Matria: Microbiologia Professoras: Lvia e Janana Alunas: Juliana Esteves Patrcia Sbano Renata Gudergues Ryanna Rubstein Thalita

Martins

Introduo:
Tanto nas prticas de Microbiologia quanto em outras prticas em que h o manuseio de amostras passiveis de contaminao, extremamente necessrio procedimentos chamados de manobras asspticas que evitem a contaminao tanto de quem est manipulando as culturas, quanto da prpria. Manobras asspticas so uma srie de procedimentos executados de modo a evitar que os meios de cultura estreis sejam contaminados por microrganismos indesejveis. Partindo-se do princpio de que todos os materiais a serem utilizados devem estar minuciosamente limpos, ou seja, devem estar estreis. As vidrarias utilizadas devem passar pela autoclavao, que o aquecimento das mesmas em meio de maior presso, temperatura e umidade, garantindo a eliminao de todas as formas de vida vegetativa ou esporulada presentes em qualquer material, que possam alterar o resultado da prtica. O aparelho utilizado para a autoclavao a autoclave, com a forma de uma panela de presso muito grande e por isso, seu manuseio deve ser com cuidado e experincia, uma vez que seu mal uso pode causar graves acidentes. Outro modo de esterilizao com a utilizao do bico de bunsen, por exemplo uma ala bacteriolgica, cuja finalidade de transportar amostras de um meio a outro deve ser flambada at que esta apresente . Mas aps a tcnica deve-se esperar uns segundos para que no haja a desnaturao da amostra por conta do calor excessivo da ala. Quando esterilizados, deve-se ter o cuidado ao manusear as vidrarias. Por isso, utiliza-se o material a um raio de distncia de no mximo vinte centmetros da chama do bico de bunsen. Sempre atentando a no descansar a vidraria na bancada para no haver contaminao. importante tambm a passagem dos materiais antes e depois no bico de bunsen para no causar contaminao do ambiente. As manobras asspticas so de extrema importncia, concomitante com a paramentao correta para garantir a segurana da pessoa que est lidando, para as pessoas que esto no ambiente e em alguns casos, quando se trata de amostras extremamente contagiosas, at mesmo para a segurana de pessoas externa ao ambiente desse trabalho.

Objetivos:
Os objetivos da realizao desta prtica foram para fins de treinamento do manuseio de amostras com bactrias e sua transferncia para meios de cultura.

Materiais Utilizados:
Cinco Placas de Petri Bico de Bunsen Ala Biolgica Tubos de Ensaio com meio de cultura Tubo de com a amostra de bactria. Agar

Metodologia
I) Metodologia do Prepraro de gar slido.
Na rea da zona de segurana do bico de Bulsen, destampar o Erlemeyer contendo o material para cultura de modo que a rolha e a vidraria estejam na mesma mo, ou seja, a vidraria apoiada na bancada e no momento em que rolha for destampada a palma da mo deve estar virada pra cima e a mesma deve ser retirada como um gancho entre o dedo indicador e o mdio. Deve-se achar uma posio confortvel para apoiar a placa de Petri em uma das mos de modo que o dedo polegar abra-a dentro da zona de segurana. Verte-se o lquido de gar na placa cobrindo toda a superfcie da placa formando uma camada pouco espessa no interior da vidraria. A placa deve descansar sobre a bancada uniformizando o lquido at que o mesmo esfrie.

Ao aplicar a soluo bacteriolgica no meio de cultura, faz-se uso de uma ala de metal. Para esteriliz-la aquece-se a ponta da ala de modo a flambar at o rubro, espera-se um tempo at que a mesma esfrie para que a ala no queime a bactria presente na soluo e mergulha-se a ala na soluo. Todo o procedimento deve ser realizado na zona de segurana do bico de Bulsen. A soluo bacteriolgica deve ser aberta e fechada com a mesma mo, de maneira que a tampa do tubo que contiver a soluo no entre em contato com a bancada evitando o risco de contaminao. Segurando a ala com a mo direita, apia-se o tubo no dedo mnimo e com a mo esquerda abre-se e mergulha-se a ala na soluo. A tampa do tubo deve continuar na mo direita pois aps o mergulho da ala na soluo, a mesma deve ser fechada. Aps mergulhada, apia-se a placa anteriormente vertida por gar e agora com o mesmo de forma slida na mo oposta a que segura a ala e deve-se passar a ala na placa com movimentos leves de modo a espalhar a bactria por todo o meio de cultura e tomando as devidas precaues para que a camada de gar no se rompa. Fecha-se a placa de Petri e coloca-se a mesma na estufa para que a bactria possa colonizar aquele meio de cultura.

II) Metodologia do Prepraro de gar Lquido.

Resultados e Discusses
I) Meio de cultura lquido
Em todos os tubos o meio no ficou turvo, ou seja, no houve crescimento de bactrias. Pode ter ocorrido o aquecimento demasiado da ala, matando assim a bactria, ou pode ter sido colocada uma quantidade insuficiente da bactria no tubo.

II) Meio de cultura slido

Em um dos tubos houve o crescimento de colnia de bactrias diferente da Serratia Marcescens, e ocorreu tambm o crescimento de fungos. Nos demasiados tubos nada ocorreu. Similarmente ao meio lquido, a ala pode ter sido flambada demais, matando assim a bactria, ou pode ter sido colocada uma quantidade insuficiente da bactria no tubo. J no tubo onde houve um crescimento de outras bactrias e fungos, provvel que tenha ocorrido algum tipo de contaminao.