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Apostila de Analise Instrumental 2012
Apostila de Analise Instrumental 2012
Anlise Instrumental
APRESENTAO
A Qumica Analtica compreende o conjunto de tcnicas e mtodos que visam caracterizar a
natureza e determinar a composio de amostras de diferentes origens, em termos de
elementos, espcies ou agrupamentos de tomos ou molculas.
No restam dvidas de que, medida que o tempo passa, o mercado e os clientes internos ou
externos das empresas tornam-se mais exigentes no que se refere qualidade dos produtos e
prpria anlise qumica.
Hoje, os profissionais da qumica contam com vrios equipamentos, a maioria controlada por
computadores com softwares que fornecem curvas, resultados rpidos e variados das mais
importantes anlises qumicas.
E pensando nesse treinamento bsico que elaboramos esta apostila, onde procuramos
ilustrar os principais temas relacionados Anlise Instrumental, de uma maneira simples,
didtica e objetiva, que serviro de base aos futuros tcnicos qumicos para que, ao
ingressarem no mercado de trabalho e ao terem contato com equipamentos analticos
variados, no se tornem somente seguidores de receitas ou leitores de manual de
aparelhos, mas que sejam profissionais que entendam o que esto operando e analisando, e
que procurem ter iniciativa e criatividade no desempenho do seu trabalho.
Propriedades ondulatrias
As radiaes eletromagnticas tm a componente de um campo eltrico alternado no espao,
sendo essa ortogonal a componente do campo magntico. Entretanto somente a componente
eltrica interage com o meio material e por essa razo somente o campo eltrico
considerado para estudo das radiaes. Desse modo importante considerarmos as seguintes
propriedades de uma radiao.
Freqncia ()
A freqncia definida como o nmero de oscilaes de uma onda por segundo, sua unidade
usual o Hertz (1Hz = 1ciclo/s).
Comprimento de onda ()
a distncia linear entre duas cristas de uma onda (ou quaiquer outros dois pontos
correspondentes; Figura 1), pode ter como unidades o m (micrmetro, 10-6 m), o m
(nanmetro10-9 m) ou o (ngstron,10-10 m), dependendo da regio espectral.
Amplitude (A)
a distncia linear ortogonal direo de propagao, correspondente a distncia do mximo
ao eixo ou do mnimo ao eixo de propagao (Figura 1).
Nmero de onda ()
Corresponde ao nmero de oscilaes por distncia linear (cm-1 ou m-1), corresponde ao
inverso do comprimento de onda e como tal dependente do ndice de refrao do meio.
Velocidade de propagao (c)
A velocidade de propagao de aproximadamente 2,99x108 m/s no vcuo. As relaes entre
essas propriedades das ondas podem ser obtidas pela Equao 1 abaixo:
Interferncias
Tal como outras ondas as Radiaes Eletromagnticas interagem umas com as outras
produzindo uma resultante de foras de intensidade maior ou menor dependendo das fases das
ondas originais. Esse fenmeno chamado de interferncia.
3. FUNDAMENTOS DA ESPECTROFOTOMETRIA
Muitos mtodos analticos quantitativos e qualitativos fazem uso da interao da energia
radiante (radiao eletromagntica = REM = luz) com a matria so chamados mtodos
fotomtricos ou mtodos ticos de anlise.
Os mtodos fotomtricos medem a quantidade de radiao de determinado comprimento de
onda que absorvida ou emitida por uma amostra lquida ou gasosa. No primeiro caso, so
chamados mtodos ticos de absoro de luz, e no segundo caso, mtodos ticos de emisso
de luz.
A teoria quntica, proposta por Marx Planck em 1900, procura explicar as propriedades da
radiao emitida por corpos aquecidos. A teoria foi posteriormente estendida para explicar
outros processos de emisso e absoro de luz, atravs de dois postulados importantes:
1 tomos, ons e molculas podem existir somente em certos estados discretos de energia.
Quando uma espcie altera seu estado, absorve ou emite uma quantidade de energia
exatamente igual diferena de energia entre os estados.
2 quando tomos, ons ou molculas absorvem ou emitem radiao ao efetuar uma
transio de um estado de energia para outro, a radiao de freqncia f ou de comprimento
de onda est relacionada diferena de energia entre dos dois estados pela equao:
As radiaes visvel e ultravioleta tem energia suficiente para provocar transies somente
dos letrons da camada mais externa, ou dos eltrons de ligao. Por outro lado, as
freqncias dos raios X so mais energticas e so capazes de interagir com eltrons mais
prximos dos tomos.
3.1.2.1- Fluorescncia e fosforescncia:
So importantes processos analticos de emisso, nos quais os tomos ou molculas so
excitados por um feixe de radiao eletromagntica; ento, a emisso radiante ocorre quando
as espcies excitadas retomam ao estado fundamental. A fluorescncia ocorre mais
rapidamente que a fosforescncia e geralmente se completa aps 10-5 segundos a partir do
instante da excitao. A emisso fosforescente acontece em perodos superiores a 10 -5
segundos, e pode permanecer ativa por minutos e at horas.
3.1.3- Emisso de radiao eletromagntica:
Quando o eltron perde a excitao ou a energia absorvida, isto , passa de um estado
energtico mais elevado para outro menos elevado, ele emite energia na forma de radiao
eletromagntica.
Quanto maior o salto energtico que o eltron realiza ao deslocar-se de uma rbita mais
externa para outra mais interna, maior a freqncia do fton emitido (e menor seu
comprimento de onda) e maior a energia emitida.
A radiao emitida pelos tomos excitados ao retornarem ao estado fundamental, pode ser
exibida em ESPECTROS DE EMISSO, como se fossem fotografias das transies
eletrnicas dos tomos ou molculas das espcies qumicas.
Temos dois tipos de espectros de emisso:
a) ESPECTROS DE LINHAS OU ATMICO:
composto por uma srie de linhas estreitas paralelas correspondentes a cada comprimento
de onda emitido, geradas pela excitao de tomos individuais do elemento qumico, na fase
gasosa. So emisses de REM na regio do visvel e UV e tanto mais cheio de linhas quanto
maior for o nmero de transies eletrnicas que o tomo pode realizar. Por isso,
caracterstico (especfico) para cada elemento, e serve para identific-lo.
b) ESPECTRO CONTNUO OU MOLECULAR:
composto por uma faixa de comprimentos de onda emitidos, formado por uma banda sem
diferenciao entre uma faixa e outra. So emisses de REM provocadas por um slido
incandescente (filamento de uma lmpada, por exemplo), nas regies do UV, visvel e IF.
3.1.4 Aplicabilidade analtica da absoro/emisso da radiao
a) Mtodos de Absoro - baseados na medida dos comprimentos de onda ou das
intensidades da REM absorvidas pela amostra: na anlise quantitativa, o n0 de ftons
absorvidos funo da concentrao ou n0 de tomos, ons ou molculas das espcies
absorventes; na anlise qualitativa, os comprimentos de onda absorvidos so caractersticos
dos tomos, ons ou molculas que os absorvem.
b) Mtodos de Emisso - baseados na emisso da energia radiante emitida por tomos, ons
ou molculas excitados. Na anlise qualitativa, se baseia na medio dos comprimentos de
onda de radiao e na anlise quantitativa, se mede a intensidade da radiao emitida.
Os mtodos espectromtricos abrangem um grupo de mtodos analticos baseados na
espectroscopia atmica e molecular. Espectroscopia um termo geral para a cincia que
estuda a interao de diferentes tipos de radiao com a matria.
Os mtodos espectromtricos ou fotomtricos mais amplamente utilizados fazem uso da
radiao eletromagntica, que um tipo de energia que toma diferentes formas, sendo a luz
visvel e o calor radiante as mais facilmente reconhecveis. As interaes mais sofisticadas
incluem os raios gama e raios X, bem como a radiao ultravioleta, microondas e
radiofreqncia.
Os diferentes mtodos espectromtricos empregados pelos qumicos para identificao e
determinao dos elementos presentes nas varias formas de matria incluem:
4. COLORIMETRIA E ESPECTROFOTOMETRIA
ULTRAVIOLETA E VISVEL:
4.1. INTRODUO:
DE
ABSORO
NO
Desde que a cor foi reconhecida como uma caracterstica de certos materiais, ela tem sido
utilizada como um meio de identificao. Porm, as anlises qualitativas baseadas na
colorao so limitadas tanto em preciso como em alcance, j que se baseia no olho humano
como detector da energia radiante.
A construo de outros detectores de radiao junto com o avano da instrumentao tem
produzido uma grande extenso das tcnicas neste campo, que cobrem todo o espectro
eletromagntico desde a regio do infravermelho at o ultravioleta.
As tcnicas fotomtricas esto baseadas na capacidade que as substncias tm de interagir
com freqncias de radiao caractersticas. Como cada espcie isolada de on, tomo ou
molcula exibir um conjunto de nveis de energia definidos, absorver somente as
freqncias eletromagnticas que correspondem excitao de um nvel ao outro.
Trataremos dos mtodos analticos baseados na absoro da REM. A luz tem radiaes para
as quais a vista humana sensvel, e as ondas de comprimentos de onda diversos provocam
cores diferentes.
A percepo visual das cores provocada pela absoro seletiva, por um objeto corado, de
certos comprimentos de onda da luz incidente. Os outros comprimentos de onda so refletidos
ou transmitidos, e so percebidos como a cor do objeto. Se um corpo slido opaco tem
aparncia de branco, todos os comprimentos de onda so refletidos; se o corpo parece negro, a
reflexo da luz de qualquer comprimento de onda mnima; se um corpo parece azul, so
refletidos os comprimentos de onda que correspondem cor azul, e assim sucessivamente.
A variao da cor de um sistema com a modificao da concentrao de um certo componente
a base da ANLISE COLORIMTRICA. A cor provocada pela formao de um
composto corado, resultante da adio de um reagente apropriado, ou pode ser intrnseca do
constituinte analisado.
A COLORIMETRIA visa a determinao da concentrao de uma substncia pela medida da
absoro relativa da luz, tomando como referncia a absoro da substncia numa
concentrao conhecida.
Na COLORIMETRIA VISUAL usa-se como fonte a luz branca natural ou artificial. As
determinaes so feitas num instrumento chamado COLORMETRO OU COMPARADOR
DE CORES.
Quando a vista substituda por uma clula fotoeltrica (dispositivo detector de radiao) a
tcnica chamada de COLORIMETRIA FOTOELTRICA e o instrumento o
FOTOCOLORMETRO. Neste instrumento, usa-se a luz que est numa banda estreita de
comprimentos de onda, que se consegue pela passagem da luz atravs de filtros (dispositivo
selecionador de comprimento de onda), que so materiais coloridos na forma de placas de
vidro, gelatina, etc., que s transmitem a luz numa regio espectral limitada.
Na ESPECTROFOTOMETRIA a fonte de radiao emite da regio visvel at a regio UV
(160 a 780 nm) do EEM, o que necessita de um instrumento mais complicado, e por isso,
mais caro o ESPECTROFOTMETRO.
A principal vantagem dos mtodos colorimtricos e espectrofotomtricos a de
proporcionarem um meio simples de determinar quantidades diminutas de substncias.
4.2. ORIGEM DO ESPECTRO DE ABSORO UV-VIS:
Quando a luz branca passa por uma amostra, a luz pode ser totalmente refletida, caso a
substancia seja branca ou a luz pode ser totalmente absorvida, neste caso a substancia tem a
cor negra.
Contudo, apenas uma poro da luz absorvida e uma parte refletida, a cor da amostra e
determinada pela cor refletida. Assim:
Quando a luz incide em uma amostra, ela pode:
_ ser totalmente refletida
_ ser totalmente absorvida
_ somente uma parte ser absorvida e restante refletida
As cores so complementares.
_ Se o Violeta absorvido, a amostra amarelo-esverdeado.
_ Se o Amarelo absorvido, a amostra azul.
H uma relao entre as cores da substancia e a estrutura eletrnica. Uma molcula ou on
exibir uma absorbncia nas regies do ultravioleta, quando a radiao for originria de uma
transio eletrnica no interior do tomo ou molcula. A energia fornecida por uma fonte de
luz promover os eltrons do estado fundamental para o estado excitado.
4.2.1- Cromforos:
Um grupo cromforo um grupo funcional, no conjugado com outro grupo, o qual exibe um
espectro de absoro caracterstico na regio Ultra-Violeta ou Visvel.
Um cromforo um grupo no qual, quando introduzido a um hidrocarboneto saturado, produz
um composto o qual possuem uma banda de absoro entre 180 e 1000 nm. Por exemplo, noctano um hidrocarboneto saturado o qual transparente nesta regio. Entretanto, se um
grupo nitrila introduzido no radical octil o composto octilnitrila produzido. O grupo nitrila
classificado como um cromforo e apresentara um espectro diferente do n-octano.
A tabela abaixo ilustra um pequeno grupo de simples cromforos com seus comprimentos de
onda mximo e absortividade molar. A absortividade molar a medida da intensidade da
banda de absoro. Como se pode observar, a intensidade de absoro de diversos cromforos
varia acentuadamente de um grupo para outro.
4.3. TEORIA DA COLORIMETRIA E ESPECTROFOTOMETRIA:
Quando a luz (monocromtica ou heterognea) passa atravs de um meio, por exemplo, um
gs ou lquido, ocorre uma certa perda de intensidade, em decorrncia de que uma parcela da
luz incidente refletida, outra parcela absorvida no meio e o restante transmitido.
Absorciometria
No estudo das interaes das radiaes com a matria necessrio estudar o modelo:
Nesse modelo, observa-se uma quantidade de energia luminosa (Po) entrando no volume de
estudo e a intensidade final (P) saindo desse volume
Transmitncia
A relao entre Po (intensidade inicial da radiao) e P (intensidade final da radiao que
deixa o meio material) chamada transmitncia (T).
IT1
Io
soluo 10 g/l
feixe de luz de
intensidade Io
Io
IT2
soluo 20 g/l
2. A absoro da luz tanto maior quanto maior for distncia percorrida pelo feixe luminoso
atravs das amostras:
IT1
Io
1 cm
feixe de luz de
intensidade Io
Io
IT3
3 cm
Absortividade
absorvncia
(fixo)
(fixo)
A= c.l
distncia percorrida
pelo feixe luminoso
atravs da amostra
concentrao
da soluo
absorvente
A absorbividade molar uma constante para uma substncia especfica, de modo que se a
concentrao da soluo reduzida para a metade, tambm a absorbncia cair pela metade,
que o que ns esperaramos.
Nesta equao,
A=log10
Io
IT
Io luz incidente
IT luz transmitida
absortividade molar ou coeficiente de absoro.
c concentrao da substncia (em moles/l)
l distncia percorrida pela luz atravs da substncia
Absorbncia
0.5
y = 10.723x - 0.0005
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0
0.01
0.02
+2
0.03
-1
[Cu ] mol L
0.04
- As condies de trabalho para a construo da curva com solues padro devem ser
mantidas em relao soluo problema (seleo do mesmo comprimento de onda, cubeta,
lmpada, pH, reagentes, temperatura).
- Se a curva for construda com diluio de 1:10, por exemplo, a soluo problema dever ser
diluda de 1:10.
- A curva dever compreender faixas teis, ou seja, valores situados abaixo do normal, dentro
do normal e acima do normal do elemento ou substncia pesquisada.
- A curva dever ser traada numa faixa de concentrao da substncia que siga a Lei de Beer,
utilizando o comprimento de onda de mxima absoro.
4.7. INSTRUMENTAO:
Espectrofotmetros em geral so instrumentos compostos por um conjunto de componentes
do seguinte tipo:
- uma fonte de radiao eletromagntica
- um conjunto de componentes pticos que levam esta radiao at a amostra
-um compartimento de amostra e um ou mais detectores que medem a intensidade de
radiao.
Dependendo da finalidade e do fabricante os arranjos pticos destes instrumentos podem ser
bastante diferentes. Este texto se refere apenas aos espectrofotmetros de absoro, operando
na regio, espectral do ultravioleta (UV) ( = 200/380nm - 400 nm), visvel (Vis) ( =
380/400 nm 700/800 nm)
Os componentes de um sistema fotomtrico de absoro de luz so:
diferentes comprimentos de onda iro incidir sobre a amostra permitindo que se determine sua
absorbncia em cada um destes comprimentos. Este conjunto de dados resulta no que se
chama espectro de absoro.
Uma grade de difrao um componente ptico que contm uma srie de ranhuras, que so
justamente os elementos responsveis pela difrao. Dependendo do nmero de ranhuras por
milmetro, haver uma maior ou menor resoluo dos espectros. Instrumentos com melhor
resoluo espectral tero grades de difrao com maior nmero de ranhuras por milmetro, e,
conseqentemente, este um (mas no o nico) parmetro a ser avaliado na seleo de um
instrumento.
Em pocas passadas as ranhuras eram feitas mecanicamente, porm atualmente estas so
feitas atravs de processos denominados hologrficos. Neste caso feito um depsito de uma
camada muito fina de um material sobre um substrato de vidro ou de quartzo, que ,
posteriormente, corrodo em certas regies definidas por uma figura de interferncia gerando
sobre este material um conjunto de vales e topos denominados ranhuras.
A qualidade de uma grade de difrao controlada pelo nmero de ranhuras por unidade de
rea e pela preciso com que estas foram feitas.
4.7.3- Recipientes para a amostra:
Chama-se cubeta, feita de material transparente radiao na regio espectral de trabalho.
Tm a forma retangular, com uma largura ptica de 1 cm. Para o uso de solues aquosas
existem clulas baratas de poliestireno. As clulas padro so feitas em vidro, para operar nos
comprimentos de onda de 340 a 1.000 nm (visvel), mas para operar em comprimentos de
onda mais baixos (at 185 nm, UV), as clulas devem ser feitas de slica ou de quartzo.
As espessuras das clulas variam de 1 a 10 cm. As clulas de absoro devem manter-se
rigorosamente limpas, pois tanto as impresses digitais como restos de amostras anteriores
podem ser, causas de erros considerveis nas determinaes quantitativas.
Acessrios de multi-cubetas
O acessrio de multi-cubeta ambiente ou termostatizvel consiste de dois conjuntos de seis
cubetas que se movem atravs do transportador de amostra posicionado no interior do
compartimento de amostras. O multi-cubetas possui as seguintes possibilidades:
- Utilizar campos de rotao magntica para promover agitao das cubetas.
- Utilizar aquecimento.
- Utilizar um canal de gua para controle de temperatura.
Quando conectado ao acessrio controlador de temperatura, a bomba de aquecimento pode
ser usada para transferir calor das cubetas para a gua circulante, ou transferir aquecimento da
gua para a cubeta. Usando este sistema possvel ajustar a temperatura de 10 a 100 graus
Celsius.
Qualquer tipo de detector absorve a energia dos ftons que chocam contra ele e a
converte em uma quantidade mensurvel, como a impresso em chapa fotogrfica,
uma corrente eltrica ou variaes trmicas.
Qualquer tipo de detector deve gerar um sinal que est quantitativamente relacionado
com a radiao recebida.
Todo detector deve obedecer aos seguintes critrios:
- alta sensibilidade;
- curto tempo de resposta;
- estabilidade a longo prazo para assegurar a exatido das respostas quantitativas;
- sinal eletrnico facilmente amplificvel por qualquer instrumento de leitura;
4.7.5- Tipos de instrumentos:
a) Feixe simples:
b) Feixe duplo:
DOS
ESPECTROFOTOMETROS
4.8.3 - Espectrofotmetros:
Os espectrofotmetros utilizam monocromadores para isolar uma banda espectral desejada,
empregado no intervalo do visvel ao UV. O campo de trabalho deste instrumento se estende
de 220 nm a 1000 nm., e dispes de 2 fontes de radiao: uma lmpada de hidrognio ou
deutrio para a regio UV, e uma lmpada de tungstnio para o visvel e infravermelho. O
instrumento tem dois fototubos, um para ser usado acima de 600 nm e outro, abaixo de 600
nm. O monocromador constitudo por um prisma de quartzo ou uma rede de difrao.
Ao deixar o monocromador, a feixe de radiao refletido por uma srie de espelhos para
atingir o obturador eletromecnico. No caso dos espectrofotmetros convencionais, o
obturador eletromecnico formado por um disco giratrio dividido em trs partes: uma parte
espelhada (mirror), uma parte slida pintada de preto (solid matt black) e a outra vazada (cut
out). Este disco gira a uma certa velocidade, de modo que o feixe que o atravessa ser
modulado na mesma freqncia em que as aberturas do disco passarem pelo ponto de
incidncia do feixe, gerando um sinal luminoso.
Quando o feixe atinge a parte vazada atravessa e segue um caminho ptico; quando ele atinge
a parte espelhada refletido e segue um outro caminho; e finalmente, quando atinge a regio
negra, o feixe absorvido pelo disco. Portanto, a finalidade do obturador a de alternar o
caminho ptico do feixe. Como ele gira a uma velocidade maior que a velocidade de
varredura da grade, cada comprimento de onda selecionado pela grade que incide sobre o
disco ir, alternadamente, fazer um ou outro caminho ptico. Um destes caminhos far com
que o feixe atravesse a amostra; o outro caminho far com que o feixe atravesse uma soluo
padro ou branco.
Ambos os feixes sero posteriormente dirigidos, por espelhos at o detector (tubo
fotomultiplicador), de modo que este estar medindo a intensidade do feixe que,
alternadamente, passa pela amostra e pela referncia, a cada comprimento de onda.
Um circuito eletrnico compara estes dois sinais e os converte em uma escala apropriada de
absorbncia a cada comprimento de onda, corrigida eletronicamente.
Espectrofotmetro para a regio visvel: projetados para operar no intervalo de de
380 a 800 nm, simples construo, de feixe nico e rede de difrao, relativamente
baratos (< U 1.000 at U$ 3.000), resistentes e portteis. Aplicao mais comum a
anlise quantitativa. Possui fonte de filamento de tungstnio, rede de difrao simples,
clula fotoeltrica.
Espectrofotmetros para a regio UV/visvel: faixa de medio de de 190 a 210 nm
(extremo inferior) e 800 a 1.000 nm (extremo superior), equipado com lmpadas
intercambiveis de tungstnio e hidrognio ou deutrio, tubos fotomultiplicadores e
redes de difrao, leitura digital. Seu preo varia de U$ 2.000 a U$ 8.000.
Espectrofotmetros computadorizados: operam na regio de 190 a 800 nm de , com
varredura de . As amostras so lidas e as absorbncias calculadas com a ajuda de
softwares. Possui vrias opes de tratamento dos dados e apresentao, como
absorbncia, transmitncia, derivadas, espectros de absoro, clculos de
concentrao, etc.
Mecanismo de funcionamento: a luz emitida da lmpada (2) purificada nos filtros (3) e
condensada sobre a fenda de entrada (4). O feixe de luz atravessa a fenda de entrada ,
refletido pelo espelho plano,,sendo condensado pelo espelho colimador sobre a rede de
difrao (5), que obtm-se a varredura dos comprimentos de onda. O feixe de luz que passa
pela fenda de sada atravessa o compartimento de amostras (7) cubeta e atinge o detector
(8).
omitir um ou mais itens, e a seqncia na qual a radiao passa de um item para o outro no
a mesma:
- compostos aromticos
- produtos naturais como esterides e clorofila
- corantes e vitaminas
- estabilizantes e antioxidantes