. et al. Aedes aegypti resistance to temephos during 2001 in several
municipalities in the states of Rio de Janeiro, Sergipe, and Alagoas, Brazil. Memrias do
Instituto Oswaldo Cruz [online], Rio de Janeiro, v. 99, n. 2, p. 199-203, 2004.
BRASIL. Ministrio da Sade. Amparo Legal Execuo das Aes de Campo
Imveis Fechados, abandonados ou com Acesso no Permitido pelo Morador.
Braslia, 2006.
53
______. Diretrizes Nacionais para a Preveno e Controle de Epidemias de Dengue.

Braslia, 2009.
BRIGHTON, S. W. Chloroquine phosphate treatment of chronic chikungunya arthritis.
An open pilot study. South African Medical Journal, [S.l.], v. 66, n. 6, p. 217-218, 1984.
BRIGHTON, S. W. et al. Chikungunya virus infection: a retrospective study of 107
cases. South African Medical Journal, [S.l.], v. 63, n. 9, p. 313-315, 1983.
BROGDON, W. G. Biochemical resistance detection: an alternative to bioassay.
Parasitology Today, [S.l.], v. 5, n. 2, p. 56-60, 1989.
BROGDON, W. G.; MCALLISTER, J. C. Insecticide resistance and vector control.
Emerging Infectious Diseases Journal, Atlanta, GA, v. 4, n. 4, p. 605-613, 1998.
CENTERS FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION. Chikungunya fever
diagnosed among international travelers--United States, 2005-2006. Morbidity and
Mortality Weekly Report, Atlanta, GA, v. 55, n. 38, p. 1040-1042, Sept. 29 2006.
CORDEL, H. et al. Imported cases of chikungunya in metropolitan France, April 2005 February 2006. Euro Surveillance,[S.l.], v. 11, n. 4, p. E060420-060423, 2006.
DARSIE, R. F. J; WARD, R. A. Identification and geographical disrtibution of the
mosquitoes of North America, New Mexico. Gainesville, FL: University Press of
Florida, 2005.
DAS, T. et al. Chikungunya fever: CNS infection and pathologies of a re-emerging
arbovirus. Progess Neurobiology, [S.l.], v. 91, n. 2, p.121-129, 2010.
DE LAMBALLERIE, X. et al. On chikungunya acute infection and chloroquine
treatment. Vector-Borne and Zoonotic Diseases, Larchmont, NY, v. 8, n. 6, p. 837-839,
2008.
______. Chikungunya virus adapts to tiger mosquito via evolutionary convergence: a
sign of things to come? Virology Journal, [S.l.], v. 5, p. 33, 2008.
DIAGNOSIS of Infections caused by Viruses, Chlamydia, Rickettsia. In: KONEMAN,
E.W. et al. (Ed.). Diagnostic Microbiology. 4th Edition. Philadelphia: JB Lippicott Co,
1992. p. 956-1074.
DUBRULLE, M. et al. Chikungunya virus and Aedes mosquitoes: saliva is infectious as
soon as two days after oral infection. PLoS One, [S.l.], v. 4, n. 6, p. e5895, 2009.
ECONOMOPOULOU, A. et al. Atypical chikungunya virus infections: clinical
manifestations, mortality and risk factors for severe disease during the 2005-2006
outbreak on Runion. Epidemiology & Infection, [S.l.], v. 137, n. 4, p. 534-541, 2009.
54
ERLANGER, T. E.; KEISER, J.; UTZINGER, J. Effect of dengue vector control

interventions on entomological parameters in developing countries: a systematic review
and meta-analysis. Medical and Veterinary Entomology, [S.l.], v. 22, n. 3, p. 203-221,
2008.
ESU, E. et al. Effectiveness of peridomestic space spraying with insecticide on dengue
transmission: systematic review. Tropical Medicine & International Health, [S.l.], v.
15, n. 5, p. 619-631, 2010.
FOURIE, E. D.; MORRISON, J. G. Rheumatoid arthritic syndrome after chikungunya
fever. South African Medical Journal, [S.l.], v. 56, n. 4, p. 130-132, 1979.
FRITEL, X. et al. Chikungunya virus infection during pregnancy, Runion, France,
2006. Emerging Infectious Diseases Journal, Atlanta, GA, v. 16, n. 3, p. 418-425, 2010.
GERARDIN, P. et al. Multidisciplinary prospective study of mother-to-child
chikungunya virus infections on the island of La Runion. PLoS Medicine, San
Francisco, CA, v. 5, n. 3, p. e60, 2008.
HAWLEY, W. A. The biology of Aedes albopictus. Journal of the American Mosquito
Control Association Supplement, [S.l.], v. 1, p. 1-39, 1988.
HEMINGWAY, J. Techniques to detect insecticide resistence machanisms (Field and
Laboratory Manual). Geneva, Switzerland: WHO, 1998.
HILLS, S. L. et al. A focal, rapidly-controlled outbreak of dengue fever in two suburbs in
Townsville, north Queensland, 2001. Communicable Diseases Intelligence, [S.l.], v. 26,
n. 4, p. 596-600, 2002.
HOARAU, J. J. et al. Persistent chronic inflammation and infection by Chikungunya
arthritogenic alphavirus in spite of a robust host immune response. The Journal of
Immunology, [S.l.], v. 184, n. 10, p. 5914-5927, 2010.
HOCHEDEZ, P. et al. Management of travelers with fever and exanthema, notably
dengue and chikungunya infections. The American Journal of Tropical Medicine and
Hygiene, [S.l.], v. 78, n. 5, p. 710-713, 2008.
JAYAKEERTHI, R. S. et al. Shell Vial Culture assay for the rapid diagnosis of Japanese
encephalitis, West Nile and Dengue-2 viral encephalitis. Virology Journal, [S.l.], v. 3, p.
2, 2006.
JOHNSON, A. J. et al. Detection of anti-arboviral immunoglobulin G by using a
monoclonal antibody-based capture enzyme-linked immunosorbent assay. Journal of
Clinical Microbiology, Washington, DC, v. 38, n. 5, p. 1827-1831, May 2000.
55
JUPP, P. G.; MCINTOSH, B. M. Chikungunya virus disease. In: MONATH, T. P. (Ed.)

The Arboviruses: epidemiology and ecology. Boca Raton, FL: CDC Press, Inc., 1988. v.
II. p. 137-157.
KARABATSOS, N. Arboviruses. In: HSIUNG, G. D.; FONG, C.; LANDRY, M. (Ed.).
Diagnostic virology. 4th ed. New Haven, CT: Yale University Press, 1993. Chap. 27.
KROEGER, A. et al. Effective control of dengue vectors with curtains and water
container covers treated with insecticide in Mexico and Venezuela: cluster randomized
trials. BMJ Journals, [S.l.], v. 332, n. 7552, p. 1247-1252, 2006.
LAKSHMI, V. et al. Clinical features and molecular diagnosis of Chikungunya fever
from South India. Clinical Infectious Diseases, [S.l.], v. 46, n. 9, p. 1436-1442, 2008.
LANCIOTTI, R. S. et al. Chikungunya virus in US travelers returning from India, 2006.
Emerging Infectious Diseases Journal, Atlanta, GA, v. 13, n. 5, p. 764-767, 2007.
LEMANT, J. et al. Serious acute chikungunya virus infection requiring intensive care
during the Runion Island outbreak in 2005-2006. Critical Care Medicine, [S.l.], v. 36,
n. 9, p. 2536-2541, 2008.
LENHART, A. et al. Insecticide-treated bednets to control dengue vectors: preliminary
evidence from a controlled trial in Haiti. Tropical Medicine & International Health,
[S.l.], v. 13, n. 1, p. 56-67, 2008.
LEWTHWAITE, P. et al. Chikungunya virus and central nervous system infections in
children, India. Emerging Infectious Diseases Journal, Atlanta, GA, v. 15, n. 2, p. 329331, 2009.
LIUMBRUNO, G. M. et al. The Chikungunya epidemic in Italy and its repercussion on
the blood system. Blood Transfusion, [S.l.], v. 6, n. 4, p. 199-210, 2008.
LUMSDEN, W. H. R. An epidemic of virus disease in Southern Province, Tanganyika
Territory, in 1952-53: II. General description and epidmiology. Transactions of the
Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene, [S.l.], v. 49, n. 1, p. 33-57, 1955.
MANIMUNDA, S. P. et al. Clinical progression of chikungunya fever during acute and
chronic arthritic stages and the changes in joint morphology as revealed by imaging. The
American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, [S.l.], v. 104, n. 6, p. 392-399,
2010.
MARTIN, D. A. et al. Standardization of immunoglobulin M capture enzyme-linked
immunosorbent assays for routine diagnosis of arboviral infections. Journal of Clinical
Microbiology, Washington, DC, v. 38, n. 5, p. 1823-1826, 2000.
56
______. Standardization of immunoglobulin M capture enzyme-linked immunosorbent

assays (MAC-ELISA) for routine diagnosis of arboviral infections. Journal of Clinical
Microbiology, Washington, DC, v. 38, n. 5, p. 1823-1826, 2000.
MAVALANKAR, D. et al. Increased mortality rate associated with chikungunya
epidemic, Ahmedabad, India. Emerging Infectious Diseases Journal, Atlanta, GA, v.
14, n. 3, p. 412-415, 2008.
MONATH, T. P. et al. Immunoglobulin M antibody capture enzyme-linked
immunosorbent assay for diagnosis of St. Louis encephalitis. Journal of Clinical
Microbiology, Washington, DC, v. 20, p. 784-790, 1984.
MONTELLA, I. R. et al. Insecticide resistance mechanisms of Brazilian Aedes aegypti
populations from 2001 to 2004. The American Journal of Tropical Medicine and
Hygiene, [S.l.], v. 77, n. 3, p. 467-477, 2007.
MORO, M. L. et al. Chikungunya virus in North-Eastern Italy: a seroprevalence survey.
The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, [S.l.], v. 82, n. 3, p. 508-511,
2010.
MORRISON, A. C. et al. Defining challenges and proposing solutions for control of the
virus vector Aedes aegypti. PLoS One, [S.l.], v. 5, n. 3, p. e68, 2008.
______. Exploratory space-time analysis of reported dengue cases during an outbreak
in Florida, Puerto Rico, 1991-1992. The American Journal of Tropical Medicine and
Hygiene, [S.l.], v. 58, n. 3, p. 287-298, 1998.
NAUEN, R. Insecticide resistance in disease vectors of public health importance. Pest
Management Science, [S.l.], v. 63, n. 7, p. 628-633, 2007.
NIEBYLSKI, M. L. et al. Blood hosts of Aedes albopictus in the United States. Journal of
the American Mosquito Control Association Supplement, [S.l.], v. 10, n. 3, p. 447-450,
1994.
NIMMANNITYA, S. et al. Dengue and chikungunya virus infection in man in
Thailand, 1962-1964. I. Observations on hospitalized patients with hemorrhagic fever.
The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, [S.l.], v. 18, n. 6, p. 954-971,
Nov. 1969.
PADBIDRI, V. S.; GNANESWAR, T. T. Epidemiological investigations of chikungunya
epidemic at Barsi, Maharashtra state, India. Journal of hygiene, epidemiology,
microbiolpgy, and Immunology, [S.l.], v. 23, n. 4, p. 445-451, 1979.
57
PAN AMERICAN HEALTH ORGANIZATION. PAHO Strategic and operational

Plan for responding to pandemic influenza. 2005. Disponvel em: <www.paho.org/
English/AD/PAHO_Plan_PandemicInfluenza_Eng.pdf>. Acesso em: Aug. 11 2010.
PARKS, W.; LLOYD, L. Planning social mobilization and communications for
dengue fever presention and control: a step-by-step guide, 2004. Disponvel em:
<http://apps.who.int/tdr/publications/training-guideline-publications/planning-socialmobilization-dengue-fever/pdf/planning_dengue.pdf>. Acesso em: June 2 2010.
PETERSEN, L. R.; STRAMER, S. L,; POWERS, A. M. Chikungunya virus: possible
impact on transfusion medicine. Transfusion Medicine Reviews, Philadelphia, PA., v.
24, n. 1, p. 15-21, 2010.
PIALOUX, G. et al. Chikungunya, an epidemic arbovirosis. The Lancet Infectious
Diseases, [S.l.], v. 7, n. 5, p. 319-327, 2007.
QUEYRIAUX, B. et al. Clinical burden of chikungunya virus infection. The Lancet
Infectious Diseases, [S.l.], v. 8, n. 1, p. 2-3, Jan. 2008.
RAJAPAKSE, S.; RODRIGO, C.; RAJAPAKSE, A. Atypical manifestations of
chikungunya infection. The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene,
[S.l.], v. 104, n. 2, p. 89-96, 2010.
RAMFUL, D. et al. Mother-to-child transmission of chikungunya virus infection. The
Pediatric Infectious Disease Journal, [S.l.], v. 26, n. 9, p. 811-815, 2007.
RENAULT, P. et al. A major epidemic of chikungunya virus infection on Runion
Island, France, 2005-2006. The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene,
[S.l.], v. 77, n. 4, p. 727-731, 2007.
REZZA, G. et al. Infection with chikungunya virus in Italy: an outbreak in a temperate
region. Lancet, [S.l.], v. 370, n. 9602, p. 1840-1846, 2007.
ROBILLARD, P. Y. et al. [Vertical maternal fetal transmission of the chikungunya virus:
ten cases among 84 pregnant women]. La Presse Mdicale, [S.l.], v. 35, n. 5, Pt. 1,
p. 785-788, 2006.
ROBIN, S. et al. Severe bullous skin lesions associated with chikungunya virus infection
in small infants. European Journal of Pediatrics, [S.l.], v. 169, n. 1, p. 67-72, 2010.
RODRIGUEZ, M. M.; BISSET, J. A.; FERNANDEZ, D. Levels of insecticide resistance
and resistance mechanisms in Aedes aegypti from some Latin American countries.
Journal of the American Mosquito Control Association Supplement, [S.l.], v. 23, n. 4,
p. 420-429, 2007.
58
SAM, I. C.; ABUBAKAR, S. Chikungunya virus infection. Medical Journal of Malaysia,

Kuala Lumpur, v. 61, n. 2, p. 264-269, 2006.
SAVAGE, H. M.; SMITH, G. C. Identification of damaged adult female specimens
of Aedes albopictus and Aedes aegypti in the New World. Journal of the American
Mosquito Control Association Supplement, [S.l.], v. 10, n. 3, p. 440-442, 1994.
SCHMIDT, N. J. Cell culture techniques for diagnostic virology. In: LENNETTE, E. H.;
SCHMIDT, N. J. (Ed.). Diagnostic procedures for viral, rickettsial, and chlamydial
Infections. 5th ed. Washington, DC: American Public Health Association, 1979.
SCHUFFENECKER, I. et al. Genome microevolution of chikungunya viruses causing
the Indian Ocean outbreak. PLoS Med, [S.l.], v. 3, n. 7, p. e263, 2006.
SHAH, K. V.; GIBBS JR., C. J.; BANERJEE, G. Virological investigation of the epidemic
of haemorrhagic fever in Calcutta: isolation of three strains of Chikungunya virus.
Indian Journal of Medical Research, New Delhi, v. 52, p. 676-683, July 1964.
SIMON, F.; SAVINI, H.; PAROLA, P. Chikungunya: a paradigm of emergence and
globalization of vector-borne diseases. Medical Clinics of North American, [S.l.], v. 92,
n. 6, p. 1323-1343, 2008.
SISSOKO, D. et al. Field evaluation of clinical features during chikungunya outbreak in
Mayotte, 2005-2006. The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, [S.l.],
v. 15, n. 5, p. 600-607, 2010.
______. Post-epidemic Chikungunya disease on Runion Island: course of rheumatic
manifestations and associated factors over a 15-month period. PloS Neglected Tropical
Diseases, [S.l.], v. 3, n. 3, p. e389, 2009.
SOUMAHORO, M. K. et al. Impact of Chikungunya virus infection on health status
and quality of life: a retrospective cohort study. PLoS One, [S.l.], v. 4, n. 11, p. e7800,
2009.
STAIKOWSKY, F. et al. Prospective study of Chikungunya virus acute infection in the
Island of La Runion during the 2005-2006 outbreak. PLoS One, [S.l.], v. 4, n. 10, p.
e7603, 2009.
______. Retrospective survey of Chikungunya disease in Runion Island hospital staff.
Epidemiology & Infectious, London, v. 136, n. 2, p. 196-206, Feb. 2008.
STAPLES, J. E.; BREIMAN, R. F.; POWERS, A. M. Chikungunya fever: an
epidemiological review of a re-emerging infectious disease. Clinical Infectious
Diseases, [S.l.], v. 49, n. 6, p. 942-948, 2009.
59
TAUBITZ, W. et al. Chikungunya fever in travelers: clinical presentation and course.

Clinical Infectious Diseases, [S.l.], v. 45, n. 1, p. e1-4, July 1 2007.
TOURET, Y. et al. [Early maternal-fetal transmission of the chikungunya virus]. La
Presse Mdicale, [S.l.], v. 35, n. 11, Pt. 1, p. 1656-1658, 2006.
TSAI, T. H. Arboviruses. In: ROSE, N. R. et al. (Ed.). Manual of Clinical Laboratory
Immunology. 4th Ed. Washington, DC: American Society for Microbiology, 1976. p.
606-618.
UNITED STATES. Departament of Health and Human Services. Biosafety in
microbiological and biomedical laboratories. 4th ed. Washington, DC: US
Government Printing Office, 1999.
______. HHS Pandemic Influenza Plan. 2005. Disponvel em: <www.hhs.gov/
pandemicflu/plan/pdf/HHSPandemicInfluenzaPlan.pdf>. Acesso em: June 2 2010.
VAZEILLE, M.; MOUSSON, L.; FAILLOUX, A. B. Failure to demonstrate experimental
vertical transmission of the epidemic strain of Chikungunya virus in Aedes albopictus
from La Runion Island, Indian Ocean. Memrias do Instituto Oswaldo Cruz, Rio de
Janeiro, v. 104, n. 4, p. 632-635, July 2009.
WILLIAMS, C. R. et al. Aedes aegypti population sampling using BG-Sentinel traps
in north Queensland Australia: statistical considerations for trap deployment and
sampling strategy. Journal of Medical Entomology, Washington, DC, v. 44, n. 2, p.
345-350, 2007.
WORLD HEALTH ORGANIZATION. Dengue Guidelines for Diagnosis,
Treatment, Prevention and Control. 2009. Disponvel em: <http://whqlibdoc.who.int/
publications/2009/9789241547871_eng.pdf>. Acesso em: June 2 2010.
______. Global strategic framework for integrated vector management. 2004.
Disponvel em: <http://whqlibdoc.who.int/hq/2004/WHO_CDS_CPE_PVC_2004_10.
pdf>. Acesso em: 24 fev. 2014.
______. Guidelines for drinking-water quality. 3rd ed. 2006. Disponvel em: <www.
who.int/water_sanitation_health/dwq/gdwq3rev/en/index.html>. Acesso em: June 2
2010.
______. Guidelines on Clinical Management of Chikungunya Fever. 2008.
Disponvel em: <www.searo.who.int/LinkFiles/Publication_guidelines_on_cli_mgmt_
chikungunya_fvr-(cd-180).pdf>. Acesso em: June 2 2010.
______. International Health Regulations (2005). 2008. Disponvel em: <http://
whqlibdoc.who.int/publications/2008/9789241580410_eng.pdf>. Acesso em: June 2
2010.
60
______. Pesticides and their application: for the control of vectors and pests of public
health importance. 2006. Disponvel em: <http://whqlibdoc.who.int/hq/2006/WHO_
CDS_NTD_WHOPES_GCDPP_2006.1_eng.pdf>. Acesso em: June 2 2010.
______. Prevention and Control of Chikungunya in South-East Asia: report of the
Expert Group Meeting. Aurangabad, India: Regional Office World Health Organization,
2008. Disponvel em: <www.searo.who.int/LinkFiles/Publication_CD-176.pdf>. Acesso
em: June 2 2010.
______. Safe use of pesticides. Fourteenth report of WHO Expert Committee on
Vector Biology and Control. Geneva, Switzerland, 1991.
61
APNDICES
62
Apndice A Protocolo de isolamento viral (para cultura de clula)

Introduo
O mtodo ideal para a determinao da etiologia especfica de uma arbovirose requer o
isolamento do vrus a partir de uma amostra obtida do paciente durante a fase aguda da
doena e a demonstrao de um aumento no ttulo de um anticorpo para o isolado durante
a convalescena. Por uma srie de razes, o isolamento de arbovrus a partir de amostras de
pacientes a exceo, sendo que o espcime a ser examinado no recolhido rapidamente,
no tratado adequadamente, ou no transportado de forma rpida para o laboratrio
de vrus para a inoculao. A viremia, para muitas infeces por arbovrus em humanos, se
detectvel em qualquer fase, cessa no momento ou logo aps o incio dos sintomas uma
fase em que o anticorpo frequentemente identificado. Como alguns vrus circulantes podem ser recuperados e os anticorpos podem estar ausentes ou presentes em ttulos baixos,
as amostras de sangue de fase aguda devem ser recolhidas imediatamente aps a suspeita
de uma etiologia viral. O atraso de uma hora ou mais pode comprometer a possibilidade de
isolamento do vrus, sendo o tempo dependente do tipo de vrus envolvido.
Alguns arbovrus produzem uma viremia de magnitude e durao suficientes e o vrus
pode ser isolado do sangue durante a fase aguda da doena, como por exemplo, entre 0 e 5
dias aps o incio. Exemplos desses vrus incluem os agentes da febre amarela, da dengue,
do chikungunya, da encefalite equina venezuelana (VEE) e do mosquito-plvora, do Ross
River e febres Oropouche. A viremia em febre da carraa do Colorado nica porque
pode se estender por semanas ou meses, e a infeco foi transmitida por transfuses.
Muitos arbovrus encefalitognicos podem ser recuperados a partir do lquido crebro-espinhal (LCE) obtido durante a fase aguda da doena no crebro, mais raramente a
encefalite St. Louis (SLE), a encefalite japonesa (JE), a encefalite equina oeste (WEE)
e a encefalite equina do leste (EEE vrus) que so recuperados a partir do sangue. Os
isolados virais podem ser recuperados por meio de bipsia ou autpsia das vsceras dos
pacientes com febre amarela aguda, febre hemorrgica da dengue ou outras arboviroses
viscerotrpicas. Para o isolamento do crebro, as amostras devem ser colhidas em vrios
domnios, incluindo o crtex, os ncleos do crebro, o cerebelo e o tronco cerebral.
O arbovrus neurotrpico, por vezes, pode ser isolado do lquor obtido por puno
lombar durante a fase aguda da encefalite ou meningite assptica. Alphavirus tm sido
isoladas de lquido sinovial de pacientes com poliartrite aguda e do trato respiratrio
superior dos pacientes com VEE aguda. Sob certas circunstncias, os arbovrus foram
recuperados na urina, no leite, no smen e no fluido vtreo.
63
Princpio
Sistemas de cultura celular suscetveis esto disponveis para a tentativa de isolamento
do agente etiolgico presumido de uma doena ou enfermidade. Aps o sucesso do
isolamento, o agente pode ser positivamente identificado e um antgeno preparado a
partir deste isolado ou o prprio vrus pode ser usado para testar o soro do paciente
para a presena de anticorpos para o vrus isolado. No caso da deteco de anticorpos
positivos, todo esse exerccio confirma que o isolado foi o agente causador da doena
ou enfermidade. Em certos casos, o soro de um paciente pode no estar disponvel.
Nestas circunstncias, depende-se do reisolamento do vrus causador da mesma amostra
original. No entanto, o reisolamento sempre testado, independente de o soro estar
disponvel a partir do paciente ou no.
Materiais e reagentes
Monocamadas de cultura de clulas Vero ou outra cultura de clulas suscetveis.
Culturas de clulas C6/36-clonadas de mosquito Aedes albopictus.
Procedimento
Tecidos ou lquidos disponveis devem ser divididos para o isolamento viral, microscopia
eletrnica, e para o exame imuno-histoqumico. Os tecidos devem ser coletados de forma
assptica e transportados rapidamente para o laboratrio. A alquota para o isolamento
viral deve ser imediatamente congelada a -70C em freezer mecnico ou armazenada
em gelo seco. As amostras para isolamento viral devem ser mantidas congeladas
continuamente, evitando ciclos de congelamento e descongelamento que inativam o
vrus. A alquota para microscopia eletrnica deve ser picada e embebida diretamente em
glutaraldedo. Mudanas autolticas ocorrem rapidamente e os tecidos devem ser fixados
o mais rapidamente possvel. Uma poro da amostra deve ser fixada em formalina
tamponada ou, de preferncia, inserida em meio de congelamento e congelados para
preparar sees para exame imuno-histoqumico.
Espcimes processados devem ser inoculadas em culturas de clulas com um mnimo
de atraso. Soros de pacientes com doena febril aguda podem ser usados no diludos
para o isolamento do vrus ou na diluio de 1:10 e 1:100 em um diluente proteico.
importante para inocular amostras desconhecidas, de preferncia em duas ou mais
diluies (no diluda a 10-2). Culturas de clulas em frascos estreis ou culturas em
frascos de 25 cm2 de linhagem Vero so inoculadas e observadas para a produo de
64
efeitos citopticos (CPE), durante 10-14 dias. Para frascos estreis, um volume total de
400 l inoculado, seguido de centrifugao a 100 xg por 1 hora a 37C. Uma parte do
sobrenadante de clulas pode ser coletado e testado para a presena do vrus por um
ou outro alvo de RT-PCR ou ensaios consenso de RT-PCR. Alternativamente, as clulas
so colhidas e as lminas locais so preparadas para o exame IFA usando anticorpos
monoclonais especficos.
Controles
Clulas Vero e clulas C6/36 sem inoculao.
Interpretao
O isolamento do vrus positivo e o reisolamento define o agente etiolgico da doena do
paciente. Se soros pareados ou um soro convalescente do paciente estiver disponvel, o
vrus isolado testado sorologicamente com o soro do paciente para verificar a resposta
de anticorpos ao vrus.
65
Apndice B Protocolo da reao da polimerase em cadeia

em tempo real
RT-PCR em tempo real pode ser realizada com um nmero de kits disponveis
comercialmente. Atualmente, utilizamos o iScript BioRad para uma etapa do RT-qPCR
(# 170-8895) ou o kit QIAGEN QuantiTect Probe RT-PCR (# 204443). Os dois kits so
quase idnticos na configurao de reao com uma nica exceo: o volume de enzima
usada no kit QIAGEN 0.5 ul por reao, em vez de 1.0 ul, e o volume de gua na mistura
principal ajustado por 0.5 ul para corrigir isso. A configurao mostrada a seguir para
o kit da QIAGEN. Note tambm que o volume de RNA adicionado por reao a seguir
de 10 ml, mas pode ser aumentado ou diminudo com o ajustamento adequado do
volume total de gua.
Componente
Volume por reao
10 reaes
13,2 l
132 l
25 l
250 l
gua livre de RNase

2X mistura pronta
primer 1 (100 M do estoque)
0,5 l
5 l
primer 2 (100 M do estoque)
0,5 l
5 l
FAM/sonda (25 M do estoque)
0,30 l
3,0 l
l da enzima
0,5 l
5 l
Prepare um master mix de reagentes de acordo com o nmero de reaes desejadas. O

master mix deve ser preparado em uma sala limpa, fisicamente separada de todas as outras
atividades laboratoriais, com reagentes e equipamentos dedicados (ou seja, pipetas). Para
dez amostras fazer um master mix 10X (veja acima) multiplicando-se os volumes de
todos os reagentes individuais por 10. Combine os reagentes na ordem acima, em um
tubo de centrfuga livre de RNase no gelo. Divida a mistura principal em dez parcelas de
40 ml cada uma, em tubos de 0,2 ml (especificamente para os ensaios TaqMan; emisso
de fluorescncia lida atravs do PAC) de PCR ou placa de PCR de 96 poos. Finalmente,
66
adicione 10 ml da amostra de RNA individuais para cada tubo. Todas as amostras so

testadas em duplicata. Inclua vrios SEM RNA controles negativos (NTC) por adio de
gua em vez de qualquer amostra de RNA. Inclua um controle positivo ou uma srie de
diluio de quantidades conhecidas de controle positivo de RNA para a criao de uma
anlise quantitativa.
Condies de Ciclagem (condies QIAGEN para o RT-PCR em tempo real):
1 ciclo:
45 ciclos:
50C por 30 min (reao de RT)
95C 15 seg
95C por 15 min (ativao enzimtica)
60C 1 min
Interpretao
Ns utilizamos o seguinte algoritmo para avaliar os resultados de TaqMan:
Positivo: Valores de Ct menor igual a 38 em poos em duplicata.
Ambguos: Valores de Ct menor igual a 38 em um dos dois poos.
Negativo: Valores de Ct maior que 38 em poos em duplicata.
Todas as amostras positivas e equvocas so repetidas com um segundo conjunto de
primers/sondas para a confirmao. Um resultado positivo em qualquer um dos controles
negativos invalida toda a execuo. A falha do controle positivo em gerar um resultado
positivo tambm invalida toda a execuo.
A extrao de RNA
NOTA: Evitando a contaminao e trabalhando com RNA
Manter separados fisicamente as reas de trabalho; uma dedicada ao trabalho de pr-amplificao do RNA (extrao de RNA e adio de RNA) e outra para produo do
master mix da reao.
Utilizar equipamentos dedicados distintos dentro das reas de pr e ps-amplificao,
especialmente pipetas e centrfugas.
Sempre utilizar luvas, mesmo quando manipular os tubos fechados.
Abrir e fechar os tubos rapidamente e evitar tocar em qualquer parte no interior.
67
Usar tubos de plstico e pontas de pipeta descartveis sem RNase.

Usar pontas de pipeta aerossol.
Usar gua sem RNase.
Preparar todos os reagentes no gelo.
1. Amostras em fase slida (mosquitos ou tecidos) so primeiramente homogeneizados
em tampo isotnica para produzir um lquido homogneo. O RNA extrado de
amostras de lquido (LCE ou soro), sem qualquer pr-tratamento, conforme descrito
a seguir. Os espcimes de tecido (aproximadamente 10 mm3) so homogeneizadas em
1 ml de diluente BA-1 com dez moedores de tecido Broeck. Espcimes do mosquito so
homogeneizados em dez moedores de tecido Broeck ou usando o talo de ao revestido de
cobre (BB) como tcnica de moagem. Em ambas as tcnicas o material homogeneizado
e clarificado por centrifugao em microcentrfuga (ou seja, Eppendorf) velocidade
mxima por 5 minutos para sedimentar qualquer material particulado.
2. Extrair RNA de 140 ml da amostra de lquido (LCE, soro ou homogeneizado
clarificado) usando o kit QiAmp para extrao de RNA viral (QIAGEN parte # 52904).
Siga exatamente o protocolo do fabricante.
NOTA: Para amostras de mosquito adicionar uma lavagem adicional com AW1.
Extrato de pelo menos dois controles negativos e dois controles positivos devem ser
adicionados com as amostras. Os controles positivos devem diferir na quantidade
de RNA-alvo presente (ou seja, uma quantidade predeterminada positiva alta e uma
baixa). O volume de amostra coletada pode ser maior ou menor que o volume padro
declaradas no protocolo QIAGEN (140 ml), com as adaptaes adequadas a todos os
outros volumes no protocolo.
68
Apndice C Protocolos sorolgicos IgM e IgG

Protocolo de captura de anticorpos IgM em ensaio ELISA
Introduo
Ensaios que detectam imunoglobulina M (IgM) especfica de vrus so vantajosos porque
a deteco de anticorpos produzidos ocorre durante os primeiros dias, aps o incio dos
sintomas clnicos em uma infeco primria, eliminando em muitos casos a necessidade
de coleta de espcimes para a fase de convalescena. A captura de IgM o mtodo ideal
para deteco de IgM, porque simples, sensvel e aplicvel a soro e no lquido crebro-espinhal (LCE) de uma variedade de espcies animais (por exemplo, humanos, equinos,
aves). Neste caso, reaes falso-positivas devido ao fator reumatoide so minimizadas.
Princpio
Anticorpos IgM de captura em enzyme-linked immunosorbent assay ou ELISA
(MAC-ELISA) fornecem uma alternativa til comparada com a imunofluorescncia
para documentao de uma resposta sorolgica. ELISA um teste menos subjetivo que
a imunofluorescncia e um grande nmero de amostras podem ser processadas. No
entanto, o princpio dessa tcnica semelhante ao da imunofluorescncia. Em nosso
laboratrio, anti-IgM (anticorpo de captura) revestido em placas de 96 poos, seguido
de soro do paciente, e ento de um antgeno viral conhecido e no infeccioso. A presena
do antgeno detectada por meio da utilizao de uma enzima conjugada a um anticorpo
antiviral, e um resultado colorimtrico gerado pela interao da enzima e de um
substrato cromognico. Essa tcnica constitui o MAC-ELISA.
Segurana
O procedimento deve ser realizado sob condies de laboratrio de segurana que levam
em considerao o potencial de infeco das amostras de soro envolvidas. O uso de jaleco,
luvas e uma capela de fluxo laminar so recomendados.
69
Tampo de Revestimento: Tampo carbonato / bicarbonato pH 9,6 NaHCO3 Na2CO3
+ 1,59 g 2,93 g diludos em 1 L de gua.
Tampo de lavagem: tampo fosfato (PBS), 0,05% de Tween 20, pH 7.2. PBS est
disponvel em forma de p, a partir de vrias fontes comerciais.
Tampo de bloqueio: PBS leite a 5% / 0,5% Tween 20.
Soluo Stop: 1N H2SO4.
Revestimento dos anticorpos: IgM anti-humano de cabra
Kirkegaard and Perry Laboratories # cat 01-10-03.
Antgeno viral: sacarose-acetona, antgenos extrados de suco do crebro do rato
infectado com vrus, no infecciosas, previamente titulada.
Antgeno normal: sacarose-acetona, antgeno extrado do crebro de camundongos
lactantes, de animais no infectados.
Conjugao anticorpo de deteco: anticorpo monoclonal conjugado de HRP,
previamente titulado.
Substrato: 3,3 5, 5 base tetrametilbenzidina (TMB-ELISA), base Gibco # 15980-0414.
Placas: Immulon II HB de fundo chato de 96 poos.
Dynatech Technologies # 3455.
Mquina de lavar a microplaca.
Leitor de microplacas.
Incubadora.
Pipetas simples e multicanal.
Reservatrios de reagentes.
Sacos Ziploc, toalhas de papel.
70
Espcimes clnicas
Soro humano das fases agudas e convalescentes e/ou lquido crebro-espinhal (LCE).
Soros humanos previamente testados soro-positivos e anticorpo-negativos para controle.
NOTA: Guarde todos os espcimes de diagnsticos a 4C antes do ensaio, e -2C depois
de todos os testes. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.
Procedimento
NOTA: o procedimento a seguir inclui informaes sobre o controle de qualidade e
interpretao. Cada amostra do soro testada em triplicata em ambos os antgenos
virais e normal. Oito espcimes de testes podem ser analisados por placa. As amostras
de lCE geralmente so testadas separadamente.
1. Usando um marcador permanente de ponta fina, numere e rotule as placas (use a
Figura 1 como um guia). Identificar a localizao de cada amostra clnica (S1-S8),
utilizando o cdigo apropriado do laboratrio. Para manter o calendrio de adio de
reagentes consistente, processe as placas na ordem em que elas so numeradas em todas as
fases do processo. As placas devem ser mantidas em um ambiente fechado, umidificado
durante todos os perodos de incubao, com exceo da etapa de revestimento. Um saco
grande Ziploc contendo uma toalha de papel mida funciona bem para essa finalidade.
2. Cubra o interior de 60 poos de 96 placa de poos com 75 microlitros por poo de
antiIgM humano produzido em cabra diludo 1:2.000 em tampo de revestimento; pH
9,6. Incubar a 40C durante a noite.
3. Despejar o anticorpo de revestimento e placas em papel absorvente.
Bloquear as placas com 200 ml de tampo de bloqueio por poo.
Incubar a temperatura ambiente por 30 minutos.
4. Lavar os poos cinco vezes, com tampo de lavagem, utilizando lavadora automtica.
Os poos devem ser preenchidos at o topo em cada ciclo de lavagem.
5. Adicionar 50 ml por poo de soro do paciente (S) diludo 1:400 em tampo de lavagem
para um bloco de seis poos ou adicionar LCE do paciente no diludo para apenas dois
poos, de modo que o LCE ser testado isoladamente contra o vrus e antgenos normais.
71
NOTA: O LCE pode ser diludo no mximo de 1:5 em tampo de lavagem, se

necessrio. Coloque soro humano de controle positivo (Ref) diludo em tampo
de lavagem de acordo com a titulao anterior e um controle de soro humano
negativo (N) diludo 1:400 em tampo de lavagem para um bloco de seis poos cada
(ver Figura 1). Incubar as placas durante 1 hora a 37C em cmara umidificada.
6. Lavar cinco vezes.
7. Diluir o antgeno viral em tampo de lavagem de acordo com a titulao anterior.
Adicionar 50 ml por poo esquerda dos trs poos de cada bloco do soro (ver Figura 1).
direita dos trs poos de cada bloco, adicionar 50 ml por poo de antgeno normal
diludo em tampo de lavagem para a mesma concentrao de antgeno viral. Incubar
durante uma noite a -40C em cmara umidificada.
9. Adicionar 50 ml por poo de anticorpo monoclonal conjugado com peroxidase
amplamente reativo para o grupo viral adequado, diludo em tampo de bloqueio, de
acordo com a titulao anterior. Incubar por 1 hora a 37C em cmara mida.
10. Ligue o leitor de placas para aquecer e remova o reagente TMB-ELISA da geladeira.
11. Lavar as placas cinco vezes, por duas vezes. Virar as placas 180 na mquina de lavar,
aps a primeira srie de cinco ciclos. Isso facilita na obteno de resultados consistentes.
12. Enquanto a chapa est na temperatura ambiente, adicionar 75 ml por poo de substrato
TMB em todos os poos. Cubra as placas para bloquear a luz. Incubar a temperatura
ambiente por 10 minutos. A cor azul vai aparecer em poos de anticorpos positivos.
13. Adicionar 50 ml por poo de soluo STOP em todos os poos, incluindo as linhas
exteriores dos poos da placa (o leitor da placa deve ser ajustado para zero). Os poos
que estavam azuis iro mudar agora para uma cor amarela. Deixe as placas temperatura
ambiente por 1 minuto. Leia as placas em leitor de microplacas utilizando filtro de 450 nm.
72
Consideraes prticas
1. As placas podem ser revestidas e mantidas a 4C por at um semana.
2. Soros controle no diludos podem ser armazenados a 4C por at duas semanas.
3. Antgenos virais reconstitudos no diludos e normais podem ser armazenados a
-20C por um perodo indefinido de tempo.
4. Soros de teste e de controle podem ser diludos para as diluies de trabalho e
refrigerados um dia antes de usar. Antgenos e conjugado devem ser diludos para as
diluies de trabalho imediatamente antes da utilizao.
O MAC-ELISA deve ser padronizado periodicamente. Isso deve ocorrer quando um
novo lote de reagentes for introduzido e pelo menos uma vez por ano. Recomenda-se que
a mdia de densidade ptica (DO) do soro controle positivo, que reagiu com o antgeno
viral, seja fixada em aproximadamente 1.0. O soro controle normal que reagiu com o
antgeno viral deve ser padronizado em torno de 0,2 (isso poder variar). A padronizao
dos reagentes normalmente obtida por meio de titulao, sempre comparando as
densidades pticas dos reagentes quando reagem ou no com o antgeno viral e normal.
73
Resultados
Antes dos resultados serem calculados para cada amostra clnica, o teste deve ser correto
para ser vlido. Para um teste vlido, o seguinte deve ser verdadeiro:
A DO mdia do soro de controle positivo que reagiu em antgeno viral (P)
A DO mdia do soro controle negativo que reagiu em antgeno viral (N)
Deve ser maior ou igual a 2,0. Este o P/N do controle positivo.
A validade do teste deve ser determinada para cada placa. Resultados para as amostras
clnicas s podem ser determinados se o teste vlido. Se o teste no vlido, a leitura
da placa deve ser repetida. Se o teste ainda falhar aps uma repetio, ento um ou
mais parmetros ou reagentes causaram provavelmente um erro, e uma soluo para o
problema deve ser buscada.
Para determinar se os espcimes clnicos (S1-S8) contm IgM contra o antgeno viral
(que indicam infeco recente com o vrus) o seguinte deve ser calculado:
A DO mdia da amostra do teste que reagem com antgeno viral (P)
A DO mdia do soro controle negativo que reagiu em antgeno viral (N)
Este o P/N da amostra teste. Para um modelo ser considerado IgM positivo para o
vrus de teste, o P/N deve ser igual ou superior a 2,0.
Alm disso, o valor de P para o corpo de prova deve ser maior ou igual ao dobro da
mdia da DO da amostra do teste que reagiu com o antgeno normal. Se este requisito
no for cumprido, um conhecimento no especfico est sendo gerado, e o resultado deve
ser reportado como no interpretvel.
Todos os pacientes com valores de P/N iguais ou superiores a 2 devem ser relatados
como presumveis de anticorpos IgM (veja o pargrafo a seguir), desde que cumpram
os requisitos listados acima. No caso de um LCE agudo precoce ou soro serem negativos
por este teste, uma amostra de soro da fase convalescente deve ser solicitada e testada
antes que o paciente seja relatado como negativo para evidncia sorolgica de infeco
viral recente. Sem o teste de uma amostra da fase convalescente, um resultado negativo
pode refletir o teste de uma amostra da fase aguda obtida antes dos anticorpos terem
aumentado a nveis detectveis. Na maioria dos pacientes, a IgM detectvel oito dias
aps o incio dos sintomas de infeco por um vrus do grupo em estudo. IgM persiste
por pelo menos 45 dias, e muitas vezes por at 90 dias.
74
O valor de corte de 2,0 emprico, baseado na experincia e na conveno. Os valores

de P/N que se encontram entre 2,0 e 3,0 podem ser considerados suspeitos de falso-positivos. Outros testes devem ser realizados para determinar o estado desses espcimes.
Ressalta-se que o valor de P/N para uma amostra na diluio de 1:400 de triagem no
uma indicao da concentrao de anticorpos absoluta, ou seja, o valor de P/N no
quantitativo.
Recomenda-se ainda que, para soros, todos os resultados positivos devem ser confirmados
por titulao com 6, duas vezes diluies das amostras de soro, em comparao a uma
titulao similar do soro de controle negativo. As curvas indicam soropositividade linear
verdadeira. Curva de titulao plana e ondulante indicam resultados falso-positivos.
Protocolo de captura de anticorpos IgG em ensaio de ELISA

Introduo
Imunoglobulina G (IgG) menos especfica para vrus que a IgM, aparecendo no soro
um pouco mais tarde no curso da infeco e permanecendo detectvel at muito tempo
depois da IgM desaparecer do soro de pacientes infectados. Usando o IgG-ELISA em
paralelo com o anticorpo IgM Capture ELISA Assay (MAC-ELISA), pode-se observar
aumento relativo e quedas nos nveis de anticorpos em amostras de soro. O teste simples
e sensvel. aplicvel a amostras de soro, mas geralmente no aplicvel a lquido crebro-espinhal (LCE). As reaes falso-positivas devido ao fator reumatoide so minimizadas.
Princpio
IgG-ELISA fornece uma alternativa til para imunofluorescncia na identificao de um
isolado viral ou documentao de uma resposta sorolgica. IgG-ELISA menos subjetivo
que a imunofluorescncia, e um grande nmero de amostras podem ser processadas
ao mesmo tempo. Em nosso laboratrio, um grupo de anticorpos monoclonais virais
reativos revestido em uma placa de 96 poos, seguido sequencialmente por antgenos
virais conhecidos, o soro do paciente, IgG humana conjugada por enzimas e, por ltimo,
um substrato utilizado para o conjugado. Essa a constituio da tcnica de IgG-ELISA.
Segurana
O procedimento deve ser realizado sob condies de laboratrio de segurana que levam
em considerao o potencial de infeco das amostras de soro envolvidas. O uso de jaleco,
luvas e uma capela de fluxo laminar so recomendados.
75
Tampo de revestimento: tampo carbonato / bicarbonato pH 9,6 NaHCO3 Na2CO3
+ 1.59 g 2.93 g diludos em 1 L de gua.
Tampo de lavagem: tampo fosfato (PBS), 0,05% de Tween 20, pH 7.2. PBS est
disponvel em forma de p a partir de vrias fontes comerciais.
Tampo de bloqueio: soro de cabra a 3%, 1% Tween-20, em PBS.
Anticorpo de revestimento: grupo de anticorpos monoclonais especficos, previamente
titulados.
Antgeno viral: sacarose-acetona, antgenos virais extrados via suco do crebro do
rato, no infecciosas, previamente titulados.
Antgeno normal: sacarose-acetona, antgenos extrados do crebro de camundongos
lactantes, de animais no infectados.
Deteco de conjugao de anticorpos: alcalina conjugada por fosfatase de IgG de cabra
anti-humano parte Fc, previamente titulada (Jackson gato Immunoresearch # 109-055-098).
Substrato: 3 mg/ml de fosfato de p-nitrofenil, dissdico (Sigma 104, Sigma gato
diagnsticos # 104-105) em 1M Tris (base) pH 8.0 (nota: o reagente tris requer considervel
concentrao de HCL para o ajuste do pH).
Soluo STOP: 3M NaOH.
Placas: Immulon II HB de fundo chato de 96 poos.
Dynatech Technologies # 3455.
Mquina de lavar a microplaca.
Leitor de microplacas.
Incubadora.
Pipetas simples e multicanal.
Reservatrios de reagentes.
Sacos Ziploc, toalhas de papel.
76
Espcimes clnicas
Soro humano das fases aguda e convalescente.
NOTA: guarde todas as amostras de diagnstico a 4C antes do ensaio, e a -20C aps
todos os testes concludos. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.
Procedimento
NOTA: o procedimento a seguir inclui informaes sobre o controle de qualidade e
a interpretao. Cada amostra do soro testada em triplicata em ambos os antgenos
virais e normal. Oito espcimes de testes podem ser analisadas por placa.
1. Usando um marcador permanente de ponta fina, numere e rotule as placas (use a Figura
1 como um guia). Identificar a localizao de cada amostra clnica (S1-S8), utilizando
o cdigo apropriado de laboratrio. Para manter o calendrio de adio de reagentes
consistente, processe as placas na ordem em que elas so numeradas em todas as fases do
processo. As placas devem ser mantidas em um ambiente fechado umidificado durante
todos os perodos de incubao, com exceo da etapa de revestimento. Um grande saco
Ziploc contendo uma toalha de papel mida funciona bem para essa finalidade.
2. Cubra o interior de 60 dos 96 poos com 75 l/poo de anticorpos monoclonais,
adequados reativos de grupos diludos em tampo de revestimento, de acordo com a
titulao prvia. Incubar a 40C durante a noite.
3. Despejar o anticorpo de revestimento e de placas em papel absorvente.
Bloquear as placas com 200 ml de tampo de bloqueio por poo. Incubar a temperatura
ambiente por 30 minutos.
4. Lavar os poos cinco vezes, com tampo de lavagem, utilizando lavadora automtica.
Os poos devem ser preenchidos at o topo em cada ciclo de lavagem.
5. Diluir o antgeno viral em tampo de lavagem de acordo com a titulao anterior.
Pipetar 50 ml por poo esquerda dos trs poos de cada bloco do soro (ver Figura 1).
Nos trs poos direita de cada bloco, adicionar 50 ml por poo de antgeno normal,
diludo em tampo de lavagem para a mesma concentrao de antgeno viral. Incubar
durante uma noite a -40C em cmara umidificada.
77

7. Pipetar 50 ml por poo de soro do paciente (S) diludo 1:400 em tampo de lavagem,
para um bloco de seis poos (ver Figura 1). Adicionar soro de controle positivo humano
(Ref), diludo em tampo de lavagem de acordo com a titulao anterior, e um controle
de soro humano negativo (N) diludo 1:400 em tampo de lavagem para um bloco de seis
poos cada. Incubar as placas durante 1 hora a 37C em cmara umidificada.
9. Pipetar 50 ml por poo de IgG de cada conjugado com fosfatase alcalina anti-humana,
diludo em tampo de bloqueio, de acordo com a titulao prvia. Incubar por 1 hora a
37C em cmara mida.
10. Ligue o leitor de placas para aquecer e dissolver tabletes de substrato em tampo tris,
por 15 minutos antes de adicion-lo s placas.
11. Lavar as placas cinco vezes, por duas vezes. Virar as placas 180C na mquina de
lavar, aps a primeira srie de cinco ciclos. Resultados consistentes so obtidos se esse
procedimento for seguido.
12. Enquanto a chapa est na temperatura ambiente, adicionar 75 l por poo de substrato
Sigma 104 para todos os poos. Cobrir imediatamente as placas para bloquear a luz.
Incubar a temperatura ambiente por 30 minutos. A cor amarela aparece em poos de
anticorpos positivos.
13. Adicionar 35 l por poo de soluo STOP em todos os poos, incluindo as linhas
exteriores dos poos da placa (o leitor da placa deve ser ajustado para zero). Os poos com
reatividade continuaro a apresentar uma cor amarela. Coloque as placas temperatura
ambiente por 1 minuto. Leia as placas em leitor de microplacas usando um filtro de 405 nm.
78
Consideraes prticas
1. As placas podem ser revestidas e mantidas a 4C por at uma semana.
2. Soros controle no diludos podem ser armazenados a 4C por at duas semanas.
3. Antgenos virais reconstitudos no diludo e normal podem ser armazenados a -20C,
por um perodo indefinido de tempo.
4. Soros de teste e de controle podem ser diludos para as diluies de trabalho e
refrigerados um dia antes de usar. Antgenos e conjugado devem ser diludos para as
diluies de trabalho imediatamente antes da utilizao.
O IgG-ELISA deve ser padronizado periodicamente. Isso deve ocorrer quando um novo
lote de reagentes for introduzido, e pelo menos uma vez por ano. Recomenda-se que a
mdia de densidade ptica do soro de controle positivo que reagiu com o antgeno viral
seja fixada em aproximadamente 1.0. O soro controle normal que reagiu com o antgeno
viral deve ser padronizado em torno de 0,2 (isso poder variar). A padronizao dos
reagentes normalmente obtida por meio de titulao, sempre comparando as densidades
pticas dos reagentes quando reagem ou no com o antgeno viral e normal.
Resultados
Antes dos resultados serem calculados para cada amostra clnica, o teste deve ser correto
para ser vlido. Para um teste vlido, o seguinte deve ser verdadeiro:
A DO mdia do soro de controle positivo que reagiu em antgeno viral (P)
A DO mdia do soro de controle negativo que reagiu em antgeno viral (N)
deve ser maior ou igual a 2,0. Este o P/N do controle positivo.
A validade do teste deve ser determinada para cada placa. Resultados para as amostras
clnicas s podem ser determinados se o teste for vlido. Se o teste no for vlido, a leitura
da placa deve ser repetida. Se o teste ainda falhar aps uma repetio, ento um ou mais
dos parmetros ou reagentes provavelmente causou um erro, e a uma soluo para o
problema deve ser buscada.
79
Para determinar se os espcimes clnicos (S1-S8) contm IgG ao antgeno viral (que
indicam infeco recente com o vrus) o seguinte deve ser calculado:
A DO mdia da amostra do teste que reagem com antgeno viral (P)
A DO mdia do soro de controle negativo que reagiu em antgeno viral (N)
Este o P/N da amostra teste. Para um modelo ser considerado IgG positivo para o vrus
de teste, o P/N deve ser igual ou superior a 2,0.
Alm disso, o valor de P para o corpo de prova deve ser maior ou igual ao dobro da
mdia da DO da amostra do teste que reagiu com o antgeno normal. Se este requisito
no for cumprido, um conhecimento no especfico est sendo gerado e o resultado deve
ser relatado como no interpretvel.
Interpretao
Todos os pacientes com valores P/N iguais ou superiores a 2,0 devem ser relatados como
possveis IgG positivos (ver o pargrafo explicativo na pgina seguinte), contanto que
preencham os requisitos listados acima. Interpretaes de IgG-ELISA devem ser feitas
no contexto do respectivo MAC-ELISA, e a data da coleta em relao ao incio dos
sintomas. Um resultado positivo no teste IgG-ELISA por si s no consegue distinguir
uma infeco recente de uma passada, devido persistncia de IgG de infeces passadas.
IgG tambm mais passvel de reao cruzada do que anticorpos IgM, o que significa que
um resultado positivo pelo ELISA-IgG pode de fato indicar a presena de anticorpos
para o vrus relacionado. Na maioria dos casos, IgG detectvel 12 dias aps o incio
dos sintomas de uma infeco por vrus do grupo em estudo, e pode persistir por longos
perodos de tempo, possivelmente por anos.
Alguns exemplos de situaes comuns esto listados a seguir:
1. Um resultado positivo do IgG-ELISA com um resultado positivo do MAC-ELISA
poderia indicar a presena de uma infeco recente.
2. Um resultado negativo do IgG-ELISA com um resultado positivo do MAC-ELISA em
um espcime de fase aguda indicaria uma infeco recente em que os anticorpos IgG
ainda no subiram para nveis detectveis.
80
3. Um resultado positivo do IgG-ELISA e um resultado negativo do MAC-ELISA a partir

de um espcime cronometrado entre aproximadamente 8 e 45 dias, aps o incio dos
sintomas, sugerem a ocorrncia de uma infeco passada (IgG tem uma reatividade
muitas vezes maior com outros vrus do mesmo gnero).
4. Para um nico espcime tardio (obtido mais de 45 dias aps o incio dos sintomas),
tendo um resultado positivo do IgG-ELISA e um resultado negativo do MAC-ELISA, a
distino entre infeco atual e infeces passadas no pode ser feita.
5. Um resultado negativo do IgG-ELISA com um resultado negativo do MAC-ELISA
negativo indica a ausncia de infeco recente ou passada com o vrus de teste.
O valor de corte de 2,0 emprico, baseado na experincia e na conveno. Os valores
de P/N que se encontram entre 2,0 e 3,0 podem ser considerados suspeitos de falso-positivos. Outros testes devem ser realizados para determinar o estudo desses espcimes.
Ressalte-se que o valor de P/N para uma amostra na diluio de 1:400 de triagem no
uma indicao da concentrao de anticorpos absoluta, ou seja, o valor de P/N no
quantitativo.
Recomenda-se ainda que, para soros, todos os resultados positivos devem ser confirmados
por titulao com 6, duas vezes diluies das amostras de soro, em comparao a uma
titulao similar do soro controle negativo. As curvas indicam soropositividade linear
verdadeira. Curva de titulao plana e ondulante indicam resultados falso-positivos.
81
Apndice D Exemplo de um formulrio de notificao de casos
Dados bsicos
Sobrenome: ______________________________ Nome: ________________________
Sexo: ( ) masculino ( ) feminino
Data de nascimento: _____/____/____ idade: |__|__| anos |__|__|meses
|__|__|dias
Ocupao:__________________________________________________________________
Endereo: ____________________________________________________________________
CEP: |__|__|__|__|__|__|__||__|
Nmero de telefone: |__|__|__|__|__|__|__||__||__|
Informao clnica
Nmero do histrico clnico: ________________________
Data do incio dos sintomas: ____/_____/____/
Semana epidemiolgica: |__|__|
Nmero de dias com sintomas: ____/_____/ Data da primeira consulta mdica: ____/_____/____
Data da hospitalizao: ____/_____/____
bito: Sim ( )
No ( ) Data: ____/_____/____
Sintomas
Sim
Febre
Artrite
No
Se sim, aonde:
Mos
Ps
Calcanhares
Outros
Artralgia
Edema periarticular
Manifestaes cutneas
Mialgia
Dor nas costas
Cefaleia
Nusea
Sangramento de mucosa
Vmitos
Astenia
Meningoencefalite
Sim
No
Se sim, descreva:____________________________
Outros ______________________________________________________________________
Diagnstico clnico: ____________________________________________________________
Informao laboratorial
Amostra de sangue para teste de infeco por CHIKV:
Data da coleta: _____/_____/_____
Sorologia - IgM Sim
Resultado:
Positivo
No
Negativo
Data do resultado _____/_____/_____
Sorologia - IgG Sim

Resultado:
Positivo
No
Negativo
Sim
Positivo
No
Negativo
Isolamento viral Sim

Resultado:
Positivo
No
Negativo
RT-PCR
Resultado:
82
Informao epidemiolgica
No
Histrico de viagem nos 30 dias anteriores ao incio dos sintomas:
Sim
Se sim, aonde: Pas: ________________ Cidade: ______________
Local de residncia:
Comunidade: ________________________________ Localidade: ________________________
Voc recebeu sangue ou produtos do sangue nos 30 dias anteriores ao incio dos sintomas?
Sim
No
Classificao final:
Descartado: |__|
Confirmado: |__|
Suspeito: |__|
Data da notificao: _____/_____/_____
Nome do provedor da notificao: __________________________
83
Apndice E Relatrio de evento/surto de importncia para

sade pblica
NOTIFICAO_____________ Regio______________
Um caso ou surto de [EVENTO DE SADE] ocorreu na cidade [LOCAL], estado [NOME
municpios e estados] na data [MS e ANO ou intervalo de tempo].
At [Data do Relatrio], [NMERO DE CASOS] de [EVENTO DE SADE] apresentando com
[SINAIS PRINCIPAIS E SINTOMAS] foram vistos no [INSTITUO OU SETOR OU OUTRA
COMUNIDADE]. Estes casos esto ocorrendo em reas com uma populao aproximada de
[NMERO DE HABITANTES da populao exposta].
Os casos ocorreram entre [DATA DE INCIO, SEMANA EPIDEMIOLGICA] e [DATA FINAL
ou HOJE]. A rea afetada principalmente [urbana ou rural] e apresentou previamente surtos
ocasionais de [SURTOS PRVIOS].
As caractersticas mais marcantes destes casos so [CARACTERSTICA PESSOA: SEXO, IDADE,
OU OUTRAS DEFINIR CARACTERSTICAS de pessoas afetadas].
De todos os casos, [# BITOS] faleceram e [# HOSPITALIZADOS] necessitaram de hospitalizao.
Casos de bito ou que necessitaram de hospitalizao tiveram [TIPO: BITO, ALTO SEM
COMPLICAES, RESULTADO ETC.].
[# amostras] amostras de [TIPO DE ESPCIME] foram coletadas e enviadas ao [LABORATRIO]
para processamento onde exames esto sendo processados ou confirmaram [Agente Etiolgico].
Pesquisa epidemiolgica indica que o surto foi produzido por [PROVVEL MECANISMO,
FONTE, fator de exposio].
As aes de controle que foram tomadas so as seguintes: [AO]
NOTA: A notificao imediata deve incluir tudo o que for possvel para completar o conhecimento
do surto. Uma vez investigado, o formato completo enviado de volta ao escritrio regional da
Organizao Mundial da Sade.
84
Apndice F Procedimentos de controle de vetores

H uma srie de procedimentos de controle de vetores que devem ser considerados para
diminuir o risco de transmisso autctone e de expanso do CHIKV em uma rea.
Controle qumico de criadouros

Se os recipientes de gua potvel no podem ser cobertos de maneira adequada, devem
ser limpos regularmente ou tratados para interromper a produo de larvas de acordo
com as prticas recomendadas pelo Programa Nacional de Controle da Dengue (PNCD)
para gua potvel. Criadouros potenciais que no contm gua destinada ao consumo
humano devem ser eliminados. Caso haja impedimento para a sua eliminao, devem ser
tratados com os larvicidas recomendados pelo PNCD.
Aplicao espacial para o controle do mosquito adulto

A aplicao espacial para controle de Ae. aegypti e Ae. albopictus mais eficaz quando
o interior de casas e quintais associados so tratados com equipamentos portteis.
Aplicaes repetidas so necessrias para matar os adultos recm-emergidos dos
criadouros e, principalmente, as fmeas infectadas, no caso do Aedes aegypti. Em
relao ao Aedes albopictus, a aplicao espacial ser mais eficiente nos domiclios e nos
peridomiclios dos casos suspeitos ou confirmados, j que o vrus atinge as glndulas
salivares do mosquito dois dias aps a ingesto de sangue infectado.
Em resposta epidemia, a aplicao espacial deve utilizar equipamentos portteis, sempre
que possvel, ou com equipamentos acoplados a veculos para aumentar a velocidade
de cobertura, a cada 2-3 dias. Especial ateno deve ser dada ao monitoramento da
resistncia a inseticidas, a calibrao dos equipamentos, tamanho de gotas e pocas de
aplicao so crticos para o uso efetivo destas ferramentas. A aplicao de pesticidas
em grande escala e com equipamentos acoplados a veculos geralmente no so eficazes
no controle do Ae. aegypti, quando utilizados isoladamente. Aplicao espacial em larga
escala deve ser usada como um componente de um programa de MIV para ser eficaz.
85
Monitoramento da resistncia a inseticidas

O uso frequente do mesmo inseticida ou da mesma classe de inseticida pode selecionar
indivduos que so capazes de sobreviver s aplicaes de pesticidas. A resistncia uma
alterao hereditria na sensibilidade de uma populao de um inseticida que pode levar
ineficcia do pesticida para produzir o esperado grau de controle.
O nmero de inseticidas disponveis para uso como adulticidas limitado e se divide
em trs classes qumicas: organofosforados, carbamatos e piretroides. Alguns produtos
larvicidas tm diferentes modos de aes, tais como reguladores de crescimento de
insetos e ferramentas microbianas. No entanto, o produto mais comumente usado para
controlar larvas de Ae. aegypti em recipientes o organofosforado temephos. Resistncia
ao temephos tem sido detectada em mltiplas populaes de Ae. aegypti nas Amricas e
constitui uma sria ameaa ao seu controle. H poucas informaes disponveis sobre a
resistncia de populaes de Ae. albopictus na regio, entretanto, de acordo com estudos
realizados na Argentina, o Ae. albopictus mostrou-se mais tolerante do que o Ae. aegypti
a inseticidas neurotxicos (Gmez, A et al; 2011).
Os programas de controle devem incluir um programa de monitoramento da resistncia
(referncias adicionais esto disponveis em <http://www.who.int/whopes/resistance/
en/>) para avaliar a eficcia e estabelecer um plano de rotao de pesticidas para atenuar
o desenvolvimento de resistncia.
Superviso de segurana e garantia da qualidade

O monitoramento contnuo e a superviso so necessrios para assegurar que os
funcionrios estejam devidamente treinados e seguindo corretamente as orientaes
tcnicas de aplicao de pesticidas e de segurana pessoal. Os programas MIV devem
incluir um programa de garantia de qualidade concebido para monitorar a eficcia
das atividades de controle. Um programa de garantia de qualidade deve monitorar o
desempenho do aplicador e os resultados de controle. Falhas de controle podem ser
devidas ao mau uso, cobertura incompleta ou de resistncia a inseticidas, e devem ser
corrigidas imediatamente. Os esforos de garantia de qualidade devem ser contnuos,
sistemticos e independentes.
86
Apndice G Controle de vetores de conteno do CHIKV

Esforos de conteno do vrus devem ser iniciados aps a descoberta de um caso ou surto de CHIKV (introduzido ou de transmisso autctone), em simultneo com a ativao
da capacidade de resposta de emergncia local. O objetivo do confinamento eliminar
CHIKV recentemente introduzido e evitar a sua propagao por intermdio de medidas
intensas de controle vetorial. Este conceito tem sido aplicado para conter a invaso e a
disseminao de vrus dengue em reas no endmicas. Mesmo que o CHIKV se espalhe
para uma rea urbana do Pas, a conteno deve ser considerada uma estratgia fundamental para evitar a sua disseminao em outras partes do Pas e em pases vizinhos.
A aplicao de medidas de controle do vetor deve comear nas residncias dos casos
de CHIKV detectados (ou no local suspeito de infeco) e deve ser aplicada em todo o
bairro. Atrasos na deteco e na notificao dos casos podem concorrer para que CHIKV
se espalhe para outras partes do bairro. Deve-se solicitar a participao das autoridades
locais para ter acesso a imveis fechados ou abandonados. Toda a operao de conteno
de emergncia deve ser realizada rapidamente, para tanto os recursos dedicados a este
esforo, tanto humanos quanto outros devem ser compatveis com o tamanho da rea de
conteno. Pessoal de controle da malria e outros com formao adequada podem ser
utilizados para atingir os objetivos do esforo de conteno.
As seguintes aes so recomendadas para conter uma introduo de CHIKV:
Alm de participar de um esforo nacional de comunicao, informar a comunidade
(moradores, escolas, igrejas, empresas etc.) imediatamente acerca da introduo do
CHIKV. Os tpicos devem incluir o modo de disseminao, sintomas principais,
aconselhar a consultar um mdico se os sintomas aparecerem e envolvimento da
comunidade para eliminar a gua parada de recipientes e para permitir acesso dos
agentes de sade nos domiclios para aplicao de medidas antivetoriais. Preparar a
comunidade para que as operaes de conteno do CHIKV possam ser conduzidas
de forma mais eficiente e rpida em imveis residenciais e comerciais, bem como
espaos pblicos e parques.
Conduzir aplicaes de inseticidas nos interiores dos imveis e no exterior para
eliminar os mosquitos adultos.
Simultaneamente, conduzir a eliminao/proteo de recipientes e aplicao de
larvicidas para eliminar a produo de novos mosquitos. Especial ateno deve ser
87
dada aos criadouros crticos ou subterrneos que podem produzir mosquitos Aedes,
como calhas, ralos, poos, reservatrios de gua elevados, medidores de gua, fossas
spticas e at mesmo87 recipientes de armazenamento de gua potvel e bebedouros
de animais, que devem ser limpos (lavagem e enxgue) e protegidos com tampas
hermeticamente fechadas. Alguns recipientes, tais como instrumentos teis (bandejas
de tinta, baldes) e as garrafas devem ser guardados de cabea para baixo sob uma rea
coberta. Os objetos grandes que acumulam gua da chuva (barcos, carros) devem ser
devidamente cobertos. Os recipientes que no podem ser manejados por qualquer
motivo devem ser tratados com um larvicida. Por exemplo, recipientes de gua para
consumo animal ou humano requerem a aplicao de larvicidas que foram licenciados
no pas para esse fim especfico. Alm desses, deve-se ateno aos criadouros naturais,
preferenciais do Ae. albopictus, como bambus, buracos em rvores, cascas de frutas e,
especialmente, criadouros artificiais esquecidos em quintais, margem de florestas ou
plantaes. Todos os pesticidas devem ser sempre utilizados seguindo as especificaes
de seus rtulos.

Em alternativa ou concomitantemente com a eliminao de criadouros, inseticidas

residuais podem ser aplicados em pontos estratgicos como, por exemplo, borracharias,
ferros-velhos e nas proximidades de superfcies exteriores para matar os mosquitos
adultos pousados ou em repouso. Este tipo de aplicao do inseticida feita com
pulverizadores de compresso manual. Um especial cuidado tem que ser tomado para
evitar a pulverizao perto de recipientes de armazenamento de gua desprotegidos
ou animais domsticos.
Monitorar casas e prdios nos bairros que esto sendo tratados e utilizar equipes de
controle especiais, depois do trabalho, fins de semana e feriados para garantir que
quase 100% dos lares e das empresas sejam tratados.
Interveno em um surto
Para controlar uma epidemia de CHIKV ou uma srie de surtos em uma escala geogrfica
maior necessrio:
Ativar um centro de comando (Centro de Operaes de Emergncia) seja fsico
ou virtual, onde os epidemiologistas, entomologistas e especialistas em controle de
vetores, educadores, comunicadores de mdia etc., podem conjuntamente planejar,
trabalhar e avaliar o progresso ao longo da epidemia. Os servios epidemiolgicos
precisam ser organizados de forma que, diariamente, relatrios detalhados sejam
88
enviados para todo o pessoal autorizado nas reas afetadas (estados, municpios).
Para serem bem-sucedidos ser necessrio estabelecer um sistema eficiente de
comunicao, permitindo relatrios de feedback e o reconhecimento de recepo
(e-mail, fax, telefones etc.)
Orientar a populao em geral por meio da mdia sobre a possibilidade de infeco
com CHIKV e sobre como as famlias e as comunidades podem contribuir para a
reduo da epidemia. Material educativo sobre aes especficas para prevenir ou
controlar a transmisso CHIKV dever ser elaborado e distribudo por vrios meios
de comunicao (TV, rdio, jornais, organizaes locais, escolas, clnicas etc.). Seria
importante um relatrio dirio (imprensa) sobre quais comunidades ou bairros esto
sendo afetados pelo CHIKV, para que os moradores e as autoridades locais estejam
conscientes do risco iminente de infeco e possam tomar as medidas adequadas
(por exemplo, uso adequado de repelentes, a eliminao de todas as guas paradas,
a organizao de campanhas de limpeza etc.). A divulgao destas informaes tem
de ser feita de forma que nenhuma informao inadequada seja liberada ao pblico a
qualquer momento.
Assegurar que as pessoas infectadas e febris sejam protegidas de picadas de mosquito.
Orientao das operaes de controle de vetor em tempo real, avaliaes
epidemiolgica e entomolgica da transmisso do CHIKV, indicando as reas
especficas que precisam ser tratadas.
Aplicao de medidas eficazes de controlo do vetor. Uma epidemia geralmente uma
srie de pequenos surtos que ocorrem simultaneamente em vrios lugares diferentes
dentro de um pas (bairros, cidades, municpios, estados), onde o nmero de casos
da doena excepcionalmente grande. Isso significa que as medidas de controle da
epidemia podem precisar ser aplicadas simultaneamente em vrios locais. Ampla rea
de controle de populaes de mosquitos em perodos curtos de tempo, a aplicao
espacial de inseticidas por equipamentos acoplados a veculos no se mostrou eficaz
na reduo da transmisso da dengue quando usada isoladamente. Aplicao de
pesticidas ao ar livre em larga escala pode fornecer um benefcio quando usado com
outras medidas de controle como parte de um programa integrado de controle do
mosquito. Portanto, medidas eficazes de controle do vetor a ser aplicadas durante uma
epidemia so semelhantes aos recomendados para rea ampla de conteno CHIKV
(acima) e surtos de vrus DEN. A principal diferena que elas devem ser aplicadas
simultaneamente em muitas reas para diminuir focos individuais.
89
Georreferenciar cada caso do CHIKV para orientar as reas de controle operacional.

No caso de reas endmicas, realizar o estudo epidemiolgico retrospectivo, neste
nvel, de modo que a estratificao sirva a fins operacionais. Uso do Sistema de
Informao Geogrfica (SIG) para as unidades do mapa operacional, fazer e
distribuir mapas de incidncia da doena e monitorar espacialmente a epidemia.
Dividir a rea-alvo (por exemplo, municpio, estado) em reas relativamente
uniformes (reas de controle operacional) que vo ser tratadas utilizando uma
abordagem de rea ampla (bairros com 2.000-5.000 pessoas; setores censitrios,
CEP etc.) Todas as lojas, empresas e outras reas (parques, cemitrios, terrenos
abandonados, reas ao longo de crregos, aterros ilegais etc.) sero tratadas
simultaneamente dentro de poucos dias. Essa diviso operacional do espao deve
ser realizada com antecedncia a uma eventual introduo de CHIKV.
Medidas de controle do vetor em rea ampla implicam ter nmero suficiente
de pessoal treinado, equipamentos e suprimentos para tratar o ambiente onde
os mosquitos Aedes esto sendo produzidos. Reduzindo significativamente o
mosquito adulto (usando adulticidas) e a produo de novos mosquitos adultos
(reduo na fonte e na eliminao, larvicidas) em uma rea particular, o ciclo de
transmisso pode ser interrompido e CHIKV levado extino. Esse cenrio s
possvel se o nmero de mosquitos picando for drasticamente reduzido durante
o perodo de tempo que leva para o homem e os vetores se tornarem livres do
CHIKV. Por essa razo, as medidas de controle de vetores necessitam alcanar
uma eficincia muito elevada, medida por meio da eliminao de uma proporo
muito grande de mosquitos vetores.
Limitaes do controle de vetores

A reduo da populao de vetores e aquela associada ao contato com humanos devem
ser correlacionados com a transmisso do vrus e a reduo da doena. No entanto, a fim
de interromper um surto, a reduo da populao do vetor deve ser imediata, substancial
e sustentada. Os mosquitos adultos continuaro a surgir e substituir os mosquitos
adultos mortos por adulticidas. Portanto, essencial manter programas de MIV com
uma cobertura completa e tratamentos repetidos. Alm da presena de profissionais de
controle de mosquitos e um programa de MIV ativo, importante manter o apoio e a
cooperao de todos os membros da sociedade.
90
Autoridades de
sade pblica
e servios de
emergncia
Preparar informativos sobre o risco de

introduo do CHIKV para as autoridades em
coordenao com especialistas no assunto.
Autoridades
governamentais
91
Estabelecer Centro de
Informao Conjunto no Centro
de Operaes de Emergncia.
Estabelecer reunies peridicas
de agentes de informao
pblica (AIP) e agentes de
comunicao estratgica para
todos os rgos envolvidos,
e cronograma de reunies
regulares com outros elementoschave da resposta operacional.
Realizar exerccios para permitir que aqueles

que respondem comunicao conheam a
estrutura de resposta a emergncias e suas
funes.
Ativao do plano de
comunicao.
Fase de resposta
Estabelecer protocolo para gerenciamento

de incidentes / abordagem de operaes de
emergncia, se no estabelecido.
Coordenar com a mdia e outros investidores

sociais.
Desenvolver um plano de comunicao de

riscos e crises.
Treinar porta-vozes sobre este assunto.
Fase de preparao
Pblico-alvo
Apndice H Modelo de risco e plano de comunicao em caso de surto
continua
Conduzir avaliao das

"lies aprendidas" na
resposta de comunicaes
e uso da estrutura de
resposta a emergncias.
Avaliao e adaptao do
plano de comunicao.
Fase de recuperao
Hospitais
92
Desenvolver um guia de bolso ou manual

abordando o tipo de informao que deve ser
compartilhada com os pacientes do CHIKV, as
famlias dos pacientes e o pessoal hospitalar
e pessoal associado ao hospital (o pessoal de
emergncia mdica).
Desenvolver e fornecer informaes para

o planejamento da resposta, gesto dos
pacientes.
Estabelecer infraestrutura para a hotline de

suporte clnico.
Usar informaes reunidas

para facilitar as comunicaes
a outros setores da populao
em geral, sobre o status das
operaes mdicas e cuidados
hospitalares nos locais de apoio.
Recolher informao para

as lies aprendidas.
Recolher informao dos hospitais

para apoio na informao e no
aconselhamento de pacientes do
CHIKV, das famlias dos pacientes
e do pessoal hospitalar e associado (emergncia mdica, Cruz Vermelha, paramdicos, bombeiros,
segurana pblica etc.).
continua
Fornecer relatrio final

comunidade hospitalar.
Avaliar o plano de
comunicaes.
Fornecer relatrio de
resposta final.
Avaliar a comunicao com

a comunidade clnica, reunir
as "lies aprendidas".
Fornecer informaes sobre

as sequelas.
Continuar a apoiar o hotline

de suporte clnico.
Continuar a fornecer
atualizaes.
Fase de recuperao
Implementar planos de
emergncia com os hospitais.
Ativar e formar funcionrios para

uma linha especial (hotline) de
informao para suporte clnico.
Atualizar o fluxo de informao,

conforme necessrio.
Fornecer informao atualizada

e facilmente acessvel sobre
a epidemiologia do surto, os
fatores de risco, definio de
casos, diagnsticos etc.
Participar de conferncias abordando fatores de

risco, definio de caso, diagnstico e fatores
de risco.
Desenvolver guia de resposta PF sobre as

diferenas entre CHIKV e dengue.
Implementar um plano(s) de
resposta.
Desenvolver e fornecer informaes por meio

de sites, brochuras, folhetos, guias de bolso.
Pessoal mdico
Fase de resposta
Fase de preparao
Pblico-alvo
continuao
Laboratrios
pblicos e
privados
Colaborar com as associaes para educar

os membros por meio de palestras, boletins
informativos, sites de redes sociais e
abordando fatores de risco, definio de caso e
diagnstico, tratamento e sequelas.
Associaes de
profissionais
de sade e das
cincias mdicas
Desenvolver e fornecer informaes sobre a

gesto de amostras, exames, procedimentos e
materiais tanto em formatos eletrnicos como
impressos, por meio de videoconferncias,
workshops etc.
Trabalhar com as associaes para transmitir

mensagens de preveno para a populao em
geral.
Fornecer as associaes folhas de PF.
Fase de preparao
Pblico-alvo
continuao
Ativar os canais de informao

reunindo informao de apoio
dos ciclos de deciso a nvel
operacional, para incluir os
servios de sade.
Intensificar a comunicao com

as cincias mdicas e associaes
de profissionais de sade no
que diz respeito aos servios
de sade, e buscar padres e
tendncias da doena.
Fase de resposta
93
continua
Reunir as lies aprendidas.
Continuar a recolher
informaes nos
laboratrios.
Avaliar as comunicaes
com o sistema de
laboratrio
Avaliar a atualidade das

informaes prestadas
s associaes, bem
como a oportunidade
da transferncia das
informaes para os
membros da associao.
Fase de recuperao
O pessoal do Ministrio da Sade, os

epidemiologistas e os comunicadores
trabalham em conjunto para desenvolver e
fornecer informaes a serem utilizadas pelos
parceiros da sade pblica e os meios de
comunicao, para abordar os mtodos de
vigilncia, anlise de dados e desenvolvimento
de mensagens para a populao em geral.
Vetores pessoal de controle e comunicadores

trabalham juntos para desenvolver e fornecer
informaes sobre possveis vetores CHIKV
e manejo integrado de vetores tanto em
formatos eletrnicos e impressos como
por meio de videoconferncias, workshops
etc., para o pessoal do vetor de controle e
populao em geral.
Vetor de
controle pessoal
Pessoal dos
departamentos
de sade local
e regional,
epidemiologistas
Fase de preparao
Pblico-alvo
continuao
Ativar os canais de informao

reunindo informao de apoio
dos ciclos de deciso a nvel
operacional, para incluir os
servios de sade
Fornecer informaes
atualizadas aos profissionais de
sade em matria de proteo e
preveno
Reunir informaes sobre a

eficcia das atividades em curso
de vetores integrado de gesto,
se necessrio
Ativar o plano de comunicao

com os profissionais de sade e
outros atores
Fase de resposta
94
Reunir as "lies
aprendidas".
continua
Avaliar as comunicaes
com os servios de sade e
os epidemiologistas.
Recolher informao sobre

as melhores prticas de
gesto de vetores.
Avaliar as aes de
comunicao para controle
de vetores e recolher "lies
aprendidas".
Fase de recuperao
Associaes,
empresas e
organizaes
de viagens
Fornecer informaes aos gestores do banco de

sangue sobre os riscos associados com o CHIKV.
Bancos
de sangue
Sensibilizao de viajantes para regies de

risco do CHIKV, descrevendo os sintomas e a
preveno da doena, usando sites oficiais e de
negcios e fichas de fatos, bem como outros
meios (CCTV, quadros de mensagens e anncios
de servio pblico).
Desenvolver fichas de doadores e potenciais

doadores para a distribuio nos bancos
de sangue.
Desenvolver diretrizes e procedimentos de

triagem de doadores.
Desenvolver e fornecer informaes relativas

gesto de sangue e os riscos do produto, bem
como preparao para a escassez de doadores.
Fase de preparao
Pblico-alvo
continuao
95
Fornecer atualizaes sobre o
status da doena e das aes
preventivas e de proteo.
Solicitar aos agentes de viagens

e operadores da indstria
turstica a intensificao das
atividades de comunicao,
includos no plano de
informao viajantes.
Coordenar com a
implementao de diretrizes e
procedimentos de triagem de
doadores em reas impactadas
pelo surgimento do CHIKV.
Estabelecer comunicao ativa

com os bancos de sangue
para vencer a escassez de
suprimentos e doadores dentro
de reas restritas para informar
a populao em geral, bem
como os meios de comunicao.
Fase de resposta
continua
Reunir as "lies aprendidas".
Avaliar a prontido de
resposta da indstria
de viagens.
Avaliar a eficcia das

recomendaes que os
bancos de sangue fornecem
aos doadores para apoiar o
levantamento de restries
para doaes dentro da
rea antes restrita.
Fase de recuperao
Autoridades
civis,
funcionrios
do governo
Desenvolver Alertas Sade aos viajantes, avisos

pr-evento para utilizao pelas autoridades
porturias, aduaneiras e pelas agncias de
segurana no transporte.
Autoridades
(portos) e
indstria de
transporte
martimo,
terrestre e areo
96
Designar e treinar porta-vozes, proporcionando

informaes especficas para a funo e
adequadas para o nvel de responsabilidade.
Manter os canais abertos com os nveis local,

regional e nacional do governo.
Envolver-se em advogar para obter o apoio

necessrio para preparao e resposta eficaz.
Proporcionar indstria e s autoridades

informaes sobre os requisitos do RSI.
Fase de preparao
Pblico-alvo
continuao
Incluir representantes adequadas

JIC.
Implementar o plano de
comunicaes com as
autoridades do governo e
atualizao das informaes aos
porta-vozes.
Fornecer atualizaes sobre o

status da doena e das aes
preventivas e de proteo.
Solicitar aos representantes

dos portos e das indstrias
terrestres, martimas e areas
a intensificao das suas
atividades de comunicao,
conforme apropriado para a
resposta.
Fase de resposta
continua
Avaliar a eficcia das

comunicaes das
atividades de preparao
e resposta realizadas com
autoridades e funcionrios.
Reunir as "lies
aprendidas".
Avaliar a prontido de
resposta da indstria de
viagens.
Fase de recuperao
Realizar avaliao inicial dos conhecimentos,

atitudes e comportamentos, com especial
ateno s questes potencialmente sensveis,
tais como o uso de pesticidas.
Populao
em geral
97
Considerar o uso da comunicao interpessoal

por meio de reunies de grupos, de escolas
e otimizao da utilizao dos meios de
comunicao tradicionais/populares.
Desenvolver materiais de educao em sade,

tais como as pginas de internet, cartazes,
panfletos, folhetos, outdoors, mensagens de
texto SMS e meios de comunicao social, e
criao de redes sociais on-line.
Planejar o uso de linhas especiais e apoio a

linhas especiais locais, quando apropriado.
Usar mltiplos canais para informar o pblico,

em geral, do potencial de risco do CHIKV e
quais os meios de preveno e proteo.
Desenvolver mensagens de resposta s

necessidades identificadas.
Fase de preparao
Pblico-alvo
continuao
Abrir linhas especiais (hotlines)

e apoiar linhas locais, quando
apropriado.
Desenvolver mensagens
especficas para o local e
atualizar, conforme apropriado.
Aumentar os esforos para

angariar apoio do uso de
inseticida e outras medidas de
controle, conforme necessrio.
Monitorar canais de
comunicao. Avaliar a entrega
das mensagens.
Campanhas especiais podero

ser levadas a cabo por via
dos meios de comunicao,
incluindo jornais/revistas,
rdio e televiso, bem como
a publicidade exterior, como
outdoors.
Divulgar e/ou intensificar

a informao dentro
dos diversos canais de
comunicao, incluindo meios
de comunicao, eletrnico,
canais no convencionais
e interpessoais, (pblicos e
privados).
Fase de resposta
continua
Reunir as "lies aprendidas"

e incluir no relatrio final.
Continuar a oferecer
atualizaes.
Avaliar a eficcia do plano

de comunicao.
Fase de recuperao
Desenvolver e manter relaes com a mdia que

vai apoiar as atividades de comunicao.
Mdia
Preparar porta-vozes. Porta-vozes devem ser

tecnicamente e politicamente credveis, e
dispostos a interagir com a imprensa em curto
prazo.
Proporcionar formao, participando de

entrevistas, e desenvolver Anncios de Servio
Pblico para aconselhar e preparar parceiros de
mdia para a potencial atividade do CHIKV.
Fase de preparao
Pblico-alvo
continuao
Monitorar a cobertura da
imprensa. Realizar anlise
dos relatrios de pertinncia
e relevncia, e ajuste de
mensagens e estratgias em
conformidade.
Divulgar os relatrios peridicos

da JIC sobre o estado do surto
para fornecer uma mensagem
consistente.
Estabelecer um canal
permanente de informaes
com os meios de comunicao
regulares, incluindo palestras e
entrevistas.
Fase de resposta
Reunir as "lies
aprendidas".
continua
Avaliar a implementao do
plano de comunicao para
introduzir os ajustamentos
necessrios para o plano.
Continuar a fornecer
atualizaes para os meios
de comunicao, incluindo
mensagens adequadas, pois
o risco de transmisso
reduzido.
Fase de recuperao
98
99
Colaborar com essas organizaes de apoio

para organizar, sensibilizar e educar as suas
comunidades.
Organizaes
No
Governamentais
(ONGs), grupos
humanitrios, as
organizaes de
sade baseados
na comunidade
e outras
organizaes da
sociedade civil
Procurar ter aulas sobre os riscos do CHIKV e

resposta no currculo escolar para promover e
ampliar a conscincia, pois os alunos se tornam
multiplicadores das comunicaes.
Colaborar com o sistema de ensino para

desenvolver aulas, materiais didticos e
contedos que vo sensibilizar para o CHIKV,
bem como de saneamento e outras medidas
preventivas.
Desenvolver e fornecer informaes para uso

em redes de meios de comunicao religiosas,
durante os servios, e entre os grupos de apoio.
Comunidades
baseadas na f
Sistema
educativo
Fase de preparao
Pblico-alvo
continuao
Colaborar com a liderana

dessas organizaes para
proteo adicional e esforos de
preveno e gesto de vetores.
Fase de resposta
continua
Avaliar o envolvimento
dessas organizaes no
plano de comunicaes
para a preparao e
resposta ao CHIKV.
Fase de recuperao
ISBN 978-85-334-2157-8
MINISTRIO DA SADE
9 788533 421578
Biblioteca Virtual em Sade

do Ministrio da Sade
www.saude.gov.br/bvs

Braslia / DF 2014
Colaborar com o setor privado na elaborao

de seus planos para organizar, sensibilizar e
educar as suas organizaes, empregados e
clientes.
Setor privado:
negcios
Buscar a participao do setor privado no

esforo do governo para comunicao de
atividades de preveno e preparao.
Fase de preparao
Pblico-alvo
continuao
Fornecer atualizaes para o

setor privado com respeito
resposta.
Colaborar com o setor privado

para intensificar as suas
atividades de comunicao e
dar continuidade as iniciativas
de comunicao do governo
dirigidas aos esforos de
proteo e preveno e gesto
de vetores.
Fase de resposta
Avaliar o envolvimento
do setor privado no plano
de comunicao para a
preparao e a resposta
ao CHIKV.
Fase de recuperao
100

Preparacao Resposta Virus Chikungunya Brasil

Enviado por

Dados do documento

Direitos autorais

Formatos disponíveis

Compartilhar este documento

Compartilhar ou incorporar documento

Opções de compartilhamento

Você considera este documento útil?

Este conteúdo é inapropriado?

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Preparacao Resposta Virus Chikungunya Brasil

Enviado por

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

ISBN 978-85-334-2157-8

Preparao e Resposta Introduo do Vrus Chikungunya no Brasil

Biblioteca Virtual em Sade

Preparao e Resposta Introduo

Preparao e Resposta Introduo

Preparao e Resposta Introduo

2014 Ministrio da Sade.

Esta obra disponibilizada nos termos da Licena Creative Commons Atribuio

Pedro Fernando da Costa Vasconcelos

Impresso no Brasil / Printed in Brazil

1.1 Surtos recentes

2.1 Apresentao clnica da doena

3.1 Tipos de exames laboratoriais disponveis e amostras exigidas

MANEJO DOS CASOS

VIGILNCIA E RESPOSTA AO SURTO

5.1 Modos de vigilncia

VIGILNCIA E CONTROLE DO VETOR

6.1 Reduzir o risco de CHIKV

Apndice A Protocolo de isolamento viral (para cultura de clula)

Preparao e Resposta Introduo do Vrus Chikungunya no Brasil

O CHIKV um vrus RNA que pertence ao gnero Alphavrus da famlia Togaviridae.

1.1 Surtos recentes

Secretaria de Vigilncia em Sade

Durante os recentes surtos, indivduos virmicos com CHIKV foram encontrados no

1.2 Dinmica de transmisso

Preparao e Resposta Introduo do Vrus Chikungunya no Brasil

Figura 1 Perodos de incubao extrnseca e intrnseca para o vrus Chikungunya

Secretaria de Vigilncia em Sade

Secretaria de Vigilncia em Sade

2.1 Apresentao clnica da doena

Dor nas costas

Secretaria de Vigilncia em Sade

Doena subaguda e crnica

Preparao e Resposta Introduo do Vrus Chikungunya no Brasil

Secretaria de Vigilncia em Sade

2.2 Manifestaes atpicas

Meningoencefalite, encefalopatia, convulses, sndrome

Neurite ptica, iridociclite, episclerite, retinite, uvete.

Miocardite, pericardite, insuficincia cardaca, arritmias,

Hiperpigmentao fotossensvel, lcera aftosa

Nefrite, insuficincia renal aguda.

Discrasias hemorrgicas, pneumonia, insuficincia

Fonte: Adaptado por Rajapakse et al.

Certas manifestaes atpicas so mais comuns em certos grupos. Por exemplo,

Preparao e Resposta Introduo do Vrus Chikungunya no Brasil

2.3 Grupos de risco

Secretaria de Vigilncia em Sade

2.4 Diagnstico diferencial

Periodicidade da febre e alterao de

Febre e dois ou mais dos seguintes:

Mialgia severa localizada na panturrilha

Infeces alphavirais (vrus Mayaro, vrus

Apresentao clnica semelhante ao

Artrite ps-infecciosa (inclusive febre

Artrite de uma ou mais, tipicamente

Artrite reumatoide juvenil

Febre de incio sbito e envolvimento

Preparao e Resposta Introduo do Vrus Chikungunya no Brasil

Sobreposio e confuso com a dengue

Infeco pelo vrus

Infeco pelo vrus

Febre (>102F ou 39C)

Fonte: Tabela modificada a partir de Staples; Breiman; Powers, 2009.

Secretaria de Vigilncia em Sade