Ministrio da Sade Fundao Oswaldo Cruz Escola Nacional de Sade Pblica

Avaliao da contaminao do leite materno por pesticidas organoclorados persistentes em mulheres doadoras do Banco de leite do Instituto Fernandes Figueira, RJ

Por Sueli Alexandra de Mesquita

Dissertao

apresentada visando

ENSP/FIOCRUZ

obteno do ttulo de Mestre em Cincias na rea de Sade Pblica.

Orientador: Josino Costa Moreira

Rio de Janeiro, setembro de 2001

Aos meus pais, meu irmo e meus amigos. A todos que ajudaram na realizao desse trabalho, e no foram poucos...

"Que um dia eu esteja pronto e amadurecido no grande meio-dia, pronto e amadurecido tal qual o bronze ardente, a nuvem prenhe, pronto para mim prprio e para o meu querer mais secreto, um arco no ardor de sua flecha, uma flecha no ardor de seu astro." (Friedrich Nietzsche)

Ministrio da Sade Fundao Oswaldo Cruz Escola Nacional de Sade Pblica

Avaliao da contaminao do leite materno por pesticidas organoclorados persistentes em mulheres doadoras do Banco de leite do Instituto Fernandes Figueira, RJ

por Sueli Alexandra de Mesquita

Membros efetivos da Banca Examinadora: Prof. Dr. Joo Aprgio Guerra de Almeida Prof.a Dr.a Ana Elisa Xavier de Oliveira e Dias Prof. Dr. Josino Costa Moreira

Rio de Janeiro, setembro de 2001

Agradecimentos

Aos meus pais Braz Alexandre de Mesquita e Maria Beatriz Martins de Moraes, meu irmo Alex Alexandre de Mesquita, Cristiane, Luisa e Carolina Mesquita. A vocs dedico esse trabalho pelo apoio e carinho com o qual eu sempre pude contar. Obrigada! Agradeo aos meus orientadores Josino Costa Moreira , pela pacincia e confiana e Paula de Novaes Sarcinelli, sem a qual esse trabalho no teria sido possvel, no fosse sua ateno, amizade e pacincia desde o incio. ENSP e o seu auxlio em forma de bolsa de mestrado. Ao Banco de Leite do Instituto Fernandes Figueira, e principalmente ao seu diretor. Joo Aprgio de Almeida Guerra, por servir de inspirao todos que o conhecem, pelo amor com o qual conduz o seu trabalho. toda a equipe do Banco de Leite, principalmente o professor Franz, a secretria Angela e a Zulene; que me ajudou muito durante a coleta, obrigada ! s mes doadoras do Banco de Leite do IFF. Ana Cristina, Anita, pela ajuda nas anlises e nas rampas do CG e antes de tudo, pela amizade, e apoio nos momentos difceis; s professoras Rita Mattos, Clia Souza e Ana Elisa Xavier, pela atitude sempre colaborativa.

Aos amigos do laboratrio (no quero esquecer ningum): Elaine e Lucineide (amigas de todas as horas!), Alan, Jefferson (pela sua engenhosidade no CG!), Srgio, Armando, Flvia Leite, Regina, Mrio (sempre disposto a ajudar , obrigada, Marinho!), Flor, Martha, Laura, Andrezinho, Marquinhos e Paulinha (mais uma vez!), Denise (na traduo do abstract, obrigada.), Simone e Cristiane (chumbo), Ftima Moreira, Leandro (metais), Renata (estagiria do Anbal), Perptua, Snia (solventes), Ftima Costa, todos os novos estagirios da UNI-RIO que esto chegando alm das meninas da "velha guarda" Miriam, Marina, Teca e Flvia Moraes. A turma de Mestrado em Sade Pblica 1999: Luis Alberto Echenique Domingues, "Gacho", Alcilia Ftima Costa, Antnio Fidalgo, Anary Baungarthem e Clber Hooper, "Clebinho", sem duvida a turma mais festeira de todos os tempos! E das outras sub-reas: AnaCristina Oliveira, Gabriela Rieveres, Elenice da Cunha, Giane Serra, Eduardo, Teresa , Manoel Pereira, AnaPaula, Regina, Carlos. "magrinho" Espero no ter esquecido ningum, afinal foram muitas festas e viagens... Ao Alexanadre "girafa"(Unirio) pela ajuda e dedicao na anlise das amostras, muito obrigada! Particularmente aos meus grandes amigos : Rose (minha irm), Jnior, ane, Alexandre e Luciana Mensor (minha amiga de sempre, Lulu), que me ajudaram com carinho e compreenso nesse momento delicado, obrigado por vocs fazerem parte da minha vida! Ao meu namorado, amigo e companheiro Anderson Gonalves de Oliveira, por seu apoio sua pacincia, seu amor e carinho. Dedico tambm a voc esse desafio e reafirmo o quanto voc uma pessoa admirvel. Obrigada! Finalmente agradeo a todos contriburam de diversas formas para realizao desse trabalho. Muito obrigada !

Resumo

Pesticidas organoclorados so substncias altamente resistentes degradao tanto por meios qumicos quanto biolgicos, pouco solveis em gua, semi-volteis e altamente lipoflicos, caractersticas responsveis pela bioacumulao desses compostos no meio ambiente pela biomagnificao atravs da cadeia trfica. Em humanos, a principal fonte de exposio em populaes no expostas ocupacionalmente atravs da alimentao. Atualmente a maioria dos organoclorados tm uso restrito ou foram definitivamente proibidos no Brasil, assim como em vrias partes do mundo. O leite materno bastante utilizado para avaliao da exposio a compostos lipoflicos por ser uma rota importante de excreo dessas substncias, ser um bom indicador da carga corprea e ser de fcil obteno. As amostras de leite humano, utilizadas no presente trabalho, foram provenientes do Banco de Leite do Instituto Fernandes Figueira, que forneceu uma boa amostragem da populao do municpio do Rio de Janeiro e Grande Rio. Para essas amostras foi encontrada uma evidente contaminao multiresidual de pesticidas organoclorados com a prevalncia do p,p' DDE em 100% das amostras, seguido do p,p' DDT ( 90%) e do - HCH (84%), embora os valores para a maior parte dos compostos, estejam abaixo do descrito pela literatura como limites aceitveis. A IDA (ingesto diria aceitvel) mdia calculada para o DDT, foi de 0.00341 mg.kg-1 de peso.dia-1, inferior portanto ao valor de referncia da FAO/WHO (Codex Alimentarius) que de 0005. mg.kg-1 de peso.dia-1. A razo IDAobser. /IDAref foi foi de 0.68 (68%). Entretanto para 18% da populao estudada os valores calculados esto acima da ingesta diria aceitvel recomendada.

Abstract

Organochlorine pesticides are highly resistant to chemical and biological degradation, semi-volatile and highly lypophilic, with low water solubility, characteristics responsible for their bioacumulation in the environment and their bioamagnification through the food chain. In humans, the main exposure source is the diet, in non occupationally exposed populations. Nowadays, most of the organochlorine pesticides have their use and production restricted, or were definitively banished in several parts of the world. The maternal milk is frequently used to evaluate the exposition to lypophilic compounds considering that lactation is an important route of excretion for these substances due to the high lipid content of the milk. Organochlorines in milk are considered as good indicators of the body burden. Besides samples are easily obteinted. The studied group under study in the present work was constituted of 50 women usual milk donnors from the Bank of milk of Fernandes Figueira Institute which contributed to the construction of a representative sample of the population of the district of Rio de Janeiro and its metropolitan areas. The examined samples presented na evident multiresidual contamination with the prevalence of the p,p'DDE in 100% of the samples, followed by the p,p'DDT (90%) and of - HCH (84%). The average IDA calculated for DDT, was 0.00341 mg/kg-1 of weight.day -1, lower than the value of reference of FAO/WHO (Codex Alimentarius) of 0.005 mg.kg-1 of weight.day-1. The rate IDAobser./ IDAref was of 0.68 (68%), however 18% of the studied population samples presented values above the recommended acceptable daily intake for the examined compounds.

Lista de Tabelas
Pgina

Tabela 1: Parmetros fsico-qumicos dos organoclorados estudados. Tabela 2: Classe toxicolgica segundo a ANVS, 1985. Tabela 3: Produo do Banco de Leite Humano do IFF/FIOCRUZ no ano de 1999. Tabela 4: Nmero de amostras analisadas por rota. Tabela 5: Linearidade de resposta do detector de captura de eltrons (HP 6890) para a faixa de concentrao de 1,25-20 ng.g-1. Tabela 6: Percentagem de recuperao do pesticidas organoclorados submetidos ao mtodo de Stevenson, 1991. Tabela 7: Reprodutibilidade dos organoclorados (%CV) Tabela 8: Limites de deteco do equipamento e do mtodo Tabela 9: Valores mdios de caractersticas maternas. Tabela10: Nveis de Pesticidas Organoclorados em ng.g-1 de gordura. Tabela 11: Nveis de Pesticidas Organoclorados em ng.ml-1 de leite. Tabela 12: Valores da IDA em ng.g-1 de peso/dia para o DDT em leite materno. Tabela 13: Valores de p,p' DDT em ng.g-1.

7 8 20 27 36

37

39 39 41 48 49 49 50

Lista de figuras
Pgina Figura 1: Metabolismo do p,p'DDT em ratos e alguns dos metablitos encontrados em humanos. Figura 2: Principais vias de absoro e excreo da substncias lipoflicas persistentes. Figura 3: Curvas de linearidade do p,p'DDD e do Aldrin Figura 4: Tempo de residncia no Rio de Janeiro e Grande Rio Figura 5 : Grfico de freqncia de moradia das doadoras por bairros pertencentes rota. Figura 6 : Freqncia percentual de pesticidas organoclorados nas amostras de leite humano. Figura 7: Nveis mdios de -HCH no leite humano de doadoras residentes nos municpios do Rio de Janeiro e Duque de Caxias Figura 8: IDA (Ingesta diria aceitvel) mdia para o DDT por rota do Instituto Fernandes Figueira. 55 51 11 40 42 43 45 10

Lista de Abreviaturas

ANVS BLH CESTEH CG-DCE DDD DDE DDT FAO HCB HCH IDA IFF LHO OMS PNIAM POP US.EPA WHO

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Banco de Leite Humano Centro de Estudos da Sade do Trabalhador e Ecologia Humana Cromatografia em fase gasosa acoplada com detector de captura de eltrons Diclorodifenildicloroetano Diclorodifenildicloroetileno Diclorodifenitricloroetano Organizao para Alimentao e Agricultura Hexaclorociclobenzeno Hexaclorociclohexano Ingesta diria aceitvel Instituto Fernandes Figueira Leite humano ordenhado Organizao Mundial de Sade Programa Nacional de Incentivo ao Aleitamento Materno Poluente orgnico persistente Agncia de Proteo Ambiental do Estados Unidos Organizao Mundial de Sade

ndice

Lista de tabelas Lista de figuras Resumo Abstract Captulo 1 - Introduo

1.1 - Histrico 1.2 - Caractersticas dos Pesticidas 1.2.1 - Gerais 1.2.2 - Fsico-qumicas 1.2.3 - Toxicolgicas 1.3 - Legislao 1.4 - Leite Humano 1.4.1 - Caractersticas Bioqumicas 1.4.2 - Sntese 1.4.3 - Fatores que modificam os nveis de compostos lipoflicos no leite 5 6 8 12 14 14 14 15 1

1.5 -Rede de Bancos de Leite 1.5.1 -O Banco de Leite Humano do IFF 1.5.2.- Etapas de processamento do leite humano no Banco do IFF 1.6 - Objetivos

18 18 21 25

Captulo II - Materiais e Mtodos

2.1 - Amostragem 2.1.1 - Recepo 2.2 - Reagentes e solues 2.3. - Lavagem de material 2.4 - Vidraria 2.5 - Equipamentos e condies operacionais 2.6 - Metodologia analtica 2.6.1 - Extrao 2.6.2 - Clean up com colunas de florisil 2.6.3 - Anlise cromatogrfica 2.7 - Qualidade analtica 26 26 28 29 29 30 31 31 32 33 34

Captulo III - Resultados e discusso

3.1- Validao da Metodologia 3.2 -Resultados da pesquisa dos hbitos de vida das doadoras participantes... 3.3-Nveis de organoclorados no leite humano 3.3.1 - Nveis mdios de organoclorados em ng.g-1 de gordura 3.3.2- Nveis mdios de organoclorados em ng. ml-1 de leite 3.4 - Avaliao da ingesto IDA - Ingesto Diria Aceitvel 3.5 -Discusso 36 41 44 45 46 49 49

Captulo IV - Concluso Captulo V - Referncias bibliogrficas Anexos

56 58 64

Captulo I - Introduo

1.1 -Histrico
A Revoluo Industrial do sculo XVIII trouxe para a sociedade um significativo avano das cincias e da produo tecnolgica, e em conseqncia mudanas profundas no que diz respeito a relao do homem com a natureza. Se por um lado, houve uma melhora significativa da qualidade de vida, j que as tcnicas agrcolas podiam desfrutar de um suporte tecnolgico que aumentava a produo, por outro a busca do aumento da produtividade levou ao uso indiscriminado de certos insumos qumicos responsveis por graves desequilbrios ecolgicos, como poluio dos mananciais e do solo das regies cultivadas tratadas com esses insumos (Zandon e Zpia, 1993). Por muitos sculos procurou-se desenvolver mtodos e substncias capazes de controlar ou exterminar certos tipos de insetos e microorganismos que infestavam a lavoura. Na literatura relatado o uso de cido sulfrico como fumigante na China 1000 a.C. Entretanto, foi partir do final da Segunda Guerra Mundial que houve um significativo desenvolvimento da chamada qumica moderna, e com ela a sntese de diversos compostos orgnicos que se destinavam ao combate de certos tipos de pragas da lavoura (Ecobichon, 1991). Desde ento, o uso de insumos qumicos na produo agrcola veio crescendo. No entanto, apesar do aumento do uso destes compostos, no se considerou os riscos de uma possvel exposio sade do trabalhador rural e da populao em geral, que atravs do consumo dos alimentos produzidos, ou do contato com fontes de gua contaminadas, tambm era indiretamente exposta. Um dos maiores problemas apresentados por esses compostos que eles no possuem seletividade para as espcies alvo, j que o sistema fisiolgico e bioqumico das espcies alvo e no alvo so extremamente semelhantes e dentre as espcies no alvo inclui-se o homem. Essa constatao aponta para o fato de que no se pode falar em pesticidas completamente seguros para a sade humana, o que existe so compostos que, dependendo da dosagem e da ateno dispensada no uso e na aplicao, apresentam menor risco sade (Ecobichon,1991).

A utilizao de pesticidas para a agricultura representou um aumento significativo da produo de alimentos, tanto em relao eficincia agrcola, quanto qualidade. Entretanto, ao lado desses benefcios restaram os resduos que se acumulam principalmente nos alimentos (Shattenberg & HSU,1992). No incio do sculo vinte, compostos qumicos inorgnicos a base de enxofre e metais como arsnio, mercrio, chumbo e outros comearam a ser utilizados largamente, uma vez que produtos naturais como o piretro, comprovadamente eficazes como pesticidas, mostravam-se muito caro para o uso em larga escala. No perodo que compreendeu as duas grandes Guerras Mundiais, a indstria de compostos "chlor-alcali" forneceu o material cru para a produo em massa de compostos organoclorados. Esse pode ser considerado o incio da "Era da Qumica Orgnica", onde a busca por biocidas mais seletivos levou sntese de diversos compostos orgnicos (Turnbull, 1996). Em 1932, um composto conhecido com o 2,4-D foi descoberto por suas propriedades herbicidas, sendo considerado como um dos primeiros pesticidas organoclorados sintticos. Sua estrutura composta de um grupamento fenoxy-cido lhe conferia uma certa labilidade, tornanado-o facilmente degradado no meio ambiente. J em 1933 um outro organoclorado mais persistente foi sintetizado, o hexaclorobenzeno (HCB), utilizado como fungicida de sementes. (Burton & Bennett, 1995). Com o final da Segunda Guerra Mundial, a necessidade de se aumentar a produo de alimentos desencadeou a modernizao da agricultura atravs da produo de maquinarias complexas, um aumento da extenso dos campos cultivados e o uso de fertilizantes qumicos e dos novos pesticidas sintticos. Em 1874, o DDT (tricloro bis (clorofenil) etano) foi sintetizado por Othmar Zeidler. Entretanto suas propriedades inseticidas s foram descobertas, durante a Segunda Guerra, em 1939 , por Paul Mller que trabalhava para os laboratrios da Companhia Sua J.R Geigy S.A, que patenteou o DDT em 1940. Mais tarde, Paul Mller receberia o Prmio Nobel de Medicina em reconhecimento aos servios prestados durante a Guerra, onde milhares de vidas foram salvas, graas ao uso do DDT, que evitou a morte de civis vtimas da epidemia de tifo que assolou Npoles, na Itlia, durante a guerra.

Tanto as tropas quanto os civis foram pulverizados com DDT, evitando assim que a epidemia se espalhasse por toda a Europa (Parke, 1981). Foi ainda durante a Guerra que outros inseticidas orgnicos foram sintetizados, isso porque vrias regies onde as tropas serviam eram reas endmicas de diversas doenas tropicais como a malria. Nessa poca tem-se ainda o surgimento do HCH, hexaclorociclohexano conhecido erradamente como BHC. Inicialmente, o HCH foi produzido como uma mistura isomrica de ciclohexanos organoclorados, conhecidos tecnicamente como HCH, e que compreendia uma mistura dos ismeros (55-77%), (5-14%), (1018%), (6-10%) e (3-4%). Mais tarde descobriu-se que apenas o -HCH ou lindano possua atividade inseticida. O -HCH foi sintetizado por Michael Faraday em 1825 e a existncia dos ismeros foi descoberta por Van der Linden em 1912, e a descoberta de suas propriedades inseticidas foi feita por Dupaire e Rancourt, na Frana em 1942 (Metcalf, 1955). No incio, estes novos biocidas foram aclamados como um verdadeiro milagre da cincia moderna, que poderia vir a solucionar um dos mais importantes problemas do ps-guerra: a falta de alimentos. Somente mais tarde comeariam a ser associados a esses compostos efeitos adversos sade humana e ao meio ambiente. Rachel Carson em 1962, em seu livro Primavera Silenciosa (Silent Spring) descrevia os efeitos txicos agudos que os compostos organoclorados provocavam no meio ambiente, tanto na Amrica quanto na Europa atravs de sua rpida bioacumulao. Espcies como o falco peregrino, aproximaram-se da extino na Inglaterra, assim como diversas aves e mamferos que morreram provavelmente pela contaminao por compostos organoclorados (Turnbull,1996). Desde ento, os pesticidas tm ocupado lugar de destaque no combate a pragas da lavoura e vetores das vrias doenas que ainda persistem em certos pases tropicais . doenas como o Mal Chagas, malria, febre amarela, tifo, dengue entre outras impem a esses pases a utilizao desses agentes.

Alguns pesticidas, j partir dos anos 70 tiveram sua produo, sua comercializao e uso proibidos, devido aos comprovados efeitos deletrios a sade que esses compostos possuem. Entretanto no Brasil foi partir de 1985 que atravs da portaria n 329 do Ministrio da Agricultura, os pesticidas organoclorados tiveram sua produo, seu uso e venda proibidos, com algumas excees, como o uso de Endossulfan em lavouras de caf, cacau, algodo e soja, do Dicofol em cultura de ctricos e algodo, Aldrin no controle de formigas e cupins e HCH em campanhas de Sade Pblica. Em 1993 uma nova portaria do Ministrio da Agricultura proibiu o uso do Mirex e do Aldrin (Bortoleto, 1993) e finalmente em 1998 o Ministrio da Sade proibiu o uso tanto no agricultura quanto para uso domstico de Aldrin, Endrin, HCH, Lindano (ismero -HCH) e do DDT (Portaria n11 M.S/ D.O.U ,21.01.98). Os trabalhadores do meio rural esto expostos ocupacionalmente a esses compostos diariamente, entretanto uma anlise mais atenta capaz de mostrar que toda a populao est exposta a contaminao indireta atravs do consumo de alimentos contaminados. Assim, vrios estudos esto sendo elaborados no sentido de determinar as concentraes desses pesticidas no organismo humano, partindo-se de populaes no expostas ocupacionalmente (Zandon e Zpia, 1993). .

1.2 -Caractersticas dos pesticidas organoclorados

1.2.1 - Caractersticas Gerais Segundo a Agncia de Proteo Ambiental dos Estados Unidos (U.S EPA), pesticida toda substncia ou mistura usada na preveno, destruio ou combate de pragas. Pesticidas tambm podem ser definidos como qualquer agente fsico, qumico ou biolgico capaz de exterminar plantas, animais ou microorganismos indesejveis (Ecobichon, 1991). O grupo dos pesticidas ou agrotxicos pode tambm ser classificado, segundo sua funo em: inseticidas, fungicidas, herbicidas, rodenticidas, antibiticos, acaricidas, molusquicidas. Os inseticidas, por sua vez, podem ser ainda subdivididos em classes segundo suas caractersticas qumicas, como os inseticidas organofosforados, organometlicos e compostos que possuem em sua molcula um ou mais tomos de cloro e portanto so classificados como pesticidas organoclorados. No grande grupo dos organoclorados, alguns so enquadrados no grupo dos Poluentes Orgnicos Persistentes, compostos altamente resistentes a degradao por meios biolgicos, qumicos ou fotolticos. Os POPs possuem pelo menos um anel aromtico em sua estrutura, e so assim chamados devido a certas propriedades fsicoqumicas que lhes conferem um alto poder de persistncia no meio ambiente, como baixa solubilidade na gua e alta solubilidade em lipdios, o que facilita sua acumulao no organismo animal, principalmente no tecido adiposo o que aliado ao seu tempo de meia-vida longo, aumenta seu potencial de bioacumulao (Ritter et al.,1995). A alta lipofilicidade desses compostos tambm responsvel pela sua biomagnificao atravs da cadeia alimentar, aumentando consideravelmente os riscos dos organismos no topo dessa cadeia. Alm disso, os compostos organoclorados so semi-volteis e em pases tropicais, constantemente submetidos a altas temperaturas, esses compostos se volatilizam facilmente partir da superfcie das plantas e do solo e so transportados pela atmosfera, condensando-se nas regies mais frias do globo (Ritter et al.,1995).

A exposio crnica e a baixas concentraes por longos perodos a estes pesticidas representa um grande risco para a sade humana, sua longa meia-vida resulta em acmulo dessas substncias no organismo animal, por isso essa exposio tem sido associada a efeitos como imunotoxicidade, efeitos drmicos, problemas relacionados a reproduo e carcinogenicidade (Ritter et. al, 1995).

Interao ambiental e bioacumulao A interao dos compostos organoclorados persistentes depende muito de suas propriedades fsico-qumicas. Os compostos hidrofbicos e semi-volteis possuem baixa solubilidade em gua e uma taxa baixa de decomposio .Caractersticas como alta lipossolubilidade e baixa taxa de decomposio so responsveis pela acumulao desses compostos em meios biolgicos, principalmente no tecido adiposo animal. Alm disso, a volatilizao desses compostos, seguida do transporte atmosfrico, facilitam sua distribuio por todo o planeta. Esses dois processos, combinados permitem aos organoclorados uma interferncia local tanto ao nvel de cadeia alimentar, quanto em reas distantes do seu local de aplicao (Cotham &Bidleman, 1991) A bioacumulao dos compostos organoclorados sem dvida o aspecto mais significante da contaminao ambiental, uma vez que a partio desses compostos no solo, na gua e na atmosfera bem menor que em materiais orgnicos. Alm da bioacumulao, que segundo Leblanc 1995, a absoro do composto atravs da alimentao, do meio abitico e/ou bitico, onde a concentrao no organismo pode ou no exceder a da fonte. Os compostos organoclorados sofrem o processo de biomagnificao atravs da cadeia alimentar, onde a concentrao desses compostos aumenta ao longo da cadeia alimentar. Nesse sentido os predadores do topo da cadeia tornam-se mais susceptveis contaminao (Leblan,1995).

1.2.2-Caractersticas fsico-qumicas A Tabela 1 mostra alguns dos parmetros fsico-qumicos dos compostos organoclorados estudados.

Tabela 1 : Caractersticas fsico - qumicas dos organoclorados estudados (Richardson & Gongolli, 1994)) Pesticida Nomenclatura e sinnimos p,p' DDT p,p' DDE p,p'DDD
4,4'diclorodifeniltriclo roetano , Dicophano 4,4'DDE; 2,2'diclorodiifenildicloroetileno 4,4- diclorodifenidicloroetano

Peso molecular 354,49 318,03 320,05

P.F (C) 108,5-190 88-90 109-111

P.E (C) 185-187 316,5 193

Volatilidade mmHg a 20(C) 1,9 x 10-7 6,5 x 10-6 1,02 x 10-6

Solubilidade

Solvente orgnico

Ocorrncia

gua: 3,1-3,4g.lgua: 0,04 mg.l-1 gua: 0,160 mg.l-1

Solivel em acetona, benzeno, ciclohexano,, nhexano, diclorometano Solventes orgnicos(acetona, dimetil sulfxido, isooctano) Amplamente solvel em solventes orgnicos e leos em geral Acetato de etila, diclorometano, tolueno etanol, hexano Solventes orgnicos Acetona, benzeno, xileno Acetona, benzeno, etanol, metanol, azeite de oliva Solvel na maioria dos solventes alifticos e aromticso

inceticida inseticida metablito do p,p'DDT inseticida metablito do p,p'DDT Mistura isomrica do e endossulfan _____ Inseticida usado no controle de cupins Metablito do inseticida Aldrin Inseticida no-sistmico _____

Endossulfan endossulfan Aldrin Dieldrin - clordano - clordano HCH Mirex

a- HCH- lindano

Thiodan, Thiorex Endossulfan 2 _____ _____ trans - clordano Cis -clordano , e HCHa BHC Dodecacloro, declorano

406,93 406,93 364,9 380,91 409,78 409,78 290,93 545,.55

70-100 213,3 104-104,5 175-176 106-107

106 213,3 145

9,0 x 10-3 9,0 x 10-6 6,45 x 10-5 3,1 x 10-6

gua: 0,32 mg.l-1 gua: 0,33mg.l-1 _____ gua :0,25mg.l-1 gua :0.1mg.l-1 _____ gua salgada: 1,4mg.l-1 gua :0,20mg.l-1

175 175

1,0 x 10-5 1,0 x 10-5 3,17 x 10-5

113 485 _____

Clorofrmio, benzeno, ter dimetlico e etanol ____

3 x 10-7

HCH grau tcnico consiste na mistura dos ismeros , e HCH inceticidas

1.2.3-Caractersticas toxicolgicas

Os organoclorados com propriedades inseticidas so, em sua maioria, hidrocarbonetos com tomos de cloro como substituntes, que de certa forma bloqueiam a oxidao do esqueleto carbnico tornando os compostos extremamente estveis quimicamente e resistentes degradao (Quincey et al.,1995). A alta lipossolubilidade permite a esses compostos uma fcil penetrao atravs das membranas celulares e nos tecidos, distribuindo-se e concentrando-se em tecidos cujo contedo de gordura maior (Klassen & Rosmam,1991). A Tabela 2 mostra como so classificados os pesticidas segundo classes toxicolgicas pela Secretaria Nacional de Vigilncia Sanitria (SNVS,1985).

Tabela 2: Classes toxicolgicas as quais so classificados os pesticidas segundo a Secretaria Nacional de Vigilncia Sanitria (SNVS,1985):

Classificao toxicolgia Classe I Classe II Classe III Classe IV Fonte: ANVS, 1985 Extremamente txico Altamente txico Mediamente txico Pouco txico

Pesticidas
Endossulfan, e HCH, Lindano (-HCH), Aldrin, DDT

________ ________

Toxicocintica De forma geral, pode-se dizer que a populao encontra-se exposta aos pesticidas organoclorados, sendo que dentre as vias de exposio, a principal atravs da ingesta de alimentos contaminados. Ento, por ordem, tem-se as principais vias de exposio: Ingesto de gua e alimentos; Inalao (atravs do ar ou poeira); Absoro cutnea (atravs de roupas ou por contato direto) (OMS,1992). Vrias so as formas de absoro de substncias qumicas pelo organismo, seja pelo contato direto com a pele, pela via inalatria (ar contaminado) ou pelo trato gastrointestinal (Ex.: gua ou alimentos contaminados ). A eficincia da absoro por cada uma dessas vias depende das propriedades fsico-qumicas dos compostos, principalmente da sua lipossolubilidade (Friberg, 1985). Aps absorvidos, os compostos clorados so transportados na corrente sangnea ligados a protenas plasmticas como as lipoprotenas e a albumina (Skalsky, 1978). O armazenamento dessas substncias depende da sua caracterstica lipoflica. Substncias pouco lipoflicas, costumam ser hidrossolveis, e portanto no acumulam no tecido adiposo, so metabolizadas rapidamente e eliminadas pelos rins (Figura 2). Durante a lactao, o leite materno passa a ser uma importante via de excreo de substncias lipoflicas (Sim & Mc'Neil, 1992) Compostos lipoflicos, como os organoclorados, difundem-se atravs das membranas celulares e se concentram em tecidos com alto contedo lipdico, como o caso do fgado, que o principal rgo de biotransformao de xenobiticos e principalmente do tecido adiposo onde esses compostos se bioacumulam. O grau de bioacumulao pode ser determinado pelo fator de bioconcentrao, que a razo da concentrao do composto no tecido adiposo pela concentrao encontrada na dieta. A mdia de bioconcentrao encontrada para o DDT (diclorodifeniltricloroetano) de 1,279 enquanto que o para o pentaclorofenol de 3,7 (Geyer et al.,1986).

Figura1: Metabolismo do p,p'DDT e sua rota de metabolismo em ratos. Os metablitos marcados com asterisco so encontrados em humanos (adapatado de Hayes & Laws, 1994).

A eliminao desses compostos pelo fgado facilitada pelo processo de biotransformao heptica que transforma esses compostos em substncias mais hidrossolveis. Tal processo governado principalmente pelas enzimas do sistema oxidase de funo mista heptica. A cintica de primeira ordem e a taxa de biotransformao so dependentes da concentrao. Atravs da biotransformao os xenobiticos so transformados em compostos mais hidroflicos e portanto mais fceis de serem eliminados por via renal. Tanto o grau de halogenao quanto a posio do halognio na molcula influenciam na taxa de metabolizao e eliminao desses qumicos (Sim & Mc'Neil, 1992) A Figura 1 mostra o metabolismo do p,p' DDT, e seus diversos metablitos em ratos. Alguns desses so metabolizados pelo sistema P450 heptico, e so encontrados no organismo humano.

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absoro
Pele Pulmes TGI*

transporte
Sangue

Tecido adiposo e outros tecidos ricos em gordura

armazenamento
Fgado

metabolismo
Rim Leite materno

excreo

Figura 2: Principais vias de absoro e excreo de substncias lipoflicas persistentes (Sim & Mc'Neil, 1992).

* TGI - trato gastro-intestinal

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1.3- Legislao

Agrotxicos - Legislao Na dcada de 70, os estudos que demostravam fortemente a toxicidade dos pesticidas organoclorados, levaram a proibio desses compostos em vrios pases. Entretanto no Brasil foi apenas em 1985 que a Portaria n 329/85 do Ministrio da Agricultura vem a proibir a comercializao e o uso de pesticidas organoclorados em todo o territrio nacional, para uso tanto domiciliar quanto agropecurio. Nessa proibio foram includos os ismeros do HCH (errneamente chamado de BHC), o , o e o -HCH ou lindano e o DDT.

A portaria n 329 admite: necessrio para salvaguardar a sade humana e para o meio ambiente que se regulamente a utilizao de agrotxicos comprovadamente de alta persistncia e/ou alta periculosidade, e para tanto probe tambm periculosidade e probe, em todo o territrio nacional, a comercializao, o uso e a distribuio dos produtos agrotxicos organoclorados, destinados agropecuria, dentre outros: ALDRIN, BHC, CANFENO CLORADO (TOXAFENO), DDT, DODECACLORO, ENDRIN, HEPTACLORO, LINDANE, ENDOSULFAN, METOXICLORO, NOMACLORO, PENTACLOROFENOL, DICOFOL e CLOROBENZILATO. Entretanto a proibio foi parcial, algumas substncias tiveram seu uso permitido, em casos especiais. O pargrafo nico determina que constituem exceo proibio constante deste artigo: a) o uso de iscas formicidas base de Aldrin e Dodecacloro; b) o uso de cupinicidas base de Aldrin para o emprego em florestamento e reflorestamento;

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c) o uso dos referidos produtos quando aplicados pelos rgos pblicos competentes, em campanhas de sade pblica de combate a vetores de agentes etiolgicos de molstias; d) o uso emergencial na agricultura, a critrio da Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria - SNAD - do Ministrio da Agricultura." Antes disso, em 1984 o Ministrio da Agricultura, atravs da Portaria n 29/84, havia cancelado todos os registros de DDT no Brasil. Em maro de 1985 a DINAL, Diviso Nacional de Alimentos , lana a compilao com a relao de substncias com ao txica sobre animais e plantas, cujo o registro poderia ser autorizado no Brasil, em atividades agropecurias ou com domossanitrio Tanto o HCH quanto o DDT no constavam da lista das substncias autorizadas para esses fins, sendo seu uso permitido somente sob exclusiva responsabilidade da Superintendncia de Campanhas de Sade Pblica , a SUCAM., vinculada ao Ministrio da Sade. Em julho de 1989 a Lei n 7.802, dispe sobre a pesquisa, produo, experimentao, embalagem e rotulagem , transporte, armazenamento, comercializao, propaganda comercial, utilizao, importao, exportao, destino final de resduos e embalagens, registro, classificao, controle, inspeo e fiscalizao de agrotxicos, seus componentes e afins. Para tanto define pesticidas e afins: "os produtos e os agentes de processos fsicos, qumicos ou biolgicos, destinados ao uso nos setores de produo, armazenamento e beneficiamento de produtos agrcolas, nas pastagens, na proteo de florestas, nativas ou implantadas, e de outros ecossistemas e tambm de ambientes urbanos, hdricos e industriais, cuja finalidade seja alterar a composio da flora ou da fauna, a fim de preserv-las da ao danosa de seres vivos considerados nocivos." Em 1993, uma nova portaria do Ministrio da Agricultura proibiu o uso do Mirex e do Aldrin (Bortoleto, 1993) e, finalmente em 1998 o Ministrio da Sade proibiu o uso tanto no agricultura quanto para uso domstico de Aldrin, Endrin, Heptaclor, HCH, Lindano (ismero -HCH) e do DDT (Portaria n11 M.S / D.O.U., 21.01.98).

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1. 4 - Leite Humano

1.4.1- Caractersticas bioqumicas: O leite, seja ele animal ou humano, considerado quimicamente como uma disperso coloidal composto por molculas complexas como acares, vitaminas lipossolveis e sais minerais. As protenas e o fosfato de clcio encontram-se em disperso coloidal, j o material graxo, ou os glbulos de gordura, encontram-se emulsificados e em suspenso na fase aquosa. O leite considerado uma emulso diluda, uma vez que possui uma partio entre sua fase aquosa e sua fase lipoflica (Pic, et al.,1994).

1.4.2 -Sntese O leite humano um fluido aquoso cujas caractersticas descritas acima lhes confere a propriedade de particionar muito bem substncias e molculas, tanto polares e hidrossolveis, como molculas lipossolveis. O leite secretado logo aps o parto por estmulo do hormnio esteroidal hipofisrio, prolactina. A prolactina age sobre as clulas alveolares da mama estimulando a assimilao intensa e rpida de material graxo, proveniente do tecido adiposo ou de reserva materno. Durante essa fase, compostos qumicos acumulados nesse tecido, devido ao seu carter lipossolvel tambm so incorporados produo do leite (Sim & Mc Neil.,1992). Durante a produo do leite observa-se um rpido equilbrio, facilitado principalmente pelas lipoprotenas plasmticas, entre os compostos qumicos presentes no leite produzido nas clulas alveolares da mama, sendo o contedo dessas substncias similar ao encontrado no tecido adiposo (Gallenberg, 1989). Durante o perodo de lactao, uma mulher capaz de produzir aproximadamente 600-800 ml de leite por dia. Vrios so os fatores que interferem nessa quantidade, dentre elas o estado nutricional da me, a idade e intensidade de suco do beb (Wilson et alii., 1980).

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Em lactantes, o leite materno pode se tornar a principal rota excretora de substncias persistentes, em sua maioria lipoflicas, que so armazenadas no organismo principalmente no tecido adiposo (Gallenberg L.A, 1989). Estudos demonstram que as concentraes encontradas em leite so similares quelas encontradas em tecido adiposo como tambm no plasma sangneo (Eyster, 1983). Esse dado de fundamental importncia para estudos epidemiolgicos, uma vez que a anlise do leite materno pode servir de indicador de dose interna para qumicos lipoflicos como os pesticidas organoclorados, fornecendo uma estimativa da carga corprea desses compostos em indivduos de uma dada populao. Compostos lipoflicos no halogenados so mais rapidamente metabolizados e eliminados , no se acumulando portanto no organismo. Nesses casos, a anlise do leite materno no capaz de refletir uma exposio passada, no sendo til por exemplo na avaliao de certos tipos de poluentes ambientais, como os metais e compostos no orgnicos que no se acumulam em tecido adiposo. Para a avaliao da exposio desses compostos o leite materno poderia apenas refletir uma exposio recente. Observa-se que o leite materno pode ser usado como um bom indicador de dose interna e de exposio passada para compostos cuja lipossolubilidade e potencial de bioacumulao sejam elevados, alm claro de possurem uma baixa taxa de metabolizao, esse o caso dos compostos em estudo, os organoclorados (Sim & Mc'Neil, 1992).

1.4.3 -Fatores que modificam os nveis de compostos lipoflicos no leite Alguns fatores podem alterar significativamente a concentrao desses compostos no leite, uma vez que so mltiplas as alteraes fisiolgicas que ocorrem durante a gravidez e o perodo subsequente ao parto, que o perodo da lactao. So eles: A -Teor de gordura do leite Sendo os pesticidas organoclorados lipoflicos, presumvel que sua partio no leite materno se d significativamente na fase gordurosa do leite. Analisando o leite total, observou-se que leites que possuam maior contedo lipdico tambm possuam
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nveis mais elevados de compostos lipoflicos, simplesmente devido ao fato de que sabidamente esses compostos se particionam mais em gordura. Entretanto importante ressaltar que os nveis de gordura no leite materno alteram-se significativamente durante a lactao (Casey, 1983). Para excluir essa fonte de variao, os resultados da concentrao de pesticidas organoclorados em leite materno devem ser expressos em relao ao percentual de gordura do leite, e no em relao ao leite total. Um estudo importante em que utilizamse os valores encontrados no leite total o estudo da ID ou ingesto diria do beb, no qual calcula-se o quanto desses compostos ingerido pelo beb durante a amamentao, considerando o volume de leite ingerido diariamente.

B -Peso materno Durante o equilbrio, a concentrao de organoclorados na gordura, tanto na me obesa quanto na me cujo peso considerado normal, sero semelhantes. Entretanto nas mes obesas a carga total durante o equilbrio poder ser maior, assim como ser maior tambm o tempo necessrio para que esse equilbrio se estabelea. Caso o tempo de exposio seja tal que permita que o equilbrio se estabelea, no necessrio que sejam feitos ajustes em relao ao peso corporal ou ao ndice de massa corprea. Esse ajuste em relao ao ndice de massa corprea torna-se importante no caso de compostos que possuem uma meia-vida curta onde o equilbrio no chega a ser alcanado (Mller et al., 1991). Mudanas no peso corpreo durante semanas ou meses antes da amostragem podem tambm influenciar os nveis de qumicos presentes na gordura do leite. Durante a gravidez, a variao do peso bastante significativa , e a perda de peso no perodo logo aps o parto faz parte do processo da produo do leite materno. A produo do leite pelas clulas alveolares da mama provocam um processo intenso de liplise da gordura armazenada no tecido adiposo. Durante a liplise os compostos lipoflicos presentes na gordura so tambm mobilizados e redistribudos, levando a um aumento dos nveis plasmticos desses compostos o que pode sugerir uma exposio maior do que a real. Por isso, para estudos epidemiolgicos torna-se importante se averiguar o peso materno durante a gravidez e durante a amamentao, para que se possa observar mudanas significativas (Sim & Mc'Neil, 1992).
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C -Durao da Lactao Uma vez que a amamentao representa a principal via de excreo de compostos lipoflicos, a concentrao desses compostos tende a diminuir em mulheres que esto amamentando (Sim & Mc'Neil, 1992). Estudos demonstram que a diminuio desses nveis se faz mais intensamente nos primeiros perodos de amamentao, portanto na amostragem deve-se levar em conta ou considerar o perodo de tempo aps o parto (Jensen et al., 1990) ou controlar este importante fator de confundimento na anlise. D -Nmero de Gestaes Devido a diminuio progressiva dos qumicos no organismo materno com a amamentao, foi observado que mulheres primparas possuem nveis maiores desses compostos no leite do que mulheres que amamentaram um maior nmero de crianas (Yakushiji, 1978). Outro fator que interfere na carga de qumicos no leite o tempo entre uma gravidez e outra, em caso de mes multparas. Em mulheres cujo espao entre as gestaes maior, existe a possibilidade de que haja um aumento dos nveis de qumicos, caso a exposio continue. Por isso, em estudos epidemiolgicos, para que se possa controlar essas variaes, costuma-se escolher mulheres primparas, ou mulheres com o mesmo nmero de filhos.

E -Idade materna Como os compostos lipoflicos acumulam com o tempo de exposio at que o "steady-state" seja alcanado, compreende-se que exista um a correlao positiva entre os nveis de qumicos na gordura do leite e a idade materna, mas apenas para idades antes que o "steady-state" tenha sido atingido. No caso de qumicos como os PCB's, o estado plat dificilmente atingido antes do incio da lactao (Yakushiji, 1978)

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1.5 - Rede de Bancos de Leite

Em 1985, atravs de uma ao conjunta realizada pela Fundao Oswaldo Cruz e o Programa Nacional de Incentivo ao Aleitamento Materno - PNIAM, teve incio o desenvolvimento de um sub-programa com vistas a promover a expanso dos Bancos de Leite Humano no Brasil. Naquele momento, o pas contava com pouco mais de uma dezena de Bancos de Leite Humano. Estas unidades de servio, com maior ou menor grau de dificuldade operacional, foram reordenadas no intuito de serem transformadas em locais de promoo do aleitamento materno. Mais do que coletar leite, o objetivo passou a ser a promoo da amamentao natural, direcionando esforos, num primeiro momento para os fatores que dificultam a amamentao nas unidades de ateno terciria. Em uma dcada, o Brasil experimentou uma expanso nunca antes registrada na histria dessas unidades de servio. De pouco mais de uma dezena de unidades em 1985, o Pas passou a contar com mais de 100 unidades. A Rede Nacional de Bancos de Leite Humano uma iniciativa do Ministrio da Sade, desenvolvida atravs da Secretaria de Polticas de Sade (rea de Sade da Criana e Aleitamento Materno) e da Fundao Oswaldo Cruz (Instituto Fernandes Figueira), cuja misso promover a sade da mulher e da criana mediante a integrao e a construo de parcerias com rgos federais, as unidades da federao, os municpios, a iniciativa privada e a sociedade, no mbito de atuao dos Bancos de Leite Humano. ( http://www.fiocruz.br/redeblh/port/rede_nacional.htm)

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1.5.1 -O Banco de Leite Humano O Banco de leite humano um centro especializado, vinculado a um hospital materno/infantil, responsvel pela promoo do incentivo ao aleitamento materno e execuo das atividades de coleta, processamento e controle de qualidade de colostro, leite de transio e leite humano maduro, para posterior distribuio, sob prescrio do mdico ou de nutricionista. O Banco de Leite do IFF, situado na maternidade do Instituto Fernandes Figueira, no bairro do Flamengo, no Rio de Janeiro, considerado um centro de referncia. Recentemente o Instituto Fernandes Figueira foi reconhecido pelo Fundo das Naes Unidas para a Infncia (UNICEF) , Organizao Mundial de Sade (OMS), e Ministrio da Sade, como Hospital Amigo da Criana. O ttulo foi conferido pela atuao, apoio e promoo ao aleitamento materno. Isso se deve muito ao fato do Banco de Leite Humano do IFF ser o responsvel pela coordenao da Rede Nacional de Bancos de Leite Humano. Alm disso, o Instituto tambm foi reconhecido como Centro de Referncia Nacional de Promoo da Sade para o Programa de Sade da Criana pelo Ministrio da Sade. (http://www.fiocruz.br/redeblh/port/rede_nacional.htm)

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Tabela 3: Produo do Banco de Leite Humano do IFF no ano de 1999 1semestre Atendimento Atividades Assistenciais Visita Domiciliar Total 404 1.709 575 2.449 Individual 2semestre

1.305

1.874

Coletado (litros) Coleta e Distribuio de Leite Humano Ordenhado Distribudo (litros)

411.650

505.182

366.610

493.361 201 93

Doadoras no perodo 122 Receptores perodo no 75

Controle de Qualidade (Anlises)

Microbiolgicas Total

2.279 2.279

2.643 2.643

(http://fiocruz.br/redeblh/port/rede_nacional.htm)

A Tabela 3 mostra a produo do Banco de Leite do IFF em relao s atividades assistenciais, coleta do leite materno e testes de controle microbiolgico e fsico-qumicos, nos 1 e 2 semestres de 1999.

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O leite doado ao Banco passa por vrias etapas de processamento at poder ser finalmente consumido.

1.5.2 -Etapas de processamento do leite humano no Banco de Leite do IFF:

Coleta A coleta residencial feita atravs da chamada Rota de Coleta. Atravs de um convnio firmado entre o Corpo de Bombeiros, um destacamento de soldados e sargentos-bombeiros, pertencentes ao quadro de sade, percorrem os diversos bairros do Rio de Janeiro e Grande Rio, onde existam mulheres doadoras. A rota, baseada nas reas de Planejamento em Sade, ou AP's que dividem as unidades de sade do municpio por regio (bairros ou municpios), percorre diversos bairros coletando amostras de leite das doadoras cadastradas. Atualmente, o Banco dispe de cinco rotas semanais (2a 6a) em dois turnos dirios, manh e tarde. A rota de domingo alternada semanalmente. Bairros de abrangncia da rota: 1 - Segundas- feiras: Bairros da Zona Sul (Botafogo, Cosme Velho, Flamengo, Glria, Humait, Jardim Botnico, Lagoa, Laranjeiras, Urca, Copacabana, Ipanema e Leblon). 2 -Teras-feiras: Centro, Estcio, Bairro de Ftima, Catumbi, Santo Cristo, Santa Teresa, Tijuca, Maracan, Graja, Andara, Praa da Bandeira, Rio Comprido, Vila Isabel, Alto da Boa Vista, Niteri e So Gonalo. 3 -Quartas-feiras: Zona da Leopoldina (Bonsucesso, Brs de Pina, Cordovil, Ramos, Iraj, Olaria, Penha), Vila da Penha, Vaz Lobo, Higienpolis, Jardim Amrica, Anchieta, Colgio, Nova Igua, Honrio Gurgel, Mesquita, So Joo de Meriti, Queimados, Mag e Duque de Caxias. 4- Quintas-feiras: Bento Ribeiro, Cascadura, Piedade, Abolio, Engenho de Dentro, Engenho Novo, Lins de Vasconcelos, Rocha, Riachuelo, So Francisco Xavier, Maria da Graa, Mier, Benfica, Del Castillho, Inhama, Toms Coelho, Pilares, Turia,

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Guadalupe, Mallet, Madureira, Marechal Hermes, Oswaldo Cruz, Realengo, Padre Miguel, Bang, Santssimo, Campo Grande. 5 -Sextas-feiras: Barra da Tijuca, Pedra de Guaratiba, Barra de Guaratiba, Recreio dos Bandeirantes, So Conrado, Gvea, Jacarepagu. Segundo o Manual Tcnico da Rede Nacioanl de Bancos de Leite: As coletas realizadas em enfermarias e domiclios precisam de um maior rigor quando comparadas s efetuadas em recinto apropriado e exclusivo para este fim, tendo em vista as diferentes formas de contaminao e a maior dificuldade de controle. As doadoras so, por definio, mulheres saudveis que apresentam secreo lctica superior s exigncias de seus filhos e que se dispem a doar o excedente por livre e espontnea vontade. Ao procurar o Banco para uma doao a voluntria submetida a uma detalhada anamnese, que procura determinar atravs de um exame fsico da doadora aspectos clnicos relevantes. As doadoras que sejam portadoras de molstias infecto-contagiosas ou que se encontrem em risco nutricional sero inaptas para a doao, a critrio mdico. Em algumas instituies o uso de sapatilhas ou correlatos, de acordo com a regulamentao, utilizado tambm visando manter a higienizao do ambiente.

Transporte

O leite deve ser transportado do local de coleta ao Banco de Leite em embalagens adequadas e especficas (homologadas). O Banco de Leite considera homologados frascos tipo maionese/nescaf ou similar, alm de mamadeiras, chucas e correlatos, frascos plsticos para acondicionamento de material clnico destinado anlises microbiolgicas. Os frascos so colocados em caixas isotrmicas, preferencialmente revestidas com PVC, contendo "gelo reciclvel" em quantidade proporcional ao nmero de frascos de leite humano ordenhado.
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Ao manter o leite a baixas temperaturas, evita-se a proliferao de microrganismos, resultando em um produto de melhor qualidade. Na impossibilidade de se dispor de "gelo reciclvel", o leite congelado deve ser transportado na caixa isotrmica sem gelo. Esses cuidados so necessrio para assegurar que o produto transportado mantenha a mesma qualidade desde a coleta da doadora at ao consumidor.

Processamento Seleo e Classificao

O produto cru, ao chegar ao Banco de Leite, deve ser imediatamente submetido seleo e classificao e ao tratamento de conservao especfico, caso contrrio, dever ser estocado cru, mas nas mesmas condies a que foi submetido desde a coleta, pelo menor tempo possvel. Avalia-se as condies de conservao em que o leite se encontra no momento da recepo, verificando se a embalagem adequada sob o ponto de vista de vedao, tipo de material, etc. A limpeza da parte externa do frasco feita com lcool a 70%. Este procedimento tem a funo de reduzir a presena de contaminantes nos freezeres e geladeiras.

Acondicionamento e Embalagem (Reenvase) Os frascos utilizados para o reenvase do leite so frascos homologados e que tenham sido devidamente esterilizados. Os frascos que apresentam sujidades no interior, so imediatamente descartados. Alm disso, deve-se observar o prazo de validade da esterilizao. Os produtos que chegam ao Banco congelados so submetidos a degelo prvio. A manipulao do leite deve ser feita sempre em campo estril que pode ser obtido com
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o auxlio de uma lamparina a lcool ou um bico de bunsen, evitando desta forma a contaminao do produto. O reenvase tambm feito em campo de chama, segundo volumes adotados pelo Banco de Leite. Pasteurizao Um dos processos mais importantes ao qual o leite humano submetido, o processo de pasteurizao. A pasteurizao responsvel pela inativao de microorganismos patognicos presentes no leite materno, inclusive do HIV (Fogliano, 2000). A temperatura de pasteurizao de 62,5C por 30 minutos, e prtica obrigatria para todos os Bancos de Leite no Brasil (Portaria no 322 - MS). importante salientar que a temperatura de inativao do vrus HIV de 56C por 30 minutos (Ziegler e col.,1989). Somente o leite pasteurizado, cujo teste microbiolgico feito para enterobactrias, deu negativo que ser considerado prprio ao consumo.

Distribuio O leite humano ordenhado deve ser distribudo de acordo com os critrios estabelecidos pela Portaria no322 de 1988, do MS. Normalmente so selecionados como receptores os lactentes que apresentam uma ou mais das indicaes que se seguem: Prematuros e recm nascidos de baixo peso que no sugam; Recm-nascidos infectados, especialmente com enteroinfeces; Portadores de deficincias imunolgicas; Portadores de diarria protrada; Casos excepcionais, a critrio mdico; Portadores de alergia a protenas heterlogas. (http://www.fiocruz.br/redeblh/pot/manual_tec/manual_tecnico.htm)

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1.6 - Objetivos
Gerais Embora haja uma tendncia diminuio dos nveis residuais de pesticidas organoclorados ambientais, devido a severa restrio do uso da maioria dos organoclorados, a persistncia desses compostos nos organismos vivos torna necessrio um monitoramento capaz de acompanhar e quantificar os nveis desses compostos na populao no exposta para avaliar possveis exposies passadas e suas origens. O objetivo desse trabalho o de quantificar, atravs da dosagem em leite humano, os nveis de pesticidas organoclorados persistentes (p,p'DDT, p,p'DDE, , e -HCH, HCB, Aldrin, Dieldrin, Endossulfan 1 e 2 , Mirex (dodecacloro), Metoxicloro e Clordano) em mulheres doadoras do Banco de Leite do Instituto Fernandes Figueira (IFF/FIOCRUZ) / RJ, avaliando dessa forma o nvel de contaminao por pesticidas organoclorados, com uma amostragem bem distribuda e representativa da populao feita utilizando-se o servio de coleta do Banco de Leite do IFF.

Especficos Estimar os nveis de organoclorados em mulheres no expostas ocupacionalmente, na cidade do Rio de Janeiro, atravs de dados amostrais de doadoras do Banco de Leite do Instituto Fernandes Figueira (IFF/FIOCRUZ) ; Calcular o valor da ingesta diria dos bebs amamentados e comparar com os valores da IDA(ingesta diria aceitvel) estabelecida pela FAO/OMS (Codex Alimentarius);

Anlise das variveis reprodutivas e dos hbitos de vida como possveis determinantes dos nveis de organoclorados no leite das doadoras.

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Captulo II - Materiais e Mtodos

2.1 -Amostragem
As amostras de leite humano foram coletadas nos meses de setembro e outubro de 2000, durante o processamento do leite doado ao Banco de Leite Humano do Instituto Fernandes Figueira, IFF/FIOCRUZ. Na primeira etapa do processamento, o leite humano ordenhado proveniente da doao domiciliar (rota) chega ao Banco de Leite congelado. A doadora cadastrada como doadora domiciliar retira o leite excedente e o acondiciona em frascos ditos homologados. Para efeito deste trabalho, somente foram coletadas amostras provenientes de frascos de vidro, uma vez que embalagens de plstico podem adsorver gordura e conseqentemente, as substncias de interesse. A doadora instruda congelar imediatamente o leite aps a coleta e comunicar ao Banco que se encarrega de transportar o leite congelado do domiclio da doadora, cujo bairro j se encontra cadastrado, em uma das rotas, at o Banco. Cada nova doadora de um bairro ainda no cadastrado tem seu bairro anexado rota. As amostras so levadas ao banco em caixas trmicas, e chegam ainda congeladas.

2.1.1 -Descongelamento e reenvase Apenas os frascos devidamente etiquetados e estocados no freezer so descongelados para a etapa de reenvase. Durante o processo de reenvase os leites so acondicionados em frascos homologados limpos e esterilizados, e o leite de uma doadora que muitas vezes chega em dois ou mais frascos ser colocado em apenas um, perfazendo um volume final de aproximadamente 400 ml por frasco. Em alguns casos, o leite de duas ou at de no mximo trs doadoras so misturados em um mesmo frasco, em um "pool". importante salientar que a coleta das amostras deste estudo foi feita antes do reenvase.

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Um volume de 10 ml foi coletado em frascos mbar sob campo estril (bico de Bunsen). As amostras foram transportadas at o Laboratorio de Toxicologia do CESTEH /ENSP, resfriados a temperatura de 4C em caixas trmicas e chegando ao laboratrio foram imediatamente congeladas -20C at o momento da anlise. Durante os meses de setembro e outubro foram coletadas em torno de 100 amostras de leite, das cinco rotas domiciliares, que foram congeladas. Alm das amostras de leite, as doadoras voluntrias foram posteriormente visitadas em seus residncias e solicitadas a responder um questionrio (anexo) sobre hbitos de vida, histrico reprodutivo, da gravidez atual e anteriores e sobre o beb amamentado. As entrevistas que foram agendadas previamente ocorreram nos meses de outubro e novembro de 2000. Apenas as doadoras que responderam ao questionrio e assinaram o termo de consentimento assumindo que participavam voluntariamente do estudo tiveram suas amostras de leite analisadas, as amostras analisadas foram 50, como mostra a tabela abaixo (Tabela 4). Tabela 4: Nmero de amostras analisadas por rota. Rota Rota 1 (Zona Sul) Rota 2 (Centro, Tijuca, Niteri) Rota 3 (Zona da Leopoldina, Duque de Caxias) Rota 4 (Zonas Norte /Oestea) Rota 5 (Barra da Tijuca , Jacarepagu) Total Nmero de amostras 15 8 12 10 5 50

Oestea : Excetuando-se a Barra da Tijuca, Pedra de Guaratiba, Barra de Guaratiba e Recreio

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2.2- Reagentes e Solues

Acetona J.T Baker - Ultra - Resi Analized, 99.4 %; Acetonitrila J.T Baker - grau HPLC, 100,0%; n Hexano J.T Baker - Ultra resi Analized (analisado para total de ismeros saturados C6, 99,5%;

Metanol para anlise de resduos - Omnisolv, grau HPLC 99,91%; Acetato de Etila J.T Baker - Ultra Resi Analized, 99,6%; gua Milli Q; Extran MA 02 (neutro) Merck, soluo 1%; Padres de Pesticidas Accu Standard, todos com graus de pureza conhecidos; Solues padro individuais com concentraes variadas em torno de 500 g/ml: cada padro foi pesado em balana analtica, com preciso de 0,01mg e solubilizado em n-hexano, em balo volumtrico com tampa de vidro esmerilhada;

A mistura padro de pesticidas para a fortificao do leite humano, utilizado nos ensaios de validao do mtodo foi preparada uma mistura dos pesticidas , e HCH, HCB, heptaclor, aldrin, e clordano, endossulfan I e II, p,p'DDE, , p,p'DDT, p,p'DDD, transnonaclor, dieldrin, metoxyclor e mirex com concentraes conhecidas de cada um dos padres;

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Mistura de extrao: acetato de etila/metanol/acetona na proporo 2:4:4, respectivamente;

2.3- Lavagem do material

A anlise de traos requer certos cuidados especiais tambm durante a lavagem da vidraria utilizada. O procedimento de lavagem deve, principalmente, retirar as substncias que possam vir a agir como interferentes nos resultados da anlise, no caso de compostos orgnicos clorados. A vidraria utilizada imersa por um perodo mnimo de duas horas em Extran MA neutro (Merck) 1%, sendo em seguida lavada abundantemente com gua Aps a lavagem e a secagem do material em estufa, estes so ento rinsados com acetona e n-hexano, nessa ordem, procedimento esse tambm executado antes da lavagem com gua, o qual chamamos descontaminao do material. O material aps rinsado e seco ento guardado em cubas fechadas e protegidos com papel alumnio. corrente e gua destilada.

2.4 - Vidraria
Pipetas volumtricas de vidro, capacidades de 0.5;1,2,5 e 10 ml; Bales volumtricos de vidro, capacidades 5, 10, 25 e 50 ml ; Provetas graduadas de vidro, capacidades 15, 25, 50 e 100ml; Erlenmeyer com tampa de rosca com capacidades de: 25, 50 e 100ml; Cachimbo de vidro para pesagem de padro; Tubos de vidro graduados, capacidade 15ml;

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Funil analtico de vidro; Frascos de vidro mbar com tampa de rosca, capacidades 5,15 e 25 ml para estocagem de solues-padro; Frascos de vidro com tampa para estocagem de leite materno; Obs.: toda a vidraria foi submetida aos processos de lavagem apresentados no tem 2.3.

2.5 - Equipamentos e condies operacionais

Cromatgrafo a gs HP 5890 series II, com detetor de captura de eltrons 63Ni ; Coluna capilar HP 5% Fenil Metil Silicone, 25 metros de comprimento; 0.1 mm de dimetro interno; 25 m espessura de filme; Ultrassom Branson 5210; Balana analtica Methlercom resoluo de 0.1mg; Vrtex Maximix II - Thermolyne Type 37600 mixer; Centrfuga Excelsa Baby II - Modelo 206 -R; Rotavapor R144 - Bchi Switzerland; Integrador HP 7673A. Colunas de SPE-PACK C18 (octadecilslica) e Florisil (SiOn).

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2.6- Metodologia Analtica

O procedimento analtico utilizado para a determinao de pesticidas organoclorados nas amostras de leite materno foi o mtodo descrito por Stevenson et al.,1991 modificado e compreende as seguintes etapas:

2.6.1-Extrao As amostras aps descongeladas foram aliquotadas em tubos graduados em um volume de 1ml, colocados em banho-maria de 37C por 20min. amostra adicionou-se 10 ml da mistura acetato de etila/metanol/acetona nas propores de 2:4:4. A mistura submetida a vrtex por 1 minuto e em seguida 20 minutos de ultrassom. Em seguida, a amostra foi centrifugada por 15 minutos aproximadamente 2000 rpm e fase orgnica foi adicionada 10 ml de gua. Essa mistura foi passada pela coluna de spe pack C18 prcondicionada. Pelo fato do leite ser uma matriz extremamente rica em gordura, e ser justamente nessa frao lipdica que esto os compostos de interesse importante que o mtodo proposto para a extrao seja eficiente com relao extrao de gorduras, evitando-se assim a ao dos interferentes no processo de anlise.

31

Extrao em fase slida (Colunas Spe Packde octadecil slica, C18 ) O sobrenadante contendo a fase orgnica passado pela coluna SPE PACKde C18 (octadecil slica) pr-condicionadas com 2 x 1ml de n-hexano, 2 x 1ml de acetato de etila, 2 x 1ml de metanol e 2 x 1 ml de gua destilada. Ao sobrenadante obtido atravs da extrao so adicionados 10 ml de gua destilada. A mistura passada pela coluna de octadecil slica sob um fluxo de 6 a 8 ml/min. Ao final, a coluna lavada com 2 x 1ml de soluo aquosa de acetonitrila 25% e ento os pesticidas retidos na coluna so eludos com 1ml de n-hexano.

2.6.2- Clean up com colunas de Florisil (SiOn) O produto eludo da coluna de C18, passado por uma coluna de Florisil prcondicionada com 25 ml de diclorometano, 10 ml de acetato de etila, 10 ml da mistuira acetona em ter de petrleo 15% e 10 ml de hexano. O pesticida eludo com 10 ml de hexano mais 5 ml da mistura acetona em ter de petrleo 15%. O volume total de 15 ml evaporado 1ml onde ento so adicionados 100 l do padro interno, DCN (1,2 dicloronaftaleno) uma concentrao de 108 ng.ml-1. O padro interno utilizado no mtodo de Stevenson o Aldrin, um composto bastante utilizado na indstria madeireira, no combate aos cupins. Uma vez que o aldrin ainda encontrado em estudos multiresiduais no Brasil, provavelmente devido ao seu uso ainda ser permitido para o tratamento de madeiras, o DCN foi selecionado como padro interno j que tambm um composto organoclorado que apresenta caractersticas semelhantes aos pesticidas estudados, embora no seja utilizado como tal, e que fornece uma resposta semelhante no detetor de captura de eltrons. A anlise feita em cromatografia gs-lquido de alta resoluo com detetor de captura de eltrons, injetando-se 3l da amostra eluda com n-hexano nas seguintes condies cromatogrficas

32

2.6.3- Anlise Cromatogrfica Parmetros Cromatogrficos Injetor Modo: sem diviso de fluxo (splitless); Temperatura: 240C Presso: 15 psi Gs de arraste : Hidrognio ultra puro; Gs de "make up": Nitrognio ultra puro; Fluxo da coluna: 1ml/min; Modo: presso constante Detetor Temperatura: 300C Fluxo do "make up": 70ml/min

Rampa

Velocidade ( C/min)

Temperatura ( C) 110C 200 280

Tempo final (minutos) 1 3 20

1 2 3

0 3,0 60

Tempo total: ~ 70,33 minutos.

33

2.7-Qualidade Analtica
Todo processo analtico depende de que a qualidade da informao analtica seja suficientemente confivel, com preciso e exatido adequadas ao objetivo estabelecido. A validao de um mtodo o processo de assegurar que uma metodologia analtica aceitvel para o propsito ao qual se destina, ou seja, validar significa estabelecer a qualidade de um procedimento analtico, determinando de modo claro e objetivo os parmetros dos mesmos (Green, 1996). Todas as medidas analticas quantitativas so sujeitas a vrios erros e essencial que sejam realizados experimentos que permitam a estimativa desses erros, (Miller & Miller, 1988). A anlise de resduos afetada por fatores de procedimento como extrao, purificao, concentrao, etc. que podem influenciar na recuperao. Os erros, em anlises de traos, so tambm atribudos s dificuldades em identificar uma resposta relativamente baixa, acima de um rudo alto e varivel. O estudo da exatido do mtodo foi determinado atravs da recuperao das substncias estudadas que foram adicionadas matriz de interesse, no caso o leite em uma faixa de concentrao apropriada, ou a faixa de linearidade do detector (Conacher, 1990). A curva de recuperao do mtodo foi obtida atravs da fortificao de leite de vaca comercial semi-desnatado com quantidades conhecidas dos pesticidas de interesse. As etapas de fortificao, segundo o mtodo de Stevenson, foram: a) uma alquota de 50 ml de leite semi-desnatado foram adicionados 2ml de uma mistura padro aproximadamente 500ng.ml-1, obtendo-se portanto uma mistura aproximadamente 20ng.ml-1. Essa mistura foi aliquotada em cinco tubos graduados cada um com um 2ml, partir de onde foram feitas diluies seriadas de : 20, 10, 5, 2,5, 1,25ng.ml-1. b) As amostras fortificadas foram submetidas ao mtodo analtico j descrito e os resultados da recuperao so apresentados no captulo de resultados.

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Outro importante parmetro analtico a preciso, ou grau de concordncia entre os resultados obtidos, quando uma amostra homognea analisada vrias vezes pelo mesmo mtodo em estudo sob idnticas condies de anlise. Pode-se expressar a preciso atravs do desvio padro ou desvio padro relativo dos resultados obtidos (Chasin et al.,1994: Moraes, 1998). O estudo de reprodutibilidade intraensaio do mtodo foi feito atravs da fortificao das amostras de leite de vaca com trs nveis diferentes de concentraes (1,25; 5 e 10 ng.ml-1), injetadas cinco vezes cada. Foram calculadas as mdias e o desvio padro das cinco injees para cada concentrao e seus respectivos coeficientes de variao. Para a avaliao da variabilidade interensaio, trs amostras nas concentraes 1,25; 5 e 10 ng.ml-1 foram extradas por dia, durante cinco dias . Foram calculados os coeficientes de variao para cada concentrao. O limite de deteco do mtodo foi determinado segundo as normas da IUPAC, calculando-se trs vezes o desvio padro do branco ou a menor concentrao detectada correspondente ao desvio do rudo de fundo para cada substncia.

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Captulo III - Resultados e Discusso

3.1- Validao da Metodologia

O estudo da lineridade de resposta do detector foi feito para as substncias de interesse no estudo na faixa de 1,25 a 20 g.l-1. Os valores de r variaram de 0,9899 a 0,9991, demonstrando uma relao linear entre a resposta do detector e 5 nveis de concentrao (1,25; 2,5; 5; 10 e 20 g.l-1), com cinco curvas para cada pesticida (Tabela 5).

Tabela 5: Linearidade de resposta do detector de captura de eltrons (HP 6890) para a faixa de concentrao 1,25 - 20 g. l-1).

Substncia
- HCH
HCB

a
1,570x 10-5 1,05 x 10 6,20 x 10 2,44 x 10 8,34 x 10 3,11 x 10
-5 -5 -5

b
- 1,250 - 0,2030 - 2,050 - 1,366 - 0,06000 - 1,9138 - 1,969 - 1,579 - 0,2910 - 1,451 - 1,451 0,01900 - 1,679 - 0.2180 - 1,550

r
0,9964 0,9899 0,9901 0.9992 0,9907 0,9909 0,9950 0,9991 0,9898 0,9985 0,9985 0,9912 0,9900 0,9909 0,9897

- HCH - HCH
Aldrin

1,36 x 10-5
-6

- clordano
Endossulfan 1 Endossulfan 2 Transnonacloro Dieldrin p,p'DDT p,p'DDE p,p'DDD Metoxicloro Mirex

1,06 x 10-5
-5 -5

1,303 x 10 2,47 x 10 1,25 x 10 2,56 x 10 2,32 x 19 1,22 x 10

2,78 x 10-5
-5 -5 -5 -5 -5

a - coeficiente angular da reta r- coeficiente de correlao b- coeficiente linear da reta

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A exatido foi avaliada atravs da recuperao das substncias estudadas que foram adicionada a matriz de interesse, no caso foi utilizado o leite de vaca semidesnatado comercial. Foram realizadas fortificaes, por adio de quantidades conhecidas de cada padro, ou seja, concentraes que encontram-se dentro da faixa de linearidade do detector. Os resultados da recuperao para 3 nveis de concentrao encontram-se na Tabela 6.

Tabela 6: Percentual de recuperao dos pesticidas submetidos ao mtodo (Stevenson, 1991) Recuperao % Substncia
1,25ng.g-1 5ng.g-1 20ng.g-1

HCH
HCB HCH HCH Aldrin clordano Endossulfan 1 Dieldrin Transnonaclor p,p'DDE Endossulfan 2 p,p'DDD p,p'DDT Metoxycloro Mirex

98,1 75,5 73,2 98,3 74,1 82,2 102 100 96,6 90,3 90,5 99,3 90,5 88,3 80,3

97.3 88,3 80,4 101 80,5 82,2 99,1 88,3 90,4 93,5 85,6 98,6 74,4 80,6 71,5

99,0 73,3 77,1 99,3 85,6 88,4 92,9 102 88,9 81,4 87,5 110 81,8 87,9 70,1

Os valores de recuperao para todas as substncias encontram-se dentro da faixa aceitvel para anlise de resduos (70 -100%) (Codex Alimentarius, 1996).

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A Figura 4 mostra graficamente a recuperao de alguns dos organoclorados estudados para a concentrao de 20 ng.g-1.

% Recuperao 20ppb
120 100 % Recuparao 80 60 40 20 0
CH H C b- B H CH gH gcl CH or da no en do en I do II al dr t-n on in ac lo di r el d p, rin p' D p, DE p' D D p, D p' m DD et ox T yc lo r m ire x H a-

Pesticidas

Figura 4: % de recuperao dos pesticidas estudados submetidos a todo processo analtico

Pode-se dizer que o parmetro preciso representa o grau de concordncia entre os resultados obtidos, quando uma mesma amostra analisada vrias vezes pelo mtodo de estudo, sob condies idnticas de anlise (Mello,2000). A preciso pode ser expressa pelo desvio padro ou desvio padro relativo (coeficiente de variao) entre os resultados obtidos. Para o estudo da preciso, amostras fortificadas com trs nveis de concentrao de 1,25; 2,5 e 5 ng.ml-1 foram extradas e injetadas 5 vezes, os resultados encontram-se na Tabela 7.

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Tabela 7: Reprodutibilidade do mtodo para extrao dos organoclorados obtido para trs nveis de fortificao (%CV). %CV Substncia
1,25ng.ml-1 2,5ng.ml-1 5ng.ml-1

HCH
HCB HCH HCH Aldrin -clordano Endossulfan 1 Dieldrin Transnonaclor p,p'DDE Endossulfan 2 p,p'DDD p,p'DDT Metoxycloro Mirex

3,4 2,8 3,5 3,6 3,0 2,2 2,2 5,8 2,8 4,0 3,7 2,9 3,5 2,8 4,0

2,3 2,1 2,4 2,6 2,3 1,6 1,5 3,8 2,1 3,0 1,7 2,0 2,5 1,2 3,0

2,0 1,7 2,3 2,9 1,8 1,2 1,2 3,7 1,6 2,4 2,9 1,7 2,2 1,7 2,4

Tabela 8: Limites de deteco do equipamento e do mtodo partir de solues padro de 0,5 ng.ml-1 e 1,0 ng.ml-1 Limites de deteco Substncia
Equipamento ng.ml
-1

Mtodo ng.ml-1

HCH
HCB HCH HCH Aldrin -clordano Endossulfan 1a Dieldrin Transnonaclor p,p'DDE Endrin p,p'DDDa p,p'DDTa Mirex
a -soluo padro 1,0 ng.ml-1

0,5163 0,0860 0,0211 0,1291 0,0861 1,8073 2,1515 0,4733 0,0430 0,0860 0,0770 0,7315 0,0861 1,7212

0,1026 0,1720 0,0042 0,0258 0,0172 0,0840 0,1000 0,0230 0,0030 0,0040 0,0035 0,0340 0,0040 0,0300

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Figura 3: Curvas de linearidade do p,p'DDT e Aldrin nas concentraes de 1,2520ng.ml-1

Curva de linearidade do p,p'DDT (1,25- 20mg.l-1)

900000 800000 700000 rea 600000 500000 400000 300000 200000 100000 0 0 5 10 15
-1

20

25

Concentrao em mg.l

Curva de linearidade do Aldrin (1,25 - 20 mg.l-1 )

1600000 1400000 rea 1200000 1000000 800000 600000 400000 200000 0

10

15

20

25

Concentrao em mg.l-1

A Figura 3 mostra a curva de linearidade para o p,p' DDT e Aldrin, fortificados com misturas padro nas de concentraes 1,25, 2,5, 5, 10 e 20 ng.g-1.

40

3.2 - Resultados da pesquisa dos hbitos de vida das doadoras participantes do estudo e dos nveis de organoclorados.
Os resultados apresentados abaixo so referentes aos dados coletados atravs do questionrio, no perodo em que foram feitas as coletas de amostras leite materno. Tabela 9: Valores mdios de caractersticas maternas Mdia Idade materna (anos) Renda familiar(R$) Nmero de pessoas por casa 29,2 2841,1 4,5 d.p 7,04 2466 2,3 Limites mx 40 10000 16 mn 17 151 2

A Tabela 9 mostra os valores mdios para variveis como idade materna, renda familiar nmero de pessoas que moram na mesma residncia que a doadora. Os dados revelam que a mdia de idade das doadoras do Banco de Leite do IFF, participantes do estudo de 29 anos com valor mnimo de 17 e mximo de 40 anos. A renda familiar mdia est em torno de R$ 2.800,00 e a doadora divide sua residncia em mdia com 5 pessoas. Outras caractersticas observadas foram que 100% das doadoras participantes do estudo sabem ler e 38% possuem o 3grau completo, 22% concluram o 2grau e 2% possuem o 1grau completo. Em relao habitao, 88% das participantes possuem saneamento bsico em suas residncias, 18% so residentes no Municpio do Rio de Janeiro ou Grande Rio por mais de 10 anos e 60% sempre morou no Rio de Janeiro e Grande Rio. A Figura 4 mostra em detalhe a distribuio percentual do tempo de residncia das doadoras do Banco de Leite do IFF participantes do estudo no Rio de Janeiro.

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Os resultados mostram que a maioria das doadoras sempre moraram no Rio de Janeiro desde o nascimento (60%). A menor freqncia foi observada para moradoras recentes, apenas (2%) .

Tempo de residncia no Rio de Janeiro

60 50 40 30 20 10 0 7m-1a 2-3a 4-6a 7-10a > 10a sempre

Figura 4: Tempo de residncia no Rio de Janeiro

7m -1a - 7 meses a 1 ano 2-3a - 2 a 3 anos 4 -6a - 4 a 6 anos 7 - 10a - 7 a 10 anos >10a - mais de 10 anos sempre - sempre moraram no Rio de Janeiro

A coleta externa do Banco de leite feita de acordo com uma rota diria, observando o disposto na Portaria n322 do Ministrio da Sade. Os diversos bairros da cidade onde existam doadoras so agrupados em uma determinada rota de acordo com a proximidade. Vale ressaltar que as rotas abrangem bairros do Rio e Grande Rio, ou municpios vizinhos.

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O grfico abaixo mostra a distribuio das doadoras que participaram deste estudo por bairros e municpios, divididos por rota:

Bairro onde reside - freqncia

rota 5 10% rota 4 20%

rota 1 30%

rota 3 24%

rota 2 16%

Figura 5: Freqncias de moradia por rota Rota 1: Botafogo, Copacabana, Leblon, Rocinha; Rota 2: Centro, Niteri, Tijuca, Rio Comprido; Rota 3: Duque de Caxias, Ilha, Jardim Amrica, Ramos, Iraj; Rota 4: Campo Grande, Realengo, Mier, Piedade, Pavuna; Rota 5: Barra da Tijuca, Recreio dos Bandeirantes, Jacarepagu. Os resultados demonstram que 30% das doadoras so residentes da Zona Sul do Rio de Janeiro (rota 1), 24% so residentes nos bairros da rota 3, ou seja, bairros da Zona da Leopoldina como Ramos e Iraj, assim como o Municpio de Duque de Caxias, que pertence a esta rota. A rota 4 a que abrange o maior nmero de bairros possui 20% das doadoras.

43

Alm de perguntas pertinentes aos hbitos de vida, as doadoras foram argidas respeito de caractersticas reprodutivas e do beb que estava sendo amamentado no momento do estudo. Em mdia as doadoras tiveram sua menarca (1 menstruao) com 12,5 + 1,10 anos, os bebs atualmente amamentados tem em mdia 4,6 + 3,03 meses e nasceram com 37,8 + 3,9 semanas. O peso dos bebs em mdia de 3058,8 + 711,3 g, com o valor mnimo de 610g e mximo de 4,450g. O tempo mdio que os bebs foram amamentados integralmente, ou seja, tendo o leite materno como fonte exclusiva de alimentao, foi de 3,69 + 1,5 meses.

3.3- Nveis de organoclorados encontrados no leite materno

Os nveis de pesticidas organoclorados encontrados nas amostras de leite materno das mes doadoras do Banco de Leite do IFF/FIOCRUZ encontram-se apresentados nas tabelas 9 e 10. A Tabela 9 expressa os valores em ng.g total, e a Tabela 10 expressa os valores em ng.ml
-1 -1

de gordura

de leite.

Observando os valores encontrados na Figura 8, verifica-se que os pesticidas que apresentaram maiores freqncias foram: o p,p'DDE 100% para as amostras analisadas, seguido do p,p'DDT 90%, do -HCH 84%, p,p'DDD 82% e Endossulfan I 78% e -clordano 74%. Pode-se portanto observar que os organoclorados mais encontrados foram os metablitos do DDT, primordialmente o p,p'DDE que o mais persistente e o -HCH. Das amostras analisadas foram encontrados ainda: -HCH 56%, -HCH (lindano) 32%, Aldrin e Dieldrin 54% e 52% respectivamente. Os valores encontrados para Aldrin e Dieldrin so coerentes uma vez que o Aldrin ao ser absorvido rapidamente metabolizado a Dieldrin (Sim & Mc,Neil). Embora com uma freqncia baixa foram ainda encontrados entre as amostras analisadas : HCB (12%), Transnonaclor (6%), Endrin (20%), Endossulfan II (14%), Metoxiclor (20%) e Mirex (38%).

44

3.3.1- Nveis mdios de organoclorados em ng.g -1 de gordura Os nveis mdios encontrados em ng.g mnimo de 18,08 ng.g.-1 . O -HCH apresentou nveis mdios de 253,3 ng.g-1 e nveis mximo e mnimo de 2626 e 2,362ng.g -1 respectivamente. Os resultados encontrados para p,p' DDT foram 23,8 ng.g
-1 -1

de gordura apresentados em base

lipdicas, na Tabela 9 foram: p,p'DDE 580,2 ng.g -1com valor mximo de 7292 ng.g-1

em mdia e valores mximo e mnimos de 169,3 e 0,9800 ng.g

-1

-1

respectivamente. O -HCH apresentou valores mdios de 15,70 ng.g -1 (1,830 - 100,9) e o -HCH, ou lindano apresentou valores mdios de 73,10 ng.g 13,9 ng.g -1 (1,330 - 86,36). O nvel mdio de Endossulfan I encontrado foi de 121,7 ng.g mximo de 943,5 ng.g -1 e mnimo de 2,1 ng.g -1 .
-1

(1,17 - 899,19).

Dentre os metablitos do p,p' DDT, o que apresentou nveis mais baixos foi o p,p' DDD , com valor

Freqncia percentual de Pesticidas Organoclorados

120

100 80 60 40 20 0

Figura 6: Freqncia percentual de pesticidas organoclorados

CH H CB bH CH gH CH A ld rin gcl or En do I tra ns D ie ld rin D D E D D D D D T En dr i En n do M II et ox y M ire x

aH

Pesticidas

45

3.3.2 -Nveis mdios de organoclorados em ng.ml -1 de leite Os nveis mdios expressos em ng.ml -1 (Tabela 10) foram: 18,54 + 22,56 ng.ml-1 para o p,p'DDE, com nveis mximo de 97, 41ng.ml-1 e mnimo de 1,250 ng.ml-1. O -HCH apresentou nveis mdios de 7,620 + 11,73 ng.ml-1e valores mximos e mnimos de 71,69 e 0,2200 ng.ml-1, respectivamente. O HCH apresentou valores de 0,5900 ng.ml-1 (0.13-2.7) e o -HCH 1,17 ng.ml-1, com valores mximo de4,02 ng.ml-1 e mnimo de 0,13 ng.ml-1. Pode-se observar que tanto para nveis mdios expressos em bases lipdicas quanto em ng.ml-1 de leite os nveis de -HCH so os mais elevados dentre os ismeros do HCH. Isso se deve ao fato de que o -HCH possui menor velocidade de metabolizao que os demais ismeros, e portanto maior taxa de acumulao que os demais ismeros (Jensen, 1983 apud Czaja et al.,1997; Quincey et al., 1995). No estudo de correlao entre os nveis encontrados para o p,p' DDE e as variveis reprodutivas: idade materna, nmero total de filhos, tempo de amamentao total, tempo de amamentao do primeiro beb em meses e tempo de amamentao das primparas encontrou-se os resultados descritos seguir: Correlacionando-se a idade materna e os nveis mdios de p,p' DDE, o valor observado foi r = 0,145, p = 0,315 o que demostra no haver correlao significativa. Entretanto ao se controlar a varivel idade materna pelo tempo total de amamentao para mulheres primparas, a correlao passa a ser significativa ( r = 0,339, p = 0,046). Em relao ao nmero total de filhos e ao tempo de amamentao do primeiro beb, observa-se uma correlao negativa com os nveis de p,p'DDE (r = - 0,187, p = 0,192) e (r = - 0.059 e p = 0,683) respectivamente, que embora no significativas, demonstram que mulheres com maior nmeros de filhos e que amamentaram o primeiro filho por mais tempo tm uma maior tendncia a ter menores nveis de p,p'DDE.

46

Tabela 10: Nveis de pesticidas organoclorados em leite materno em ng.g-1 de gordura. Pesticidas -HCH HCB -HCH -HCH Aldrin -clordano Endossulfan I Endossulfan II Transnonaclor Dieldrin p,p'DDE p,p'DDD p,p'DDT Endrin Mirex N 28 6 42 16 27 37 39 7 3 26 47 41 45 10 19 Mdia (g/g) 15.75 25.59 253.26 73.13 58.58 78.25 121.78 54.33 15.76 47.90 580.23 13.89 23.80 12.84 21.73 Valores mximos 100.86 97.50 2626.2 899.19 499.82 352.33 943.54 101.49 24.88 343.76 7292.5 86.36 169.33 28.99 108.38 Valores mnimos 1.83 2.03 2.36 1.17 5.92 11.95 2.10 7.94 7.18 6.36 18.08 1.33 0.98 3.02 0.85

Tabela 11: Nveis de pesticidas organoclorados em leite materno em ng.ml-1 de leite. Pesticidas -HCH HCB -HCH -HCH Aldrin -clordano Endossulfan I Endossulfan II Transnonaclor Dieldrin p,p'DDE p,p'DDD p,p'DDT Endrin Metoxyclor Mirex N 28 6 42 16 27 37 39 7 3 26 47 41 45 10 10 19 Mdia (g/ml) 0.60 1.23 7.62 1.18 1.82 3.13 4.48 3.77 0.83 1.58 18.53 0.53 0.83 0.94 2.31 0.68 Valores mximos 2.70 2.35 71.69 4.03 5.70 8.29 14.34 7.75 1.46 4.79 97.41 2.27 3.01 2.08 10.21 2.55 Valores mnimos 0.13 0.09 0.22 0.13 0.32 0.97 0.07 1.05 0.54 0.34 1.25 0.16 0.15 0.07 0.07 0.14

50

3.4- Avaliao da IDA (Ingesto Diria Aceitvel)

Atravs dos valores de concentrao obtidos para os organoclorados, possvel estimar o valor da ingesto diria desses contaminantes provenientes do leite materno e compar-los com os valores aceitveis para a ingesto diria estabelecidos pela FAO/WHO (Codex Alimentarius). O clculo da IDA foi feito para o somatrio de DDT e para o ismero do HCH. Para o clculo da ingesto diria, considerou-se em mg/kg de peso corpreo/dia (OMS, 1992) que um beb ingere em mdia 125g / kg de leite com um percentual de 3,5% de gordura (Lpez-Carrillo et al., 1999). A IDA mdia calculada para o somatrio de DDT foi de 0,00341 mg/ kg de peso corpreo / dia, quando a IDA recomendada pela FAO/WHO de 0,005 mg /kg de peso corpreo / dia. Tabela.12: Valores da IDA em mg/ kg de peso/dia para o DDT em leite materno IDA Mxicoa (1999) FAO/WHOb (Codex Alimentarius) Brasilc (2000) Brasild (2001) 0.00392 0.005 0.57 0.00341 IDAobs/IDAref 0,78 _____ 113,9 0.68 % acima do recomendado 6 ____ 0,06 18

a-Lpez-Carrillo,1999 b- FAO/WHO (Codex Alimentarius), 1996 c-Mello,2000 d- Este trabalho

3.5 - Discusso
Embora os resultados apresentados demonstrem uma evidente contaminao multiresidual da populao no exposta ocupacionalmente do Rio de Janeiro e municpios vizinhos, por pesticidas organoclorados, os nveis encontrados esto abaixo dos nveis apontados como pela literatura.

49

O p,p' DDE aparece em 100% das amostras analisadas, apresentando nveis mdios de 580 ng.g-1. Dentre os metablitos do p,p'DDT, o p,p'DDE o que ocorre com maior freqncia na populao geral. Isso se deve fundamentalmente sua baixa taxa de metabolizao e ao fato de sua fonte primria de contaminao ser atravs da alimentao (Stehr-Green, 1989). A Tabela 13 mostra valores de p,p'DDE em pases como Mxico e Uganda, cuja utilizao de p,p'DDT ainda permitida em certos casos: o valor encontrado nesse estudo para o p,p'DDE aproxima-se do valor encontrado no Mxico Trabalhos recentes com mulheres lactentes no Municpio de Duque de Caxias no Rio de Janeiro demonstram esse dado (Mello, 2000). A prevalncia do p,p'DDE sobre o p,p'DDD e o p,p'DDT sugere, como j descrito (Salch et al., 1996; ok, et al., 1996; Mello, 2000) uma exposio passada ao DDT, j que o tempo mdio necessrio metabolizao do p,p'DDT p,p'DDE de 12 meses (Matuo et al.,1992). A legislao brasileira probe o emprego agropecurio e domossanitrio do DDT desde 1998, atravs da publicao da Portaria n11 do M.A Comparando -se os nveis mdios de DDE, encontrados no Rio de Janeiro, Mxico e Uganda, estes ltimos onde o uso do DDT ainda permitido, tem-se: Tabela 13 : Valores de p,p'DDT em ng.g-1 Amostra/pas Mxico,1999a Uganda,1996b
Este trabalho, 2001c

p,p'DDT(ng.g-1) 162,0 570,0 23.8

p,p'DDE(ng.g-1) 594,0 2350,0 580.2

DDT(ng.g-1) 895,0 2550,0 616,0

a-Torres-Arreola et al.,1999 b-Ejobi et al, 1996 c-este estudo

O ismero do HCH, aparece em 84% das amostras, enquanto -HCH e -HCH (lindano), apresentaram respectivamente 54 e 32%. O resultado demonstra coerncia em relao prevalncia percentual, j que tanto o -HCH quanto o -HCH transformamse ao longo do tempo em -HCH, por ser esse o ismero que possui conformao mais simtrica e conseqentemente, mais estvel (ok, 1998). Essa uma das razes da sua alta persistncia no meio ambiente, alm da baixa taxa de metabolizao aps ser absorvido (Kinyamu,1998).

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Atravs da observao da Figura 7, que mostra os nveis de -HCH no municpio do Rio de Janeiro e em Duque de Caxias, pode-se observar que os valores mdios em Duque de Caxias so significativamente maiores (p=0,05) que os do municpio do Rio de Janeiro, resultado coerente com a literatura, uma vez que essa regio abriga a Cidade dos Meninos, que sofreu e ainda sofre as conseqncias de um importante acidente ambiental, envolvendo a contaminao do solo, dos animais e dos moradores com o "BHC", ou HCH (Mello, 2000).

Nveis mdios de b-HCH por municpios em ng.g -1

Nveis mdios 700 de b-HCH

600 500 400 300 200 100 0

696

206

Duque de Caxias

Rio de Janeiro

Figura 7 : Nveis mdios de - HCH nos municpios do Rio de Janeiro e Duque de Caxias.

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O valor mdio encontrado na Cidade dos meninos para o -HCH (Mello, 2000), seu ismero mais persistente variou de 314,8 ng.g-1 a 4274,2 ng.g-1, enquanto que o grupo controle ( mulheres residentes em Duque de Caxias, porm no na Cidade dos Meninos) apresentou o valor mximo de 213,8 ng.g-1 Esse valor prximo ao valor encontrado nesse estudo no qual as doadoras participantes desse estudo, residentes em Duque de Caxias, apresentaram o valor mximo de 253.26 ng.g-1 (Mello,2000). A contaminao multiresidual do leite materno, contou ainda com a presena do inseticida Aldrin em 54% das amostras e do Endossulfan em 78% do total de amostras analisadas. O aldrin ao ser absorvido rapidamente metabolizado a dieldrin, seu epxido mais persistente (Jensen, A.A., 1983 apud, Sim & Mc'Neil, 1992), que aparece em 52% das amostras analisadas, portanto nveis biolgicos de dieldrin podem indicar uma exposio passada tanto ao aldrin quanto ao prprio dieldrin. A utilizao do aldrin como inseticida fito e domossanitrio, proibido segundo a legislao brasileira (Portaria n 329 do M.A. de 1985), com exceo do uso em iscas formicidas ou como cupinicidas para o emprego em reflorestamentos (Portaria n 329 do M.A. de 1985 Pargrafo nico). O limite mximo de resduos para produtos lcteos de aldrin de 0,15 ppm ou 150 ng.g-1 em gordura (ANVS, 2001). O valor mdio de aldrin encontrado em leite materno, nesse estudo foi de 58,6 + 103,10 ng.g-1 em gordura. Em pases onde a utilizao do aldrin foi completamente banida, ele costuma ser utilizado como padro interno em anlises multiresiduais, o caso do mtodo utilizado por esse estudo, o mtodo de Stevenson, de 1992, onde o aldrin utilizado como padro interno. Como no Brasil a proibio do uso do aldrin parcial, havia uma expectativa de se encontrar resduos na populao, razo pela qual o aldrin foi substitudo no presente estudo pelo DCN (1,2 dicloronaftaleno), um organoclorado que no possui propriedades inseticidas, mas fornece uma resposta semelhante aos organoclorados estudados devido as suas caractersticas qumicas.

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O endossulfan encontrado em 78% das amostras, encontra-se no mesmo caso do aldrin, seu uso e comercializao foi proibido em 1985, pela Portaria n 329 do M.A., entretanto como exceo, seu uso emergencial na agricultura, critrio da Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria - SNDA, pode ser responsvel por sua elevada prevalncia na populao. Sua utilizao se deu principalmente nas lavouras de algodo, cacau, soja, cana-de-acar e caf. Os limites mximos de resduos de endossulfan (incluindo a soma do sulfato de endossulfan, o endossulfan 1 e 2, ou A e B).so: Limite mximo de resduos Algodo.........................1,0 ppm Cacau.............................0,01 ppm Caf (gro).................... 0,04 ppm Soja............................... 1,0 ppm Cana-de-acar..............0,01 ppm intervalo de segurana (em dias) 30 dias; 30 dias; 70 dias; 30 dias; (*)

Fonte: ANVS, 2001 (*) limite de segurana no determinado por referir-se ao tratamento do solo durante o plantio. Os nveis mximos de endossulfan 1 ou A e 2 ou B encontrados foram: 943,5 g.kg-1 e 101,49 g.kg-1, respectivamente e os nveis mdios foram de 121,7 + 181.37 g.kg-1 para o endossulfan 1 e de 54.3 + 30,3 g.kg-1 por g de gordura. O endossulfan considerado de persistncia MDIA no meio ambiente. (ANVS, 2001). importante deixar claro que em muitos casos a literatura no deixa claro os valores limites para leite humano, o que torna dficil um dilogo mais profundo com a biossegurana, sobre os valores que poderiam ser considerados seguro. Estudo das Correlaes dos nveis de p,p'DDE com variveis reprodutivas Estudos demonstram que, embora mais fracos que o seu metablito o,p' DDT, o p,p'DDT e seu metablito p,p'DDE so tambm estrognicos, ou seja, so capazes de mimetizar os efeitos dos hormnios estrognicos (Stehr-Green,1989 apud Longnecker, 1997). Entretanto, apesar de estrognicos, os estudos de correlao dos nveis de DDT e DDE e efeitos reprodutivos tm-se mostrado inconclusivos (Longnecker, 1997).
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Nesse estudo, foram correlacionadas algumas variveis reprodutivas com os nveis de p,p'DDE, variveis como: nmero de filhos (paridade), tempo total de amamentao, idade materna, tempo total de amamentao do primeiro beb, para todas as mes, e peso do beb. Embora no significativo, o valor negativo para o coeficiente de correlao entre o tempo total de amamentao e os nveis de p,p' DDE, mostra que quanto maior os nveis de DDE, menor o tempo de amamentao, ou seja, mulheres cujos nveis de p,p' DDE apresentaram-se mais elevados amamentavam seus filhos por um tempo menor. A literatura confirma esses resultados. Em estudo com mulheres lactentes que amamentavam pela primeira vez, observou-se uma diminuio de 0,9 semanas para cada 1,0 ppm por g de gordura de p,p'DDE , com uma associao similar para subsequentes lactaes (Rogan et al.,1987). No Mxico, mulheres fortemente expostas ao DDT tambm mostraram uma correlao negativa entre tempo de amamentao e nveis de p,p'DDE, isso para multparas, o estudo com primparas, entretanto se mostrou inconclusivo (Gladen, & Rogan, 1995). Em recente estudo tambm no Mxico, Torres-Arreola e col., em 1999 encontraram uma correlao negativa entre tempo de amamentao e nveis de p,p' DDE e p,p'DDT. Para a idade materna, observa-se uma correlao com os nveis de p,p' DDE quando se controla pela varivel tempo total de amamentao das primparas, retirando sua influncia sobre os nveis de p,p' DDE. A tendncia dos nveis de p,p' DDE aumenta em funo da idade o que confirmado em trabalhos anteriores como em Yakujishi, 1978 e Paungarten, 2000. Para as demais variveis no foram encontradas correlaes, ou foram inconclusivas, entretanto o valor de p para algumas das variveis como por exemplo a idade materna, demonstra que h uma tendncia a correlao entre os nveis de p,p'DDE e idade materna, quando se controla a varivel paridade, retirando sua influncia da anlise. Uma possvel causa para isso seja o N amostral, que talvez no seja suficiente para mostrar essa correlao. O clculo da IDA (ingesto diria aceitvel) para o DDT (p,p'DDT + p,p'DDE + p,p'DDD) considerando a concentrao mdia de DDT e a ingesto diria de leite de 125g de leite/ kg de peso corpreo/dia (Torres-Arreola,1999) foi de 0,00391mg/kg de peso/ dia. A Tabela 8 mostra os valores da IDA para a FAO/WHO, (Codex Alimentarius Comission) de 0,005 mg/kg de peso/ dia . Portanto o valor encontrado 0,78 vezes
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menor que o valor aceitvel, ou seja, em mdia a contribuio do leite materno para a ingesto diria de DDT no ultrapassa o valor recomendado. Calculando-se a IDA para o valor mximo do DDT o valor encontrado foi de 0,0366 mg/kg de peso/dia, o que corresponde a um valor 7,2 vezes maior que a IDA recomendada (FAO/WHO). Embora a IDA mdia observada para o somatrio de DDT represente 68% da IDA recomendada, 18% das doadoras participantes do estudo, que corresponde dentro do universo de doadoras do BLH do IFF (aproximadamente 900 doadoras), cerca de 1% das doadoras, possuem o valor da IDA calculada para suas respectivas concentraes de DDT acima da IDA recomendada pelo Codex Alimentarius (FAO/WHO). A Figura 8 mostra a distribuio do valor da IDA mdia pelas rotas domiciliares. Pode-se observar claramente que as maiores mdias encontram-se na Rota 1, onde provavelmente encontram-se as 9 doadoras participantes do estudo (1% das doadoras do IFF).

Valor Mdio da IDA (mg/kg de peso/dia)

0,008 Mdia da IDA para DDTtotal 0,007 0,006 0,005 0,004 0,003 0,002 0,001 0 Rota 1 Rota 2 Rota 3 Rota do IFF Rota 4 Rota 5

Figura 8: IDA mdia do DDT por rota do IFF. A comparao entre os valores mdios da IDA por Rota (Tabela 13) mostrou que a Rota 1, que abrange os bairros da Zona Sul, possui valores significativamente maiores (p=0,005) que as demais rotas do IFF.

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Captulo IV - Concluso

As amostras de leite humano provenientes das doadoras domiciliares do Banco de Leite Humano do Instituto Fernandes Figueira (IFF/FIOCRUZ) apresentaram evidente contaminao multiresidual por pesticidas organoclorados, embora os valores encontrados para a maior parte dos compostos, estejam abaixo do descrito pela literatura como limites aceitveis. O p,p' DDE foi encontrado em 100% das amostras analisadas, o que sugere uma exposio passada ao p,p'DDE, j que este o seu metablito mais estvel. Dentre os ismeros do HCH o que obteve maior prevalncia foi o - HCH (84%) das amostras analisadas, e semelhante ao DDE o - HCH o ismero mais persistente do HCH. Foi observada ainda contaminao residual para o - HCH e o - HCH. As amostras provenientes de Duque de Caxias mostraram nveis significativamente mais elevados que as provenientes de outra localidades, esses valores podem estar ligados contaminao por HCH, ocorrida na Cidade dos Meninos, situada em Duque de Caxias na dcada de 60, observando-se que esta exposio vem se disseminando ao longo dos anos nessa regio. As amostras de leite ainda apresentaram contaminao residual de Endossulfan 1 e 2, Aldrin, Dieldrin, -clordano, Metoxicloro e Mirex. Essa contaminao pode ser devida ao uso restrito mas no proibido dessas substncias no Brasil at 1998, quando a Portaria n11 do Ministrio da Agricultura proibiu o uso em definitivo desses compostos, inclusive, do DDT, que ainda era utilizado em carter emergencial no combate de vetores em campanhas de Sade Pblica. H uma tendncia da carga de p,p' DDE aumentar em funo da idade materna o que foi observado atravs da correlao positiva significativa com o p,p'DDE no leite materno e a idade das mes controlando-se essa associao pelo tempo de amamentao, uma varivel que influencia esses nveis. A IDA foi calculada para o DDT j que o DDT e seus metablitos foram os que apresentaram maiores nveis mdios e maior prevalncia no total das amostras. O que se
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observa que 18% das doadoras participantes do estudo, possuem valores para IDA acima do valor recomendado pelo Codex Alimentarius. para o DDT No universo das doadoras do Banco de Leite do IFF (aproximadamente 900 mulheres), esse percentual representa 1% das doadoras, e embora seja um percentual baixo no se pode dizer que inexista risco sade, uma vez que o quadro apresentado pelas doadoras do IFF pode ser um reflexo do quadro da populao no -exposta de todo o municpio. Entretanto necessrio ressaltar os benefcios incontestveis da amamentao para o beb do ponto de vista nutricional, imunolgico, psicolgico e na promoo geral da sade. Apesar dos possveis danos causados pela exposio aos pesticidas, so muitos os benefcios apresentados com o incentivo ao aleitamento materno nos ltimos anos no Brasil, como o decrscimo na taxa de doenas infecciosas e o aumento da taxa de crescimento e desenvolvimento infantil. Portanto qualquer atitude em relao ao desaconselhamento amamentao tem que ser avaliado considerando-se o risco/ benefcio e os mltiplos fatores envolvidos no processo de aleitamento.

Uma vez que o leite materno processado no Banco de Leite do IFF passa pelo processo de pasteurizao sugere-se como continuao futura desse trabalho a avaliao do leite aps o processo de pasteurizao para que possam ser comparadas aos nveis atuais observando as possveis perdas dessas substncias durante o processo e conseqetemente os benefcios.

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Anexo I TERMO DE CONSENTIMENTO PS INFORMAO

INSTITUIES: Centro de Estudos da Sade do Trabalhador e Ecologia
Humana - ENSP / FIOCRUZ Instituto Fernandes Figueira (IFF) / FIOCRUZ

TTULO DO PROJETO:

Avaliao da Contaminao do Leite Materno por Pesticidas Organoclorados Persistentes em Mulheres Doadoras do Banco de Leite do Instituto Fernandes Figueira.

INVESTIGADORES (PESQUISADORES) : Sueli Alexandra de Mesquita (aluna de mestrado), Ana Cristina Simes Pereira (Lab. de Toxicologia / CESTEH), Josino Costa Moreira (orientador) e Paula de Novaes Sarcinelli , (co-orientadora).

NOME DO VOLUNTRIO:_____________________________________

Como voluntria, a Sra. est sendo solicitada a participar de uma investigao cientfica, patrocinada pela Fundao Oswaldo Cruz com o objetivo de determinar a quantidade de pesticidas organoclorados presentes no seu organismo, atravs da anlise do leite materno, uma das principais vias pela qual o organismo libera essas substncias. A pesquisa ser feita por Sueli de Mesquita, sob a coordenao de Paula de Novaes Sarcinelli do Lab. de Toxicologia do CESTEH/ENSP. Este documento procura fornecer a Sra informaes sobre o problema de sade em estudo e a experincia que ser realizada, detalhando os procedimentos e exames, benefcios, inconvenientes e riscos potenciais. A sra. poder recusar-se a participar da pesquisa ou, mesmo, dela se afastar em qualquer tempo, sem que este fato lhe venha a causar qualquer constrangimento ou penalidade por parte da instituio. Os pesquisadores se comprometem a no revelar sua identidade em qualquer publicao resultante desse estudo, assim como podero interromper a participao da sra. a qualquer momento, por razes tcnico-mdicas quando ento, lhe sero oferecidos aconselhamento e orientao. Os exames e procedimentos aplicados so gratuitos. Antes de se assinar este Termo a sr. deve sentir-se plenamente a vontade em pedir esclarecimentos sob algum item ou aspecto que ainda lhe cause dvida.

1. Objetivos da Investigao: Os pesticidas organoclorados tm sido usados no combate a certas pragas da lavoura e no tratamento da madeira contra cupins. Essas substncias quando usadas na lavoura contaminam os alimentos, ao ingerir esses alimentos, os organoclorados neles presentes podem se acumular no organismo, no tecido gorduroso por muitos anos, e serem liberados no leite materno durante a amamentao. 2. Procedimentos de Coleta: As amostras de leite para a pesquisa sero coletadas manualmente no momento da doao para o Banco de Leite do Instituto Fernandes Figueira, e a quantidade em torno de 20 ml (duas colheres de sopa), em frascos de vidro limpos e esterilizados. 3. Benefcios: Os testes feitos neste estudo podem indicar nveis de contaminao da me, e do beb por essas substncias, atravs da dosagem do leite materno. No existem benefcios aparentes para voc participar, entretanto os resultados deste estudo podero nos ajudar a conhecer melhor os perigos das exposies ambientais e aprender como evit-las da melhora maneira possvel. 4.Incovenientes: Uma vez que a coleta muito simples, realizada pela prpria me, que no ato da doao para o banco de leite receber tambm um pequeno frasco onde ela mesma coletar o leite, no existe nenhum inconveniente. 5.Riscos potenciais conhecidos at os dias atuais: No existe nenhum caso relatado sobre risco relacionado a coleta de leite materno, uma vez que a coleta das amostras so feitas durante a coleta de doao para o banco. Rio de Janeiro, ____ de ___________________ de 2000

_________________________________________________ Voluntrio _________________________________________________ Sueli Alexandra de Mesquita (pesquisador responsvel)

Aldrin

DDE

DDT

Figura anexa: Cromatograma referente a de amostra de leite materno.