Projeto de Pesquisa (Doutorado)

Ttulo: Ecologia e Biogeografia do gnero Brachycephalus Fitzinger, 1971 (Anura: Brachycephalidae)

Equipe Executora: Thais Helena Condez Orientador: Clio Fernando Baptista Haddad

Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho - Rio Claro Instituto de Biocincias, Departamento de Zoologia Av. 24-A, n. 1515, Caixa Postal 199, Bela Vista CEP. 13506-900 - Rio Claro, SP - Brasil

Resumo: A Mata Atlntica apresenta grande diversidade estrutural de ambientes, relacionada principalmente variao de altitude, clima e fragmentao de sua cobertura vegetal. Em funo destas caracteristicas, seus remanescentes abrigam elevada biodiversidade e grau de endemismo e constituem ambientes apropriados para estudos sobre biogeografia e evoluo de espcies. Anfbios do gnero Brachycephalus so endmicos da Mata Atlntica do sul e sudeste do Brasil e, em sua maioria, possuem distribuio geogrfica restrita a reas de altitude ao longo das principais cadeias montanhosas da regio. O padro de distribuio geogrfica disjunta e o desconhecimento acerca de aspectos de histria natural e ecologia das populaes sugerem que podem existir espcies ainda no descritas, provavelmente ameaadas pela perda e modificao dos ambientes onde ocorrem. O presente projeto prope o estudo dos padres de distribuio geogrfica das espcies de Brachycephalus e da variao de caracteres morfolgicos, ecolgicos e de histria natural nas populaes ao longo da distribuio do gnero no pas. Limitaes filogenticas, fatores histricos e ecolgicos atuais sero considerados para avaliar os padres geogrficos encontrados e reas com maior concentrao de endemismos. Alm de contribuir com informaes bsicas sobre o grupo, os resultados deste projeto podem fornecer informaes relevantes para o estabelecimento de reas prioritrias para a conservao destas espcies. I. Introduo e Justificativa O gnero Brachycephalus Fitzinger (1971) endmico da Mata Atlntica do sul e sudeste do Brasil, ocorrendo desde o estado do Esprito Santo at o Paran, sendo composto atualmente por 12 espcies descritas: B. ephippium, B. nodoterga, B. didactylus, B. pernix, B. hermogenesi, B. vertebralis, B. brunneus, B. izecksohni, B. ferruginus, B. pombali, B. alipioi e B. pitanga (Frost 2009, SBH 2009). Todas as

espcies do gnero Brachycephalus esto associadas ao ambiente de serapilheira, apresentam tamanho reduzido, com comprimento rostro-cloacal (CRC) inferior a 18 mm, modificaes morfolgicas de reduo de artelhos, alm da excessiva ossificao de elementos do esqueleto (Izecksohn 1971, Alberch & Gale 1985, Pombal Jr. et al. 1998, Yeh 2002). Entre as espcies descritas, dez ocorrem em populaes restritas a topos de morro na Mata Atlntica (Pombal Jr. et al. 1998, Pombal Jr. 2001, Ribeiro et al. 2005, Alves et al. 2006, Alves et al. 2009). Como os modelos de especiao e endemismo em reas restritas da Mata Atlntica consideram a origem de novas espcies a partir de populaes extremamente isoladas em reas singulares (Heyer & Maxon 1983), os padres de distribuio geogrfica disjunta das populaes de Brachycephalus sugerem que muitas destas populaes podem constituir espcies novas. Alm do desconhecimento acerca de novas populaes ou espcies para o gnero, os padres de distribuio e aspectos da biologia so pouco conhecidos para a maioria das espcies descritas de Brachycephalus. Grande parte das espcies conhecida apenas para a localidade-tipo e arredores (Frost 2009) e as informaes disponveis sobre sua histria natural referem-se geralmente a observaes pontuais que acompanham a descrio cientfica dos exemplares. A espcie para a qual se possui mais informao Brachycephalus ephippium (Pombal Jr. et al. 1994, Pombal Jr. 1999, Pires et al. 2002, Ananias et al. 2006, Clemente-Carvalho et al. 2008). As espcies B. alipioi, B. brunneus, B. ferruginus, B. izecksohni, B. nodoterga, B. pernix, B. pombali e B. vertebralis constam na categoria deficiente em dados, segundo a lista de espcies ameaada da IUCN (DD; IUCN 2009). Modelos bioclimticos permitiram previses da distribuio futura das espcies do gnero Brachycephalus diante de um cenrio de mudanas globais, indicando tratar-se de um grupo de espcies sensveis a alteraes nas condies climticas e vegetacionais do ambiente (Haddad et al. 2008). Como resultado do aumento da temperatura e duplicao da concentrao de CO2 atmosfrico, a linha de neblina e os bancos de nuvens seriam deslocados para altitudes maiores, eliminando ou alterando a distribuio das florestas ombrfilas montanas. Desta forma, a amplitude da distribuio geogrfica do gnero seria 56% menor do que a atual e mesmo espcies de ampla distribuio como B. ephippium sofreriam extines locais (Haddad et al. 2008). Considerando o status atual de conhecimento das espcies de Brachycephalus e as ameaas a que esto expostas, este projeto pode contribuir para a compreenso dos aspectos relacionados ecologia e biogeografia das populaes e espcies do gnero no pas, fornecendo subsdios para a conservao destas espcies

endmicas da Mata Atlntica. Este projeto ser realizado vinculado ao Projeto Temtico Especiao de Anfbios Anuros em Ambientes de Altitude (Processo FAPESP n 2008/50928-1, coordenado por Clio F. B. Haddad).

II. Objetivos O objetivo deste projeto de pesquisa estudar aspectos da ecologia e biogeografia de populaes e espcies do gnero Brachycephalus, ao longo de sua distribuio geogrfica, com os seguintes objetivos especficos: 1. Caracterizar a distribuio das espcies do gnero no Brasil, considerando a possvel ocorrncia de novas espcies; 2. Descrever aspectos de ecologia, histria natural e morfologia das espcies e reconstruir a evoluo dos caracteres analisados; 3. Avaliar a importncia de fatores causais envolvidos nos padres de distribuio das populaes e espcies incluindo (A) limitaes filogenticas, (B) processos histricos e (C) aspectos ecolgicos atuais; e 4. Avaliar o status de conservao e indicar reas prioritrias para a conservao das espcies, a partir do conhecimento atual e novas informaes obtidas sobre ecologia, distribuio e histria evolutiva das populaes.

III. Material e Mtodos rea de Estudo A rea de estudo insere-se no Domnio Tropical Atlntico (AbSaber 1977) e abrange remanescentes de floresta ombrfila densa nos estados do Esprito Santo, Minas Gerais, Rio de Janeiro, So Paulo, Paran e Santa Catarina, considerando os limites de distribuio geogrfica do gnero Brachycephalus no pas.

Coleta de dados em laboratrio Para a anlise detalhada da ocorrncia de espcies ou populaes do gnero Brachycephalus sero consultados os registros de espcimes depositados nas colees cientficas do Museu de Histria Natural Capo da Imbuia (MHNCI, Paran), Museu de Zoologia da Universidade de So Paulo (MZUZP), Museu de Histria Natural da Universidade Estadual de Campinas (ZUEC), Coleo de Anfbios CFBH (Clio Haddad, UNESP de Rio Claro), Museu Nacional (MNRJ, Rio de Janeiro) e Museu de Biologia Professor Mello-Leito (MBML, Esprito Santo).

Alm de informaes sobre distribuio, sero coletadas informaes sobre a morfologia de pelo menos 10 exemplares de cada sexo, pertencentes a cada espcie ou populao. Para cada individuo preservado sero coletadas informaes sobre a massa, aps drenagem do lquido preservativo com papel absorvente (com uso de balana semianaltica digital), e 10 variveis de comprimento com auxlio de paqumetro digital (preciso 0,05 mm) ou ocular micromtrica associada a microscpio estereoscpico, quando necessrio.

Coleta de dados em campo A partir dos registros das colees cientficas consultadas sero elaborados mapas de distribuio de cada espcie para a identificao de lacunas de amostragem e definio das reas prioritrias para amostragem em campo. Aps a definio das reas, sero realizadas viagens de curta durao (entre dois e cinco dias em cada localidade) para a coleta de espcimes e observao de aspectos da histria natural e ecologia de cada populao. O trabalho de campo deve estender-se por dois anos, abrangendo desde coletas pontuais durante o ano a amostragens intensivas no perodo chuvoso. Sero aplicados mtodos de captura ativa, como a procura em parcelas (Jaeger & Inger 1994) e procura visual ou aditiva. O mtodo de captura em parcelas bastante eficiente em amostragens de anfbios associados serapilheira (e.g. Giaretta et al. 1997, Giaretta et al. 1999, Sawaya 1999, Rocha et al. 2001, Sluys et al. 2007). O mtodo consiste na amostragem da serapilheira em quadrados com 1 x 2 metros e 5 x 5 m, delimitados com estacas e redes, para evitar a fuga de indivduos. Nas parcelas de 1 x 2 m, depois de delimitada a rea de amostragem, toda a serapilheira removida rapidamente para sacos plsticos, e a procura por anfbios realizada minuciosamente entre as amostras. Nas parcelas de 5 x 5 m a serapilheira vasculhada com a ajuda de tridentes manuais de jardinagem. A amostragem por procura visual consiste na procura por indivduos em todos os microambientes visualmente acessveis, e a procura auditiva consiste no registro da atividade de vocalizao das espcies (cf. Crump & Scott Jr. 1994, Zimmerman 1994). Para o estudo da histria natural e ecologia das espcies e populaes, sero amostradas tambm as seguintes caractersticas ambientais nas parcelas utilizadas para a captura de espcimes: (1) profundidade da serapilheira (rgua milimetrada em cinco pontos, nas quatro extremidades e no centro da parcela), (2) umidade relativa do ar na serapilheira (termohigrmetro digital, tambm em cinco pontos), (3) temperatura da

serapilheira (termmetro de mercrio digital, tambm em cinco pontos), (4) altitude local (altmetro com acurcia de 10 m), (5) condies gerais do clima (chuva, neblina, sol), (6) altura mxima do dossel (clinmetro e trena mtrica), (7) inclinao do terreno (clinmetro e trena), (8) face de inclinao do terreno (bssola, N, NE, E, SE, S, SO, O ou NO), (9) data e horrio e (10) coordenadas geogrficas. Sero tambm feitas observaes sobre o perodo de atividade das espcies e populaes (noturno, diurno, crepuscular) e uso do ambiente. Sempre que possvel sero coletadas informaes relacionadas reproduo destas espcies, incluindo gravaes sonoras das vocalizaes emitidas pelos machos (gravador digital Sony ICD P-520 acoplado a microfone unidirecional). Os exemplares coletados sero transportados em sacos plsticos umedecidos, com licena de captura/coleta/transporte cedida pelo Instituto Brasileiro de Meio Ambiente e Recursos Naturais Renovveis (IBAMA). Em laboratrio os animais sero fotografados, medidos com auxlio de paqumetro digital, pesados com balana semianaltica, mortos com aplicao externa (na pele) de xilocana a 5%, fixados em formaldedo a 10% e conservados em lcool a 70%.

IV. Resultados Esperados Em funo da especificidade de habitat, isolamento e padro de distribuio disjunta das espcies nas cadeias de montanhas da Mata Atlntica, possvel que a maioria das populaes e espcies de Brachycephalus apresente evoluo relativamente rpida. Neste cenrio, o registro de populaes e espcies diferenciadas em reas relativamente prximas, bem como espcies ainda no descritas formalmente, so resultados esperados deste projeto. Alm do registro de novas populaes e espcies, ser possvel relacionar caractersticas morfolgicas (e.g. forma e tamanho do corpo, comprimento de membros locomotores) a caractersticas ecolgicas e de histria natural das espcies ou populaes (e.g. uso do ambiente, fecundidade), trazendo informaes importantes sobre as relaes filogenticas do grupo e aspectos de evoluo. A partir da anlise dos padres de distribuio geogrfica do grupo em relao a aspectos histricos (e.g. filogenia, formao geomorfolgica das serras, eventos climticos) e ecolgicos atuais (e.g. ecologia e histria natural das espcies, resposta a variaes ambientais e fragmentao florestal) tambm podero ser elaboradas propostas que assegurem a conservao do gnero no pas.

V. Referncias Bibliogrficas
ALBERCH, P., GALE, E.A. 1985. A Developmental Analysis of an Evolutionary Trend: Digital Reduction in Amphibians. Evolution 39 (1): 8-23. ALVES, A.C.R., RIBEIRO, L.F., HADDAD, C.F.B. & REIS, S.F. 2006. Two new species of Brachycephalus (Anura: Brachycephalidae) from the Atlantic forest in the Paran State, Southern Brazil. Herpetologica 62:221233. ALVES, A.C.R., SAWAYA, R.J.S., REIS, S.F. & HADDAD, C.F.B. 2009. New species of Brachycephalus (Anura: Brachycephalidae) from the Atlantic Rain Forest in So Paulo State, Southeasthern Brazil. Journal of Herpetology 43 (2): 212-219. ANANIAS, F., GIARETTA, A.A., RECCO-PIMENTEL, S.M. 2006. Cytogenetics of Brachycephalus ephippium (Anura: Brachycephalidae) with comments on its relationship to the Bufonidae. Amphibia-Reptilia 27: 121-125. CLEMENTE-CARVALHO, R.B.G., MONTEIRO, R.L., BONATO, V., ROCHA, H.S., PEREIRA, G.R., OLIVEIRA, D.F., LOPES, R.T., HADDAD, C.F.B., MARTINS, E.G., REIS, S.F. 2008. Geographic variation in cranial shape in the Pumpkin Toadlet (Brachycephalus ephippium): a geometric analysis. Journal of Herpetology 42: 176-185. FROST, D. R. 2009. Amphibian Species of the World: an Online Reference, Version 5.3. http://research.amnh.org/herpetology/amphibia/index.php. (ltimo acesso em 02/02/2010) HADDAD, C.F.B., GIOVANELLI, J.G.R., ALEXANDRINO, J.M.B. 2008. O aquecimento global e seus efeitos na distribuio e declnio dos anfbios. In: BUCKERIDGE, M. (Org.). A biologia e as mudanas climticas no Brasil. So Carlos: Editora RIMA, 2008. p. 195-206. HEYER, R. & MAXON, L.R. 1983. Relationships, zoogeography and speciation mechanisms of frogs of the genus Cycloramphus (Amphibia: Leptodactylidae). Arquivos de Zoologia, So Paulo 30: 341-373. IUCN. 2009. IUCN Red List of Threatened Species, Version 2009. Disponvel em: www.iucnredlist.org (ltimo acesso em 18/02/2010) IZECKSOHN, E. 1971. Novo gnero e nova espcie de Brachycephalidae do estado do Rio de Janeiro, Brasil. Boletim do Museu Nacional, Rio de Janeiro, nova srie, Zoologia 280:1 12. PIRES, O.R., SEBBEN, A., SCHWARTZ, E.F., LARGURA, S.W.R., BLOCH, C., MORALES, R.A.V., SCHWARTZ, C.A. 2002. Occurrence of tetrodotoxin and its analogues in the Brazilian frog Brachycephalus ephippium (Anura: Brachycephalidae). Toxicon 40: 761-766. POMBAL Jr., J.P. 2001. A new species of Brachycephalus (Anura: Brachycephalidae) from Atlantic Rain Forest of southeastern Brazil. Amphibia-Reptilia 22: 179-185. POMBAL, Jr., J.P. 1999. Oviposio e desenvolvimento de Brachycephalus ephippium (Spix) (Anura, Brachycephalidae). Revista Brasileira de Zoologia 16:967976. POMBAL, Jr., J.P., SAZIMA, I. & HADDAD, C.F.B. 1994. Breeding behavior of the pumpkin toadlet, Brachycephalus ephippium (Brachycephalidae). Journal of Herpetology 28:516 519. POMBAL, Jr., J.P., WISTUBA, E.M. & BORNSCHEIN, M.R. 1998. A new species of Brachycephalid (Anura) from the Atlantic Rain Forest of Brazil. Journal of Herpetology 32:7074. RIBEIRO, L.F., ALVES, A.C.R., HADDAD, C.F.B. & REIS, S.F. 2005. Two new species of Brachycephalus Gnther, 1858 from the State of Paran, Southern Brazil (Amphibia, Anura, Brachycephalidae). Boletim do Museu Nacional, Zoologia, Rio de Janeiro 5198:118. SBH. 2009. Sociedade Brasileira de Herpetologia. Brazilian amphibians List of species. http://www.sbherpetologia.org.br (ltimo acesso em 10/02/2010)

YEH, J. 2002. The effect of miniaturized body size on skeletal morphology in frogs. Evolution 56: 628-641.

VI. Cronograma Fsico O presente projeto ter durao de 48 meses, sendo iniciado em abril de 2010 e finalizado em abril de 2014. A coleta de dados em campo ocorrer ao longo deste perodo, com viagens de curta durao.

VII. Origem dos Recursos O presente projeto de pesquisa financiado pelo Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq) atravs da bolsa de doutorado concedida a Thais Helena Condez, Processo CNPq 141716/2010-0. Recursos adicionais para o desenvolvimento dos trabalhos de campo sero obtidos atravs de auxlio da Fundao de Amparo a Pesquisa no Estado de So Paulo (FAPESP) ao projeto temtico Especiao de Anfbios Anuros em Ambientes de Altitude (Processo FAPESP 2008/50928-1, coordenado por Clio F. B. Haddad).